CN117918244A - 胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及植物杂交子代苗技术领域,是一种胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,该胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,包括杂交种子采集,杂交种子促萌培养,子代苗室内培育,子代苗室外炼苗培养,子代苗大田培育。本发明采用多次转移培养的方法,在短期内实现了胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速繁殖,提高了杂交子代苗的成苗速度,对干旱区困难立地造林高抗逆性新材料的应用提供有力支持。此外,本发明中使用材料易购且价格低廉,生产成本较低,操作简单易行,可广泛应用于植物杂交子代的优选或育苗工作中。

Description

胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法
技术领域
本发明涉及植物杂交子代苗技术领域,是一种胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法。
背景技术
胡杨(Populus euphraticaOliv.)又称异叶杨,属杨柳科,是杨属中最原始、最古老的树种,胡杨具有抗热、抗寒抗旱、抗风沙、抗盐碱、抗瘩薄的特性,胡杨是极端干旱的沙漠地区唯一的乔木树种,是荒漠绿洲地区重要的抗逆种质资源,是风沙前沿、盐碱较重等区域主要的防护林造林优选树种。小叶杨(Populus simonii Carrière),别名南京白杨,具耐寒、耐旱、耐盐碱、抗病虫害、生长块的特性,是东北和西北防护林和用材林主要树种之一。因胡杨生态学与生物学的高抗逆特性,使胡杨为亲本培育高抗逆性造林材料的工作成为干旱荒漠区林木良种培育方面的重点内容。目前国内外不少学者对胡杨杂交改良进行了大量的工作,但胡杨遗传特性十分牢固,获得优良的改良品系较少,且均集中在以胡杨为父本的杂交育种,杂交子代在遗传特性上更易于遗传母本的特性,因此,以胡杨为母本的杂交工作显得尤为重要。但目前以胡杨为母本的种间杂交育种研究工作尚无有效进展,主要表现在胡杨与其他其它派杨树杂交的不亲和性,杂交子代种子成熟度不高难以得到杂种植株等方面。因此,急需形成一胡杨杂交苗的培育技术,为胡杨杂交选优提供大量样本,为满足干旱半干旱区困难立地条件下对高抗逆性树种的需求提供有力技术支撑。
目前杂交子代的培育主要采用组培、嫁接及剥除种皮后培育等方式,通过使用不同的培养基将种子培育出苗,然后将幼苗转移到生根培养基上进行培养,得到无菌苗,无菌苗长大后移植,得到杂交苗,整个培养过程需4个月左右。嫁接方式主要为将杂交种子的种胚嫁接于砧木上,利用透光套袋套住种胚及嫁接部位并密封后进行培养,然后解除透光套袋的密封状态,继续培养后完全去除透光套袋,最后喷施保湿膜溶液以提升杂交苗的嫁接成活率。剥除种皮后进行培育主要是将种皮剥除,经生根粉浸泡,恒温培养催芽,促进种胚快速萌芽,再用胚芽进行播种育苗,待幼苗长出真叶后移至大棚,最后进行移栽定植。但现有技术主要存在以下缺点:组织培养技术中不同植物需要的培养基也不同,需先针对供试材料进行培养基的筛选,需要有专业的组培间及无菌操作间等试验条件,对操作人员专业知识背景要求高,生产成本高;嫁接技术为无性繁殖,嫁接苗会保持杂交苗的性状,无法应用于杂交子代苗的优系筛选;剥除种皮后的培育技术因胡杨×小叶杨杂交子代种子及其微小(长1mm至1.2mm,中部直径0.5mm至0.7mm),无法进行种皮的剥除,该方法不适宜极其微小的杂交种子。
发明内容
本发明提供了一种胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,克服了上述现有技术之不足,其能有效解决现有胡杨与小叶杨杂交子代苗的问题。
本发明的技术方案是通过以下措施来实现的:一种胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,按下述步骤进行:
第一步,杂交种子采集:胡杨×小叶杨杂交蒴果成熟之前,在果枝上套育种袋,待子代蒴果开裂达到80%以上时,剪下套袋果枝,将套袋果枝冷藏;
第二步,杂交种子促萌培养:于套袋果枝的蒴果中取出杂交种子平铺于培养盘中湿润的纸面上,于向阳处进行培养,至杂交种子萌发出子叶,待子叶生长1天至2天,得到子代幼苗;
