CN1857219A - 一种含抗结核病药物的缓释制剂 - Google Patents

Abstract

一种含抗结核病药物的缓释制剂由选自乙硫异烟胺、丙硫异烟胺和/或卷曲霉素的抗结核药和缓释辅料组成，在结核灶局部放置或注射该剂能将药物缓慢释放至30－40天，在有效获得和维持局部灶有效药物浓度的同时明显降低其全身毒性。缓释制剂为缓释注射剂由缓释微球和溶媒组成，缓释微球含缓释辅料和抗结核药，溶媒为特殊溶媒，含羧甲基纤维素钠等助悬剂，黏度为100cp－3000cp(20℃－30℃时)；缓释辅料选自EVAc、聚苯丙生、PLA、PLGA、癸二酸共聚物等；缓释制剂还可制成缓释植入剂，由缓释微球或经其他方法制备。该剂对耐多药结核菌、结核球及淋巴、关节、肾、皮肤、肠、乳腺、生殖器等处结核、结核性骨髓炎、瘘道、空洞性肺结核等顽固性结核病变具有显著独特的治疗效果。

Description

一种含抗结核病药物的缓释制剂

(一)技术领域

本发明涉及一种抗结核病药物的缓释制剂，属于药物技术领域。具体而言，本发明提供一种含抗结核药物的缓释制剂，主要为缓释注射剂和缓释植入剂。该缓释剂局部应用为主，可于结核病灶局部获得并维持有效药物浓度。

(二)背景技术

以肺结核为代表的结核病本来就是一种严重影响人民健康的疾病，在全世界广泛流行，夺去了数亿人的生命，人们称之为白色瘟疫，曾有“十痨九死”之说。随着链霉素等抗痨药的问世，结核病成了一种可治疗的疾病。然而随着人们对其严重性的忽视、相关防治方面投入的明显不足、治疗不规范，由此引起的结核菌耐药的产生已经成为成功治疗该病的最棘手的问题。

由于它的传染性非常强，其发病率近年每年全球以1％的速度在增长。在世界卫生组织确定的全球需要重点控制的三种疾病中，结核病仅次于艾滋病，居疟疾之前。全球每秒钟即有一个人受结核菌感染，每分钟会有3到4个人因结核病死亡，目前全球平均每年仍有约300万人死于结核病。中国的结核病目前流行非常严重，现已成为世界上22个结核病高负担国家之一；目前中国约有六百万结核病人，占全球患病人数的三分之一，居世界第二位仅次于印度；在中国耐药病人占了全球的四分之一。全国每年至少有150万例新病人发生，其中传染性病人超过65万例，每年因结核病死亡的人数高达二十五万，且多为中青年。其作为单一传染病已成为头号杀手。结核病需要六个月以上的连续用药才能取得较满意的预后。由于治疗时间较长，不少病人可能就忘了及时定量服药，因而常造成耐药性的产生。而耐药性结核病人的治疗一方面是时间的拖长，另一方面就是多种药物联合化疗应用费用昂贵。如在中国需两三万元以上。因此，研究开发新的有效的防治结核病的制剂或方法已经成为急切解决的世界性课题。

目前，有不少新的抗结核药物已经显示出较好的疗效，然而对耐多药结核病(MDR-TB)效果不够理想。因为对很多慢性病灶，特别是局部病灶而言，常规疗法给药很难获得有效杀菌浓度。加大剂量或长期服用药物又会有很多副作用。

(三)发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种含抗结核病药物的缓释制剂，具体而言，是一种缓释注射剂和缓释植入剂。

常用的抗结核病药物国外主要为口服制剂，不能于病灶部位获得有效药物浓度。即使一般的注射剂也不够理想。由于不当用药，如：(1)药量不足；(2)单一用药；(3)不规律服药等因素耐药的产生。不能达到有效的血液浓度，不足以彻底杀灭结核菌，从而使耐药菌存活下来或促使结核菌变异。单靠能加剂量又会受到全身毒性反应的限制。耐多药结核病(MDR-TB)的产生极大地限制了药物的应用。

耐多药结核病(MDR-TB)是指结核菌至少同时耐卷曲霉素(INH)和利福平(RFP)者，MDR-TB的治疗已成为结核病控制工作中急待解决的问题。迄今，抗结核药物对耐多药结核菌依然是束手无策。

本发明发现，将抗结核病药物制成缓释剂(主要为缓释注射剂和缓释植入剂)局部放置或注射不仅能够极大地提高局部的药物浓度、降低药物在循环系统中的浓度、降低药物对正常组织的毒性，还能够极大方便药物应用、减少疗程、缩短治疗时间、减少药物的并发症、降低病人的费用、减少药物耐受。对耐多药结核病及结核局部病灶具有显著独特的治疗效果。

