CN113777305A - 尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的应用 - Google Patents

尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113777305A
CN113777305A CN202010519825.XA CN202010519825A CN113777305A CN 113777305 A CN113777305 A CN 113777305A CN 202010519825 A CN202010519825 A CN 202010519825A CN 113777305 A CN113777305 A CN 113777305A
Authority
CN
China
Prior art keywords
urine
burn
monoadenosine
ribosyltransferase
diphosphate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010519825.XA
Other languages
English (en)
Inventor
张曼
王佶图
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Shijitan Hospital
Original Assignee
Beijing Shijitan Hospital
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Shijitan Hospital filed Critical Beijing Shijitan Hospital
Priority to CN202010519825.XA priority Critical patent/CN113777305A/zh
Publication of CN113777305A publication Critical patent/CN113777305A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/62—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating the ionisation of gases, e.g. aerosols; by investigating electric discharges, e.g. emission of cathode
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/91—Transferases (2.)
    • G01N2333/91091—Glycosyltransferases (2.4)
    • G01N2333/91142—Pentosyltransferases (2.4.2)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/40—Disorders due to exposure to physical agents, e.g. heat disorders, motion sickness, radiation injuries, altitude sickness, decompression illness
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供一种尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶[Mono (ADP‑ribosyl) transferase]及其多肽片段的应用，具体为尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在制备用于烧伤诊断、鉴别诊断、烧伤面积及程度评价、治疗效果评价、监测、预后评估及机理研究等制剂的应用。烧伤是日常生活中常见的重要创伤，每年每100万人中约有5000～100000人烧伤，据世界卫生组织统计，每年全球死于烧伤患者超过30万人，严重烧伤救治存活率仍处于较低水平。本发明通过研究证实，与健康人（正常对照组）相比，尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤患者中表达升高。可用于烧伤患者的各种目的应用检测。本发明发挥尿液标本获取无创、可大规模重复取样、保存方便的优势，利用尿液标本检测尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段。

