CN203741320U - 一种检测人精子活动力和化学趋向性的装置 - Google Patents

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薛亚梅
倪崖
陈爱君
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谢海锋
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Abstract

本实用新型公开了一种用于检测人精子活动力和化学趋向性的装置,包括底座和与底座相配合的盖子,底座的顶面凹设有样本室、引诱室和对照室,其中,引诱室和对照室之间通过第二通道相连,样本室与第二通道的中点之间通过第一通道相连,第二通道的长度为8~15cm,第一通道的长度为5~8cm;在第二通道的中点两侧,所述第二通道内均匀设置有隔栏,隔栏将第二通道分成若干个分隔室,隔栏的高度小于第二通道的高度。通过模拟女性生殖器官的相对解剖学位置,模拟精子在女性生殖道内的自然选择过程;一方面通过长距离的运动淘汰掉活动力差的精子;另一方面在分隔室内填装化学引诱剂,对精子的化学趋向性进行检测。

Description

一种检测人精子活动力和化学趋向性的装置
技术领域
本实用新型属于辅助生殖技术领域,具体涉及一种检测人精子活动力和化学趋向性的装置。
背景技术
辅助生殖技术是指对配子、胚胎或者基因物质进行体内外系统操作而获得新生命的技术。采用辅助生殖技术不仅可以治疗不孕不育症,而且可以通过该技术观察胚胎发育过程,揭示生殖奥秘,从而使生殖医学成为21世纪生命科学研究的核心。
辅助生殖技术中,筛选形态功能正常、无遗传缺陷的精子是必需步骤。常规的精子分离筛选技术包括上游法、迁移沉淀法、密度梯度离心法、玻璃棉过滤法、玻璃法、交联葡聚糖柱法和跨膜迁移法等多种。其原理主要是基于精子活动,粘附或过滤,目的是为了获得运动的或形态正常精子,分离出能体外受精的精子。
但常规的精子筛选技术忽视了女性生殖道对精子的自然选择过程,人类在受精过程中,数以百万计的精子经过射精储存在宫颈附近阴道上部,然后精子游出精浆,进入高度水化的宫颈粘液,在此处通过形态和活力进行精子选择;随后,精子通过子宫运输,并利用其活力和及时获能的特征进行选择,功能不良的精子被淘汰;通过竞争激烈角逐的精子最终到达输卵管峡部;在输卵管峡部和卵丘位置,精子可利用热趋向性、化学趋向性反应和DNA完整性进行选择;最后,精子再经过形态选择后通过卵丘细胞,在输卵管的壶腹部与卵母细胞的透明带结合受精;此外,精子还可通过透明带结合能力和DNA的完整性进行选择。
由于没经过在女性生殖道内获得相关功能或遗传质量的筛选,对DNA损伤或凋亡的精子无法区分去除,特别在ICSI情况下,正常受精时不会与卵子结合的精子也可能被注入,从而损伤卵母细胞激活和胚胎核发育;由于DNA损伤的精子也可与卵母细胞受精,会导致反复自然流产。总之,常规分离方法获得的精子具有明显的局限性。
而目前TUNEL检测、SCSA检测、COMET测定、Halosperm测定等确定DNA损伤的方法对于用于辅助生殖的精子来说都是侵入性的、破坏性的,即被分析测定的精子不可再用于受精。因而,目前亟需发展区分性好、对精子而言相对安全、非侵入性的精子分离筛选方法。
在受精过程,卵子通过释放化学因子吸引精子,化学引诱物(化学因子)的浓度梯度可以指引精子游向卵子,这个过程称为化学趋向性(chemotaxis)。利用化学趋向性筛选精子符合其在女性生殖道内的自然选择过程;由于化学趋向性涉及到精子生理状态的信号传导过程,而这一过程是否顺利又可反映精子各项功能是否正常发挥,更可能筛选分离出功能正常的精子,更好地区分出异常的精子。
实用新型内容
本实用新型公开了一种用于检测人精子活动力和化学趋向性的装置,利用该装置能对人精子的活动力和化学趋向性进行有效评价,并筛选得到功能正常的精子。
一种用于检测人精子活动力和化学趋向性的装置,包括底座和与底座相配合的盖子,底座的顶面凹设有样本室、引诱室和对照室,其中,引诱室和对照室之间通过第二通道相连,样本室与第二通道的中点之间通过第一通道相连,第二通道的长度为16~30cm,第一通道的长度为5~8cm;
在第二通道的中点两侧,所述第二通道内均匀设置有隔栏,隔栏将第二通道分成若干个分隔室,隔栏的高度小于第二通道的高度。
本装置采用透明、硬度强、耐高温、耐腐蚀、无毒无热原的高分子材料制成,整个装置模拟了女性生殖器官的相对解剖学位置,其中第一通道模拟女性子宫,第二通道模拟两条输卵管,引诱室、对照室则模拟了两个卵巢。
本实用新型中,第二通道可以是呈水平的直线形,也可以是呈一定弧度的弧形。
样本室、引诱室、对照室和第一通道、第二通道均是凹设在底座顶面的,与凸设在底座顶面相比,凸设在底座顶面不仅便于制作加工,而且由于结构较为精细,便于保存,凸设则易于遭到损伤。
隔栏的高度小于第二通道的高度,则分隔室的高度低于第二通道的高度,便于在分隔室上层导入精子培养液,保证精子存活和自由游动。
样品室内的精子若能在预定时间内穿过第一通道和第二通道到达引诱室或对照室,则说明精子活动力较好;位于引诱室一侧的分隔室用于固定不同浓度的化学引诱剂,形成浓度梯度,诱使样品室内的精子向引诱室运动,若大部分精子都游向引诱室而不是对照室,则说明精子化学趋向性较好。
作为优选,所述第二通道的长度为16cm,第一通道的长度为6cm。如此长度的第二通道正好相当于两条正常女性输卵管的长度,以及如此长度的第一通道正好相当于子宫的长度,更好地模拟女性生殖道对精子的自然选择过程。
作为优选,在第二通道的中点两侧,所述分隔室均至少有三个。作为进一步优选,在第二通道的中点两侧,所述分隔室分别有五个。如此便于多设置几个化学引诱剂浓度,更好地引诱精子。
优选地,所述第一通道或第二通道的高度为1~3cm,所述隔栏的高度为2~4mm。更优选地,第一通道或第二通道的高度为2cm,隔栏的高度为3mm。为精子游动提供更大的空间。