以结核空洞为例，由于结核空洞壁的屏障作用，加之洞壁周围血管稀少、硬化、甚至闭合，经常规途径(口服或肌肉注射或点滴)应用的抗结核药物很难渗透至空洞内。空洞内的药物浓度很低，起不到杀菌或抑菌作用，反而引起耐药结核菌产生。在超声波和/或CT等影像学技术帮助下经皮肺穿刺放置或注射缓释药物不仅可将药物较准确地注入空洞内，还可通过缓释机制将药物局限于洞壁内数十天，从而直接有效杀灭洞壁内的结核菌；此外，由于释放出的药物对洞壁的侵蚀作用，可促使干酪性病灶软化、坏死物脱落排出；局部操作时也可借助于穿刺针或相应器具(如但不限于支气管镜、膀胱镜、腹腔镜、关节腔镜等)将局部灶清除。不仅如此，局部反复多次穿刺还可削弱空洞壁的屏障作用。如此不仅有利于血液中的药物进入病灶，还有利于肉芽组织的增生以及空洞的净化。以上意外发现构成本发明的主要内容。

本发明药物缓释剂的一种形式是缓释注射剂，由缓释微球和溶媒组成。具体而言，该缓释注射剂由以下成分组成：

(a)缓释微粒，由重量百分比如下的成分组成：

抗结核病药物     1-70％

缓释辅料         30-99％

助悬剂           0.0-30％

以上为重量百分比

和

(b)溶媒，为普通溶媒或含助悬剂的特殊溶媒。

其中，

缓释辅料选自聚苯丙生、双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)、木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、透明质酸、胶原蛋白、明胶和白蛋胶之一或其组合；助悬剂选自羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40和土温80之一或其组合。

抗结核病药物为下列中的一种或数种：

(1)硫胺类，如，但不限于，乙硫异烟胺、丙硫异烟胺；

(2)多肽类，如，但不限于，卷曲霉素、FAS20013；

(3)二芳基喹啉的化合物，如，但不限于，R207910；

(4)硝基咪唑并吡喃衍生物，如，但不限于，化合物PA-824(I)和PA-824。

上述抗结核病药物在缓释剂中所占的比例因具体情况而定，可为1％-70％，以2％-50％为佳，5％-40％为最佳。

本发明抗结核缓释微球中的有效成分及缓释辅料的重量百分比优选如下：

抗结核病药物           2-50％

缓释辅料               50-98％

助悬剂                 0.0-30％

缓释辅料选自聚苯丙生、双脂肪酸与癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚体-癸二酸)、聚(富马酸-癸二酸)、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物、透明质酸、胶原蛋白或明胶。

本发明缓释微球中抗结核有效成分及其重量百分比优选为：

(a)2-40％的乙硫异烟胺、丙硫异烟胺或卷曲霉素；

(b)2-40％的乙硫异烟胺与2-40％的丙硫异烟胺或卷曲霉素的组合；或

(c)2-40％的丙硫异烟胺与2-40％的卷曲霉素的组合。

本发明缓释微球中缓释辅料及其重量百分比最优选如下：

(1)55-90％的PLA；

(2)50-90％的PLGA；

(3)50-85％的聚苯丙生；

(4)55-90％的双脂肪酸与癸二酸共聚物；或

(5)55-90％的EVAc。

以上缓释微球与含羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40或土温80的助悬剂的溶媒一起制成缓释注射剂。其中羧甲基纤维素钠在溶媒中的浓度可为0.1-5％，但以0.5-3％为优选，以1-2％为最优选。

聚乳酸的分子量峰值可为，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000为优选，以30,000-50,000为最优选；聚乙醇酸的分子量可为，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000为优选，以30,000-50,000为最优选；以上聚羟基酸可单选或多选。当单选时，以聚乳酸(PLA)或羟基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)为优选，共聚物的分子量可为，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000为优选，以30,000-50,000为最优选；当多选时，以高分子多聚物或不同高分子多聚物组成的复合多聚物或共聚物为优选，以含不同分子量聚乳酸或癸二酸的复合多聚物或共聚物为最优选，如，但不限于，分子量为1000到30000的聚乳酸与分子量为20000到50000的聚乳酸混合、分子量为10000到30000的聚乳酸与分子量为30000到80000的PLGA混合、分子量为20000到30000的聚乳酸与癸二酸混合、分子量为30000到80000的PLGA与癸二酸混合。