Description

尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的 应用
技术领域
本发明涉及尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段的新用途，具体涉及尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在于烧伤诊断、鉴别诊断、烧伤面积及程度评价、治疗效果评价、监测、预后评估及机理研究等的应用。
背景技术
烧伤是指由于火焰、高温气体、灼热的固体或液体、放射线、电能、强酸强碱等化学物质所引起的人体皮肤、组织甚至深层脏器的损伤，是一种全身性综合性疾病。烧伤后创面组织大量坏死、感染、休克及凝血功能障碍等反应可引起机体发生一系列的病理生理学变化。不同程度的烧伤对人体有着不同的影响，严重的烧伤可对人体内环境造成破坏，使烧伤患者出现各系统复杂性的病理生理变化，相关的检测指标也会随着烧伤严重程度的不同随之出现相应的改变。及时检测这些指标的变化可为临床医生对于疾病的诊断，病情的判断，治疗方法的选择以及患者预后的评估等多方面提供有价值的参考依据。
但是，严重烧伤的病人皮肤完整性较差，血液学检测作为皮肤有创性检查在此类患者的临床应用中存在着诸多困难，反复的抽血检测还会加剧患者痛苦。尿液作为血液的超滤液蕴含着丰富的生物学信息，其采集过程具有无创便捷等优势，这在烧伤患者的检测中尤为明显。在尿液中寻找有助于烧伤诊断及反映病情变化的生物标志物，可提高烧伤患者的生活质量和依从性，减轻多次采血的痛苦，更好的为临床医生提供有利于疾病诊断和治疗的参考依据。
单腺苷二磷酸核糖基化转移酶[Mono (ADP-ribosyl) transferase, ART] 在单腺苷二磷酸核糖基化中起重要作用。腺苷二磷酸核糖基化(ADP—ribosylation)反应在生理和病理生理过程中扮演着重要角色，例如其可影响细胞信号传递、转录调节、DNA修复、基因稳定性维持以及细胞增殖分化、黏附迁移等多个生理病理过程。单腺苷二磷酸核糖基化是腺苷二磷酸核糖基化的一种类型。本研究烧伤患者尿液中单腺苷二磷酸核糖基化转移酶较健康人组出现表达上调，烧伤患者尿液中该蛋白含量增加。
与常用的临床血液样本相比，尿液可以完全无创、连续、大量收集；没有稳态调节，可累积更多种类、更大幅度的变化，机体的很多病理生理变化可能体现在尿液中。一些激素和细胞因子等分子量相对较小的蛋白多肽入血后，会很快被排泄进入尿液，这些蛋白和多肽在尿液中被检测到的概率比在血中大很多；尿液收集之前，尿中可能的蛋白降解过程已经完成，所以尿蛋白可在较长时间内保持稳定。为减轻烧伤患者多次采血的痛苦，本实验在前期方法学摸索的基础上，期望通过尿液蛋白或多肽研究，实现用无痛、方便、快捷、易重复的尿液检测辅助烧伤患者的诊断及病情监测，也为进一步尿液多肽检测试剂盒的研究奠定基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一种尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在制备用于烧伤诊断、鉴别诊断、烧伤面积及程度评价、治疗效果评价、监测、预后评估及机理研究等制剂的应用。
优选地，所述尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示(MKTGHFEIVT MLLATMILVD IFQVKAEVLD MADNAFDDEY LKCTDRMEIK YVPQLLKEEKASHQQLDTVW ENAKAKWAAR KTQIFLPMNF KDNHGIALMA YISEAQE）；或由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列衍生的，且与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列。
优选地，所述制剂为烧伤患者尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段检测试剂盒。
优选地，所述试剂盒包括抗原抗体反应的免疫方法及其试剂盒如能够特异性结合单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种。
优选地，所述检测方法包括直接检测单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段的质谱等方法及其相关试剂盒。
优选地，所述检测方法包括直接检测单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段的相关核酸检测等方法及其相关试剂盒。
优选地，所述试剂盒还包括选自下组的成分：固相载体，稀释液，对照品，标准品，质控品，检测抗体，第二抗体、第二抗体稀释液，发光试剂，洗涤液、显色液、终止液中的任意一种或几种的组合。
优选地，所述标准品包括单腺苷二磷酸核糖基化转移酶标准品、人源化标签抗体标准品；较佳地，所述质控品包括：单腺苷二磷酸核糖基化转移酶质控品、人源化标签抗体质控品；较佳地，所述固相载体包括：微粒、微球、玻片、试纸条、塑料珠、液相芯片、微孔板或亲和膜等以及同等功能的其他载体。
优选地，所述固相载体的材质为聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺、纤维素中的任意一种及具有类似功能的载体。
发明人首先收集了健康人、烧伤患者的尿液标本， 4000r/min离心5min后，吸取上清，采用Bradford法测定提取的蛋白浓度，进行SDS-PAGE酶解。尿液样本的Label-free质谱分析由OrbitrapFusion型质谱完成。将烧伤组和正常对照组在质谱中得到的数据进行定量计算。以蛋白表达量差异在1.5倍以上且经统计检验P<0.05作为参考标准筛选差异性多肽。然后发明人对具有统计学意义的差异性多肽进行鉴定，利用数据库检索得到差异蛋白单腺苷二磷酸核糖基化转移酶。
本发明通过研究证实与健康人相比，单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤患者的尿液中呈高表达，与临床诊断有较好的一致性。从而提出检测尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段可用于烧伤的辅助诊断或病情监测。
本发明发挥尿液标本获取无创、可大规模重复取样、保存方便的优势，利用尿液标本检测尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段。
为让本发明的上述和其它目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合附图，作详细说明如下。
附图说明
图1是尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤组及健康对照组中含量图。
具体实施方式
实施例1 尿液标本的收集与处理
选取烧伤患者作为烧伤组，选取同期健康体检者作为正常对照组。收集各组研究对象入院后的新鲜晨尿样本30ml，不能正常排尿者收集其早晨导尿管中尿液，置于干燥、洁净的容器内。将收集的尿液标本4000r/min离心5min后，吸取上清，每管2ml分装，-80℃冰箱保存。
实施例2 质谱分析和尿液多肽的筛选
对尿液样品蛋白提取，并对提取的蛋白浓度进行测定。尿液样本的质谱分析由OrbitrapFusion型质谱完成。将实验组和正常对照组在质谱中得到的数据进行定量计算。组间比较采用t-test进行差异分析，以蛋白表达量差异在1.5倍以上且经统计检验P<0.05作为参考标准筛选差异表达蛋白。
实施例3 差异多肽的鉴定及分析
使用的数据库为Uniprot_Homo数据库，产生的质谱原始文件采用MaxQuant软件处理，检索参数设置见表1。
Figure DEST_PATH_IMAGE001
与健康人相比，单腺苷二磷酸核糖基化转移酶在烧伤患者的尿液中高表达，如图1所示，单腺苷二磷酸核糖基化转移酶在正常对照组和烧伤组尿液中的表达有显著性差异。
虽然本发明已以较佳实施例披露如上，然其并非用以限定本发明，任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作些许的更动与改进，因此本发明的保护范围当视权利要求所界定者为准。
序列表
<110> 张, 曼
<120> 尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的应用
<130> 1
<140> 20PART
<141> 2020-05-10
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 107
<212> PRT
<213> Human Urine
<400> 1
Met Lys Thr Gly His Phe Glu Ile Val Thr Met Leu Leu Ala Thr Met
1 5 10 15
Ile Leu Val Asp Ile Phe Gln Val Lys Ala Glu Val Leu Asp Met Ala
20 25 30
Asp Asn Ala Phe Asp Asp Glu Tyr Leu Lys Cys Thr Asp Arg Met Glu
35 40 45
Ile Lys Tyr Val Pro Gln Leu Leu Lys Glu Glu Lys Ala Ser His Gln
50 55 60
Gln Leu Asp Thr Val Trp Glu Asn Ala Lys Ala Lys Trp Ala Ala Arg
65 70 75 80
Lys Thr Gln Ile Phe Leu Pro Met Asn Phe Lys Asp Asn His Gly Ile
85 90 95
Ala Leu Met Ala Tyr Ile Ser Glu Ala Gln Glu
100 105

Claims (9)

1.尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在制备用于烧伤诊断、鉴别诊断、烧伤面积及程度评价、治疗效果评价、监测、预后评估及机理研究等制剂的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；或由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列衍生的，且与SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述制剂为烧伤患者尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段检测试剂盒。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括抗原抗体反应的免疫方法及其试剂盒如能够特异性结合单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测方法包括直接检测单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段的质谱等方法及其相关试剂盒。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测方法包括直接检测单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段或其相关核酸检测等方法及其相关试剂盒。
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括选自下组的成分：固相载体，稀释液，对照品，标准品，质控品，检测抗体，第二抗体、第二抗体稀释液，发光试剂，洗涤液、显色液、终止液中的任意一种或几种的组合。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述标准品包括单腺苷二磷酸核糖基化转移酶标准品、人源化标签抗体标准品；较佳地，所述质控品包括：单腺苷二磷酸核糖基化转移酶控品、人源化标签抗体质控品；较佳地，所述固相载体包括：微粒、微球、玻片、试纸条、塑料珠、液相芯片、微孔板或亲和膜等以及同等功能的其他载体。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述固相载体的材质为聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺、纤维素中的任意一种及具有类似功能的载体。
CN202010519825.XA 2020-06-09 2020-06-09 尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的应用 Pending CN113777305A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010519825.XA CN113777305A (zh) 2020-06-09 2020-06-09 尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010519825.XA CN113777305A (zh) 2020-06-09 2020-06-09 尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN113777305A true CN113777305A (zh) 2021-12-10

Family

ID=78834450

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010519825.XA Pending CN113777305A (zh) 2020-06-09 2020-06-09 尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113777305A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113777314A (zh) 尿液踝蛋白1及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777305A (zh) 尿液单腺苷二磷酸核糖基化转移酶及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777315A (zh) 尿液泛素样蛋白isg15及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113804890A (zh) 尿液程序性细胞死亡6相互作用蛋白及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113804893A (zh) 尿液I型胶原蛋白α1链及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777306A (zh) 尿液果糖二磷酸醛缩酶b及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113804891A (zh) 尿液c反应蛋白及其多肽片段在烧伤中的应用
CN114113580A (zh) 尿液血栓调节蛋白及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113759123A (zh) 尿液软骨间层蛋白及其多肽片段在烧伤中的应用
CN114113621A (zh) 尿液鸟嘌呤核苷酸结合蛋白亚基α-13及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777317A (zh) 尿液主穹隆蛋白及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777331A (zh) 尿液激肽原-1及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113820485A (zh) 尿液碳酸酐酶3及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777313A (zh) 尿液维生素k依赖性蛋白s及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113804889A (zh) 尿液XII型胶原蛋白α1链及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777316A (zh) 尿液C4b结合蛋白α链及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113759121A (zh) 尿液免疫球蛋白κ可变区3D-7及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113804895A (zh) 尿液免疫球蛋白重链可变区3-7及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777304A (zh) 尿液纤维蛋白溶解酶原及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113804894A (zh) 尿液肿瘤坏死因子受体超家族成员19l及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113759125A (zh) 尿液子宫珠蛋白及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777303A (zh) 尿液凝血酶原及其多肽片段在烧伤中的应用
CN114113622A (zh) 尿液鸟嘌呤核苷酸结合蛋白G（s）亚单位α短亚型及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113777302A (zh) 尿液补体因子d及其多肽片段在烧伤中的应用
CN113759122A (zh) 尿液蛋白质z及其多肽片段在烧伤中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination