CN117598924A - 一种植物多肽组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种植物多肽组合物及其应用，属于化妆品技术领域，所述的植物多肽组合物，包括水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物；所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(2～20)：(0.5～2.5)：(1.5～25)。本发明将水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物进行组合，在水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的协同作用下，从预防真皮层老化、协同促进胶原蛋白的生成、预防真表皮连接层老化、强固角质层、促进皮肤表面有益菌生长、防止皮肤过氧化、恢复皮肤解毒系统等多靶点全方位解决皮肤衰老问题，提升肌肤紧致度和饱满度，提高皮肤弹性，减少皱纹产生，达到优异的抗皱抗衰老效果。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种植物多肽组合物及其应用。
背景技术
肽是氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，是蛋白质水解的中间产物，它的分子结构介于蛋白质和氨基酸之间。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽，以此类推还有三肽、四肽、五肽等，多个氨基酸分子脱水缩合而成的肽叫多肽，一般超过50个氨基酸组成的称为蛋白质。
生物活性多肽类化合物具有高生物活性、安全无毒的优势，同时具有抗衰来、舒缓、修护及美白等护肤功效。多肽获取方式主要有化学合成法、发酵法、提取法及降解法。目前主流趋势是利用发酵法获取高纯度的单一目标多肽，机理明确，作用靶点相对单一。
目前世面上的肽根据作用靶点可分为1、信号肽；2、神经传导阻断/抑制肽(类肉毒素)；3、载体肽；主要的案例代表是，棕榈酰五肽-4模仿我们皮肤自身的多肽信号，作用于成纤维细胞合成细胞外基质，以达到促进胶原蛋白、弹力纤维和透明质酸增生，提升肌肤含水量等功效，更适合用于改善面部自然衰老导致的胶原蛋白流失造成的静态纹，该肽种类作用靶点单一，应用较为局限，只适合特定人群或特殊靶点；二肽二氨基丁酰苄基酰胺二乙酸盐属于类肉毒素肽家族，类似于信号干扰器，阻断面部肌肉神经递质乙酰胆碱的释放，从而减少肌肉的收缩，该肽类对皮肤本身并没有较大的改善作用，只具备即时的紧致效果；蓝铜肽属于载体肽，铜离子本身游离于皮肤角质层，但是结合在三肽-1上面，即可作用于皮肤的真皮层，促进伤口愈合和生发，虽然承载了两种活性物的功效，但是很不稳定，对环境要求及其苛刻。
市面上的多肽种类虽然繁多，但是其功效靶点往往比较单一，需要将多种肽类组合调配在一起，使化妆品具有能够具有较为全面的功效，成功率较低，且容易导致配方不稳定，多种肽类靶点错综复杂，相生相克等多种情况，且市面上多肽来源大多数为生物合成，造价较高，吸收性不佳。
鉴于此，提出本申请。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供一种植物多肽组合物及其应用，所述的植物多肽能够有效的紧致肌肤，提高皮肤弹性，具有优异的抗皱抗衰老效果。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种植物多肽组合物，包括水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物；
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(2～20)：(0.5～2.5)：(1.5～25)。
作为本发明的优选实施方案，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(2～12)：(0.8～1.2)：(1.5～15)。
作为本发明的优选实施方案，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(8～10)：1：(5～10)。
作为本发明的优选实施方案，所述植物多肽组合物中所述水解羽扇豆蛋白的质量大于鳄梨果提取物的质量。
作为本发明的优选实施方案，所述植物多肽组合物中所述豌豆提取物的质量大于鳄梨果提取物的质量。
作为本发明的优选实施方案，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的90％～220％。
作为本发明的优选实施方案，所述水解羽扇豆蛋白的制备方法为：羽扇豆种子粉依次经过加水酶解，截留分子量300Da的超滤膜超滤，截留分子量3500Da的超滤膜超滤，干燥，得到水解羽扇豆蛋白；
所述酶解的酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶。
作为本发明的优选实施方案，所述羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶的质量比为1：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)。
作为本发明的优选实施方案，所述酶解时酶的温度为45～55℃，时间为4～12h。
作为本发明的优选实施方案，所述豌豆提取物的制备方法为：豌豆粉依次经过加水酶解，截留分子量5000Da的超滤膜超滤，截留分子量100000Da的超滤膜超滤，干燥，得到豌豆提取物；
所述酶解的酶为纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶。
作为本发明的优选实施方案，所述豌豆粉、纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为1：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)。