在各种高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物为首选，混合物和共聚物可选自，但不限于，PLA、PLGA、乙醇酸和羟基羧酸的混合物、葵二酸与芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羟基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羟基羧酸共聚时的含量分别为重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是聚苯丙生[聚(1，3-二(对羧基苯氧基)丙烷-癸二酸)(p(CPP-SA))、双脂肪酸-癸二酸共聚物(PFAD-SA)]、聚(芥酸二聚体-癸二酸)[P(EAD-SA)]和聚(富马酸-癸二酸)[P(FA-SA)]等。对羧苯氧基丙烷(p-CPP)与癸二酸共聚时的含量分别为重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。

除上述辅料外，还可选用其他物质见美国专利(专利号4757128；4857311；4888176；4789724)及《药用辅料大全》(第123页，四川科学技术出版社1993年出版，罗明生和高天惠主编)中已有详细描述。另外，中国专利(申请号96115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美国发明专利(专利号5,651,986)也列举了某些药用辅料，包括充填剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂、制(或致)孔剂、赋型剂或阻滞剂等。

为调节药物释放速度或改变本发明的其它特性，可以改变聚合物的单体成分或分子量、添加或调节药用辅料的组成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各种糖或盐等。其中糖可为，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)软骨素及甲壳素等，其中盐可为，但不限于，钾盐和钠盐等。

缓释注射剂中，药物缓释系统可制成微球、亚微球、微乳、纳米球、颗粒或球形小丸，然后与注射溶媒混合后制成注射剂使用。在各种缓释注射剂中以混悬型缓释注射剂为优选，混悬型缓释注射剂是将含抗结核成分的药物缓释系统悬浮于注射液中所得的制剂，所用的辅料为上述缓释辅料中的一种或其组合，所用溶媒为普通溶媒或含助悬剂的特殊溶媒。普通溶媒为，但不限于，蒸馏水、注射用水、生理冲液、无水乙醇或各种盐配制的缓冲液。助悬剂的目的在于有效悬浮含药微球，从而利于注射之用。

助悬剂选自羧甲基纤维素钠、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40和土温80之一或其组合。

助悬剂在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可为0.1-30％因具体情况而定。优选助悬剂的组成为：

A)0.5-5％羧甲基纤维素钠+0.1-0.5％土温80；或

B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土温80；或。

C)0.5-5％羧甲基纤维素钠+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土温80。

缓释注射剂的制备方法是任意的，可用若干种方法制备：如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、喷雾干燥法制备微球、溶解法结合冷冻(干燥)粉碎法制成微粉、脂质体包药法及乳化法等。其中以溶解法(即溶剂挥发法)、干燥法、喷雾干燥法和乳化法为优选。微球则可用于制备上述各种缓释注射剂，其方法是任意的。所用微球的粒径范围可在5-400um之间，以10-300um之间为优选，以20-200um之间为最优选。

微球还可用于制备其他缓释注射剂，如凝胶注射剂、凝胶缓释注射剂、嵌段共聚物胶束注射剂。其中，嵌段共聚物胶束由疏水-亲水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形内核-外壳结构，疏水嵌段形成内核，亲水嵌段形成外壳。载药胶束注射进入体内达到控制药物释放或靶向治疗的目的。所用药物载体为上述任意一种或其组合。其中优选分子量为1000-15000的聚乙二醇(PEG)作为胶束共聚物的亲水嵌段，优选生物降解聚合物(如PLA、聚丙交酯、聚己内酯及其共聚物(分子量1500-25000))作为胶束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物胶束的粒径范围可在10-300um之间，以20-200um之间的为优选。凝胶注射剂系将生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己内酯共聚物)溶于某些两亲性溶媒，再加入药物与之混溶(或混悬)后形成流动性较好的凝胶，可经局部注射。一旦注入，两亲性溶媒很快扩散至体液，而体液中的水分则渗入凝胶，使聚合物固化，缓慢释放药物。

本发明发现影响药物和/或缓释微球悬浮和/或注射的关键因素是溶媒的黏度，黏度越大，悬浮效果越好，可注射性越强。这种意外发现构成了本发明的主要指数特征之一。溶媒的黏度取决于助悬剂的黏度，助悬剂的黏度为100cp-3000cp(20℃-30℃时)，优选1000cp-3000cp(20℃-30℃时)，最优选1500cp-3000cp(20℃-30℃时)。按照此条件所制得的溶媒的黏度为10cp-650cp(20℃-30℃时)，优选20cp-650cp(20℃-30℃时)，最优选60cp-650cp(20℃-30℃时)。

