CN203728840U - 一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因a1298c多态性检测试剂盒 - Google Patents

Abstract

一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，包括盒体、盒体上部设有盒盖，盒体的腔体内设有固定座和试剂瓶槽，在固定座上设有离心管容器孔和加样器吸头孔，所述离心管容器孔内设有离心管，所述加样器吸头孔内设有加样器吸头，所述试剂瓶槽内设有装引物的试剂瓶、装酶混合物的试剂瓶和MboⅡmixture试剂瓶，所述盒盖的下表面边缘设有与盒体的腔体相匹配的密封条，所述盒盖的下表面设有保护垫。本试剂盒结构简单、设计合理、检测过程不易受污染，试剂盒在检测一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性时具有敏感性高、特异性强、耗时短等优点；盒盖的设计可以保证密封性，防止容器顶部磕碰破损，保证试剂盒安全，方便运输。

Description

一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒

技术领域

本实用新型涉及检测试剂盒技术领域，具体涉及一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒。 

背景技术

在现有技术中，检测使用的一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，一般结构包括盒体、盒体上部设有盒盖，盒体的腔体内设有固定座和试剂瓶槽，在固定座上设有离心管容器孔和加样器吸头孔,所述离心管容器孔内设有离心管，所述加样器吸头孔内设有加样器吸头，所述试剂瓶槽内设有装引物的试剂瓶、装酶混合物的试剂瓶和MboⅡmixture试剂瓶。这种结构的亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，由于试剂盒内的容器有些是玻璃制品，容器的顶部很容易与试剂盒的盒盖发生碰撞而破损，盒盖和盒体之间经常有密封不严，在运输和移动过程中无法保持稳定性的问题。 

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题是提供一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，结构简单，保证盒盖和盒体的密封性，可以防止试剂盒的盒盖与容器顶部发生碰撞破损，方便移动和运输，可以在检测一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性时方便实验人员操作，提高工作效率。 

为了解决上述技术问题，本实用新型采用如下的技术方案： 

一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，包括盒体、盒体上部设有盒盖，盒体的腔体内设有固定座和试剂瓶槽，在固定座上设有离心管容器孔和加样器吸头孔,所述离心管容器孔内设有离心管，所述加样器吸头孔内设有加样器吸头，所述试剂瓶槽内设有装引物的试剂瓶、装酶混 合物的试剂瓶和Mbo Ⅱ mixture试剂瓶，所述盒盖的下表面边缘设有与盒体的腔体相匹配的密封条，所述盒盖的下表面设有保护垫。 

进一步地，所述保护垫上设有分别与离心管、加样器吸头、装引物的试剂瓶、装酶混合物的试剂瓶和Mbo Ⅱ mixture试剂瓶形状相匹配的限位孔。 

进一步地，所述保护垫材质为海绵。 

进一步地，所述装引物的试剂瓶中的扩增引物为特异性扩增MTHFR677的引物，上游引物序列为CTTTGGGGAGCTGAAGGACTACTA；下游引物序列为：CACTTTGTGACCATTCCGGTTTG，引物浓度为100pmol/L。 

进一步地，所述装酶混合物的试剂瓶中的酶混合物包括浓度为0.4mmol/L的dNTPs，6mmol/L的Mg²⁺，2x Buffer，1U/25μL的rTaq。 

进一步地，所述Mbo Ⅱ mixture试剂瓶中的Mbo Ⅱ mixture包括5x L Buffer，2500U/mL的Mbo Ⅱ。 

本实用新型专利由于采用了以上技术方案，试剂盒结构简单、设计合理、检测过程不易受污染，试剂盒在检测一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性时具有敏感性高、特异性强、耗时短等优点；盒盖的设计可以保证密封性，防止容器顶部磕碰破损，保证试剂盒安全，方便运输。 

下面结合附图对本实用新型的一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒做进一步说明。 

附图说明

图1为本实用新型一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒的结构示意图。 

图中各标记如下：1盒体，2盒盖，21密封条，22保护垫，23限位孔，3固定架，4装引物的试剂瓶，5装酶混合物的试剂瓶，6MboⅡmixture试剂瓶，7离心管，8加样器吸头，91离心管容器孔,92加样器吸头孔，10试剂槽。 