第三步,子代苗室内培育:在培养皿平铺基质,并喷水浸透基质,在培养皿中间隔设置定植穴,从培养盘中取出子代幼苗,将子代幼苗根部的绒絮去除,放入定植穴中,将培养皿放置于向阳处进行室内培育,待幼苗长出2片真叶,且单片真叶面积≧9mm2时进行下一步操作;
第四步,子代苗室外炼苗培养:在育苗纸筒中填装基质并开挖定植穴,将培养皿中的单株幼苗取出,放置在育苗纸筒内的定植穴中,之后将育苗纸筒埋入育苗床,对单株幼苗进行10天至15天的遮荫培养,之后去除遮荫,待单株幼苗高度为15cm至20cm时,进行大田培育;
第五步,子代苗大田培育:采用沙壤土或沙土作为培育土壤并设置栽植穴,在栽植穴底部施用复合肥,将育苗纸筒放入栽植穴中,栽植后进行灌溉和管理。
上述第一步中,育种袋两面为不同材质,育种袋阴面为牛皮纸材质,阳面为高密度聚乙烯合成纸(特卫强)材质。
上述第一步中,果枝套袋时间为5月底至6月初。
上述第一步中,冷藏温度为1℃至7℃,冷藏时间为1天至2天。
上述第二步中,杂交种子促萌培养过程中,每24小时向培养盘中喷水3次至4次,保持培养盘中纸面湿润。
上述第三步中,培养皿内基质为蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土的混合物,蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土的质量比为3:1:1:1,将蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土混合均匀后使用消毒剂对基质消毒。
上述第三步中,定植穴间隔为2cm至5cm。
上述第三步中,室内培育时长为5天至10天,室内培育期间对培养皿内基质进行喷水,基质浸润深度为10mm至12mm。
上述第四步中,育苗纸筒为可降解纸筒,规格为直径10cm×高25cm,纸筒壁四周和底部均开设有多个直径1cm至1.5cm的孔洞。
上述第四步中,育苗纸筒内的定植穴直径为2cm±0.3cm,深2cm±0.3cm,每个育苗纸筒中定植穴为2个。上述第四步中,将育苗纸筒埋入育苗床的埋设深度为17cm至20cm,育苗纸筒之间间距为4cm至6cm,育苗床基质为质量比为3:1的蛭石和河沙混合物。
上述第四步子代苗室外炼苗培养过程中用淡水喷洒育苗纸筒和育苗床基质,保持育苗纸筒和育苗床基质润湿。
上述第四步中,遮荫操作为:在育苗床基质上方2.0m至2.5m处安装遮光率为80%的遮荫网,日间遮荫8小时至10小时。
上述第五步中,培育土壤中总盐的质量百分数小于0.2%,培育土壤中有机质含量质量百分数大于2%,栽植穴底部施用复合肥40g至60g,复合肥总养分含量>45%。
本发明采用多次转移培养的方法,在短期内实现了胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速繁殖,提高了杂交子代苗的成苗速度,对干旱区困难立地造林高抗逆性新材料的应用提供有力支持。此外,本发明中使用材料易购且价格低廉,培养盘、培养皿、遮荫网等材料均可连续使用,生产成本较低,对技术人员及实验条件要求较低,简单易行,可广泛应用于植物杂交子代的优选或育苗工作中。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制,可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本发明中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明,均为现有技术中公知公用的化学试剂和化学用品;本发明中的百分数如没有特殊说明,均为质量百分数;本发明中的常温、室温一般指15℃到25℃的温度,一般定义为25℃。
下面结合实施例对本发明作进一步描述:
实施例1:该胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,按下述步骤进行:
第一步,杂交种子采集:胡杨×小叶杨杂交蒴果成熟之前,在果枝上套育种袋,待子代蒴果开裂达到80%以上时,剪下套袋果枝,将套袋果枝冷藏;
第二步,杂交种子促萌培养:于套袋果枝的蒴果中取出杂交种子平铺于培养盘中湿润的纸面上,于向阳处进行培养,至杂交种子萌发出子叶,待子叶生长1天至2天,得到子代幼苗;
第三步,子代苗室内培育:在培养皿平铺基质,并喷水浸透基质,在培养皿中间隔设置定植穴,从培养盘中取出子代幼苗,将子代幼苗根部的绒絮去除,放入定植穴中,将培养皿放置于向阳处进行室内培育,待幼苗长出2片真叶,且单片真叶面积≧9mm2时进行下一步操作;
