CN1452979A - 一种具有抗炎作用的药物组合物及其生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有治疗急性炎症和以肉芽组织增生为主的慢性炎症的药物组合物及其生产方法，该药物组合物包括50－80％的贯叶连翘提取物和20－50％和赖氨酸盐酸盐，它对急性炎症和以肉芽组织增生为主的慢性炎症，均有显著抑制作用，还能显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性，并具有抑制单纯疱疹病毒和带状疱疹病毒效果，无明显副作用，是一种抗炎和治疗疱疹病毒感染的理想药物。

Description

一种具有抗炎作用的药物组合物及其生产方法

技术领域

本发明涉及一种具有抗炎作用的药物，特别是添加有中药贯叶连翘提取物的具有治疗急性炎症和以肉芽组织增生为主的慢性炎症的药物组合物及其生产方法。

背景技术

急、慢性炎症的产生一般认为是化学性及物理性疼痛因子所致的疼痛，临床的病症是内脏器官，疼痛、急、慢性软组织损伤，腱鞘炎，风湿、类风湿关节炎、关节疼痛等，我国传统中医学认为本病的发生，多因正气本虚，外邪入侵，邪毒阻滞，湿演化热，血败肉腐，带脉约束失常。但严重时可能会出现局部粘膜充血水肿、炎性渗出，血液循环障碍，乃至组织粘膜脱落坏死。目前西医采用的镇痛和消炎药物有多种，如阿司匹林、去痛片、消炎痛、布洛芬、酮洛芬、案普生、保泰松、尼美舒利、莫非唑拉等，中药有牛黄消炎片、麻黄细辛汤、止痛消炎膏、乌药提取物、竹黄提取物、莲胆消炎胶囊等，这些镇痛和消炎药物的作用要求在达到清热解毒，抗菌消炎的同时，还可以改善局部血液循环，促进创面的修复与愈合，使热清毒化。湿祛瘟散，腐法新生，带脉宣通畅达，则谙症自除的目的。

经检索中国科技文献，我们还了解到具有治疗急性炎症和以肉芽组织增生为主的急慢性炎症的中西药药物研究论文如下：

1、金边瑞香的抗炎症作用，《赣南医学院学报》。2002，22(1)，目的：研究金边瑞香的抗炎症作用。方法：①足肿胀法；②佐剂性关节炎法；③琼脂肉芽肿法；④耳廓肿胀法；⑤迟发性过敏反应法；⑥毛细血管通透性法。结果：对角叉菜胶诱发的大鼠足爪肿，佐剂性关节炎，琼脂肉芽肿，小鼠迟发性过敏反应具有明显的抑制作用；对二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀及醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性的影响等急性炎症也具有一定的抑制作用。结论：金边瑞香提取液具有抗炎症作用。

2、赤土苻苓苷的抗炎作用研究《新疆中医药》。2002，20(3)，通过增加血管通透性为主的急性炎症模型和以肉芽肿为特征的慢性炎症模型，观察赤土苻苓(Smi)的抗炎作用，并以阿斯匹林为阳性对照。结果：Smi对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性，小鼠角叉菜胶性足肿胀均有明显的抑制作用，其中Smi在80mg/kg作用最为明显(P＜0.001)。对小鼠棉球肉芽肿增生也有明显的抗增生作用(P＜0.001)。结果表明Smi对急性和慢性炎症模型均有抗炎作用，此外，Smi明显降低小鼠角叉菜胶性炎症组织内PGE2含理。

3、福建穿山龙抗炎镇痛作用的实验研究，《海峡药学》。2000，12(3)。运用二甲苯、角叉菜胶致炎、小鼠扭体反应等实验观察。福建穿山龙i g能明显抑制二甲苯引起的小鼠耳壳炎症、大鼠角叉菜胶性足关节肿胀，降低小鼠腹腔毛细血管通透性及明显抑制大鼠棉球肉芽肿；并能延长小鼠疼痛反应时间，减少小鼠扭体反应次数。实验结果表明，福建穿山龙具有明显的抗炎、镇痛作用。

4、红毛五加总甙的抗炎作用，《中药药理与临床》。2000，16(1)，研究红毛五加总甙(TGA)的抗炎作用。方法：采用多种致炎剂引起大、小鼠炎症模型。结果：TGA对二甲苯、蛋清、角叉菜胶、甲醛致肿、琼脂肉芽肿增生、乙酸致毛细血管通透性增加及多形核白细胞游走均有明显抑制作用，同时使炎症组织PGE、组胺含量减少。结论：TGA具有抗急、慢性炎症作用。

5、乙醇提取新鲜当归油的抗炎镇痛作用《中国药房》。2002，13(9)。研究当归油的镇痛、抗炎作用。方法：应用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、蛋清致大鼠足跖肿胀及大鼠棉球肉芽肿增生4种动物模型进行抗炎药效学实验；采用醋酸致小鼠扭体反应，进行镇痛实验。结果：当归油能显著抑制上述各种动物模型的炎症反应及醋酸引起的小鼠扭体反应。结论：当归油对急、慢性炎症均有明显抑制作用。且有一定的镇痛效果。

