CN118021677A - 一种舒缓修护护肤组合物及其在化妆品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种舒缓修护护肤组合物及其在化妆品中的应用。本发明的组合物由透明质酸钠‑阿魏酸接枝物、二甲基甲硅烷醇透明质酸酯、荷叶黄酮复配而成，可通过促进屏障相关蛋白FLG、LOR的表达、抑制炎症相关因子IL‑1α、TNF‑α表达，达到舒缓修护护肤的作用，可用于化妆品中改善皮肤敏感问题。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种舒缓修护护肤组合物及其在化妆品中的应用。
背景技术
敏感性皮肤(sensitive skin，SS)特指皮肤在生理或病理条件下发生的一种高反应状态，主要发生于面部，临床表现为受到物理、化学、精神等因素刺激时皮肤易出现灼热、刺痛、瘙痒及紧绷感等主观症状，伴或不伴红斑、鳞屑、毛细血管扩张等客观体征。目前市场上具有敏感性皮肤症状的人群出现显著增加的趋势，有数据表明女性皮肤敏感的患病率约占60％～70％，男性约占50％～60％。敏感性皮肤背后的发病机制是一个复杂的过程，主要成因是皮肤屏障功能受损，皮肤屏障功能受损会加速水分经皮失散以及皮肤营养物质流失，引起神经酰胺含量显著减少，与屏障稳定性有关的鞘脂水平上调，另外，还会使刺激物或过敏原的渗透作用增强，并导致表皮内神经纤维保护不足，更深层的肌肤暴露在微生物及外界刺激下，从而诱发皮肤局部炎症状态，出现泛红发痒、灼热刺痛等症状。因此，敏感性皮肤的护理必须修复受损的皮肤屏障，同时减少皮肤炎症细胞因子的释放。
敏感肌肤形成与发展机制复杂，对敏感肌肤的修护及改善造成极大困难，市面上很多产品只能达到暂时舒缓皮肤敏感的效果，对于敏感性皮肤不具有深层次修护的作用。且现有的舒缓修护组合物大多是通过大量叠加修护舒缓类成分配制而成，成分复杂，作用机制不明确，且成本高，功效并不显著。因此，有必要开发成分简单、温和无刺激、具有良好舒缓修护作用的产品。
发明内容
针对上述问题，本发明提供了一种舒缓修护护肤组合物及其在化妆品中的应用。本发明的组合物由透明质酸钠-阿魏酸接枝物、二甲基甲硅烷醇透明质酸酯、荷叶黄酮复配而成，经试验验证，具有良好的舒缓修护功效，可用于化妆品中改善皮肤敏感问题，在化妆品中具有良好的应用前景。
为了实现上述技术目的，本发明采用的技术方案如下：一种舒缓修护护肤组合物，包含以下质量份数的组分：透明质酸钠-阿魏酸接枝物0.1-1.0份，二甲基甲硅烷醇透明质酸酯0.05-0.5份。
进一步的，所述舒缓修护组合物的组分及质量份数为：透明质酸钠-阿魏酸接枝物0.1-1.0份，荷叶黄酮0.5-5.0份，二甲基甲硅烷醇透明质酸酯0.05-0.5份。优选的，所述舒缓修护组合物的质量份数为：透明质酸钠-阿魏酸接枝物0.4-0.8份，荷叶黄酮2.0-4.0份，二甲基甲硅烷醇透明质酸酯0.08-0.3份。
制备方法：将透明质酸钠-阿魏酸接枝物、荷叶黄酮、二甲基甲硅烷醇透明质酸酯混合到一起，溶于纯化水中。
本发明使用的透明质酸钠-阿魏酸接枝物可以是透明质酸钠和阿魏酸通过化学方法接枝(CN202311268636X)或者通过生物酶法(CN2024100507594)接枝获得，优选通过生物酶法接枝获得，本发明实施例中使用的透明质酸钠-阿魏酸接枝物是通过CN2024100507594的实施例1获得。具体为：S1：取2kd透明质酸钠溶解于水中，透明质酸钠质量浓度0.1％，加入0.1％乙醇，搅拌0.5h；S2：加入碳酸钠，使其终浓度为0.1％，搅拌反应4h，反应结束后调节pH至5.5；S3：向上述的溶液中加入阿魏酸，使阿魏酸质量浓度为0.02％；随后向溶液中加入漆酶，酶的添加量为体系质量的0.5％，35℃反应12h；S4：收集样品，300D滤膜过滤纯化，收集液冷冻干燥即得。
所述荷叶黄酮由CN2015101508152(发明名称：一种同时分离、提纯荷叶黄酮和多糖的方法)中实施例5获得。
所述二甲基甲硅烷醇透明质酸酯由CN2013103171040(发明名称：一种硅烷化玻璃酸酯复合物的制备方法)中实施例3获得。