第四步,子代苗室外炼苗培养:在育苗纸筒中填装基质并开挖定植穴,将培养皿中的单株幼苗取出,放置在育苗纸筒内的定植穴中,之后将育苗纸筒埋入育苗床,对单株幼苗进行10天至15天的遮荫培养,之后去除遮荫,待单株幼苗高度为15cm至20cm时,进行大田培育;
第五步,子代苗大田培育:采用沙壤土或沙土作为培育土壤并设置栽植穴,在栽植穴底部施用复合肥,将育苗纸筒放入栽植穴中,栽植后进行灌溉和管理。
实施例2:作为上述实施例的优化,第一步中,育种袋两面为不同材质,育种袋阴面为牛皮纸材质,阳面为高密度聚乙烯合成纸(特卫强)材质。育种袋的规格根据果枝长短确定,一般为20cm×35cm、30×40cm、35×50cm。套袋时,将高密度聚乙烯合成纸朝上,增加透光性,牛皮纸一面超下,增加透气性。
实施例3:作为上述实施例的优化,第一步中,果枝套袋时间为5月底至6月初。
实施例4:作为上述实施例的优化,第一步中,冷藏温度为1℃至7℃,冷藏时间为1天至2天。
实施例5:作为上述实施例的优化,第二步中,杂交种子促萌培养过程中,每24小时向培养盘中喷水3次至4次,保持培养盘中纸面湿润。
实施例6:作为上述实施例的优化,第三步中,培养皿内基质为蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土的混合物,蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土的质量比为3:1:1:1,将蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土混合均匀后使用消毒剂对基质消毒。采用的消毒剂可为波尔多液(配比为硫酸铜:石灰:水=1:1:100)。
实施例7:作为上述实施例的优化,第三步中,定植穴间隔为2cm至5cm。
实施例8:作为上述实施例的优化,第三步中,室内培育时长为5天至10天,室内培育期间对培养皿内基质进行喷水,基质浸润深度为10mm至12mm。
实施例9:作为上述实施例的优化,第四步中,育苗纸筒为可降解纸筒,规格为10cm×25cm(直径×高),纸筒壁四周和底部均开设有多个直径1cm至1.5cm的孔洞。
实施例10:作为上述实施例的优化,第四步中,育苗纸筒内的定植穴直径为2cm±0.3cm,深2cm±0.3cm,每个育苗纸筒中定植穴为2个。育苗纸筒内的基质与培养皿内基质相同。
实施例11:作为上述实施例的优化,第四步中,将育苗纸筒埋入育苗床的埋设深度为17cm至20cm,育苗纸筒之间间距为4cm至6cm,育苗床基质为质量比为3:1的蛭石和河沙混合物。
实施例12:作为上述实施例的优化,第四步子代苗室外炼苗培养过程中用淡水喷洒育苗纸筒和育苗床基质,保持育苗纸筒和育苗床基质润湿。子代苗室外炼苗培养过程中需保障幼苗的水分状况,具体的,将幼苗定植于育苗纸筒后,用淡水喷洒育苗纸筒,浸润深度为3cm左右,之后将育苗纸筒埋入育苗床,用淡水喷洒育苗床基质,使其完全浸透,遮荫培养期间每日早晚淡水喷洒1次育苗纸筒,浸润深度为3cm左右,每隔3天淡水喷淋一次基质,浸润深度为18cm,7天后改为每天喷水1次,去除遮荫后,每隔2天喷水1次。
实施例13:作为上述实施例的优化,第四步中,遮荫操作为:在育苗床基质上方2.0m至2.5m处安装遮光率为80%的遮荫网,日间遮荫8小时至10小时。
实施例14:作为上述实施例的优化,第五步中,培育土壤中总盐的质量百分数小于0.2%,培育土壤中有机质含量质量百分数大于2%,栽植穴底部施用复合肥40g至60g;复合肥总养分含量>45%,其中,N元素、P2O5和K2O的质量比为1:1:1。
本发明的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,通过保持良好水分状况,提高胡杨与小叶杨杂交种子萌发率,平均萌发率达到64%;通过多次转移培养,缩短了杂交苗的培育时长,从种子促萌至大田培育仅需70天左右,多孔可降解育苗袋的使用不仅利于根系水平及垂直方向的生长,还可通过根系不受损的方式,提高大田子代苗培育成活率,可高达90%以上,形成了由种子到子代苗的快速繁育及培养方法。
实施例15:本实施例在新疆巴音郭楞蒙古自治州尉犁县(年平均气温10.1℃)实施,具体过程如下:
①种子采集:2022年5月25日,胡杨×小叶杨杂交果枝上套育种袋,育种袋规格为35cm×45cm,育种袋双面材质不同,阴面材质为牛皮纸,阳面材质为高密度聚乙烯合成纸;套袋后每隔2天观察1次,2022年5月28日观察发现85%的蒴果开裂,将果枝剪下,带回实验室放置于4℃冰箱中冷藏2天后开始播种。
