CN1985873A - 甘草酸或其盐、人参和黄芪的药物组合物 - Google Patents

甘草酸或其盐、人参和黄芪的药物组合物 Download PDF

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CN1985873A CN 200510045375 CN200510045375A CN1985873A CN 1985873 A CN1985873 A CN 1985873A CN 200510045375 CN200510045375 CN 200510045375 CN 200510045375 A CN200510045375 A CN 200510045375A CN 1985873 A CN1985873 A CN 1985873A
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Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了一种用于抗肝炎的药物组合物及其制备方法和用途，该组合物主要由下列重量份的原料药制成：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参250～16000份、黄芪5000～80000份，也可由甘草酸或其药学上可接受的盐和人参、黄芪的提取物投料，可制成各种药学上可接受的剂型；该组合物具有协同增效作用，稳定性好，比单用同剂量的甘草酸单铵或甘草酸二铵或人参或黄芪的效果大大提高，产生了意想不到的效果，具有广泛的应用前景。

Description

甘草酸或其盐、人参和黄芪的药物组合物
1、技术领域
本发明涉及一种主要由甘草酸或其药学上可接受的盐、人参或其提取物和黄芪或其提取物制成的药物组合物及其制备方法，属于医药技术领域。
2、背景技术
肝炎是一种常见病和多发病，据不完全统计，我国肝炎患者和病毒携带者占总人口的10％。其中以病毒性肝炎为主，病毒性肝炎又可分为：急性肝炎、慢性肝炎、重症肝炎和胆型肝炎。慢性肝炎又可分为迁延性肝炎和活动性肝炎。肝炎是一种传染性疾病，由于其流行性广、危害性大、发病率高，是目前国内外公认的疑难病症之一，以乙型肝炎为例，治愈率仅为10％，绝大部分转为慢性肝炎，严重的转化为肝腹水、肝癌。其中肝纤维化的形成和发展是影响预后和病情转危的关键病理变化之一，也是临床慢性肝病治疗中最为复杂的疑难问题。目前治疗慢性乙型肝炎的疗法主要有：抗病毒药物疗法、免疫调控药物疗法、改善肝微循环疗法、保护疗法、中医辨证论治等。国内外近年来治疗肝炎的药物虽然有许多，但大多没有十分公认的疗效，并且疗效并不理想，另外治疗后病情易反复，且价格又十分昂贵。至今，市场上仍缺少抗肝炎疗效确切又副作用较小的药物。
甘草酸为豆科植物甘草、光果甘草、胀果甘草的根及根茎的精制提取物。由于甘草精制提取的甘草酸有皮质激素样作用，能提高肝炎病人血清氢化可的松的浓度，降低慢性肝炎患者血清及外周单个核细胞中白介素-6和肿瘤坏死因子，减轻免疫病理反应，促进肝功能恢复，清除症状，缩小肝脾肿大，降酶快，退黄疸显著。甘草酸单铵和甘草酸二铵为甘草酸的单铵盐和二铵盐，甘草酸单铵对各型急慢性肝炎、肝纤维化，中毒性肝炎、外伤性肝炎以及癌症有一定的辅助治疗作用。甘草酸二铵为20β-羧基-11氧代正齐墩果烷-12-烯-3β基-2-β-D-葡萄吡喃糖苷醛酸基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸二铵盐，分子式C42H68N2O16，具有较强的抗炎、保护肝细胞膜及改善肝功能的作用，可阻碍可的松与醛固酮的灭活，从而发挥类固醇样作用，但无皮质激素的不良反应。
人参为五加科植物人参(PanaxginsengC.A.Mey.)的干燥根及根茎，以其根部入药，具有“大补元气，固脱生津，安神益智”等良好作用，是著名的珍贵药材。经国内外学者研究证实，人参中含人参总皂苷、人参多糖、人参挥发油等有效成分，现代医学及药理实验研究证实：人参具有增强机体抵抗力，调整机体的功能，促进物质代谢，调节中枢神经和内分泌等作用，人参还具有加速肝脏排毒的功能，保护肝脏，抑制肝纤维增生的作用。
黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)的干燥根。甘，温，归肺、脾经，具有补气固表、利尿脱毒、排脓、敛疮生肌之功效，主要用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，久溃不敛，血虚痿黄，内热消渴；慢性肾炎蛋白病，糖尿病。主要含有黄芪多糖、黄芪总皂苷、黄酮类、生物碱、葡萄糖醛酸及微量元素硒等成分。现代药理实验表明黄芪可促进免疫功能，主要有效成分为多糖和皂苷。
目前利用甘草酸或其药学上可接受的盐、人参或其提取物和黄芪或其提取物的相互作用，配伍组方，用于治疗肝脏疾病方面的药物，尚未见报道。
3、发明内容
为了满足临床需要，更好的治疗肝脏疾病，提高人民健康水平，本发明提供了一种药物组合物及其制备方法，该药物组合物主要由甘草酸或其药学上可接受的盐、人参或其提取物和黄芪或其提取物制备而成，在用于制备治疗肝炎、防治肝纤维化、肝硬化等方面，产生了意想不到的效果。
本发明药物组合物，主要由甘草酸或其药学上可接受的盐、人参或其提取物和黄芪或其提取物制备而成，其重量份数为：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参250～16000份、黄芪5000～80000份；优选为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参500～8000份、黄芪10000～40000份；最优为：甘草酸或其药学上可接受的盐20～200份、人参1000～4000份、黄芪20000份。
上述药物组合物中的原药材可以用适宜的溶剂和方法单提或混提制备得到提取物，总提取物再与甘草酸或其药学上可接受的盐和药学上可接受的辅料混合制成任一制剂。组合物中总提取物的主要的有效成分为：人参多糖或皂苷、黄芪多糖或皂苷，总提取物中主要有效成分总的含量不低于30％。
上文所述的人参可以用适宜的溶剂经过提取加工得到人参提取物，提取溶剂优选水或乙醇，提取方法可以为浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法，提取物的有效成分为人参总皂苷或人参多糖。
人参的提取方法也可参照文献方法制备：如人参总皂苷可根据中国专利申请CN00110418.7制备，人参多糖可根据中国专利申请CN200410000209.4制备。
本发明提供了人参的优选提取工艺，具体过程如下：
以人参多糖为主要有效成分的优选制备工艺如下：
取人参药材，切碎，用75％乙醇，回流提取4小时，滤过，药渣晾干，加水煎煮五次，合并煎煮液，加入0.3％活性炭，搅拌30分钟，静置过夜，滤过，滤液过树脂柱，收集流出液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达95％，冷藏，滤过，取沉淀用丙酮洗涤，抽干丙酮，取出沉淀于60～80℃干燥，粉碎即得。
通过本工艺制备的人参多糖得率为0.5～2％，其中人参多糖的含量不低于50％。
人参多糖还可由如下工艺制备，但不仅限于下述方法：
方法一：取人参，切碎，加水回流提取三次，每次2小时，第一次加水10倍量，二、三次分别为8倍量，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.16～1.24，过大孔树脂柱，收集流出液，减压浓缩至稠膏状，真空干燥，即得。通过本工艺制备的人参多糖，得率为4～6％，人参多糖的含量不低于40％。
方法二：取人参，切碎，用80％乙醇，回流提取3小时，滤过，药渣晾干，加水煎煮三次，每次1.5小时，加水10倍量，合并煎煮液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15～1.20，过大孔树脂，流出液减压浓缩至稠膏状，喷雾干燥即得。通过本工艺制备的人参多糖，得率为2～4％，人参多糖含量不低于45％。
以人参总皂苷为主要有效成分的优选制备工艺，具体如下：
取人参药材，粉碎成细粒，加10倍量乙醇回流提取二次，每次3小时，合并提取液，冷藏，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至稠膏，加水至适量(使每1ml相当于原药材1g)，搅匀，冷藏，滤过，滤液加于已处理好的大孔树脂柱上，先用2V～3V柱体积的水进行洗脱，弃去水洗液，再用3倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇并减压浓缩至相对密度1.30～1.35的稠膏，真空干燥，即得。
通过本工艺制备得到的人参总皂苷得率为1～2％，人参总皂苷含量不低于50％，人参皂苷Re、人参皂苷Rg1含量和不低于30％。
人参总皂苷还可由如下工艺制备，但不仅限于下述方法：
方法一：取人参药材，粉碎成细粒，加乙醇回流提取二次，每次4小时，每次加醇10倍量，合并提取液，冷藏，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至稠膏，加水稀释至相对密度为1.15～1.20，加1/2倍量水饱和正丁醇提取3次，合并正丁醇液，减压回收正丁醇至稠膏状，喷雾干燥即得。通过本工艺制备的人参总皂苷得率为4～5％，人参总皂苷含量不低于35％，人参皂苷Re、人参皂苷Rg1含量和不低于20％。
方法二：取人参药材，粉碎成细粒，加乙醇回流提取三次，第一次加醇10倍量，二、三次分别为8倍量，每次2小时，合并提取液，滤过，回收乙醇并浓缩至稠膏，加水至适量，搅匀，冷藏，滤过，滤液加1/2倍量水饱和正丁醇提取3次减压浓缩，合并正丁醇液，减压回收正丁醇至稠膏状，喷雾干燥即得。通过本工艺制备的人参总皂苷得率为3～5％，人参总皂苷含量为不低于40％，人参皂苷Re、人参皂苷Rg1含量和不少于20％。
上文所述的黄芪可以用适宜的溶剂经过提取加工得到黄芪多糖，其中的溶剂优选水或乙醇，黄芪的提取方法可以为浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法。如可通过水提醇沉制备得到黄芪提取物，还可以通过根据文献方法制备。
本发明提供了黄芪的优选提取工艺，具体过程如下：
以黄芪多糖为主要有效成分的优选制备工艺，具体如下：
取黄芪药材，加7倍量70％乙醇提取二次，每次2小时，弃去提取液，取药渣加水提取二次，合并提取液，浓缩至提取液体积与生药材的比例为1.05∶1，加入乙醇沉淀使含醇量达到70％，过滤，得沉淀，沉淀用70％乙醇洗涤，再用适量水溶解，过滤，滤液过大孔树脂，用水洗脱，收集水洗液，将水洗液浓缩至药液体积与药材比例为1∶2.5，加入乙醇使含醇量达到70％，得沉淀，将沉淀用95％乙醇和丙酮洗涤脱水，减压干燥(60℃)，即得。
通过本工艺制备的黄芪多糖得率为0.5～2％，黄芪多糖的含量不低于50％。
除采用上述方法外，也可通过以下方法获得，但不仅限于下述方法：
方法一：取黄芪药材，加水回流提取三次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15～1.23，加乙醇使含醇量达80％，静置24小时，滤过，沉淀加水溶解，滤过，再加乙醇使含醇量达85％，静置24小时，滤过，收集沉淀，真空干燥即得。通过本工艺制备的黄芪多糖得率为2～4％，黄芪多糖含量不低于40％。