注射剂的制备有多种方法，一种是将助悬剂为“0”的缓释微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相应的缓释微粒注射剂；另一种是将助悬剂不为“0”的缓释微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相应的缓释微粒注射剂；再一种是将缓释微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助悬剂混匀，得到相应的缓释微粒注射剂。除外，还可先将缓释微粒(A)混于特殊溶媒中制得相应的混悬液，然后用真空干燥等办法去除混悬液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混悬，得到相应的缓释微粒注射剂。以上方法只是用于说明而非限制本发明。值得注意的是，悬浮药物或缓释微球(或微囊)在注射剂中的浓度因具体需要而定，可为，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml为优选，以50-200mg/ml最优选。注射剂的黏度为50cp-1000cp(20℃-30℃时)，优选100cp-1000cp(20℃-30℃时)，最优选200cp-650cp(20℃-30℃时)。此黏度适用于18-22号注射针头和特制的内径更大的(至3毫米)注射针头。

缓释微球还可用于制备缓释植入剂，所用的药用辅料可为上述药用辅料中的任何一种或多种物质，但以水溶性高分子聚合物为主选，在各种高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物为首选，混合物和共聚物可选自，但不限于，PLA、PLGA、PLA与PLGA的混合物、葵二酸与芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。聚乳酸(PLA)与聚乙醇酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚时的含量分别为重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是对羧苯基丙烷(p-CPP)，对羧苯基丙烷(p-CPP)与葵二酸共聚时的含量分别为重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。

因此，本发明缓释剂的又一种形式是缓释剂为缓释植入剂。抗结核植入剂的有效成分可均匀地包装于整个药用辅料中，也可包装于载体支持物中心或其表面；可通过直接扩散和/或经多聚物降解的方式将有效成分释放。

缓释植入剂的特点在于所用的缓释辅料除高分子聚合物外，还含有上述任意一种或多种其它辅料。添加的药用辅料统称为添加剂。添加剂可根据其功能分为充填剂、致孔剂、赋型剂、分散剂、等渗剂、保存剂、阻滞剂、增溶剂、吸收促进剂、成膜剂、胶凝剂等。

缓释植入剂的主要成份可制成多种剂型。如，但不限于，胶囊、缓释剂、植入剂、缓释剂植入剂等；呈多种形状，如，但不限于，颗粒剂、丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、球形、块状、针状、棒状、柱状及膜状。在各种剂型中，以体内缓慢释放植入剂为优选。体积大小取决于病灶的部位、大小等因素。可为0.1-5mm(粗)×1-10mm(长)的棒状，也可为片状等其它形状。

缓释植入剂的最佳剂型为生物相容性、可降解吸收的缓释剂植入，可因不同临床需要而制成各种形状及各种剂型。其主要成份的包装方法和步骤在美国专利中(US5651986)已有详细描述，包括若干种制备缓释制剂的方法：如，但不限于，(i)把载体支持物粉末与药物混合然后压制成植入剂，即所谓的混合法；(ii)把载体支持物熔化，与待包装的药物相混合，然后固体冷却，即所谓的熔融法；(iii)把载体支持物溶解于溶剂中，把待包装的药物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸发溶剂，干燥，即所谓的溶解法；(iv)喷雾干燥法；及(v)冷冻干燥法等。

本发明缓释植入剂的有效成分及重量百分比优选如下：

抗结核病药物       2-50％

缓释辅料           50-98％

助悬剂             0.0-30％

本发明缓释植入剂中抗结核有效成分及其重量百分比优选为：

(a)2-40％的乙硫异烟胺、丙硫异烟胺或卷曲霉素；

(b)2-40％的乙硫异烟胺与2-40％的丙硫异烟胺或卷曲霉素的组合；或

(c)2-40％的丙硫异烟胺与2-40％的卷曲霉素的组合。

本发明缓释植入剂中缓释辅料及其重量百分比最优选如下：

(1)55-90％的PLA；

(2)50-90％的PLGA；

(3)50-85％的聚苯丙生；

(4)55-90％的双脂肪酸与癸二酸共聚物；或

(5)55-90％的EVAc。

本发明抗结核缓释微球中的缓释辅料的重量百分比优选如下：

除此之外，所选的辅料还可为上述任意一种以上的组合。

本发明可以用于制备治疗人及动物的各种结核的药物制剂，主要为缓释注射剂或缓释植入剂。所制备的药物制剂虽然可以用于全身结核如肺结核的治疗，但以治疗局部病灶为优选。常见的局部病灶或称之为肺外结核主要包括：结核球、淋巴结核、骨关节结核、滑膜结核、结核性骨髓炎、肾结核、皮肤结核、肠结核、乳腺结核、生殖器结核(输卵管、子宫内膜、睾丸、附睾)、肛门结核、甲状腺结核、心包结核、胸壁结核、结核瘘道、胸膜结核等。除此之外，局部病灶还包括慢性纤维空洞性肺结核及因结核引起的或合并的慢性病变，如：但不限于，重症褥疮、顽固性皮肤溃疡、糖尿病足、股骨头坏死和老年前列腺类疾病等。