作为本发明的优选实施方案，所述鳄梨果提取物的制备方法为：鳄梨果依次经过压榨、压榨所得物加水酶解，截留分子量1000Da的超滤膜超滤，截留分子量15000Da的超滤膜超滤，干燥，得到鳄梨果提取物；
所述酶解的酶为纤维素酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶。
作为本发明的优选实施方案，所述压榨所得物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为1：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)。
本发明还提供了一种植物多肽组合物在制备化妆品中的应用。
作为本发明的优选实施方案，所述化妆品的剂型为水剂、乳液、膏霜、凝胶、面膜或精华。
作为本发明的优选实施方案，所述植物多肽组合物在化妆品中的质量百分含量0.006～3％。
作为本发明的优选实施方案，所述植物多肽组合物在化妆品中的质量百分含量0.1～3％。
本发明的有益效果在于：本发明将水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物进行组合，在水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的协同作用下，从预防真皮层连接层老化，真皮的老化，到协同促进胶原蛋白的生成，防止皮肤过氧化、恢复皮肤解毒系统，强固角质层，促进皮肤有益菌生长、提升肌肤紧致度和饱满度等多个方面多靶点、全方位解决皮肤的紧致度问题，协同提高皮肤弹性，达到优异的抗皱抗衰老效果，同时发明人研究发现，所述的水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物在搭配过程中，基于水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的对肌肤的复杂作用机理，三种成分的选取和配比也具有较高的专一匹配性，若替换组合物中的种类或改变三者的配比，将导致紧致效果、抗皱抗衰老效果显著下降。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
本申请中，以开放式描述的技术特征中，包括所列举特征组成的封闭式技术方案，也包括包含所列举特征的开放式技术方案。
本申请中，涉及到数值区间，如无特别说明，上述数值区间内视为连续，且包括该范围的最小值及最大值，以及这种最小值与最大值之间的每一个值。进一步地，当范围是指整数时，包括该范围的最小值与最大值之间的每一个整数。此外，当提供多个范围描述特征或特性时，可以合并该范围。换言之，除非另有指明，否则本文中所公开之所有范围应理解为包括其中所归入的任何及所有的子范围。
在本申请中，具体的分散、搅拌处理方式没有特别限制。
本发明各实施例及对比例所用组分原料或仪器除非特别说明，否则均为市售原料或仪器，且各平行实验中所使用的组分原料均为同种。
本申请实施例提供了一种植物多肽组合物，包括水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物；
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(2～20)：(0.5～2.5)：(1.5～25)。
在所述的植物多肽组合物中，所述的鳄梨果提取物能够促进角化细胞和成纤母细胞分泌透明质酸，并刺激和参与角质层粘合和形成分子(例如丝聚蛋白、转谷酰胺酶以及神经酰胺)的合成，增加表皮体积，加强角质层的保湿作用，提高真皮和表皮的天然水合作用，提高皮肤弹性，紧致肌肤，维持皮肤水分含量，防止水分流失，同时所述的鳄梨果提取物具有优异的抗氧化作用，能够有效的抑制蛋白质过氧化物的累积，保护细胞膜的完整性。
在所述的植物多肽组合物中，所述的豌豆提取物能够促进成纤维细胞上的I型胶原蛋白、III型胶原蛋白的合成，并促进成纤维细胞的胶原晶格上弹性蛋白的合成，促进串珠素的合成，抑制真皮中的弹性蛋白酶的活性，保护真皮3D结构中的纤维(如网状弹性纤维)，有效的稳定肌肤饱满度和提升肌肤紧致度，并能够促进有益菌的生长。
在所述的植物多肽组合物中，所述的水解羽扇豆蛋白能够促进层粘连蛋白5(确保表皮-DEJ锚定的关键成分)合成，促进IV型胶原蛋白(DEJ的主要结构成分)，进而提到优异的预防表皮连接(DEJ)老化效果，同时所述的水解羽扇豆蛋白能够促进I型胶原蛋白、III型胶原蛋白的合成，并抑制MMPs(例如MMP1、MMP3、MMP9)的活性，避免真皮大分子物质的降解，进而有效的预防真皮老化，强化真皮结构，刺激胶原蛋白生成，提高皮肤弹性和紧致度，提亮肤色。
本发明创造性的将水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物按照上述特定的质量比进行组合，在水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的协同作用下，从预防真皮层连接层老化，真皮的老化，到协同促进胶原蛋白的生成，防止皮肤过氧化、恢复皮肤解毒系统，强固角质层，促进皮肤有益菌生长、提升肌肤紧致度和饱满度等多个方面多靶点、全方位解决皮肤的紧致度问题，协同提高皮肤弹性，达到优异的抗皱抗衰老效果，同时发明人研究发现，所述的水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物在搭配过程中，基于水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的对肌肤的复杂作用机理，三种成分的选取和配比也具有较高的专一匹配性，若替换组合物中的种类或改变三者的配比，将导致紧致效果、抗皱抗衰老效果显著下降。
本发明所述的组合物中各原料为天然植物来源，相比于市面上的生物来源的肽，合成成本更低，安全性更高，来源更加广泛，更加有利于皮肤吸收，具有温和稳定的优点。
在其中一个实施方式中，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(2～12)：(0.8～1.2)：(1.5～15)，特别是水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物在此质量比下，协同效果更加明显，紧致效果、抗皱抗衰老效果得到进一步提高。
