CN1473463A - 一种植物组培脱病毒方法 - Google Patents
一种植物组培脱病毒方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1473463A CN1473463A CNA021259801A CN02125980A CN1473463A CN 1473463 A CN1473463 A CN 1473463A CN A021259801 A CNA021259801 A CN A021259801A CN 02125980 A CN02125980 A CN 02125980A CN 1473463 A CN1473463 A CN 1473463A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- virus
- plant
- seedling
- group
- whole strain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 title description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 38
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 34
- 238000012549 training Methods 0.000 claims description 9
- 238000009395 breeding Methods 0.000 claims description 7
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000005418 vegetable material Substances 0.000 claims description 7
- 244000144987 brood Species 0.000 claims description 5
- -1 steroids compound Chemical class 0.000 claims description 5
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 4
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 4
- GEWDNTWNSAZUDX-WQMVXFAESA-N (-)-methyl jasmonate Chemical compound CC\C=C/C[C@@H]1[C@@H](CC(=O)OC)CCC1=O GEWDNTWNSAZUDX-WQMVXFAESA-N 0.000 claims description 3
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 claims description 3
- GEWDNTWNSAZUDX-UHFFFAOYSA-N methyl 7-epi-jasmonate Natural products CCC=CCC1C(CC(=O)OC)CCC1=O GEWDNTWNSAZUDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 abstract description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 abstract description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 4
- 244000205754 Colocasia esculenta Species 0.000 description 3
- 235000006481 Colocasia esculenta Nutrition 0.000 description 3
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 3
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 3
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 3
- 241001147458 Dasheen mosaic virus Species 0.000 description 2
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 description 2
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 description 2
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 description 2
- FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N Kinetin Natural products N=1C=NC=2N=CNC=2C=1N(C)C1=CC=CO1 FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001669 kinetin Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000000442 meristematic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000921313 Phyllopodium Species 0.000 description 1
- 241000710179 Potato virus S Species 0.000 description 1
- 241000709992 Potato virus X Species 0.000 description 1
- 241000726445 Viroids Species 0.000 description 1
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000012271 agricultural production Methods 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 230000005860 defense response to virus Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 1
- 230000027272 reproductive process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000007669 thermal treatment Methods 0.000 description 1
- 230000005570 vertical transmission Effects 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明涉及一种植物脱病毒快速繁殖的方法，具体地说，涉及一种通过在组培阶段和整株处理前，用促进或抑制病毒的激素类化合物处理植物材料，获得低病毒负荷量的繁殖体，然后进行快速繁殖的方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物脱病毒快速繁殖的方法，具体地说，涉及一种通过在组培阶段和整株处理前，用促进或抑制病毒的激素类组化合物处理植物材料，获得低病毒负荷量的繁殖体，然后进行快速繁殖的方法。
技术背景