②种子促萌培养:2022年5月30日准备30cm×50cm、底部平整的长方形托盘作为培养盘进行子代促萌。首先在培养盘底部平铺满3层餐巾纸,使用100ml高压喷壶装满矿化度<1g/L的淡水喷洒纸面;然后打开育种袋,使用镊子取一小部分绒絮(杂交种子分布其中),平铺于培养盘底部,再次使用100ml高压喷壶于培养盘正上方20cm处向培养盘喷水,保证水分浸透纸面。喷水完毕后将培养盘放在向阳处,保证有充足的阳光。每天9点、14点、21点各喷水一次(即早、中、晚各喷水一次),每次喷水保证浸透纸面,始终保持培养盘中纸面湿润。2022年6月1日种子吸水膨大,6月3日种子长出胚根、胚芽及胚轴,6月5日至6日萌发两片子叶,待子叶生长1天至2天后,进行移植。本实施例中杂交种子的萌发率为64%。
③子代苗室内培育:2022年6月8日使用直径为120mm、高15mm的一次性塑料培养皿进行子代苗的室内培育。培养基为蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土,其质量比为3:1:1:1,将基质拌匀后使用波尔多液(配比为硫酸铜:石灰:水=1:1:100)对基质进行消毒后装满培养皿,使用100ml高压喷壶装满矿化度<1g/L的淡水喷淋浸透基质。使用牙签在培养皿中戳出孔洞形成定植穴,每个培养皿均匀分布8个定植穴(间隔约3cm);使用圆头镊子轻轻将幼苗从培养盘中取出,将子代幼苗根部的绒絮去除,迅速将幼苗放入孔洞中,用镊子轻轻按压孔洞四周土壤,使其紧实,并放置于向阳处进行室内培育。移栽后使用100ml高压喷壶喷洒,早上10点,晚上9点各喷水一次,喷水浸润深度≧10mm。3天后改为每天1次,即早上10点喷洒。待长出2片真叶,且单片真叶面积≧9mm2时进行移栽。
④子代苗炼苗培育:2022年6月14日使用可降解育苗纸筒进行子代苗炼苗培育。纸筒规格为10cm×25cm,纸筒壁四周均匀分布有规格为1.5cm孔洞6个,底部有1.5cm空洞2个。在纸筒中填装基质至4/5处并压实。在纸筒中开挖直径约2cm,深2cm的定植穴,每个育苗纸筒中开挖2个。使用圆头小勺将培养皿中的单株幼苗取出,取时幼苗根部需带基质约2cm2。幼苗取出后迅速将其放置在纸筒中的定植穴中,将幼苗扶正,用勺头轻轻按压四周土壤,使其紧实,保证土壤与子代苗根部紧密结合;使用100ml高压喷壶装满化度<1g/L的淡水喷洒育苗纸筒,浸润深度为3cm左右。在室外将蛭石、河沙(3:1)拌匀后形成10m×2m×30cm(长×宽×高)育苗床,将育苗纸筒埋入育苗床的埋设深度为18cm,各纸筒间距为5cm左右。埋设完毕后使用2L喷壶喷洒基质,使其完全浸透。在基质上方2.0m至2.5m处安装三针、遮光率为80%的黑色扁丝遮荫网,每天早上11点将遮荫网拉开遮住育苗纸筒,下午20点将其收拢。每天早晚使用2L喷壶喷洒1次育苗纸筒,浸润深度为3cm左右,每隔3天喷淋一次基质,浸润深度为18cm。7天后改为每天早上10点喷水1次,15天后将遮荫网去除,每隔2天喷水1次,每隔6天随水喷施水溶肥,加速子代苗生长,待幼苗高度≧15cm时,进行移栽。
⑤子代苗大田培育:2022年8月10日,选择总盐<0.2%,培育土壤中有机质含量质量百分数大于2%的沙壤土作为培育地块。按照株行距60cm×80cm开挖栽植穴,栽植穴规格为30cm×30cm,在每穴底部施用复合肥50g左右,复合肥总养分(N-P2O5-K2O)含量为>45%(15-15-15)。移栽时将育苗纸筒直接放入栽植穴中,减少对根系的二次损伤。栽植后及时灌溉,进行水肥、病虫害管理,促进苗木生长发育。
本实施例整个育苗周期为70天左右,子代苗大田培育成活率为92%,年高平均生长量为65cm。可为杂交子代苗的优选提供大量供试材料。
综上所述,本发明提供了一种胡杨与小叶杨杂交子代苗的培育方法,其采用多次转移培养的方法,在短期内实现了胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速繁殖,仅需70天左右就可形成苗高60cm的杂交子代苗,提高了杂交子代苗的成苗速度,从而为胡杨与小叶杨杂交种的系筛选提供大量供试材料,加快干旱荒漠区高抗逆性优良树种筛选步伐,对干旱区困难立地造林高抗逆性新材料的应用提供有力支持。此外,本发明中使用材料易购且价格低廉,可连续使用,生产成本较低,对技术人员及实验条件要求较低,简单易行,可广泛应用于植物杂交子代的优选或育苗工作中。
以上技术特征构成了本发明的实施例,其具有较强的适应性和实施效果,可根据实际需要增减非必要的技术特征,来满足不同情况的需求。