在其中一个实施方式中，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(8～10)：1：(5～10)，尤其是水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物在此质量比下，协同效果进一步提高，各成分能够更加充分发挥作用，紧致效果、抗皱抗衰老效果得到进一步提高。
在其中一个实施方式中，所述植物多肽组合物中所述水解羽扇豆蛋白的质量大于鳄梨果提取物的质量。
在其中一个实施方式中，所述植物多肽组合物中所述豌豆提取物的质量大于鳄梨果提取物的质量。
本发明的发明人研究发现，分别将水解羽扇豆蛋白、豌豆提取物的质量大于鳄梨果的提取物，三者如此组合，各组分之间的作用能够得到充分发挥，更加有效的促进胶原蛋白的合成，并抑制真皮中的弹性蛋白酶的活性，紧致效果、抗皱抗衰老效果进一步提高。
在其中一个实施方式中，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的90％～220％。本发明的发明人在研究中进一步发现，通过控制豌豆提取物的质量与解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物总质量的关系，能够控制体系组合物中大分子和小分子的含量以及活性成分的含量，更加有利于的皮肤的吸收，并平衡组合物的抗氧化效果、稳定性以及紧致效果，从而进一步提高抗皱抗衰老效果。
在其中一个实施方式中，所述水解羽扇豆蛋白的制备方法为：羽扇豆种子粉依次经过加水酶解，截留分子量300Da的超滤膜超滤，截留分子量3500Da的超滤膜超滤，干燥，得到水解羽扇豆蛋白；
所述酶解的酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶。
本发明通过将羽扇豆种子粉酶水解，通过截留分子量300Da的超滤膜，3500Da的超滤膜超滤，得到了能够有效预防表皮连接(DEJ)老化、预防真皮老化，提高皮肤弹性和紧致度的水解羽扇豆蛋白，所述的水解羽扇豆蛋白分子量主要分布在300～3500Da，更加有利于皮肤吸收。
其中，以所述水解羽扇豆蛋白总质量计，所述水解羽扇豆蛋白中分子量在300～1200Da的组分占40～55wt％，分子量在1200～3500Da的组分占25～40％。
需要说明的是，所述水解羽扇豆蛋白的分子量分布通过高效液相色谱法测量得到。
其中，所述羽扇豆种子粉通过将白羽扇豆种子粉碎得到，所述羽扇豆种子粉的粒径为10～200目。
在其中一个实施方式中，所述羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶的质量比为1：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)。
在其中一个实施方式中，所述酶解时酶的温度为45～55℃，时间为4～12h。
更具体而言，所述水解羽扇豆蛋白的制备方法为：将白羽扇豆种子粉碎至10～200目，得到羽扇豆种子粉，将羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶加入到水中，酶解得到酶解液，酶解液先用截留分子量300Da的超滤膜超滤，再用截留分子量3500Da的超滤膜超滤，干燥，得到水解羽扇豆蛋白。
在其中一个实施方式中，所述豌豆提取物的制备方法为：豌豆粉依次经过加水酶解，截留分子量5000Da的超滤膜超滤，截留分子量100000Da的超滤膜超滤、干燥，得到豌豆提取物；
所述酶解的酶为纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶。
本发明通过将豌豆粉依次经过加水酶解、截留分子量5000Da的超滤膜超滤、截留分子量1000000Da的超滤膜超滤，所述的豌豆提取物能够有效的促进胶原蛋白的合成，抑制真皮中的弹性蛋白酶的活性，有效的稳定肌肤饱满度和提升肌肤紧致度，并能够促进有益菌的生长，所述的豌豆提取物的分子量主要分布在5000～30000Da和30000～100000Da，大部分分布在5000～30000Da，在保证能够被肌肤充分吸收的同时，能够平整稳定性，使其持续稳定的发挥作用。
在其中一个实施方式中，以所述豌豆提取物总质量计，所述豌豆提取物中分子量在5000～30000Da的组分占50～80wt％。
其中，所述豌豆粉通过将冬豌豆粉碎得到，所述豌豆粉的粒径为10～200目。
在其中一个实施方式中，所述豌豆粉、纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为1：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)，采用纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶进行搭配，能够去除豌豆中高分子化合物(大于100000Da)。
在其中一个实施方式中，所述酶解时酶的温度为45～55℃，时间为4～12h。
更具体而言，所述豌豆提取物的制备方法为：将冬豌豆粉碎至10～200目，得到豌豆粉，将豌豆粉、纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中，酶解得到酶解液，酶解液先用截留分子量5000Da的超滤膜超滤，再用截留分子量100000Da的超滤膜超滤、干燥，得到豌豆提取物。
在其中一个实施方式中，所述鳄梨果提取物的制备方法为：鳄梨果依次经过压榨，压榨所得物加水酶解，截留分子量1000Da的超滤膜超滤，截留分子量15000Da的超滤膜超滤，干燥，得到鳄梨果提取物；
所述酶解的酶为纤维素酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶。
