CN1468631A - 孕马全血去蛋白提取物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种孕马全血去蛋白提取物的方法，采妊娠40～140天期间的孕马的血，分离出血清，分别经10万、1万道尔顿超滤，超滤液经真空浓缩、冷冻、化冻、再经1万道尔顿超滤，超滤液经稀释、调pH值、除菌、灌装。本发明孕马全血去蛋白提取物中含有促性腺激素(小分子肽、氨基酸、糖蛋白等)，它们能直接作用于卵巢，促进黄体发育，可诱发排卵，治疗不孕症，还可用于因男性垂体功能不足所致的性功能过低症，隐睾症及男女更年期综合症，此外还可以消除皮肤皱纹、色斑等功效。

Description

孕马全血去蛋白提取物的方法
技术领域
本发明涉及医学生化药物领域，具体涉及一种孕马全血去蛋白提取物的方法。
背景技术
2002.11.27公告的，申请号为01109582.2，专利名称为“从孕马尿液中制备结合雌激素的方法”该发明从孕马尿液(PMU)中制备结合雌激素，结合雌激素是治疗更年期综合症的有效药物。
发明内容
本发明的目的在于提供一种孕马全血去蛋白提取物的方法，从孕马全血中提取“孕马全血去蛋白提取物”这一生物活性物质，孕马全血去蛋白提取物中含有促性腺激素(小分子肽、氨基酸、糖蛋白等)，它们能直接作用于卵巢，促进黄体发育，可诱发排卵，治疗不孕症，还可用于因男性垂体功能不足所致的性功能过低症，隐睾症及男女更年期综合症，此外还可以消除皮肤皱纹、色斑等功效。
本发明所提供的孕马全血去蛋白提取物的方法：采妊娠40～140天期间的孕马的血，分离出血清，分别经10万、1万道尔顿超滤，超滤液经真空浓缩、冷冻、化冻，再经1万道尔顿超滤，超滤液经稀释、调PH值、除菌、灌装。
具体步骤：1、取孕马血，4℃、4000转/分、离心30分钟，分离出血清，经10万道尔顿分子量的超滤器超滤，超滤液再经1万道尔顿分子量的超滤器超滤，超滤液再真空浓缩至原体积的四分之一，冷冻备用(最长可贮存一年)。
2、将上述冷冻液化冻，再经1万道尔顿的超滤器超滤，得超滤液，精密测出总固体的含量，加注射用水稀释至总固体为40mg/ml，用3M盐酸将PH值调至6.5～7.5之间，经0.22μM膜除菌，灌装，2ml/支。
使用本发明孕马全血去蛋白提取物的方法，得到的产品的成份分析结果表明：小分子肽占5％、氨基酸占2％、糖蛋白占5％，其它干物质88％。
实施例1：
在无菌条件下采妊娠70天的孕马全血，在4℃、4000转/分、离心机离心30分钟，得孕马血清，先经10万道尔顿分子量的超滤器超滤，超滤液再经1万道尔顿分子量的超滤器超滤，超滤液再真空浓缩至原体积的四分之一，冷冻备用。将上述冷冻液化冻，再经1万道尔顿的超滤器超滤，得超滤液，加注射用水稀释至总固体为40mg/ml，其中包括小分子肽4mg/ml，氨基酸0.8mg/ml，糖蛋白2mg/ml，用3M盐酸将PH值调至6.95～7.05之间，经0.22μM膜除菌，灌装，2ml/支，得孕马全血去蛋白提取物成品。
本发明孕马全血去蛋白提取物属生物活性激素，可应用于人体，与合成的激素相比，稳定性好，疗效显著，对人体无任何毒副作用。
使用本发明所提供的方法提取得到的孕马全血去蛋白提取物的质量标准为：提取物为去蛋白的孕马血衍生物的无菌水溶液，含孕马血衍生物应为标示量的90.0～110.0％，性状为：淡黄色澄明液体，相对密度为：1.0215～1.0274(中国药典2000年版)。产品的检测情况为：
[鉴别]
氨基酸分析：用自动采样器和注射装置将标准液和供试品稀释液(取供试品1支，稀释6倍)各100ul注入色谱分离柱，根据标准色谱图确定各种氨基酸的保留时间，然后比较保留时间，鉴别各种氨基酸。此外，通过积分仪中的标准曲线，可根据峰面积确定氨基酸的浓度(mg/ml)，结果大于0.8mg/ml。
[检查]
