CN118141871A - 一种抗uvb损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液及其制备方法和应用 - Google Patents

一种抗uvb损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种抗UVB损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液及其制备方法和应用，属于中药技术领域。抗UVB损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液的制备方法，包括以下步骤：在鲜天麻中加入玉米淀粉水溶液，加热熟化后过滤，滤液即为所述鲜天麻玉米淀粉熟化液。本发明的鲜天麻玉米淀粉熟化液具有优异的抗UVB损伤的作用。并且本发明的方法可以同时提高鲜天麻玉米淀粉熟化液6种药效成分（天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷A）的提取率和熟化成品天麻中的6种药效成分（天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷A）的含量。

Description

一种抗UVB损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液及其制备方法和 应用
技术领域
本发明涉及中药技术领域，特别是涉及一种抗UVB损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液及其制备方法和应用。
背景技术
天麻是一种珍贵兰科属草本植物药材，含有多种药效成分，具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、抗抑郁、提高记忆力、头痛和保护神经等多种功效。天麻需要加工熟化后才能被服用，加工过程中产生大量熟化液，未得到利用而被废弃，造成资源浪费和环境污染。在产地加工过程中，人们只重视成品天麻的质量，而忽视鲜天麻的熟化液（FGE）的利用价值。
紫外线（UV）能促进人体维生素D的合成和钙吸收，但过量的紫外线辐射会造成皮肤光老化疾病、甚至癌变。紫外线分为短波紫外线（UVC）、中波紫外线（UVB）、长波紫外线（UVA）三个波段，其中UVA和UVB均可造成皮肤损伤，UVB具有更强的强度和穿透力，更易使皮肤内环境稳态失衡，皮肤暴露在UVB下，会产生大量活性氧，导致皮肤炎症、免疫调节、表皮增厚、皱纹、光老化等，造成氧化应激损伤，甚至还有可能引发皮肤肿瘤，严重影响人类健康。因此，亟需找到一种具有光保护作用的药物。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗UVB损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液及其制备方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
本发明的技术方案之一：一种抗UVB损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液的制备方法，包括以下步骤：
在鲜天麻中加入玉米淀粉水溶液，加热熟化后过滤，滤液即为所述鲜天麻玉米淀粉熟化液。
进一步地，所述鲜天麻和玉米淀粉水溶液的质量/体积比为1g:4~8mL；
所述玉米淀粉水溶液的浓度为0.5~4wt.%；
所述加热熟化的温度为80~120℃，时间为20~40min。
进一步地，所述鲜天麻和玉米淀粉水溶液的质量/体积比为1g:4mL；
所述玉米淀粉水溶液的浓度为1.0wt.%；
所述加热熟化的温度为120℃，时间为30min。
进一步地，所述鲜天麻玉米淀粉熟化液中的药效成分包括天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷A。
更进一步地，所述过滤包括采用4层纱布过滤。
本发明的技术方案之二：一种成品天麻的制备方法，包括以下步骤：将上述过滤后得到的熟化天麻在60℃下烘干，得到所述成品天麻。
本发明的技术方案之三：一种上述制备方法制备的鲜天麻玉米淀粉熟化液。
本发明的技术方案之四：一种上述鲜天麻玉米淀粉熟化液在制备抗UVB损伤的产品中的应用。
进一步地，所述产品包括外用制剂或口服制剂。
更进一步地，所述外用制剂包括护肤产品。
更进一步地，所述口服制剂包括胶囊、散剂、口服液、片剂、颗粒剂、丸剂或粉剂。
本发明公开了以下技术效果：
（1）本发明的鲜天麻玉米淀粉熟化液具有优异的抗UVB损伤的作用。并且本发明的方法可以提高鲜天麻玉米淀粉熟化液中的6种药效成分（天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷A）的提取率。