方法二：取黄芪药材，加10倍量80％乙醇提取4小时，提取液弃去，取药渣加水提取二次，每次2小时，每次加水10倍量，提取液合并，过滤，滤液加乙醇使含醇量达85％，过滤，滤液减压浓缩至稠膏状，喷雾干燥即得。通过本工艺制备的黄芪多糖得率为3～4％，黄芪多糖含量不低于35％。
以黄芪总皂苷为主要有效成分的优选制备工艺，具体如下：
取黄芪，加水煎煮三次，每次1.5小时，第一次加水10倍量，二、三次均为8倍量，合并煎液，滤过滤液浓缩至相对密度为1.20～1.25(60℃)，用乙醇沉淀处理2次，第一次溶液中含醇量为75％，第二次为85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原药材10g，加于已处理好的大孔吸附树脂柱上，先用2倍体积的水冲柱，再用4倍体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、真空干燥，即得。
通过本工艺制备的黄芪总皂苷得率为0.5～2％，总皂苷含量不低于50％，黄芪甲苷含量不低于2.0％。
除采用上述方法外，也可通过以下方法获得，但不仅限于下述方法：
方法二：取黄芪，加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.25(60℃)，用乙醇沉淀处理2次，第一次溶液中含乙醇量为60％，第二次为85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原药材10g，减压浓缩、真空干燥，即得。通过本工艺制备的黄芪总皂苷得率为2～4％，总皂苷含量为不低于40％，黄芪甲苷含量不低于1％。
方法二：取黄芪，加水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.25(60℃)，用乙醇沉淀处理1次使含乙醇量为60％，冷藏放置，回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原药材10g，并减压浓缩、真空干燥，即得。通过本工艺制备的黄芪总皂苷得率为3～5％，总皂苷含量不低于30％，黄芪甲苷含量不低于1％。
本发明药物组合物除可用上述药材直接投料制得外，还可以由甘草酸或其药学上可接受的盐和人参的提取物、黄芪的提取物投料制成，其中人参多糖含量不低于40％，最好不低于50％，或者人参总皂苷含量不低于35％，最好不低于50％，其中的人参皂苷Re、人参皂苷Rg1含量和不低于20％，最好不低于30％；黄芪多糖含量不低于35％，最好不低于50％，或者黄芪总皂苷含量不低于30％，最好不低于50％，其中的黄芪甲苷含量不低于1％，最好不低于2％。按照提取物相对于药材的得率计算，可以有以下四种不同配比，其重量份数分别为：
配比1：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参多糖2～40份、黄芪多糖70～1200份；优选为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参多糖5～20份、黄芪多糖150～600份；最优为：甘草酸或其药学上可接受的盐20～200份、人参多糖10份、黄芪多糖300份。
配比2：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参多糖2～40份、黄芪总皂苷50～800份；优选为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参多糖5～20份、黄芪总皂苷100～400份；最优为：甘草酸或其药学上可接受的盐20～200份、人参多糖10份、黄芪总皂苷200份
配比3：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参总皂苷10～160份、黄芪多糖70～1200份；优选为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参总皂苷20～80份、黄芪多糖150～600份；最优为：甘草酸或其药学上可接受的盐20～200份、人参总皂苷40份、黄芪多糖300份。
配比4：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参总皂苷10～160份、黄芪总皂苷50～800份；优选为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参总皂苷20～80份、黄芪总皂苷100～400份；最优为：甘草酸或其药学上可接受的盐20～200份、人参总皂苷40份、黄芪总皂苷200份。
以上组成是按重量份作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减小，如大规模生产可以以千克为单位，或以吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间重量配比的比例不变。
以上组成，若以克为单位，可以制成100～10000次用量的制剂，如作为注射剂，可制成100～10000支，每次用量1～10支。如作为片剂，可制成100～10000片，每次服用1～10片。
以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，可以相应调整组成的比例，增加或者减少不超过100％。
本发明药物组分的用量是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量在上述重量份范围内都具有较好疗效。
本发明药物组合物，甘草酸药学上可接受的盐为金属盐或有机氮盐，金属盐可以是钠盐、钾盐、镁盐、钙盐、锌盐，有机氮盐优选甘草酸单铵和甘草酸二铵。
本发明提供了一种用于制备治疗肝脏疾病方面的药物。本发明药物组合物具有抗肝炎，防治肝纤维化、肝硬化作用，甘草酸能提高肝炎病人血清氢化可的松的浓度，降低慢性肝炎患者血清及外周单个核细胞中白介素-6和肿瘤坏死因子，减轻免疫病理反应，促进肝功能恢复，清除症状，缩小肝脾肿大，降酶快，退黄疸，其衍生的盐甘草酸单铵对各型急慢性肝炎、肝纤维化，中毒性肝炎、外伤性肝炎以及癌症有一定的辅助治疗作用，甘草酸二铵具有较强的抗炎、保护肝细胞膜及改善肝功能的作用，可阻碍可的松与醛固酮的灭活，从而发挥类固醇样作用，但无皮质激素的不良反应，人参具有加速肝脏排毒的功能，保护肝脏，抑制肝纤维增生的作用，黄芪可促进免疫功能，提高机体免疫力，对肝炎有辅助治疗的作用。三药配伍组方共同发挥治疗肝炎，保护肝脏等作用，用于治疗肝炎，防治肝纤维化、肝硬化方面有意想不到的好效果。
本发明的药物组合物可以加一种或多种药学上可接受的载体，以口服、鼻吸入或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊、软胶囊、分散片、口服液、颗粒、咀嚼片、口崩片、滴丸、缓释片、缓释胶囊、控释片、控释胶囊，制成液体制剂如水或油悬浮剂或其它液体制剂如糖浆等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、水或油悬浮剂等，如水针、冻干粉针、无菌粉针、输液等。本组合物优选的剂型是注射剂或口服制剂。
本发明的药物组合物可采用现有制药领域中的常规方法生产，需要的时候可以添加各种药学上可接受的载体。所述的载体包括药学领域常规的赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
本发明的药物组合物在制成注射剂时，为了增加其溶解度，可以加入聚山梨酯80等增溶剂。输液中可以加入用于调节渗透压的等渗调节剂，例如，氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、乳酸钠、葡萄糖、木糖醇、山梨醇和右旋糖苷等，优选氯化钠或葡萄糖。粉针中可加入赋形剂，例如，甘露醇、葡萄糖等。
本发明经过药效动物实验研究结果表明，由甘草酸或其药学上可接受的盐、人参或其提取物和黄芪或其提取物制成的药物，对四氯化碳(CCl4)中毒致大鼠急性肝损伤有保护作用，使肝脏的ALT和AST有明显的恢复作用；对四氯化碳(CCl4)中毒小鼠的肝、脾指数有很好的降低作用；对鸭感染的DHBV病毒有明显抑制的作用；对小鼠肝纤维化后血清生化指标有明显的恢复作用，使血清ALT、AST、TP含量降低，Alb、A/G明显升高，有明显的抗肝纤维化的作用。本发明实验研究结果表明，甘草酸或其药学上可接受的盐、人参或其提取物和黄芪或其提取物合并用药呈协同作用，药效明显增强。
本发明组合物具有以下优点：
(1)提供了一种用于治疗肝炎的药物组合物及其制备方法，满足了临床急需；
(2)首次对本发明组合物各配比进行了药效学研究，得出了本发明组合物的最优配比；
(3)对本发明组合物的相互作用和配伍组方进行了药效学研究，发现了组合物具有明显的抗肝炎作用，对四氯化碳(CCl4)中毒致大鼠急性肝损伤有保护作用，使肝脏的ALT和AST有明显的恢复作用，对四氯化碳(CCl4)中毒小鼠的肝、脾指数有很好的降低作用，对鸭感染的DHBV病毒有明显抑制的作用，对小鼠肝纤维化后血清生化指标有明显的恢复作用，使血清ALT、AST、TP含量降低，Alb、A/G明显升高，有明显的抗肝纤维化的作用；上述各实验组中，组合物实验组与单用甘草酸二铵或甘草酸单铵组或人参多糖组或人参总皂苷组或黄芪多糖组或黄芪总皂苷组相比，统计学差异均显著(p＜0.05)，表明甘草酸或其药学上可接受的盐、人参或其提取物和黄芪或其提取物三药合用抗肝炎、抗肝纤维化效果显著，其结果是本技术领域的普通技术人员所意想不到的；
(4)本发明可以以原料或提取物直接投料，制备工艺简单，可以使不同批次药品间质量差异小，药品质量更均匀稳定；
(5)进行的急性毒性实验表明本发明药物组合物注射液的最大耐受量相当于50kg体重人日最大用量40ml的100倍，表明了本发明药物组合物低毒，安全性高；
(6)进行的稳定性实验表明本发明药物组合物注射液各项指标均比较稳定，保证了临床用药的安全；
(7)本发明组合物三药合并用药疗效确切，且减小了相对用药剂量，具有广泛的应用前景。
以下通过实验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。下列实验例中：甘草酸单铵或二铵、人参多糖和黄芪多糖的组合物以下简称 GRH组合物I，甘草酸单铵或二铵、人参多糖和黄芪总皂苷的组合物以下简称 GRH组合物Ⅱ，甘草酸单铵或二铵、人参总皂苷和黄芪多糖的组合物以下简称 GRH组合物Ⅲ，甘草酸单铵或二铵、人参总皂苷和黄芪总皂苷的组合物以下简称 GRH组合物IV。实验例中所用的人参多糖取自实施例1，人参总皂苷取自实施例2，黄芪多糖取自实施例3，黄芪总皂苷取自实施例4。
实验例1  GRH组合物合并用药药效研究-对四氯化碳(CCl4)致大鼠急性肝损伤的保护作用
供试品：空白对照组：0.9％生理盐水注射液，市购；
模型组：CCl4注射液，自制；
甘草酸二铵组：甘草酸二铵注射液10ml 150mg，自制；
人参多糖组：人参多糖注射液，自制；
人参总皂苷组：人参总皂苷注射液，自制；
黄芪多糖组：黄芪多糖注射液，自制；
黄芪总皂苷组：黄芪总皂苷注射液，自制；