无性繁殖植物病毒病的发生相对普遍和严重，所有的植物病毒无一例外均可以通过无性繁殖方式(扦插、嫁接和)垂直传播。该类植物由于没有种子繁殖过程，因此其病毒表现逐渐累积和终身带毒的特点。病毒的长期大量累积，造成无性繁殖植物的种质退化。同时，普遍带毒(几乎所有木本和块茎块根繁殖的植物都100％携带病毒)的植物在自身的生命力下降的同时，引发病毒扩散，可能使周边农作物和经济作物遭受病毒的危害，因此，对无性繁殖植物进行病毒检测是一项非常有价值得工作，尤其是当植物材料来自外地、外国销售品和需要异地扩散时，病毒检测和无病毒繁殖体的采用尤为重要。通过组织培养脱除病毒，获得纯净的植物繁殖体，不仅可以恢复植物生长活力，获得“复壮”效果，同时还能够大大提高植物产品的环境安全性，保障产品销售环节畅通。组织培养获得的无病毒苗，由于可以从一株母体上获得遗传基础和外观、品质形状均的繁殖体和产品，对于形成植物产品品牌具有无与伦比的优势。
组培与脱病毒苗生产的关键是脱毒技术。获得无病毒植株的方法有多种，例如热处理脱毒、芽尖培养脱毒和茎尖微芽嫁接脱毒以及其组合方法。普遍采用的较好的方法是芽尖培养脱毒法，具体的步骤是：通过植物顶端分生组织切取小块(0.2mm以下分生组织)，用各部位器官和组织的培养去分化诱导愈伤组织，然后从愈伤组织再分化产生芽，长成小植株得到脱毒苗是目前通常采用的方法。相关的技术已有许多的专利。例如，CN1031637A、CN1238122A、CN1258435A、CN1258436A披露了采用芽尖组织作为外植体，用消毒剂消毒处理后进行组织培养，得到脱毒苗的方法。WO00/78128公开了培养球茎或块茎叶基部分的园顶形组织，获得无毒植物的方法。JP5130816A、JP5084028A公开了一种采用叶芽或苗尖作为外植体在含有6-BA、激动素等激素的固体培养基上培养，获得无病毒人工草莓的方法。
但是这种分生组织脱毒法存在二个问题：1)但由于植物愈伤组织中病毒浓度降低的原因目前还存在着争议，获得的脱毒苗不一定完全脱毒，因此需要对大量样品进行病毒检测，而病毒检测往往存在灵敏度的问题；2)需要切取小块顶端分生组织，具有一定难度，切取组织越小，成活率越低，同时，容易造成污染；3)切取组织越小越容易导致变异发生。
因此，农业生产中仍就需要一种更好的脱毒方法。
针对现有技术的不足，本发明者进行了深入细致的研究，结果发明，通过采用相应诱导手段显示病毒的存在和在一定植物生长阶段抗病毒，于是完成了本发明。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的脱病毒方法，它包括如下步骤，在组培阶段和整株处理前，用促进或抑制植物病毒的激素类化合物处理植物材料，获得低病毒负荷量的繁殖体，然后进行快速繁殖的方法。
一些激素类物质，尽管不能完全杀灭植物病毒，但是，他们存在促进或者抑制植物病毒复制的作用。因此，用它们作为植物病毒抑制剂或促进剂，能够使得感病毒植物表现更为明显的症状，或者诱导植物病毒的表达，以便在无病毒苗筛选过程中及早淘汰“轻微”感病毒的植株；同时，通过在某些阶段促进病毒表达，及早诱导植物的抗病毒反应，使得植物在后续生长的过程中能够有效抑制病毒复制和扩散，组培过程中可以切取较大的组织块，而不至于携带病毒。
本文中所述的“植物材料”是所有适合的植物繁殖体材料例如组培采用的整株植物、植物外植体如芽尖、侧芽，以及组培出的种苗、种薯，优选的是整株植物和侧芽。
本文中所述的促进或抑制植物病毒的激素化合物是例如茉莉酸、二氢茉莉酸丙酯茉莉酸甲酯、芸苔素内酯，干扰素，优选的是茉莉酸、二氢茉莉酸内酯。
本发明中所述的病毒是指RNA病毒、类病毒、DNA病毒和植物菌原体，优选是RNA病毒。
本发明方法中，通过激素处理所获得的低病毒负荷量繁殖体的随后快速繁殖采用常规的方法进行，例如，将外植体在基础培养基如MS培养基上培育。
本发明所述的激素处理可以是例如浸泡、喷雾等整株处理方法。
虽然在现有技术中，公开了将叶芽或苗尖作为外植体在含有6-BA、激动素等激素的固体培养基上培养，获得无病毒人工草莓的方法(例如JP5130816A、JP5084028A)。但是，该方法是在组培阶段进行激素处理，容易形成变异体。
本发明与现有技术中的在培养基中添加激素化合物的差别在于，在整株水平上，进行激素处理，与现有的方法相比，本发明的方法具有对整株遗传和生长影响小，脱毒成功率高的优点。
实施例
本发明通过下文的非限定性实施例进行说明。
实施例1芋头的脱毒快繁
先将芋头整株或块茎用茉莉酸(jisamoni acid，JA)浸泡处理10分种，处理浓度为30ppm～100ppm，14d～19天，切取顶端分生组织，用常规方法再生植物。结果显示：切取0.6mm以上组织，50株植物，86％再生苗不带芋花叶病毒(dasheen mosaic virus，DsMV)；对照处理用自来水作为处理，50株再生苗只有1株不携带病毒，无病毒苗比例2％。该方法尤其是适合RNA病毒的脱病毒。
实施例2：马铃薯的脱毒快繁
马铃薯组培苗各20只试管，用50ppmJA水溶液喷雾处理，28℃培养6d取测定，马铃薯X病毒，马铃薯Y病毒，马铃薯S病毒，马铃薯A病毒，进行ELISA检测，同一批苗，JA处理组，只有7只试管没有病毒，其余13只携带一种以上病毒，对照组自来水20只试管均未检测到病毒。将处理组与对照组的试管苗再生长一个月后检测，处理组先前检查无病毒的试管均不再检测出以上病毒，但是，对照组的14只试管检测出一种以上病毒。
虽然，在本文中对本发明原理及方法作了详尽的说明，但可以理解，本领域技术人员在本发明基础上可以做出改进或变化，这些内容也属于本发明的范围。
Claims (6)
1.一种用于植物种苗的脱病毒方法，它包括如下步骤：通过在组培阶段和整株处理前，用促进或抑制病毒的激素类化合物处理植物材料，获得低病毒负荷量的繁殖体，然后进行快速繁殖的方法。
2.根据权利要求1的方法，其中，所述的激素类化合物选自茉莉酸、茉莉酸甲酯、芸苔素内酯和干扰素。
3.根据权利要求2的方法，其中，所述的激素类化合物是茉莉酸和/或茉莉酸甲酯。
4、根据权利要求1-3之任一的方法，其中，所述的植物材料选自组培采用的整株植物、植物外植体、组培出的种苗和种薯。
5.根据权利要求4的方法，其中，所述的植物材料选自组培采用的整株植物和外植体。
6、根据权利要求5的方法，其中，所述的外植体选自芽尖和侧芽。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA021259801A CN1473463A (zh) | 2002-08-07 | 2002-08-07 | 一种植物组培脱病毒方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA021259801A CN1473463A (zh) | 2002-08-07 | 2002-08-07 | 一种植物组培脱病毒方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1473463A true CN1473463A (zh) | 2004-02-11 |
Family
ID=34143168
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNA021259801A Pending CN1473463A (zh) | 2002-08-07 | 2002-08-07 | 一种植物组培脱病毒方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1473463A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105010137A (zh) * | 2015-06-29 | 2015-11-04 | 大新县科学技术情报研究所 | 一种甘蔗脱毒育苗繁殖的方法 |
| CN106386500A (zh) * | 2016-11-03 | 2017-02-15 | 广西玉林容山堂生物科技有限公司 | 一种大蒜脱毒组培苗的培养基 |