（2）采用本发明的方法可以提高鲜天麻熟化液6种药效成分的提取率，可以提高鲜天麻熟化后成品天麻中6种药效成分（天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷A）的含量，可用于天麻的加工。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1采用实验序号1~3的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图，其中，A~C分别为采用实验序号1~3的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；
图2为本发明实施例1采用实验序号4~6的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图，其中，A~C分别为采用实验序号4~6的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；
图3为本发明实施例1采用实验序号7~9的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图，其中，A~C分别为采用实验序号7~9的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；
图4为本发明实施例1采用实验序号1~3的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图，其中，A~C分别为采用实验序号1~3的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图；
图5为本发明实施例1采用实验序号4~6的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图，其中，A~C分别为采用实验序号4~6的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图；
图6为本发明实施例1采用实验序号7~9的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图，其中，A~C分别为采用实验序号7~9的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图；
图7为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的鲜天麻熟化液的6种药效成分色谱图，其中，A~B分别为对照组、半乳糖水组的鲜天麻熟化液6种药效成分色谱图；
图8为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的鲜天麻熟化液的6种药效成分色谱图，其中，A~B分别为蔗糖水组、乳糖水组的鲜天麻熟化液6种药效成分色谱图；
图9为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的鲜天麻熟化液的6种药效成分色谱图，其中，A~B分别为白砂糖水组、冰糖水组的鲜天麻熟化液6种药效成分色谱图；
图10为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的鲜天麻熟化液的6种药效成分色谱图，其中，A~B分别为玉米淀粉水组、小麦淀粉水组的鲜天麻熟化液6种药效成分色谱图；
图11为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的成品天麻的6种药效成分色谱图，其中，A~B分别为对照组、半乳糖水组的成品天麻6种药效成分色谱图；
图12为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的成品天麻的6种药效成分色谱图，其中，A~B分别为蔗糖水组、乳糖水组的成品天麻6种药效成分色谱图；
图13为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的成品天麻的6种药效成分色谱图，其中，A~B分别为白砂糖水组、冰糖水组的成品天麻6种药效成分色谱图；
图14为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的成品天麻的6种药效成分色谱图，其中，A~B分别为玉米淀粉水组、小麦淀粉水组的成品天麻6种药效成分色谱图；
图15为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的鲜天麻熟化液的6种药效成分提取率的综合评分；
图16为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的成品天麻的6种药效成分含量的综合评分；