本实用新型中,第二通道的宽度从第二通道的中点至引诱室和对照室均逐渐变大。即第二通道呈“中间窄、两端宽”。其中,最窄处的宽度为0.5~1mm,最宽处的宽度为2~2.5mm。
作为优选,所述第二通道的两端均插设有隔板,隔板的高度不小于第二通道的高度。隔板为可拆卸式,当预定的精子游动时间结束后,才插入隔板,对引诱室和对照室内的精子浓度进行检测,避免精子在检测过程中离开引诱室或对照室。
作为优选,样本室、引诱室和对照室均为圆柱形。作为进一步优选,圆柱的高为1~2cm,圆柱的底面直径为5~10mm。
使用时,先将化学引诱剂固定在位于引诱室一侧的分隔室中,使分隔室内化学引诱剂的浓度从第二通道的中点至引诱室依次变大;再向样本室、引诱室、对照室和第一通道、第二通道内加入精子培养液;最后将待测获能精子悬液加到样本室中孵育,一段时间后分别检测样本室精子浓度C、引诱室精子浓度A和对照室精子浓度B,并计算A/C比值、B/C比值和A/B比值;其中,A/C比值、B/C比值中较大者为精子活动力系数,A/B比值为精子化学趋向性系数。
根据计算获得的A/C比值、B/C比值和A/B比值对精子质量进行评价:
(1)若A、B均不为0且A/B>1,或A不为0、B为0,表明精子活动力好(此时A/C比值为精子活动力系数,A/C比值越大,活动力越好),化学趋向性好。
(2)若A、B均不为0且A/B≤1,表明精子活动力好(此时B/C比值为精子活动力系数,B/C比值越大,活动力越好),化学趋向性差。
(3)若A、B均为0,表明精子活动力差,继续孵育30~180min,再检测样本室、引诱室和对照室中的精子浓度,对精子质量进行评价:
1)若此时A、B均不为0且A/B>1,表明精子活动力较差,化学趋向性好;
2)若此时A、B均不为0且A/B≤1,表明精子活动力较差,化学趋向性差;
3)若此时A、B仍为0,表明精子活动力极差,难以获得化学趋向性系数,无法评估其化学趋向性。“A、B均不为0”表示精子能够进行长距离的运动到达引诱室和对照室,表明其活动力好;“A/B>1,或A不为0、B为0”表明大多数或全部精子集中到引诱室中,说明其化学趋向性好;“A/B≤1”表明浓度梯度的化学引诱剂对精子没有选择性,说明其化学趋向性差。
在预定时间内达到引诱室的精子,其活动力和化学趋向性均较佳,表明精子质量较好;精子活动力系数和精子化学趋向性系数越大的精子样本,其质量也越好;则引诱室内的精子即可用于进一步的生殖生物学研究、辅助生殖应用等方面。若在预定时间内均未在引诱室和对照室中检测到精子,表明精子活动力差,无法在预定时间内达到,此时适当延长孵育时间再对其化学趋向性进行评价。
与现有技术相比,本实用新型的有益效果为:
(1)本实用新型的装置模拟女性生殖器官的相对解剖学位置,模拟精子在女性生殖道内的自然选择过程;一方面通过长距离的运动淘汰掉活动力差的精子;另一方面,在第二通道内设置分隔室,在分隔室内加入不同浓度的化学引诱剂,形成浓度梯度,对精子的化学趋向性进行检测;
(2)利用本实用新型的装置检测精子活动力和化学趋向性的过程,对精子无损伤、非侵入,安全性高,因此检测过程也是筛选优良精子的过程;并且操作简便易行,成本低廉,便于实际应用。
附图说明
图1为本实用新型用于检测人精子活动力和化学趋向性的装置的顶面结构示意图;
图2为本实用新型用于检测人精子活动力和化学趋向性的装置的侧面结构示意图。
具体实施方式
如图1、图2所示,本实施例一种用于检测人精子活动力和化学趋向性的装置,本装置采用透明、硬度强、耐高温、耐腐蚀、无毒无热原的高分子材料制成,包括底座1和与底座1相配合的盖子11,底座1的顶面凹设有样本室4、引诱室2和对照室3,其中,引诱室2和对照室3之间通过第二通道7相连,样本室4与第二通道7的中点之间通过第一通道6相连。
样本室4、引诱室2和对照室3均为圆柱形,样本室4圆柱的底面直径为10mm,引诱室2和对照室3圆柱的底面直径均为5mm,引诱室2和对照室3模拟女性的两个卵巢,样本室4、引诱室2、对照室3以及三向通道的高度均为2cm。其中,第二通道7的长度为16cm,相当于两条女性输卵管的长度;第一通道6的长度为6cm,相当于女性子宫的长度。
第二通道7的宽度从第二通道7的中点至引诱室2、对照室3逐渐变大,即第二通道7呈“中间窄、两端宽”。其中,最窄处的宽度为0.5mm,最宽处的宽度为2mm。而第一通道6的宽度从第二通道7的中点至样品室2逐渐变小。
由图1、图2可见,第二通道7内设有隔栏9,本实施例中,在第二通道7的中点两侧,均有五个分隔室8,隔栏9的高度小于第二通道7的高度;本实施例中,隔栏9的高度为3mm。
并且,第二通道7的两端均设有卡槽,卡槽内插设有隔板10,隔板10的高度不小于第二通道7的高度。本实施例中,隔板10的高度为2.5cm。
使用时,先将化学引诱剂固定在位于引诱室2一侧的分隔室8中,使分隔室8内化学引诱剂的浓度从第二通道7的中点至引诱室2依次变大;再向样本室4、引诱室2、对照室3和第一通道6、第二通道7内加入精子培养液;最后将待测已获能精子悬液加到样本室4中孵育,一段时间后分别检测样本室4内的精子浓度C、引诱室2内的精子浓度A和对照室3内的精子浓度B,并计算A/C比值、B/C比值和A/B比值;其中,A/C比值、B/C比值中较大者为精子活动力系数,A/B比值为精子化学趋向性系数。
根据计算获得的A/C比值、B/C比值和A/B比值对精子质量进行评价:
(1)若A、B均不为0且A/B>1,或A不为0、B为0,表明精子活动力好(此时A/C比值为精子活动力系数,A/C比值越大,活动力越好),化学趋向性好。
(2)若A、B均不为0且A/B≤1,表明精子活动力好(此时B/C比值为精子活动力系数,B/C比值越大,活动力越好),化学趋向性差。
(3)若A、B均为0,表明精子活动力差,继续孵育30~180min,再检测样本室、引诱室和对照室中的精子浓度,对精子质量进行评价:
1)若此时A、B均不为0且A/B>1,表明精子活动力较差,化学趋向性好;
2)若此时A、B均不为0且A/B≤1,表明精子活动力较差,化学趋向性差;
3)若此时A、B仍为0,表明精子活动力极差,难以获得化学趋向性系数,无法评估其化学趋向性。