本发明的第二个方面，提供上述组合物在制备舒缓修护护肤的化妆品中的应用。本发明通过试验验证，上述组合物能够通过促进屏障相关蛋白FLG、LOR的表达、抑制炎症相关因子IL-1α、TNF-α表达，达到舒缓修护护肤的作用，同时安全无毒副作用，因此可应用于舒缓修护护肤的化妆品之中。
本发明的第三个方面，提供一种舒缓修护护肤化妆品，所述化妆品包含舒缓修护护肤组合物。
所述舒缓修护护肤化妆品还可以包含任意化妆品领域允许添加的其他原料成分，包括但不限于乳化剂、润肤剂、保湿剂和增稠剂等。还可以包括防腐剂、pH值调节剂等。
优选的，所述乳化剂包括PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、硬脂酸甘油酯、聚甘油-6硬脂酸酯、聚甘油-6山嵛酸酯、聚甘油-6二硬脂酸酯、C14-22醇、C12-20烷基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯、山梨坦橄榄油酸酯、氢化卵磷脂、鲸蜡醇磷酸酯钾、硬脂酰谷氨酸钠和聚甘油-10月桂酸酯中的任意一种或两种以上的组合。
优选的，所述润肤剂包括鲸蜡硬脂醇、辛酸/癸酸甘油三酯、异壬酸异壬酯、角鲨烷、蜂蜡、矿油、伯尔硬胡桃籽油、聚二甲基硅氧烷、白池花籽油、环五聚二甲基硅氧烷、异十二烷、霍霍巴籽油、甘油三(乙基己酸)酯、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、山嵛醇、乳木果油、猴面包树籽油、碳酸二辛酯、季戊四醇四异硬脂酸酯和生育酚乙酸酯中任意一种或两种以上的组合。
优选的，所述保湿剂包括甘油、丁二醇、双丙甘醇、1,3-丙二醇、1,2-己二醇、乙基己基甘油、甜菜碱、鼠李糖、透明质酸钠、泛醇、海藻糖中任意一种或两种以上的组合。
优选的，所述增稠剂包括卡波姆、聚丙烯酸钠、羟乙基纤维素、聚丙烯酸钠接枝淀粉、黄原胶、羟乙基纤维素、聚丙烯酸酯交联聚合物-6、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和鞘胺醇单胞菌发酵产物提取物中的任意一种或两种以上的组合。
优选的，所述防腐剂包括对羟基苯乙酮、辛酰羟肟酸和苯氧乙醇中的任意一种或者两种以上的组合。
优选的，所述pH值调节剂包括氨丁三醇、三乙醇胺和精氨酸中的任意一种。
同时，本发明通过合理添加上述原料成分，也可以此制备不同化妆品剂型，如精华水、精华液、面膜、精华乳、精华霜等，同时，基于上述基础化妆品品类，进一步衍生制备获得的化妆品品类，其显然均属于本申请的保护范围之内。
本发明的第四个方面，提供上述舒缓修护护肤化妆品的制备方法，其特征是，将舒缓修护护肤组合物以及其他各原料组分混合。
本发明的有益效果：
(1)将透明质酸钠-阿魏酸接枝物和二甲基甲硅烷醇透明质酸酯复配，在体外修护功效方面效果较好，加入荷叶黄酮后效果更佳；
(2)二甲基甲硅烷醇透明质酸酯的成本较高，本发明将透明质酸钠-阿魏酸接枝物、二甲基甲硅烷醇透明质酸酯和荷叶黄酮复配使用可降低其用量，且舒缓修护效果显著，大大节约成本；
(3)本发明的舒缓修护组合物可通过促进屏障相关蛋白FLG、LOR的表达、抑制炎症相关因子IL-1α、TNF-α表达，达到舒缓修护护肤的作用；
(4)本发明的舒缓修护护肤化妆品的制备方法简单易行，节约成本，原料易于获取，适合大批量生产，通过人体功效实验测试，具有很好的舒缓修护功效(在使用含有3.0％舒缓修护组合物的化妆品4周后，红区分析a*值显著降低，皮肤经皮水分散失TEWL显著降低)。
附图说明
图1：试验例4的14号和19号受试者使用样品前后面部红区变化图片。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进一步说明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围中。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有作出创造性前提下，任何对本发明的变化都归属本发明的保护范围。同时，在本发明实施例中，若无特殊说明，所有制备原料均为本领域技术人员熟知的市售产品。