图17为本发明实施例2采用不同糖水熟化工艺获得的鲜天麻的折干率；
图18为本发明实施例2中不同糖水熟化工艺对总综合评分的影响；
图19为本发明实施例3采用不同的浓度的玉米淀粉水溶液熟化工艺获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图，其中，A~B分别为采用浓度0.5wt.%、1wt.%玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；
图20为本发明实施例3采用不同的浓度的玉米淀粉水溶液熟化工艺获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图，其中，A~B分别为采用浓度2wt.%、4wt.%玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；
图21为本发明实施例3采用不同的浓度的玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的成品天麻的药效成分色谱图，其中，A~B分别为采用浓度0.5wt.%、1wt.%玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的成品天麻的药效成分色谱图；
图22为本发明实施例3采用不同的浓度的玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的成品天麻的药效成分色谱图，其中，A~B分别为采用浓度2wt.%、4wt.%玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的成品天麻的药效成分色谱图；
图23为本发明实施例3采用不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的鲜天麻熟化液的6种药效成分提取率的综合评分；
图24为本发明实施例3采用不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的成品天麻的6种药效成分含量的综合评分；
图25为本发明实施例3采用不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺获得的成品天麻的折干率；
图26为本发明实施例3中不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺对总综合评分的影响；
图27为本发明实施例4制备的鲜天麻玉米淀粉熟化液对UVB损伤小鼠皮肤体外表征的影响；
图28为本发明实施例4制备的鲜天麻玉米淀粉熟化液对抗UVB损伤小鼠皮肤组织H&E染色病理切片；
图29为本发明实施例4制备的鲜天麻玉米淀粉熟化液对抗UVB损伤小鼠皮肤组织Masson染色病理切片；
图30为本发明实施例4制备的鲜天麻玉米淀粉熟化液对抗UVB损伤小鼠皮肤组织维多利亚蓝染色病理切片；
图31为本发明实施例4制备的鲜天麻玉米淀粉熟化液对小鼠皮肤组织MDA、SOD、GSH-Px、CAT、MMP-9、TIMP-1、IL-6和TNF-α的影响。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明采用的鲜天麻，由白山靖珍天麻开发有限公司提供。
本发明采用的半乳糖、蔗糖、乳糖均为食品级，购自万邦实业有限公司。
本发明采用的白砂糖、冰糖、玉米淀粉和小麦淀粉，购自杞参食品有限公司。
本发明采用的5周龄昆明雌性小鼠（体重20g左右），由长春亿思实验动物科技有限公司提供。
本发明采用的H&E染液套装和Masson染液套装购自上海碧云天生物技术有限公司。
本发明采用的维多利亚蓝染液套装购自武汉谷歌生物科技有限公司。
本发明采用的检测MDA、SOD、CAT、GSH-Px、IL-6、TNF-α、TIMP-1和MMP-9的试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
本发明采用的UVB显示灯（HR40 W）购自南京华强电子有限公司。
本发明采用SPSS 23软件进行统计分析。
实施例1
鲜天麻水熟化的方法（水熟化工艺）：
取采收的鲜天麻，用清水洗净，放入容器中，按一定的料液比向容器中加入水，在一定的温度下熟化一定时间；熟化后取出熟化天麻，余液用4层纱布过滤，得滤液，即为鲜天麻熟化液，熟化天麻经60℃烘干得成品天麻。
采用L9（34）正交试验法，选取熟化时间为20min、30min、40min，熟化温度为80℃、100℃、120℃，料液比为1g：4mL、1g：6mL、1g：8mL作为考察因素，设置空白列。
采用重量法测定天麻的折干率，使用HPLC测定鲜天麻水熟化液中的药效成分含量及其成品天麻的药效成分含量。