给药途径取决于多种因素，为于结核所在部位获得有效浓度，药物可经多种途径给予，如皮下、腔内(如腹腔、胸腔及椎管内)、病灶周或病灶内注射或放置、淋巴结内及骨髓内注射，但缓释植入剂以病灶局部注射(缓释注射剂)或放置(缓释植入剂)为优选。可于手术时或手术前后注射或放置；可经纤支镜等器械介入治疗，如治疗肺结核空洞；也可经皮穿刺病灶内给药介入治疗；还可关节腔内注射或放置；可与全身化疗同时或前后分开应用，但局部应用前后最好有一周到数月的全身抗结核治疗。

药物剂量因药物组成不同而异，但一药物总量可为常规途径日给药量的10％到200％不等。如吡嗪酰胺的全身日剂量2～60毫克/公斤，乙胺丁醇为1.5～40毫克/公斤；当两种药物联合应用时，每一种药物的剂量不要超过其常规途径日给药量的100％。吡嗪酰胺的全身日剂量不超过30毫克/公斤，乙胺丁醇不超过20毫克/公斤。若病灶没有完全清除或改善，可考虑20到40天后再次放置或注射缓释剂。为防止病灶内结核菌播散，每次局部给药前后应配以全身给药。

本发明所制的缓释注射剂或缓释植入剂中还可加入其它药用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼药、抗凝药、止血药等。

通过如下试验和实施例对本发明的技术方法作进一步的描述：

试验1、不同方式应用抗结核病药物(卷曲霉素)后的局部药物浓度比较

以大白鼠为试验对象，将其分组后分别经下列不同方式接受等量卷曲霉素(10毫克)：组1，腹腔注射普通卷曲霉素注射剂；组2，季肋部皮下注射普通卷曲霉素注射剂；组3，季肋部皮下注射卷曲霉素缓释注射剂；组4，季肋部皮下放置卷曲霉素缓释植入剂。一周、两周、三周后分别测定局部给药处药物浓度。结果表明，经不同方式应用后的局部药物浓度差异显著，局部给药能够明显提高，并有效维持给药部位的有效药物浓度。其中以局部放置缓释植入剂和注射缓释注射剂的效果最好。然而，局部注射缓释注射剂操作最方便、容易。这一发现构成本发明的重要特征。以下的相关试验进一步证实了这一点。

试验2、不同方式应用抗结核病药物后的体内抑菌作用比较

以大白鼠为试验对象，将2×10⁵个结核杆菌注射于其股骨骨髓腔内，一周后按照试验1的分组(10只/组)给于等量卷曲霉素治疗。随后检查局部红肿等炎症变化，三十天后处死动物并取局部骨髓检菌。结果表明，注射卷曲霉素缓释注射剂和放置卷曲霉素缓释植入剂组效果最好，局部红肿在治疗后第一周开始明显缩小，所有动物无死亡。在腹腔注射普通卷曲霉素注射剂组，70％动物20天内死亡；在局部注射普通卷曲霉素注射剂组，20％动物20天内死亡，但70％动物30天内死亡。比较抑菌效果表明，经不同方式应用后的作用差异显著，局部给药能够明显提高并有效维持所在部位的有效药物浓度，其中以局部放置缓释植入剂和注射缓释注射剂的效果最好。不过，注射缓释注射剂操作最方便、容易。不仅疗效好，毒副作用也小。

试验3、不同途径应用卷曲霉素的体内抑菌作用比较

以大白鼠为试验对象，重复试验2，结果见表1

表1

试验组(n)	所受治疗	动物死亡率(％)	P值
				1(10)	对照	0
2(10)	腹腔注射普通卷曲霉素注射剂	100
				3(10)	局部注射普通卷曲霉素注射剂	70	＜0.05
4(10)	局部注射卷曲霉素缓释注射剂	30	＜0.01
				5(10)	局部放置卷曲霉素缓释植入剂	10	＜0.01

以上结果表明，抗结核病药物卷曲霉素经不同途径给药的抑菌作用不同，以局部应用的效果为好(P＜0.05)，其中局部注射卷曲霉素缓释注射剂和局部放置卷曲霉素缓释植入剂的效果更好。

试验4、不同途径应用卷曲霉素的体内抑菌作用比较

以大白鼠为试验对象，重复试验3，但观察动物至给药后60天，结果见表2

表2

试验组(n)	所受治疗	动物死亡率(％)	P值
				1(10)	对照	0
2(10)	腹腔注射普通卷曲霉素注射剂	100
				3(10)	局部注射普通卷曲霉素注射剂	90
4(10)	局部注射卷曲霉素缓释注射剂	30
				5(10)	局部放置卷曲霉素缓释植入剂	10	＜0.01

