CN118001294A - 一种环状rna载体的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种环状RNA载体的应用，所述的环状RNA载体在制备抑癌药物中的应用；所述的环状RNA序列如SEQ ID NO.1所示。越来越多的证据表明，非编码RNA对生理、疾病过程发挥调控作用。内源性非编码RNA包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(long noncoding RNA，LncRNA)以及环状RNA(circular RNA，circRNA)。共价闭合的circRNA可通过多种机制发挥生物学功能，被认为是基因表达和病理网络的重要调节因子。因其具有普遍性、稳定性与组织特异性，还是极具潜力的分子标志物。
Description
技术领域
本发明属于生物学技术领域，进一步属于生物制药技术领域，具体涉及一种环状RNA载体的应用。
背景技术
肝细胞癌由于其高转移率、复发率和死亡率，是全球十大常见恶性肿瘤之一。原发性肝细胞癌是导致癌症相关死亡的第四大常见原因。大多数HCC患者诊断时即为晚期，即使手术治疗，术后5年复发率仍高达77-100% 根据世界卫生组织的年度预测，2030年死于肝细胞癌的患者人数每年将超过100万。目前肝癌诊断仍缺乏有效的手段，探寻肝癌发生发展分子机制，发现异常表达基因，对于寻找有效分子诊断标志物进行早期诊断具有重要理论意义和临床价值。
发明内容
本发明的目的在于提供一种环状RNA载体的应用。
本发明的目的是这样实现的，所述的环状RNA载体在制备抑癌药物中的应用；所述的环状RNA序列如SEQ ID NO. 1所示，具体如下：CTGAACTGTCCCAAGCAATAAACAGTGGTACATTGTTATCAAAACCGTCCCCACCCTTACCACCTAAGAGAGGCATTCCATCAACCTCAGTACCCACCTTGGAGTCTGCTGCTGCCATCACCACAAAAACACCAAGTGATGAAAGAGAGAAGAGCACGTGTTCTATGGGCTCGGAACTACTACCAATGATCTCACCTCGCTCTCCGTCCCCCCCACTGCCTACTCATATACCTCCAGAGCCTCCACGCACCCCTCCATTCCCTGCTAAGACTTTTCAAGTTGTGCCAGAAATTGAGTTTCCACCATCCTTAGATCTACACCAGGAGATTCCCCAGCAGGAAGATCAGAAAAAGGAAGTCCCCAAGAGGATACTGGACCAGAACTTTGGGGAGCCCCATATACCCTCTAGGCTGCCTCCACTCCCACTGCATATTCGAATCCAGCAGGCCCTCACCAGCCCACTTCCCATGACTCCTATTCTGGAGGGTTCTCACAGAGCTCATTCGTTGCTTTTTGAAAACAGTGACAGCTTTTCTGAGGACAGCAGTACGCTGGGTCGGACCAGGTCTCTTCCCATCACTATTGAAATGCTAAAAGTTCCAGACGATGAAGAAGAAGAGGAGCAAACCTGTCCATCCACATTCAGTGAAGAAATGACACCTACCTCAGTCATTCCTAAATTACCACAGTGTCTACGGGAGGAAGAAGAGAAGGAGAGCGACTCTGATTCAGAAGGTCCCATTCAGTACCGAGATGAAGAAGATGAAGATGAAAGCTATCAGA。
越来越多的证据表明，非编码RNA对生理、疾病过程发挥调控作用。内源性非编码RNA包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(long noncoding RNA，LncRNA)以及环状RNA(circularRNA，circRNA)。共价闭合的circRNA可通过多种机制发挥生物学功能，被认为是基因表达和病理网络的重要调节因子。因其具有普遍性、稳定性与组织特异性，还是极具潜力的分子标志物。
近年来研究发现，circRNA主要通过两种机制发挥作用：一方面circRNA可通过吸附miRNA，作为“miRNA海绵”，影响miRNA对下游靶基因mRNA的结合，发挥调控作用。另一方面，circRNA可作为蛋白质支架，增强或抑制靶蛋白的活性发挥调控作用。在肝癌发生发展中，circRNA作为“miRNA海绵”结合miRNA，抑癌circRNA结合促癌miRNA，可发挥抑癌作用；同时circRNA作为蛋白支架结合靶蛋白，抑癌circRNA结合促癌蛋白，抑制促癌蛋白功能，可发挥抑癌作用。反之亦然。最终导致或逆转生理病理过程。
附图说明