鲜天麻折干率=（成品天麻的质量/鲜天麻的质量）×100%。
采用本实施例实验序号1~9（表1）中的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图以及成品天麻的药效成分色谱图见图1~图6。图1中，A~C分别为采用实验序号1~3的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图2中，A~C分别为采用实验序号4~6的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图3中，A~C分别为采用实验序号7~9的方法获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图4中，A~C分别为采用实验序号1~3的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图；图5中，A~C分别为采用实验序号4~6的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图；图6中，A~C分别为采用实验序号7~9的方法获得的成品天麻的药效成分色谱图；图1~图6中的1~6分别为天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A的色谱峰。
从图1~图6中可以看出，色谱峰分离度良好，HPLC测定方法可靠。
运用综合加权评分法进行评估鲜天麻熟化工艺：
（1）鲜天麻熟化液的药效成分提取率综合评分：设定满分为100分，将鲜天麻熟化液中天麻素（W1）、对羟基苯甲醇（W2）、巴利森苷E（W3）、巴利森苷B（W4）、巴利森苷C（W5）和巴利森苷A（W6）的药效成分提取率（鲜天麻熟化液中药效成分提取率=鲜天麻熟化液的药效成分质量/（鲜天麻熟化液的药效成分质量+熟化成品天麻的药效成分质量）的权重系数分别设为0.75、0.05、0.05、0.05、0.05、0.05。
鲜天麻熟化液的药效成分提取率的综合评分=W1/W1max1×0.75×100%+W2/W2max2×0.05×100%+W3/W3max3×0.05×100%+W4/W4max4×0.05×100%+W5/W5max5×0.05×100%+W6/W6max6×0.05×100%。
式中max1、max2、max3、max4、max5及max6分别为每种鲜天麻熟化液中药效成分的提取率W1、W2、W3、W4、W5、W6的最大值。
（2）成品天麻的药效成分含量综合评分：设定满分为100分，将成品天麻药效成分含量天麻素（C1）、对羟基苯甲醇（C2）、巴利森苷E（C3）、巴利森苷B（C4）、巴利森苷C（C5）和巴利森苷A（C6）的权重系数分别设为0.75、0.05、0.05、0.05、0.05、0.05。
成品天麻药效成分含量综合评分=C1/C1max1×0.75×100%+C2/C2max2×0.05×100%+C3/C3max3×0.05×100%+C4/C4max4×0.05×100%+C5/C5max5×0.05×100%+C6/C6max6×0.05×100%。
式中max1、max2、max3、max4、max5及max6分别为每种成品天麻中药效成分的含量C1、C2、C3、C4、C5、C6的最大值。
（3）鲜天麻折干率测定：采用重量法测定，鲜天麻折干率=100%×（成品天麻的质量/鲜天麻的质量）。
（4）鲜天麻熟化工艺总综合评分：将（1）中鲜天麻熟化液的药效成分提取率综合评分（Y1）、（2）中成品天麻的药效成分含量综合评分（Y2）和（3）中折干率（Y3）的权重系数分别设为0.4、0.4、0.2；鲜天麻熟化工艺总综合评分=Y1/Y1max1×0.4×100+Y2/Y2max2×0.4×100+Y3/Y3max3×0.2×100。式中max1、max2、max3分别为Y1、Y2及Y3各项最大值。
鲜天麻熟化液的药效成分提取率直观分析结果见表1。
表1鲜天麻熟化液的药效成分提取率直观分析表
注表1中：A：时间/min（A列中1为20min，2为30min，3为40min），B：温度/℃（B列中1为80℃，2为100℃，3为120℃），C：料液比（C列中1为1g：4mL，2为1：6mL，3为1：8mL），D：空白。k：同一因素不同水平观测值的平均值，R：极差值。
表2鲜天麻熟化液的药效成分提取率综合评分方差分析表
注表2中：A：时间/min（A列中1为20min，2为30min，3为40min），B：温度/℃（B列中1为80℃，2为100℃，3为120℃），C：料液比（C列中1为1g：4mL，2为1：6mL，3为1：8mL），D：空白。
从表1中可以看出，水熟化工艺各因素对鲜天麻熟化液的药效成分提取率综合评分影响大小依次为：B>C>A。方差分析结果见表2，温度对于鲜天麻熟化液的药效成分提取率具有显著性影响（P<0.05）。以鲜天麻熟化液药效成分提取率为评价指标，优选的鲜天麻水熟化工艺条件为：A3B3C1。