GRH组合物注射液I组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液II组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液III组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液IV组，自制(制备方法参见实施例6)。
受试动物：Wistar大鼠，体重200～220g，310只，随机分为31组。
试剂盒：谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒，市购，上海生物制品研究所。
实验方法：取大鼠310只，随机分为31组，分别为空白对照组、模型组、甘草酸二铵组、人参多糖组、人参总皂苷组、黄芪多糖组、黄芪总皂苷组、GRH组合物注射液I不同剂量配比组、GRH组合物注射液II不同剂量配比组、GRH组合物注射液III不同剂量配比组、GRH组合物注射液IV不同剂量配比组，每组10只。空白对照组腹腔注射0.9％生理盐水10ml/kg，其余各组大鼠连续给药三天(腹腔注射)，禁食5.5h，末次给药2h后分别给予25％CCl4花生油溶液，给药剂量见表1。给予四氯化碳后大鼠进食，于给予四氯化碳24小时禁食12小时，颈静脉取各大鼠血，3000r/min离心10min，分离血清，按ALT，AST测定说明书，进行谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性测定。结果见表1。
表1 GRH组合物注射液对四氯化碳(CCl4)致大鼠急性肝损伤的保护作用
组别 重量配比(mg) 给药剂量(mg/kg) ALT(n mol/s.L) AST(n mol/s.L)
空白对照组 - 225.64±21.65 219.41±20.98
模型组 - 20 376.24±72.85*** 389.54±47.86***
甘草酸二铵组 - 100 305.48±35.67*## 313.55±32.25*##
人参多糖组 - 100 331.34±43.53**# 347.42±37.78**#
人参总皂苷组 - 100 329.61±42.37**# 346.72±37.66**#
黄芪多糖组 - 100 339.53±46.28**# 345.29±36.87**#
黄芪总皂苷组 - 100 336.79±45.52**# 351.68±37.85**#
GRH组合物注射液I组(甘草酸二铵+人参多糖+黄芪多糖) 10+5+150 100 282.34±30.06*##&★△ 276.84±28.67*##&★△
20+5+200 100 271.68±28.56*##&★△ 268.48±26.85*##&★△
100+10+300 100 253.51±23.23###&★△ 252.04±25.41###&★△
150+10+300 100 243.39±21.67###&★△ 232.54±20.38###&★△
200+15+500 100 259.65±24.51###&★△ 256.06±26.25###&★△
400+20+600 100 276.54±28.99*##&★△ 272.69±27.67*##&★△
GRH组合物注射液II组(甘草酸二铵+人参多糖+黄芪总皂苷) 10+5+100 100 278.37±28.75*##&★ 273.66±27.85*##&★
20+5+200 100 265.94±25.48*##&★ 258.45±26.76*##&★
100+10+200 100 255.51±23.44###&★ 245.24±25.32###&★
150+10+200 100 240.36±22.38###&★ 230.54±19.68###&★
200+15+300 100 254.34±24.06###&★ 255.31±25.97###&★
400+20+400 100 275.76±27.94*##&★ 272.66±27.58*##&★
GRH组合物注射液III组(甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪多糖) 10+20+150 100 276.92±28.46*##&◆△ 274.36±27.88*##&◆△
20+30+200 100 261.38±26.75*##&◆△ 261.52±25.41*##&◆△
100+40+300 100 252.34±23.26###&◆△ 248.84±23.26###&◆△
150+40+300 100 238.31±21.48###&◆△ 241.51±21.43###&◆△
200+50+500 100 260.51±26.54*##&◆△ 256.48±24.49###&◆△
400+60+600 100 273.58±28.86*##&◆△ 270.33±28.54*##&◆△
GRH组合物注射液IV组(甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷) 10+20+100 100 277.39±29.84*##&◆ 273.58±27.68*##&◆
20+30+200 100 262.42±27.09*##&◆ 263.46±25.34*##&◆
100+40+200 100 253.24±23.52###&◆ 252.65±23.55###&◆
150+40+200 100 241.65±22.06###&◆ 239.58±21.15###&◆
200+50+300 100 257.54±25.62###&◆ 258.55±23.75###&◆
400+60+400 100 271.38±27.87*##&◆ 267.66±27.36*##&◆
注：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001与空白对照组相比；#p＜0.05，##p＜0.01，###p＜0.001与模型组相比；&p＜0.05，与甘草酸二铵组相比；p＜0.01，与人参多糖组相比；◆p＜0.01，与人参总皂苷组相比；△p＜0.01，与黄芪多糖组相比；p＜0.01，与黄芪总皂苷组相比。
实验结果：模型组与空白对照组相比有显著差异(***p＜0.01)，说明造模成功。各给药组都对四氯化碳(CCl4)中毒致大鼠急性肝损伤有保护作用，肝脏的ALT和AST有明显的恢复作用(#p＜0.05、##p＜0.01和###p＜0.001)。其中GRH组合物注射液I、GRH组合物注射液II、GRH组合物注射液III和GRH组合物注射液IV的不同剂量配比组与单用甘草酸二铵或人参多糖或人参总皂苷或黄芪多糖或黄芪总皂苷相比，差别显著(&p＜0.05、★p＜0.01、◆p＜0.01、△p＜0.01和p＜0.01)。表明甘草酸二铵、人参和黄芪配联合应用呈协同作用，对四氯化碳中毒致大鼠急性肝损伤有保护作用，使肝脏的ALT和AST水平恢复正常，表明恢复肝功的效果显著，其疗效与组合物的剂量配比有关，GRH组合物注射液I中甘草酸二铵+人参多糖+黄芪多糖＝150mg+10mg+300mg、GRH组合物注射液II中甘草酸二铵+人参多糖+黄芪总皂苷＝150mg+10mg+200mg、GRH组合物注射液III中甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪多糖＝150mg+40mg+300mg、GRH组合物注射液IV中甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷＝150mg+40mg+200mg时作用最好。
实验例2 GRH组合物对四氯化碳(CCl4)中毒所致急性肝损伤小鼠的肝、脾指数的影响
供试品：空白对照组：0.9％生理盐水注射液，市购；
CCl4模型组：CCl4注射液，自制；
甘草酸单铵组：甘草酸单铵注射液10ml：40mg，自制；
GRH组合物注射液I组(甘草酸单铵+人参多糖+黄芪多糖＝40mg+10mg+300mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液II组(甘草酸单铵+人参多糖+黄芪总皂苷＝40mg+10mg+200mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液III组(甘草酸单铵+人参总皂苷+黄芪多糖＝40mg+40mg+300mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液IV组(甘草酸单铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷＝40mg+40mg+200mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)。
受试动物：健康昆明种小鼠，体重18～22g，150只，随机分为15组。
实验方法：取小鼠150只，随机分为15组，分别为空白对照组、CCl4模型组、甘草酸单铵组、GRH组合物注射液I低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液II低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液III低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液IV低、中、高三个剂量组，每组10只。空白对照组腹腔注射0.9％生理盐水10ml/kg，其余各组动物均腹腔注射CCl410ml/kg，禁食过夜。给药组腹腔注射给药，每日1次，给药剂量见表2，连续10d，对照组给相应体积的生理盐水，于最后一次给药后，断头处死动物，取肝脏和脾脏，吸去血液，剪去脂肪、系膜，精确称重。结果见表2。
实验结果：各给药组都能明显的降低四氯化碳(CCl4)中毒小鼠的肝、脾指数(#p＜0.05和##p＜0.01)。其中GRH组合物注射液I、GRH组合物注射液II、GRH组合物注射液III和GRH组合物注射液IV与单用甘草酸单铵相比，差别显著(&p＜0.05)。证明甘草酸单铵、人参和黄芪配伍有显著降低四氯化碳(CCl4)中毒小鼠的肝、脾指数的作用，与空白对照组相比没有显著差异(p＞0.05)。且作用效果与组合物的给药剂量有关，高剂量时作用最好。
表2 GRH组合物对四氯化碳(CCl4)中毒所致急性肝损伤小鼠的肝、脾指数的影响(x±SD)
组别 动物数(只) 给药剂量(mg/kg) 肝指数(g/100g) 脾指数(g/100g)
空白对照组 10 - 6.32±1.02 0.635±0.126
CCl4模型组 10 10 8.160±0.648** 0.744±0.063**
甘草酸单铵组 10 60 7.164±0.728*# 0.663±0.051*#
GRH组合物注射液I组(低剂量) 10 20 6.73±0.74##& 0.657±0.082##&
GRH组合物注射液I组(中剂量) 10 40 6.64±0.75##& 0.644±0.081##&
GRH组合物注射液I组(高剂量) 10 60 6.40±0.82##& 0.631±0.086##&
GRH组合物注射液II组(低剂量) 10 20 6.80±0.73##& 0.652±0.080##&
GRH组合物注射液II组(中剂量) 10 40 6.68±0.75##& 0.641±0.085##&
GRH组合物注射液II组(高剂量) 10 60 6.39±0.84##& 0.632±0.089##&
GRH组合物注射液III组(低剂量) 10 20 6.71±0.73##& 0.649±0.086##&
GRH组合物注射液III组(中剂量) 10 40 6.60±0.76##& 0.639±0.087##&
GRH组合物注射液III组(高剂量) 10 60 6.42±0.81##& 0.630±0.089##&
GRH组合物注射液IV组(低剂量) 10 20 6.75±0.76##& 0.654±0.078##&
GRH组合物注射液IV组(中剂量) 10 40 6.63±0.72##& 0.642±0.088##&
GRH组合物注射液IV组(高剂量) 10 60 6.37±0.86##& 0.635±0.085##&
注：*p＜0.05，**p＜0.01，与空白对照组相比；#p＜0.05，##p＜0.01，与CCl4模型组相比；&p＜0.05，与甘草酸单铵组相比。
实验例3 GRH组合物对DHBV-DNA的抑制作用
供试品：空白对照组：0.9％生理盐水注射液，市购；
阳性对照组：阿昔洛韦(ACV)注射液，自制；
甘草酸二铵组：甘草酸二铵注射液10ml：150mg，自制；
GRH组合物注射液I组(甘草酸二铵+人参多糖+黄芪多糖＝150mg+10mg+300mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液II组(甘草酸二铵+人参多糖+黄芪总皂苷＝150mg+10mg+200mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液III组(甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪多糖＝150mg+40mg+300mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液IV组(甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷＝150mg+40mg+200mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)。
受试动物：市售1日龄北京鸭。
病毒：DHBV阳性血清。
实验方法：(1)动物模型北京鸭经足静脉注射0.2ml DHBV阳性血清，7d后取血，分离血清，-20℃保存检验。
(2)药物治疗 筛选出感染成功的阳性鸭90只，随机分为15组，每组6只。分别为空白对照组、阳性对照组、甘草酸二铵组、GRH组合物注射液I低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液II低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液III低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液IV低、中、高三个剂量组。静脉注射给药，给药剂量见表3，给药2周。分别于药前、用药第7天、用药第14天和停药后第3天，自鸭腿静脉抽血，分离血清，-20℃保存待验。
(3)检测方法 采用DHBV-DNA Dot Blot法，以杂交斑点吸光度值(A)作为标本DHBV-DNA水平值。
(4)统计学处理  用药组不同时间DNA含量与用药前比较，采用配对t检验；用药组同一时间DNA含量与病毒对照组比较，采用t检验。结果见表4。
表3  GRH组合物对DHBV-DNA的抑制作用(x±SD)
组别 给药剂量(mg/kg) 治疗前DHBV-DNA滴度 治疗后7dDHBV-DNA滴度 治疗后14dDHBV-DNA滴度 停药后3dDHBV-DNA滴度
空白对照组 - 1.56±0.05 1.57±0.04 1.56±0.04 1.57±0.03
阳性对照组 50 1.59±0.03 0.85±0.16**&& 0.81±0.17**&& 1.57±0.04
甘草酸二铵组 100 1.56±0.05 1.23±0.07*& 1.22±0.08*& 1.38±0.06*&
GRH组合物注射液I组(低剂量) 60 1.57±0.04 1.01±0.12**&&# 0.94±0.13**&&# 1.03±0.08**&&#
GRH组合物注射液I组(中剂量) 80 1.60±0.04 0.92±0.14**&&# 0.89±0.16**&&# 0.98±0.11**&&#
GRH组合物注射液I组(高剂量) 100 1.58±0.05 0.84±0.16**&&# 0.82±0.17**&&# 0.85±0.15**&&#
GRH组合物注射液II组(低剂量) 60 1.55±0.05 1.03±0.10**&&# 0.95±0.13**&&# 1.03±0.10**&&#
GRH组合物注射液II组(中剂量) 80 1.58±0.04 0.93±0.13**&&# 0.90±0.14**&&# 0.95±0.12**&&#
GRH组合物注射液II组(高剂量) 100 1.59±0.03 0.86±0.15**&&# 0.83±0.16**&&# 0.88±0.14**&&#
GRH组合物注射液III组(低剂量) 60 1.56±0.05 1.02±0.12**&&# 0.95±0.13**&&# 1.05±0.10**&&#
GRH组合物注射液III组(中剂量) 80 1.58±0.04 0.93±0.15**&&# 0.88±0.14**&&# 0.98±0.11**&&#
GRH组合物注射液III组(高剂量) 100 1.59±0.03 0.82±0.16**&&# 0.80±0.18**&&# 0.86±0.15**&&#
GRH组合物注射液IV组(低剂量) 60 1.61±0.04 1.00±0.13**&&# 0.94±0.15**&&# 1.02±0.12**&&#
GRH组合物注射液IV组(中剂量) 80 1.56±0.03 0.94±0.14**&&# 0.91±0.15**&&# 0.95±0.14**&&#
GRH组合物注射液IV组(高剂量) 100 1.57±0.04 0.84±0.15**&&# 0.81±0.17**&&# 0.86±0.15**&&#
注：*p＜0.05，**p＜0.01，与同组治疗前相比；&p＜0.05，&&p＜0.01，与空白对照组相比；#p 0.05，与甘草酸二铵组相比。
实验结果：各给药组都明显抑制DHBV病毒(&p＜0.05和&&p＜0.01)。其中GRH组合物注射液I、GRH组合物注射液II、GRH组合物注射液III和GRH组合物注射液IV与单用甘草酸二铵相比，差别显著(&p＜0.05)，且停药后无反跳，与给药前比较差异显著(*p＜0.05和**p＜0.01)，而阳性对照组在停药后与给药前比较无显著差异(p＞0.05)。且作用效果与组合物的给药剂量有关，高剂量作用最好。
实验例4 GRH组合物抗小鼠肝纤维化作用
供试品：空白对照组：0.9％生理盐水注射液，市购；
模型组：CCl4注射液，自制；
甘草酸二铵组：甘草酸二铵注射液10ml：150mg，自制；
人参多糖组：人参多糖注射液，自制；
人参总皂苷组：人参总皂苷注射液，自制；
GRH组合物注射液I组(甘草酸二铵+人参多糖+黄芪多糖＝150mg+10mg+300mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液II组(甘草酸二铵+人参多糖+黄芪总皂苷＝150mg+10mg+200mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液III组(甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪多糖＝150mg+40mg+300mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)；
GRH组合物注射液IV组(甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷＝150mg+40mg+200mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制(制备方法参见实施例6)。
受试动物：健康昆明种小鼠，体重24～28g，雌雄兼用，170只，随机分为17组。
实验方法：取小鼠170只，随机分为17组，分别为空白对照组、模型组、甘草酸二铵组、人参多糖组、人参总皂苷组、GRH组合物注射液I低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液II低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液III低、中、高三个剂量组、GRH组合物注射液IV低、中、高三个剂量组，每组10只。空白对照组皮下注射NS 10mg/kg，首剂加倍，5d注射1次，连续5周，其余各组动物均皮下注射40％CCl4花生油10mg/kg，首剂加倍，5d注射1次，连续5周，除空白对照组、模型组外的各给药组皮下注射给药，给药剂量见表4，5d注射1次，连续5周。在实验过程中每天观察各组小鼠进食、饮水、活动情况及皮毛变化，每周称重1次，第五周全部停用CCl4，继续给药治疗1周，于末次给药后第2天摘眼球取血，分离血清检测血中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)的含量和A/G(白蛋白/球蛋白)的比值。结果见表4。
实验结果：模型组各项指标与空白对照组相比有极显著差异(**p＜0.01)，说明造模成功。各给药组都与模型组相比血清ALT、AST、TP有明显的降低，而Alb、A/G明显升高，差异显著(#p＜0.05和##p＜0.01)。其中GRH组合物注射液I、GRH组合物注射液II、GRH组合物注射液III和GRH组合物注射液Ⅳ与单用甘草酸二铵或人参多糖或人参总皂苷相比，差别显著(&p＜0.05、★p＜0.05和△p＜0.05)。表明甘草酸二铵、人参和黄芪配伍对小鼠肝纤维化后血清生化指标有明显的恢复作用，使血清ALT、AST、TP含量降低，Alb、A/G明显升高，与空白对照组相比没有明显差异(p＞0.05)。且与组合物的给药剂量有关，高剂量作用最好。
表4 GRH组合物注射液对小鼠肝纤维化后血清生化指标的影响(x±SD，n＝10)
组别 给药剂量(mg/kg) ALT/U·L-1 AST/U·L-1 TP/g·L-1 Alb/g·L-1 A/G
空白对照组 10 54.0±12.6 82.2±16.0 51.4±5.8 24.9±2.7 0.94±0.42
模型组 10 11 2.6±16.2** 112.8±12.6** 89.6±10.3** 15.4±3.2** 0.21±0.08**
甘草酸二铵组 100 78.7±13.6*# 93.5±13.7*# 71.5±8.7*# 18.6±2.5*# 0.35±0.16*#