PH值：6.5～7.5(中国药典2000年版二部)
蛋白质：加入等体积的10％的三氯醋酸溶液，没有沉淀产生。
无菌：符合规定(中国药典2000年版二部)
热源：符合规定(中国药典2000年版二部)
[含量测定]
总固体测定：精密量取本品2ml，置称量瓶中，在53±2℃下真空干燥至恒重(中国药典2000年版二部)，按下式计算总固体含量：
Figure A0313243900051
下面是本发明孕马全血去蛋白提取物的动物试验：
(一)孕马全血去蛋白提取物对小鼠同期发情效果试验。
摘要：应用孕马全血去蛋白提取物即孕马血促性激素对125只小鼠进行同期发情试验：
一、材料和方法
试验时间：2002年5月
地点：本公司动物实验中心
1.试验小鼠来源：本公司动物实验中心饲养，身体健康且生殖机能正常，无公小鼠混居的雌性小鼠。
2.药品来源：本试验所使用的孕马全血去蛋白提取物注射液是本公司委托江氏药业加工生产，每瓶2ml；
3.小鼠群处理：试验小鼠125只，第一次每只小鼠肌肉注射0.2ml，全部试验小鼠于96小、时后再注射0.2ml；
试验小鼠在给药后全部在小鼠的尾根处涂上用胶水调制好的双飞粉(市售)，通过观察小鼠的爬跨行为来鉴定是否发情，如果是小鼠尾根处的双飞粉被严重弄脏或被磨掉大部分，说明该鼠曾多次被爬跨，表示小鼠正发情。
判断标准：
1.试验小鼠于药品注射后5天内表现发情，即判定发情的同期化；
2.本试验的发情鉴定主要以爬跨等现象为依据。
二、结果：
试验期间，所有小鼠均健康正常，无发生繁殖机能紊乱现象，结果125只小鼠中121只为同期发情，占96.8％。
参考文献：(1)北京农业大学，家畜繁殖学第二版，农业出版社
          (2)缨振鸿，等(J)，中国畜牧杂志，1980.2.18～19
(二)孕马全血去蛋白提取物对小鼠子宫增重效果试验
摘要：应用孕马全血去蛋白提取物即孕马血促性腺激素对15只小鼠进行子宫增重效果试验。
一、材料和方法
试验时间：2002年6月
地点：本公司动物实验中心
1.实验小鼠来源：本公司动物实验中心饲养，身体健康且生殖机能正常，无公小鼠混居的雌性小鼠；
2.药品来源：本试验所使用的孕马全血去蛋白提取物注射液是本公司委托江氏药业加工生产，每瓶2ml；
3.小鼠样处理：试验小鼠15只，每只小鼠注射0.2ml，按《中国药典》2000版规定的小鼠子宫增重法进行。
二、结果：
试验期间，所有小鼠均健康正常，无发生繁殖机能紊乱现象，结果15只小鼠中14只小鼠子宫增重，占93.3％。

Claims (2)

1、一种孕马全血去蛋白提取物的方法，其特征在于：采妊娠40～140天期间的孕马的血，分离出血清，分别经10万、1万道尔顿超滤，超滤液经真空浓缩、冷冻、化冻、再经1万道尔顿超滤，超滤液经稀释、调PH值、除菌、灌装。
2、根据权利要求1所述的孕马全血去蛋白提取物的方法，其特征在于：调PH是用3M盐酸将PH值调至6.5～7.5。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN100355427C (zh) * 2005-04-20 2007-12-19 沈阳斯佳科技发展有限公司 从猪血中提取具有刺激细胞呼吸活性作用物质的方法
CN103275206A (zh) * 2013-03-17 2013-09-04 赤峰博恩药业有限公司 孕马血清促性腺激素的提纯方法
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100355427C (zh) * 2005-04-20 2007-12-19 沈阳斯佳科技发展有限公司 从猪血中提取具有刺激细胞呼吸活性作用物质的方法
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