本发明通过鳄梨果依次经过压榨、压榨所得物(压榨得到的压饼)加水酶解，截留分子量1000Da的超滤膜超滤、截留分子量15000Da的超滤膜超滤，得到了具有优异的抗氧化作用和促进胶原蛋白的合成的鳄梨果提取物，能够有效的抑制蛋白质过氧化物的累积，保护细胞膜的完整性，所述的鳄梨果提物语分子量主要分布在1000～15000Da，更加有利于皮肤吸收，且所述的鳄梨果提取物中脯氨酸和α-氨基氮含量高。
在其中一个实施方式中，以所述鳄梨果提取物总质量计，所述鳄梨果提取物中脯氨酸含量≥30wt％，α-氨基氮含量为8～16wt％。
需要说明的是，所述的脯氨酸含量通过凯氏定氮法测量，所述α-氨基氮含量通过紫外分光光度法进行测量。
在其中一个实施方式中，所述压榨所得物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为1：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)，采用此种组合的酶，能够充分对鳄梨果中蛋白和肽类物质进行提取，并提高鳄梨果提取物中的脯氨酸和α-氨基氮含量。
在其中一个实施方式中，所述酶解时酶的温度为45～55℃，时间为4～12h。
更具体而言，所述鳄梨果提取物的制备方法为：将鳄梨果压榨，将压榨物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中，酶解得到酶解液，酶解液先用截留分子量1000Da的超滤膜超滤，再用截留分子量15000Da的超滤膜超滤，干燥，得到鳄梨果提取物。
需要说明的是，在本发明中，所述的植物多肽组合物可以先进行预混成植物多肽组合物，以组合物的形式加入到化妆品中，也可以将原料直接加入到化妆品中。
本发明所述的植物多肽组合物的制备方法不限，本领域技术人员可根据本领域常规技术手段将其制备成植物多肽组合物，例如在反应釜中，将植物多肽组合物混合均匀即可。
在其中一个实施方式中，所述植物多肽组合物还可包括麦芽糊精和环糊精，通过将麦芽糊精和/或环糊精与植物多肽组合物共混，可进一步提高植物多肽组合物的稳定性。
示例性的，所述植物多肽组合物还包括环糊精，所述环糊精与豌豆提取物的质量比为1：(0.2～5)。
示例性的，所述植物多肽组合物还可包括麦芽糊精，所述麦芽糊精与鳄梨果提取物质量比为1：(0.2～5)。
本发明还提供了一种植物多肽组合物在制备化妆品中的应用。
在其中一个实施方式中，所述化妆品还包含化妆品领域可接受的辅料。
在其中一个实施方式中，所述化妆品领域可接受的辅料包括但不限于保湿剂、增稠剂、润肤剂、乳化剂、防腐剂、抗氧剂、pH调节剂、促渗剂、脂质体、螯合剂、表面活性剂、香精、色素中的至少一种。
在其中一个实施方式中，合适的保湿剂包括但不限于1,3丁二醇、丙二醇、己二醇、双丙甘醇、聚乙二醇、木糖醇、双甘油、麦芽糖、D甘露糖醇、戊二醇、二丙二醇、甘油、聚丙二醇、乙二醇、新戊二醇、赤藓糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、葡萄糖、乳糖、甘露糖、麦芽糖、果糖、肌醇、山梨糖醇、山梨糖醇酐、海藻糖、淀粉水解糖中的至少一种。
在其中一个实施方式中，合适的增稠剂包括但不限于卡波姆、羟乙基纤维素、小核菌胶、卡拉胶、刺瑰豆胶、瓜尔胶、羧甲基纤维素、聚丙烯酸钠、丙烯酸(酯)交联聚合物、汉生胶中的至少一种。
在其中一个实施方式中，合适的润肤剂包括但不限于角鲨烷、异十二烷、异十六烷、辛酸/癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、环五聚二甲基硅氧烷、二异硬脂醇苹果酸酯、二鲸蜡硬脂醇二聚亚油酸酯、月桂酸己酯、聚甘油2-二异硬脂酸酯、氢化聚异丁烯、季戊四醇、四异硬脂酸酯、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二烷醇、碳酸二辛酯、澳洲坚果油、乳木果油、霍霍巴油、羊毛脂、白油、杏仁油、橄榄油、霍霍巴油、蓖麻油、C12-15烷基苯甲酸酯、异壬酸异壬酯、己二酸二辛酯、硬脂酸辛酯、月桂酸己酯、可可辛酸酯、癸酸酯中的至少一种。
在其中一个实施方式中，合适的乳化剂包括但不限于PEG-30大豆甾醇、聚甘油-10硬脂酸酯、聚甘油-10月桂酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚甘油-5三油酸酯、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PPG-13-癸基十四醇聚醚-24、壬基酚聚醚-12、PEG-35蓖麻油/PEG-50氢化蓖麻油/壬基酚聚醚-12/丙二醇、硬酯醇聚醚-2、硬酯醇聚醚-21、氢化卵磷脂中的至少一种。
在其中一个实施方式中，合适的抗氧化剂包括但不限于类胡罗卜素、生育酚、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸盐、磷酸抗坏血酸镁、白藜芦醇、三乙基柠檬酸酯、熊果酚甙、超氧化物歧化酶、焦亚硫酸钠以及它们的组合。
在其中一个实施方式中，合适的pH调节剂包括但不限于精氨酸、三乙醇胺、柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾以及它们的组合。
在其中一个实施方式中，合适的着色剂包括但不限于白色、黑色、黄色、蓝色、绿色、粉色、红色、橙色、紫色、靛蓝、棕色等颜色以及它们的组合。
在其中一个实施方式中，合适的防腐剂包括但不限于对羟基苯甲酸丁酯、重氮烷基脲、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸甲酯、甲基异噻唑啉酮、苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸钠以及它们的组合。
在其中一个实施方式中，所述化妆品的剂型为水剂、乳液、膏霜、凝胶、面膜或精华。
在其中一个实施方式中，所述植物多肽组合物在化妆品中的质量百分含量0.006～3％。
在其中一个实施方式中，所述植物多肽组合物在化妆品中的质量百分含量0.1～3％。
提供了以下实施例以促进对本发明的理解。提供这些实施例不是为了限制权利要求的范围。
实施例1