不同鲜天麻水熟化工艺获得的成品天麻的药效成分含量直观分析结果见表3。
表3不同鲜天麻水熟化工艺成品天麻的药效成分含量直观分析表
注表3中：A：时间/min（A列中1为20min，2为30min，3为40min），B：温度/℃（B列中1为80℃，2为100℃，3为120℃），C：料液比（C列中1为1g：4mL，2为1：6mL，3为1：8mL），D：空白。k：同一因素不同水平观测值的平均值，R：极差值。
表4不同鲜天麻水熟化工艺获得的成品天麻药效成分含量综合评分方差分析
注表4中：A：时间/min（A列中1为20min，2为30min，3为40min），B：温度/℃（B列中1为80℃，2为100℃，3为120℃），C：料液比（C列中1为1g：4mL，2为1：6mL，3为1：8mL），D：空白。
从表3中可以看出，不同鲜天麻水熟化工艺各因素对成品天麻药效成分含量综合评分影响大小依次为：B>A>C。方差分析结果见表4，时间和温度对于不同鲜天麻水熟化工艺的成品天麻药效成分含量均具有显著性影响（P<0.05）。以成品天麻药效成分含量为评价指标，优选的鲜天麻水熟化工艺条件为：A2B3C3。
不同水熟化工艺下鲜天麻折干率直观分析结果见表5。
表5不同水熟化工艺下鲜天麻折干率直观分析表
注表5中：A：时间/min（A列中1为20min，2为30min，3为40min），B：温度/℃（B列中1为80℃，2为100℃，3为120℃），C：料液比（C列中1为1g：4mL，2为1：6mL，3为1：8mL），D：空白。k：同一因素不同水平观测值的平均值，R：极差值。
表6鲜天麻折干率方差分析
注表6中：A：时间/min（A列中1为20min，2为30min，3为40min），B：温度/℃（B列中1为80℃，2为100℃，3为120℃），C：料液比（C列中1为1g：4mL，2为1：6mL，3为1：8mL），D：空白。
从表5中可以看出，不同水熟化工艺各因素对鲜天麻折干率综合评分影响大小依次为：B>A>C。方差分析结果见表6，时间，温度，料液比对鲜天麻折干率均不具有显著性影响（P>0.05）。以鲜天麻折干率为评价指标，优选的鲜天麻水熟化工艺条件为：A1B1C2。
鲜天麻不同水熟化工艺的总综合评分直观分析，见表7。
表7鲜天麻不同水熟化工艺总综合评分
注表7中：A：时间/min（A列中1为20min，2为30min，3为40min），B：温度/℃（B列中1为80℃，2为100℃，3为120℃），C：料液比（C列中1为1g：4mL，2为1：6mL，3为1：8mL），D：空白。k：同一因素不同水平观测值的平均值，R：极差值。
表8不同鲜天麻水熟化工艺的总综合评分方差分析表
注表8中：A：时间/min（A列中1为20min，2为30min，3为40min），B：温度/℃（B列中1为80℃，2为100℃，3为120℃），C：料液比（C列中1为1g：4mL，2为1：6mL，3为1：8mL），D：空白。
从表7中可以看出，各因素对总综合评分影响大小依次为：温度>时间>料液比。方差分析结果见表8，温度对不同鲜天麻水熟化工艺总综合评分具有显著性影响（P<0.05）。鲜天麻最优水熟化的方法为：时间30min，温度120℃，料液比1g：4mL。
实施例2
采用不同的糖水溶液（不同糖水熟化工艺）制备鲜天麻熟化液：
取采收的鲜天麻，用清水洗净，放入容器中，按料液比1g:4mL的比例向容器中加入不同的糖水溶液（糖水溶液分别为2wt.%半乳糖水溶液、2wt.%蔗糖水溶液、2wt.%乳糖水溶液、2wt.%白砂糖水溶液、2wt.%冰糖水溶液、2wt.%玉米淀粉水溶液或2wt.%小麦淀粉水溶液），在温度为120℃的条件下熟化30min；熟化后取出熟化天麻，余液用4层纱布过滤，得滤液，即为鲜天麻熟化液，熟化天麻经60℃烘干得成品天麻。
并将糖水溶液替换成水作为对照组。
采用本实施例的方法（采用不同糖水熟化工艺）获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图以及成品天麻的药效成分色谱图见图7~图14。图7中，A~B分别为采用水、半乳糖水溶液获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图8中，A~B分别为采用蔗糖水溶液、乳糖水溶液获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图9中，A~B分别为采用白砂糖水溶液、冰糖水溶液获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图10中，A~B分别为采用玉米淀粉水溶液、小麦淀粉水溶液获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图11中，A~B分别为采用水、半乳糖水溶液获得的成品天麻的药效成分色谱图；图12中，A~B分别为采用蔗糖水溶液、乳糖水溶液获得的成品天麻的药效成分色谱图；图13中，A~B分别为采用白砂糖水溶液、冰糖水溶液获得的成品天麻的药效成分色谱图；图14中，A~B分别为采用玉米淀粉水溶液、小麦淀粉水溶液获得的成品天麻的药效成分色谱图；图7~图14中1~6分别为天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A的色谱峰。
