CN117460536A - 多肽制剂 - Google Patents

Abstract

本公开尤其提供了用于口服施用多肽的方法和组合物。许多多肽通常通过静脉内或皮下注射以液体溶液施用。本公开提供了包括用于口服递送的多肽制剂的方法和组合物，所述多肽制剂包括核心和药学上可接受的胶囊，其中所述核心包括无定形多肽组合物或结晶多肽组合物和包含维生素E剂的药学上可接受的载体。

Description

多肽制剂

背景技术

多肽治疗剂在医学中起着重要作用。许多当前的治疗剂包括多肽，例如酶和抗体。用于多肽治疗剂的典型施用途是静脉内或皮下注射。治疗剂的注射与众所知周的缺点相关。多年来，研究者一直在寻找用于施用多肽治疗剂的替代组合物和方法。

发明内容

本公开尤其提供了用于施用(例如口服施用)多肽的方法和组合物。许多多肽通常被配制为通过静脉内或皮下注射施用的液体溶液。本公开尤其提供了用于口服递送的囊封多肽制剂和悬浮液，其包括无定形多肽组合物或结晶多肽组合物(例如包括无定形多肽或结晶多肽的粉末形式)和药学上可接受的载体(包括维生素E剂)。本公开包括以下令人惊奇的发现：包括多肽和维生素E的本文所公开制剂的口服递送成功地将多肽递送到血流。不希望受限于任何特定的科学理论，本公开还包括以下令人惊奇的发现：在包括维生素E剂的如本文所公开制剂中经口施用的多肽有效地递送到血流、淋巴系统和胸导管。在多个实施方案中，在包括维生素E剂的如本文所公开制剂中经口施用的多肽经由淋巴系统、例如至少部分地经由胸导管有效地递送到血流。本公开包括认识到，包括多肽和维生素E的本文所提供的制剂提供了具有广泛效用和将多肽递送到血流的普遍能力的平台。因此，本领域的技术人员根据本公开(包括本发明的实施例)将明了，本文所提供的制剂是有利且有用的而无需详细说明其中所包括的多肽。另外，本公开展示了本文所公开制剂的各种口服递送的出人意料地有利的特征，包括改良的药代动力学性质(例如递送到血流中的速率)和/或延长的半衰期。

在至少一个方面，本公开包括用于口服递送的多肽制剂，所述多肽制剂包括(i)结晶多肽组合物或无定形多肽组合物，和(ii)包括维生素E剂的药学上可接受的载体，任选地其中(i)多肽制剂是包括核心和药学上可接受的胶囊的囊封多肽制剂，其中核心包括结晶多肽组合物或无定形多肽组合物和药学上可接受的载体，或(ii)多肽制剂是悬浮制剂。

在至少一个方面，本公开包括将多肽递送到受试者血流的方法，所述方法包括向受试者经口施用多肽制剂，所述多肽制剂包括(i)结晶多肽组合物或无定形多肽组合物，和(ii)包括维生素E剂的药学上可接受的载体，任选地其中(i)多肽制剂是包括核心和药学上可接受的胶囊的囊封多肽制剂，其中核心包括结晶多肽组合物或无定形多肽组合物和药学上可接受的载体，或(ii)多肽制剂是悬浮制剂。在某些实施方案中，多肽经由淋巴系统递送到血流，任选地其中多肽经由胸导管递送到血流。

在至少一个方面，本公开包括将多肽递送到受试者胸导管或淋巴的方法，所述方法包括向受试者经口施用多肽制剂，所述多肽制剂包括(i)结晶多肽组合物或无定形多肽组合物，和(ii)包括维生素E剂的药学上可接受的载体，任选地其中(i)多肽制剂是包括核心和药学上可接受的胶囊的囊封多肽制剂，其中核心包括结晶多肽组合物或无定形多肽组合物和药学上可接受的载体，或(ii)多肽制剂是悬浮制剂。

在至少一个方面，本公开包括制造用于口服递送的囊封多肽制剂的方法，所述方法包括将核心囊封于胶囊内，所述核心包括(i)无定形多肽组合物或结晶多肽组合物，和(ii)包括维生素E剂的药学上可接受的载体。在至少一个方面，本公开包括制造用于口服递送的多肽悬浮液的方法，所述方法包括将(i)结晶多肽组合物或无定形多肽组合物悬浮于(ii)包括维生素E剂的药学上可接受的载体中。

在某些实施方案中，多肽包括：(i)治疗性多肽；(ii)抗体剂或其片段；(iii)单克隆抗体或其片段；(iv)融合多肽；(v)免疫球蛋白；(vi)酶；或(vii)(i)-(vi)中任一者的类似物和/或修饰形式，任选地其中多肽通过以下中的一者或多者修饰：聚乙二醇化、乙酰化、酰胺化、脂化、甲基化、磷酸化、糖基化、糖化、硫酸化、甘露糖化、亚硝基化、酰化、棕榈酰化、异戊二烯化、脂肪酸或它们的组合。在某些实施方案中，多肽选自抗体(例如抗HER2抗体，例如曲妥珠单抗(trastuzumab))、GLP-1受体激动剂、人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)或其类似物(例如合成类似物，例如利拉鲁肽(liraglutide))、甲状旁腺激素(例如重组人甲状旁腺激素类似物，例如特立帕肽(teriparatide))、胰岛素(例如)、利妥昔单抗(rituximab)、贝伐珠单抗(bevacizumab)、西妥昔单抗(cetuximab)、依那西普(etanercept)、英夫利昔单抗(infliximab)、阿加糖酶β(agalsidase beta)、阿加糖酶α、伊米苷酶(imiglucerase)、阿利苷酶α(aliglucerase alfa)、维拉苷酶α(velaglucerasealfa)、阿糖脑苷酶(alglucerase)、西贝利帕酶α(sebelipase alpha)、拉罗尼酶(laronidase)、艾杜硫酶(idursulfase)、艾罗硫酶α(elosulfase alpha)、加硫酶(galsulfase)、胰脂肪酶、沙丙蝶呤(sapropterin)、艾利司他(eliglustat)、加硫酶、艾司福酶α(asfotase alfa)、培格力酶(pegvaliase)、艾拉培加酶(elapegademase)、沙可罗酶(sacrosidase))、因子I、因子II、因子III、因子IV、因子V、因子VI、因子VII、因子VIII、因子IX、因子X、因子XI、因子XII、因子XIII、冯·维勒布兰德因子(von Willebrand factor)、依那西普、阿柏西普(aflibercept)、列洛西普(rilonacept)、阿法西普(alefacept)、罗米司亭(romiplostim)、阿巴西普(abatacept)/贝拉西普(belatacept)和/或地尼白介素(denileukin-diftitox)或它们的类似物或衍生物，任选地其中多肽是天然、合成或工程化的。在某些实施方案中，多肽的分子量介于约50Da与25kDa之间，任选地其中分子量介于约50Da与约1kDa之间、介于约50Da与约2kDa之间、介于约50Da与约3kDa之间、介于约50Da与约4kDa之间、介于约50Da与约5kDa之间、介于约50Da与约10kDa之间、介于约50Da与约15kDa之间、或介于约50Da与约20kDa之间。在某些实施方案中，多肽的分子量介于约25kDa与约1,000kDa之间，任选地其中分子量介于约25kDa与约500kDa之间、介于约100kDa与约500kDa之间、介于约120kDa与约250kDa之间、或介于约150kDa与约300kDa之间。在某些实施方案中，多肽制剂包括约1μg至约2,000mg的多肽，任选地其中多肽制剂包括约1μg至约1,000mg、约1μg至约500mg、约1μg至约400mg、约1μg至约300mg、约1μg至约200mg、约1μg至约100mg、约1μg至约50mg、约1μg至约25mg、约1μg至约20mg、约1μg至约15mg、约1μg至约10mg、约1μg至约5mg、约1μg至约1mg、约1μg至约500μg、约1μg至约250μg、约1μg至约200μg、约1μg至约150μg、约1μg至约100μg、约1μg至约50μg、约1mg至约1,000mg、约1mg至约500mg、约1mg至约400mg、约1mg至约300mg、约1mg至约200mg、约1mg至约100mg、约1mg至约50mg、约1mg至约25mg的多肽。

在某些实施方案中，多肽制剂包括约1mg至约2,000mg的维生素E剂，任选地其中多肽制剂包括约1mg至约1,000mg、约1mg至约500mg、约1mg至约400mg、约1mg至约300mg、约1mg至约200mg、约1mg至约100mg、约1mg至约50mg、或约1mg至约25mg的维生素E剂。在某些实施方案中，多肽制剂包括相对于多肽制剂中多肽的量摩尔过量或重量过量的维生素E剂，任选地其中过量是至少1.1倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍、500倍或1,000倍的倍数过量。

在某些实施方案中，结晶多肽组合物包括平均粒度小于25微米、例如小于20微米、15微米、10微米、5微米、4微米、3微米、2微米、1微米或0.5微米的多肽晶体，任选地其中多肽晶体的平均粒度介于0.5微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间，或其中多肽晶体的平均粒度介于1微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间。在某些实施方案中，无定形多肽组合物包括平均粒度小于25微米、例如小于20微米、15微米、10微米、5微米、4微米、3微米、2微米、1微米或0.5微米的多肽粒子，任选地其中多肽粒子的平均粒度介于0.5微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间，或其中多肽粒子的平均粒度介于1微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间。

在某些实施方案中，多肽组合物包括冻干多肽。在某些实施方案中，多肽组合物包括多肽微晶体。在某些实施方案中，多肽组合物包括有包括结晶多肽的粉末。

在某些实施方案中，核心是粘性溶液。在某些实施方案中，胶囊是硬壳胶囊或软壳胶囊，任选地其中胶囊是明胶胶囊或HPMC胶囊。在某些实施方案中，胶囊被配制用于递送到肠管，任选地其中胶囊被配制用于递送到胃和/或肠。在某些实施方案中，胶囊包括肠溶包衣。

在某些实施方案中，核心还包括选自由以下组成的组的一种或多种赋形剂或添加剂：聚集减少剂、糖或糖醇、多糖、稳定剂、透明质酸酶、缓冲剂、防腐剂、载体、抗氧化剂、螯合剂、天然或合成聚合物、低温保护剂、冻干保护剂、表面活性剂、增积剂、酸化剂、减轻注射部位不适的成分、消泡剂、碱化剂、媒介物、聚集抑制剂、增溶剂、张力调节剂和稳定剂以及它们的组合。在某些实施方案中，一种或多种赋形剂或添加剂个别地或累积地以介于0.1mM与约1,000mM之间、介于约0.1mM与约500mM之间、介于约0.1mM与约200mM之间、或介于约0.1mM与约100mM之间的浓度存在。在某些实施方案中，(i)聚集减少剂选自由以下组成的组：烟酸、柠檬酸咖啡因、烟酸咖啡因、咖啡因、辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷和正十二烷基-β-D-麦芽糖苷和任选地与以下中的一者或多者的组合：精氨酸、色氨酸、组氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、β-丙氨酸、谷氨酸钾、精氨酸乙酯、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、DTPA(二亚乙基三胺五乙酸)、EGTA(氨基聚羧酸)、EDTA(乙二胺四乙酸)、羟丙基β(HP-β)环糊精、羟丙基γ(HP-γ)环糊精、磺丁基醚(SBE)环糊精、TMAO(三甲基胺N-氧化物)、海藻糖、乙二醇、甜菜碱、木糖醇、山梨醇、6-(N-(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑-4-基)氨基)己酸(NBD-X)、乙酰磷酸甲酯(MAP)、柠康酐、焦磷酸盐、柠檬酸盐和它们的组合；(ii)张力调节剂选自由以下组成的组：精氨酸、半胱氨酸、组氨酸、甘氨酸、氯化钠、氯化钾、柠檬酸钠、糖(例如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、丙三醇或甘露醇)和它们的组合；(iii)抗氧化剂选自由以下组成的组：甘氨酸、赖氨酸、EDTA、DTPA、山梨醇、甘露醇、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、次磷酸、一硫代甘油、没食子酸丙酯、亚硫酸氢钠、甲醛次硫酸氢钠、偏二亚硫酸钠、硫代硫酸钠、二氧化硫、生育酚和它们的组合；或(iv)冻干保护剂选自由以下组成的组：蔗糖、乳糖、海藻糖、葡聚糖、赤藻糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨醇、麦芽糖、乳酮糖、麦芽酮糖、葡萄糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、异麦芽酮糖和甘露醇；氨基酸，例如精氨酸或组氨酸或脯氨酸或甘氨酸；易溶盐，例如硫酸镁；丙二醇、甘油、聚(乙二醇)或聚(丙二醇)；明胶、糊精、改性淀粉、羧甲基纤维素和它们的组合。

定义

一(A)、一(An)、所述(The)：如本文所用的“一(a)”、“一(an)”和“所述(the)”是指一个或一个以上(即至少一个)的冠词的文法宾语。举例来说，“元素”公开恰好一种元素的实施方案和包括一种以上元素的实施方案。