实施例1-5及对比例1-3：
具体方案如下表1所示，以质量份计算。制备方法为：将透明质酸钠-阿魏酸接枝物、二甲基甲硅烷醇透明质酸酯和荷叶黄酮混合到一起，溶于纯化水中，得到舒缓修护护肤组合物。
表1具体实施例及对比例成分列表
实施例6：精华水
上述舒缓修护护肤组合物的应用，制备含有该舒缓修护组合物的精华水产品，配方如表2所示。
表2：精华水产品配方
精华水的制备方法：
S1：水相制备：分别加入A相中原料，加热至85℃搅拌溶解；
S2：当温度降至45℃时，依次加入B相、C相成分，搅拌溶解分散均匀，即得精华水产品。
试验例1：安全性测试实验
参照SN/T 2329-2009《化妆品眼刺激性/鸡胚绒毛尿囊膜试验》，对产品进行眼刺激测试即安全性测试。
实验方法：采用7日龄以内的受精鸡胚，在37.6±0.5℃﹑50％～70％湿度的孵育箱中孵育9日。
CAM制备：进行照蛋检查，在蛋壳表面标记气室位置，用镊子剥去带标记的蛋壳部分，暴露白色蛋膜，应小心操作不破坏蛋膜完整性。滴加0.5mL 0.9％ NaCl溶液使蛋膜充分湿润，用纸巾轻轻吸干表面液体，并用镊子小心去除内膜，保证血管膜不受损。
反应终点法：取透明受试物0.3mL均匀滴加或涂抹于CAM表面，作用3min后使用0.9％ NaCl溶液洗去受试物，观察CAM每种毒性效应变化的程度。
终点评分法(end point score ES)：采用反应终点法进行的试验，应计算终点评分(ES)，结果保留小数点后两位。每只鸡胚记分＝每只鸡胚观察到的出血、凝血和血管融解程度的和，ES＝6只鸡胚得分的数学总和。根据ES值按表3对受试物眼刺激性进行分类。
表3反应终点法结果判定标准
| 刺激评分 | ES≤12 | 12<ES<16 | ES≥16 |
| 刺激性分类 | 无/轻刺激性 | 中度刺激性 | 强刺激性/腐蚀性 |
试验结果如表4所示，该舒缓修护护肤组合物无刺激性。
表4刺激性实验结果统计表
试验例2：体外修护功效测试
本测试选用3D表皮皮肤模型为测试模型。0.1％ SLS工作液配制：吸取1mL0.2％SLS溶液，加入1mL PBS配制成0.1％SLS工作液；阳性对照组(WY14643)工作液配制：吸取10μL 30mM WY14643母液溶于6mL培养液(EpiGrowth培养液)中，配制成50μMWY14643。
根据表5测试分组，将模型转移到6孔板中(提前添加0.9mL EpiGrowth培养液)，在6孔板上标注测试组编号。阴性对照组(NC)、阳性对照组(PC)、实施例1-5、对比例1-3表面添加25μL 0.1％的SLS溶液，孵育30min。孵育结束后，阳性对照组添加相应浓度的工作液，取待测样品(实施例1-5、对比例1-3样品的测试样品)12.5μL加于模型表面，涂布均匀后置于CO2培养箱(37℃、5％ CO2)中孵育24h。孵育结束后，用无菌PBS溶液清洗模型表面残留的受试物，用无菌棉签拭去模型内、外残留液体。
免疫荧光测试：取用于检测的模型，将模型环切取下，用4％的多聚甲醛进行固定处理，固定24h后，进行FLG、LOR含量的免疫荧光检测，显微镜下拍照观察，采集图片并分析。
表5实验分组设置
免疫荧光测试测试结果分别如表6、表7所示。
表6 FLG免疫荧光分析结果汇总表
注：积分光密度(IOD)，其数值反映FLG的含量。用t-test方法进行统计分析时，与BC组相比，显著性以#表示，P-value＜0.01表示为##；与NC组相比，显著性以*表示，0.01＜P-value＜0.05表示为*，P-value＜0.01表示为**。
从表6中可以看出，与BC组相比，NC组的FLG含量显著下降，说明本次测试刺激条件有效。与NC组相比，PC组的FLG含量显著上升，说明本次测试阳性对照有效。与NC组相比，实施例1-5、对比例1-3的FLG含量显著上升，实施例1-5的提升率高于对比例1-3，故该舒缓修护护肤组合物能协同促进FLG含量，具有修护功效。
表7 LOR免疫荧光分析结果汇总表