从图7~图14中可以看出，色谱峰分离度均良好，HPLC测定方法均可靠。
采用不同的糖水溶液（水（即对照组）、半乳糖水溶液（即半乳糖水组）、蔗糖水溶液（即蔗糖水组）、乳糖水溶液（即乳糖水组）、白砂糖水溶液（即白砂糖水组）、冰糖水溶液（即冰糖水组）、玉米淀粉水溶液（即玉米淀粉水组）、小麦淀粉水溶液（即小麦淀粉水组））获得的鲜天麻熟化液的6种药效成分提取率综合评分见图15；采用不同的糖水溶液获得的成品天麻的6种药效成分含量的综合评分见图16；采用不同的糖水溶液获得的成品天麻的折干率见图17；不同糖水熟化工艺对总综合评分的影响见图18。
鲜天麻的不同糖水熟化工艺的总综合评分的评估方法同实施例1。
从图15~16中可以看出，玉米淀粉水溶液的熟化工艺最优。
从图18中可以看出，玉米淀粉水组总综合评分显著高于其他组（P<0.05），说明玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺最优。
实施例3
采用不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化工艺制备鲜天麻熟化液：
取采收的鲜天麻，用清水洗净，放入容器中，按料液比1g:4mL的比例向容器中加入玉米淀粉水溶液（玉米淀粉水溶液的浓度分别为0.5wt.%、1wt.%、2wt.%、4wt.%），在温度为120℃的条件下熟化30min；熟化后取出熟化天麻，余液用4层纱布过滤，得滤液，即为鲜天麻熟化液，熟化天麻经60℃烘干得成品天麻。
采用本实施例的方法（不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化工艺）获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图以及成品天麻的药效成分色谱图见图19~图22。图19中，A~B分别为采用浓度0.5wt.%、1wt.%玉米淀粉水溶液进行熟化，获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图20中，A~B分别为采用浓度2wt.%、4wt.%玉米淀粉水溶液进行熟化，获得的鲜天麻熟化液的药效成分色谱图；图21中，A~B分别为采用浓度0.5wt.%、1wt.%玉米淀粉水溶液进行熟化，获得的成品天麻的药效成分色谱图；图22中，A~B分别为采用浓度2wt.%、4wt.%玉米淀粉水溶液进行熟化，获得的成品天麻的药效成分色谱图；图19~图22中1~6分别为天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A的色谱峰。
采用不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化获得的鲜天麻熟化液的6种药效成分提取率的综合评分见图23；采用不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化获得的成品天麻的6种药效成分含量的综合评分见图24；采用不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化获得的成品天麻的折干率见图25；不同浓度的玉米淀粉水溶液熟化鲜天麻工艺对总综合评分的影响见图26；
总综合评分的评估方法同实施例1。
从图19~图22以及图26中可以看出，色谱峰分离度良好，HPLC测定方法可靠。1wt.%玉米淀粉水溶液（玉米淀粉水熟化组）熟化鲜天麻工艺的总综合评分显著高于其它组（P<0.05）。
实施例4
一种抗UVB损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液的制备方法：
取采收的鲜天麻，用清水洗净，放入容器中，按料液比1g:4mL的比例向容器中加入含1.0wt.%玉米淀粉的水溶液，在温度为120℃的条件下熟化30min；熟化后取出熟化天麻，余液用4层纱布过滤，得滤液，即为鲜天麻熟化液（鲜天麻玉米淀粉熟化液）。
效果例1
实施例4制备的鲜天麻熟化液（鲜天麻玉米淀粉熟化液）对UVB损伤小鼠皮肤的影响：
（1）动物分组及UVB建模
小鼠随机分为6组（每组8只），分为：ZT1组、ZT2组、ZT3组、ZG4组、ZG5组和ZG6组。