约：如本文所用的术语“约”在用于提及值时是指在上下文中与所提及值相似的值。一般来说，熟悉上下文的本领域的技术人员将了解该上下文中“约”所涵盖的相关变化程度。举例来说，在一些实施方案中，术语“约”可涵盖在所提及值的25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更小内的一系列值。

施用：如本文所用的术语“施用”通常是指向受试者或系统施用组合物以达成剂的递送，该剂系组合物或包括在组合物中。

剂：如本文所用的术语“剂”可指任何化学实体，包括(但不限于)以下中的任一者或多者：原子、分子、化合物、氨基酸、多肽、核苷酸、核酸、多肽复合物、液体、溶液、糖、多糖、脂质或它们的组合或复合物。

氨基酸：在其最广泛的含义中，如本文所用，是指可例如经由形成一个或多个肽键纳入多肽链中的任何化合物和/或物质。在一些实施方案中，氨基酸具有一般结构H₂N-C(H)(R)-COOH。在一些实施方案中，氨基酸是天然氨基酸。在一些实施方案中，氨基酸是非天然氨基酸；在一些实施方案中，氨基酸是D-氨基酸；在一些实施方案中，氨基酸是L-氨基酸。“标准氨基酸”是指在天然肽中通常发现的20种标准L-氨基酸中的任一者。“非标准氨基酸”是指除标准氨基酸外的任一氨基酸，无论其以合成方式制备还是从天然来源获得。在一些实施方案中，与典型或规范氨基酸结构相比，氨基酸(包括多肽中的羧基末端和/或氨基末端氨基酸)可含有结构修饰。举例来说，在一些实施方案中，与一般结构相比，氨基酸可通过甲基化、酰胺化、乙酰化、聚乙二醇化、糖基化、磷酸化和/或取代(例如氨基、羧酸基、一个或多个质子和/或羟基)来修饰。在一些实施方案中，与含有原本相同的未修饰的氨基酸的多肽相比，这类修饰可例如改变含有修饰氨基酸的多肽的循环半衰期。在一些实施方案中，与含有原本相同的未修饰的氨基酸的多肽相比，这类修饰不会显著改变含有修饰氨基酸的多肽的相关活性。根据上下文将清楚，在一些实施方案中，术语“氨基酸”可用于指游离氨基酸；在一些实施方案中，其可用于指多肽的氨基酸残基。

无定形：如本文所用的术语“无定形”通常是指多肽的非结晶固体形式，有时称为“无定形固体”或“无定形沉淀物”，其通常不具或基本上不具结晶固态的分子晶格结构特征。

类似物：如本文所用的术语“类似物”是指与参考物质共用一个或多个特定结构特征、元素、组分或部分的物质。通常，“类似物”显示与参考物质的显著结构相似性，例如共用核心或一致结构，但也以某些离散方式有所不同。在一些实施方案中，类似物是可以从参考物质(例如通过参考物质的化学操纵)生成的物质。在一些实施方案中，类似物是可以经由实施基本上与生成参考物质的合成过程(例如与其共用多个步骤)相似的合成过程生成的物质。在一些实施方案中，类似物经由或可经由实施与用于生成参考物质的合成过程不同的合成过程来生成。

抗体：如本文所用的术语“抗体”是指包括足以赋予特定抗原特异性结合的一个或多个规范免疫球蛋白序列元件(例如重链可变结构域、轻链可变结构域和/或一个或多个CDR)的多肽。因此，术语抗体包括(但不限于)人类抗体、非人类抗体、合成和/或工程化抗体、其片段和包括它们的剂。抗体可为天然免疫球蛋白(例如通过生物体与抗原反应生成)。合成、非天然或工程化抗体可通过重组工程化、化学合成或本领域的技术人员已知的其它人工系统或方法来产生。

如本领域中所众所知周，典型的人免疫球蛋白是约150kD四聚体剂，其包括彼此缔合形成通常称为“Y形”结构的结构的两条相同的重链(H)多肽(各自约50kD)和两条相同的轻链(L)多肽(各自约25kD)。通常，每一重链包括重链可变结构域(VH)和重链恒定结构域(CH)。重链恒定结构域包括三个CH结构域：CH1、CH2和CH3。短区(称为“转换”)连接重链可变区和恒定区。“铰链”将CH2和CH3结构域连接到免疫球蛋白的其余部分。每一轻链包括轻链可变结构域(VL)和轻链恒定结构域(CL)，其通过另一“转换”彼此分开。每一可变结构域含有三个超变环(称为“互补决定区”(CDR1、CDR2和CDR3))和四个在某种程度上不变的“框架”区(FR1、FR2、FR3和FR4)。在每一VH和VL中，三个CDR和四个FR从氨基末端到羧基末端以下列顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。重链和/或轻链的可变区通常理解为提供可与抗原相互作用的结合部分。恒定结构域可调介抗体与各种免疫系统细胞(例如效应细胞和/或调介细胞毒性的细胞)、受体和补体系统的元件的结合。重链和轻链通过单个二硫键彼此连接，且两个其它二硫键使重链铰链区彼此连接，以使得二聚体彼此连接并形成四聚体。当天然免疫球蛋白折叠时，FR区形成为结构域提供结构框架的β折叠，且来自重链和轻链的CDR环区在三维空间中聚集在一起，以使其产生位于Y结构尖端的单一超变抗原结合位点。

在一些实施方案中，抗体是多克隆抗体、单克隆抗体、单特异性抗体或多特异性抗体(包括双特异性抗体)。在一些实施方案中，抗体包括至少一个轻链单体或二聚体、至少一个重链单体或二聚体、至少一个重链-轻链二聚体、或包括两个重链单体和两个轻链单体的四聚体。另外，术语“抗体”可包括(除非另有说明或上下文明确指出)利用抗体结构和/或功能特征的任何本领域中已知的构建体或格式，包括(但不限于)胞内抗体、结构域抗体、抗体模拟物、Fab片段、Fab’片段、F(ab’)2片段、Fd’片段、Fd片段、分离的CDR或其集合、单链抗体、单链Fv(scFv)、二硫化物连接的Fv(sdFv)、多肽-Fc融合物、单结构域抗体(例如鲨鱼单结构域抗体，例如IgNAR或其片段)、骆驼样抗体、骆驼化抗体、遮蔽的抗体(例如/>)、亲和体、抗个体基因型(抗Id)抗体(包括例如抗抗Id抗体)、小模组免疫药剂(“SMIPsTM”)、单链或串联双价抗体/>VHH、/> 微小抗体、/>锚蛋白重复蛋白或/> DART、TCR样抗体、 微蛋白、和/>CAR、工程化TCR和上述任一者的抗原结合片段。

在多个实施方案中，抗体包括本领域的技术人员识别为互补决定区(CDR)或可变结构域的一个或多个结构元件。在一些实施方案中，抗体可为共价修饰(“结合”)的抗体(例如包括多肽的抗体，该多肽包括足以赋予特定抗原特异性结合的一个或多个规范免疫球蛋白序列元件，其中多肽与治疗剂、可检测部分、另一多肽、聚糖或聚乙二醇分子中的一者或多者共价连接)。在一些实施方案中，抗体序列元件是人源化、灵长类化、嵌合的等，如本领域中已知。

包括重链恒定结构域的抗体可为(但不限于)任一已知类别的抗体，包括(但不限于)基于重链恒定结构域氨基酸序列，IgA、分泌性IgA、IgG、IgE和IgM(例如阿尔法(α)、德尔塔(δ)、埃普西隆(ε)、伽马(γ)和缪(μ))。IgG子类也是本领域的技术人员众所知周的且包括(但不限于)人IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。“同型”是指由重链恒定区基因编码的Ab类别或子类(例如IgM或IgG1)。如本文所用，基于轻链恒定结构域的氨基酸序列，“轻链”可具有不同类型，例如卡帕(κ)或拉姆达(λ)。在一些实施方案中，抗体具有小鼠、兔、灵长类动物或人免疫球蛋白所特有的恒定区序列。天然产生的免疫球蛋白是糖基化的，通常在CH2结构域上。如本领域中已知，Fc受体的Fc区的亲和力和/或其它结合属性可经由糖基化或其它修饰来调节。在一些实施方案中，抗体可能缺少其在天然产生时将具有的共价修饰(例如聚糖的连接)。在一些实施方案中，根据本发明产生和/或使用的抗体包括糖基化Fc结构域，包括具有修饰或工程化的这类糖基化的Fc结构域。

抗体片段：如本文所用的“抗体片段”是指如本文所述的抗体或抗体剂的一部分，且通常是指包括抗原结合部分或其可变区的部分。抗体片段可通过任何方式来产生。举例来说，在一些实施方案中，抗体片段可通过片段化完整抗体或抗体剂以酶方式或化学方式产生。替代地，在一些实施方案中，抗体片段可重组产生(即，通过表达工程化的核酸序列)。在一些实施方案中，抗体片段可完全或部分合成产生。在一些实施方案中，抗体片段(具体来说，抗原结合抗体片段)的长度可为至少约50个、60个、70个、80个、90个、100个、110个、120个、130个、140个、150个、160个、170个、180个、190个氨基酸或更长，在一些实施方案中为至少约200个氨基酸。

与……相关：当该术语用于本文中时，如果一个事件或实体的存在、水平和/或形式与另一个事件或实体的存在、水平和/或形式相关联，则两个事件或实体彼此“相关”。举例来说，如果特定实体(例如多肽、遗传特征、代谢物、微生物等)的存在、水平和/或形式与疾病、病症或疾患的发生率和/或易感率(例如在相关群体中)相关联，则认为该特定实体与特定疾病、病症或疾患相关。在一些实施方案中，如果两个或更多个实体直接或间接相互作用，以使得它们在物理上彼此靠近和/或保持靠近，则该两个或更多个实体在物理上彼此“相关”。在一些实施方案中，两个或更多个在物理上彼此相关的实体彼此共价连接；在一些实施方案中，两个或更多个在物理上彼此相关的实体彼此不共价连接，但例如借助氢键、范德华(van der Waals)相互作用、疏水相互作用、磁性或它们的组合非共价相关。

介于……之间或从……：如本文所用的术语“介于……之间”是指落在所指示上边界(或“界线”)与下边界之间、或第一边界与第二边界之间(包括所述边界)的内容。类似地，术语“从……”在用于值范围的上下文中时指示，该范围包括落在所指示上边界与下边界之间、或第一边界与第二边界之间(包括所述边界)的内容。

生物利用度：如本文所用的术语“生物利用度”可指施用于体内受试者的物质(例如多肽，例如抗体或抗体片段)变得可用于该物质所靶向的组织(例如血流和/或血浆)的程度。生物利用度可指已施用于体内受试者的物质递送到受试者血液的程度。生物利用度可指物质在受试者中发挥功能的能力。生物利用度可以多种方式测量，例如以血流或血浆中物质的浓度测量。在一些实施方案中，生物利用度可例如通过比较血浆浓度绘图中随时间变化的“曲线下面积”(AUC)(从时间0至血浆浓度返回至基线水平的时间的血浆浓度曲线下面积)来评价。AUC可例如使用线性梯形法则来计算。“AUC0-t”是指时间0至时间t后(例如至达到基线的时间)的血浆浓度曲线下面积。

癌症：如本文所用的术语“癌症”是指其中细胞展现相对异常、不受控和/或自主生长，使得其展示异常升高的增殖速率和/或特征在于细胞增殖显著失控的异常生长表型的疾病、病症或疾患。在一些实施方案中，癌症可包括一种或多种肿瘤。在一些实施方案中，癌症可为或包括癌前(例如良性)、恶性、转移前、转移和/或非转移细胞。在一些实施方案中，癌症可为或包括实体瘤。在一些实施方案中，癌症可为或包括血液肿瘤。

工程化：如本文所用的术语“工程化”是指由人手操纵的方面。举例来说，当不以自然界中的顺序连接在一起的两条或更多条序列由人手操纵以在工程化多核苷酸中彼此连接时，多核苷酸视为“工程化”。本领域的技术人员应了解，“工程化”的核酸或氨基酸序列可为重组核酸或氨基酸序列。在一些实施方案中，工程化的多核苷酸包括发现在自然界中与第一序列可操作连接但发现在自然界中不与第二序列可操作连接的编码序列和/或调控序列，其处于工程化的多核苷酸中且通过人手与第二序列可操作连接。在一些实施方案中，如果细胞或生物体已经被操纵以使其遗传信息发生变化(例如，已例如通过转化、交配、体细胞杂交、转染、转导或其它机制引入先前不存在的新遗传材料，或例如通过取代、缺失或交配改变或去除先前存在的遗传材料)，则其视为“工程化”。如通常实践和本领域的技术人员所理解，即使直接操纵是针对先前实体，工程化多核苷酸或细胞的子代或拷贝，无论完美还是不完美，通常仍称为“工程化”。

赋形剂：如本文所用的“赋形剂”是指可纳入药物组合物中例如以提供或有助于期望一致性或稳定效应的非治疗剂。在一些实施方案中，适宜药物赋形剂可包括例如淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、水稻、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙烯、二醇、水、乙醇等。