注：积分光密度(IOD)，其数值反映LOR的含量。用t-test方法进行统计分析时，与BC组相比，显著性以#表示，P-value＜0.05表示为#，P-value＜0.01表示为##；与NC组相比，显著性以*表示，0.01＜P-value＜0.05表示为*，P-value＜0.01表示为**。
从表7中可以看出，与BC组相比，NC组的LOR含量显著下降，说明本次测试刺激条件有效。与NC组相比，PC组的LOR含量显著上升，说明本次测试阳性对照有效。与NC组相比，实施例1-5、对比例1-3的LOR含量显著上升，实施例1-5的提升率高于对比例1-3，故该舒缓修护护肤组合物能协同促进LOR含量，具有修护功效。
试验例3：体外抑制IL-1α、TNF-α因子的活性实验
采用LPS(细菌脂多糖)诱导小鼠巨噬细胞Raw264.7，通过ELISA方法检测IL-1α、TNF-α表达量，来评价受试物抑制相关细胞通路因子表达的能力。见表8测试方案。
表8测试方案
测试结果如表9-10所示。
表9 IL-1α含量结果汇总表
| 样品名称 | 平均浓度(pg/mL) | SD | P-value | 抑制率 |
| BC | 5.01 | 0.11 | / | |
| NC | 70.03 | 0.55 | / | |
| PC | 48.15 | 0.48 | ** | 31.24％ |
| 实施例1 | 57.23 | 0.55 | ** | 18.28％ |
| 实施例2 | 53.02 | 0.5 | ** | 24.29％ |
| 实施例3 | 47.22 | 0.43 | ** | 32.58％ |
| 实施例4 | 51.17 | 1.1 | ** | 26.93％ |
| 实施例5 | 53.70 | 0.77 | ** | 23.32％ |
| 对比例1 | 62.77 | 0.68 | ** | 10.37％ |
| 对比例2 | 64.36 | 0.94 | ** | 8.10％ |
| 对比例3 | 66.18 | 0.81 | ** | 5.50 |
注：##表示与空白对照相比，p<0.01；**表示与阴性对照相比，p<0.01；*表示与阴性对照相比，0.01<p<0.05。
从表9中可以看出，与BC组相比，NC组的IL-1α含量显著上升，说明本次测试刺激条件有效。与NC组相比，PC组的IL-1α含量显著下降，说明本次测试阳性对照有效。与NC组相比，实施例1-5、对比例1-3的IL-1α含量显著下降，实施例1-5的抑制率高于对比例1-3，故该舒缓修护护肤组合物能协同抑制IL-1α含量，具有舒缓功效。
表10 TNF-α含量结果汇总表
注：##表示与空白对照相比，p<0.01；**表示与阴性对照相比，p<0.01；*表示与阴性对照相比，0.01<p<0.05。
从表10中可以看出，与BC组相比，NC组的TNF-α含量显著上升，说明本次测试刺激条件有效。与NC组相比，PC组的TNF-α含量显著下降，说明本次测试阳性对照有效。与NC组相比，实施例1-5、对比例1-3的TNF-α含量显著下降，实施例1-5的抑制率高于对比例1-3，故该舒缓修护护肤组合物能协同抑制TNF-α含量，具有舒缓功效。
试验例4：含本发明舒缓修护护肤组合物的化妆品对人体舒缓修护实验的测试结果
对制备的实施例6精华水产品进行人体皮肤功效测试，寻求18-40岁的志愿者30人(皮肤状态：肌肤敏感(乳酸刺痛阳性))进行产品测试。若样品使用后任一访视时点红区分析a*值与使用前对比差异显著降低(P<0.05)，则认为该产品具有舒缓皮肤的功效，用于评价其在人体面部的舒缓效果。若样品使用后任一访视时点经皮水分散失TEWL与使用前对比差异显著降低(P<0.05)，则认为该产品具有修护皮肤屏障功能的功效，用于评价其在人体面部的修护效果。
产品使用方法：早晚洁面后，取适量精华水于掌心中，均匀地涂抹于面部肌肤，轻柔按摩至吸收，每天使用2次，连续使用28天。
测试环境：温度：20.1℃～21.8℃，相对湿度：44％～50％；
检测时间：使用产品前、使用样品2周、4周；
检测设备：VISIA皮肤检测仪(美国CanField公司)；皮肤水分散失测试仪AquaFlux(AF200，BIOX，英国)。