以上结果表明，抗结核病药物卷曲霉素经不同途径给药的抑菌作用不同，以局部应用的效果为好，其中局部注射卷曲霉素缓释注射剂和局部放置卷曲霉素缓释植入剂的效果更好。但局部放置卷曲霉素缓释植入剂的效果比局部注射卷曲霉素缓释注射剂的效果为好(P＜0.01)。

试验5、不同途径应用吡嗪酰胺的体内抑菌作用比较

以大白鼠为试验对象，重复试验3，但观察动物至给药后60天，结果见表3

表3

试验组(n)	所受治疗	动物死亡率(％)	P值
				1(10)	对照	0
2(10)	腹腔注射普通乙硫异烟胺注射剂	100
				3(10)	局部注射普通乙硫异烟胺注射剂	80
4(10)	局部注射乙硫异烟胺缓释注射剂	40
				5(10)	局部放置乙硫异烟胺缓释植入剂	10	＜0.01

以上结果表明，抗结核病药物乙硫异烟胺经不同途径给药的抑菌作用不同，以局部应用的效果为好，其中局部注射乙硫异烟胺缓释注射剂和局部放置乙硫异烟胺缓释植入剂的效果更好。局部放置缓释植入剂的效果比局部注射乙硫异烟胺缓释注射剂的效果为好(P＜0.01)，但缓释注射剂操作更为方便。

同样明显的治疗效果还见于局部放置及局部注射的乙硫异烟胺和丙硫异烟胺。

试验6、不同药物联合的增效作用

取2×10⁵个结核杆菌培养24小时后用同浓度(5ug/ml)不同药物处理24小时，检测细胞生长抑制率(％)，结果见表4

表4  不同药物联合的增效作用(抑制率％)

卷曲霉素	乙硫异烟胺	丙硫异烟胺	卷曲霉素+乙硫异烟胺	卷曲霉素+丙硫异烟胺	乙硫异烟胺+丙硫异烟胺
						54	50	60	88	86	90

实验4结果表明，所用抗结核病药单独应用均有明显的抑菌作用，但联合应用的效果为好(P＜0.01)。

总之，局部放置及局部注射卷曲霉素、吡嗪酰胺、乙胺丁醇和/或对氨水杨酸钠缓释剂对结核菌生长均有明显的抑制作用，所表现出的显著的治疗作用与其局部获得的有效药物浓度有关。因此，本发明所述的缓释剂的有效成分为卷曲霉素、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、对氨水杨酸钠中的一种或其组合。优选的组合为卷曲霉素、吡嗪酰胺和/或乙胺丁醇

含有以上有效成分的药物可制成缓释微球，进而制成缓释注射剂和植入剂，其中以与含助悬剂的特殊溶媒组合形成的混悬注射剂为优选。

缓释注射剂或缓释植入剂还可通过以下实施方式得以进一步说明。上述实施例及以下实施例只是对本发明作进一步说明，并非对其内容和使用作任何限制。

(四)具体实施方式

实施例1.

将90、90和80mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)为20∶80)共聚物分别放入(甲)、(乙)及(丙)三个容器中，然后每个中加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，分别加入10m卷曲霉素、10mg乙硫异烟胺、10mg卷曲霉素和10mg乙硫异烟胺，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含10％卷曲霉素、10％乙硫异烟胺及10％卷曲霉素和10％乙硫异烟胺的注射用微球。然后将微球悬浮于含15％甘露醇的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂。注射剂的黏度为300cp-600cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为15-20天，在小鼠皮下的释药时间为30-40天左右。

实施例2.

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例1相同，但所不同的是所含抗结核有效成分及其重量百分比为：

(a)2-40％的乙硫异烟胺、丙硫异烟胺或卷曲霉素；

(b)2-40％的乙硫异烟胺与2-40％的丙硫异烟胺或卷曲霉素的组合；或

(c)2-40％的丙硫异烟胺与2-40％的卷曲霉素的组合。

实施例3.