“改良”、“增加”、“抑制”或“减少”：如本文所用的术语“改良”、“增加”、“抑制”和“减少”和其语法等效形式指示与参考的定性或定量差异。

药学上可接受：如本文所用的术语“药学上可接受”在应用于如本文所公开组合物的制剂的一种或多种或所有组分时意指，每一组分必须与组合物的其它成分相容且对其接受者无害。

药物组合物或制剂：如本文所用的术语“药物组合物”或“制剂”是指其中将治疗剂与一种或多种药学上可接受的载体配制在一起的组合物。

多肽：如本文所用的“多肽”是指两个或更多个氨基酸的任何聚合物链。在一些实施方案中，多肽具有在自然界中存在的氨基酸序列。在一些实施方案中，多肽具有不在自然界中存在的氨基酸序列。在一些实施方案中，多肽具有经由人手的动作设计和/或产生来工程化的氨基酸序列。在一些实施方案中，多肽可为或包括天然氨基酸、非天然氨基酸或二者。在一些实施方案中，多肽可为或包括仅天然氨基酸或仅非天然氨基酸。在一些实施方案中，多肽可包括D-氨基酸、L-氨基酸或二者。在一些实施方案中，多肽可仅包括L-氨基酸。在一些实施方案中，多肽可包括一个或多个侧基或其它修饰，例如一条或多条氨基酸侧链，例如在多肽的N末端、多肽的C末端、非末端氨基酸或其任一组合处。在一些实施方案中，所述侧基或修饰可选自乙酰化、酰胺化、脂化、甲基化、磷酸化、糖基化、糖化、硫酸化、甘露糖化、亚硝基化、酰化、棕榈酰化、异戊二烯化、聚乙二醇化等，包括它们的组合。在一些实施方案中，多肽可为环状，和/或可包括环状部分。

在一些实施方案中，术语“多肽”可附加到参考多肽、活性或结构的名称以指示共享相关活性或结构的多肽的类别。对于该类别，本说明书提供和/或本领域的技术人员将意识到已知氨基酸序列和/或功能的类别内的例示性多肽。在一些实施方案中，多肽类别或家族的成员显示与该类别的参考多肽的显著序列同源性或同一性，与其共享常见序列基元(例如特征性序列元件)，和/或共享常见活性(在一些实施方案中以相当水平或在指定范围内)。举例来说，在一些实施方案中，成员多肽显示与参考多肽至少约30％-40％、且通常大于约50％、60％、70％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更大的总体序列同源性或同一性程度，和/或包括至少一个显示极高序列同一性、通常大于90％或甚至95％、96％、97％、98％或99％的区域(例如在一些实施方案中可为或包括特征性序列元件的保守区)。该保守区通常涵盖至少3-4个且在一些情况下高达20个或更多个氨基酸；在一些实施方案中，保守区涵盖至少2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个或更多个邻接氨基酸的至少一段。在一些实施方案中，相关多肽可为或包括母体多肽的片段。在一些实施方案中，有用的多肽可为或包括多个片段，所述片段中的每一者以相对于彼此不同于在所关注多肽中发现的空间排列(例如在母体中直接连接的片段可在所关注多肽中在空间上分开或反之亦然，和/或片段可以不同于母体的顺序存在于所关注多肽中)发现于同一母体多肽中，以使得所关注多肽是其母体多肽的衍生物。

参考：如本文所用的“参考”是指相对于其实施比较的标准或对照。举例来说，在一些实施方案中，将剂、样品、序列、受试者、动物或个体、或其群体、或代表其的量度或特征与参考、剂、样品、序列、受试者、动物或个体、或其群体、或代表其的量度或特征进行比较。在一些实施方案中，参考是所测量的值。在一些实施方案中，参考是已确立的标准或预期值。在一些实施方案中，参考是历史参考。参考可为定量或定性的。通常，如本领域的技术人员将理解，参考和与其比较的值代表可比较条件下的量度。本领域的技术人员应了解何时存在足够相似性以证明依赖性和/或比较。在一些实施方案中，适当参考可为剂、样品、序列、受试者、动物或个体、或其群体(在本领域的技术人员将认为可比较的条件下，例如用于评价一个或多个特定变量(例如存在或不存在剂或条件)的目的)、或代表其的量度或特征。

小分子：如本文所用的术语“小分子”意指低分子量有机和/或无机化合物。一般来说，“小分子”是大小小于约5千道尔顿(kD)的分子。在一些实施方案中，小分子小于约4kD、3kD、约2kD或约1kD。在一些实施方案中，小分子小于约800道尔顿(D)、约600D、约500D、约400D、约300D、约200D或约100D。在一些实施方案中，小分子小于约2,000g/mol、小于约1500g/mol、小于约1,000g/mol、小于约800g/mol或小于约500g/mol。在一些实施方案中，小分子不为聚合物。在一些实施方案中，小分子不包括聚合物部分。在一些实施方案中，小分子不为和/或不包括多肽。在一些实施方案中，小分子不为和/或不包括多核苷酸(例如不为寡核苷酸)。在一些实施方案中，小分子不为和/或不包括多糖；例如，在一些实施方案中，小分子不为糖蛋白、蛋白聚糖、糖脂等)。在一些实施方案中，小分子不为脂质。在一些实施方案中，小分子是调节剂(例如是抑制剂或活化剂)。在一些实施方案中，小分子为生物活性剂。在一些实施方案中，小分子是可检测的(例如包括至少一个可检测部分)。在一些实施方案中，小分子是治疗剂。

受试者：如本文所用的术语“受试者”是指生物体，通常哺乳动物(例如人、大鼠或小鼠)。在一些实施方案中，受试者患有疾病、病症或疾患。在一些实施方案中，受试者易患疾病、病症或疾患。在一些实施方案中，受试者展示疾病、病症或疾患的一个或多个症状或特征。在一些实施方案中，受试者未患疾病、病症或疾患。在一些实施方案中，受试者未展示疾病、病症或疾患的任何症状或特征。在一些实施方案中，受试者具有对疾病、病症或疾患的易感性或风险所特有的一个或多个特征。在一些实施方案中，受试者是已测试疾病、病症或疾患和/或已向其施用疗法的受试者。在一些情况下，人类受试者可互换地称为“患者”或“个体”。施用与治疗与受试者相关的疾病、病症或疾患相关的剂的受试者可称为需要剂的受试者，即称为有需要的受试者。

治疗剂：如本文所用的术语“治疗剂”是指在施用于受试者时发挥期望药理学效应的任一剂。在一些实施方案中，如果剂在适宜群体中展示统计学上显著的效应，则该剂视为治疗剂。在一些实施方案中，适当群体可为模型生物体的群体或人类群体。在一些实施方案中，适当群体可通过多个准则来定义，例如某一年龄组、性别、遗传背景、预先存在的临床疾患等。在一些实施方案中，治疗剂是可用于治疗疾病、病症或疾患的物质。在一些实施方案中，治疗剂是已经或需要由政府机构批准才可出售用于施用于人类的剂。在一些实施方案中，治疗剂是需要医学处方才能施用于人的剂。

治疗有效量：如本文所用的“治疗有效量”是指因施用其而产生期望效应的量。在一些实施方案中，该术语是指根据治疗给药方案在施用于患有或易患疾病、病症和/或疾患的群体时足以治疗疾病、病症和/或疾患的量。在一些实施方案中，治疗有效量是降低疾病、病症和/或疾患的一个或多个症状的发生率和/或严重程度、和/或延迟其发作的量。本领域的技术人员应了解，治疗有效量不一定在每个特定治疗受试者中达成成功治疗。相反，治疗有效量可为在施用需要该治疗的患者时在大量受试者中提供了特定期望药理学反应的量。在一些实施方案中，提及治疗有效量可为提及如在一种或多种特定组织(例如由疾病、病症或疾患侵袭的组织)或流体(例如血液、唾液、血清、汗液、泪液、尿液等)中测量的量。本领域的技术人员应了解，在一些实施方案中，特定剂或疗法的治疗有效量可以单一剂量配制和/或施用。在一些实施方案中，治疗有效剂可以多个剂量、例如作为给药方案的一部分配制和/或施用。

治疗：如本文所用的术语“治疗(treatment)”(亦为“治疗(treat)”或“治疗(treating)”)是指施用部分或完全缓和、改善、减轻、抑制特定疾病、病症或疾患的一个或多个症状、特征和/或病因、延迟其发作、降低其严重程度和/或降低其发生率、或出于达成任一这类结果的目的施用的疗法。在一些实施方案中，该治疗可针对未展现相关疾病、病症或疾患的征象的受试者和/或针对仅展现疾病、病症或疾患的早期征象的受试者。替代地或另外，该治疗可针对展现相关疾病、病症和/或疾患的一个或多个已确立征象的受试者。在一些实施方案中，治疗可针对已经被诊断为患有相关疾病、病症和/或疾患的受试者。在一些实施方案中，治疗可针对已知具有一个或多个易感因素的受试者，所述易感因素在统计学上与增加的患上相关疾病、病症或疾患的风险相关联。

附图说明

图1是显示干燥前(左图)和干燥后(右图)的曲妥珠单抗微粒的一组四幅影像。

图2是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的利拉鲁肽微粒的影像。

图3是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的利拉鲁肽微粒的影像。

图4是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的利拉鲁肽微粒的影像。

图5是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的利拉鲁肽微粒的影像。

图6是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的利拉鲁肽微粒的影像。

图7是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的利拉鲁肽微粒的影像。

图8是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的利拉鲁肽微粒的影像。

图9是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的利拉鲁肽微粒的影像。

图10是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的胰岛素微粒的影像。

图11是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的胰岛素微粒的影像。

图12是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的胰岛素微粒的影像。

图13是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的胰岛素微粒的影像。

图14是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的胰岛素微粒的影像。

图15是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的胰岛素微粒的影像。

图16是显示通过本领域的技术人员已知的典型结晶方法制造的胰岛素微粒的影像。

图17是显示皮下施用利拉鲁肽的标准护理制剂后或口服施用如本文所提供的制剂后，利拉鲁肽随时间的血浆浓度的图。

图18是显示皮下施用利拉鲁肽的标准护理制剂后或口服施用如本文所提供的制剂后，利拉鲁肽随时间的血浆浓度的一对图。

图19是显示皮下施用利拉鲁肽的标准护理制剂后或口服施用如本文所提供的制剂后，利拉鲁肽随时间的血浆浓度的一对图。

图20是显示皮下施用曲妥珠单抗的标准护理制剂后或口服施用如本文所提供的制剂后，曲妥珠单抗随时间的血浆浓度的图。

图21是显示皮下施用曲妥珠单抗的标准护理制剂后或口服施用如本文所提供的制剂后，曲妥珠单抗随时间的血浆浓度的图。

图22是显示皮下施用胰岛素的标准护理制剂后或口服施用如本文所提供的制剂后，胰岛素随时间的血浆浓度的图。

图23是显示皮下施用曲妥珠单抗的标准护理制剂后或口服施用包括维生素E、椰子油、鱼肝油或酥油的制剂后，曲妥珠单抗随时间的血浆浓度的图。

图24是显示向新西兰白兔(New Zealand White Rabbit)施用口服利拉鲁肽制剂后，利拉鲁肽的血浆浓度的图。

图25是显示向新西兰白兔施用静脉内利拉鲁肽制剂后，利拉鲁肽的血浆浓度的图。

图26是显示向新西兰白兔施用皮下利拉鲁肽制剂后，利拉鲁肽的血浆浓度的图。

具体实施方式

医药工业已付出了巨大努力将多肽治疗剂推向市场。临床试验已纳入数百种多肽来治疗100多种疾患。然而，多肽的临床使用已受到其成功递送的多种障碍的阻碍。生物利用度、稳定性和治疗功效尤其是开发用于多肽递送的制剂中所考虑的因素。许多多肽通过不经肠途径(例如皮下、肌内或静脉内注射)来施用。本公开包括以下认识：例如对于患者接受度、家庭使用和对于长期方案的依从性来说，口服施用通常将比注射多肽治疗剂更优选。这些优点尤其可使多肽产品的口服制剂的治疗和商业价值不同于和/或大于不经肠制剂的治疗和商业价值。

尽管为了达成多肽的口服递送付出了巨大努力，但不经肠递送仍然是多肽治疗剂的主要施用模式。尽管口服递送可能是施用小分子的标准，但口服递送多肽的困难是本领域的技术人员所认识到的问题。固有物理化学和生物性质(包括大分子大小、通过胃肠膜的渗透较差、归因于胃液低pH的较差稳定性和对蛋白水解酶敏感)尤其是使多肽的口服递送具有高度挑战性的因素。在多个试验中观察到，经口施用的多肽展示小于1％的生物利用度，而更高的水平，在一些情况下至少30％-50％的目标生物利用度对于治疗功效可能是优选的。改良多肽稳定性和效能的努力已纳入多肽的化学修饰，例如聚乙二醇化、高糖基化和甘露糖化，或使用胶质载体，包括微粒、纳米粒子、脂质体、碳纳米管和胶束。尽管付出这类努力，多肽的不经肠施用仍然作为规范存在。本公开提供了配制用于口服施用的多肽的长期困难的解决方案。

