CN202754996U - 一种体外细胞共培养装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种体外细胞共培养装置，包括培养皿，其特征在于，所述培养皿上表面具有至少一个培养孔，培养孔内采用纵横设置的半透膜分隔成为若干大小相同的培养区间，所述半透膜为孔径大小3-8μm的聚碳酸酯膜。还包括分支滴管系统，所述分支滴管系统设置在培养皿上方，分支滴管系统包括位于上方的总管、位于下方的若干分管和连接于两者之间的过渡部分，所述若干分管对应位于培养皿的各培养区间上方，所述过渡部分内具有连通于总管和各分管之间的通道且通道内设置有亲水性材料。本实用新型具有培养液交流更充分，可以实现多个细胞共培养，细胞换液更加方便的优点。

Description

一种体外细胞共培养装置

技术领域

本实用新型属于体外细胞培养领域，具体涉及一种体外细胞共培养装置。 

背景技术

体外细胞共培养（cell co-culture)：是将两种细胞（可以来自同一种组织，也可以来自不同的组织）混合共同培养，从而使其中一种细胞的形态和功能稳定表达，并维持较长时间。该技术能模拟体内生成的微环境 ,便于更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用以及探讨药物的作用机制和可能作用的靶点 ,填补了单层细胞培养和整体动物实验的鸿沟。 

体外细胞共培养，主要通过两种方法建立：直接共培养体系和间接共培养体系。直接共培养体系，是将2种或2种以上的细胞同时接种于同一培养体系中，不同类型的细胞直接接触，由于不同的细胞生长在同一细胞容器中，无法分离各种细胞用于下一步研究，限制了其应用。间接共培养体系，即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将不同的载体置于同一培养环境中，使不同种类的细胞共处于同一种培养体系中而不直接接触，可以分别收取不同种类的细胞用于下一步研究，弥补了直接共培养体系的不足。本实验新型主要是基于第二种方式设计一种合理方便的细胞共培养装置。 

    目前已有商品化的用于间接共培养的共培养体系，如美国康宁（corning）公司生产各种规格的共培养体系（又称transwell培养皿），而美国millipore公司则生产可适用于国内外各家培养皿生产公司的悬挂式小室，组装成为共培养体系，这些商品化的共培养体系操作简单，目前在研究中得到广泛应用。其基本方法是设置一类有通透性的杯状装置 ,杯子底层放一张有通透性的膜 ,一般常用的是聚碳酸酯膜,孔径大小有 0.1～12.0μm.将 Transwell 小室放入培养板中 ,细胞A种在上室内 ,下层种植细胞B， 其培养液中的成分可以影响到上室内的细胞 ,从而可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞 A 的影响。 

但这种现有共培养体系存在以下不足：1）培养小室仅底面有膜，允许进入的下层细胞培养液有限，不利于上下两层细胞的信号分子充分交流；2)培养小室数量多，对单独的培养小室进行细胞换液时操作不方便，工作量大；3）只能对两种细胞进行共培养，不能共培养多种细胞。 

实用新型内容

针对上述问题和不足，本实用新型所要解决的技术问题是：怎样提供一种培养液交流更充分，可以实现多个细胞共培养，细胞换液更加方便的体外细胞共培养装置。 

为了解决上述问题，本实用新型采用了以下的技术方案。 

一种体外细胞共培养装置，包括培养皿，其特征在于，所述培养皿上表面具有至少一个培养孔，培养孔内采用纵横设置的半透膜分隔成为若干大小相同的培养区间，所述半透膜为孔径大小3-8μm的聚碳酸酯膜。 

本装置中，采用了孔径大小3-8μm的聚碳酸酯膜作为半透膜，该膜能够允许细胞的分泌产物通过，阻止细胞通过。本装置用于共培养细胞时，可以指定不相邻的培养区间培养以一种细胞，指定其他区间培养另一种或几种细胞，这样就增加了不同细胞的培养液的交换接触面积，增加信号分子交流，使得交流更充分。 