将70mg分子量峰值为65000的聚乳酸(PLGA，75∶25)分别放入(甲)、(乙)及(丙)三个容器中，然后每个中加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，分别向三个容器中加入30mg卷曲霉素、30mg丙硫异烟胺、15mg卷曲霉素和15mg丙硫异烟胺，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含30％卷曲霉素、30％丙硫异烟胺、15％卷曲霉素和15％丙硫异烟胺的注射用微球。将干燥后的微球悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂。注射剂的黏度为300cp-600cp(20℃-30℃时)。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。

实施例4

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例3相同，但所不同的是所含抗结核有效成分及其重量百分比为：

(a)2-40％的乙硫异烟胺、丙硫异烟胺或卷曲霉素；

(b)2-40％的乙硫异烟胺与2-40％的丙硫异烟胺或卷曲霉素的组合；或

(c)2-40％的丙硫异烟胺与2-40％的卷曲霉素的组合。

实施例5.

将70mg乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混匀后，加入20毫克卷曲霉素和10毫克乙硫异烟胺，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含20％卷曲霉素和10％乙硫异烟胺的注射用微球。然后将微球悬浮于含5-15％山梨醇的注射液中，制得相应的混悬型缓释注射剂。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为25-35天左右。

实施例6.

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例5相同，但所不同的是所含抗结核有效成分为：

10-20％的卷曲霉素与10-20％的乙硫异烟胺或丙硫异烟胺的组合。

实施例7.

将70mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)为20∶80)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入20mg乙硫异烟胺和10mg丙硫异烟胺，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含20％乙硫异烟胺与10％丙硫异烟胺的注射用微球。然后将微球悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠和0.5％吐温80的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。

实施例8.

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例7相同，但所不同的是所含抗结核有效成分为：

10-20％的乙硫异烟胺与10-20％的卷曲霉素或丙硫异烟胺的组合。

实施例9

将70mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)为20∶80)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入15mg丙硫异烟胺和15mg卷曲霉素，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含15％丙硫异烟胺和15％卷曲霉素注射用微球。然后将微球悬浮于含1.5％羧甲基纤维素钠和15％山梨醇和0.2％吐温80的生理盐水中，制得相应的混悬型缓释注射剂。该缓释注射剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为20-30天左右。

实施例10

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例9相同，但所不同的是所含抗结核有效成分为：

15％的丙硫异烟胺与15％的卷曲霉素的组合。

实施例11

将70mg聚苯丙生(对羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)为20∶80)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入10mg卷曲霉素和20mg乙硫异烟胺，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含10％卷曲霉素和20％乙硫异烟胺的注射用微球。然后将微球经压片法制得相应的缓释植入剂。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为10-15天，在小鼠皮下的释药时间为30-40天左右。

实施例12

加工成缓释植入剂的方法步骤与实施例11相同，但所不同的是所含抗结核有效成分为：

10-20％的卷曲霉素与10-20％的乙硫异烟胺的组合。

实施例13

将70mg分子量峰值为45000的聚乳酸(PLGA，50∶50)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混匀后，加入10mg卷曲霉素和20mg乙硫异烟胺，重新摇匀后用喷雾干燥法制备含10％卷曲霉素和20％乙硫异烟胺的注射用微球。然后将微球经压片法制得相应的缓释植入剂。该缓释植入剂在体外生理盐水中的释药时间为15-25天，在小鼠皮下的释药时间为35-50天左右。

实施例14

加工成缓释植入剂的方法步骤与实施例11、13相同，但所不同的是所含抗结核有效成分及重量百分比为：

(1)2-40％的乙硫异烟胺、丙硫异烟胺或卷曲霉素；

(2)2-40％的乙硫异烟胺与2-40％的丙硫异烟胺或卷曲霉素的组合；或

(3)2-40％的丙硫异烟胺与2-40％的卷曲霉素的组合。

实施例15

加工成缓释剂的方法步骤与实施例1-14相同，但所不同的是所用的缓释辅料为下列之一或其组合：

a)分子量峰值为10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乳酸(PLA)；

b)分子量峰值为10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物(PLGA)，其中，聚乙醇酸和羟基乙酸的比例为50-95∶50-50；

c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)；

d)10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40的对羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)共聚物(聚苯丙生)；

e)双脂肪酸与癸二酸共聚物；

f)聚(芥酸二聚体-癸二酸)共聚物；

g)聚(富马酸-癸二酸)共聚物；

h)木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、钾盐、钠盐、透明质酸、胶原蛋白、明胶或白蛋胶。

实施例16

加工成缓释注射剂的方法步骤与实施例1-10相同，但所不同的是所用的助悬剂分别为下列之一或其组合：

a)0.5-3.0％羧甲基纤维素(钠)；

b)5-15％甘露醇；

c)5-15％山梨醇；

d)0.1-1.5％表面活性物质；

e)0.1-0.5％吐温20；

f)(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇或卡波姆；

g)0.5-5％羧甲基纤维素钠+0.1-0.5％土温80；

h)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土温80；或

i)0.5-5％羧甲基纤维素钠+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土温80。

以上实施例仅用于说明，而并非局限本发明的应用。

本发明所公开和保护的内容见权利要求。

Claims (10)