本公开的各种组合物可包括药学上可接受的胶囊内的核心。在多个实施方案中，核心包括无定形多肽组合物或结晶多肽组合物和包括维生素E剂的药学上可接受的载体。

维生素E

如本文所用的维生素E剂是指在施用于受试者时将维生素E活性部分递送到该受试者的化合物或实体。在一些实施方案中，维生素E剂以盐、共晶体、游离酸或碱、溶剂化物、酯、水合物、多晶型物或无水形式提供和/或使用。在一些实施方案中，维生素E剂以特定立体异构形式或以立体异构形式的混合物提供和/或使用。在一些实施方案中，维生素E剂是维生素E的前药，其中维生素E是用于治疗作用的预期代谢物。

维生素E剂(在本文中互换地称为维生素E)可以是或包括一种或多种维生素E母育酚，其选自一种或多种维生素E生育酚和/或一种或多种维生素E生育三烯酚。天然维生素E母育酚包括两个系列的化合物：具有饱和侧链的生育酚和具有不饱和侧链的生育三烯酚。生育酚和生育三烯酚具有相似的化学结构，其特征在于连接在6-色原醇环的2位的长类异戊二烯侧链。生育酚包括色原醇环和16-碳尾。生育三烯酚与生育酚的不同之处在于，其具有法呢基而非饱和类异戊二烯C16侧链。维生素E母育酚(例如生育酚和生育三烯酚)基于色原醇环的甲基化模式命名为α、β、γ或δ。β-和γ-分别在色原醇环的5位和8位或7位和8位被二甲基化。α-母育酚在色原醇环的5位、7位和8位被三甲基化，且δ-在色原醇环的8位被单甲基化。维生素E剂可包括α-母育酚、β-母育酚、γ-母育酚或δ-母育酚或它们的任何混合物。举例来说，维生素E生育酚可包括生育酚α、β、γ和δ以及其衍生物中任一者或多者。维生素E生育三烯酚可包括生育三烯酚α、β、γ和δ以及其衍生物中的任一者或多者。在所述维生素E母育酚中，α-生育酚和γ-生育酚在自然界中是最丰富的。某些市售维生素E补充物通常可包括α-生育酚。某些市售维生素E补充物通常可包括具有多种特定结构的维生素E母育酚的混合物。

维生素E剂可包括维生素E剂的所有立体异构(例如对映异构或非对映异构)形式以及所有几何异构或构象异构形式。举例来说，考虑将维生素E剂的每一立体中心的R和S构型作为本公开的一部分。因此，维生素E剂的单一立体化学异构物以及对映异构、非对映异构和几何异构(或构象)混合物在本公开的范围内。举例来说，维生素E剂可以是或包括维生素E生育酚或生育三烯酚的立体异构物。生育酚分子在C-2、C-4′和C-8′处具有至少三个立体中心，使得至少八种立体异构物成为可能。例如，维生素E剂可以是或包括选自以下的α-生育酚的立体异构物：RRR、RRS、RSS、SSS、RSR、SRS、SRR和SSR。在多个实施方案中，RRR立体异构物是天然的。在一些实施方案中，维生素E剂包括一种或多种立体异构物(例如一种或多种α-生育酚立体异构物，例如1种、2种、3种、4种、5种、6种、7种或8种立体异构物)的混合物。天然生育酚以RRR构型存在，而合成形式可包括八种不同的立体异构物且称为全外消旋-α-生育酚。生育三烯酚仅在C-2处具有立体中心且天然生育三烯酚仅呈2R,3’E,7’E构型。

维生素E剂包括维生素E母育酚的衍生物和/或类似物。维生素E剂可具有多种修饰，例如在维生素E母育酚的二氢苯并吡喃部分。维生素E母育酚的衍生物的实例包括2-取代的二氢苯并吡喃衍生物、5-取代的二氢苯并吡喃衍生物或6-取代的二氢苯并吡喃衍生物。维生素E母育酚可通过与剂(例如peg部分(聚乙二醇化)或酸(例如透明质酸))结合而衍生化。

维生素E剂可以是或包括维生素E母育酚的前药，例如维生素E母育酚的酯(例如乙酸酯、琥珀酸酯或烟酸酯)。在某些实施方案中，维生素E剂的酯使用本领域中已知的常规方法由维生素E剂的酚形式制备。生育酚酯(例如α-生育酚乙酸酯、生育酚琥珀酸酯、生育酚烟酸酯、生育酚亚油酸酯、α-生育酚磷酸酯等)可展示降低的氧化敏感性。生育酚酯可在肠管中去酯化(例如通过酯酶)且以游离生育酚吸收。维生素E剂可以是或包括非酯化维生素E母育酚。在多个实施方案中，游离和酯化维生素E母育酚理解为具有相当的生物利用度。

本公开包括例如由人体吸收的维生素E剂。本公开包括维生素E的液体和固体形式。维生素E的例示性固体形式可以是白色至棕白色颗粒粉末。维生素E的液体形式可不溶于水，可溶于醇，和/或可混溶(例如与醚、丙酮、植物油和/或氯仿)。维生素E的各种液体形式可以是澄清、黄色至棕红色和/或粘性油状物。本公开包括脂溶性维生素E剂。举例来说，在多个实施方案中，固体形式(例如α生育酚酸琥珀酸酯)不溶于水，但可溶于脂肪(例如植物油)，且在多个实施方案中可包被结晶多肽和/或多肽粒子。

包括维生素E剂的药学上可接受的载体可包括维生素E剂(例如脂溶性维生素E剂)和油。在多个实施方案中，除了载体外，维生素E还可以作为营养补充物起作用。在多个实施方案中，包括维生素E剂的药学上可接受的载体(例如包括天然存在或添加的维生素E剂的油)可包括维生素E剂和为植物源性油的油，任选地其中植物源性油选自小麦胚芽油、榛子油、芥花/菜籽油、葵花油、红花子油、杏仁油、葡萄籽油、葵花籽仁、杏仁、杏仁酱、小麦胚芽、芥花油、棕榈油、花生油、人造奶油、tub、榛子、玉米油、橄榄油、大豆油、松子、花生酱和花生。某些这类组合物中维生素E的例示性浓度提供于表1中。这些所提供的浓度仅具有例示性且在一些情况下反映了通常或天然存在的维生素E剂的量，而本公开包括，可修改油组合物中维生素E剂的量，例如通过添加维生素E以达成本文所公开的维生素E量或浓度，用于结晶或无定形多肽的悬浮液或囊封制剂。

表1：油和维生素E剂浓度

药学上可接受的载体

本公开的制剂可包括药学上可接受的载体，它是或包括维生素E剂。如本文所用的术语“药学上可接受的载体”是指促进剂(例如药剂)的配制、调节剂的生物利用度或促进剂从受试者的一个器官或部分运输到另一器官或部分的药学上可接受的材料、组合物或媒介物，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂或溶剂囊封材料。可用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素和其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂；油，例如花生油、棉籽油、初榨椰子油、杏仁油、小麦胚芽油、任一可食用油、红花子油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如丙三醇、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热源水；等渗盐水；林格氏溶液(Ringer’s solution)；乙醇；pH缓冲溶液；聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；和用于药物制剂中的其它无毒相容性物质。赋形剂可包括可纳入药物组合物中例如以提供或有助于期望一致性或稳定效应的非治疗剂。在一些实施方案中，适宜药物赋形剂可包括例如淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、水稻、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、可可脂、栓剂蜡、甘油、丙烯、二醇、水、乙醇等等。在多个实施方案中，本公开的多肽制剂(例如多肽制剂的囊封核心或悬浮液)还包括一种或多种药学上可接受的载体。在多个实施方案中，一种或多种药学上可接受的载体选自由以下组成的组：聚集减少剂、糖或糖醇、多糖、稳定剂、透明质酸酶、缓冲剂、防腐剂、载体、抗氧化剂、螯合剂、天然或合成聚合物、低温保护剂、冻干保护剂、表面活性剂、增积剂、酸化剂、减轻注射部位不适的成分、消泡剂、碱化剂、媒介物、聚集抑制剂、增溶剂、张力调节剂和稳定剂以及它们的组合。

在多个实施方案中，聚集减少剂可包括以下中的一者或多者：烟酸、柠檬酸咖啡因、烟酸咖啡因、咖啡因、辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷和正十二烷基-β-D-麦芽糖苷和任选地与以下中的一者或多者的组合：精氨酸、色氨酸、组氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、β-丙氨酸、谷氨酸钾、精氨酸乙酯、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、DTPA(二亚乙基三胺五乙酸)、EGTA(氨基聚羧酸)、EDTA(乙二胺四乙酸)、羟丙基β(HP-β)环糊精、羟丙基γ(HP-γ)环糊精、磺丁基醚(SBE)环糊精、TMAO(三甲基胺N-氧化物)、海藻糖、乙二醇、甜菜碱、木糖醇、山梨醇、6-(N-(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑-4-基)氨基)己酸(NBD-X)、乙酰磷酸甲酯(MAP)、柠康酐、焦磷酸盐、柠檬酸盐和它们的组合。

在多个实施方案中，张力调节剂可包括以下中的一者或多者：精氨酸、半胱氨酸、组氨酸、甘氨酸、氯化钠、氯化钾、柠檬酸钠、糖(例如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、丙三醇或甘露醇)和它们的组合。

在多个实施方案中，抗氧化剂可包括以下中的一者或多者：甘氨酸、赖氨酸、EDTA、DTPA、山梨醇、甘露醇、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、次磷酸、一硫代甘油、没食子酸丙酯、亚硫酸氢钠、甲醛次硫酸氢钠、偏二亚硫酸钠、硫代硫酸钠、二氧化硫、生育酚和它们的组合。

在多个实施方案中，冻干保护剂可包括以下中的一者或多者：蔗糖、乳糖、海藻糖、葡聚糖、赤藻糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨醇、麦芽糖、乳酮糖、麦芽酮糖、葡萄糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、异麦芽酮糖和甘露醇；氨基酸，例如精氨酸或组氨酸或脯氨酸或甘氨酸；易溶盐，例如硫酸镁；丙二醇、甘油、聚(乙二醇)或聚(丙二醇)；明胶、糊精、改性淀粉、羧甲基纤维素和它们的组合。

在多个实施方案中，药学上可接受的载体明确排除药物活性剂。在多个实施方案中，药学上可接受的载体明确排除一种或多种或所有多肽。

在其中用于口服递送的多肽制剂包括有包括无定形多肽组合物或结晶多肽组合物和包括维生素E剂的药学上可接受的载体的核心或悬浮液的多个实施方案中，核心、悬浮液或药学上可接受的载体的特征可在于以重量计、以摩尔比计或以体积计，维生素E剂的量为至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％。在多个实施方案中，核心、悬浮液或药学上可接受的载体的特征可在于以重量计、以摩尔比计或以体积计，维生素E剂的量介于10％与90％之间、介于20％与90％之间、介于30％与90％之间、介于40％与90％之间、介于50％与90％之间、介于60％与90％之间、介于70％与90％之间、介于80％与90％之间、介于10％与70％之间、介于20％与70％之间、介于30％与70％之间、介于40％与70％之间、介于50％与70％之间、介于60％与70％之间、介于10％与50％之间、介于20％与50％之间、介于30％与50％之间、或介于40％与50％之间。

结晶和无定形多肽

本公开包括口服制剂，其包括维生素E和多肽(例如存在于无定形多肽组合物或结晶多肽组合物中的多肽)。药剂可以多种形式存在，包括多晶型物、溶剂化物、水合物、盐、共晶体和无定形固体。

无定形多肽组合物可包括其中多肽分子无序或基本上无序的组合物。无定形多肽可缺少或基本上缺少原子位置的长程有序。在多个实施方案中，无定形多肽可比同一多肽的结晶形式更可溶。在某些实施方案中，无定形多肽是尚未结晶和/或尚未根据结晶方法处理的组合物。在某些实施方案中，无定形多肽组合物可包括短程有序、残余结晶度、多形状态和不同密度区域，这些皆不一定构成长程有序。在多个实施方案中，无定形多肽组合物可包括结晶多肽的一部分，例如以质量、体积或摩尔数计小于20％总多肽的结晶多肽的一部分(例如小于20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％的结晶多肽)。用于测定结晶度的技术包括XRD、DSC、溶液量热、水吸附、等温量热和热刺激电流(TSC)。在多个实施方案中，无定形多肽组合物不以相干方式衍射X射线，和/或粉末X射线衍射图案是不具或具有极少特征峰的宽晕。

在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括小于25微米、例如小于20微米、15微米、10微米、5微米、4微米、3微米、2微米、1微米或0.5微米的平均和/或最大粒度，任选地其中粒子的平均和/或最大粒度介于0.5微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间，或其中多肽粒子的平均和/或最大粒度介于1微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间。在多个实施方案中，本公开的多肽组合物的粒子是多肽的微粒。

本公开的无定形多肽组合物包括有包括相对于其它剂或其它类型的剂高比例的无定形和/或非结晶多肽(例如特征在于特定氨基酸序列的多肽)的组合物。在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括以组合物或存在于组合物中的多肽的重量、摩尔比或体积计至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的无定形和/或非结晶多肽(例如特征在于特定氨基酸序列的多肽)。在多个实施方案中，无定形多肽组合物的特征可在于，无定形和/或非结晶多肽(例如特征在于特定氨基酸序列的多肽)的量介于以组合物或存在于组合物中的多肽的重量、摩尔比或体积计1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％或90％的下限与以组合物或存在于组合物中的多肽的重量、摩尔比或体积计10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的上限之间。

在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物不含或基本上不含非多肽剂(和/或除无定形多肽外的剂)，例如其中无定形多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的非多肽剂(和/或除无定形多肽外的剂)。在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的非多肽剂(和/或除无定形多肽外的剂)。在多个实施方案中，无定形多肽组合物包括一种或多种特定多肽的粒子且不含或基本上不含其它多肽剂(任选地包括一种或多种特定多肽的结晶形式)，例如其中无定形多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的其它多肽剂。在多个实施方案中，无定形多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的其它多肽剂。在多个实施方案中，无定形多肽组合物包括一种或多种特定多肽的粒子且不含或基本上不含其它剂(任选地包括一种或多种特定多肽的结晶形式)，例如其中无定形多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的其它剂。在多个实施方案中，无定形多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的其它剂。

在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括一种或多种特定多肽的粒子，其中一种或多种特定多肽的粒子不含或基本上不含非多肽剂，例如其中粒子包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的非多肽剂。在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括一种或多种特定多肽的粒子，其中一种或多种特定多肽的粒子包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的非多肽剂。在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括一种或多种特定多肽的粒子，其中一种或多种特定多肽的粒子不含或基本上不含其它多肽，例如其中一种或多种特定多肽的粒子包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的其它多肽。在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括一种或多种特定多肽的粒子，其中一种或多种特定多肽的粒子包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的其它多肽。在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括一种或多种特定多肽的粒子，其中一种或多种特定多肽的粒子不含或基本上不含其它剂(任选地包括一种或多种特定多肽的非结晶形式)，例如其中一种或多种特定多肽的粒子包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的其它剂。在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物包括一种或多种特定多肽的粒子，其中一种或多种特定多肽的粒子包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的其它剂。

产生无定形多肽组合物的工艺可包括熔融物的分子淬灭、通过反溶剂添加快速沉淀、冷冻-干燥、喷雾-干燥、喷雾-冷冻-干燥、在超临界流体中沉淀、固体分散和结晶前体的固态化学反应(降解)。举例来说，将蛋白质/PEG掺合物溶液冷冻干燥，随后从基质去除PEG已证实产生呈无定形形式的沉淀的蛋白质粒子。引入机械或化学应力的工艺(研磨、磨碎和湿式造粒)可使结晶材料完全或部分为无定形。

在一些实施方案中，无定形多肽组合物可以是水合形式或由水合形式制备。水合形式可包括醇(例如乙醇)。在一些实施方案中，无定形多肽组合物是溶剂化形式或由溶剂化形式制备。例示性溶剂可包括例如酸性溶剂或有机溶剂。在一些实施方案中，溶剂可包括DMSO、DMF、乙酸、乙腈、甲醇、丙醇、异丙醇、丙酮、茴香醚、1-丁醇、2-丁醇、乙酸丁基酯、叔丁基甲基醚、异丙苯、二甲基亚砜、乙醇、乙酸乙酯、乙基醚、甲酸乙酯、甲酸、庚烷、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、3-甲基-1-丁醇、甲基乙基酮、甲基异丁基酮、2-甲基-1-丙醇、戊烷、1-戊醇、1-丙醇、2-丙醇、乙酸丙酯、四氢呋喃、乙醇和/或水。制备无定形多肽组合物的某些方法可包括通过从溶剂化形式快速蒸发溶剂、喷雾干燥、滚筒干燥、溶剂沉淀或冷冻干燥来去除溶剂。在一些实施方案中，无定形多肽组合物包括阳离子，例如2+带电阳离子(例如Ba²⁺、Ca²⁺、Cr²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe²⁺、Pb²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、Sr²⁺、Sn²⁺或Zn²⁺)。

晶体形成可包括将非结晶固体剂组装成结晶固体形式。晶体形成可利用多种分子相互作用，包括例如氢键结、p堆叠和范德华力。氢键形成通常负责分子固体中的分子间相互作用。结晶通常视为与小分子剂相关，且很少视为与多肽相关。多肽在溶液中通常缺少明确定义的构象。在某些实施方案中，无定形多肽组合物或结晶多肽组合物是包括多肽晶体的粉末形式。

在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括平均和/或最大粒度小于25微米、例如小于20微米、15微米、10微米、5微米、4微米、3微米、2微米、1微米或0.5微米的多肽晶体，任选地其中多肽晶体的平均和/或最大粒度介于0.5微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间，或其中多肽晶体的平均和/或最大粒度介于1微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间。在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物的晶体是多肽微晶体。

本公开的结晶多肽组合物包括有包括相对于其它剂或其它类型的剂高比例的结晶多肽(例如特征在于特定氨基酸序列的多肽)的组合物。在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括以组合物或存在于组合物中的多肽的重量计、以摩尔比计或以体积计至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％的结晶多肽(例如特征在于特定氨基酸序列的多肽)。在多个实施方案中，结晶多肽组合物的特征可在于，结晶多肽(例如特征在于特定氨基酸序列的多肽)的量介于以组合物或存在于组合物中的多肽的重量、摩尔比或体积计1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％或90％的下限与以组合物或存在于组合物中的多肽的重量、摩尔比或体积计10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的上限之间。

在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物不含或基本上不含非多肽剂，例如其中结晶多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的非多肽剂。在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的非多肽剂。在多个实施方案中，结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体且不含或基本上不含其它多肽剂(任选地包括一种或多种特定多肽的非结晶形式)，例如其中结晶多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的其它多肽剂。在多个实施方案中，结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体且包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的其它多肽剂。在多个实施方案中，结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体且不含或基本上不含其它剂(任选地包括一种或多种特定多肽的非结晶形式)，例如其中结晶多肽组合物包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的其它剂。在多个实施方案中，结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体且包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的其它剂。

在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体，其中一种或多种特定多肽的晶体不含或基本上不含非多肽剂，例如其中晶体包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的非多肽剂。在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体，其中晶体包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的非多肽剂。在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体，其中一种或多种特定多肽的晶体不含或基本上不含其它多肽，例如其中一种或多种特定多肽的晶体包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的其它多肽。在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体，其中一种或多种特定多肽的晶体包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的其它多肽。在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体，其中一种或多种特定多肽的晶体不含或基本上不含其它剂(任选地包括一种或多种特定多肽的非结晶形式)，例如其中一种或多种特定多肽的晶体包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％或30％的其它剂。在多个实施方案中，本公开的结晶多肽组合物包括一种或多种特定多肽的晶体，其中一种或多种特定多肽的晶体包括以重量计、以摩尔比计或以体积计不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的其它剂。

多肽晶体可由多肽样品制备。多肽晶体可由基本上不含其它剂和/或污染物的多肽样品制备。多肽晶体可由无定形材料(例如无定形冻干材料或已沉淀的无定形固体)制备。在一些实施方案中，多肽晶体可由无定形和结晶材料的混合物(例如冻干材料，其为无定形和结晶材料的混合物)或已沉淀的无定形和结晶固体的混合物制备。在多个实施方案中，多肽晶体可由多肽浓度介于0.1mg/ml与200mg/ml之间、例如多肽浓度介于0.1mg/ml、1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、50mg/ml、75mg/ml或100mg/ml的下限与15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、50mg/ml、75mg/ml、100mg/ml、125mg/ml、150mg/ml、175mg/ml或200mg/ml的上限之间的多肽样品制备。

多肽结晶的方式可包括(但不限于)蒸发、缓慢扩散(例如环境温度或低温下的蒸气扩散)、缓慢冷却、制浆、悬滴、坐滴、籽晶形成和/或本领域中已知的其它结晶方法。本领域的技术人员应了解，许多结晶方法为本领域中充分理解和已知，使得多肽结晶通常简单。本领域的技术人员应进一步了解，多肽结晶在无需特定晶体大小、无需大晶体、无需特定结晶形式和/或无需完全规则的晶体的情况下尤其简单，所述情况中的任一者或全部可描述本公开的多个实施方案的特征。

结晶多肽可通过在适宜溶剂(例如水)中混合多肽，然后使多肽返回到固相来制备。举例来说，多肽可在从水溶液(例如硫酸铵水溶液)沉淀时形成晶体。在某些例示性实施方案中，多肽饱和溶液通过增加溶液中多肽的浓度来制备。在最大溶解度下，可发生多肽沉淀且沉淀剂可能结晶。缓慢沉淀可产生少量的较大晶体，而更快速的沉淀可产生极大量的小晶体，因此使得沉淀的速率通常并非产生晶体的关键。

蒸发(例如缓慢蒸发)是使多肽结晶的常用方式。多肽的沉淀可通过以下方式进行：允许多肽溶液的溶剂蒸发(例如缓慢蒸发)直到溶液达到饱和，由此允许发生多肽沉淀。

冷却(例如缓慢冷却)是使多肽结晶的另一方法。多肽的沉淀可通过以下方式进行：允许多肽的溶液冷却(例如缓慢冷却)，由此降低多肽在溶液中的最大溶解度且诱导发生沉淀。

蒸气扩散和分批方法也常用于多肽结晶。在蒸气扩散中，将含有沉淀剂和未沉淀多肽的混合物的液滴密封于具有纯沉淀剂的室中。水蒸气随后扩散出液滴直到液滴和沉淀剂的渗透度相等。液滴的脱水使得多肽和沉淀剂缓慢浓缩直到可达成平衡，这有利于结晶。蒸气扩散可以悬滴或坐滴格式实施。悬滴方法可涉及将一滴多肽溶液置于倒置盖玻片上，然后将其悬浮于贮器上方。坐滴方法可使液滴定位于与贮器分开的底座上。这些方法皆需要密封环境，以使得液滴与贮器之间可达到平衡。

分批方法依赖于通过混合多肽与适量沉淀剂将多肽直接带入成核区中。本文所提供的多个实例包括分批结晶。分批结晶与连续结晶的不同之处在于，在分批运行结束时，仅抽取一次晶体产物用于分批系统。分批结晶还可以包括半分批系统，其中在整个分批或其一部分中将一种或多种进料溶液以恒定或可变的速率添加到结晶器中。在多个实施方案中，分批结晶的体积可在例如1微升(例如于埃彭道夫管(Eppendorf tube)中)至1升或以上(例如数千升)变化。在多个实施方案中，不涉及蒸气扩散方法。在多个实施方案中，不涉及蒸发。在多个实施方案中，分批结晶包括缓慢添加沉淀试剂(例如需要时通过搅拌，这取决于批料大小)。

通常，可在分批工艺的早期添加使材料结晶的晶种以改良可再生性和产品质量。当已形成期望量的固体时，通常将浆液转移到固体-液体分离单元。

透析是常用于多肽结晶的另一方法。该技术利用沉淀剂分子通过半透膜扩散和平衡作为逐步接近大分子结晶浓度的方式。可在可获得大量多肽的情形下使用透析管。

微透析按钮(也称为剑桥按钮(Cambridge button))提供了由少量样品产生晶体的便利方式。将多肽样品置于按钮顶部的小室内且用适当分子量截止值的透析膜覆盖样品。然后将装置浸没于含有沉淀剂溶液的贮器中。沉淀剂分子的平衡可经由膜进行。

还可以使用自由界面扩散来使多肽结晶。该技术可包括小心地使沉淀剂溶液在毛细管中的浓多肽溶液顶部分层，然后用蜡密封该毛细管的末端。毛细管的窄直径使系统中自然对流的混合最小化。因此，沉淀剂和多肽缓慢地相互扩散且系统通过称为逆向扩散的现象达到平衡。当溶液开始接触并发生扩散混合时，界面附近的多肽溶液区域变得过饱和且产生核形成的理想条件。随着时间推移，两种溶液沿着毛细管的轴相互扩散且彼此稀释，由此促进较小核的溶解和较大核的生长。在大多数情形下通过自由液体扩散达成瞬时成核条件允许获得高质量晶体。因此，自由界面扩散可视为一种最大程度地减少晶体生长前沿的过饱和和杂质水平以确保两个值的稳定性的合理结晶方法。自由界面扩散方法的变化形式称为液体桥方法，在该方法中将一滴多肽样品和一滴沉淀剂溶液紧密靠近地置于盖玻片上并通过薄液体桥连接。与空气隔绝的两个液滴之间的液体扩散可诱导晶体生长。

在一些情况下，结晶成核可通过使用例如成核剂(nucleating agent)、成核剂(nucleant)或晶种的材料诱导。成核可发生在成核剂(nucleating agent)、成核剂(nucleant)或晶种的表面上，这诱导大分子的较高局部浓度、降低成核的能量障壁并绕过自发成核的动力学障壁；在所述情况下可能需要较低的过饱和水平。

药物共晶体可以是包含药物活性成分和一种或多种共晶体形成剂(“共形成剂”)的结晶材料，使得活性成分和共形成剂一起处于同一晶格中。共晶体不同于盐，这是因为与盐不同，以所定义化学计量共同存在于共晶体晶格中的组分以非离子方式相互作用。另外，共晶体不同于多晶型物，多晶型物定义为包括1)在晶格中具有不同的分子排列或构象的单组分结晶形式，2)无定形形式，和3)多组分相，例如溶剂化物和水合物形式。共晶体与溶剂化物的相似之处至少在于二者在晶格中皆含有一种以上的组分。在一些实施方案中，本公开的无定形多肽组合物或结晶多肽组合物不包括共结晶多肽。在一些实施方案中，本公开的无定形多肽组合物或结晶多肽组合物包括共结晶多肽。

本领域的技术人员应了解，可调整多种结晶条件以增加或降低结晶的效率和/或纯度。例如，可调整的结晶条件包括增溶系统(水性系统和/或有机溶剂系统)、pH、平衡离子、盐、温度、赋形剂、共形成剂和多肽浓度。这些因素的调节和测试范围对于本领域的技术人员来说微不足道。在结晶领域中，将对多种结晶条件取样视为典型的。另外，如本领域的技术人员应了解，本公开不一定要求鉴别最有效的结晶形式，仅要求可形成晶体。

本公开的结晶多肽组合物可包括多种结晶多肽。在多个实施方案中，结晶多肽的特征可在于高浓度、高纯度和/或高稳定性。可使用本领域中已知的任何适宜方法来表征所提供的结晶多肽组合物，包括(但不限于)X射线粉末衍射(XRPD)、差示扫描量热法(DSC)、热重分析(TGA)、高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱法-质谱法(LCMS)、激光衍射、高温显微术、偏光显微术等等。

在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物或结晶多肽组合物不含或基本上不含一种或多种或任何沉淀试剂，任选地其中沉淀试剂包括盐、有机溶剂或聚合物中的一者或多者，任选地其中盐可包括选自硫酸铵、柠檬酸盐和鲸蜡基三甲基铵盐的盐，有机溶剂可包括选自2-甲基-2,4-戊二醇或2-甲基-2,4-戊二醇的有机溶剂，和/或聚合物可包括聚乙二醇聚合物。

在多个实施方案中，本公开的无定形多肽组合物或结晶多肽组合物包括不含或基本上不含一种或多种或任何沉淀试剂的多肽晶体，任选地其中沉淀试剂包括盐、有机溶剂或聚合物中的一者或多者，任选地其中盐可包括选自硫酸铵、柠檬酸盐和鲸蜡基三甲基铵盐的盐，有机溶剂可包括选自2-甲基-2,4-戊二醇或2-甲基-2,4-戊二醇的有机溶剂，和/或聚合物可包括聚乙二醇聚合物。

除非另有说明，否则本领域的技术人员应了解，与本领域中的结晶相关的提及是指不为多肽的分子的结晶，例如为小分子(例如小分子治疗剂)的分子的结晶。

在各种应用中，肽结晶可产生具有通常均匀含量的有序晶体。尽管本公开包括包含有序晶体的多肽组合物，但本公开也明确包括以下认识：本公开的制剂无需具有特定或一致大小或特征的晶体。在多个实施方案中，结晶多肽组合物包括多肽的一种或多种结晶形式(例如多肽的一种或多种多晶型物或水合物)。

在一些实施方案中，多肽/肽可呈覆盖有维生素E的液滴形式的水性形式。在其它实施方案中，可溶解于水溶液中的维生素E衍生物可用作载体。

本领域的技术人员根据本公开应了解，本文所提供的组合物和方法可用于递送多种多肽。举例来说，本领域的技术人员根据本公开应了解，本文所提供的组合物和方法是有利的，至少部分地由于其在口服施用后例如经由淋巴系统以例如有利的药代动力学性质将多肽递送到血流和/或血浆。

在一些实施方案中，多肽的分子量可以是例如至少约25kDa、50kDa、100kDa、150kDa、200kDa、250kDa、300kDa、400kDa、500kDa、1,000kDa或更大。本公开多肽的分子量可介于例如约1kDa至约1,000kDa、例如约25kDa至约1,000kDa、约25kDa至约500kDa、约100kDa至约500kDa、约125kDa至约250kDa、约125kDa至约175kDa、或约150kDa至约300kDa的范围内。在多个实施方案中，本公开多肽的分子量可具有例如约1kDa、10kDa、20kDa、30kDa、40kDa、50kDa、75kDa、100kDa、150kDa、200kDa、250kDa、300kDa、350kDa、400kDa、450kDa或500kDa的下限和例如约100kDa、150kDa、200kDa、250kDa、300kDa、350kDa、400kDa、450kDa、500kDa、750kDa或1,000kDa的上限。

在一些实施方案中，多肽的分子量可以例如介于约50Da与25kDa之间，任选地其中分子量介于约50Da与约1kDa之间、介于约50Da与约2kDa之间、介于约50Da与约3kDa之间、介于约50Da与约4kDa之间、介于约50Da与约5kDa之间、介于约50Da与约10kDa之间、介于约50Da与约15kDa之间、或介于约50Da与约20kDa之间。在多个实施方案中，本公开多肽的分子量可具有例如约50Da、100Da、150Da、200Da、250Da、300Da、400Da、500Da、600Da、700Da、800Da、900Da、1kDa、2kDa、3kDa、4kDa或5kDa的下限和例如约250Da、300Da、400Da、500Da、600Da、700Da、800Da、900Da、1kDa、2kDa、3kDa、4kDa、5kDa、10kDa、15kDa、20kDa或25kDa的上限。

本公开的多肽可包括例如约1至约1,000个氨基酸，例如约10至约500个、约10至约250个、约10至约100个、约100至约1,000个、约100至约750个、约100至约500个、约100至约250个、约250至约1,000个、约250至约750个、或约250至约500个氨基酸。在多个实施方案中，本公开的多肽可包括多个氨基酸，其具有例如约1个、10个、20个、30个、40个、50个、75个、100个、150个、200个、250个、300个、350个、400个、450个或500个氨基酸的下限和例如约100个、150个、200个、250个、300个、350个、400个、450个、500个、750个或1,000个氨基酸的上限。

在多个实施方案中，本公开的多肽可以是治疗性多肽，例如酶或抗体，例如用于施用于有需要的受试者。本领域的技术人员应熟悉多种治疗性多肽的属性和特征。

在多个实施方案中，本公开的多肽可以是或包括重组多肽、分离或合成多肽、细胞骨架蛋白、细胞外基质蛋白、血浆蛋白、凝血因子、急性期蛋白、血红素蛋白、细胞粘附蛋白、跨膜运输蛋白、同向运输/反向运输蛋白、激素、生长因子、受体、跨膜受体、细胞内受体、DNA结合蛋白、转录调控蛋白、RNA结合蛋白、免疫系统蛋白、营养素储存和运输蛋白、伴侣蛋白、酶、糖蛋白、磷蛋白、膜蛋白、运输蛋白或载脂蛋白、抗体、重组抗体、抗体片段、单克隆抗体、修饰酶、聚乙二醇化多肽、治疗性多肽、储存多肽、酶、生长因子或激素、免疫调节剂、抗感染剂、抗增生剂、疫苗或其它治疗剂、预防药、诊断性多肽和它们的组合。

在多个实施方案中，本公开的多肽可以是或包括抗体或抗体片段。在一些实施方案中，抗体是单克隆抗体或其片段。在一些实施方案中，抗体是多克隆抗体或其片段。在一些实施方案中，抗体是天然、合成或工程化的。

抗体片段包括Fab片段(通过用木瓜酶消化从完整抗体分离的单一Fab)和F(ab’)2片段(通过用胃蛋白酶消化抗体产生的彼此共价结合的两个Fab)。Fab片段是单特异性的，而F(ab’)2片段是双特异性的。抗体片段包括双链Fv(dsFv)片段和单链Fv(scFv)片段(在两种情形下，“v”代表“可变”)。dsFv片段由Fab片段减去恒定区组成，即，仅由彼此共价结合的重链和轻链的可变区组成。scFv片段是单一多肽链，由经由肽连接体连接到轻链可变区的重链可变区组成。经典地，dsFv和scFv片段皆为单价(因此是单特异性的)。然而，两个dsFv片段或两个scFv片段可自身连接形成双特异性片段(类似于无恒定区的F(ab’)2片段)。另外，可连接具有不同抗原结合位点(即，不同特异性)的两个dsFv片段或scFv片段，以形成双特异性片段。这类片段可用作研究工具或者治疗或诊断试剂。

在一些实施方案中，抗体是免疫球蛋白。在天然免疫球蛋白中，每一四聚体由两对相同的多肽链构成，每对具有一条“轻链”(约25kDa)和一条“重链”(约50-70kDa)。每条链的氨基末端部分包括主要负责抗原识别的约100至110个或更多个氨基酸的“可变”(“V”)区。每条链的羧基末端部分定义主要负责效应功能的不变区。四条链以经典“Y”模型排列。“Y”的底部“腿”称为Fc区(“c”代表“可结晶”或替代地“补体结合”)且用于将抗体锚定在细胞膜内，并且也用于结合巨噬细胞，因此活化互补作用。“Y”顶部的两个“臂”称为Fab区(“ab”代表“抗原结合”)。每一Fab区含有不变区(在Fab区和Fc区的接合处)和可变区(其延伸到“Y”或Fc区的尖端)。每一可变区在“Y”的每一尖端含有相同的抗原结合位点(处于可变区内称为“超变”区的区域)。术语“超变”区是指互补决定区或CDR的氨基酸残基(即，轻链可变结构域中的残基24-34(L1)、50-56(L2)和89-97(L3)和重链可变结构域中的31-35(H1)、50-65(H2)和95-102(H3)，如Kabat等人,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版,Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,Md.(1991)所述)。“框架”或FR残基是除超变区残基外的剩余可变区残基。每一Fab区具有一个抗原结合位点，因此完整抗体分子具有两个抗原结合位点(即为“二价”)。天然抗体上的两个抗原结合位点彼此相同，因此抗体对一种抗原具有特异性(即为“单特异性”)。

免疫球蛋白可视其重链的不变结构域的氨基酸序列分配到不同类别。重链分类为缪(μ)、德尔塔(Δ)、伽马(γ)、阿尔法(α)和埃普西隆(ε)，且抗体的同型分别定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。通常，IgG、IgE和IgD以单体存在，而IgA可不仅以单体存在，还以二聚体或三聚体存在，且IgM可以五聚体存在。上述免疫球蛋白中的若干可进一步分成多个子类或同型，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。不同同型具有不同的效应功能；例如，IgG1和IgG3同型具有抗体依赖性细胞细胞毒性(ADCC)活性。人类轻链分类为卡帕(κ)和拉姆达(λ)轻链。在轻链和重链内，可变区和不变区通过约12个或更多个氨基酸的“J”区连结，其中重链另外涵盖约10多个氨基酸的“D”区(通常参见Fundamental Immunology,第7章(Paul,W.编辑,第2版,Raven Press,N.Y.(1989))。

在一些实施方案中，多肽可以是嵌合抗体。尽管天然抗体衍生自单一物种，但工程化的抗体和抗体片段可衍生自一种以上的动物物种，即可以是嵌合的。已生成小鼠(鼠类)/人嵌合抗体，但其它组合是可能的。嵌合抗体已进一步分成两个亚型：嵌合和人源化。嵌合鼠类/人类抗体通常分别含有约75％的人类氨基酸序列和25％的小鼠氨基酸序列。人类序列代表抗体的不变区，而小鼠序列代表抗体的可变区(因此含有抗原结合位点)。使用这类嵌合体的一般原理是保留小鼠抗体的抗原特异性，但降低小鼠抗体的免疫原性(鼠类抗体将在除小鼠外的物种中产生针对其的免疫反应)，因此能够在人类疗法中采用嵌合体。嵌合抗体还包括包含不同人类抗体的CDR区的那些抗体。CDR区(也称为超变区)是抗体分子的可变区内生成抗原结合位点的序列。CDR区如此命名的原因在于，结合位点的形状和电荷分布与在抗原上识别的表位互补。替代地，嵌合抗体包括一种抗体的框架区和另一抗体的CDR区。嵌合抗体还包括包含至少两种不同的人类抗体的CDR区的那些抗体。人源化抗体通常含有约90％(或更大)的人类氨基酸序列。在此情况下，存在的唯一鼠类序列是用于超变区的那些序列(是可变区内所含的实际抗原结合位点)。与嵌合抗体相比，人源化抗体具有最小的小鼠免疫原性。