一种植物多肽组合物，包括水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物；所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为10：1：5。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的220％。
其中，所述水解羽扇豆蛋白的制备方法为：将白羽扇豆种子粉碎至50目，得到羽扇豆种子粉，将羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶加入到水中(羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、水质量比为1：0.04：0.03：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量300Da的超滤膜超滤，再用截留分子量3500Da的超滤膜超滤，干燥，得到水解羽扇豆蛋白。
其中，所述鳄梨果提取物的制备方法为：将鳄梨果压榨，将压榨物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中(压榨物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、水的质量比为1：0.02：0.03：0.04：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量1000Da的超滤膜超滤，再用截留分子量15000Da的超滤膜超滤，干燥，得到鳄梨果提取物。
其中，所述豌豆提取物的制备方法为：将冬豌豆粉碎至50目，得到豌豆粉，将豌豆粉、纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中(1：0.008：0.012：0.015：0.02：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量5000Da的超滤膜超滤，再用截留分子量100000Da的超滤膜超滤，干燥，得到豌豆提取物。
实施例2
实施例2与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为8：1：10。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的90％。
实施例3
实施例3与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为9：1：8。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的125％。
实施例4
实施例4与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为5：0.8：4。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的145％。
实施例5
实施例5与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为12：1.2：12。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的110％。
实施例6
实施例6与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为8：1：6。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的150％。
实施例7
实施例7与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为2：1：1.5。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的200％。
实施例8
实施例8与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为20：2：24。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的91.67％。
实施例9
实施例9与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为20：2.5：25。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的90％。
实施例10
实施例10与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为2：0.5：1.5。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的166.67％。
实施例11
实施例11与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为2：2.5：5。
所述植物多肽组合物中所述水解羽扇豆蛋白的质量小于鳄梨果提取物的质量。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的90％。
实施例12
实施例12与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为1.5：2.5：2。
所述植物多肽组合物中所述豌豆提取物、水解羽扇豆蛋白的质量小于鳄梨果提取物的质量。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的200％。
实施例13
实施例13与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为12：1：4。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的325％。
实施例14
实施例14与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比不同，其他都相同。