面部红区测试：采用VISIA皮肤检测仪测试，采集受试者面部左、中、右三面标准光1、标准光2和交叉偏振光3种光源下的图片并在交叉偏振光下导出的红区图片。对红区图片进行图像分析，得到量化指标红区分析a*值，用于评估面部皮肤发红、敏感状态的改善情况。
经皮水分散失TEWL测试：采用皮肤水分散失测试仪Aqua Flux，仪器内使用单硅晶芯片作为水蒸气温度和湿度的传感器，测量水蒸气的流量密度，进而测定皮肤的经皮水分散失量。
计算公式：
应用SPSS Statistics 25进行统计分析，双尾检验，检验水平α＝0.05。
计量数据依据正态分布检验结果，选择差异分析方法：如果测量值为正态分布，则采用t检验方法进行统计分析；如果为非正态分布，则采用秩和检验方法进行统计分析。
面部红区测试测试结果如表11、12所示。示例2名受试者使用样品前后面部红区变化的图片如图1所示。
表11红区分析a*值描述性统计结果(n＝30)
表12红区分析a*值统计分析结果(n＝30)
统计分析结果：“-”：差异无统计学意义(P≥0.05)；“*”：差异有统计学意义(0.01≤P<0.05)；“**”：差异有统计学意义(0.001≤P<0.01)；“***”：差异有统计学意义(P<0.001)。
红区分析a*值测试结果显示，与使用前相比，在使用测试样品4周后，红区分析a*值显著降低(0.01≤P<0.05)，说明含有该舒缓修护护肤组合物的产品具有舒缓功效。如图1所示，14号和19号受试者在使用测试样品4周后红区减弱明显，也进一步证明含有该舒缓修护护肤组合物的产品具有舒缓功效。
经皮水分散失TEWL测试结果如表13、14所示。
表13经皮水分散失TEWL值描述性统计结果(n＝30)
表14经皮水分散失TEWL值统计分析结果(n＝30)
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备注：统计分析结果：“-”：差异无统计学意义(P≥0.05)；“*”：差异有统计学意义(0.01≤P<0.05)；“**”：差异有统计学意义(0.001≤P<0.01)；“***”：差异有统计学意义(P<0.001)。
测试结果显示，在使用含有3.0％舒缓修护组合物的化妆品2周、4周后皮肤经皮水分散失TEWL显著降低，较使用前分别降低24.54％、29.81％，说明含舒缓修护护肤组合物的化妆品具有修护功效。
应注意的是，以上实例仅用于说明本发明的技术方案而非对其进行限制。尽管参照所给出的实例对本发明进行了详细说明，但是本领域的普通技术人员可根据需要对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围。
Claims (8)
1.一种舒缓修护护肤组合物，包含以下质量份数的组分：透明质酸钠-阿魏酸接枝物0.1-1.0份，二甲基甲硅烷醇透明质酸酯0.05-0.5份。
2.如权利要求1所述的舒缓修护护肤组合物，其特征是，所述舒缓修护组合物的组分及质量份数为：透明质酸钠-阿魏酸接枝物0.1-1.0份，荷叶黄酮0.5-5.0份，二甲基甲硅烷醇透明质酸酯0.05-0.5份。
3.如权利要求2所述的舒缓修护护肤组合物，其特征是，所述舒缓修护组合物的质量份数为：透明质酸钠-阿魏酸接枝物0.4-0.8份，荷叶黄酮2.0-4.0份，二甲基甲硅烷醇透明质酸酯0.08-0.3份。
4.如权利要求2所述的舒缓修护护肤组合物，其特征是，将透明质酸钠-阿魏酸接枝物、荷叶黄酮、二甲基甲硅烷醇透明质酸酯混合到一起，溶于纯化水中。
5.权利要求1-4中任一项所述的舒缓修护护肤组合物在制备舒缓修护护肤化妆品中的应用。
6.一种舒缓修护护肤化妆品，所述化妆品包含权利要求1-4中任一项所述的舒缓修护护肤组合物。
7.如权利要求6所述的舒缓修护护肤化妆品，其特征是，还包括乳化剂、润肤剂、保湿剂和增稠剂。
8.如权利要求6所述的舒缓修护护肤化妆品，其特征是，所述化妆品为精华水、精华液、面膜、精华乳或者精华霜。
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