1.一种含抗结核病药物的缓释制剂，其特征在于该抗缓释制剂于结核病灶局部放置或注射该剂能将抗结核病药物在结核病灶局部缓慢释放，在有效获得和维持局部有效药物浓度的同时降低其全身毒性。

2.根据权利要求1所述之抗结核病药物缓释剂，其特征在于该抗结核病药物缓释剂为缓释注射剂，由以下成分组成：

(A)缓释微球，包括：

抗结核病药物          1-70％

缓释辅料              30-99％

助悬剂                0.0-30％

以上为重量百分比

和

(B)溶媒，为普通溶媒或含助悬剂的特殊溶媒。

其中，

助悬剂的黏度为100cp-3000cp(20℃-30℃时)，选自羧甲基纤维素钠、碘甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物质、土温20、土温40和土温80之一或其组合。

根据权利要求1和2所述之抗结核缓释注射剂，其特征在于抗结核药物选自卷曲霉素、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、对氨水杨酸钠之一或其组合。

3.根据权利要求2所述之抗结核缓释注射剂，其特征在于抗结核缓释注射剂的抗结核有效成分及其重量百分比为：

(1)2-40％的乙硫异烟胺、丙硫异烟胺或卷曲霉素；

(2)2-40％的乙硫异烟胺与2-40％的丙硫异烟胺或卷曲霉素的组合；或

(3)2-40％的丙硫异烟胺与2-40％的卷曲霉素的组合。

4.根据权利要求2所述之抗结核缓释注射剂，其特征在于缓释辅料选自下列之一或其组合：

a)聚乳酸；

b)聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物；

c)聚苯丙生；

d)乙烯乙酸乙烯酯共聚物；

e)双脂肪酸与癸二酸共聚物；

f)聚(芥酸二聚体-癸二酸)共聚物；

g)聚(富马酸-癸二酸)共聚物；

h)木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、钾盐、钠盐、透明质酸、胶原蛋白、明胶或白蛋胶。

5.根据权利要求2所述之抗结核缓释注射剂，其特征在于所用的助悬剂分别为下列之一：

a)0.5-3.0％羧甲基纤维素(钠)；

b)5-15％甘露醇；

c)5-15％山梨醇；

d)0.1-1.5％表面活性物质；

e)0.1-0.5％吐温20；

f)(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇或卡波姆；

g)0.5-5％羧甲基纤维素钠+0.1-0.5％土温80；

h)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土温80；或

i)0.5-5％羧甲基纤维素钠+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土温80。

6.根据权利要求1所述之抗结核病药物缓释剂，其特征在于该抗结核病药物缓释剂为缓释植入剂，由以下成分组成：

(1)抗结核病药物          1-70％

(2)缓释辅料              30-99％

(3)助悬剂                0.0-30％

以上为重量百分比

7.根据权利要求6所述之抗结核缓释缓释植入剂，其特征在于抗结核缓释植入剂的抗结核有效成分及其重量百分比为：

(1)2-40％的乙硫异烟胺、丙硫异烟胺或卷曲霉素；

(2)2-40％的乙硫异烟胺与2-40％的丙硫异烟胺或卷曲霉素的组合；或

(3)2-40％的丙硫异烟胺与2-40％的卷曲霉素的组合。

8.根据权利要求6所述之抗结核缓释植入剂，其特征在于缓释辅料选自下列之一或其组合：

a)聚乳酸；

b)聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物；

c)聚苯丙生；

d)乙烯乙酸乙烯酯共聚物；

e)双脂肪酸与癸二酸共聚物；

f)聚(芥酸二聚体-癸二酸)共聚物；

g)聚(富马酸-癸二酸)共聚物；

h)木糖醇、低聚糖、软骨素、甲壳素、钾盐、钠盐、透明质酸、胶原蛋白、明胶或白蛋胶。

9.根据权利要求8所述之所述之抗结核缓释植入剂，其特征在于缓释辅料中：

a)聚乳酸的分子量峰值选自10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；

b)聚乙醇酸和羟基乙酸的共聚物中，聚乙醇酸和羟基乙酸的比例为50-95∶50-50，分子量峰值为10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；

c)聚苯丙生中，对羧苯基丙烷∶葵二酸为10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40。

10.根据权利要求1、2和6所述之所抗结核缓释制剂，其特征在于所述缓释辅料及其重量百分比为：

(1)55-90％的PLA；

(2)50-90％的PLGA；

(3)50-85％的聚苯丙生；

(4)55-90％的双脂肪酸与癸二酸共聚物；或

(5)55-90％的EVAc。