人参多糖组 100 82.2±12.5*# 92.6±13.9*# 71.3±8.6*# 18.8±2.3*# 0.36±0.18*#
人参总皂苷组 100 81.7±13.4*# 92.8±13.6*# 71.8±8.9*# 18.5±2.0*# 0.34±0.17*#
GRH组合物注射液I组(低剂量) 60 64.6±9.5##&★ 85 6±14.7##&★ 61.8±6.9##&★ 21.5±2.2##&★ 0.53±0.34##&★
GRH组合物注射液I组(中剂量) 80 60.4±10.2##&★ 83.8±15.6##&★ 60.6±6.8##&★ 22.7±2.5##&★ 0.60±0.33##&★
GRH组合物注射液I组(高剂量) 100 56.4±8.9##&★ 82.3±16.5##&★ 54.7±6.2##&★ 23.5±2.7##&★ 0.75±0.32##&★
GRH组合物注射液II组(低剂量) 60 63.8±9.9##&★ 84.9±15.2##&★ 62.6±7.1##&★ 21.3±2.3##&★ 0.52±0.31##&★
GRH组合物注射液II组(中剂量) 80 59.4±10.3##&★ 83.1±15.7##&★ 58.5±6.4##&★ 22.6±2.4##&★ 0.63±0.33##&★
GRH组合物注射液II组(高剂量) 100 55.6±10.5##&★ 81.6±16.7##&★ 53.2±6.0##&★ 23.8±2.6##&★ 0.80±0.36##&★
GRH组合物注射液III组(低剂量) 60 65.4±9.6##&△ 84.6±15.1##&△ 63.3±7.3##&△ 21.6±2.3##&△ 0.52±0.29##&△
GRH组合物注射液III组(中剂量) 80 61.2±10.9##&△ 83.9±15.9##&△ 57.6±6.8##&△ 22.9±2.5##&△ 0.66±0.32##&△
GRH组合物注射液III组(高剂量) 100 55.8±9.8##&△ 82.0±16.1##&△ 52.9±6.6##&△ 23.7±2.6##&△ 0.81±0.38##&△
GRH组合物注射液IV组(低剂量) 60 63.5±10.8##&△ 85.2±14.8##&△ 63.9±7.6##&△ 21.9±2.3##&△ 0.52±0.30##&△
GRH组合物注射液IV组(中剂量) 80 57.9±10.4##&△ 83.9±15.8##&△ 59.8±6.7##&△ 22.5±2.4##&△ 0.60±0.35##&△
GRH组合物注射液IV组(高剂量) 100 54.8±11.3##&△ 81.8±16.2##&△ 53.6±6.5##&△ 23.4±2.7##&△ 0.77±0.36##&△
注：*p＜0.05，**p＜0.01，与空白对照组相比；#p＜0.05，##p＜0.01，与模型组相比；&p＜0.05，与甘草酸二铵组相比；★p＜0.05，与人参多糖组相比；△p＜0 05，与人参总皂苷组相比。
实验例5 小鼠注射给药急性毒性实验
(1)实验方法
供试品：GRH组合物注射液I
(自制，10ml：甘草酸二铵+人参多糖+黄芪多糖＝150mg+10mg+300mg)；
(自制，10ml：甘草酸单铵+人参多糖+黄芪多糖＝40mg+10mg+300mg)；
GRH组合物注射液II
(自制，10ml：甘草酸二铵+人参多糖+黄芪总皂苷＝150mg+10mg+200mg)；
(自制，10ml：甘草酸单铵+人参多糖+黄芪总皂苷＝40mg+10mg+200mg)；
GRH组合物注射液III
(自制，10ml：甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪多糖＝150mg+40mg+300mg)；
(自制，10ml：甘草酸单铵+人参总皂苷+黄芪多糖＝40mg+40mg+300mg)；
GRH组合物注射液IV
(自制，10ml：甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷＝150mg+40mg+200mg)；
(自制，10ml：甘草酸单铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷＝40mg+40mg+200mg)。
受试动物：小鼠，每组雌雄各5只，雄性体重25～28g，雌性体重21～24g。
给药途径：静脉注射、腹腔注射。
观察项目：死亡数、一般状态、体重、剖检、半数致死量。
(2)实验结果
按照急性毒性实验要求进行预试，腹腔注射及静脉注射两给药途径皆无法测出药物的半数致死量，也未见明显的毒性反应，故进行一日内最大给药量实验。给药剂量：尾静脉注射0.4ml/10g，腹腔注射0.4ml/10g，一日2次。
死亡数：未出现死亡。
一般状态：未见异常变化。
体重：于给药前1天，给药日，给药后1、3、7、14天测量；未见异常变化。
剖检：心、肝、肺、肾等组织未见异常变化。
(3)结论
本实验中未出现死亡，推测GRH各组合物注射液对雌雄小鼠静脉和腹腔注射给药的最大耐受量均为0.8ml/10g，相当于50kg体重人日最大用量40ml的100倍。表明本品低毒，安全性高。
实验例6 GRH组合物注射液稳定性实验
供试品：GRH组合物注射液I
(自制，10ml：甘草酸二铵+人参多糖+黄芪多糖＝150mg+10mg+300mg)；
(自制，10ml甘草酸单铵+人参多糖+黄芪多糖＝40mg+10mg+300mg)；
GRH组合物注射液II
(自制，10ml：甘草酸二铵+人参多糖+黄芪总皂苷＝150mg+10mg+200mg)；
(自制，10ml：甘草酸单铵+人参多糖+黄芪总皂苷＝40mg+10mg+200mg)；
GRH组合物注射液III
(自制，10ml甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪多糖＝150mg+40mg+300mg)；
(自制，10ml：甘草酸单铵+人参总皂苷+黄芪多糖＝40mg+40mg+300mg)；
GRH组合物注射液IV
(自制，10ml甘草酸二铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷＝150mg+40mg+200mg)；
(自制，10ml甘草酸单铵+人参总皂苷+黄芪总皂苷＝40mg+40mg+200mg)。
考察项目：性状、pH值、澄明度。
长期稳定性实验方法及结果：将本品各组合物置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置6个月、12个月，各项指标均无明显变化，实验结果表明本品组合物注射液长期放置基本稳定。
4、具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。实施例5～11中的实验例中所用的人参多糖取自实施例1，人参总皂苷取自实施例2，黄芪多糖取自实施例3，黄芪总皂苷取自实施例4。
实施例1 以多糖为主要有效成分的人参提取物即人参多糖的制备
人参多糖制备工艺：
取人参，切碎，用75％乙醇，回流提取4小时，滤过，药渣晾干，加水煎煮五次，合并煎煮液，加入0.3％活性炭，搅拌30分钟，静置过夜，滤过，滤液过树脂柱，收集流出液，减压浓缩，加乙醇使含醇量达95％，冷藏，滤过，取沉淀用丙酮洗涤，抽干丙酮，取出沉淀于60～80℃干燥，粉碎即得。
人参多糖鉴别实验
(1)取本品约0.2g，加水5ml溶解后，加碱性酒石酸铜试液5滴，加热即产生红色沉淀，冷却，滤过，取滤液加盐酸1滴使成酸性，水浴加热10分钟，放冷，调节PH值至中性，加碱性酒石酸铜试液0.5ml，水浴加热即产生红色的氧化亚铜沉淀。
(2)取本品约0.2g，加水2ml溶解后，加5％α-萘酚乙醇溶液0.5ml摇匀，缓缓加入硫酸3ml，两液面交界处显紫红色环。
人参多糖的含量测定
对照品溶液的制备  精密称取60℃真空干燥至恒重的半乳糖醛酸约100mg，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备  精密称取本品50mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法精密量取对照品溶液、供试品溶液及水各1ml，分别精密加入0.25mol/L硼砂硫酸溶液6ml，置水浴中加热30分钟，放冷，再分别精密加入0.125％咔唑无水乙醇溶液0.4ml，置水浴中加热10分钟，放冷至室温，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录V B)实验，在530nm波长处测定吸收度，计算，即得。
根据上述工艺，制得人参多糖三批样品，其含量和得率见下表。由结果可以看出，通过本工艺制备的人参多糖得率为0.5～2％，其中人参多糖的含量不低于50％。
人参多糖含量和得率
批号 人参多糖含量(％) 得率(％)
1 86.64 1.02
2 89.88 1.11
3 92.69 1.29
平均 89.74 1.14
实施例2  以总皂苷为主要有效成分的人参提取物即人参总皂苷的制备
人参总皂苷制备工艺：
取人参药材，粉碎成细粒，乙醇回流提取二次，每次3小时，每次加醇10倍量，合并提取液，冷藏，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至稠膏，加水至适量(使每1ml相当于原药材1g)，搅匀，冷藏，滤过，滤液加于已处理好的大孔树脂柱上，先用2V～3V柱体积的水进行洗脱，弃去水洗液，再用3倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇并减压浓缩至相对密度1.30～1.35的稠膏，真空干燥，即得。
人参总皂苷的鉴别
取本品0.5g，加水0.5ml搅拌润湿，加水饱和正丁醇10ml，超声处理30分钟，吸取上清液加3倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Re、Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点。
人参总皂苷的含量测定
对照品溶液制备：取人参皂甙Rg1对照品约10mg，经60℃真空干燥2小时，精密称定，置100ml量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制得每1ml含Rg1对照品0.1mg的溶液，即得。
供试品溶液制备：精密称取本品50mg，置50ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法  精密量取供试品溶液和对照品溶液各1ml，分别置10ml具塞试管中，在水浴上蒸干，放冷，加入5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml，再加入高氯酸0.8ml，于60℃保温15分钟，冷却至室温，加冰醋酸5ml，摇匀；同时作空白对照。照分光光度法(中国药典2000年版一部附录V B)，在560nm波长处测定吸收度，计算，即得。
人参皂苷Re、人参皂苷Rg1含量测定
色谱条件与系统适用性实验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(22∶78)为流动相；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品、Re对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的混合溶液。