6、复方银黄微型灌肠剂抗炎作用的研究《广西医科大学学报》。1999，16(6)。研究复方银黄微型灌肠剂的抗炎作用。方法：观察复方银黄微型灌肠剂对巴豆油所致的小鼠耳部炎症、冰醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增高和大鼠棉球肉芽肿的影响。结果：复方银黄微型灌肠剂对巴豆油所致的小鼠耳部炎症有明显的抗炎作用。能明显抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加，对大鼠棉球肉芽肿也有显著的抑制作用。结论：复银黄微型灌肠剂具有较强的抗炎作用。

7、蛇床子素抗炎作用的实验研究《赣南医学院学报》。1999，19(3)。采用多种实验性炎症模型，观察了Ost的抗炎作用。Ost对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀，醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增高，角叉菜胶诱发的大鼠及切除双侧肾上腺的大鼠足抓肿胀均有明显的抑制作用，但不影响大鼠足爪类症组织内PGE含量。Ost对琼脂引起的小鼠肉芽肿增生亦有明显的抑制作用。结果表明Ost对急性和慢性炎症模型均有抗炎作用。其抗炎机制并非通过垂体—肾上腺皮质系统，亦与PGE的合成无关。

8、荆芥挥发油抗炎作用研究，《中药药理与临床》。1998，14(6)。采用动物急性炎症模型(大鼠角叉菜胶或蛋清性足肿胀、小鼠角叉菜胶性及足肿胀和二甲苯致耳廓肿胀、小鼠腹腔或皮肤毛细血管通透性亢进)及慢性炎症模型(小鼠棉球肉芽肿)，观察了荆芥挥发油的抗炎作用，结果表明荆芥挥发油对动物急性或慢性炎症模型均有不同程度的抑制作用，具有良好的抗炎作用。

9、女金丹抗炎和对血液流变学影响的实验研究《广州中医药大学学报》。1996，13(1)，本研究结果表明，女金丹能降低炎症动物毛细血管通透性，对大鼠蛋清性，甲醛性足肿胀，对大鼠棉球性肉芽肿，均有明显的抑制作用，“血瘀证”大鼠能明显改善其血液流变性。提示女金丹具有抗炎和改善血液流湾性的作用。

10、合成川芎嗪的抗炎作用《沈阳药科大学学报》。2000，17(4)。川芎嗪50-200mg/kg灌胃给药，可显著抑制小鼠叉菜胶性足肿胀、巴豆油性耳肿胀、二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性增高、小鼠棉球肉芽肿增生、大鼠巴豆油性肉芽囊肿的组织增生、抑制小鼠羧甲基纤维素囊中白细胞的游走反应，对小鼠烫伤性炎症也有显著抑制作用。

11、双氯芬酸刺氨酸盐的抗炎作用《中国医药工业杂志》。1995，26(12)，双氯芬酸赖氨酸盐灌胃给药能明显抑制角叉菜胶等所致急性炎症，棉球肉芽肿民性炎症及免疫性炎症佐剂关节炎。其作用机理与抑制前列腺素等各种致炎介质的合成、释放，稳定溶酶体膜，抑制单核巨噬细胞系统吞噬功能有关。

技术内容

本发明为了更好地开发出一些治疗急性炎症和以肉芽组织增生为主的急慢性炎症的药物，对一些中药提取物进行了研究，筛选了一些具有治疗效果好，安全、无明显副作用等特点的药物。

本发明的技术方案如下：

具有抗炎作用的药物组合物包括贯叶连翘提取物和赖氨酸盐酸盐，其成分和重量含量如下：

贯叶连翘提取物       50-80％

赖氨酸盐酸盐         20-50％

以上所述的贯叶连翘提取物含金丝桃素2-5％，其提取方法可以采用50℃左右的热水浸泡2h后，加入0.5％NaOH，用75％甲醇在0.05Mpa下78℃提取3-5次，每次1.5h，溶媒量为5倍，在80℃条件下浓缩干燥；也可以采用80％乙醇为溶剂，撮出贯叶连翘中的蒽衍生物，再用吸附树脂，结合硅胶层析法把金丝桃素分离出来，得到含量为4.26％的金丝桃素产品；有的文献介绍用95％乙醇作为溶剂来提取金丝桃甙，浓缩时加入少量(NH₄)₂SO₄，在真空度为34～8kPa的条件下浓缩，采用喷雾干燥的方法得到，也可以用文献介绍的其它方法提取得到。

所述的药物组合物中赖氨酸盐酸盐含量为95％以上。

所述的药物组合物做成的制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、合剂、糖浆剂。

本发明的药物组合物的生产方法如下：

1、片剂的生产方法：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐，与赋形剂制成颗粒干燥，加入崩解剂、润滑剂，压片，或直接包装，或包糖衣，或包薄膜衣即得到产品。

以上片剂所述的赋形剂为淀粉及其衍生物、糊精、磷酸氢钙等；所述的崩解剂为羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素等；所述的润滑剂为硬脂酸镁等；所述的包糖衣材料为蔗糖、滑石粉、明胶、色素、川蜡等；所述的薄膜包衣材料为胃溶型水、醇包衣材料等。其中赋形剂、崩解剂、润滑剂、包衣材料用量的重量含量分别为：5～75％、0.5～20％、0.5～2.0％、2～45％。

2、胶囊剂的生产方法：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐加入赋形剂，和崩解剂并使之干燥，然后装入胶囊中，得到产品。

以上制备胶囊所述的赋形剂为淀粉及其衍生物、磷酸氢钙、硬脂酸镁、微分硅胶等。重量20～80％。

3、丸剂的生产方法：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐加入赋形剂，制丸。①制成浓缩丸；②加入赋形剂重量10～100％、蜜糖，制成水蜜丸、大蜜丸、浓缩丸。

4、颗粒剂的生产方法：在上述生产得到的浓缩液中加入赋形剂，并制成颗粒，使之干燥，得到产品。

加入赋形剂的成分和含量：蔗糖50～95％、乳糖50～90％、糊精50～70％。

5、合剂的生产方法：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐与矫味剂、防腐剂溶液混合均匀，即得到产品。

加入的矫味剂及其含量：蔗糖(或蜜糖)10～60％、防腐剂山梨酸钾0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％。

6、糖浆剂的生产方法：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐与蔗糖、防腐剂溶液混合均匀，即得到产品。

加入的蔗糖量为60～70％、防腐剂山梨酸钾0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％。

本发明药物组合物的抗炎作用机理以及其的突出实质性特点和显著的进步为：

贯叶连翘为藤黄科金丝桃属(Hyprzeum L)植物贯叶连翘(Hypericum perforatumLinn，EHPL)的全草，它主要被用于抗抑郁、收敛止血、治吐血、外伤出血、肿毒及止痛等症。近年来国外的研究发现，提取物中金丝桃素是贯叶连翘中的主要有效成分，可以治疗甲型肝炎、乙型肝炎、风湿骨痛等。有的文献介绍，金丝桃素还是一种有前途的内源性光敏剂，可应用于肿瘤的光化学诊断与治疗，具有显著的抗DNA、RNA病毒的作用。

赖氨酸盐酸盐为L-赖氨酸，别名L-己氨酸、L-松氨酸、L-2，6-二氨基己酸的盐酸盐，外观为白色或近白色、可自由流动的结晶性粉末，无肉眼可见杂质，赖氨酸盐酸盐通常较稳定，高温下易结块，相对湿度60％以下稳定，60％以上则生成二水合物，碱性条件及直接在还原糖存在下加热则分解，易溶于水，水溶液呈中性至微酸性，与磷酸、盐酸、氢氧化钠、离子交换树脂等一起加热，能起到外消旋作用。

本发明人还经过检索，了解贯叶连翘国内外的研究和治疗疾病的进展情况，并检索到有关贯叶连翘的公开文献有以下一些：1、“国产贯叶连翘化学成分的研究”，殷志琦叶文才，(中国药科大学)《中国药科大学学报》。2002，33(4)【文摘】对我国贵州产贯叶连翘的化学成分进行了较系统的化学研究。利用各种色谱技术进行分离纯化，经理化常数和波谱分析等进行结构鉴定。分离得到8个化合物：槲皮素(quercetin，I)，皮苷(quercitrin，II)，山萘酚(kaempferol，III)，1，7-二羟基山酮(1，7-dihydroxyxanthone，IV)，kielcorin(5-hydroxymethyl-6-guaiacyl-2，3：3’，2’，4’-methoxy-xanthone-1，4-dioxane，V)，大黄素(emodin，VI)，2，5-二甲基-7-羟基色原酮(2，5-dimethyl-7-hydroxychromone，VII)，香草酸(vanillic acid，VIII)。结论：化合物IV，VII和VII为首次从贯叶连翘中分离得到。2、“贯叶连翘提取物抗抑郁作用研究”作者，徐静、蔡爽等(沈阳药科大学、中国医科大学附属第一临床医院)，《中药药理与临床》。2002，18(5)，【文摘】目的：研究贯叶连翘提取物对小鼠的抑郁作用。方法：选取了强迫小鼠游泳实验，小鼠尾悬吊应激实验，拮抗利血平所致的抑制症状等实验指标。结果：贯叶连翘提取物150mg/kg，300mg/kg显著缩短迫游泳小鼠及尾悬吊小鼠的不动时间；显著拮抗利血平所致的体温下降作用和小鼠眼睑下垂作用。结论：贯叶连翘提取物具有一定的抗抑郁作用。3、“贯叶连翘中的新抗真菌黄酮苷”，作者，卢艳花张臻等(南京师范大学、南京大学)《植物学报》。2002，44(6)。【文摘】从贯叶连翘(Hypericum perforatum L.)地上部分的80％乙醇提取物中分离得到1个新的黄酮苷和6个已知黄酮类化合物。采用红外光谱，紫外光谱，质谱和核磁共振光谱等波谱技术测得新黄酮苷的结构为6″-O-乙酰基槲皮素-3-O-β-D—阿洛糖苷(1，6″-O-acetyl quercetin3-O-β-D-alloside)，6个已知化合物分别被鉴定为槲皮苷(quercitrin)，金丝桃苷(hyperoside)，扁蓄苷(avicularin)，芦丁(rutin)，槲皮素(quercetin)和山萘酚(kaemfero10。体外抗真菌活性实验表明，新黄酮苷(1)，槲皮苷和槲皮素对植物病原菌Helminthosporium sativum Pamel King et Bakke具有一定的抑制作用，三者的最小抑制浓度(MIC)分别为：25，50和50μg/mL。另外，1和槲皮苷对禾赤色镰孢霉(Fusarium graminearum Schw.)的生长也有抑制作用(MIC值均为100μg/mL)。4、“贯叶连翘活性成分研究新进展”，李宏、姜怀春等(武汉大学、重庆商学院)《中草药》。2001，32(7)。【文摘】介绍了贯叶连翘的活性成分，抗抑郁、抗肿瘤、抗病毒等药理作用和副作用的研究新进展。5、“贯叶连翘的研究进展与可持续发展对策”，李会宁王存莲(汉中师范学院)《汉中师范学院学报：自科版》。2000，18(1)【文摘】贯叶连翘除作为传统的中药材入药外，它的活性成分在治疗抑郁症，肝炎和艾滋病以及抗癌等方面具有重要的利用前景而被广泛关注。本文综述了贯叶连翘的生药显微鉴定特征，有效成分的研究，药理和临床试验等方面的研究进展。同时探讨了可持续发展的对策。6、“贯叶连翘的生药学研究”，雷国莲王继涛(陕西中医学院)《陕西中医学院学报》。1999，22(6)。【文摘】为寻找和研究新而有效，无毒，安全可靠，非麻醉性的特殊性镇痛药，作者对秦岭地区资料十分丰富，且富含金丝桃甙的植物贯叶连翘首次作了为系统的生药学研究，为该药的开发与利用提供可靠的鉴定和研究资料。7、“金丝桃素的研究进展”，梁巧丽高宏成(北京大学)，《中草药》。1999，30(9)。【文摘】综述金丝桃素在抗抑郁，抗病毒，对癌症的光化学治疗，免疫等方面的最新研究成果，为开发新药提供参考。

赖氨酸极其衍生物单独治疗疾病在中国科技期刊和在中国专利中有以下一些公开的文献：1、【题名】赖氨酸茶碱治疗支气管哮喘及喘息性支气管炎的临床观察【刊名】临床内科杂志。1995，12(4)【文摘】作者采用双盲法对照研究口服赖氨酸茶碱和氨茶碱治疗支气管哮喘及喘息性支气管炎的疗效及副作用，结果表明：赖氨酸茶碱平喘、止咳及改善小气道痉挛作用与氨茶碱相似，且副作用比氨茶减小，是一种较好的支气管扩张药；2、【题名】苄达赖氨酸滴眼液对实验性白内障的治疗作用观察【刊名】眼科新进展。1997，17(3)；3、【题名】L-赖氨酸对大鼠脑损伤的作用【刊名】青岛大学医学院学报。2001，37(4)。【文摘】①目的研究L-赖氨酸对大鼠闭合性脑损伤的作用。②方法采用落体法致大鼠闭合性脑损伤，伤后立刻一次性腹腔注射L-赖氨酸，观察L-赖氨酸对脑损伤大鼠脑水肿、病死率的影响；采用光镜下特定区域坏死神经元计数方法，观察L-赖氨酸对皮质及海马CA-1神经元损害的作用。③结果L-赖氨酸组(621.5mg/kg及310.8mg/kg)与对照组(NS组)比较，能显著减少相关脑区变性、坏死神经元的数量(H＝10.35，13.84，t＝2.16～9.25，P＜0.05，0.01)，显著减轻脑水肿(F＝3.52，q＝4.04～11.37，P＜0.01)，同时621.5mg/kg L-赖氨酸能显著降低脑损伤后大鼠的病死率(P＝0.009)。④结论L-赖氨酸对脑损伤有一定的保护作用。4、中国专利<申请号>01111316<公告号>1365665<发明名称>用于与细胞外基质退化相关疾病的含有抗坏血酸盐和赖氨酸的药物组合物<文摘>公开了一种预防和治疗与细胞外基质降解有关的疾病或病态如包括但不限于退化性疾病，特别是动脉粥样硬化、癌症、感染或其他炎性疾病的组合物，包含赖氨酸、脯氨酸、抗坏血酸盐及其衍生物和合成的类似物和维生素、前维生素和微量元素。5、中国专利<申请号>96116212<发明名称>一种治疗脑血管病的药物<文摘>本发明公开了一种抗脑血管病新药——苏脑片，主要由丹皮酚、川芎嗪、赖氨酸、珍珠粉、维生素E等组成，它能改善脑梗塞后脑血流量，治疗各种原因引起的缺血性脑血管病以及颅脑外伤后出现的意识障碍等各种综合症。6、中国专利<申请号>95109783<授权公告日>2000年05月03日<发明名称>一种治疗颅脑外伤及其综合症的药物组合物，本发明是一种治疗颅脑外伤及其综合症的药物组合物，其主要成分是盐酸赖氨酸、维生素B6、维生素B1和葡萄糖酸钙。6、中国专利<申请号>93103380<发明名称>L-赖氨酸盐酸在制备止血药物中的应用<文摘>本发明公开了一种止血新药(健身素颗粒剂)，这种止血新药  的主要成分是L-赖氨酸盐，用这种止血药物能治疗人体某些器官出血，如子宫异常出血、手术后异常出血，咯血，尿血等，从而开拓了L-赖氨酸的新用途。7、中国专利<申请号>93102915<发明名称>L-赖氨酸盐酸盐用于制备治疗颅脑外伤药物的应用<文摘>本发明提供了L-赖氨酸及其盐类的新用途，即用L-赖氨酸治疗颅脑损伤的药物，它对治疗颅脑受机械性损伤、脑血管病、大脑发育不全、更年期综合症的有效率达到9 0％以上，进一步拓宽了L-赖氨酸的新用途。

其中中国专利<申请号>95109783、93103380、93102915是本发明人(原单位：广西南宁邕江制药厂)的发明创造。

从上述文献了解到，贯叶连翘在治疗某些疾病方面得到了证明，尤其是抗抑郁作用的研究较多，但未公开其使用方法、也未见有贯叶连翘提取物与其它药物配成组合物的公开文献报道；赖氨酸在治疗颅脑损伤、治疗人体某些器官出血、改善脑梗塞后脑血流量等方面也有了较多研究，并已经形成药物产品在市场上销售，但也未发现赖氨酸在抗炎方面的药用报道，也未见将贯叶连翘和赖氨酸组合成药物的公开文献报道。

本发明人在对贯叶连翘和赖氨酸组合成药物进行研究的过程中对其药理学、药效学和临床试验，发现该药物组合物对二甲苯所致小鼠耳肿胀、棉球腋下埋藏诱发肉芽组织增生均有不同程度的抑制作用，但对急性炎症有非常显著性意义，抑菌作用试验结果提示该药对一些病菌如金黄色葡萄球菌有抑制作用；对急性炎症、慢性增生性炎症作用呈正相关。认为的作用机理可能与其抗炎、抑菌、抗菌作用及抗感染作用有关。

本发明的突出的实质性特点和显著的进步为：

1、安全性

从公开文献中我们已经了解到，贯叶连翘提取物的毒理工作已在小鼠，大鼠和犬等动物身上进行了长达26星期的试验。最大试验剂量为5000mg/kg，最初不耐受剂量为每日900mg/kg。LD₅₀大于最大剂量。所有试验末显示有基因毒和诱变作用。在13个男性正常人每日服用900，1800和3600mg贯叶连翅提取物试验中，每日900mg是大多数临床试验采用的安全有效剂量。在我们进行的临床试验中，也证明了人服用贯叶连翘提取物的安全性。

2、镇痛和消炎作用的有效性

本发明的贯叶连翘提取物与赖氨酸盐酸盐组合后有明显的镇痛作用，并且部分减轻甲醛引起的水肿症状。而单独使用贯叶连翘提取物或单独使用赖氨酸盐酸盐达不到复合后的效果。

3、对人体的其它辅助治疗效果

与赖氨酸盐酸盐复配后，显示出该药物组合物不仅具有镇痛和消炎作用，而且还有抗抑郁、抗肿瘤的效果，还可以补充人体所缺乏的部分维生素。

4、本发明对急性炎症和以肉芽组织增生为主的慢性炎症，均有显著抑制作用，还能显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性。

具体实施方式

实施例1

取贯叶连翘提取物500g，赖氨酸盐酸盐500g(其中贯叶连翘提取物中金丝桃素含量2-5％，赖氨酸盐酸盐含量为95％以上)，与5～75％淀粉或者淀粉衍生物、糊精、磷酸氢钙混合，制成颗粒，干燥，加入0.5～20％羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、润滑剂0.5～2.0％硬脂酸镁，压片，或直接包装，或包糖衣，或包薄膜衣即得到产品。

实施例2

取贯叶连翘提取物750g，赖氨酸盐酸盐250g，与5～75％淀粉或者淀粉衍生物、糊精、磷酸氢钙混合，制成颗粒，干燥，加入0.5～20％羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、润滑剂0.5～2.0％硬脂酸镁，压片，或直接包装，或包糖衣，或包薄膜衣即得到产品。

实施例3

取贯叶连翘提取物800g，赖氨酸盐酸盐200g，与5～75％淀粉或者淀粉衍生物、糊精、磷酸氢钙制成颗粒，干燥，加入助流剂微分硅胶，装胶囊，即得到产品。

实施例4

取贯叶连翘提取物800g，赖氨酸盐酸盐200g，与5～75％淀粉或者淀粉衍生物、糊精、磷酸氢钙制成颗粒，干燥，加入助流剂微分硅胶，装胶囊，即得到产品。

实施例5

取贯叶连翘提取物700g，赖氨酸盐酸盐300g，与赋形剂蔗糖100g、乳糖100g、糊精300g制成浓缩丸、水蜜丸、大蜜丸、即得到产品。

实施例6

取贯叶连翘提取物650g，赖氨酸盐酸盐350g，30g，与赋形剂蔗糖200g、乳糖100g、糊精200g制成浓缩丸、水蜜丸、大蜜丸、即得到产品。

实施例7

取贯叶连翘提取物800g，维生素B1 40g，维生素B2 60g，维生素B6 100g，加入蔗糖500g、糊精500g，制成颗粒，干燥，得到产品。

实施例8

取贯叶连翘提取物750g，赖氨酸盐酸盐250g，与蔗糖10～55％、防腐剂山梨酸钾0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％混合，制成合剂。

实施例9

取贯叶连翘提取物650g，赖氨酸盐酸盐6350g，与蔗糖量为60～70％、防腐剂山梨酸钾0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％合并，制成糖浆剂。

本发明有关临床试验、药理、药效学情况：

一、贯叶连翘提取物和维生素B复方的镇痛

试验单位，北京大学医学部神经病理研究室(国家药物临床试验单位)

试验时间：2002年9月-2003年1月

摘要：目的，了解贯叶连翘摇提取物和盐酸赖氨酸复方的抗炎作用。方法，采用小鼠耳壳二甲苯性炎症法、小鼠滤纸片诱发肉芽肿法和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高法。结果，赖金丝可以显著抑制小鼠耳肿胀，抑制肉芽组织增生，降低腹腔毛细血管通透性。结论，赖金丝可以抑制急性炎症，其作用机制可能与抑制毛细血管通透性有关；可以抑制肉芽肿组织增生。

关键词：贯叶连翘提取物；赖氨酸；赖金丝(贯叶连翘提取物和赖氨酸的组合物)；抗炎

贯叶连翘(Hypericum Perforatum L，HPL)又名圣约翰草(St.John’swort)，为多年生连翘属植物，有效成份有金丝桃素(hypericin)贯叶金丝桃素(hyperforin)伪金丝桃素(pseudohrpericin)其提取物在欧洲(尤其是德国)广泛用于轻中度抑郁症的治疗，近年来对其抗病毒、抗菌和抗炎镇痛作用的研究逐渐增多。赖氨酸是一种必需氨基酸，具有抗单纯疱疹病毒和带状疱疹病毒作用。另外，赖氨酸参与能量代谢，补充一定量赖氨酸可以改善机休的营养状态。本实验把盐酸赖氨酸和贯叶连翘提取物按正交设计原理以不同比例配伍，进行抗单纯疱疹病毒、带状疱疹病毒和镇痛试验研究，结果显示剂量相同时贯叶连翘提取物和赖氨酸的组合物(赖金丝)的抗病毒及镇痛效果最理想，本研究是对赖金丝的抗炎作用进行研究。

1材料

1.1试验药物与试剂

贯叶连翘提取物(EHPL，广西南宁邕江药业有限公司提供，批号：1605796，金丝桃素含量30‰，棕色瓶避光保存)盐酸赖氨酸(lysine hydroch loride，广西南宁邕江药业有限公司生产)，吲哚美辛(indomethacin，石家庄制药集团欧意药业有限公司生产)，羧甲基纤维素钠(CMC，中国医药上海化学试剂站生产)，阿司匹林(aspirin，山东新华制药股份有限公司生产)，醋酸(acetic acid，北京化工厂生产)。

贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸按1∶1；1∶2；2∶1等几种形式混合后，用0.25％CMC制成所需浓度的混悬液，吲哚美辛及阿司匹林均研磨成细粉后用0.25％CMC制成混悬液。对照组用等容积0.25％CMC。

1.2试验动物ICR小鼠，雌雄各半，18～22g，自由食水，由北京大学医学部试验动物中心提供，合格证号SCXKII-0004。

1.3试验仪器打孔器，AB104-N型电子天平(上海Mettler-Toledo仪器公司)，手术器械，HH.BII420型烘干箱(天津市中环科技开发公司)，注射器，TU-1800型721分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)。

2试验方法

试验分组和给药  小鼠50只随机分为5组，每组10只，分别为：赖金丝500mg/kg、250mg/kg、125mg/kg吲哚美辛10mg/kg或阿司匹林300mg/kg，对照组给予等容量的0.25％CMC(ig，吲哚美辛组ip给药)，每天一次，连续给药7天。

二甲苯性炎症  连续给药7天，末次给药后一小时，将30ul二甲苯涂于小鼠右耳，两侧涂匀，左耳作为对照。两小时后处死动物，将左右两耳剪下，用直径6mm打孔器在两耳相同部位打孔，将取下的耳片在天平上称重，以左右两耳片重量之差为肿胀程度指标⁽⁴⁾。

滤纸片诱发肉芽肿  小鼠用戊巴比妥钠50mg/kg麻醉后，下腹部消毒，沿正中线剪开皮肤，分离皮下组织，于左右腹股沟皮下各埋入重量约2.7～2.8mg的灭菌滤纸片(直径为6mm)，缝合皮肤，术后12h开始给药，连续7天，末次给药后12h处死动物，剥出周围已包裹肉芽组织的滤纸片，在60℃烘箱干燥24h后称量，减去原有纸片的重量，即为肉芽组织净重。以mg(肉芽肿重)/10g(体重)，作为肉芽肿增殖指数。比较组间差异并计算抑制率。

对腹腔毛细血管通透性的影响连续给药7天，每天一次，于末次给药后1h，尾静脉注射1％Evan’s蓝0.1ml/10g，随即ip 0.6％醋酸，0.1ml/10g，20min后处死动物，用6ml NS分3次冲洗腹腔，收集冲洗液置于预先加入0.1ml 0.1N NaOH的试管中，用NS补充至10ml，混匀静置2h，取上清液于725分光光度计590nm测OD值，以OD值表示Evan’s蓝含时。