图1是环状RNA hsa_circ_0000038的形成和结构鉴定；
其中，(A)模式图显示环状RNA hsa_circ_0000038由基因PHACTR4的第6、7外显子反向剪切形成，扩散引物(Divergent primers)和收敛引物(Convergentprimers)分别以肝癌细胞系HepG2.2.15以及Huh7的gDNA和cDNA为模板，PCR扩增PHACTR4、hsa_circ_0000038，包含hsa_circ_0000038剪切位点的PCR产物进行Sanger测序鉴定，均发现成环位点正确；(B)扩散引物和收敛引物分别以肝癌细胞系HepG2.2.15的gDNA和cDNA为模板，PCR扩增PHACTR4、hsa_circ_0000038的琼脂糖凝胶电泳结果；(C)HepG2.2.15的RNA用RNaseR消化后，一般PCR扩增PHACTR4、hsa_circ_0000038的琼脂糖凝胶电泳结果；(D)HepG2.2.15以及Huh7用放线菌素 D (Actinomycin D)处理不同时间，RT-qPCR检测细胞中hsa_circ_0000038的表达水平；(E)hsa_circ_0000038在慢乙肝患者肝组织和正常人群肝组织中的表达水平；
图2是环状RNA hsa_circ_0000038在体外显著抑制肝癌细胞增殖，并可影响肝癌细胞迁移、侵袭能力；
其中，(A)显示环状RNA hsa_circ_0000038在不同肝癌细胞系中的mRNA表达水平；(B)Huh7和SK-hep-1细胞中过表达hsa_circ_0000038的水平；(C)Huh7和(D)SK-hep-1细胞过表达hsa_circ_0000038后，CCK8检测细胞增殖水平；Huh7和SK-hep-1细胞过表达hsa_circ_0000038后，(E)划痕和(F)transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力；
图3是敲低环状RNA hsa_circ_0000038在体外促进肝癌细胞增殖，并可影响肝癌细胞迁移、侵袭能力；
其中，(A)Huh7和SK-hep-1细胞中敲低hsa_circ_0000038的水平，(B)Huh7和SK-hep-1细胞中敲低hsa_circ_0000038后不影响其母本PHACTR4的表达，(C)HepG2和(D)MHCC97H细胞敲低hsa_circ_0000038后，CCK8检测细胞增殖水平，HepG2和MHCC97H细胞敲低hsa_circ_0000038后，(E)划痕和(F)transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力；
图4是环状RNA hsa_circ_0000038可靶向p53/p21轴影响细胞周期；
其中，(A)根据过表达和非过表达hsa_circ_0000038后的转录组数据进行生物信息学分析，hsa_circ_0000038影响基因可聚焦到p53信号通路，(B)通过western blot的方法检测过表达和敲低hsa_circ_0000038后p53、p21的蛋白水平变化，(C)流式细胞术的方法检测过表达和敲低hsa_circ_0000038后细胞周期的比例变化；
图5是环状RNA hsa_circ_0000038作为miR92a-2-5p的“海绵作用”；
其中，(A)RNAscope技术检测hsa_circ_0000038的定位，(B)AGO2 RIP实验检测miRNA与hsa_circ_0000038的结合，(C)生物信息学分析miR92a-2-5p可同时与hsa_circ_0000038、TP53mRNA结合，(D)miR92a-2-5p过表达后，AGO2 RIP实验检测miR92a-2-5p与hsa_circ_0000038的结合，(E)hsa_circ_0000038过表达或敲减后miR92a-2-5p的水平变化，(F)hsa_circ_0000038敲减后TP53mRNA的水平检测，(G)miR92a-2-5p过表达后，AGO2 RIP实验检测miR92a-2-5p与TP53mRNA8的结合，(H)在miR92a-2-5p与hsa_circ_0000038预测的结合位点进行突变后，双荧光素酶检测miR92a-2-5p与hsa_circ_0000038的结合，(I)在miR92a-2-5p与TP53mRNA预测的结合位点进行突变后，双荧光素酶检测miR92a-2-5p与TP53mRNA的结合；
图6是hsa_miR_92a-5p的生物学功能及调控机制；
其中，(A)在Huh7、SK-sep-1细胞中转hsa_miR_92a-5p模拟物mimics及在HepG2、MHCC97H细胞中转染其抑制物inhibitor，qPCR验证其表达效率，(B)过表达hsa_miR_92a-5pmimics或(C)miR_92a-5p inhibitor后，CCK8实验检测细胞增殖水平，(D)过表达hsa_miR_92a-5p mimics或miR_92a-5pinhibitor后，transwell实验检测细胞侵袭能力，(E)过表达hsa_miR_92a-5p mimics或inhibitor后，WB检测p53蛋白水平，(F)添加p53抑制剂可以逆转miR_92a-5p inhibitor的抑癌作用，(G)过表达hsa_miR_92a-5p mimics的同时再过表达hsa_circ_0000038，可以部分回复hsa_circ_0000038对HCC的抑制作用；
图7是环状RNA hsa_circ_0000038对肝癌细胞成瘤性的研究；
其中，(A)过表达hsa_circ_0000038后，用克隆形成实验检测hsa_circ_0000038对克隆形成的作用，上排为hsa_circ_0000038过表达Huh7细胞，下排为对照载体过表达的Huh7细胞，(B-D)通过接种过表达hsa_circ_0000038的Huh7细胞和对照Huh7细胞，监测裸鼠皮下瘤体形成及大小差异，上排为hsa_circ_0000038过表达Huh7细胞接种，下排为对照Huh7细胞接种。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明所述的环状RNA载体的应用为所述的环状RNA载体在制备抑癌药物中的应用；所述的环状RNA序列如SEQ ID NO. 1所示。
所述的癌为肝癌。
所述的肝癌为肝细胞型肝癌。
下面以具体实施案例对本发明做进一步说明：
实施例1
环状RNA hsa_circ_0000038特性检测及其在肝癌中的表达
1. 环状RNA hsa_circ_0000038是PHACTR4第6、7外显子反向剪切形成的环状RNA
我们通过对环状RNA hsa_circ_0000038在乙肝病毒中的相关研究发现，hsa_circ_0000038过表达能够明显抑制体外培养细胞的增殖水平，推测hsa_circ_0000038具有调控肿瘤增殖的能力。随即，我们对肝癌组织及对应癌旁组织进行RT-qPCR检测，发现hsa_circ_0000038在肝癌组织中的表达显著降低。因此，我们选择hsa_circ_0000038作为研究对象，进一步验证其在肝癌中的作用。
hsa_circ_0000038来自1号染色体PHACTR4基因的第6、7外显子反向剪切，PHACTR4pre-mRNA第7外显子3’端GA碱基与第6外显子5’端CT碱基相连，形成的共价闭合环状RNA。hsa_circ_0000038的核苷酸序列见表1，序列编号为SEQ ID NO.1（图1中的A）。
由于hsa_circ_0000038是PHACTR4的部分外显子首尾相接而形成的闭合环状结构，其剪切位点处的碱基序列与PHACTR4的碱基序列不同，因此，为验证hsa_circ_0000038的成环，我们设计了扩散引物(Divergent primers)用于特异性PCR扩增hsa_circ_0000038而非线性的PHACTR4。通过扩散引物(Divergentprimers)和收敛引物(Convergentprimers)分别以肝癌细胞系HepG2.2.15以及Huh7的gDNA和cDNA为模板，PCR扩增PHACTR4、hsa_circ_0000038，引物序列见表2。PCR产物用琼脂糖凝胶电泳进行检测，发现hsa_circ_0000038扩散引物只有以cDNA为模板时才能扩增出条带，而以gDNA为模板时扩不出条带。因为cDNA中既包含环状结构，还包含线性结构，而gDNA中只有线性结构。收敛引物以cDNA和gDNA为模板均可以扩增出条带（图1中的B）。为进一步证实hsa_circ_0000038的成环性，我们将扩散引物(Divergent primers)特异性扩增hsa_circ_0000038的PCR产物进行Sanger测序鉴定，发现PHACTR4第7外显子3’端GA碱基与第6外显子5’端CT碱基相连（图1中的C）。以上结果表明，环状RNAhsa_circ_0000038是PHACTR4第6、7外显子反向剪切形成的环状RNA，且扩散引物可以用来特异性检测hsa_circ_0000038。
表1 hsa_circ_0000038序列表
表2 鉴定hsa_circ_0000038的扩散引物(Divergent primers)和收敛引物(Convergent primers)
2. 环状RNA hsa_circ_0000038稳定性检测
为检测环状RNA hsa_circ_0000038是否较线性RNA分子具有更高的稳定性，我们用RNaseR处理HepG2.2.15细胞提取的RNA，RNaseR可以消化线性的RNA分子而不能消化环状的RNA分子，我们用RNaseR处理所提取的细胞总RNA，普通逆转录后用RT-qPCR引物进行扩增（引物序列见表3），我们发现hsa_circ_0000038可以耐受RNaseR的消化作用，而线性PHACTR4则对RNaseR的消化作用不耐受（图1中的D）。
表3 hsa_circ_0000038 RT-qPCR引物序列
放线菌素D (Actinomycin D)可以抑制RNA的合成，通过对HepG2.2.15细胞用放线菌素D处理不同时间，提取总RNA后进行RT-qPCR检测，我们发现PHACTR4 mRNA的水平明显受到抑制，而hsa_circ_0000038的形成则不受抑制（图1中的E）。以上实验说明hsa_circ_0000038比其亲本基因PHACTR4具有更高的稳定性。
3. 环状RNA hsa_circ_0000038在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达显著升高
我们通过分析慢乙肝患者的肝组织circRNA转录谱，检测到环状RNA hsa_circ_0000038在慢乙肝患者肝组织中极端上调。我们进一步用RT-qPCR的方法检测慢乙肝患者肝组织及健康人群肝组织的hsa_circ_0000038表达水平，发现其在慢乙肝患者肝组织中显著上调（图1中的F）。
实施例2
环状RNA hsa_circ_0000038在体外显著抑制肝癌细胞增殖，并可影响肝癌细胞迁移、侵袭能力
1. 过表达hsa_circ_0000038对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
我们首先检测不同肝癌细胞中hsa_circ_0000038的表达水平，通过对HepG2、Huh7、MHCC97H等细胞提取总RNA后进行RT-qPCR检测，发现HepG2、MHCC97H中hsa_circ_0000038表达水平较高，而Huh7、SK-hep1细胞中hsa_circ_0000038表达水平较低（图2中的A）。因此后续采用Huh7、SK-hep1细胞进行过表达处理。
我们构建hsa_circ_0000038真核表达载体，通过lipo3000转染的方法，在Huh7、SK-hep1细胞中过表达hsa_circ_0000038或空载体，发现hsa_circ_0000038均成功过表达（图2中的B）。
转染hsa_circ_0000038质粒或空载体质粒后，通过CCK8实验检测细胞增殖水平，发现过表达hsa_circ_0000038后，肝癌细胞的增殖能力受到明显抑制（图2中的C-D）。通过划痕实验及Transwell 实验，我们发现过表达hsa_circ_0000038后，肝癌细胞的迁移、侵袭能力均受到抑制（图2中的E-F）。
2. 敲低hsa_circ_0000038对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
我们设计hsa_circ_0000038成环位点处特异性siRNA（序列见表4），通过lipo3000转染的方法，在HepG2.2.15细胞中敲低hsa_circ_0000038或对照siRNA，以及在HBV感染的HepG2-NTCP细胞中敲低hsa_circ_0000038或对照siRNA，发现hsa_circ_0000038均成功敲低（图3中的A），而亲本基因PHACRTR4的表达水平没有明显变化（图3中的B）。在HepG2、MHCC97H中转染Si-circ38后，通过CCK8实验检测细胞增殖水平，发现敲低hsa_circ_0000038后，肝癌细胞的增殖能力明显增强（图3中的C-D）。通过划痕实验及Transwell 实验，我们发现敲低hsa_circ_0000038后，肝癌细胞的迁移、侵袭能力均增强（图3中的E-F）。
表4 hsa_circ_0000038 干扰序列
实施例3
环状RNA hsa_circ_0000038在体外可通过p53/p21通路影响肝癌细胞周期
1. 过表达hsa_circ_0000038后转录组数据GO分析聚焦到p53信号通路
我们在肝癌细胞中过表达hsa_circ_0000038或空载体，转录组测序分析，其中GO注释发现hsa_circ_0000038过表达后影响p53信号通路（图4中的A）。这提示hsa_circ_0000038可能通过影响p53信号通路发挥抑癌作用。
2. 过表达和敲低hsa_circ_0000038对肝癌细胞p53/p21蛋白水平的影响
我们通过lipo3000转染的方法，在HepG2、MHCC97H细胞中过表达或敲低hsa_circ_0000038或对照质粒及siRNA，提取总蛋白，western blot检测发现hsa_circ_0000038过表达后可上调p53/p21蛋白水平；而hsa_circ_0000038q敲低后可下调p53/p21蛋白水平（图4中的B）。
3. 过表达和敲低hsa_circ_0000038对肝癌细胞细胞周期的影响
我们通过lipo3000转染的方法，在HepG2、MHCC97H细胞中过表达或敲低hsa_circ_0000038或对照质粒及siRNA，通过细胞周期试剂盒用流式细胞术方法检测，发现hsa_circ_0000038过表达后可抑制细胞周期进入S期，更多的停留在G0/G1期；而hsa_circ_0000038q敲低后可促进细胞周期进入S期，更多的细胞进入G2期（图4中的C）。
实施例4
环状RNA hsa_circ_0000038抑制肝癌细胞增殖、迁移侵袭的分子机制
1. 环状RNA hsa_circ_0000038在肝癌细胞中的亚细胞定位
环状RNA功能通常与其在细胞中的位置相关，为检测hsa_circ_0000038在肝癌细胞中的定位，我们进行了circRNA Basescope检测，设计hsa_circ_0000038特异性环化位点探针，待肝癌细胞生长于玻片上后，固定、通透细胞，用Basescope技术将特异性探针与细胞爬片进行杂交，封片后显微镜拍照。实验结果表明，hsa_circ_0000038在肝癌细胞中主要存在于细胞质（图5中的A）。
2. 软件预测环状RNA hsa_circ_0000038可能的结合miRNA
根据文献报道，环状RNA常通过结合miRNA或蛋白来发挥功能，而Argonaute 2(AGO2)蛋白可以与成熟miRNA结合，形成RNA沉默复合体 (RISC)。因此，通过RNA结合蛋白AGO2免疫共沉淀实验(RIP)，我们发现用AGO2抗体进行免疫沉淀的产物可以扩增出hsa_circ_0000038信号（图5中的B）。说明hsa_circ_0000038可能具有结合miRNA的功能。
通过生物学软件预测发现hsa_miR_92a-5p同时与hsa_circ_0000038、TP53mRNA有结合（图5中的C），并且有文献报道hsa_miR_92a-5p具有促进HCC的作用。因此，我们选取hsa_miR_92a-5p作为候选miRNAs进行后续研究。
3. 环状RNA hsa_circ_0000038作为hsa_miR_92a-5p的“分子海绵”来发挥调控作用
通过RNA结合蛋白AGO2免疫共沉淀实验(RIP)，我们发现当hsa_miR_92a-5p过表达情况下，用AGO2抗体进行免疫沉淀的产物可以扩增出更强的hsa_circ_0000038信号（图5中的D）。提示hsa_circ_0000038与hsa_miR_92a-5p有潜在结合能力。通过在肝癌细胞中过表达hsa_circ_0000038，检测hsa_miR_92a-5p表达水平变化，发现当hsa_circ_0000038表达增强后，hsa_miR_92a-5p表达下调（图5中的E）；而当hsa_circ_0000038表达敲低后，hsa_miR_92a-5p表达上调（图5中的F）。这提示hsa_circ_0000038可能通过“miRNA海绵”的作用调控hsa_miR_92a-5p的表达。
进一步我们通过TargetScan软件寻找hsa_circ_0000038序列中hsa_miR_92a-5p潜在结合位点，构建包含hsa_circ_0000038部分序列的野生型双荧光素酶载体(pMIRGLO-circ38-WT)与相应miRNA结合位点突变的双荧光素酶载体(pMIRGLO-circ38-MUT)（图5中的G）。通过在肝癌细胞中共转染miRNA与pMIRGLO-circ38-WT/MUT质粒，发现双荧光素酶相对活性在转染pMIRGLO-circ38-WT质粒与hsa_miR_92a-5p mimics后显著下调，而在转染pMIRGLO-circ38-MUT质粒的细胞中，双荧光素酶活性则基本不变（图5H）。以上实验说明hsa_circ_0000038能与hsa_miR_92a-5p结合，hsa_circ_0000038通过“miRNA海绵”的吸附作用调控hsa_miR_92a-5p的表达。
实施例5
hsa_miR_92a-5p的生物学功能及调控机制
1. hsa_miR_92a-5p对肝癌细胞增殖和侵袭的影响
根据上述结果，我们对hsa_miR_92a-5p是否影响HCC的表型进行检测，通过在Huh7、SK-sep-1细胞中转hsa_miR_92a-5p模拟物mimics及在HepG2、MHCC97H细胞中转染其抑制物inhibitor，qPCR验证其表达效率（图6中的A）。通过CCK8实验检测细胞增殖水平，发现过表达hsa_miR_92a-5p mimics后，肝癌细胞的增殖能力受到明显促进（图6中的B），而转染miR_92a-5p inhibitor后，肝癌细胞的增殖能力受到明显抑制（图6中的C）。通过划痕实验及Transwell 实验，我们发现过表达hsa_miR_92a-5p mimics后，肝癌细胞的侵袭能力受到促进，而转染miR_92a-5p inhibitor后，肝癌细胞的侵袭能力受到抑制（图6中的D）。
2. hsa_miR_92a-5p调控肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制
为确认hsa_miR_92a-5p调控HCC的机制，我们通过生物信息学分析发现hsa_miR_92a-5p与TP53mRNA存在相互作用。因此我们进一步验证hsa_miR_92a-5p对HCC的影响是否通过TP53mRNA的调控作用。通过检测细胞中转染hsa_miR_92a-5p mimics或inhibitor后p53蛋白水平，发现hsa_miR_92a-5p mimics可显著下调p53的表达，而miR_92a-5pinhibitor可显著上调p53的表达（图6中的E）。通过添加p53抑制剂，发现p53抑制剂可以逆转miR_92a-5p inhibitor的抑癌作用（图6中的F）。以上结果显示：hsa_miR_92a-5p可通过影响p53抑癌因子的表达从而调控HCC进展。
实施例6
环状RNA hsa_circ_0000038/hsa_miR_92a-5p/p53调控肝癌细胞增殖
为进一步检测环状RNA hsa_circ_0000038是否通过hsa_miR_92a-5p调控p53，从而发挥调控HCC的功能。我们在肝癌细胞中共转染hsa_circ_0000038过表达质粒和hsa_miR_92a-5p mimics，通过检测细胞增殖表型，发现过表达hsa_miR_92a-5p可以部分回复hsa_circ_0000038对HCC的抑制作用（图6中的G）。以上实验显示，hsa_circ_0000038通过hsa_miR_92a-5p/p53轴调控HCC进展。
实施例7
环状RNA hsa_circ_0000038在肝癌细胞中对克隆形成的影响
为进一步检测hsa_circ_0000038在对HCC的影响，我们进行了克隆形成实验。通过接种过表达hsa_circ_0000038的Huh7细胞和对照Huh7细胞，监测克隆形成的数量差异。发现hsa_circ_0000038过表达能够显著抑制Huh7细胞的克隆形成（图7中的A）。
实施例8
环状RNA hsa_circ_0000038抑制肝癌细胞的裸鼠皮下成瘤
为进一步检测hsa_circ_0000038在体内对HCC的影响，我们进行了裸鼠皮下成瘤验证。通过接种过表达hsa_circ_0000038的Huh7细胞和对照Huh7细胞，监测皮下瘤体形成及大小差异。发现hsa_circ_0000038过表达能够显著抑制Huh7细胞在裸鼠中的皮下成瘤（图7中的B-C）。
Claims (3)
1.一种环状RNA载体的应用，其特征在于，所述的环状RNA载体在制备抑癌药物中的应用；所述的环状RNA序列如SEQ ID NO. 1所示。
2.根据权利要求1所述的环状RNA载体的应用，其特征在于，所述的癌为肝癌。
3.根据权利要求2所述的环状RNA载体的应用，其特征在于，所述的肝癌为肝细胞型肝癌。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410074721.0A CN118001294A (zh) | 2024-01-18 | 2024-01-18 | 一种环状rna载体的应用 |
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Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
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| CN118001294A true CN118001294A (zh) | 2024-05-10 |
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Country Status (1)
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2024
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