供试品溶液的制备  取本品0.2g，精密称定，精密加入水饱和正丁醇30ml，密塞，放置过夜，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液15ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。
测定法  分别精密吸取对照品和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。结果见下表。
根据上述工艺，制得人参总皂苷三批样品，其含量和得率见下表。由结果可以看出，通过本工艺制备得到的人参总皂苷得率为1～2％，人参总皂苷含量不低于50％，人参皂苷Re、人参皂苷Rg1含量不低于30％。
人参总皂苷含量测定结果及得率
批号 人参总皂苷含量(％) 人参皂苷Re、人参皂苷Rg1含量(％) 得率(％)
1 70.51 36.84 1.15
2 68.43 35.68 1.02
3 72.66 38.96 1.19
平均 70.53 37.16 1.12
实施例3  以多糖为主要有效成分的黄芪提取物即黄芪多糖的制备
黄芪多糖制备工艺：
取黄芪药材，加7倍量70％乙醇提取二次，每次2小时，提取液弃去，取药渣加水提取二次，提取液合并，浓缩至提取体积与生药材的比例为1.05∶1，加入乙醇沉淀使含醇量达到70％，过滤，得沉淀，沉淀用70％乙醇洗涤，再用适量水溶解，过滤，滤液过大孔树脂，用水洗脱，收集水洗液，将水洗液浓缩至药液体积与药材比例为1∶2.5，加入乙醇使含醇量达到70％，得沉淀，将沉淀用95％乙醇和丙酮洗涤脱水，减压干燥(60℃)，即得。
黄芪多糖的含量测定
标准溶液的制备  取经105℃干燥至恒重的葡萄糖100mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，备用。
标准曲线绘  制精密量取标准溶液0.1ml～0.6ml共6份，分别置25ml量瓶中，加水至2.0ml，并加苯酚溶液(取苯酚300g，铝片0.3g，碳酸氢钠0.15g，混合蒸馏，收集182℃馏分，配制成5％水溶液)1.0ml，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0ml，摇匀，放置5min，置水浴中加热15min，取出，迅速冷却至室温，另以2.0ml水同上平行操作作为空白对照，在490nm波长处测定吸收值，计算回归方程。
测定方法  取黄芪提取物0.5g置25ml量瓶中，照标准曲线绘制项下的方法自“加水至2.0ml”起，依法测定吸收值，依回归方程计算多糖的含量。
黄芪多糖的鉴别
(1)取本品约0.2g，加水5ml溶解后，加碱性酒石酸铜试液5滴，加热即产生红色沉淀，冷却，滤过，取滤液加盐酸1滴使成酸性，水浴加热10分钟，放冷，调节PH值至中性，加碱性酒石酸铜试液0.5ml，水浴加热即产生红色的氧化亚铜沉淀。
(2)取本品约0.2g，加水2ml溶解后，加5％α-萘酚乙醇溶液0.5ml摇匀，缓缓加入硫酸3ml，两液面交界处显紫红色环。
根据上述工艺，制得黄芪多糖三批样品，其含量和得率见下表。由结果可以看出，通过本工艺制备的黄芪多糖的含量不低于50％，得率为0.5～2％。
黄芪多糖的含量和得率
批号 黄芪多糖含量(％) 得率(％)
1 68.57 1.32
2 72.69 1.56
3 76.54 1.78
平均 72.60 1.55
实施例4以总皂苷为主要有效成分的黄芪提取物即黄芪总皂苷的制备
黄芪总皂苷制备工艺：
取黄芪，加水煎煮三次，每次1.5小时，第一次加水10倍量，二、三次均为8倍量，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20～1.25(60℃)，用乙醇沉淀处理2次，第一次溶液中含醇量为75％，第二次为85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原药材10g，加于已处理好的大孔吸附树脂柱上，先用2倍体积的水冲柱，再用4倍体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、真空干燥，即得。
黄芪总皂苷鉴别实验
鉴别实验一  取本品0.01g，加甲醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100～120目，5g，内径10～15mm)上，用40％甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗涤2次，每次20ml；弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；紫外光灯(365nm)下显相同的橙黄色荧光斑点。
鉴别实验二  取本品0.01g，加乙醇30ml，加热回流20分钟，滤过，滤液加0.3％氢氧化钠溶液15 ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调节pH值至5～6，用乙酸乙酯15ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，用铺有无水硫酸钠的滤纸滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材2g，同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1)作为展开剂，展开，取出，凉干，置氨蒸气中熏后置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。
黄芪总皂苷含量测定
总皂苷的含量测定
对照品溶液的制备  精密称取于105℃干燥至恒重的黄芪甲苷对照品约10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含黄芪甲苷0.1mg)。
供试品溶液的制备  取本品0.1g，精密称定，加水25ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次10ml，弃去水液，正丁醇至水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解，移至25ml量瓶中，并加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法精密量取对照品溶液、供试品溶液各1ml，置25ml钠氏比色管，置水浴中蒸干，放冷，加新鲜配制的5％香草醛-冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.6ml，摇匀，放置5分钟，置沸水浴中显色15分钟，取出，立即置冰浴中冷却至室温，加入8ml冰醋酸，摇匀，在538nm波长处测定吸光度，计算，即得。
黄芪甲苷的含量测定
色谱条件与系统适用性实验  以十八烷基键合硅胶为填充剂；以乙睛-水(32∶68)为流动相；蒸发光散射检测器。理论板数以黄芪甲苷峰计算不低于4000。
对照品溶液的制备  精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备  精密称取本品0.04g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法  分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl与供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点对数方程计算，即得。
根据上述工艺，制得黄芪总皂苷三批样品，其含量和得率见下表。由结果可以看出，通过本工艺制备的黄芪总皂苷得率为0.5～2％，总皂苷含量不低于50％，黄芪甲苷含量不低于2.0％。
黄芪总皂苷和黄芪甲苷的含量及得率
批号 黄芪总皂苷含量(％) 黄芪甲苷含量(％) 得率(％)
1 56.85 2.26 0.96
2 57.42 2.48 1.02
3 60.58 2.89 1.12
平均 58.28 2.54 1.03
实施例5  GRH组合物粉针剂的制备
1、处方：
GRH组合物I处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯80 20g；甘露醇400g；无菌注射用水3000ml，共制备1000支。
GRH组合物I处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；聚山梨酯80 20g；甘露醇400g；无菌注射用水3000ml，共制备1000支。
GRH组合物II处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8020g；甘露醇400g；无菌注射用水加至3000ml，共制备1000支。
GRH组合物II处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；聚山梨酯80 20g；甘露醇400g；无菌注射用水加至3000ml，共制备1000支。
GRH组合物III处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8020g；甘露醇400g；无菌注射用水加至3000ml，共制备1000支。
GRH组合物III处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；聚山梨酯80 20g；甘露醇400g；无菌注射用水加至3000ml，共制备1000支。
GRH组合物IV处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯80 20g；甘露醇400g；无菌注射用水加至3000ml，共制备1000支。
GRH组合物IV处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；聚山梨酯80 20g；甘露醇400g；无菌注射用水加至3000ml，共制备1000支。
2、具体步骤：
1)首先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)取配液量40％的无菌注射用水，将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)加入少量注射用水，根据处方需要加入氨基酸，加入处方量的聚山梨酯80加热搅拌溶解。合并上述溶液，补加无菌注射用水至3000ml。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.22μm的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞。将样品放入冻干机中冷冻干燥。预冻-45℃5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时。
9)冻干结束，压塞，轧盖。
10)成品全检，包装入库。