ZT1组：剃除小鼠背毛（2cm2左右），灌喂蒸馏水0.4mL/d/只，持续12d；
ZT2组：剃除小鼠背毛（2cm2左右），灌喂蒸馏水0.4mL/d/只，每天照射UVB 2h，持续12d；
ZT3组：剃除小鼠背毛（2cm2左右），灌喂达卡巴嗪0.4mL/d/只（0.4mL含有达卡巴嗪0.8mg），每天照射UVB 2h，持续12d；
ZG4组：剃除小鼠背毛（2cm2左右），灌喂鲜天麻熟化液0.4mL/d/只，每天照射UVB2h，持续12d；
ZG5组：剃除小鼠背毛（2cm2左右），灌喂稀释2倍的鲜天麻熟化液0.4mL/d/只，每天照射UVB 2h，持续12d；
ZG6组：剃除小鼠背毛（2cm2左右），灌喂稀释4倍的鲜天麻熟化液0.4mL/d/只，每天照射UVB 2h，持续12d。
（2）小鼠皮肤组织病理学观察
实验期间，每天观察并记录小鼠背部皮肤的变化（图27），12天后处死。取背部脱毛区域皮肤组织，部分皮肤组织用4wt.%多聚甲醛溶液固定。取0.8cm×0.8cm的组织块包埋，切成5μm石蜡切片。切片分别用苏木精-伊红（即H&E）液、Masson丽春红酸性品红（即Masson）液、维多利亚蓝染液染色。切片密封后在光镜下观察各组病理组织结构的变化，并拍照记录。结果见图28~30，图28为H&E染色病理切片，图29为Masson染色病理切片，图30为维多利亚蓝染色病理切片。
从图27中可以看出，与ZT1组比较，ZT2组出现角质层脱落、红肿、弹性差、色素沉着、白斑等现象。与ZT2组比，ZT3组、ZG4组、ZG5组及ZG6组皮肤红肿及色素沉着均减弱，无角质层脱落和白斑现象，具有弹性，ZG4组效果最好。
从图28~30中可以看出，与ZT1组相比，ZT2组表皮层增厚，表皮与真皮层界限模糊，真皮层厚度变小，胶原纤维及弹力纤维断裂堆积，弹力纤维组织减少，出现断裂、紊乱和空洞，并伴有炎症细胞浸润现象。相对于ZT2组，ZT3、ZG4、ZG5及ZG6组表皮与真皮层连接处凹凸界面明显，胶原纤维分布均匀且整齐。对于皮肤表皮层增厚、结构损伤、胶原纤维含量减少、胶原纤维束断裂、堆积、紊乱和空洞、炎性细胞浸润等均得到改善。
（3）小鼠皮肤氧化应与促炎症因子含量的测定
称取皮肤组织，按重量（g）：体积（mL）=1∶9的比例，加入生理盐水，匀浆，在4℃，4000r/min下离心5min，取上清液。使用检测试剂盒对MDA、SOD、CAT、GSH-Px进行检测。采用酶联免疫吸附测定TIMP-1和MMP-9的含量。使用试剂盒测定IL-6、TNF-α的含量，结果见图31。
从图31中可以看出，与ZT1组相比，ZT2组小鼠皮肤组织SOD、CAT、GSH-Px和TIMP-1含量均降低，而MDA、MMP-9、IL-6和TNF-α含量显著升高（P<0.05）。与ZT2组相比，ZT3、ZG4、ZG5和ZG6组小鼠UVB损伤皮肤组织MDA、MMP-9、IL-6和TNF-α含量均显著降低（P<0.05），SOD活性、GSH-Px活性、CAT含量、TIMP-1含量均显著升高（P<0.05），说明鲜天麻熟化液对UVB照射导致的皮肤组织氧化应激和皮肤组织炎症因子有明显抑制作用。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (7)

1.一种抗UVB损伤的鲜天麻玉米淀粉熟化液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
在鲜天麻中加入玉米淀粉水溶液，加热熟化后过滤，滤液即为所述鲜天麻玉米淀粉熟化液。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述鲜天麻和玉米淀粉水溶液的质量/体积比为1g:4~8mL；
所述玉米淀粉水溶液的浓度为0.5~4wt.%；
所述加热熟化的温度为80~120℃，时间为20~40min。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述鲜天麻和玉米淀粉水溶液的质量/体积比为1g:4mL；
所述玉米淀粉水溶液的浓度为1.0wt.%；
所述加热熟化的温度为120℃，时间为30min。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述鲜天麻玉米淀粉熟化液中的药效成分包括天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷A。
5.一种权利要求1~4任一项所述的制备方法制备的鲜天麻玉米淀粉熟化液。
6.一种权利要求5所述的鲜天麻玉米淀粉熟化液在制备抗UVB损伤的产品中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述产品包括外用制剂或口服制剂。
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