CN1445546A - 鼻咽癌早期诊断试剂盒 - Google Patents

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CN1445546A
CN1445546A CN 03113530 CN03113530A CN1445546A CN 1445546 A CN1445546 A CN 1445546A CN 03113530 CN03113530 CN 03113530 CN 03113530 A CN03113530 A CN 03113530A CN 1445546 A CN1445546 A CN 1445546A
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nasopharyngeal
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汪慧民
李满枝
李端
简少文
刘庆伦
郑美莲
张玲
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Abstract

本发明涉及一种鼻咽癌早期诊断试剂盒。它由2－4块冻干固相捕捉抗原板块、2－4块抗人IgA抗体板块、2－4块联苯二胺板块以及唾液收集器所组成，捕捉抗原板块上含有以EBV基因组中BMLF1编码框内，属反式激活蛋白的一段短肽：AGRSTRKQARQERF。本发明适用于临床与鼻咽癌高发现场，为鼻咽癌早期诊断与预防提供了特异、简便而快速的有用工具。

Description

鼻咽癌早期诊断试剂盒
[技术领域]
本发明涉及一种与鼻咽癌相关的EB病毒抗原生物学特性而建立的分子水平的诊断试剂盒，适用于临床与鼻咽癌高发现场，为鼻咽癌早期诊断与预防提供了特异、简便而快速的有用工具。
[背景技术]
我国人群普遍感染EB病毒(Epstein-Barr Virus，EBV)，由于EBV具有多种结构和特异性抗原，包括壳抗原(VCA)、早期抗原(EA)、核抗原(EBNA)和膜抗原(MA)等，在与EBV有关的不同疾病中，显现出不同的反应抗体，这些不同的抗体反应模式，反映了EBV急性、慢性、恢复期、持续感染或既往感染等状况。检测这些抗原的相应抗体反应，有助与疾病的诊断和治疗。
现已公认EBV是鼻咽癌的重要病因之一，大量研究证实鼻咽癌患者体液中EBV-IgA抗体增高是其特征。鼻咽癌患者血清中含有较高滴度的IgA/VCA、IgA/EA抗体和抑制DNA酶活性的抗体，且抗体滴度随病情发展而升高。故在鼻咽癌高发地区和临床均以检测EBVIgA/VCA、EA和DNA抗体作为鼻咽癌早期发现、预后判断以及疗效观察的有用指标。
由于鼻咽癌治疗5年生存率徘徊在50％左右，鼻咽癌的早诊和治疗是提高患者生存率，改善生存质量的重要手段之一。而鼻咽癌早期症状不明显，原发部位隐蔽，不易发现，病程发展迅速，近30年临床与现场检验均用免疫组化法，带有一定主观性，耗时，耗眼力和繁琐。因此寻找敏感性高、特异性强以及安全、简便、经济的早诊方法是急待解决的课题。
[发明内容]
多年实践证明IgA/VCA诊断鼻咽癌的特异性低于IgA/EA，但后者敏感性低。研究表明，EA有弥漫性(diffusion，D)和限制性(restriction，R)两种抗原，鼻咽癌以EA-D为主，对其鼻咽癌前瞻性诊断亦有意义。
在检测在受试者的血清和唾液中相应IgA/EA抗体反应，经反复验证发现在BMLF1读码框架中一段基因的编码蛋白最适宜作为捕捉抗原，对诊断鼻咽癌具有较高的特异性和敏感性。
本发明由2-4块冻干固相捕捉抗原板块、2-4块抗人IgA抗体板块、2-4块联苯二胺板块以及唾液收集器所组成，捕捉抗原板块上含有以EBV基因组中BMLF1编码框内，属反式激活蛋白的一段短肽：AGRSTRKQARQERF。
本诊断试剂盒特异性和敏感性均高，性能稳定，使用简便，便于携带，肯定较以往的免疫组化法试剂盒优越。
[附图说明]
图1为本发明之结构示意图。
图2为鼻咽癌与正常人的唾液和血清EBV-IgA/EA-D检查的ROC曲线。
[具体实施方式]
参阅图1所示，本发明由2块冻干固相捕捉抗原板块(1)、2块抗人IgA抗体板块(2)、2块联苯二胺板块(3)以及唾液收集器(4)所组成，捕捉抗原板块(1)上含有属反式激活蛋白的一段短肽：AGRSTRKQARQERF，其量为40ug/块，将其包被在固体面(固相化)，抗人IgA抗体板块(2)的量为1.5uL/块，联苯二胺板块(3)的量为6.7mg/块。
捕捉抗原板块上的肽链已经过临床病理确诊为鼻咽癌患者的血清样本211份(例)，唾液159份(例)；健康者(献血员和正常体检者)血清174份(例)，唾液209份(例)；和鼻咽癌高危现场人群同一受试者的血清和唾液样本，各393份(例)的检测验证(结果见附表及图2)。表1ELISA检测样本对EBV-EA-D肽链反应的O.D值样本                                            EA-D
                 例数             x                   s血清：鼻咽癌病人     61               0.37749             0.21576
  健康献血者     87               0.24448             0.08386
  U检验                 U＝4.323            P＜0.0001唾液：鼻咽癌病人     64               0.5736              0.2170
  健康献血者     99               0.3947              0.2138
  U检验                 U＝5.170            P＜0.0001表2四会高危人群样本EB病毒抗体检测结果比较
                               血清                  唾液检测例数395           免疫酶法    H 3 标记    ELISA     ELISA
                 VCA     EA    DNA酶       EA-D       EA-D阳性病例             231     13    86          153        161阳性率(％)           58.48   3.29  21.78       38.73      40.75*注解：每一受试者样本均同时进行表中各项检测
现又进一步用于临床确诊为鼻咽癌患者唾液各100份(例)；共检测三次，经统计学验证其特异性和敏感性分别为：69.3％和77.5％；85.7％和83.3％；83.3％和75％。认为适合于临床诊断和现场人群筛查应用。由于是以唾液为样本，除采样较新颖外，又在人群中易于推广。

Claims (1)

1、一种鼻咽癌早期诊断试剂盒，其特征在于它由2-4块冻干固相捕捉抗原板块、2-4块抗人IgA抗体板块、2-4块联苯二胺板块以及唾液收集器所组成，捕捉抗原板块上含有以EBV基因组中BMLF1编码框内，属反式激活蛋白的一段短肽：AGRSTRKQARQERF。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN101313306B (zh) * 2005-09-22 2011-11-16 中国合成橡胶股份有限公司 用于鉴别鼻咽癌中的预后型亚类的基因表达谱

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN101313306B (zh) * 2005-09-22 2011-11-16 中国合成橡胶股份有限公司 用于鉴别鼻咽癌中的预后型亚类的基因表达谱
CN102346816A (zh) * 2005-09-22 2012-02-08 中国合成橡胶股份有限公司 用于鉴别鼻咽癌中的预后型亚类的基因表达谱
CN102346816B (zh) * 2005-09-22 2014-12-03 中国合成橡胶股份有限公司 用于鉴别鼻咽癌中的预后型亚类的基因表达谱

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