Claims (10)

1.一种胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于按下述步骤进行:
第一步,杂交种子采集:胡杨×小叶杨杂交蒴果成熟之前,在果枝上套育种袋,待子代蒴果开裂达到80%以上时,剪下套袋果枝,将套袋果枝冷藏;
第二步,杂交种子促萌培养:于套袋果枝的蒴果中取出杂交种子平铺于培养盘中湿润的纸面上,于向阳处进行培养,至杂交种子萌发出子叶,待子叶生长1天至2天,得到子代幼苗;
第三步,子代苗室内培育:在培养皿平铺基质,并喷水浸透基质,在培养皿中间隔设置定植穴,从培养盘中取出子代幼苗,将子代幼苗根部的绒絮去除,放入定植穴中,将培养皿放置于向阳处进行室内培育,待幼苗长出2片真叶,且单片真叶面积≧9mm2时进行下一步操作;
第四步,子代苗室外炼苗培养:在育苗纸筒中填装基质并开挖定植穴,将培养皿中的单株幼苗取出,放置在育苗纸筒内的定植穴中,之后将育苗纸筒埋入育苗床,对单株幼苗进行10天至15天的遮荫培养,之后去除遮荫,待单株幼苗高度为15cm至20cm时,进行大田培育;
第五步,子代苗大田培育:采用沙壤土或沙土作为培育土壤并设置栽植穴,在栽植穴底部施用复合肥,将育苗纸筒放入栽植穴中,栽植后进行灌溉和管理。
2.根据权利要求1所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第一步中,育种袋两面为不同材质,育种袋阴面为牛皮纸材质,阳面为高密度聚乙烯合成纸材质。
3.根据权利要求1或2所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第一步中,果枝套袋时间为5月底至6月初;或/和,第一步中,冷藏温度为1℃至7℃,冷藏时间为1天至2天。
4.根据权利要求1至3任一项所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第二步中,杂交种子促萌培养过程中,每24小时向培养盘中喷水3次至4次,保持培养盘中纸面湿润;或/和,第三步中,培养皿内基质为蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土的混合物,蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土的质量比为3:1:1:1,将蛭石、珍珠岩、河沙、腐殖质土混合均匀后使用消毒剂对基质消毒。
5.根据权利要求1至4任一项所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第三步中,定植穴间隔为2cm至5cm;或/和,第三步中,室内培育时长为5天至10天,室内培育期间对培养皿内基质进行喷水,基质浸润深度为10mm至12mm。
6.根据权利要求1至5任一项所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第四步中,育苗纸筒为可降解纸筒,纸筒壁四周和底部均开设有多个直径1cm至1.5cm的孔洞;或/和,育苗纸筒内的定植穴直径为2cm±0.3cm,深2cm±0.3cm,每个育苗纸筒中定植穴为2个。
7.根据权利要求1至6任一项所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第四步中,将育苗纸筒埋入育苗床的埋设深度为17cm至20cm,育苗纸筒之间间距为4cm至6cm,育苗床基质为质量比为3:1的蛭石和河沙混合物。
8.根据权利要求1至7任一项所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第四步子代苗室外炼苗培养过程中用淡水喷洒育苗纸筒和育苗床基质,保持育苗纸筒和育苗床基质润湿。
9.根据权利要求1至8任一项所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第四步中,遮荫操作为:在育苗床基质上方2.0m至2.5m处安装遮光率为80%的遮荫网,日间遮荫8小时至10小时。
10.根据权利要求1至9任一项所述的胡杨与小叶杨杂交子代苗的快速培育方法,其特征在于第五步中,培育土壤中总盐的质量百分数小于0.2%,培育土壤中有机质含量质量百分数大于2%,栽植穴底部施用复合肥40g至60g,复合肥总养分含量>45%。
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