CN117561278A - 抗trem2人源化抗体、其抗原结合片段及其应用 - Google Patents
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Abstract
本申请涉及生物医药技术领域，具体涉及一种抗TREM2抗体、其抗原结合片段及其应用，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段具有较强的诱导ADCC效应的活性，可用于增强免疫应答和/或用于治疗个体的免疫相关疾患例如癌症，包括使用抗TREM2抗体或其抗原结合片段杀灭非刺激性髓系细胞，使非刺激性髓系细胞丧失能力或消减。
Description
技术领域
本申请涉及生物医药技术领域，具体涉及一种抗TREM2抗体、其抗原结合片段及其应用，尤其是抗TREM2人源化抗体、其抗原结合片段及其应用。
背景技术
髓系细胞触发受体2(TREM2)属于免疫球蛋白超家族，是一种跨膜受体。TREM2的生理学功能包括细胞成熟、细胞增殖、细胞生存、吞噬作用、炎症调节。TREM2被认为是重要的病理诱导免疫信号中枢，在髓系细胞活化和存活中起着重要作用。TREM2有多种配体，主要是与质膜结合的游离负电荷分子，包括细菌产物、DNA、脂蛋白和磷脂。TREM2与配体结合后，通过DNAX激活蛋白10(DAP10)和DNAX激活蛋白12(DAP12)向胞内传递信号，继而激活下游多种信号通路，产生不同效应。TREM2是肿瘤中巨噬细胞浸润的标志物，已在多种肿瘤中发现TREM2在肿瘤相关巨噬细胞(TAM)表面表达，并与肿瘤的生存期呈负相关。TREM2与其配体结合后可促进TAM高表达CD163，放大肿瘤局部微环境中炎性反应，促进肿瘤的发生、发展。
越来越多的研究发现，表达TREM2的TAM在多种肿瘤中积累，并且与T细胞耗竭以及免疫检查点抑制剂治疗耐药相关。
因此，TREM2可能是靶向治疗肿瘤髓系浸润和增强免疫检查点抑制剂疗效的理想靶标。
发明内容
针对现有技术，本申请提供一种抗TREM2抗体、其抗原结合片段及其应用，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含互补决定区的重链可变区HCDR1、HCDR2、HCDR3和/或互补决定区的轻链可变区LCDR1、LCDR2、LCDR3；所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段具有较强的诱导ADCC效应的活性，可用于增强免疫应答和/或用于治疗个体的免疫相关疾患例如癌症，包括使用抗TREM2抗体或其抗原结合片段杀灭非刺激性髓系细胞，使非刺激性髓系细胞丧失能力或在数量上消减。
本申请第一方面提供了一种抗TREM2抗体或其抗原结合片段，其包含：
(a)包含下述互补决定区的重链可变区:
HCDR1，其包含SEQ ID NO：1、7、12、16或42所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：1、7、12、16或42所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
HCDR2，其包含SEQ ID NO：2、8、13、17、22、31、38或43所示的氨基酸序列，或与SEQID NO：2、8、13、17、22、31、38或43所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
HCDR3，其包含SEQ ID NO：3、9、14、18、23或44所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：3、9、14、18、23或44所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或
(b)包含下述互补决定区的轻链可变区:
LCDR1，其包含SEQ ID NO：4、10、19、24、27、33、36、39、45、48、51或54所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：4、10、19、24、27、33、36、39、45、48、51或54所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
LCDR2，其包含SEQ ID NO：5、11、20、25、28、34、37、40、46、49或52所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：5、11、20、25、28、34、37、40、46、49或52所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
LCDR3，其包含SEQ ID NO：6、15、21、26、29、30、32、35、41、47、50或53所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：6、15、21、26、29、30、32、35、41、47、50或53所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和6所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：4、5和6所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(2)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：10、11和6所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：10、11和6所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(3)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：12、13和14所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：12、13和14所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：10、11和15所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：10、11和15所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(4)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：16、17和18所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：16、17和18所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：19、20和21所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：19、20和21所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(5)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(6)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、28和29所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：27、28和29所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(7)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和30所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：4、5和30所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(8)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(9)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、31和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、31和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和32示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：4、5和32所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(10)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：33、34和35所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：33、34和35所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(11)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：36、37和30所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：36、37和30所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(12)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：39、40和41所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：39、40和41所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(13)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：42、43和44所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：42、43和44所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：45、46和47所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：45、46和47所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(14)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：48、49和29所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：48、49和29所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(15)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、5和26所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：27、5和26所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(16)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、28和50所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：27、28和50所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(17)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：51、5和26所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：51、5和26所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(18)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：36、52和53所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：36、52和53所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；或
(19)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：54、5和32所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：54、5和32所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55、58、59或61所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55、58、59或61所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或
轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：56、57、60或62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：56、57、60或62所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在本申请的一些实施方式中，SEQ ID NO：55、58、59或61所示的氨基酸序列和与其具有至少80％同一性的氨基酸序列之间的差异氨基酸主要或全部位于所述重链可变区的FR区中；和/或SEQ ID NO：56、57、60或62所示的氨基酸序列和与其具有至少80％同一性的氨基酸序列之间的差异氨基酸主要或全部位于所述轻链可变区的FR区中。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(2)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(3)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：58所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：58所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(4)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(5)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：61所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：61所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；或
(6)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在本申请的一些实施方式中，所述抗体为鼠源抗体、猴源抗体、兔源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、全人源抗体；所述抗体优选为人源化抗体。在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段选自单克隆抗体、多克隆抗体、中和抗体、拮抗性抗体、无海藻糖基化抗体、单特异性抗体、多特异性抗体、纳米抗体、Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段、Fd片段、Fv片段、dAb片段、分离的CDR区和scFv中至少一种。在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体为单克隆抗体。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段进一步包含恒定区，所述恒定区为重链恒定区和/或轻链恒定区。
优选地，所述重链恒定区为IgG、IgA、IgM、IgE或IgD的重链恒定区或其变体；所述重链恒定区优选为IgG的重链恒定区或其变体，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的恒定区或其变体；所述重链恒定区更优选为IgG1的重链恒定区或其变体；例如人IgG1的重链恒定区，其氨基酸序列如SEQ ID NO：75或76所示。
优选地，轻链恒定区为κ链或λ链的恒定区或其变体，优选人κ链的恒定区，其氨基酸序列如SEQ ID NO：77所示。
在一些实施方式中，所述重链恒定区包含全长重链恒定区或其片段，所述片段可选自CH1区、Fc区或CH3区。在一些实施方式中，所述重链恒定区或其变体包含具有一种或多种增强抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)的突变的IgG1 Fc区。
在一些实施方式中，所述重链恒定区或其变体包含IgG1 Fc区第234位、第235位和第243位突变，或第239、第330和第332位突变。在一些实施方式中，IgG1 Fc区包含S239D、A330L和I332E的突变。在一些实施方式中，所述重链恒定区或其变体包含IgG1 Fc区第234位、第235位、第243位、第239、第330或第332位的至少一种突变。在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段进一步包含具有S239D、A330L和I332E中的至少一种突变的IgG1 Fc区。
在一些实施方案中，Fc区结合Fcγ受体，例如：FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIb、FcγRIIc、FcγRIIIa或FcγRIIIb。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
重链，所述重链包含SEQ ID NO：67、69、72、63、66或71所示的氨基酸序列或与SEQID NO：67、69、72、63、66或71所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或
轻链，所述轻链包含SEQ ID NO：68、70、64或65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68、70、64或65所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方式中，SEQ ID NO：67、69、72、63、66或71所示的氨基酸序列和与其具有至少80％同一性的氨基酸序列之间的差异氨基酸主要或全部位于所述重链的FR区和/或恒定区中；和/或SEQ ID NO：68、70、64或65所示的氨基酸序列和与其具有至少80％同一性的氨基酸序列之间的差异氨基酸主要或全部位于所述轻链的FR区和/或恒定区中。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(2)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(3)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：69所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：69所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(4)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(5)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(6)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(7)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：66所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：66所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；或者
(8)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方式中，所述抗体为多特异性抗体，所述多特异性抗体特异性结合TREM2，并且额外地特异性结合一个或多个其他靶标。优选地，所述多特异性抗体、例如双特异性抗体还包含至少一种具有针对第二靶标的第二结合特异性的第二抗体。优选地，所述多特异性抗体为双特异性抗体、三特异性抗体或四特异性抗体。更优选地，所述多特异性抗体为双特异性抗体。
作为非限制性示例，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段具有以下一个或多个特性：
(1)能够结合至人TREM2；
(2)能够结合至鼠TREM2；
(3)能够结合至食蟹猴TREM2；
(4)与一种或多种TREM2配体竞争结合TREM2；
(5)抑制和/或阻断TREM2与配体的结合；
(6)抑制和/或阻断由TREM2结合配体介导的细胞内信号传导；
(7)诱导细胞因子或趋化因子分泌；
(8)具有抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性、补体依赖性细胞毒性(CDC)活性和抗体介导的吞噬作用(ADCP)活性中的至少一种；
(9)增强免疫应答；
(10)增强的ADCC活性。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段与人TREM2结合的KD值＜5E-08M、＜1E-09M、＜1E-10M、＜5E-10M、＜1E-11M或＜1E-12M。
在一些实施方案中，所述一种或多种TREM2配体选自大肠杆菌细胞、凋亡细胞、核酸、阴离子性脂质、两性离子性脂质、带负电的磷脂、磷脂酰丝氨酸、硫苷脂、磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine)、鞘磷脂、膜磷脂、脂化蛋白、蛋白脂质、脂化肽及脂化β淀粉样肽。
在一些实施方案中，所述细胞因子或趋化因子选自IFN-γ、TNF-α、CXCL1或CXCL10。
在一些实施方案中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段能够对TREM2+髓系细胞进行特异性杀灭、消减或使其丧失能力。
任选地，所述TREM2+髓系细胞为非刺激性髓系细胞，例如CD45+、HLA-DR+、CD11c+、CD14+和BDCA3-非刺激性髓系细胞。任选地，所述TREM2+髓系细胞为肿瘤内髓系细胞。任选地，所述TREM2+细胞选自树突细胞、巨噬细胞、单核细胞和嗜中性白细胞；所述巨噬细胞优选为肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。
在一些具体实施方案中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段具有ADCC活性。ADCC可在抗体结合病原性或致肿瘤性靶标细胞的表面上的抗原时发生。
本申请第二方面提供了一种核酸分子，所述核酸分子编码本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方式中，所述核酸分子包括分别编码本文所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段的重链可变区或/和轻链可变区的核酸分子。
本申请第三方面提供了重组载体，其包含本申请第二方面所述的核酸分子。
本申请第四方面提供了宿主细胞，其包含本申请第二方面所述的核酸分子或本申请第三方面所述的重组载体。
在一些实施方式中，所述载体为克隆载体；在另一些实施方式中，所述载体为表达载体。所述表达载体可任选地为能够表达本文所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段、或其部分(moiety)的任意表达载体。
本申请第五方面提供了制备抗TREM2抗体或其抗原结合片段的方法，其包括培养本申请第四方面所述的宿主细胞。
在一些实施方式中，所述宿主细胞为原核细胞。在另一些实施方式中，所述宿主细胞为真核细胞。
在一些实施方式中，所述宿主细胞选自酵母细胞、哺乳动物细胞或适用于制备抗体或其抗原结合片段、或其部分(moiety)的其他细胞。哺乳动物细胞例如为中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、人肾上皮细胞系293细胞或293T细胞。在一些实施方式中，所述重组细胞为重组CHO细胞。在一些实施方式中，所述方法还包括对所述宿主细胞的表达产物进行分离和纯化，例如采用ProteinA亲和柱纯化。
本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段、本申请第二方面所述的核酸分子、本申请第三方面所述的重组载体或本申请第四方面所述的宿主细胞在制备药物中的用途。
在一些实施方式中，所述药物为预防和/或治疗TREM2相关的疾病或病症的药物。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为癌症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为脂质相关疾病或病症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为纤维化疾病或病症。
在一些实施方式中，所述药物为调节受试者的免疫应答的药物。在一些具体实施方式中，所述药物为增加受试者的抗肿瘤免疫应答的药物和/或诱导受试者的记忆免疫应答的药物。
在一些实施方式中，本申请涉及用于预防和/或治疗TREM2相关的疾病或病症、或者调节受试者的免疫应答的本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段、本申请第二方面所述的核酸分子、本申请第三方面所述的重组载体或本申请第四方面所述的宿主细胞。或者，本申请涉及一种预防和/或治疗TREM2相关的疾病或病症、或者调节受试者的免疫应答的方法，包括向有需要的受试者给予本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段、本申请第二方面所述的核酸分子、本申请第三方面所述的重组载体或本申请第四方面所述的宿主细胞。
本申请第六方面提供了第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段、本申请第二方面所述的核酸分子、本申请第三方面所述的重组载体或本申请第四方面所述的宿主细胞胞在制备诊断TREM2相关的疾病或病症的试剂中的用途。
在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为癌症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为脂质相关疾病或病症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为纤维化疾病或病症。
在一些实施方式中，所述试剂能够调节受试者的免疫应答。在一些具体实施方式中，所述试剂能够增加受试者的抗肿瘤免疫应答和/或诱导受试者的记忆免疫应答。
本申请第七方面提供了一种用于检测TREM2的试剂盒，其包含本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段或本申请第二方面所述的核酸分子。
本申请第八方面提供了一种治疗或预防有需要的受试者的疾病或病症的方法，其包括向所述受试者施用本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方式中，所述疾病或病症为TREM2相关的疾病或病症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为癌症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为脂质相关疾病或病症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为纤维化疾病或病症。
本申请第九方面提供了一种增强受试者的免疫应答的方法，其包括向所述受试者施用本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段。
优选地，所述增强受试者的免疫应答为增加受试者的抗肿瘤免疫应答和/或诱导受试者的记忆免疫应答。
在一些具体的实施方式中，所述受试者为哺乳动物，例如人。在一些实施方式中，所述免疫应答是适应性免疫应答。在一些实施方式中，所述免疫应答是先天性免疫应答。
在一些实施方式中，所述癌症选自黑素瘤、肾癌、肝胆癌、头颈部鳞状癌(HNSC)、胰腺癌、结直肠癌、膀胱癌、胶质母细胞瘤、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌、食道癌、肾脏癌、白血病、淋巴瘤或间皮瘤。在一些具体实施方式中，所述癌症为结直肠癌。在一些具体实施方式中，所述癌症为乳腺癌。
在一些实施方式中，所述脂质相关疾病或病症选自肥胖症、脂肪肝病、心脏病、中风、动脉粥样硬化、糖尿病、骨关节炎、痛风、睡眠呼吸暂停或高血压。
在一些实施方式中，所述纤维化疾病或病症是肝病。任选地，所述肝病为非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
本申请的有益效果：
本申请的抗TREM2抗体或其抗原结合片段具有抗体依赖的细胞毒性(ADCC)活性、补体依赖性细胞毒性(CDC)活性、抗体介导的吞噬作用(ADCP)活性、结合亲和力，尤其具有较强的诱导ADCC效应的活性，可用于增强免疫应答和/或用于治疗个体的免疫相关疾患例如癌症，包括使用抗TREM2抗体或其抗原结合片段杀灭非刺激性髓系细胞，使非刺激性髓系细胞丧失能力或消减。
本申请靶向TREM2的单克隆抗体阻断TREM2介导的信号转导或通过ADCC效应、CDC效应、ADCP效应中至少一种(尤其是通过ADCC效应)，清除肿瘤微环境中表达TREM2的肿瘤相关巨噬细胞(TAM)，有助于增强抗肿瘤免疫应答。
本申请的抗TREM2抗体或其抗原结合片段能够与人、鼠、猴TREM2过表达细胞株交叉结合或与人、猴TREM2过表达细胞株交叉结合。
附图说明
图1-1～图1-4为实施例2嵌合抗体和阳性对照抗体与人TREM2过表达细胞株的结合检测结果图；
图1-5～图1-8为实施例2嵌合抗体和阳性对照抗体与小鼠TREM2过表达细胞株的结合检测结果图；
图1-9～图1-10为实施例2嵌合抗体和阳性对照抗体与食蟹猴TREM2过表达细胞株的结合检测结果图；
图2-1～图2-4为实施例6人源化抗体和阳性对照抗体与人TREM2过表达细胞株的结合检测结果图；
图2-5～图2-6为实施例6人源化抗体和阳性对照抗体与小鼠TREM2过表达细胞株的结合检测结果图；
图2-7～图2-9为实施例6人源化抗体和阳性对照抗体与食蟹猴TREM2过表达细胞株的结合检测结果图；
图3-1～图3-2为实施例7人源化抗体的ADCC效应结果图；
图4-1为本申请人源化抗体的体内药效肿瘤生长曲线图；
图4-2为本申请人源化抗体的体内药效体重变化趋势图；
图5为本申请突变改造增强人源化抗体的ADCC效应结果图。
具体实施方式
为使本申请更加容易理解，下面将结合实施例来详细说明本申请，这些实施例仅起说明性作用，而并不会限制本申请的应用范围。
除非另有说明，本文使用的术语“包含、包括和含有(comprise、comprises和comprising)”或其等同物(contain、contains、containing、include、includes、including)为开放式表述，意味着除所列出的要素、组分和步骤外，还可涵盖其它未指明的要素、组分和步骤。
除非另有说明，本文所使用的表示成分的量、测量值或反应条件的所有数字应理解为在所有情况下均由术语“约”修饰。当与百分比相连时，术语“约”可以表示例如±1％、优选±0.5％、更优选±0.1％。
除非上下文另有明确指示，本文中的单数术语涵盖复数的指示对象，反之亦然。类似地，除非上下文另有明确指示，本文中的词语“或”意在包括“和”。除非另有说明，本文使用的术语“任选的”或“任选地”表示其所修饰的对象或事件存在或不存在、或者发生或不发生。
除非另有说明，本文使用的术语“治疗”意味着在给药后可以抑制、遏制、减轻、改善、减缓、缓解或消除疾病或其相关症状，可以迟滞、延缓、减慢、中止或终止疾病或其相关症状的进展，或者可以阻止、控制或减少疾病或其相关症状的复发。
除非另有说明，本文使用的术语“受试者”涵盖任何脊椎动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，诸如人、非人灵长类动物、羊、犬、猫、马、牛、鸡、猪、鼠等。优选地，本申请中的受试者是人。本文使用的术语“受试者”可与术语“患者”互换使用。
术语“互补决定区”可以指在抗体的可变区中赋予抗原结合特异性的部分，并且可以指在免疫球蛋白的重链或轻链的高可变区中发现的氨基酸序列。重链可以包括三个互补决定区CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3；以及轻链可以包括三个互补决定区CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)。所述CDR可以提供在抗体与其抗原或抗原表位的结合中起重要作用的接触残基。
术语“人源化抗体”是指，经基因工程改造的非人源抗体，其氨基酸序列经修饰以提高与人源抗体的序列的同源性。通常而言，人源化抗体的全部或部分CDR区来自于非人源抗体(供体抗体)，全部或部分的非CDR区(例如，可变区FR和/或恒定区)来自于人源免疫球蛋白(受体抗体)。人源化抗体通常保留或部分保留了供体抗体的预期性质，包括但不限于抗原特异性、亲和性、反应性、提高免疫细胞活性的能力、增强免疫应答的能力等。
术语“嵌合抗体”是指可变区序列源自一个物种，恒定区序列源自另一物种的抗体，例如：将鼠源性抗体的可变区与人抗体的恒定区融合而成的抗体。当提及抗体时，除非另有说明，其为分离的抗体，本文中的术语“分离的”表示该抗体基本上不含在天然状态下与其结合的其他细胞组分，例如，分离的抗体可以是从天然或自然环境中移出的抗体。
在本文中，序列之间的同一性百分比(同源性程度)可以通过例如使用万维网(例如www.ncbi.nlm.nih.gov)上通常用于此目的的免费可用的计算机程序(例如具有默认设置的BLASTp或BLASTn)对两个序列进行比较来确定。
本申请第一方面提供了一种抗TREM2抗体或其抗原结合片段，其包含：
(a)包含下述互补决定区的重链可变区:
HCDR1(重链CDR1)，其包含SEQ ID NO：1、7、12、16或42所示的氨基酸序列，或与SEQID NO：1、7、12、16或42所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
HCDR2(重链CDR2)，其包含SEQ ID NO：2、8、13、17、22、31、38或43所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：2、8、13、17、22、31、38或43所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
HCDR3(重链CDR3)，其包含SEQ ID NO：3、9、14、18、23或44所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：3、9、14、18、23或44所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或
(b)包含下述互补决定区的轻链可变区:
LCDR1(轻链CDR1)，其包含SEQ ID NO：4、10、19、24、27、33、36、39、45、48、51或54所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：4、10、19、24、27、33、36、39、45、48、51或54所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
LCDR2(轻链CDR2)，其包含SEQ ID NO：5、11、20、25、28、34、37、40、46、49或52所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：5、11、20、25、28、34、37、40、46、49或52所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
LCDR3(轻链CDR3)，其包含SEQ ID NO：6、15、21、26、29、30、32、35、41、47、50或53所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：6、15、21、26、29、30、32、35、41、47、50或53所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和6所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：4、5和6所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(2)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：10、11和6所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：10、11和6所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(3)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：12、13和14所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：12、13和14所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：10、11和15所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：10、11和15所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(4)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：16、17和18所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：16、17和18所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：19、20和21所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：19、20和21所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(5)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(6)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、28和29所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：27、28和29所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(7)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和30所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：4、5和30所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(8)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(9)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、31和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、31和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和32示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：4、5和32所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(10)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：33、34和35所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：33、34和35所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(11)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：36、37和30所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：36、37和30所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(12)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：39、40和41所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：39、40和41所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(13)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：42、43和44所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：42、43和44所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：45、46和47所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：45、46和47所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(14)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：48、49和29所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：48、49和29所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(15)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、5和26所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(16)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、28和50所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：27、28和50所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(17)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：51、5和26所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：51、5和26所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(18)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：36、52和53所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：36、52和53所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；或
(19)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：54、5和32所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NOs：54、5和32所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3；分别具有SEQ ID NOs：4、5和6所示的氨基酸序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
(2)分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3；分别具有SEQ ID NOs：10、11和6所示的氨基酸序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
(3)分别具有SEQ ID NOs：12、13和14所示的氨基酸序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3；分别具有SEQ ID NOs：10、11和15所示的氨基酸序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
(4)分别具有SEQ ID NOs：16、17和18所示的氨基酸序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3；分别具有SEQ ID NOs：19、20和21所示的氨基酸序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3；分别具有SEQ ID NOs：4、5和6所示的氨基酸序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
(2)分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列的HCDR1、HCDR2和HCDR3；分别具有SEQ ID NOs：10、11和6所示的氨基酸序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55、58、59或61所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55、58、59或61所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或
轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：56、57、60或62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：56、57、60或62所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(2)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(3)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(4)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：58所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：58所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(5)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：61所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：61所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；或
(6)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方式中，SEQ ID NO：55、56、57、58、59、60、61或62所示的氨基酸序列和与其具有至少80％同一性的氨基酸序列之间的差异氨基酸全部位于FR区中。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(2)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(3)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(4)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：58所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：58所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；或
(5)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：61所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：61所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
其中，SEQ ID NO：55、56、57、58、59、60、61或62所示的氨基酸序列和与其具有至少80％同一性的氨基酸序列之间的差异氨基酸全部位于FR区中。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；或
(2)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
其中，SEQ ID NO：55、56、59或60所示的氨基酸序列和与其具有至少80％同一性的氨基酸序列之间的差异氨基酸全部位于FR区中。
在本申请的一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列；或
(2)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列。
上述CDR的范围已根据AbM编号规则进行了定义，但是本领域技术人员可以理解的是，根据ImMunoGenTics(IMGT)编号规则、Kabat编号规则、Chothia编号规则和Contact编号规则(基于对可用复杂晶体结构的分析)等中的任一种或多种进行编号的CDR序列也落入了本申请的保护范围内。
在本申请中，还可对抗TREM2抗体或其抗原结合片段进行保守修饰。保守修饰是指不会明显影响或改变抗体结合特性的氨基酸修饰。例如，保守氨基酸取代可为采用同类(具有类似的化学性质或者功能)的另一种氨基酸进行取代。作为示例，可根据氨基酸的侧链性质将其分为：(1)非极性氨基酸：Ala(A)、Val(V)、Leu(L)、Ile(I)、Pro(P)、Phe(F)、Trp(W)、Met(M)；(2)不带电荷的极性氨基酸：Gly(G)、Ser(S)、Thr(T)、Cys(C)、Tyr(Y)、Asn(N)、Gln(Q)；(3)酸性氨基酸：Asp(D)、Glu(E)；(4)碱性氨基酸：Lys(K)、Arg(R)、His(H)。或者，可基于共同的侧链特性将氨基酸分为：(1)疏水氨基酸：Met、Ala、Val、Leu、Ile；(2)中性亲水氨基酸：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；(3)酸性氨基酸：Asp、Glu；(4)碱性氨基酸：His、Lys、Arg；(5)影响链取向的氨基酸：Gly、Pro；(6)芳香族氨基酸：Trp、Tyr、Phe。
本申请所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段及它们的变体均能够特异性地结合至TREM2。
本申请的抗TREM2抗体或其抗原结合片段为分离的抗TREM2抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方式中，所述抗体为鼠源抗体、猴源抗体、兔源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、全人源抗体；所述抗体优选为人源化抗体。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段选自单克隆抗体、多克隆抗体、中和抗体、拮抗性抗体、无海藻糖基化抗体、单特异性抗体、多特异性抗体、纳米抗体、Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段、Fd片段、Fv片段、dAb片段、分离的CDR区和scFv中至少一种。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体为单克隆抗体。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段进一步包含重链恒定区和/或轻链恒定区。
优选地，所述重链恒定区为IgG、IgA、IgM、IgE或IgD的重链恒定区或其变体；所述重链恒定区优选为IgG的重链恒定区或其变体，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的恒定区或其变体；所述重链恒定区更优选为IgG1的重链恒定区或其变体。
优选地，轻链恒定区为κ链或λ链的恒定区或其变体。
在一些实施方式中，所述重链恒定区包含全长重链恒定区或其片段，所述片段可选自CH1区、Fc区或CH3区；
在一些实施方式中，所述重链恒定区或其变体包含具有一种或多种增强抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)的突变的IgG1 Fc区。
在一些实施方式中，所述重链恒定区或其变体包含IgG1 Fc区第234位、第235位和第243位突变，或第239、第330和第332位突变。在一些实施方式中，IgG1 Fc区包含S239D、A330L和I332E的突变。
在一些实施方案中，Fc区结合Fcγ受体，例如：FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIb、FcγRIIc、FcγRIIIa或FcγRIIIb。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含上述的重链可变区和轻链可变区、以及IgG1 Fc区。在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含上述的重链可变区和轻链可变区、以及IgG1 Fc区和人κ链的恒定区。在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含上述的重链可变区和轻链可变区、IgG1的重链恒定区、以及浓度比为2:1的人κ链的恒定区和人λ链的恒定区。在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含上述的重链可变区和轻链可变区、以及具有S239D、A330L和I332E中的至少一种突变的IgG1 Fc区。在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：(1)上述的重链可变区和轻链可变区，(2)具有S239D、A330L和I332E中的至少一种突变的IgG1 Fc区；以及(3)人κ链的恒定区。在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：(1)上述的重链可变区和轻链可变区，(2)具有S239D、A330L和I332E中的至少一种突变的IgG1 Fc区；以及(3)浓度比为2:1的人κ链的恒定区和人λ链的恒定区。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：(1)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ IDNO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(2)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(3)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：69所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：69所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(4)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(5)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(6)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(7)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：66所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：66所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；或者
(8)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方式中，SEQ ID NO：67、68、69、70、72、63、64、65、66或71所示的氨基酸序列和与其具有至少80％同一性的氨基酸序列之间的差异氨基酸主要或全部位于FR区和/或恒定区中；优选地，全部位于FR区和/或恒定区中。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(2)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(3)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(4)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(5)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：69所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：69所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(6)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；或者
(7)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：66所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：66所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方式中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(2)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(3)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；或者
(4)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方式中，所述抗体为多特异性抗体，所述多特异性抗体特异性结合TREM2，并且额外地特异性结合一个或多个其他靶标。
优选地，所述多特异性抗体还包含至少一种具有针对第二靶标的第二结合特异性的第二抗体。优选地，所述多特异性抗体为双特异性抗体、三特异性抗体或四特异性抗体。更优选地，所述多特异性抗体为双特异性抗体。
作为非限制性示例，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段具有以下一个或多个特性：
(1)能够结合至人TREM2；
(2)能够结合至鼠TREM2；
(3)能够结合至食蟹猴TREM2；
(4)与一种或多种TREM2配体竞争结合TREM2；
(5)抑制和/或阻断TREM2与配体的结合；
(6)抑制和/或阻断由TREM2结合配体介导的细胞内信号传导；
(7)诱导细胞因子或趋化因子分泌；
(8)具有抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性、补体依赖性细胞毒性(CDC)活性和抗体介导的吞噬作用(ADCP)活性中的至少一种；
(9)增强免疫应答；
(10)增强的ADCC活性。
在一些实施方案中，所述一种或多种TREM2配体选自大肠杆菌细胞、凋亡细胞、核酸、阴离子性脂质、两性离子性脂质、带负电的磷脂、磷脂酰丝氨酸、硫苷脂、磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine)、鞘磷脂、膜磷脂、脂化蛋白、蛋白脂质、脂化肽及脂化β淀粉样肽。
在一些实施方案中，所述细胞因子或趋化因子选自IFN-γ、TNF-α、CXCL1或CXCL10。
在一些实施方案中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段能够对TREM2+髓系细胞进行特异性杀灭、消减或使其丧失能力。
任选地，所述TREM2+髓系细胞为非刺激性髓系细胞，例如：CD45+、HLA-DR+、CD11c+、CD14+和BDCA3-非刺激性髓系细胞。任选地，所述TREM2+髓系细胞为肿瘤内髓系细胞。任选地，所述TREM2+细胞选自树突细胞、巨噬细胞、单核细胞和嗜中性白细胞；所述巨噬细胞优选为肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。
在一些具体实施方案中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段具有ADCC活性。ADCC可在抗体结合病原性或致肿瘤性靶标细胞的表面上的抗原时发生。
为评估目标分子的ADCC效应的活性，可进行诸如美国专利号5,500,362或5,821,337中所述的体外ADCC测定。可用于所述测定的效应细胞包括外周血液单个核细胞(PBMC)和天然杀伤(NK)细胞。或者或另外，可在体内，例如在诸如Clynes等,Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)95:652-656(1998)中公开的动物模型中评估目标分子的ADCC效应的活性。
本申请第二方面提供了一种核酸分子，所述核酸分子编码本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方式中，所述核酸分子包括分别编码本申请所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段的重链可变区或/和轻链可变区的核酸分子。
本申请第三方面提供了重组载体，其包含本申请第二方面所述的核酸分子。
术语“载体”是指用于在宿主细胞中表达靶基因的工具，例如质粒载体、粘粒载体和病毒载体如噬菌体载体、慢病毒载体、腺病毒载体、逆转录病毒载体和腺相关病毒载体。重组载体可以由以下构建或通过操纵以下来构建：质粒(例如，pSC101、pGV1106、pACYC177、ColE1、pKT230、pME290、pBR322、pUC8/9、pUC6、pBD9、pHC79、pIJ61、pLAFR1、pHV14、pGEX系列、pET系列、pUC19等)、噬菌体(例如，λgt4λB、λ-Charon、λΔz1、M13等)或病毒载体(例如，SV40等)，这是本领域中常用的。
在重组载体中，核酸分子可以与启动子可操作地连接。术语“可操作地连接”旨在涉及目标核苷酸序列与表达调控序列(例如，启动子序列)之间的功能连接。当“可操作地连接”时，调控元件可以控制目标多核苷酸的转录和/或翻译。
在一些实施方式中，所述载体为克隆载体；在另一些实施方式中，所述载体为表达载体。所述表达载体可任选地为能够表达本申请所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段的任意表达载体。
为了在宿主例如原核或真核细胞中使用，可以相应地构建重组载体。例如，当构建载体作为用于原核宿主的表达载体时，所述载体通常包括用于转录的强启动子(例如，pLλ启动子、CMV启动子、trp启动子、lac启动子、tac启动子、T7启动子等)、用于启动翻译的核糖体结合位点和转录/翻译终止序列。另一方面，用于真核宿主的表达载体包括可在真核细胞中操作的复制起点，例如f1复制起点、SV40复制起点、pMB1复制起点、腺病毒复制起点、AAV复制起点和BBV复制起点，但不限于此。另外，表达载体通常包括源自哺乳动物细胞基因组的启动子(例如金属硫蛋白启动子)或源自哺乳动物病毒的启动子(例如腺病毒晚期启动子、牛痘病毒7.5K启动子、SV40启动子、巨细胞病毒启动子、HSV的tk启动子等)，以及作为转录终止序列的多聚腺苷酸化序列。可以通过将重组载体引入合适的宿主细胞来制备重组细胞。本领域已知的任何宿主细胞都可以用于本公开中，只要它允许重组载体以稳定的方式连续克隆和表达。可用于本公开的原核宿主细胞的实例可以选自大肠杆菌(E.coli)如大肠杆菌JM109、大肠杆菌BL21、大肠杆菌RR1、大肠杆菌LE392、大肠杆菌B、大肠杆菌X1776、大肠杆菌W3110，芽孢杆菌属菌种如枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)，以及肠杆菌科菌株，例如鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)和各种假单胞菌菌种。可用于转化的真核宿主细胞可以选自但不限于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、昆虫细胞和动物细胞，例如Sp2/0、CHO(中国仓鼠卵巢)K1、CHO DG44、CHO S、CHO DXB11、CHO GS-KO、PER.C6、W138、BHK、COS-7、293、HepG2、Huh7、3T3、RIN、MDCK等。可以使用相关领域中众所周知的方法将核酸分子或携带核酸分子的重组载体引入(转染)到宿主细胞中。例如，当宿主细胞是原核细胞时，可以使用CaCl2或电穿孔方法进行这种转染。对于真核宿主细胞，可以使用但不限于显微注射、磷酸钙沉淀、电穿孔、脂质体介导的转染或粒子轰击来实现基因引入。
为了选择转化的宿主细胞，可以根据本领域中众所周知的方法利用与选择标志物相关的表型。例如，当所述选择标志物是赋予某些抗生素抗性的基因时，宿主细胞可以在存在抗生素的情况下在培养基中生长以选择目标转化体。
本申请第四方面提供了宿主细胞，其包含本申请第二方面所述的核酸分子或本申请第三方面所述的重组载体。
本申请中的宿主细胞可为用于表达抗TREM2抗体或其抗原结合片段、或其部分(moiety)的任何适当的宿主细胞。
在一些实施方式中，所述宿主细胞为原核细胞。在另一些实施方式中，所述宿主细胞为真核细胞。在一些实施方式中，所述宿主细胞选自酵母细胞、哺乳动物细胞或适用于制备抗体或其抗原结合片段、或其部分的其他细胞。哺乳动物细胞例如为中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、人肾上皮细胞系293细胞或293T细胞。在一些实施方式中，所述重组细胞为重组CHO细胞。
本申请第五方面提供了制备抗TREM2抗体或其抗原结合片段的方法，其包括培养本申请第四方面所述的宿主细胞。优选地，所述方法还包括对所述宿主细胞的表达产物进行分离和纯化。
本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段、本申请第二方面所述的核酸分子、本申请第三方面所述的重组载体或本申请第四方面所述的宿主细胞在制备药物中的用途。
在一些实施方式中，所述药物为预防和/或治疗TREM2相关的疾病或病症的药物。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为癌症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为脂质相关疾病或病症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为纤维化疾病或病症。
在一些实施方式中，所述药物为调节受试者的免疫应答的药物。在一些具体实施方式中，所述药物为增加受试者的抗肿瘤免疫应答的药物和/或诱导受试者的记忆免疫应答的药物。
本申请第六方面提供了第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段、本申请第二方面所述的核酸分子、本申请第三方面所述的重组载体或本申请第四方面所述的宿主细胞胞在制备诊断TREM2相关的疾病或病症的试剂中的用途。
在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为癌症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为脂质相关疾病或病症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为纤维化疾病或病症。
在一些实施方式中，所述试剂能够调节受试者的免疫应答。在一些具体实施方式中，所述试剂能够增加受试者的抗肿瘤免疫应答和/或诱导受试者的记忆免疫应答。
本申请第七方面提供了一种用于检测TREM2的试剂盒，其包含本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段或本申请第二方面所述的核酸分子。
本申请第八方面提供了一种治疗或预防有需要的受试者的疾病或病症的方法，其包括向所述受试者施用本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段。
在一些实施方式中，所述疾病为TREM2相关的疾病或病症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为癌症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为脂质相关疾病或病症。在一些实施方式中，所述TREM2相关的疾病或病症为纤维化疾病或病症。
本申请第九方面提供了一种增强受试者的免疫应答的方法，其包括向所述受试者施用本申请第一方面所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段。
优选地，所述增强受试者的免疫应答为增加受试者的抗肿瘤免疫应答和/或诱导受试者的记忆免疫应答。
在一些具体的实施方式中，所述受试者为哺乳动物，例如人。在一些实施方式中，所述免疫应答是适应性免疫应答。在一些实施方式中，所述免疫应答是先天性免疫应答。
本申请的抗TREM2抗体或其抗原结合片段可杀伤的癌细胞包括但不限于来自以下的癌细胞：膀胱、血液、骨、骨髓、脑、乳腺、结肠、食管、胃肠、牙龈、头、肾、肝、肺、鼻咽、颈、卵巢、前列腺、皮肤、胃、胰腺、睾丸、舌头、宫颈或子宫。
另外，癌症可具体地具有以下组织学类型，尽管不限于这些：肿瘤、恶性肿瘤病。在一些实施方式中，所述癌症选自黑素瘤、肾癌、肝胆癌、头颈部鳞状癌(HNSC)、胰腺癌、结直肠癌、膀胱癌、胶质母细胞瘤、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌、食道癌、肾脏癌、白血病、淋巴瘤或间皮瘤。在一些具体实施方式中，所述癌症为结直肠癌。在一些具体实施方式中，所述癌症为乳腺癌。
在一些实施方式中，所述脂质相关疾病或病症选自肥胖症、脂肪肝病、心脏病、中风、动脉粥样硬化、糖尿病、骨关节炎、痛风、睡眠呼吸暂停或高血压。
在一些实施方式中，所述纤维化疾病或病症是肝病。任选地，所述肝病为非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
本申请所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段的合适剂量可由临床医师根据如下因素确定，例如受试者的年龄、体重、性别、一般状况、疾病严重程度；它们可通过本领域已知的任何常规途径给予，例如胃肠外、静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外和胸骨内施用。
本领域技术人员可以根据本领域的普通知识对给药方案进行调整以提供最佳的所需应答(例如，临床应答)。例如，可以施用单次大剂量、可以随时间推移施用多个分剂量、或者可以随治疗情况的危急程度成比例降低或提高单次的剂量。例如，当将抗体作为缓释剂给药时，能够以降低的频率给药。
实施例
下面将结合实施例对本申请的方案进行进一步的说明，但是本领域技术人员将能够理解的是，本申请的保护范围并不仅限于这些实施例。
除非另有特别说明，下述实施例中涉及的试剂、材料或仪器为可商购得到的。
实施例1：阳性对照抗体的表达
以Pionyr Immunotherapeutics公司的TREM2抗体PY314作为阳性对照抗体，PY314的可变区氨基酸序列记载于WO2019118513，采用IgG1亚型，并通过重链恒定区S239D/I332E/A330L突变增强其ADCC效应，其序列如下所示：
PY314重链序列，SEQ NO ID:73：
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYYMAWVRQAPGKGLEWVSSLTNSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTREWAGSGYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPDVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPLPEEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
PY314轻链序列，SEQ NO ID:74：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVGNNLAWYQQKPGKAPKLLIYYTSNRFTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQRIYNSPWTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
将PY314的轻链和重链基因合成后分别亚克隆至pcDNA3.4表达载体，转染ExpiCHO细胞，在37℃、5％CO2下培养后，收集细胞培养物，离心，并用ProteinA亲和柱纯化，得到PY314抗体。
实施例2：小鼠免疫库构建与筛选
对Balb/C小鼠和C57两个品系的小鼠进行免疫，分别采用人TREM2蛋白(购自凯佧)单免、人TREM2蛋白与小鼠TREM2蛋白(购自凯佧)交叉免疫的方式，免疫5次，隔周免疫。首次免疫的TREM2蛋白用弗氏完全佐剂乳化，抗原量为100μg/只，后续免疫佐剂为弗氏不完全佐剂，抗原量为50μg/只。注射方式为腹腔加皮下多点注射。取免疫效价检测较好的小鼠进行颈部脱臼处死，无菌条件下获得小鼠脾脏，按照RNA提取试剂盒(购自Omega)的说明书从脾脏细胞内抽提RNA并按照反转录试剂盒(购自TaKaRa)的说明书经过反转录获得cDNA，以通用简并引物(由金唯智合成)经PCR扩增免疫后的小鼠抗体Fab基因，将得到的PCR扩增产物进行1％琼脂糖凝胶电泳，使用DNA纯化回收试剂盒(购自Omega)按照说明书回收所得到的PCR扩增产物，通过Hind III、Not I(购自TaKaRa)酶切和T4 DNA连接酶体外连接来重组抗体Fab基因，将重组后的抗体Fab基因序列插入到M13噬菌体载体中，进行1％琼脂糖凝胶电泳，使用DNA纯化回收试剂盒(购自Omega)按照说明书回收正确构建的重组载体，然后将得到的重组载体转化大肠杆菌感受态细胞，并利用LB培养基培养后，离心并用1×PBS洗涤，获得小鼠免疫抗体库。
通过固相与液相交叉筛选的方式，筛选所述小鼠免疫抗体库，通过胰酶洗脱的方式将针对人、小鼠、食蟹猴TREM2的特异性Fab抗体富集下来。
小鼠免疫抗体库淘选(Kingfisher法)：
(1)背景扣除：将小鼠免疫抗体库噬菌体悬液用5％BSA稀释封闭，与Dynabeads(购自Invitrogen)共孵育，收集负筛孵育后的噬菌体。
(2)Dynabeads封闭及包被：采用Kingfisher磁珠筛选系统(购自Thermoscientific)对磁珠进行结合和清洗，将5％BSA与磁珠孵育。
(3)正筛：将负筛后收集的噬菌体悬液与生物素标记的TREM2蛋白(购自凯佧)包被且封闭后的Dynabeads孵育，并采用Kingfisher磁珠筛选系统进行结合和清洗。
(4)洗脱：用Trypsin(购自上海生工)洗脱噬菌体。
(5)侵染库板：洗脱后噬菌体溶液与对数期SS320细胞充分混合后37℃静置孵育30min。涂布在2YT-Car+-Tet+平板上，37℃培养箱过夜培养。
(6)点Titer：将洗脱后噬菌体溶液用对数期SS320细胞10倍梯度稀释，37℃静置孵育30min，混匀后取2μL滴在平板上，37℃培养箱过夜培养。
(7)统计：计算噬菌体输入、输出等，刮板制备输入的噬菌体并进行2轮筛选，每一轮筛选采用3倍梯度抗原递减的浓度筛选获得具有较高亲和力的抗体克隆。
小鼠免疫抗体库淘选(免疫管法)：
(1)背景扣除：将小鼠免疫库噬菌体悬液用5％PBSM封闭。
(2)免疫管包被封闭：将TREM2蛋白(购自凯佧)包被5％PBSM封闭。
(3)正筛：将噬菌体悬液与蛋白包被且封闭后的免疫管孵育，并按照免疫管筛选系统方法进行结合和清洗。
(4)洗脱：用Trypsin(购自上海生工)洗脱噬菌体。
(5)侵染库板：洗脱后噬菌体溶液与对数期SS320细胞充分混合后37℃静置孵育30min。涂布在2YT-Car+-Tet+平板上，37℃培养箱过夜培养。
(6)点Titer：将洗脱后噬菌体溶液用对数期SS320细胞10倍梯度稀释，37℃静置孵育30min，混匀后取2μL滴在平板上，37℃培养箱过夜培养。
(7)统计：计算噬菌体输入、输出等，刮板制备输入的噬菌体并进行3轮筛选，每一轮筛选采用3倍梯度抗原递减的浓度筛选获得具有较高亲和力的抗体克隆。
通过ELISA按以下步骤检测上述不同输出集合的富集情况：
(1)包被：使用2μg/mL人、小鼠或食蟹猴TREM2(均购自凯佧)包被96孔板，每孔30μL，4℃孵育过夜，PBST洗板3次。
(2)封闭：向各孔加入5％PBSM室温封闭1小时，PBST洗板3次。
(3)一抗孵育：用5％PBSM将上述不同输出集合的Fab或噬菌体表达上清按照5倍梯度进行稀释，以30μL/孔加入稀释后上清，室温孵育1小时，PBST洗板3次。
(4)二抗孵育：Fab上清加入用PBS以1:5000稀释的二抗Anti-mouse-Fab-HRP(购自Sino biological)，噬菌体上清加入用5％PBSM以1:20000稀释的二抗Anti-M13-HRP(购自Sino biological)，30μL/孔，室温孵育1小时，PBST洗板6次。
(5)终止：加入30μL/孔的TMB(购自SurModics)室温显色5～10分钟，然后加入30μL/孔的终止液(2M硫酸)终止反应，酶标仪OD 450读取数据。
选择在Fab水平或噬菌体水平能够与人、小鼠、食蟹猴TREM2(均购自凯佧)交叉富集，或能够与人、食蟹猴TREM2交叉富集的输出集合。挑取第二轮、第三轮筛选的输出集合的单克隆进行针对人、小鼠、食蟹猴TREM2的噬菌体ELISA初筛。初筛共挑取了786个克隆，从中获得90个在蛋白ELISA水平具有人鼠猴交叉结合活性的阳性克隆，163个具有人猴交叉结合活性的阳性克隆，其中65个为序列独特的分子，对其中61个分子进行全长嵌合抗体的构建，采用人IgG1亚型。
嵌合抗体构建过程如下：将上述的61个Fab分子的基因以及人IgG1的重链恒定区和轻链恒定区(κ链)的基因分别克隆到pcDNA3.4表达载体中，通过测序分析获得序列正确的嵌合抗体表达质粒。按照ExpiFectamineTMCHO转染试剂(购自Thermo)的说明书，将纯化得到的所述嵌合抗体表达质粒转染入Expi CHO细胞中，在37℃、5％CO2下培养后，离心收集上清，使用ProteinA亲和层析纯化得到嵌合抗体。
实施例3：嵌合抗体的FACS结合活性
采用流式细胞仪分别检测实施例2的各嵌合抗体与过表达人TREM2、小鼠TREM2、食蟹猴TREM2的CHO-K1细胞(均购自吉满基因)的结合活性，步骤如下。
(1)按照1×105个/孔接种细胞，离心并用FACS buffer洗涤细胞。
(2)在细胞中加入100μL浓度梯度稀释(初始浓度50μg/mL，用FACS缓冲液4倍稀释，FACS缓冲液为DPBS+1％BSA)后的上述嵌合抗体，4℃孵育60min，用FACS buffer离心洗涤细胞2次。
(3)在细胞中加入100μL PE标记的anti-Human Fc(购自Abcam)，4℃孵育30min。
(4)用FACS buffer重悬细胞，用流式细胞仪进行检测。
图1-1～图1-4示出了嵌合抗体与人TREM2过表达细胞株的结合，图1-5～图1-8示出了嵌合抗体与小鼠TREM2过表达细胞株的结合，图1-9～图1-10示出了嵌合抗体与食蟹猴TREM2过表达细胞株的结合，其中，以PY314抗体作为阳性对照。可以看出，嵌合抗体能够与人、鼠、猴TREM2过表达细胞株交叉结合或与人、猴TREM2过表达细胞株交叉结合。
其中，基于A48、A33、A37、B59、A21、A4、A18、A40、A82、A35、A22、A29、A44、A45、A53、A55、A80、A20、A31克隆构建的嵌合抗体表现出更佳的结合活性，所述嵌合抗体的CDR序列见表1。
表1嵌合抗体的CDR序列
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实施例4：嵌合抗体的人源化
对实施例2构建的嵌合抗体A33、A37、A48、B59进行抗体人源化改造，基于嵌合抗体重链和轻链的氨基酸序列进行人源化设计，保留嵌合抗体A33、A37、A48、B59的CDR区序列不变，根据germline alignment的结果以及抗体结构模拟的结果，重链和轻链分别选择不同的人源抗体模板，并在人源化之后对框架区进行回复突变，设计候选的人源化抗体序列。基于嵌合抗体A33、A37、A48、B59抗体序列分别设计了10个、8个、8个、16个人源化抗体分子。将设计的人源化抗体的重链和轻链分别进行基因合成，重链亚克隆至pcDNA3.4-hIgG1表达载体，轻链亚克隆至pcDNA3.4-hIgKc表达载体。构建的载体经测序验证无误后，用Expi CHO细胞进行瞬转表达，使用ProteinA亲和层析纯化得到人源化抗体。代表性的人源化抗体的重链和轻链序列见表2。
表2人源化抗体重链和轻链序列
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实施例5：人源化抗体的ELISA结合活性
按照以下步骤通过ELISA检测人源化抗体与人、小鼠、食蟹猴TREM2的结合活性，并与母本嵌合抗体(人鼠嵌合抗体A33、A37、A48、B59)进行比较：
(1)包被：使用2μg/mL人、小鼠或食蟹猴TREM2(均购自凯佧)包被96孔板，每孔30μL，4℃孵育过夜，PBST洗板3次。
(2)封闭：向各孔加入5％PBSM室温封闭2小时，PBST洗板3次。
(3)一抗孵育：用1％PBSM将待测抗体按照3倍梯度进行稀释，使终浓度分别为3、0.333、0.111、0.037、0.0123、0.00412、0、00137、0.00045μg/mL，以30μL/孔加入稀释后抗体，室温孵育1小时，PBST洗板3次。
(4)二抗孵育：加入用1％牛奶以1:8000稀释的二抗Anti-human-Fc-IgG-HRP(购自abcam)，室温孵育1小时，PBST洗板6次。
(5)终止：加入30μL/孔的TMB(购自SurModics)室温显色5～10分钟，然后加入30μL/孔的终止液(2M硫酸)终止反应，酶标仪OD 450读取数据。
表3～表6分别示出了A33、A37、A48、B59的人源化抗体与人、小鼠、食蟹猴TREM2蛋白的结合。可以看出，A33、A37、A48、B59的一些人源化抗体相比母本嵌合抗体保留了良好的结合活性。
表3 A33人源化抗体ELISA结合的EC50结果汇总表
备注：N代表无结合活性或结合活性较弱无法计算EC50。
表4 A37人源化抗体ELISA结合的EC50结果汇总表
表5 A48人源化抗体ELISA结合的EC50结果汇总表
表6 B59人源化抗体ELISA结合的EC50结果汇总表
备注：N代表无结合活性或结合活性较弱无法计算EC50。
实施例6：人源化抗体的FACS结合活性
按照实施例3所述步骤采用流式细胞仪分别检测人源化抗体与过表达人TREM2、小鼠TREM2、食蟹猴TREM2的CHO-K1细胞的结合活性。
图2-1～图2-4示出了代表性人源化抗体与人TREM2过表达细胞株的结合，图2-5～图2-6示出了代表性人源化抗体与小鼠TREM2过表达细胞株的结合，图2-7～图2-9示出了代表性人源化抗体与食蟹猴TREM2过表达细胞株的结合，其中，以PY314抗体作为阳性对照。可以看出，A33、A37、A48、B59的人源化抗体相比母本嵌合抗体(人鼠嵌合抗体A33、A37、A48、B59)均保留了良好的FACS结合活性。
实施例7：人源化抗体的ADCC效应
采用如下步骤检测人源化抗体介导ADCC效应的能力，以人PBMC细胞作为效应细胞，以过表达人TREM2的CHO-K1细胞(购自吉满基因)作为靶细胞。
(1)按照1×104个细胞/孔、50μL/孔接种hu-TREM2-CHO-K1细胞，37℃孵育30min，同时设置靶细胞加效应细胞孔(仅加入靶细胞和效应细胞)、靶细胞非裂解孔(仅加入靶细胞)、靶细胞全裂解孔(仅加入靶细胞)。
(2)用含有1％FBS的1840培养基对人源化抗体进行梯度稀释，按照50μL/孔加入到细胞中，使终浓度分别为2、0.2、0.02、0.002μg/mL，37℃孵育30min。
(3)按照5×105个细胞/孔、100μL/孔加入PBMC细胞(三优生物制备)，37℃孵育4h。
(4)在靶细胞全裂解孔中加入10μL 10％TritonX-100，37℃孵育30min。
(5)离心后各孔取60μL上清液与LDH试剂等比例混合，室温孵育30min，在490nm处检测OD值。
(6)按照如下公式计算裂解率：裂解率＝(样品孔OD值-靶细胞加效应细胞孔OD值)/(靶细胞全裂解孔OD值-靶细胞非裂解孔OD值)
图3-1～图3-2示出了人源化抗体的ADCC效应结果，可以看出，人源化抗体A33-H5-L1、A33-H4-L2、A33-H5-L2、A48-H4-L1、A48-H2-L2具有较强的诱导ADCC效应的活性。
实施例8：人源化抗体的亲和力
用Biacore T200(Cytiva)仪器检测人源化抗体A33-H5-L1、A48-H2-L2与人TREM2的亲和力。将待测抗体以1×HBS-EP(pH 7.4)缓冲液稀释至30nM，作为抗原的人TREM2(购自凯佧)以1×HBS-EP(pH7.4)缓冲液进行2倍梯度稀释，浓度依次为150、75、37.5、18.75、9.38、4.69、2.34、1.17、0.58nM。采用Protein A芯片(购自Cytiva)按预设程序进行检测。首先芯片捕获待测抗体120秒，捕获完毕后在1×HBS-EP(PH 7.4)缓冲液中继续平衡30秒后，然后将不同浓度抗原稀释液依次经过芯片进行抗体抗原结合180秒，再切换至1×HBS-EP(pH 7.4)缓冲液中解离300秒，最后通过不同浓度抗原与抗体的结合解离数据拟合得到KD、Kon和Koff。
表7示出了人源化抗体的亲和力检测结果，可以看出，人源化抗体A48-H2-L2与人TREM2的亲和力高于PY314，A33-H5-L1与PY314相当。
表7人源化抗体与人TREM2的亲和力
| 抗体名称 | Kon(1/Ms) | Koff(1/s) | KD(M) |
| PY314 | 9.99E+06 | 1.22E-02 | 1.22E-09 |
| A33-H5-L1 | 1.27E+06 | 2.50E-03 | 1.97E-09 |
| A48-H2-L2 | 5.03E+05 | 3.29E-04 | 6.55E-10 |
实施例9：人源化抗体的体内药效研究
对人源化抗体A33-H5-L1、A48-H2-L2进行小鼠肿瘤模型体内药效研究。为了更好地模拟在人体内的药效，使用转入了人TREM2基因的TREM2人源化C57BL/6小鼠(购自南模生物)。取雌性TREM2人源化小鼠，按2.5E6/只的数量皮下接种MC38小鼠结肠癌细胞，建立皮下荷瘤模型。至肿瘤生长至100mm3左右，按照表8所示方案开始分组给药。研究过程中每天观察小鼠存活情况及一般状态，每周2次测量肿瘤体积和体重。
至研究终点的肿瘤生长曲线图和体重变化趋势图分别如图4-1、图4-2所示，肿瘤生长抑制率(TGI)如表8所示，研究结果显示，人源化抗体A33-H5-L1、A48-H2-L2均具有明显的抑瘤作用，并且其抑瘤作用均显著高于PY314，实验过程中各组动物体重均无明显下降。
表8人源化抗体体内药效研究方案
| 组号 | 动物数量 | 药物 | 剂量(mg/kg) | 给药频次 | 给药途径 | TGI |
| 1 | 6 | PBS | / | BIW，给药8次 | i.p. | / |
| 2 | 6 | PY314 | 20 | BIW，给药8次 | i.p. | 64％ |
| 3 | 6 | A33-H5-L1 | 20 | BIW，给药8次 | i.p. | 89％ |
| 4 | 6 | A48-H2-L2 | 20 | BIW，给药8次 | i.p. | 86％ |
实施例10：人源化抗体的ADCC增强改造
为了进一步增强人源化抗体A33-H5-L1、A48-H2-L2的ADCC效应，对其重链恒定区进行S239D/I332E/A330L点突变，并以HC表示，A33-H5-L1-HC表示经过突变改造的A33-H5-L1分子，A48-H2-L2-HC表示经过突变改造的A48-H2-L2分子，序列如表9所示。
表9 ADCC增强的人源化抗体重链和轻链序列
实施例11：突变改造后人源化抗体的ADCC效应
采用实施例7所述步骤检测突变改造后人源化抗体A33-H5-L1-HC、A48-H2-L2-HC介导ADCC效应的能力，并以突变改造前的人源化抗体A33-H5-L1、A48-H2-L2作为对照，其中A33-H5-L1-HC、A48-H2-L2-HC加入细胞中的终浓度分别为5、1.667、0.556、0.185、0.0617、0.0206、0.0069、0.0023nM，A33-H5-L1、A48-H2-L2加入细胞中的终浓度分别为100、20、4、0.8、0.16、0.032、0.0064、0.0013nM。
图5示出了突变改造后人源化抗体的ADCC效应结果，可以看出，经过突变改造的A33-H5-L1-HC、A48-H2-L2-HC诱导ADCC效应的活性相比突变改造前显著增强。
将本申请的序列列于下表10中。
表10
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为了描述和公开的目的，以引用的方式将所有的专利、专利申请和其它出版物在此明确地并入本申请。这些出版物仅因为它们的公开早于本申请的申请日而提供。所有关于这些文件的日期的声明或这些文件的内容的表述是基于申请者可得的信息，并且不构成任何关于这些文件的日期或这些文件的内容的正确性的承认。而且，在任何国家，在本中对这些出版物的任何引用并不构成关于该出版物成为本领域的公知常识的一部分的认可。
本领域技术人员将认识到，本申请的范围并不限于上文描述的各种具体实施方式和实施例，而是能够在不脱离本申请的精神的情况下，进行各种修改、替换、或重新组合，这都落入了本申请的保护范围内。
Claims (15)
1.一种抗TREM2抗体或其抗原结合片段，包含：
(a)包含下述互补决定区的重链可变区:
HCDR1，其包含SEQ ID NO：1、7、12、16或42所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：1、7、12、16或42所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
HCDR2，其包含SEQ ID NO：2、8、13、17、22、31、38或43所示的氨基酸序列，或与SEQ IDNO：2、8、13、17、22、31、38或43所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
HCDR3，其包含SEQ ID NO：3、9、14、18、23或44所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：3、9、14、18、23或44所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；和/或
(b)包含下述互补决定区的轻链可变区:
LCDR1，其包含SEQ ID NO：4、10、19、24、27、33、36、39、45、48、51或54所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：4、10、19、24、27、33、36、39、45、48、51或54所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
LCDR2，其包含SEQ ID NO：5、11、20、25、28、34、37、40、46、49或52所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：5、11、20、25、28、34、37、40、46、49或52所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
LCDR3，其包含SEQ ID NO：6、15、21、26、29、30、32、35、41、47、50或53所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO：6、15、21、26、29、30、32、35、41、47、50或53所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段，包含：
(1)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和6所示的氨基酸序列；
(2)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：10、11和6所示的氨基酸序列；
(3)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：12、13和14所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：10、11和15所示的氨基酸序列；
(4)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：16、17和18所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：19、20和21所示的氨基酸序列；
(5)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列；
(6)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、28和29所示的氨基酸序列；
(7)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和30所示的氨基酸序列；
(8)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：24、25和26所示的氨基酸序列；