Claims (9)

1.一种用于检测人精子活动力和化学趋向性的装置,包括底座和与底座相配合的盖子,其特征在于,底座的顶面凹设有样本室、引诱室和对照室,其中,引诱室和对照室之间通过第二通道相连,样本室与第二通道的中点之间通过第一通道相连,第二通道的长度为16~30cm,第一通道的长度为5~8cm;
在第二通道的中点两侧,所述第二通道内均匀设置有隔栏,隔栏将第二通道分成若干个分隔室,隔栏的高度小于第二通道的高度。
2.如权利要求1所述的装置,其特征在于,所述第二通道的长度为16cm,第一通道的长度为6cm。
3.如权利要求1所述的装置,其特征在于,在第二通道的中点两侧,所述分隔室均至少有三个。
4.如权利要求3所述的装置,其特征在于,在第二通道的中点两侧,所述分隔室分别有五个。
5.如权利要求1所述的装置,其特征在于,所述第一通道或第二通道的高度为1~3cm,所述隔栏的高度为2~4mm。
6.如权利要求1所述的装置,其特征在于,第二通道的宽度从第二通道的中点至引诱室和对照室均逐渐变大。
7.如权利要求1所述的装置,其特征在于,所述第二通道的两端均插设有隔板,隔板的高度不小于第二通道的高度。
8.如权利要求1所述的装置,其特征在于,样本室、引诱室和对照室均为圆柱形。
9.如权利要求8所述的装置,其特征在于,圆柱的高为1~2cm,圆柱的底面直径为5~10mm。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN103773672A (zh) * 2014-02-08 2014-05-07 浙江省医学科学院 一种检测人精子活动力和化学趋向性的方法及其装置
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