实施例6  GRH组合物水针剂的制备
1、处方：
GRH组合物I处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯80 50g；注射用水加至10000ml，共制备1000支。
GRH组合物I处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；聚山梨酯80 50g；注射用水加至10000ml，共制备1000支。
GRH组合物II处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8050g；注射用水加至10000ml，共制备1000支。
GRH组合物II处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；聚山梨酯80 50g；注射用水加至10000 ml，共制备1000支。
GRH组合物III处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8050g；注射用水加至10000ml，共制备1000支。
GRH组合物III处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；聚山梨酯80 50g；注射用水加至10000ml，共制备1000支。
GRH组合物IV处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8050g；注射用水加至10000ml，共制备1000支。
GRH组合物IV处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；聚山梨酯80 50g；注射用水加至10000 ml，共制备1000支。
2、具体步骤：
1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量40％的注射用水，将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)加入少量注射用水，根据处方需要加入氨基酸，加入处方量的聚山梨酯80加热搅拌溶解，合并上述溶液，补加注射用水至10000ml。
3)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
4)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
5)经0.45μm的微孔滤膜精滤。
6)检查溶液的澄明度，半成品化验。
7)将溶液熔封于玻璃安瓿中。
8)100℃流通蒸汽灭菌30分钟。
9)趁热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏。
10)灯检，成品全检，包装入库。
实施例7  GRH组合物氯化钠输液的制备
1、处方：
GRH组合物I处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯80 20g；氯化钠900g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物I处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；聚山梨酯80 20g；氯化钠900g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物II处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8020g；氯化钠900g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物II处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；聚山梨酯80 20g；氯化钠900g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物III处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8020g；氯化钠900g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物III处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；聚山梨酯80 20g；氯化钠900g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物IV处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯80 20g；氯化钠900g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物IV处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；聚山梨酯80 20g；氯化钠900g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
2、具体步骤：
1)前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量40％的注射用水，将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)加入少量注射用水，根据处方需要加入氨基酸，加入处方量的聚山梨酯80加热搅拌溶解。将氯化钠用适量注射用水溶解完全，合并上述溶液，补加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
4)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
5)经0.45μm的微孔滤膜精滤。
6)检查溶液的澄明度，半成品化验。
7)灌装于100ml的输液瓶中。
8)115℃热压灭菌30分钟。
9)灯检，成品全检，包装入库。
实施例8  GRH组合物葡萄糖输液的制备
1、处方：
GRH组合物I处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯80 20g；葡萄糖5000g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物I处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；聚山梨酯80 20g；葡萄糖5000g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物II处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8020g；葡萄糖5000g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物II处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；聚山梨酯80 20g；葡萄糖5000g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物III处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯8020g；葡萄糖5000g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物III处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；聚山梨酯80 20g；葡萄糖5000g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物IV处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；甘氨酸400g；盐酸半胱氨酸20g；聚山梨酯80 20g；葡萄糖5000g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
GRH组合物IV处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；聚山梨酯80 20g；葡萄糖5000g；注射用水加至100000ml，共制备1000瓶。
2、具体步骤：
1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量40％的注射用水，将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)加入少量注射用水，根据处方需要加入氨基酸，加入处方量的聚山梨酯80加热搅拌溶解。合并上述溶液，补加注射用水至全量。将葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全，加热煮沸15分钟。
3)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
4)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
5)经0.45μm的微孔滤膜精滤。
6)检查溶液的澄明度，半成品化验。
7)灌装于100ml的输液瓶中。
8)115℃热压灭菌30分钟。
9)灯检，成品全检，包装入库。
实施例9  GRH组合物片剂的制备
1、处方：
GRH组合物I处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；淀粉40g；微晶纤维素40g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g；羧甲淀粉钠10.0g，共制备1000片。
GRH组合物I处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；淀粉40g；微晶纤维素40g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g；羧甲淀粉钠10.0g，共制备1000片。
GRH组合物II处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；淀粉40g；微晶纤维素40g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g；羧甲淀粉钠10.0g，共制备1000片。
GRH组合物II处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；淀粉40g；微晶纤维素40g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g；羧甲淀粉钠10.0g，共制备1000片。