本实施例所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为5：1：9。
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的66.7％。
实施例15
实施例15与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的制备参数不同，其他都相同。
所述豌豆提取物的质量为水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物总质量的220％。
其中，所述水解羽扇豆蛋白的制备方法为：将白羽扇豆种子粉碎至50目，得到羽扇豆种子粉，将羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶加入到水中(羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、水质量比为1：0.02：0.05：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量300Da的超滤膜超滤，再用截留分子量3500Da的超滤膜超滤，干燥，得到水解羽扇豆蛋白。
其中，所述鳄梨果提取物的制备方法为：将鳄梨果压榨，将压榨物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中(压榨物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、水的质量比为1：0.01：0.05：0.02：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量1000Da的超滤膜超滤，再用截留分子量15000Da的超滤膜超滤，干燥，得到鳄梨果提取物。
其中，所述豌豆提取物的制备方法为：将冬豌豆粉碎至50目，得到豌豆粉，将豌豆粉、纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中(1：0.005：0.02：0.05：0.02：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量5000Da的超滤膜超滤，再用截留分子量100000Da的超滤膜超滤，干燥，得到豌豆提取物。
实施例16
实施例15与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的制备参数不同，其他都相同。
所述豌豆提取物的质量为水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物总质量的220％。
其中，所述水解羽扇豆蛋白的制备方法为：将白羽扇豆种子粉碎至50目，得到羽扇豆种子粉，将羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶加入到水中(羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、水质量比为1：0.05：0.04：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量300Da的超滤膜超滤，再用截留分子量3500Da的超滤膜超滤，干燥，得到水解羽扇豆蛋白。
其中，所述鳄梨果提取物的制备方法为：将鳄梨果压榨，将压榨物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中(压榨物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、水的质量比为1：0.04：0.02：0.02：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量1000Da的超滤膜超滤，再用截留分子量15000Da的超滤膜超滤，干燥，得到鳄梨果提取物。
其中，所述豌豆提取物的制备方法为：将冬豌豆粉碎至50目，得到豌豆粉，将豌豆粉、纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中(1：0.005：0.02：0.01：0.01：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量5000Da的超滤膜超滤，再用截留分子量100000Da的超滤膜超滤，干燥，得到豌豆提取物。
实施例17
实施例17与实施例1不同之处在于，水解羽扇豆蛋白的制备方法不同，其他都相同。
其中，所述水解羽扇豆蛋白的制备方法为：将白羽扇豆种子粉碎至50目，得到羽扇豆种子粉，将羽扇豆种子粉、纤维素酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶加入到水中(羽扇豆种子粉、纤维素酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、水质量比为1：0.02：0.04：0.03：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量3500Da的超滤膜超滤，再用截留分子量5000Da的超滤膜超滤，干燥，得到水解羽扇豆蛋白。
实施例18
实施例18与实施例1不同之处在于，鳄梨果提取物的制备方法不同，其他都相同。
其中，所述鳄梨果提取物的制备方法为：将鳄梨果压榨，将压榨物、纤维素酶、风味蛋白酶加入到水中(压榨物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、水的质量比为1：0.02：0.03：0.04：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量500Da的超滤膜超滤，再用截留分子量10000Da的超滤膜超滤，干燥，得到鳄梨果提取物。
实施例19
实施例19与实施例1不同之处在于，豌豆提取物的制备方法不同，其他都相同。