(9)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQID NOs：7、31和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：4、5和32所示的氨基酸序列；
(10)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、22和23所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：33、34和35所示的氨基酸序列；
(11)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：36、37和30所示的氨基酸序列；
(12)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：39、40和41所示的氨基酸序列；
(13)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：42、43和44所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ IDNOs：45、46和47所示的氨基酸序列；
(14)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：48、49和29所示的氨基酸序列；
(15)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、5和26所示的氨基酸序列；
(16)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：7、8和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：27、28和50所示的氨基酸序列；
(17)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、38和9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：51、5和26所示的氨基酸序列；
(18)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：36、52和53所示的氨基酸序列；或
(19)HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有SEQ ID NOs：1、2和3所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有SEQ ID NOs：54、5和32所示的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段，包含：
重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NOs：55、58、59或61所示的氨基酸序列或与SEQ ID NOs：55、58、59或61所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；和/或
轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NOs：56、57、60或62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NOs：56、57、60或62所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段，包含：
(1)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：56所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(2)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：55所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(3)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：58所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：58所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：57所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(4)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：60所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(5)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：61所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：61所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；或
(6)重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：59所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：62所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体为鼠源抗体、猴源抗体、兔源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、全人源抗体；所述抗体优选为人源化抗体；和/或
所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段选自单克隆抗体、多克隆抗体、中和抗体、拮抗性抗体、无海藻糖基化抗体、单特异性抗体、多特异性抗体、纳米抗体、Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段、Fd片段、Fv片段、dAb片段、分离的CDR区和scFv中至少一种；所述抗TREM2抗体优选为单克隆抗体或多特异性抗体，优选地，所述多特异性抗体为双特异性抗体、三特异性抗体或四特异性抗体；或者优选地所述多特异性抗体还包含至少一种具有针对第二靶标的第二结合特异性的第二抗体。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段，进一步包含重链恒定区和/或轻链恒定区；
优选地，所述重链恒定区为IgG、IgA、IgM、IgE或IgD的重链恒定区或其变体；所述重链恒定区优选为IgG的重链恒定区或其变体；所述重链恒定区更优选为人IgG1的重链恒定区或其变体；
优选地，轻链恒定区为人κ链或λ链的恒定区或其变体；
优选地，所述重链恒定区包含如SEQ ID NO：75或76所示的氨基酸序列；和/或所述轻链恒定区包含如SEQ ID NO：77所示的氨基酸序列。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段，包含：
重链，所述重链包含SEQ ID NO：67、69、72、63、66或71所示的氨基酸序列或与SEQ IDNO：67、69、72、63、66或71所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或
轻链，所述轻链包含SEQ ID NO：68、70、64或65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68、70、64或65所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
优选地，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段包含：
(1)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(2)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(3)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：69所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：69所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(4)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：70所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(5)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(6)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
(7)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：66所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：66所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：65所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；或者
(8)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；
8.根据权利要求1-7中任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段，包含：
(1)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：67所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(2)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：63所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
(3)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：72所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：68所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；或者
(4)重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：71所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；所述轻链包含SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO：64所示的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗TREM2抗体或其抗原结合片段具有以下一个或多个特性：
(1)能够结合至人TREM2；
(2)能够结合至鼠TREM2；
(3)能够结合至食蟹猴TREM2；
(4)与一种或多种TREM2配体竞争结合TREM2
(5)抑制和/或阻断TREM2与配体的结合；
(6)抑制和/或阻断由TREM2结合配体介导的细胞内信号传导；
(7)诱导细胞因子或趋化因子分泌；
(8)具有抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性、补体依赖性细胞毒性(CDC)活性和抗体介导的吞噬作用(ADCP)活性中的至少一种；
(9)增强免疫应答；
(10)增强的ADCC活性；
(11)与人TREM2结合的KD值＜5E-08M、＜1E-09M、＜1E-10M、＜5E-10M、＜1E-11M或＜1E-12M。
10.一种核酸分子，所述核酸分子编码权利要求1-9中任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段。
11.一种重组载体，包含权利要求10所述的核酸分子。
12.一种宿主细胞，包含权利要求10所述的核酸分子或权利要求11所述的重组载体。
13.一种制备抗TREM2抗体或其抗原结合片段的方法，包括培养权利要求12所述的宿主细胞。
14.用于诊断、预防和/或治疗TREM2相关的疾病或病症、或者调节受试者的免疫应答的权利要求1-9任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段、权利要求10所述的核酸分子、权利要求11所述的重组载体、权利要求12所述的宿主细胞；
优选地，所述疾病为癌症、脂质相关疾病或病症、或者纤维化疾病或病症；
优选地，所述调节受试者的免疫应答为增加受试者的抗肿瘤免疫应答和/或诱导受试者的记忆免疫应答。
15.一种用于检测TREM2的试剂盒，其包含权利要求1-9任一项所述的抗TREM2抗体或其抗原结合片段、权利要求10所述的核酸分子。
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2023
- 2023-09-26 CN CN202380011795.3A patent/CN117561278A/zh active Pending
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