统计方法  所有结果均以x±s表示，用Excel软件进行双尾t检验，组间对照，p＜0.05为显著性差异。

3.试验结果

3.1赖金丝对小鼠耳壳二甲苯致炎的影响

与CMC组相比，赖金丝高(500mg/km)、中(250mg/kg)、低(125mg/kg)剂量对小鼠二甲苯性耳炎症均有显著抑制作用，中剂量(250mg/kg)组与对照组相比抑制率(50.69％)最高，但不及ip吲哚美辛组(75.35％)的抗炎效果。结果见表1。

表1 赖金丝对小鼠耳壳二甲苯性炎症的影响(x±s，n＝10)组别         剂量              肿胀度(mg)        抑制率(％)

      (mg/kg，ig)CMC         等容量             10.18±3.27吲哚美辛    10(ip)             2..51±3.32***     75.35***

        125                6.49±1.81**       36.25**赖金丝      250                5.02±2.50***      50.69***

        500                5.32±3.25**       47.74**

与对照组相比**p＜0.01；***p＜0.001。

3.2赖金丝对小鼠纸片透发肉芽肿的影响

与CMC组相比，赖金丝高(500mg/kg)、中(250mg/kg)、低(125mg/kg)剂量，对小鼠纸片诱发的肉芽肿均有显著抑制作用，各组之间无统计学差异，抑制效果较阿司匹林组为佳。结果见表2。

3.3赖金丝对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

与CMC组相比，赖金丝高(500mg/kg)、中(250mg/kg)剂量，能显著降低小鼠腹腔毛细血管通透性，减少Evan’s蓝渗出量，但抑制率低于阿司匹林。结果见表3。

表2  赖金丝对小鼠纸片诱发肉芽肿的影响(x±s，n＝10)组别          剂量         肉芽肿增殖指数    抑制率(％)

       (mg/kg，ig)      (mg/10g)CMC          等容量        15.65±4.38阿司匹林      300          11.56±3.04*       26.14*

          125          11.09±4.34*       28.64*赖金丝        250          11.14±4.25*       28.81*

          500          11.17±2.89*       29.22*

与对照组相比*p＜0.05。

表3  赖金丝对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(x±s，n＝10)组别         剂量           OD           抑制率(％)

      (mg/kg，ig)CMC         等容量         0.134±0.041阿司匹林      300          0.073±0.018**     45.49**

          125          0.101±0.030       24.18赖金丝        250          0.094±0.036*      29.97*

          500          0.096±0.033*      28.20*

与对照组相比*p＜0.05；**p＜0.01。

4.讨论：

贯叶连翘提取物(EHPL)的抗抑郁作用已为人们所公认，与经典抗抑郁药相比副作用较少，作用温和，因此许多国家把其作为非处方药，甚至作为保健药使用。但近年来其抗病毒、镇痛和抗炎作用也日益引起人们关注。

实验证明EHPL的冷冻干燥制品能抑制炎症和白细胞浸润。EHPL可以显著抑制角叉菜胶引起的大鼠足肿胀⁽¹²⁾。EHPL的抗炎作用，可能与其中的贯叶金丝桃素抑制5-脂氧化酶和COX-1(环氧化酶1)的活性，进而抑制了炎症介质PGE₂的生成。

本实验室的前期工作已证实贯叶连翘提取物(含金丝桃素30‰)和盐酸赖氨酸配伍，具有理想的镇痛和抗疱疹病毒作用。鉴于患者单纯疱疹和带状疱疹发作的主要症状是疼痛和急性炎症，所以本研究设计了几种炎症实验，观察赖金丝的抗炎效果。结果表明，赖金丝对以血浆蛋白渗出为主的急性炎症和以肉芽组织增生为主的慢性炎症，均有显著抑制作用，还能显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性。

初步印象，赖金丝具有一定镇痛抗炎作用，并具有抑制单纯疱疹病毒和带状疱疹病毒效果，两种成份均无明显副作用，有可能会成为一种治疗疱疹病毒感染的理想药物。

二、药理研究

北京大学医学部药理学系和神经病理研究室于2002年9月-2003年1月还对本发明的药物组合物进行了药理研究，药理研究共做了以下几个项目：

1、贯叶连翘提取物、盐酸赖氨酸组合物使用对小鼠神经行为的影响，种属为ICR，雌雄各半，共60只，观察灌胃给药是否对小鼠中枢神经系统有抑制作用，实验结果表明高剂量(2000mg/kg)和中剂量(1000mg/kg)对小鼠一般神经精神行为无影响。

2、贯叶连翘提取物、盐酸赖氨酸组合物使用对小鼠自主活动的影响，种属为ICR，雌雄各半，共60只，观察灌胃给药是否对小鼠中枢神经系统有抑制作用，实验结果表明高剂量(2000mg/kg)和中剂量(1000mg/kg)对小鼠有明显镇静作用。

3、贯叶连翘提取物、盐酸赖氨酸组合物使用对小鼠肠蠕动的影响，种属为ICR，雌雄各半，共60只，用CMC比较，观察灌胃给药是否对小鼠肠道功能有影响，实验结果表明高剂量(2000mg/kg)和中剂量(1000mg/kg)对小鼠胃肠没有明显影响。

4、贯叶连翘提取物、盐酸赖氨酸组合物对大鼠LD₅₀，种属为SD大鼠，雌雄各半，共50只，分成3组，对照组用0.25％的CMC，观察灌胃给药后的死亡率，实验结果表明最大剂量(14000mg/kg)雌性组死亡90％，雄性20％，和中剂量(7072mg/kg)死亡率为0。

5、贯叶连翘提取物、盐酸赖氨酸组合物使用对小鼠抗电惊厥的影响，种属为ICR，雌雄各半，共60只，用CMC比较，用110V交流电3秒致电惊厥，观察灌胃给药是否对小鼠抗最大电惊厥有无明显影响，实验结果表明高剂量(2000mg/kg)和中剂量(1000mg/kg)对小鼠抗最大电惊厥无。

6、贯叶连翘提取物、盐酸赖氨酸组合物使用对家猫心率和心电图的影响，种属为家猫，雌雄不拘，共34只，对照组用0.25％的CMC，观察灌胃给药对家猫心率和心电图的变化，实验结果表明高剂量(600mg/kg)和中剂量(300mg/kg)对家猫心率和心电图没有明显变化。

7、贯叶连翘提取物、盐酸赖氨酸组合物使用对家猫呼吸的影响，种属为家猫，雌雄不拘，共34只，对照组用0.25％的CMC，观察灌胃给药对家猫呼吸频率和呼吸幅度的变化，实验结果表明高剂量(600mg/kg)和中剂量(300mg/kg)对家猫心率和心电图没有明显变化。

8、贯叶连翘提取物、盐酸赖氨酸组合物使用对家猫血压的影响，种属为家猫，雌雄不拘，共34只，对照组用0.25％的CMC，观察灌胃给药对家猫呼吸频率和呼吸幅度的变化，实验结果表明，观察240分钟，高剂量(600mg/kg)和中剂量(300mg/kg)对家猫血压没有明显变化。

Claims (9)

1、一种具有抗炎作用的药物组合物药物组合物，其特征在于它包括贯叶连翘提取物和赖氨酸盐酸盐，其成分和重量含量如下：

贯叶连翘提取物        50-80％

赖氨酸盐酸盐          20-50％

2、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：贯叶连翘提取物的金丝桃含量为2-5％；赖氨酸盐酸盐含量为95％以上。

3、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述的药物组合物可以做成片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、合剂、糖浆剂。

4、一种具有抗炎作用的药物组合物的生产方法，其特征在于：该药物组合物做成片剂的生产方法是：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐，与赋形剂制成颗粒干燥，加入崩解剂、润滑剂，压片，或直接包装，或包糖衣，或包薄膜衣即得到产品；

所述的赋形剂为淀粉及其衍生物、糊精、磷酸氢钙等；所述的崩解剂为羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素等；所述的润滑剂为硬脂酸镁等；所述的包糖衣材料为蔗糖、滑石粉、明胶、色素、川蜡等；所述的薄膜包衣材料为胃溶型水、醇包衣材料等。其中赋形剂、崩解剂、润滑剂、包衣材料用量的重量含量分别为：5～75％、0.5～20％、0.5～2.0％、2～45％。

5、一种具有抗炎作用的药物组合物的生产方法，其特征在于：该药物组合物做成胶囊剂的生产方法是：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐加入赋形剂，和崩解剂并使之干燥，然后装入胶囊中，得到产品；

所述的制备胶囊所述的赋形剂为淀粉及其衍生物、磷酸氢钙、硬脂酸镁、微分硅胶等。重量20～80％。

6、一种具有抗炎作用的药物组合物的生产方法，其特征在于：该药物组合物做成丸剂的生产方法：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐加入赋形剂，制丸。①制成浓缩丸；②加入赋形剂重量10～100％、蜜糖，制成水蜜丸、大蜜丸、浓缩丸。

7、一种具有抗炎作用的药物组合物的生产方法，其特征在于：该药物组合物做成颗粒剂的生产方法：在上述生产得到的浓缩液中加入赋形剂，并制成颗粒，使之干燥，得到产品；

所述的颗粒剂的赋形剂的成分和含量：蔗糖50～95％、乳糖50～90％、糊精50～70％。

8、一种具有抗炎作用的药物组合物的生产方法，其特征在于：该药物组合物做成合剂的生产方法：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐与矫味剂、防腐剂溶液混合均匀，即得到产品。

所述的合剂的矫味剂及其含量：蔗糖(或蜜糖)10～60％、防腐剂山梨酸钾0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％。

9、一种具有抗炎作用的药物组合物的生产方法，其特征在于：该药物组合物做成糖浆剂的生产方法：将贯叶连翘提取物、赖氨酸盐酸盐与蔗糖、防腐剂溶液混合均匀，即得到产品；

所述的蔗糖加入量为60～70％、防腐剂山梨酸钾0.1～1％、尼泊金乙酯0.1～0.3％。