其中，所述豌豆提取物的制备方法为：将冬豌豆粉碎至50目，得到豌豆粉，将豌豆粉、角蛋白酶、菠萝蛋白酶加入到水中(1：0.015：0.02：5)，在50℃下酶解8h得到酶解液，酶解液先用截留分子量500Da的超滤膜超滤，再用截留分子量1000Da的超滤膜超滤，干燥，得到豌豆提取物。
对比例1
对比例1为单一的水解羽扇豆蛋白，水解羽扇豆蛋白采用实施例1的方法制备。
对比例2
对比例2为单一的鳄梨果提取物，鳄梨果提取物采用实施例1的方法制备。
对比例3
对比例3为单一的豌豆提取物，豌豆提取物采用实施例1的方法制备。
对比例4
对比例4与实施例1不同之处在于，对比例4不含有水解羽扇豆蛋白，其他都相同。
本对比例的植物多肽组合物，包括鳄梨果提取物和豌豆提取物；所述鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为1：5。
对比例5
对比例5与实施例1不同之处在于，对比例5不含有鳄梨果提取物，其他都相同。
本对比例的植物多肽组合物，包括水解羽扇豆蛋白和豌豆提取物；所述水解羽扇豆蛋白、豌豆提取物的质量比为10：5。
对比例6
对比例6与实施例1不同之处在于，对比例6不含有豌豆提取物，其他都相同。
本对比例的植物多肽组合物，包括水解羽扇豆蛋白和鳄梨果提取物；所述水解羽扇豆蛋白和鳄梨果提取物的质量比为10：1。
测试例
测试例1：刺激性实验(CAMVA试验)
CAMVA实验作为眼刺激的筛选方法之一，用于不同配方之间的比较、原料品质筛查和活性物质的安全阈值确定具有指导作用。
试剂与材料准备：0.9％ NaCl溶液、照蛋器、孵化器、牙科锯齿弯镊、开壳器等。
鸡胚选取条件：1、符合《兽药生产、检验SPF鸡(蛋)定点生产企业资格》的供应商提供的无菌蛋；2、购买3日龄以内的鸡胚。
鸡胚孵化条件：温度37.5℃±0.5℃，相对湿度55％-70％。
试验方法：在鸡胚绒毛尿囊膜血管密集处放置特氟龙环，将受试样品均匀涂布在环内，接触一段时候后，通过对比换内外血管变化情况评价受试样品的刺激作用，判定受试样品是否具有眼刺激性。
实验过程：取150个鸡蛋，分为25组，在蛋壳膜表面滴入0.9％NaCl溶液使充分润湿后除去蛋壳膜，将特氟龙环置于鸡胚绒毛尿囊膜血管密集处，滴入1ml的待测物(待测物分别为实施例和对比例所对应的水溶液)，孵化30min，比较评估血管损伤。
结果评判：
出血：血液从CAM的血管或毛细血管流出。根据无出血、轻度出血、中度出血、重度出血分别判予0、1、2、3分。
凝血：指血管内外蛋白变性，表现为血栓、关闭肿胀、血管内外的凝血点出现、血管外乳浊状浑浊等状况。根据无凝血、轻度凝血、中度凝血、中度凝血分别判予0、1、2、3分。
血管溶解：指CAM膜上血管消融。根据无血管消融、轻度血管消融、中度血管消融、重度血管消融分别判予0、1、2、3分。
结果计算和评价
按以下公式计算ES平均分值，按表1判断刺激分类。
表1
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从表1可看出，本发明所述的植物多肽组合物引起皮肤刺激性的风险低，具有温和安全的优点。
测试例2
按照T/SHRH 031-2020《化妆品紧致、抗皱功效测试-体外成纤维细胞I型胶原蛋白含量测定》测试实施例和对比例的植物多肽组合物对纤维细胞I型胶原蛋白的促进Ⅰ型胶原蛋白的合成效果，测试浓度(水溶液)和测试结果如表2所示。
表2
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测试例3
志愿者筛选：选择125名愿者入组，将所有志愿者按每组5人随机分成25组，将实施例和对比例分别配制成精华液供测试，各组志愿者分别试用实施例和对比例的精华液。(精华液配方按照质量比计：去离子水：94.9％，黄原胶：0.15％，甘油4％，羟苯甲酯：0.15％，植物多肽组合物：0.5％，苯氧乙醇：0.3％。制备工艺：将离子水、黄原胶、甘油、羟苯甲酯混合搅拌均匀，加热至80℃，降温至45℃后加入植物多肽组合物、苯氧乙醇，搅拌均匀后即可。)
纳入志愿者标准为：亚洲成年健康男性或女性，年龄25～45岁，脸部有细纹且皮肤松弛；近一月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者；现在或近30天内受试部位未参加其他临床试验者；能很好配合试验者；能够阅读和理解知情同意书的所有内容，并自愿签署知情同意书；试验期间同意不使用任何对结果有影响的化妆品、药物和保健品。排除标准：有开放性伤口或糜烂面者；高度过敏体质者；有化妆品过敏史者；妊娠、哺乳或在测试期间打算怀孕的女性者；有严重心、肝、肾功能损害及严重免疫功能低下者；有精神疾病、严重内分泌疾病者以及口服避孕药者；30天内参加药物临床试验者或其它试验者，或近1周内有系统用对试验结果有影响的药物者；2周内有口服和外用可能对试验结果有影响的美容产品者、研究者认为不适于参加本项测试。中止及退出标准：在试验期间未按测试要求进行涂抹受试样品或未按要求进行回访记录；使用期间患有严重疾病或发生严重不良反应。
2.测试方法：志愿者测试前洗净脸部，处于恒温(21℃±1℃)恒湿(50％±10％)环境下，脸部暴露无任何遮挡的情况下，静待30min，心保持心情平静，不要过度兴奋或者悲伤，将产品分发于受试者，每天两次均匀涂抹于脸部肌肤，按摩至吸收，连续使用28天。使用仪器对志愿者使用前、使用28天后的面部进行测量与分析。使用仪器：皮肤弹性测试仪(Cutometer MPA580；Courage+Khazaka公司)，皮肤纹理检测分析仪(VC20plus，；Courage+Khazaka公司)。皮肤弹性R2提高幅度＝[(使用后皮肤R2-使用前皮肤R2)/使用前R2]×100％；皱纹参数SEw改善度＝[(使用前皮肤皱纹参数SEw-使用后皮肤皱纹参数SEw)/使用前皮肤皱纹参数SEw]×100％。
表3
从表2、表3中可看出，本发明所述的植物多肽能够有效的紧致肌肤，提高皮肤弹性，具有优异的抗皱抗衰老效果。