抗体和抗体片段的实例包括(但不限于)伊达赛珠单抗(Idarucizumab，)、瑞西巴库单抗(Raxibacumab，/>)、阿替珠单抗(Atezolizumab，RG7446(Roche))、奥法木单抗(Ofatumumab，/>)、奥妥珠单抗(Obinutuzumab，/>GA101(Roche))、贝唑妥昔单抗(Bezlotoxumab，ZINPLAVA^TM)、耐昔妥珠单抗(Necitumumab，Portrazza^TM)、奥比妥昔单抗(Obiltoxaximab，)、奥拉单抗(Olaratumab，Lartruvo^TM)、利妥昔单抗(/>ABP 798(Amgen)、/>GP2013(Novartis))、托西莫单抗(Tositumomab，/>)、曲妥珠单抗(/>ABP 980(Amgen)、HERTRAZ^TM、CANMAB^TM)、帕妥珠单抗(Pertuzumab，/>RG1273(Roche))、托珠单抗(Tocilizumab，/>)、贝伐珠单抗(/>ABP 215(Amgen))、达雷木单抗(Daratumumab，/>)、艾洛珠单抗(Elotuzumab，EMPLICITI^TM)、司妥昔单抗(Siltuximab，SYLVANT^TM)、帕尼单抗(Panitumumab，/>)、维多珠单抗(Vedolizumab，/>)、依库珠单抗(Eculizumab，/>)、那他株单抗(Natalizumab，/>)、西妥昔单抗伊匹单抗(Ipilimumab，/>)、瑞利珠单抗(Reslizumab，)、派姆单抗(Pembrolizumab，/>)、尼沃鲁单抗(Nivolumab，)、英夫利昔单抗(/>ABP 710(Amgen)、/>)、阿昔单抗(Abciximab，/>)、依伏库单抗(Evolocumab，/>)、苏金单抗(Secukinumab，)、聚乙二醇化赛妥珠单抗(Certolizumab pegol，/>)、依奇珠单抗(Ixekizumab，TALTZ^TM)、奥马珠单抗(Omalizumab，/>)、卡那单抗(Canakinumab，)、阿利库单抗(Alirocumab，/>)、达利珠单抗(Daclizumab，ZINBRYTA^TM、)、地诺单抗(Denosumab，/>)、地诺单抗/>美泊利单抗(Mepolizumab，Nucala)、优特克单抗(Ustekinumab，/>)、戈利木单抗(Golimumab，)、阿达木单抗(Adalimumab，/>ABP501(Amgen)、GP2017(Novartis))、雷莫芦单抗(Ramucirumab，/>)、兰尼单抗(Ranibizumab，RG3645(Roche&Novartis))、依法利珠单抗(Efalizumab，/>)、帕利珠单抗(Palivizumab，/>)、阿多-曲妥珠单抗艾坦辛(Ado-trastuzumabemtansine，KADCYLA^TM)、阿伦珠单抗(Alemtuzumab，/>)、阿伦珠单抗(LEMTRADA^TM)、巴利昔单抗(Basiliximab，/>)、贝利木单抗(Belimumab，)、布利莫单抗(Blinatumomab，/>)、贝伦妥单抗维多汀(Brentuximab vedotin，Adcetris)、卡罗单抗喷替肽(capromab pendetide，/>)、地妥昔单抗(Dinutuximab，Unituxin)、艾洛珠单抗(EMPLICITI^TM)、吉妥珠单抗奥唑米星(Gemtuzumab ozogamicin，Mylotarg)、替伊莫单抗(Ibritumomab tiuxetan，/>)、伊利珠单抗(Itolizumab，Alzumab^TM)、莫罗单抗(Muromonab，Orthoclone/>)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab，/>)、诺非单抗(Nofetumomab，/>)和它们的生物类似药和组合。在多个实施方案中，抗体和抗体片段的实例包括(但不限于)阿昔单抗、帕利珠单抗、莫罗单抗-CD3、吉妥珠单抗、曲妥珠单抗、巴利昔单抗、达利珠单抗、依那西普和/或替伊莫单抗。

抗体和抗体片段的实例包括(但不限于)抗细胞因子抗体、抗CD抗原抗体(例如抗CD3、如CD20(利妥昔单抗)、抗CD25、抗CD52、抗CD33和抗CD11a)、抗TNF-α(例如英夫利昔单抗)、抗响尾蛇毒液、抗ICAM(例如抗ICAM-1和抗ICAM-3)、抗生长因子抗体(例如抗VEGF)、抗生长因子受体抗体(例如抗HER2/neu(曲妥珠单抗)和抗EGFR)、抗免疫球蛋白抗体(例如抗IgE)、抗多克隆Ab抗体、抗病毒抗体(例如抗CMV、抗HIV(抗gp120)、抗HBV、抗RSV(抗F糖蛋白))、抗补体抗体(例如抗C5)、抗凝血因子抗体(例如抗gpIIb/IIIa和抗因子VII)、抗白细胞介素抗体(例如抗IL-5、抗IL-4和抗IL-8)、靶向主要组织相容性复合物的抗体(例如抗HLA)、抗个体基因型抗体、抗整合素抗体(例如抗β-2-整合素)、抗17-IA细胞表面抗原、抗α4β7、抗VLA-4、抗CBL和它们的组合。

在一些实施方案中，多肽是生物相似性抗体。生物类似药通常在物理化学上或生物上在安全性和功效方面类似于参考。生物类似药可使用一种或多种体外研究对比参考进行评估。体外比较可与展示药代动力学、药效学和/或安全性的相似性的体内数据组合。临床评估可包括比较药代动力学性质(例如AUC0-inf、AUC0-t、Cmax、tmax、C谷)；药效学终点；或临床功效的相似性(例如使用随机化、平行组比较临床试验)。生物类似药与参考之间的差异可包括翻译后修饰，例如通过结合一种或多种生物化学基团(例如磷酸盐、各种脂质和碳水化合物)；通过翻译后的蛋白水解裂解；通过改变氨基酸的化学性质(例如甲酰化)；或通过许多其它机制。其它翻译后修饰可以是制造工艺操作的结果，例如，糖化可能随着产物暴露于还原糖而发生。在其它情形下，储存条件可容许进行某些降解途径，例如氧化、脱酰胺或聚集。

抗体通常可借助其特异性靶结合性质和/或靶中和(例如结合和/或中和与疾病状态相关的靶)用于例如治疗癌症、炎症、心血管疾病和移植排斥。举例来说，单克隆抗体英夫利昔单抗结合至肿瘤坏死因子且通过阻断其与细胞表面受体的相互作用来中和其在炎症中的作用。利妥昔单抗通过结合至其细胞表面CD20抗原靶向恶性B淋巴细胞。临床上相关的抗体还可以根据欲使用其的治疗区域来分类。在一些实施方案中，用于治疗用途的临床抗体可包括用于治疗癌症(例如胰腺癌)、炎症性疾病(例如自身免疫疾病、关节炎)、心血管疾病(例如中风)、感染性疾病(例如HIV/AIDS)、呼吸疾病(例如哮喘)、组织移植排斥和器官移植排斥的那些抗体。在一些实施方案中，临床抗体用于放射性免疫疗法。

在多个实施方案中，本公开的多肽可以是或包括多肽替代疗法、酶(例如治疗替代酶)和/或融合多肽。多肽和/或酶的实例包括例如抗体(例如抗HER2抗体，例如曲妥珠单抗)、GLP-1受体激动剂、人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)或其类似物(例如合成类似物，例如利拉鲁肽)、甲状旁腺激素或其类似物(例如重组人甲状旁腺激素类似物，例如特立帕肽)、胰岛素或其类似物(例如)、利妥昔单抗、贝伐珠单抗、西妥昔单抗、依那西普、英夫利昔单抗或它们的类似物或衍生物。例如用于替代酶疗法的酶的实例可包括阿加糖酶β、阿加糖酶α、伊米苷酶、阿利苷酶α、维拉苷酶α、阿糖脑苷酶、西贝利帕酶α、拉罗尼酶、艾杜硫酶、艾罗硫酶α、加硫酶、胰脂肪酶、沙丙蝶呤、艾利司他、加硫酶、艾司福酶α、培格力酶、艾拉培加酶和/或沙可罗酶。替代多肽的实例包括因子I、因子II、因子III、因子IV、因子V、因子VI、因子VII、因子VIII、因子IX、因子X、因子XI、因子XII、因子XIII和/或冯·维勒布兰德因子。融合多肽的实例可包括例如依那西普、阿柏西普、列洛西普、阿法西普、罗米司亭、阿巴西普/贝拉西普和/或地尼白介素。本公开包括本文所公开多肽的类似物和修饰形式，例如，其包括一个或多个侧基或修饰，例如聚乙二醇化、乙酰化、酰胺化、脂化、甲基化、磷酸化、糖基化、糖化、硫酸化、甘露糖化、亚硝基化、酰化、棕榈酰化、异戊二烯化或它们的组合。在多个具体实施方案中，本公开的多肽包括选自聚乙二醇化和/或脂肪酸的一个或多个侧基或修饰。

本公开还包括本文所公开多肽的工程化和/或生物相似形式，例如与本文所公开的多肽具有至少80％序列同一性，例如与本文所公开的多肽具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性。

本公开还包括以下认识：多肽(包括例如抗体和/或抗体片段)在本领域中通常并不称为“小分子”或“化合物”。因此，由于小分子和化合物可具有与如本文所公开的多肽(例如与抗体和/或抗体片段)极为不同的物理和药代动力学性质，故本领域的技术人员不应将与小分子和化合物相关的先前技术公开内容理解为适用于与如本文所公开的多肽相关的制剂和方法。

药学上可接受的胶囊

包括本公开的无定形多肽组合物或结晶多肽组合物的核心可囊封于聚合物胶囊中。本公开的胶囊包括适于口服施用或直肠施用的药学上可接受的胶囊。在多个实施方案中，本公开的胶囊是适于将多肽递送、例如特异性递送到肠管的胶囊。在多个实施方案中，本公开的胶囊是适于将多肽递送、例如特异性递送到小肠和/或大肠中的一者或两者的胶囊。

本公开的胶囊包括硬壳胶囊和软壳胶囊。在多个实施方案中，胶囊是明胶胶囊或羟丙基甲基纤维素(HPMC)胶囊。例示性胶囊材料可包括聚合物，例如聚(乙醇酸)(PGA)、聚(乳酸)(PLA)和其共聚物聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)，和非离子纤维素醚，例如羟丙基纤维素(HPC)和羟丙基甲基纤维素(HPMC)。在一些实施方案中，胶囊是植物胶囊。

软明胶胶囊(也称为软胶囊)可由单片明胶制造。其可用于囊封不基于水的溶液，这是因为水会溶解明胶。一旦摄取，胶囊便立即溶解，从而暴露核心。

硬明胶胶囊是由两部分(主体和盖)制成。可向硬明胶胶囊填充包括呈粉末形式的干燥成分的核心。首先向主体填充核心组合物，然后用盖封闭胶囊。一旦摄取，硬胶囊便立即溶解，从而暴露核心。

在多个实施方案中，胶囊可包括肠溶包衣。肠溶包衣通常是控制其中口服制剂的核心暴露和/或向其递送口服制剂的核心的接受者身体的位置(例如消化系统，例如肠管，例如小肠和/或大肠)的障壁。许多肠溶包衣在低pH下不可溶，但在肠道中在较高pH下溶解、溶胀或变得可溶。用于肠溶包衣的典型材料可包括CAP(乙酸邻苯二甲酸纤维素)、CAT(乙酸偏苯三酸纤维素)、PVAP(聚(乙酸邻苯二甲酸乙烯酯))和HPMCP(邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素)、聚(甲基丙烯酸-共-甲基丙烯酸甲酯)、脂肪酸、蜡、虫胶(例如紫胶桐酸的酯)、塑料和植物纤维。在多个实施方案中，肠溶包衣的溶解pH可介于例如约4.5与约7之间，例如约4.5至约5.5、约4.5至约6.0、约5.5至约7.0、约5.0、约6.2或约7.0。在多个实施方案中，肠溶包衣的pH释放在下限为约4.5、5.0、5.5或6.0且上限为约5.0、5.5、6.0、6.5、7.0或7.5的范围内。

本公开明确包括以下认识：肠溶包衣对于根据本公开的方法和组合物递送本文所公开的多肽以到达血流、血浆、淋巴系统和/或胸导管(例如以治疗有效量)并非必需的。

在多个实施方案中，包括无定形多肽组合物或结晶多肽组合物的本公开制剂是或包括生物粘附性制剂，例如在胶囊或片剂的表面中或其上。在多个实施方案中，生物粘附性制剂粘附到特定生物位置，例如粘膜内衬(粘膜粘附)。生物粘附剂型可通过在长时间段内以小剂量递送多肽剂和/或通过生物粘附使其定位于肠中来改良多肽剂的口服吸收。多种生物粘附性聚合物可广泛地呈特异性或非特异性。特异性生物粘附性聚合物(例如凝集素和纤毛素)能够粘附到生物分子内的特定化学结构，而非特异性生物粘附性聚合物(例如聚丙烯酸[PAA]和氰基丙烯酸酯)能够与细胞表面和粘膜层结合。生物粘附性聚合物的其它实例包括CMC钠、卡波普(Carbopol)、聚卡波非(Polycarbophil)、黄蓍胶、海藻酸钠、HPMC、刺梧桐胶(Gum karaya)、明胶、瓜尔胶(Guar gum)、果胶、阿拉伯树胶(Acacia)、几丁聚糖和羟丙基纤维素。生物粘附性聚合物的实例可包括亲水性聚合物(例如甲基纤维素、羟乙基纤维素、HPMC、Na CMC和卡波姆(carbomer))、硫醇化聚合物(例如几丁聚糖-亚氨基硫杂环戊烷、PAA-半胱氨酸、PAA-高半胱氨酸、几丁聚糖-硫乙醇酸、几丁聚糖-硫乙基脒、海藻酸盐-半胱氨酸、聚(甲基丙烯酸)-半胱氨酸和羧甲基纤维素钠-半胱氨酸)、基于凝集素的聚合物(例如扁豆凝集素、花生凝集素和刺金雀花(ulex europaeus)凝集素)、Polyox WSR(例如WSRN-10、WSR N-80、WSR N-205和WSR N-750)和其它聚合物(例如番茄凝集素、PAA-co-PEG和PSA)。