作为优化，还包括分支滴管系统，所述分支滴管系统设置在培养皿上方，分支滴管系统包括位于上方的总管、位于下方的若干分管和连接于两者之间的过渡部分，所述若干分管对应位于培养皿的各培养区间上方，所述过渡部分内具有连通于总管和各分管之间的通道且通道内设置有亲水性材料。分支滴管系统在使用时，将总管上端连接胶皮套进行吸液，再连接换液枪的枪头可进行换液。分管的数目和位置可以进一步根据该种细胞在分块培养皿上接种的位置确定，以方便同种细胞同时换液。同时，过渡部分设置了亲水性材料，可以使得总管流下的液体能均匀流到各分管，以保证添加培养液时液体均匀到达各培养区间。 

本装置的培养孔内具有多个相邻的培养区间，故使用时，也可共培养多种细胞。由于每个培养孔上每个培养区间与周围的多个培养区间有细胞液交流，若在其周围接种多种细胞，就可以研究多种细胞的共同作用对某种细胞的影响。 

综上所述，本实用新型具有以下优点：1）不同细胞的培养液接触面积比现有装置提高80%，保证了共培养的细胞充分交流；2）用配套的分支滴管为细胞换液，减少了换液的工作量，十分方便，不易污染；3）不仅可以共培养两种细胞，也可根据需要进行多种细胞的共培养。 

说明书附图

图1为本实用新型培养皿部分具体实施时的结构示意图。

图2为本实用新型分支滴管系统部分具体实施时的结构示意图。 

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明做进一步说明。 

具体实施时，如图1和图2所示，一种体外细胞共培养装置，包括培养皿1，所述培养皿1上表面具有至少一个培养孔2，培养孔2内采用纵横设置的半透膜3分隔成为若干大小相同的培养区间4，所述半透膜3为孔径大小3-8μm的聚碳酸酯膜。 

具体实施时，本装置还包括分支滴管系统，所述分支滴管系统设置在培养皿1上方，分支滴管系统包括位于上方的总管5、位于下方的若干分管6和连接于两者之间的过渡部分7，所述若干分管6对应位于培养皿的各培养区间上方，所述过渡部分7内具有连通于总管和各分管之间的通道且通道内设置有亲水性材料。 

下面以共培养两种细胞（骨髓间充质干细胞、成骨细胞）为例，对本装置使用方式做进一步说明： 

共培养装置的培养皿设计为含6个边长为39cm的正方形孔为培养孔，每个正方形孔用半透膜隔成3×3的培养区间，所用膜为聚碳酸酯膜，孔径3～8μm，。设计两种分支滴管分别用于骨髓间充质干细胞和成骨细胞换液，分管位置与两种细胞的培养区间对应。本共培养实验为了研究成骨细胞分泌的细胞因子对骨髓间充质干细胞的影响，以下对这两种细胞的共培养进行说明。

首先同时对两种细胞单独培养，各传代3～4次后，接种到上述分块培养皿上，并使相邻的培养区间接种不同种细胞。每隔一天为细胞换液，骨髓间充质干细胞和成骨细胞可以分别采用单独设计的分支滴管换液。用分支滴管吸取细胞废液时，先将其上部的总管连上胶头，再将分管伸入对应的培养区间吸取；滴加缓冲液或新鲜培养液时，则先用枪吸取缓冲液或培养液，再连接到干净的分支滴管总管上滴加。 

由于分隔膜的存在，两种细胞不能直接接触，但培养液可以相互交流，故可以研究排除直接接触外成骨细胞对骨髓间充质干细胞的影响。培养一段时间后，观察骨髓间充质干细胞的生长情况，与单独培养时比较，分析结果。 

Claims (2)

1.一种体外细胞共培养装置，包括培养皿，其特征在于，所述培养皿上表面具有至少一个培养孔，培养孔内采用纵横设置的半透膜分隔成为若干大小相同的培养区间，所述半透膜为孔径大小3-8μm的聚碳酸酯膜。

2.如权利要求1所述的体外细胞共培养装置，其特征在于，还包括分支滴管系统，所述分支滴管系统设置在培养皿上方，分支滴管系统包括位于上方的总管、位于下方的若干分管和连接于两者之间的过渡部分，所述若干分管对应位于培养皿的各培养区间上方，所述过渡部分内具有连通于总管和各分管之间的通道且通道内设置有亲水性材料。

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