| CN106386494A (zh) * | 2016-09-29 | 2017-02-15 | 紫云自治县紫香源农林科技有限责任公司 | 一种甘薯茎尖脱毒与育种方法 |
| CN106508676A (zh) * | 2016-11-03 | 2017-03-22 | 广西玉林容山堂生物科技有限公司 | 一种玉林香蒜的提纯复壮方法 |
-
2002
- 2002-08-07 CN CNA021259801A patent/CN1473463A/zh active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105010137A (zh) * | 2015-06-29 | 2015-11-04 | 大新县科学技术情报研究所 | 一种甘蔗脱毒育苗繁殖的方法 |
| CN106386494A (zh) * | 2016-09-29 | 2017-02-15 | 紫云自治县紫香源农林科技有限责任公司 | 一种甘薯茎尖脱毒与育种方法 |
| CN106386500A (zh) * | 2016-11-03 | 2017-02-15 | 广西玉林容山堂生物科技有限公司 | 一种大蒜脱毒组培苗的培养基 |
| CN106508676A (zh) * | 2016-11-03 | 2017-03-22 | 广西玉林容山堂生物科技有限公司 | 一种玉林香蒜的提纯复壮方法 |
| CN106508676B (zh) * | 2016-11-03 | 2018-11-06 | 广西玉林容山堂生物科技有限公司 | 一种玉林香蒜的提纯复壮方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ruiz et al. | Synthetic polyploidy in grafted crops | |
| Pornpienpakdee et al. | Improving the micropropagation efficiency of hybrid Dendrobium orchids with chitosan | |
| CN101611697B (zh) | 甘薯商19的脱毒快繁方法 | |
| Payghamzadeh et al. | In vitro propagation of walnut-A review | |
| Cardoso | Silver nitrate enhances in vitro development and quality of shoots of Anthurium andraeanum | |
| Kriaa et al. | The date palm (Phoenix dactylifera L.) micropropagation using completely mature female flowers | |
| Wu et al. | In vitro mass propagation of hermaphroditic Carica papaya cv. Meizhonghong | |
| Yambo et al. | Micropropagation of anchote [Coccinia abyssinica (Lam.) Cogn.]: High calcium content tuber crop of Ethiopia | |
| Koehler et al. | Somatic embryogenesis from leaf explants of hermaphrodite Carica papaya: a new approach for clonal propagation | |
| Shekhawat et al. | An improved micropropagation protocol by ex vitro rooting of Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Deg. through nodal segment culture | |
| Liu et al. | Improved in ovulo embryo culture for stenospermocarpic grapes (Vitis vinifera L.) | |
| Ridzuan et al. | Micropropagation and defence enzymes assessment of Moringa oleifera L. plantlets using nodal segments as explant | |
| Stephen et al. | Micropropagation of hemp (Cannabis sativa L.) | |
| CN111771730A (zh) | 一种百香果脱毒苗的生产方法 | |
| Li et al. | A method for micropropagation of Cornus wilsoniana: an important biofuel plant | |
| Kambou et al. | Phytochemical composition and insecticidal effects of aqueous spice extracts on insect pests found on green beans (Phaseolus vulgaris) in Burkina Faso | |
| Zheng et al. | Efficient in vitro shoot bud proliferation from cotyledonary nodes and apical buds of Moringa oleifera Lam. | |
| Yelli et al. | Somatic embryogenesis in two cassava (Manihot esculenta Crantz) genotypes | |
| Agnihotri et al. | In vitro cloning of female and male Carica papaya through tips of shoots and inflorescences | |
| CN1473463A (zh) | 一种植物组培脱病毒方法 | |
| CN109220782A (zh) | 一种黄瓜枯萎病抗性育种方法 | |
| Lardet et al. | Effect of strictly plant-related factors on the response of Hevea brasiliensis and Theobroma cacao nodal explants cultured in vitro | |
| Guranna et al. | Studies on establishment of aseptic culture in pomegranate cv. Bhagwa | |
| Raju et al. | Micropropagation of Syzygium densiflorum Wall. ex Wight & arn.: An endemic and endangered semi-evergreen tree species of the Western Ghats, India | |
| Thangaraj | Comparative potential of somatic embryogenesis and friable embryogenic callus production in farmer preferred indian cassava cultivars |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |