CN117982490A

CN117982490A - 一种硫杂环脂肪酸注射液

Info

Publication number: CN117982490A
Application number: CN202211328157.8A
Authority: CN
Inventors: 操锋; 郑磊; 程芳
Original assignee: Jiangsu Jinglixin Pharmaceutical Technology Co ltd
Current assignee: Jiangsu Jinglixin Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date: 2022-10-27
Filing date: 2022-10-27
Publication date: 2024-05-07

Abstract

本发明提供一种安全性高的硫杂环脂肪酸制剂，包括硫辛酸和助溶剂组分，所述硫杂环脂肪酸制剂中，含有硫杂环脂肪酸聚合物，其中，硫杂环脂肪酸聚合物含量不高于0.1％(w/v)。本发明所述的硫杂环脂肪酸制剂安全性高，毒性低，可以更好的发挥硫辛酸的临床疗效。

Description

一种硫杂环脂肪酸注射液

技术领域

本发明属于医药制剂领域，具体涉及一种硫杂环脂肪酸的注射液。

背景技术

硫辛酸，其化学名称为(±)-5-[3-(1，2-二硫杂环戊烷)]-戊酸，分子式为C₈H₁₄O₂S₂，分子量为206.33，是由Reed氏首次从猪肝中分离出来的天然产物，为丙酮酸和三羧酸循环中α-酮戊二酸的氧化脱羧反应的辅酶因子。硫辛酸兼具脂溶性与水溶性的特性，可以被运输到身体大部分组织内发挥作用。

硫辛酸被大量应用于治疗糖尿病的神经病变上。离体试验显示本品可以降低神经组织的脂质氧化现象，可能阻止蛋白质的糖基化作用；且可抑制醛糖还原酶，因而可阻止葡萄糖或半乳糖转化成为山梨醇，所以硫辛酸可以防止糖尿病、控制血糖及防止因高血糖造成的神经病变。

目前硫辛酸在国内外广泛应用，最早的上市药物硫辛酸源于德国，在欧洲，硫辛酸针剂是唯一被确认的并已上市的治疗糖尿病多发性微循环病变的药物；在我国，该药于2000年批准进口。2009年11月，国家新版医保目录首次收录了α-硫辛酸注射剂为调节血糖的医保乙类药物。

随着硫辛酸在临床的广泛应用，对其不良反应的报告也逐渐增多。临床应用中，硫辛酸注射液的不良反应比较常见，达到10％左右，多表现为输注部位疼痛、静脉炎、手臂酸胀、头晕、头疼、针刺样疼痛等。因此，研究如何降低硫辛酸的不良反应发生率，减小不良反应的严重程度，是本领域技术人员亟待解决的技术问题。

此外，硫辛酸在水中溶解度小，且具有热不稳定性，温度过高时，可能会被热分解，产生较高的杂质，从而影响其生物活性和使用安全性。因此，现有技术中，硫辛酸注射液长期存放会出现有关物质超标问题，澄明度不合格，pH值降低，稳定性较差影响药效和药物安全性。

因此，需要建立一种能够克服硫辛酸热不稳定性的处方，以及相对简便可实现的制备方法，提高硫辛酸注射液的热稳定性，并减小其不良反应的发生率。

发明内容

本发明对硫辛酸进行了大量研究，首次发现，在生产和贮存过程中，硫杂环脂肪酸(硫辛酸)制剂中会产生硫辛酸聚合物(含通式1结构分子和式2结构分子)。并进一步发现硫辛酸聚合物不仅会降低硫辛酸制剂的药效，也会在一定程度上增加硫辛酸制剂在体内的毒性。所述的硫辛酸聚合物包括各种含如式1、式2结构的分子。

式1：

其中n为2～10的整数；

式2：

因此，需要控制硫辛酸制剂中有关物质的量来提高其药效及使用安全性。

一方面，基于以上目的，本发明提供一种硫杂环脂肪酸制剂，含有硫辛酸、药学上可接受的辅料和硫辛酸聚合物(含有通式1结构的分子和式2结构的分子，如其盐或水合物)，其中，硫辛酸聚合物的一种或几种的质量体积百分含量不高于0.01～0.2％(w/v)。

一个优选的方案，所述硫杂环脂肪酸制剂为硫辛酸注射液，含有硫辛酸，助溶剂组分，其特征在于，所述硫辛酸注射液中，还含有硫辛酸聚合物，其中，硫辛酸聚合物为含有通式1结构的分子和式2结构的分子(如其盐或水合物)，优选为通式1中n为2-10的分子和式2结构的分子，更优选为通式1中n为2-4的分子和式2结构的分子，即硫辛酸二聚体(C₁₆H₂₈O₄S₄)、三聚体(C₂₄H₄₂O₆S₆)和四聚体(C₃₂H₅₆O₈S₈)，硫辛酸聚合物总量不高于0.1％(w/v)，优选不高于0.01％，更优选不高于0.001％。

优选的，硫辛酸与硫辛酸聚合物的含量之比不低于25︰1，优选的含量之比不低于150︰1，更优选的含量之比不低于1500︰1。

所述硫杂环脂肪酸注射液中，硫辛酸含量(w/v)不低于1％，优选含量2～10％，更优选含量为2.5％。

所述硫杂环脂肪酸注射液中，助溶剂组分含量(w/v)不低于0.1％，优选含量不低于0.5％，更优选的含量为0.5-0.8％。

优选的，所述药学上可接受的辅料可以为助溶剂、等渗调节剂、缓冲盐、抗氧化剂中的一种或几种。

所述助溶剂选自乙二胺、氨丁三醇或葡甲胺的一种或几种的组合。

进一步地，所述硫杂环脂肪酸注射液中还可以含有药学上可接受的等渗调节剂，所述等渗调节剂选自氯化钠、葡萄糖、果糖、磷酸盐、枸橼酸盐、甘露醇、聚乙二醇、丙二醇的一种或几种的组合。

进一步地，所述硫杂环脂肪酸注射液中还可以含有药学上可接受的缓冲盐，所述缓冲盐选自如枸橼酸盐、磷酸盐、碳酸盐等的一种或几种的组合。

进一步地，所述硫杂环脂肪酸注射液中还可以含有药学上可接受的抗氧化剂，所述抗氧化剂选自如半胱氨酸、亚硫酸氢钠、甘氨酸、亚硫酸钠等的一种或几种的组合。

本发明还公开了上述制备硫杂环脂肪酸注射液的方法，其步骤包括：

(1)预处理：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<1.0mg/L)；量取配液总量80-95％的注射用水；

(2)称量：按处方量称取硫辛酸，按处方量称取助溶剂、硫辛酸聚合物；

(3)加助溶剂：按约95％处方量加入助溶剂，搅拌均匀；

(4)加原料：在继续搅拌(100r/min-500r/min)状态下缓慢加入处方量硫辛酸及硫辛酸聚合物，搅拌均匀；

(5)加辅料：根据需要加入处方量等渗调节剂、缓冲盐、抗氧化剂；

(6)调节药液pH值：用剩余处方量的助溶剂调节pH值至8.2～8.4；

(7)稀配：补充注射用水至全量，搅拌20-40分钟；

(8)过滤：经0.45μm粗滤过滤器和两道0.2μm微孔过滤器过滤至灌封步骤，配制开始到灌装开始的时限为3-5小时内；

(9)灌封：检测中间产品，含量97.0-103.0％、pH值8.2～8.4为合格产品，将检测合格的中间产品药液灌装，灌封开始到灌封结束的时限为12小时内；(10)充氮、封口、灭菌：121℃湿热灭菌15-30min。采用上述的制备方法，可以有效降低注射液在储存过程中硫辛酸聚合物的产生。

另一方面，本发明还提供了一种硫辛酸的制备方法，其步骤包括：(1)硫化钠溶液的配置；(2)硫辛酸乙酯的合成；(3)硫辛酸乙酯的水解；(4)硫辛酸钠的酸化；(5)硫辛酸粗品的纯化。

具体的，步骤(1)为，将20重量份的硫化钠溶于80-120重量份纯化水中，在35℃-45℃溶解，配制成硫化钠溶液；步骤(2)为，在100-200重量份的水溶剂中加入6,8-二氯辛酸乙酯20-80份、硫磺5-10份、四丁基溴化铵2-5份，升温至85-86℃，将步骤(1)得到的硫化钠溶液缓慢加入到此水溶液中。加入硫化钠溶液后，继续反应3-5小时；反应结束后，降温到60-65℃，静止约60分钟，分层，即得到硫辛酸乙酯；步骤(3)为，在水溶剂中加入硫辛酸乙酯，再加入20-25份氢氧化钠和1-3份四丁基溴化铵，200-400r/min搅拌，升温至60℃-80℃，反应结束后，趁热抽滤；步骤(4)为，将步骤(3)得到的滤液降温至5℃-10℃，然后用盐酸调节pH至1-2过滤即得到硫辛酸粗品；步骤(5)为，将步骤(4)得到的硫辛酸粗品加入到混合溶剂(环己烷：乙酸乙酯＝5-10：1(w：w))中，100-500r/min搅拌下，加热升温至40℃-45℃，保温30-50分钟，使硫辛酸粗品完全溶解，然后加入36℃～40℃的纯化水，保持搅拌10-15分钟，静止20-30分钟除去水层，将有机层加热升温到40℃-50℃后，加入硅胶，搅拌2h后，抽滤。然后冷却至16℃-20℃，搅拌析晶1小时，抽滤即得到硫辛酸湿精品，然后在35℃-40℃温度下干燥12-24小时。

另一方面，本发明还提供了一种硫杂环脂肪酸注射液中硫辛酸聚合物的检测方法。该方法适用于硫辛酸注射液中硫辛酸聚合物的检测，且便于操作，分离度高，重现性好。

所述硫辛酸注射液中的硫辛酸聚合物采用液相色谱法进行检测。

固定相以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，优选选用Waters Symmetry C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱；流动相由流动相A与流动相B混合而成，流动相A为：0.002-0.01mol/L磷酸盐溶液，优选为0.005mol/L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH值为2.0-3.5，更优选的，pH值调节至2.3；流动相B为：乙腈；进行梯度洗脱；流速为0.5-1.5ml/min，优选为1.0ml/min；柱温为20-40℃，优选为35℃；检测波长为200-250nm，优选为215nm；检测时，以自制各硫辛酸聚合物单体为对照品，按外标法以对照品溶液中硫辛酸聚合物单体的峰面积计算硫辛酸注射液中硫辛酸聚合物的总量(相对保留时间1.3之后的杂质峰均为聚合物杂质，以其峰面积之和进行计算)。

梯度洗脱程序如下：

时间(min)	流动相A(％)	流动相B(％)
			0	80	20
10	80	20
			35	40	60
50	40	60
			51	80	20
60	80	20

本发明研究结果表明，随着硫辛酸聚合物含量的提高，硫辛酸注射液的不良反应发生率会出现显著提高，具体来说，使用者神经系统的不良反应率显著提高，具体表现为头疼、头晕等。

另一方面，本发明还提供一种硫辛酸注射液的质量评价方法，所述方法为，检测注射液中硫辛酸聚合物的总量，当所述注射液中硫辛酸聚合物含量超过0.1％(w/v)时，判定其为不合格品。

优选的，所述的硫辛酸聚合物为硫辛酸二聚体、三聚体和四聚体。

另一方面，本发明还提供一种提高硫辛酸注射液使用安全性的方法，所述方法为，检测注射液中硫辛酸聚合物的总量，当所述注射液中硫辛酸聚合物含量超过0.1％(1g/L)时，判定其为不合格品，并弃用。

本发明所述的硫辛酸，可以是(±)-硫辛酸，也可以是(+)-硫辛酸。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

1.本发明发现了一种硫辛酸制剂中新的有关物质，并对其毒性进行了充分的研究，同时推测了这种杂质与硫辛酸不良反应之间的关系。

2.本发明提供了一种硫辛酸注射液，其稳定性好，安全性高，毒性低，可以更好的发挥硫辛酸的临床疗效。

3.本发明提供了硫辛酸注射液中，对硫辛酸聚合物的检测方法，其分离度高，专属性好，可以对硫辛酸注射液中的硫辛酸聚合物进行准确的检测。

4.本发明提供了一种硫辛酸的制备方法，该方法制备的硫辛酸，纯度更高，配制的制剂有关物质含量小，提高了制剂的安全性。

5.本发明还提供了一种硫辛酸注射液的制备方法，该方法制备的注射液安全性好，稳定性高，并可以有效降低硫辛酸注射液的有关物质含量。

6.本发明还提供了一种硫辛酸注射液质量评价的方法，通过对硫辛酸聚合物含量的检测，将有关物质含量高于标准的产品判定为不合格品，以避免毒性较高的产品被患者使用，从而提高了硫辛酸注射液的使用安全性。

7.本发明还提供了一种提高硫辛酸注射液使用安全性的方法，通过对硫辛酸聚合物含量的检测，从而判断该批产品是否可以使用，以降低患者用药时的风险。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为硫辛酸制剂的液相色谱图。

图2为硫辛酸聚合物二聚体的氢谱图。

图3为硫辛酸聚合物三聚体的氢谱图。

图4为硫辛酸聚合物四聚体的氢谱图。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步的说明。应理解的是，本发明实施例仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明的构思前提下，对本发明的简单改进均属于本发明要求保护的范围。

实施例1硫辛酸的制备

(1)称取20g的硫化钠溶于80g纯化水中，在35℃溶解，配制成硫化钠溶液；(2)在100g水中加入6,8-二氯辛酸乙酯20g、硫磺5g、四丁基溴化铵2g，升温至85℃，将步骤(1)得到的硫化钠溶液缓慢加入到此水溶液中。加入硫化钠溶液后，继续反应3小时；反应结束后，降温到60℃，静止约60分钟，分层，即得到硫辛酸乙酯；(3)在水溶剂中加入硫辛酸乙酯，再加入氢氧化钠20g和四丁基溴化铵1g，200r/min搅拌，升温至60℃，反应结束后，趁热抽滤；(4)将步骤(3)得到的滤液降温至5℃，然后用盐酸调节pH至1，过滤即得到硫辛酸粗品；(5)将步骤(4)得到的硫辛酸粗品加入到混合溶剂(环己烷：乙酸乙酯＝5：1(w：w))中，100r/min搅拌下，加热升温至40℃，保温30分钟，使硫辛酸粗品完全溶解，然后加入36℃的纯化水，保持搅拌10分钟，静止20分钟除去水层，将有机层加热升温到40℃后，加入硅胶，搅拌2h后，抽滤。然后冷却至16℃，搅拌析晶1小时，抽滤即得到硫辛酸湿精品，然后在35℃温度下干燥12小时。

实施例2

本发明所述硫辛酸低聚物的分离鉴定

(1)称取实施例1制得的硫辛酸25g，置于反应瓶中，加入10％氢氧化钠溶液100ml，放置数小时，得到待制备的样品溶液。

(2)采用高效液相色谱法进行检测。

固定相以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，选用Waters Symmetry C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱；流动相A为0.005mol/L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH值至2.3；流动相B为乙腈；按表1进行梯度洗脱；流速：10ml/min；柱温：35℃；检测波长：215nm，进样体积：20μl。

表1梯度洗脱流动相浓度变化

HPLC色谱图如图1所示，由于硫辛酸低聚物存在多个手性中心，因此图中出现的峰形为手性异构体的峰。分段收集主峰后各峰的流出液，富集，55℃下旋蒸有机相，-20℃冷冻干燥，得不同聚合程度的硫辛酸低聚物。硫辛酸的二聚体、三聚体、四聚体进行高分辨质谱分析，ESI-MS(m/z)分别为412.0870[M+H]+、618.1306[M+H]+、824.1741[M+H]+。硫辛酸二聚体、三聚体、四聚体的氢谱图见图2-4。

实施例3

按本发明的方法制备硫辛酸注射液(12ml：300mg)。

(1)称取市售硫辛酸20g，乙二胺5g，；(2)预处理：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<1.0mg/L)；量取配液总量80％的注射用水，也就是800ml；(3)称量：按处方量称取硫辛酸，按处方量称取乙二胺、硫辛酸三聚体；(4)加助溶剂：按约95％处方量加入乙二胺，搅拌均匀；(5)加原料：在继续搅拌(100r/min)状态下缓慢加入处方量硫辛酸及硫辛酸三聚体，搅拌均匀；(6)调节药液pH值：用剩余处方量的助溶剂调节pH值至8.2～8.4；(7)稀配：补充注射用水至全量1000ml，搅拌20分钟；(8)过滤：经0.45μm粗滤过滤器和两道0.2μm微孔过滤器过滤至灌封步骤，配制开始到灌装开始的时限为3小时内；(9)灌封：检测中间产品，含量97.0-103.0％、pH值8.2～8.4为合格产品，将检测合格的中间产品药液灌装，灌封开始到灌封结束的时限为12小时内；(10)充氮、封口、灭菌：121℃湿热灭菌15min。即得硫辛酸注射液。

实施例4

按本发明的方法制备硫辛酸注射液(12ml：300mg)。

(1)称取市售硫辛酸50g，乙二胺8g，硫辛酸聚合物0.1g；(2)预处理：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<1.0mg/L)；量取配液总量95％的注射用水，也就是950ml；(3)称量：按处方量称取硫辛酸，按处方量称取乙二胺、硫辛酸三聚体；(4)加助溶剂：按约95％处方量加入乙二胺，搅拌均匀；(5)加原料：在继续搅拌(500r/min)状态下缓慢加入处方量硫辛酸及硫辛酸三聚体，搅拌均匀；(6)调节药液pH值：用剩余处方量的助溶剂调节pH值至8.2～8.4；(7)稀配：补充注射用水至全量1000ml，搅拌40分钟；(8)过滤：经0.45μm粗滤过滤器和两道0.2μm微孔过滤器过滤至灌封步骤，配制开始到灌装开始的时限为4.5小时内；(9)灌封：检测中间产品，含量97.0-103.0％、pH值8.2～8.4为合格产品，将检测合格的中间产品药液灌装，灌封开始到灌封结束的时限为12小时内；(10)充氮、封口、灭菌：121℃湿热灭菌30min。即得硫辛酸注射液。

实施例5

按本发明的方法制备硫辛酸注射液。

(1)称取市售硫辛酸25g，乙二胺6g，硫辛酸聚合物0.01g；(2)预处理：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<1.0mg/L)；量取配液总量95％的注射用水，也就是950ml；(3)称量：按处方量称取硫辛酸，按处方量称取乙二胺、硫辛酸三聚体；(4)加助溶剂：按约95％处方量加入乙二胺，搅拌均匀；(5)加原料：在继续搅拌(300r/min)状态下缓慢加入处方量硫辛酸及硫辛酸三聚体，搅拌均匀；(6)调节药液pH值：用剩余处方量的助溶剂调节pH值至8.2～8.4；(7)稀配：补充注射用水至全量1000ml，搅拌30分钟；(8)过滤：经0.45μm粗滤过滤器和两道0.2μm微孔过滤器过滤至灌封步骤，配制开始到灌装开始的时限为4小时内；(9)灌封：检测中间产品，含量97.0-103.0％、pH值8.2～8.4为合格产品，将检测合格的中间产品药液灌装，灌封开始到灌封结束的时限为12小时内；(10)充氮、封口、灭菌：121℃湿热灭菌30min。即得硫辛酸注射液。

实施例6

按本发明的方法制备硫辛酸注射液。

(1)称取实施例1制备的硫辛酸25g，乙二胺6g，硫辛酸聚合物0.01g；(2)预处理：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<1.0mg/L)；量取配液总量95％的注射用水，也就是950ml；(3)称量：按处方量称取硫辛酸，按处方量称取乙二胺、硫辛酸三聚体；(4)加助溶剂：按约95％处方量加入乙二胺，搅拌均匀；(5)加原料：在继续搅拌(300r/min)状态下缓慢加入处方量硫辛酸及硫辛酸三聚体，搅拌均匀；(6)调节药液pH值：用剩余处方量的助溶剂调节pH值至8.2～8.4；(7)稀配：补充注射用水至全量1000ml，搅拌30分钟；(8)过滤：经0.45μm粗滤过滤器和两道0.2μm微孔过滤器过滤至灌封步骤，配制开始到灌装开始的时限为4小时内；(9)灌封：检测中间产品，含量97.0-103.0％、pH值8.2～8.4为合格产品，将检测合格的中间产品药液灌装，灌封开始到灌封结束的时限为12小时内；(10)充氮、封口、灭菌：121℃湿热灭菌30min。即得硫辛酸注射液。

实施例7

按本发明的方法制备硫辛酸注射液。

(1)称取实施例1中制备的硫辛酸25g，乙二胺6g；(2)预处理：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<1.0mg/L)；量取配液总量95％的注射用水，也就是950ml；(3)称量：按处方量称取硫辛酸，按处方量称取乙二胺；(4)加助溶剂：按约95％处方量加入乙二胺，搅拌均匀；(5)加原料：在继续搅拌(300r/min)状态下缓慢加入处方量硫辛酸，搅拌均匀；(6)调节药液pH值：用剩余处方量的助溶剂调节pH值至8.2～8.4；(7)稀配：补充注射用水至全量1000ml，搅拌30分钟；(8)过滤：经0.45μm粗滤过滤器和两道0.2μm微孔过滤器过滤至灌封步骤，配制开始到灌装开始的时限为4小时内；(9)灌封：检测中间产品，含量97.0-103.0％、pH值8.2～8.4为合格产品，将检测合格的中间产品药液灌装，灌封开始到灌封结束的时限为12小时内；(10)充氮、封口、灭菌：121℃湿热灭菌30min。即得硫辛酸注射液。

对比例1

按照CN103655469A的方法制备硫辛酸注射液，具体步骤如下：

称取硫辛酸15g，乙二胺3.87g，注射用水加至600ml。

制备工艺：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<50μg/ml)。量取配液总量3/4的注射用水。按处方比例加入乙二胺，搅拌均匀。在继续搅拌状态下缓慢加入处方量硫辛酸，搅拌均匀。再加水至全量，加入活性炭，搅拌30分钟。经Φ3μm钛棒过滤器(5芯)粗滤脱碳。初测pH值为8.15。再经0.45μm聚醚砜折叠滤膜芯一级过滤、0.22μm聚醚砜折叠滤膜芯一级除菌过滤。再经过0.22μm聚醚砜折叠滤膜芯二级除菌过滤至灌封，121℃湿热灭菌15min，即得。

对比例2

按照CN103655469A的方法制备硫辛酸注射液，具体步骤如下：

称取硫辛酸15g，乙二胺3.87g，硫辛酸聚合物2g，注射用水加至600ml。

制备工艺：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<50ug/ml)。量取配液总量3/4的注射用水。按处方比例加入乙二胺，搅拌均匀。在继续搅拌状态下缓慢加入处方量硫辛酸及硫辛酸三聚体，搅拌均匀。再加水至全量，加入活性炭，搅拌30分钟。经Φ3μm钛棒过滤器(5芯)粗滤脱碳。初测pH值为8.15。再经0.45μm聚醚砜折叠滤膜芯一级过滤、0.22μm聚醚砜折叠滤膜芯一级除菌过滤。再经过0.22μm聚醚砜折叠滤膜芯二级除菌过滤至灌封，121℃湿热灭菌15min，即得。

对比例3

采用本发明方法制备硫辛酸注射液。

(1)称取实施例1中制备的硫辛酸25g，乙二胺6g，硫辛酸聚合物2g；(2)预处理：注射用水充氮脱氧，检测水中含氧量合格(水中含氧量<1.0mg/L)；量取配液总量95％的注射用水，也就是950ml；(3)称量：按处方量称取硫辛酸，按处方量称取乙二胺、硫辛酸三聚体；(4)加助溶剂：按约95％处方量加入乙二胺，搅拌均匀；(5)加原料：在继续搅拌(300r/min)状态下缓慢加入处方量硫辛酸及硫辛酸三聚体，搅拌均匀；(6)调节药液pH值：用剩余处方量的助溶剂调节pH值至8.2～8.4；(7)稀配：补充注射用水至全量1000ml，搅拌30分钟；(8)过滤：经0.45μm粗滤过滤器和两道0.2μm微孔过滤器过滤至灌封步骤，配制开始到灌装开始的时限为4小时内；(9)灌封：检测中间产品，含量97.0-103.0％、pH值8.2～8.4为合格产品，将检测合格的中间产品药液灌装，灌封开始到灌封结束的时限为12小时内；(10)充氮、封口、灭菌：121℃湿热灭菌30min。即得硫辛酸注射液。

实施例11

采用实施例2的方法对对比例1-3，实施例3-7的硫辛酸制剂中的硫辛酸及硫辛酸聚合物的含量进行检测。结果如表2所示。根据实施例7的检测结果，采用本发明的制备方法，可以制备出硫辛酸聚合物含量小于0.02g/L，甚至小于0.01g/L的硫辛酸制剂，也就是硫辛酸聚合物含量小于0.002％(w/v)，甚至小于0.001％(w/v)，这是现有技术中所无法达到的。

表2对比例1-3、实施例3-7的制剂中的硫辛酸及硫辛酸聚合物(总杂)的含量

	硫辛酸(g/L)	硫辛酸聚合物(g/L)
			对比例1	25.08	0.025
对比例2	25.12	2.031
			对比例3	25.06	2.004
实施例3	19.95	1.020
			实施例4	50.04	0.118
实施例5	25.13	0.025
			实施例6	25.09	0.017
实施例7	25.18	0.006

实施例12

对对比例1-3及实施例3-7制备的硫辛酸制剂进行长期毒性实验。(人与大鼠的剂量换算比值为6.25)

取健康SD大鼠，体重(125±10)g，每组50只，雌雄各半，实验组按制剂量每日0.5ml/kg的剂量静脉注射给药，空白对照组按等量生理盐水注射给药。投药前观察一周，各组动物活动、进食、粪便等情况均无异常，然后开始给药。

每天按时给药1次，连续60天，每周称体重一次，据体重变化调整给药量。进行外观体征、行为活动、粪便性状、食量、体重变化等一般观察。

待用药结束后，摘眼球取血进行血象、血生化检查，取心、肝、脾、肺、肾五个脏器称重，计算每100g体重的器官比重量。

实验结果如表3所示。

表3对比例1-3及实施例3-7制备的硫辛酸制剂进行长期毒性实验结果

根据表10的实验结果，对比例2-3中均出现了神经系统失常的大鼠，可知在硫辛酸制剂中，硫辛酸聚合物含量对大鼠的不良反应发生率有一定的影响，高含量的硫辛酸聚合物导致不良反应率的上升。

实施例13

将对比例1-3及实施例3-7获得的成品，置于25℃避光保存24月。

分别检测上述硫辛酸制剂中硫辛酸及硫辛酸聚合物的含量。

检测结果如表4所示。

表4 25℃避光保存24月后，对比例1-3、实施例6-15的制剂中的硫辛酸及硫辛酸聚合物的含量

由表4的结果可知，采用本发明中所述的制备方法制备的硫辛酸注射液(实施例3-7)，相比与对比例1、对比例2的制备方法，在储存中硫辛酸聚合物的产生量更小(p＜0.01)，对硫辛酸的含量影响也更小(p＜0.01)。

采用常规方法制备的硫辛酸注射液，在产生硫辛酸聚合物的同时，其硫辛酸的含量也必然降低，影响了药物的疗效。

其中，采用本发明方法(实施例1)制备的硫辛酸，制备成相应制剂后(实施例6，7)，在储存中硫辛酸聚合物的产生量相对于市售硫辛酸制备的制剂(实施例3-5)，显著减少(p＜0.01)。

上述数据证明，无论是采用本发明中提供的硫辛酸制备方法，或是硫辛酸注射液的制备方法，均能有效的降低在硫辛酸注射液储存过程中硫辛酸聚合物的产生量，从而保证硫辛酸主药含量的稳定及药品安全。

实施例14

将对比例1-3及实施例3-7获得的成品，置于25℃避光保存24月。对上述制剂按实施例12的方法进行长期毒性实验。实验结果如表5所示。

表5 25℃避光保存24月后，对比例1-3及实施例3-7制备的硫辛酸制剂进行长期毒性实验结果

根据表5的实验结果可知，在硫辛酸制剂中，硫辛酸聚合物的含量对大鼠的不良反应发生率有显著的影响，高含量的硫辛酸聚合物导致不良反应率显著上升。

由表5的实验结果可知，无论是对比例1-3，还是实施例3，当硫辛酸聚合物的含量超过1g/L(0.1％)时，大鼠不良反应发生数量会有显著提高(p＜0.01)，且含量越高，不良反应发生率越高；根据实施例4，当硫辛酸聚合物的含量超过0.1g/L(0.01％)小于1g/L(0.1％)时，大鼠会发生极少量的不良反应，显著少于含量超过1g/L的实施例(p＜0.01)；而实施例5-7中，硫辛酸聚合物的含量小于0.1g/L(0.01％)，则没有出现不良反应。进一步证明了控制硫辛酸制剂中硫辛酸聚合物含量的重要性，以及证明了本发明制备的硫辛酸制剂的稳定性及安全性。

应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims

1.一种硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于含有硫辛酸、药学上可接受的辅料和硫辛酸聚合物，所述硫辛酸聚合物具有如下结构：

式1：或式2：/>

其中n为2～10的整数，

所述硫杂环脂肪酸硫辛酸制剂中聚合物的一种或几种的质量体积百分含量不高于0.1％。

2.根据权利要求1所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于所述硫辛酸聚合物为：

3.根据权利要求1所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于：硫辛酸聚合物质量体积百分含量不高于0.01％。

4.根据权利要求1所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于：硫辛酸聚合物质量体积百分含量不高于0.001％。

5.根据权利要求1所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于：硫辛酸与硫辛酸聚合物的含量之比不低于25︰1。

6.根据权利要求5所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于：硫辛酸与硫辛酸聚合物的含量之比不低于150︰1。

7.根据权利要求1所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于：所述制剂为注射液，包括硫辛酸、助溶剂、溶剂和硫辛酸聚合物，所述硫辛酸质量体积百分含量不低于1％，助溶剂质量体积百分含量不低于0.1％。

8.根据权利要求7所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于：所述溶剂为水，助溶剂选自乙二胺、氨丁三醇或葡甲胺中的一种或几种。

9.根据权利要求7所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于：还包括药学上可接受的等渗调节剂、缓冲盐、抗氧化剂中的一种或几种。

10.根据权利要求7所述的硫杂环脂肪酸制剂，其特征在于：所述等渗调节剂选自氯化钠、葡萄糖、果糖、磷酸盐、枸橼酸盐、甘露醇、聚乙二醇、丙二醇中的一种或几种，所述缓冲盐选自枸橼酸盐、磷酸盐、碳酸盐中的一种或几种，所述抗氧化剂选自半胱氨酸、亚硫酸氢钠、甘氨酸、亚硫酸钠中的一种或几种。