GRH组合物III处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；淀粉40g；微晶纤维素40g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g；羧甲淀粉钠10.0g，共制备1000片。
GRH组合物III处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；淀粉40g；微晶纤维素40g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g；羧甲淀粉钠10.0g，共制备1000片。
GRH组合物IV处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；淀粉40g；微晶纤维素40g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g；羧甲淀粉钠10.0g，共制备1000片。
GRH组合物IV处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；淀粉40g；微晶纤维素40g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g；羧甲淀粉钠10.0g，共制备1000片。
2、具体步骤：
1)将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)、淀粉、微晶纤维素混合均匀，根据处方需要加入氨基酸，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的片重压片。
10)成品全检，包装入库。
实施10  GRH组合物胶囊剂的制备
1、处方：
GRH组合物I处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；淀粉20.0g；微晶纤维素60.0g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g，共制备1000粒。
GRH组合物I处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；淀粉20.0g；微晶纤维素60.0g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g，共制备1000粒。
GRH组合物II处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；淀粉20.0g；微晶纤维素60.0g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g，共制备1000粒。
GRH组合物II处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；淀粉20.0g；微晶纤维素60.0g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g，共制备1000粒。
GRH组合物III处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；淀粉20.0g；微晶纤维素60.0g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g，共制备1000粒。
GRH组合物III处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；淀粉20.0g；微晶纤维素60.0g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g，共制备1000粒。
GRH组合物IV处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；淀粉20.0g；微晶纤维素60.0g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g，共制备1000粒。
GRH组合物IV处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；淀粉20.0g；微晶纤维素60.0g；2％HPMC水溶液适量；硬脂酸镁5.0g，共制备1000粒。
2、具体步骤：
1)将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)、淀粉、微晶纤维素混合均匀，根据处方需要加入氨基酸，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的装量装入胶囊。
10)成品全检，包装入库。
实施例11  GRH组合物颗粒剂的制备
1、处方：
GRH组合物I处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；糖粉2000.0g；2％HPMC50％乙醇溶液适量，共制备1000包。
GRH组合物I处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪多糖300g；糖粉2000.0g；2％HPMC50％乙醇溶液适量，共制备1000包。
GRH组合物II处方1
甘草酸单铵40g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；糖粉2000.0g；2％HPMC50％乙醇溶液适量，共制备1000包。
GRH组合物II处方2
甘草酸二铵150g；人参多糖10g；黄芪总皂苷200g；糖粉2000.0g；2％HPMC50％乙醇溶液适量，共制备1000包。
GRH组合物III处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；糖粉2000.0g；2％HPMC50％乙醇溶液适量，共制备1000包。
GRH组合物III处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪多糖300g；糖粉2000.0g；2％HPMC50％乙醇溶液适量，共制备1000包。
GRH组合物IV处方1
甘草酸单铵40g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；蛋氨酸40g；甘氨酸40g；糖粉2000.0g；2％HPMC50％乙醇溶液适量，共制备1000包。
GRH组合物IV处方2
甘草酸二铵150g；人参总皂苷40g；黄芪总皂苷200g；糖粉2000.0g；2％HPMC50％乙醇溶液适量，共制备1000包。
2、具体步骤：
1)将蔗糖粉碎过100目筛备用。将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将甘草酸单铵(或甘草酸二铵)、人参多糖(或人参总皂苷)、黄芪多糖(或黄芪总皂苷)与糖粉以等量递加的方法混合均匀，根据处方需要加入氨基酸，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
4)过20目筛制颗粒。
5)颗粒在60℃的条件下烘干。
6)干颗粒过18目筛整粒。
7)取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量。
8)包装，成品全检，包装入库。

Claims (10)

1.一种药物组合物，其特征在于该组合物主要由下列重量份的原料药制成：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参250～16000份、黄芪5000～80000份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于各原料药的重量份数为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参500～8000份、黄芪10000～40000份。
3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于各原料药的重量份数为：甘草酸或其药学上可接受的盐20～200份、人参1000～4000份、黄芪20000份。
4.如权利要求1～3所述的任一药物组合物的制备方法，其特征在于，所述的人参、黄芪可以用适宜的溶剂和方法单提或混提制备得到提取物，总提取物再与甘草酸或其药学上可接受的盐和药学上可接受的辅料混合制成任一制剂。
5.如权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，总提取物中所含的主要有效成分为人参多糖或人参总皂苷、黄芪多糖或黄芪总皂苷，总提取物中主要有效成分的总含量不低于30％。
6.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物还可以由下列原料药制成：甘草酸或其药学上可接受的盐、人参多糖或人参总皂苷和黄芪多糖或黄芪总皂苷，其重量配比为：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参多糖2～40份、黄芪多糖70～1200份：或者为：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参多糖2～40份、黄芪总皂苷50～800份：或者为：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参总皂苷10～160份、黄芪多糖70～1200份；或者为：甘草酸或其药学上可接受的盐4～800份、人参总皂苷10～160份、黄芪总皂苷50～800份。
7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，其原料药的重量配比为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参多糖5～20份、黄芪多糖150～600份；或者为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参多糖5～20份、黄芪总皂苷100～400份；或者为：甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参总皂苷20～80份、黄芪多糖150～600份；甘草酸或其药学上可接受的盐10～400份、人参总皂苷20～80份、黄芪总皂苷100～400份。
8.如权利要求6、7所述的任一药物组合物，其特征在于，所述的人参多糖含量不低于40％，人参总皂苷含量不低于35％，其中的人参皂苷Re、人参皂苷Rg1含量和不低于20％，黄芪多糖含量不低于35％，黄芪总皂苷含量不低于30％，其中的黄芪甲苷含量不低于1％。
9.如权利要求1、2、3、6、7所述的任一药物组合物，其特征在于，所述的甘草酸药学上可接受的盐为甘草酸单铵或甘草酸二铵。
10.如权利要求1、2、3、6、7所述的任一药物组合物，其特征在于，该药物组合物可以与药学上可接受的辅料混合制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。
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