对比实施例1～3与实施例4～7以及实施例8～10可看出，水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物的质量比对于抗皱抗衰老效果具有一定的影响，本发明通过控制水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(2～12)：(0.8～1.2)：(1.5～15)，进一步提高了抗皱抗衰老效果，进一步将所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比控制为(2～12)：(0.8～1.2)：(1.5～15)，更进一步提高了抗皱抗衰老效果。
对比实施例1与实施例11～12可看出，本发明通过控制水解羽扇豆蛋白、豌豆提取物大于鳄梨果提取物的质量，进一步提高了抗皱抗衰老效果。
对比实施例1与实施例13～14可看出，本发明通过控制所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的90％～220％，显著的提高了抗皱抗衰老效果。
对比实施例1与实施例17～19可看出，本发明通过控制各提取物的制备方法，在本发明中所限定的方法内，更进一步提高了抗皱抗衰老效果。
对比实施例1与对比例1～6可看出，本发明所述的水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物具有显著的协同增效作用，本发明将三者联用，显著提高了抗皱抗衰老效果。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (15)
1.一种植物多肽组合物，其特征在于，包括水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物和豌豆提取物；
所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(2～20)：(0.5～2.5)：(1.5～25)。
2.根据权利要求1所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(2～12)：(0.8～1.2)：(1.5～15)。
3.根据权利要求1所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物、豌豆提取物的质量比为(8～10)：1：(5～10)。
4.根据权利要求1所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述植物多肽组合物中所述水解羽扇豆蛋白的质量大于鳄梨果提取物的质量；和/或
所述植物多肽组合物中所述豌豆提取物的质量大于鳄梨果提取物的质量。
5.根据权利要求4所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述水解羽扇豆蛋白、鳄梨果提取物的总质量为豌豆提取物质量的90％～220％。
6.根据权利要求1所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述水解羽扇豆蛋白的制备方法为：羽扇豆种子粉依次经过加水酶解，截留分子量300Da的超滤膜超滤，截留分子量3500Da的超滤膜超滤，干燥，得到水解羽扇豆蛋白；
所述酶解的酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶。
7.根据权利要求6所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述羽扇豆种子粉、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶的质量比为1：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)。
8.根据权利要求1所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述豌豆提取物的制备方法为：豌豆粉依次经过加水酶解，截留分子量5000Da的超滤膜超滤，截留分子量100000Da的超滤膜超滤，干燥，得到豌豆提取物；
所述酶解的酶为纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶。
9.根据权利要求8所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述豌豆粉、纤维素酶、果胶酶、角蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为1：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)：(0.005～0.02)。
10.根据权利要求1所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述鳄梨果提取物的制备方法为：鳄梨果依次经过压榨，压榨所得物加水酶解，截留分子量1000Da的超滤膜超滤，截留分子量15000Da的超滤膜超滤，干燥，得到鳄梨果提取物；
所述酶解的酶为纤维素酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶。
11.根据权利要求10所述的植物多肽组合物，其特征在于，所述压榨所得物、纤维素酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为1：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)：(0.01～0.05)。
12.权利要求1～11任一所述的植物多肽组合物在制备化妆品中的应用。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述化妆品的剂型为水剂、乳液、膏霜、凝胶、面膜或精华。
14.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述植物多肽组合物在化妆品中的质量百分含量0.006～3％。
15.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述植物多肽组合物在化妆品中的质量百分含量0.1～3％。
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