具体实施方式

如图1所示，一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，包括盒体1、盒体1上部设有盒盖2，盒体1的腔体内设有固定座3和试剂瓶槽10，在固定座3上设有离心管容器孔91和加样器吸头(9),所述离心管容器9内设有离心管7，所述加样器吸头孔92内设有加样器吸头8，所述试剂瓶槽10内设有装引物的试剂瓶4、装酶混合物的试剂瓶5和Mbo Ⅱ mixture试剂瓶6，所述盒盖2的下表面边缘设有与盒体1的腔体相匹配的密封条21，所述盒盖2的下表面设有保护垫22，所述保护垫22材质为海绵。密封条21可以保证在盒盖2与盒体1闭合时，保持密封的状态，保护垫22可以防止离心管容器孔91内的离心管7和试剂瓶槽10内的装引物的试剂瓶4、装酶混合物的试剂瓶5和Mbo Ⅱ mixture试剂瓶6顶部与盒盖2发生碰撞。 

所述保护垫22上设有分别与离心管7、加样器吸头8、装引物的试剂瓶4、装酶混合物的试剂瓶5和Mbo Ⅱ mixture试剂瓶6形状相匹配的限位孔23。限位孔23可以保证离心管7、加样器吸头8、装引物的试剂瓶4、装酶混合物的试剂瓶5和Mbo Ⅱ mixture试剂瓶6上下同时定位，使得位置更加稳妥。 

所述装引物的试剂瓶4中的扩增引物为特异性扩增MTHFR677的引物，上游引物序列为CTTTGGGGAGCTGAAGGACTACTA；下游引物序列为：CACTTTGTGACCATTCCGGTTTG，引物浓度为100pmol/L。 

所述装酶混合物的试剂瓶5中的酶混合物包括浓度为0.4mmol/L的dNTPs，6mmol/L的Mg²⁺，2x Buffer，1U/25μL的rTaq。 

所述Mbo Ⅱ mixture试剂瓶6中的Mbo Ⅱ mixture包括5x L Buffer，2500U/mL的Mbo Ⅱ。 

操作方法： 

1)取模板DNA 

取病人全血1mL，常规提取DNA，取1uLDNA作为模板。 

2)反应体系 

将各反应物质按照如下表1中反应体系进行配比： 

表1 

3)反应 

将反应体系中各物质在中混合，按照如下程序反应： 

95℃5min(预变性)； 

72℃7min 

4℃保存。 

4)PCR结果判断 

PCR扩增结果由核酸电泳结果来反映。若电泳条带正确清晰，则可进行下一步操作。反之则重新扩增。 

MTHFR1298电泳结果：可扩增出84bp的条带。 

5)酶切及酶切结果判断 

酶切体系如下：PCR产物4μL，Mbo Ⅱ mixture2μL，补双蒸水至10μL，37℃消化3h。 

酶切结果用3％琼脂糖凝胶电泳，结果如下： 

C/C：84bp 

A/C：84bp/56bp/28bp 

T/T：56bp/28bp 

以上所述的实施例仅仅是对本实用新型的优选实施方式进行描述，并非对本实用新型的范围进行限定，在不脱离本实用新型设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本实用新型的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本实用新型权利要求书确定的保护范围内。 

Claims (3)

1.一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，包括盒体（1）、盒体（1）上部设有盒盖（2），盒体（1）的腔体内设有固定座（3）和试剂瓶槽（10），在固定座（3）上设有离心管容器孔（91）和加样器吸头孔（92）,所述离心管容器孔（91）内设有离心管（7），所述加样器吸头孔（92）内设有加样器吸头（8），所述试剂瓶槽（10）内设有装引物的试剂瓶(4)、装酶混合物的试剂瓶（5）和MboⅡmixture试剂瓶（6），其特征在于，所述盒盖（2）的下表面边缘设有与盒体（1）的腔体相匹配的密封条（21），所述盒盖（2）的下表面设有保护垫（22）。

2.根据权利要求1所述的一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，其特征在于，所述保护垫（22）上设有分别与离心管（7）、加样器吸头（8）、装引物的试剂瓶(4)、装酶混合物的试剂瓶（5）和MboⅡmixture试剂瓶（6）形状相匹配的限位孔（23）。

3.根据权利要求1所述的一种亚甲基四氢叶酸还原酶基因A1298C多态性检测试剂盒，其特征在于，所述保护垫（22）材质为海绵。