本公开还包括适于直肠递送的栓剂。在多个实施方案中，栓剂在施用后熔融或溶解。在多个实施方案中，栓剂包括囊封核心的胶囊(例如本文所公开的胶囊，例如硬明胶胶囊或软明胶胶囊)。在多个实施方案中，栓剂不包括胶囊(即，不包括囊封核心的胶囊)。栓剂可由蜡物质、结构化丙三醇、氢化植物油、聚乙二醇蜡衍生物或基于泊洛沙姆的混合物形成。在多个实施方案中，栓剂在环境温度下是固体，但在体温下快速熔融。可使用乳化剂来增加结晶多肽或无定形多肽在栓剂块中的溶解度和/或加速结晶多肽或无定形多肽在栓剂熔融后的分散。

在多个实施方案中，本公开还包括片剂、快速溶解片剂、液体凝胶胶囊、糖浆、菱形片剂、气溶胶喷雾、口香糖等。

制剂

本公开包括有包括用于口服或直肠递送的多肽制剂的方法和组合物，该多肽制剂包括药学上可接受的胶囊的核心或悬浮液内，其中核心或悬浮液包括多肽组合物(例如无定形多肽组合物或结晶多肽组合物)和包括维生素E剂的药学上可接受的载体。

在多个实施方案中，本公开的悬浮液包括无定形多肽组合物或结晶多肽组合物于维生素E剂和/或包括维生素E剂的药学上可接受的载体中的悬浮液。本公开的悬浮液包括液体制剂，其中无定形多肽剂或结晶多肽剂分布于悬浮介质(例如维生素E剂、药学上可接受的载体或它们的组合)中。在多个实施方案中，本公开的悬浮液可以是稀悬浮液(例如包括以重量或体积计10％或更少的多肽剂的悬浮液)或浓悬浮液(例如包括以重量或体积计10％-50％或更大的多肽剂的悬浮液)。在多个实施方案中，本公开的悬浮液可以是絮凝悬浮液或非絮凝悬浮液。在多个实施方案中，悬浮液可以是粗悬浮液(例如粒子直径大于1μm)、胶质悬浮液(例如粒子直径小于1μm)或纳米悬浮液(例如粒子直径介于1nm与100nm之间)。本公开的悬浮液可例如经口或直肠施用。

在多个实施方案中，核心或悬浮液包括约1mg至2,000mg的多肽(例如结晶多肽或无定形多肽)。在多个实施方案中，核心或悬浮液包括约1mg至1,000mg、1mg至500mg、1mg至400mg、1mg至300mg、1mg至200mg、或1mg至100mg的结晶多肽或无定形多肽。在一些实施方案中，制剂包括一定量的结晶多肽或无定形多肽，该量的下限为例如1mg、5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、75mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg或500mg结晶多肽或无定形多肽且上限为100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、1,000mg或2,000mg结晶多肽或无定形多肽。在多个实施方案中，核心或悬浮液包括约50μg至2,000mg的多肽，任选地其中多肽制剂包括约50μg至1,000mg、50μg至500mg、50μg至400mg、50μg至300mg、50μg至200mg、50μg至100mg、50μg至50mg、50μg至25mg、50μg至20mg、50μg至15mg、50μg至10mg、50μg至5mg、50μg至1mg、50μg至500μg、1mg至1,000mg、1mg至500mg、1mg至400mg、1mg至300mg、1mg至200mg、1mg至100mg、1mg至50mg、1mg至25mg结晶多肽或无定形多肽。在多个实施方案中，核心或悬浮液包括约1μg至2,000mg的多肽，任选地其中多肽制剂包括约1μg至1,000mg、1μg至500mg、1μg至400mg、1μg至300mg、1μg至200mg、1μg至100mg、1μg至50mg、1μg至25mg、1μg至20mg、1μg至15mg、1μg至10mg、1μg至5mg、1μg至1mg、1μg至500μg、1μg至250μg、1μg至200μg、1μg至150μg、1μg至100μg、1μg至50μg的结晶多肽或无定形多肽。在一些实施方案中，制剂包括一定量的结晶多肽或无定形多肽，该量的下限为例如1μg、5μg、10μg、15μg、20μg、25μg 50μg、100μg、200μg、300μg、400μg、500μg、600μg、700μg、800μg、900μg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、10mg或25mg结晶多肽或无定形多肽且上限为500μg、600μg、700μg、800μg、900μg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、10mg、25mg、50mg、100mg、500mg、1,000mg或2,000mg结晶多肽或无定形多肽。

在多个实施方案中，本公开的制剂(例如囊封或悬浮制剂)和/或其核心包括相对于制剂中结晶多肽或无定形多肽的量摩尔过量或重量过量的维生素E剂，任选地其中过量是至少1.1倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍、500倍或1,000倍的倍数过量，例如在1至10、1至20、1至30、1至40、1至50、1至100或1至1,000范围内的倍数增加。在多个实施方案中，维生素E剂相对于制剂中结晶多肽或无定形多肽的量的摩尔倍数过量或重量倍数过量是在下限为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、75、100、150、200或250且上限为30、40、50、75、100、150、200、250、500或1,000的范围内的倍数增加。

在多个实施方案中，一种或多种药学上可接受的载体以下列浓度存在于本公开的制剂(例如囊封或悬浮制剂)或其核心中：介于0.1mM与约1,000mM之间、介于约0.1mM与约500mM之间、介于约0.1mM与约200mM之间、或介于约1mM与约100mM之间。在多个实施方案中，一种或多种药学上可接受的载体以下限为0.1mM、1mM、5mM、10mM、20mM、30mM、40mM、50mM、75mM或100mM且上限为10mM、20mM、30mM、40mM、50mM、75mM、100mM、150mM、200mM、250mM或500mM的浓度存在于本公开的制剂(例如囊封或悬浮制剂)或其核心中。

本公开的某些栓剂制剂可包括无定形多肽组合物或结晶多肽组合物和栓剂赋形剂，例如亲脂性基底(例如可可脂、椰子油、初榨椰子油、杏仁油、小麦胚芽油、任何可食用油、氢化植物油和硬脂肪)或亲水性基底(例如丙三醇明胶和聚乙二醇)。亲脂性基底与体液不可混溶且易于在体温下熔融以在粘膜表面上释放药物，而亲水性基底需要溶解于生理流体中用于药物释放。栓剂制剂可包括固体、半固体和液体形式。

在多个实施方案中，本公开的栓剂制剂包括半固体剂型，例如凝胶或泡沫。直肠凝胶可以是半固体制剂，其含有包埋于聚合物网络内的溶剂以产生粘性稠度。凝胶的粘性可通过添加共溶剂(例如丙三醇和丙二醇)和电解质来调节。

在多个实施方案中，本公开的栓剂制剂包括液体栓剂，例如包括热敏聚合物(例如泊洛沙姆)、粘膜粘附聚合物(例如卡波普、海藻酸钠、聚卡波非、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素和甲基纤维素)或热敏和粘膜粘附聚合物的组合的液体栓剂。栓剂可还包括例如纤维素醚聚合物(例如羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素和甲基纤维素)。

在多个实施方案中，本公开的栓剂制剂包括泡沫，例如胶质剂型，其具有含有起泡剂的亲水性液体连续相和遍布其中的气态分散相。在直肠施用后，某些这类制剂在粘膜表面上从泡沫状态转变成液体或半固体状态。起泡剂包括对泡沫生成和稳定至关重要的两亲性物质。

除上述外，本公开的药物组合物可呈本领域中已知的任一形式。这类形式包括例如液体、半固体和固体剂型，例如液体溶液(例如可注射和可输注溶液)、分散液或悬浮液、片剂、丸剂、粉末、脂质体和栓剂。本公开的药物组合物可经肠或经局部(例如经颊)施用。本公开的药物组合物可呈可注射或可输注溶液的形式。本公开的药物组合物可被配制成通过不经肠模式(例如静脉内、皮下、腹膜内或肌内注射)施用。如本文所用的不经肠施用是指除肠和局部施用外的施用模式，例如通过注射，且包括(但不限于)静脉内、鼻内、经鼻、眼内、肺部、肺内、经肺、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、真皮内、腹膜内、经气管、皮下、经皮、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外、大脑内、颅内、颈动脉内和胸骨内注射和输注。药物组合物可以包含无菌溶液或悬浮液的可注射制剂形式不经肠施用。举例来说，药物组合物可通过适宜地组合多肽组合物与一种或多种药学上可接受的载体来配制。施用可以是全身或局部。

在一些实施方案中，组合物可被配制用于肺内施用(例如用于经由吸入器或雾化器施用)。用于配制这类组合物的方法是本领域中众所知周的。肺部施用可以是口服和/或鼻。用于肺部递送的药物装置的实例包括计量剂量吸入器、干燥粉末吸入器(DPI)和雾化器。

在一些实施方案中，组合物可例如以药学上可接受的溶液、悬浮液或软膏(例如滴眼剂)的形式配制用于递送到眼。用于治疗眼的制剂可呈含有例如其它成分(例如但不限于防腐剂、缓冲剂、张力剂、抗氧化剂和稳定剂、非离子润湿或澄清剂和增粘剂)的无菌水溶液形式。如本文所述的制剂可通过常规方法(例如以滴剂形式)或通过将眼浸泡在在治疗溶液中来局部施用需要治疗的受试者的眼。

适宜施用方式可基于受试者的年龄和状况来选择。药物制剂中所包括活性成分的量使得提供指定范围内的适宜剂量。施用剂量和方法可视患者的体重、年龄、状况和其它特征而变化，且可由本领域的技术人员根据需要适当选择。

多肽递送和应用

本公开的组合物和方法包括用于口服施用于受试者的制剂，其中口服施用可将多肽递送到受试者的胸导管、淋巴系统和/或血流。不希望受限于本发明人已知的任何特定科学理论，本公开首先使用口服制剂和/或包括维生素E剂的口服制剂经由胸导管和/或淋巴系统将多肽递送到血流。

长期以来一直假设维生素E通过被动扩散吸收，但最新的资料已显示，该过程实际上远远比先前所认为的更加复杂。不希望受限于任何特定科学理论，典型食物消耗后的维生素E剂消化，即消化-吸收过程的第一阶段是维生素E溶解在膳食的脂质相中。脂肪消化过程开始于具有舌脂酶的口腔且在添加有由主要细胞产生的胃脂酶的胃中继续。胃中似乎不存在维生素E的代谢(即降解或吸收)。在乳化胆汁酸帮助下，大部分脂肪消化在十二指肠中由胰腺脂酶和辅脂酶进行。脂质在胃和十二指肠水平上乳化成脂质液滴。另外，液滴的大小看上去对维生素E的后续吸收效率无任何作用。在十二指肠中，源自脂肪分解的单酸甘油酯和长链脂肪酸与磷脂、胆固醇和脂溶性维生素一起与胆汁盐形成胶束。维生素E与脂质消化产物一起纳入混合胶束中，这是肠细胞吸收的步骤。混合胶束可溶解疏水性组分且扩散到未搅拌的水层(糖盏)中以接近肠细胞的刷状缘膜。当接近刷状缘膜时，混合胶束可因存在pH梯度而解离。释放的成分随后可被不同系统捕获以被肠细胞吸收，例如通过被动扩散和/或清除受体。在吸收后，维生素E穿过肠细胞的命运未明确阐述。由于具有疏水性，维生素E可能定位于细胞器膜、胞质脂质液滴或结合至结合蛋白的运输中。亚细胞定位揭露，维生素E可在微粒体膜(即内质网、高尔基体(Golgi)、溶酶体和过氧化物酶体膜)中累积。长链脂肪酸和单酸甘油酯再酯化成三酸甘油酯，随后与多肽、磷脂和胆固醇组合形成乳糜微粒。大部分维生素E在释放到淋巴之前在高尔基体层面以其游离形式纳入乳糜微粒中。此后，乳糜微粒经由胸导管进入肠淋巴，最终进入外周循环中。淋巴系统使各种免疫系统细胞循环，也是某些营养素的主要吸收部位。大分子消化产物可在到达全身性循环之前经由静脉系统吸收到淋巴系统中。总之，仅部分了解维生素E吸收的机制。本领域的技术人员通常应了解，大部分维生素E吸收发生在肠的远端部分中。

不希望受限于任何特定科学理论，本发明者已意外地发现，以包括维生素E剂和多肽的核心或悬浮液经口施用的多肽例如经由胸导管和/或淋巴系统有效地递送到血流。因此，本公开提供了将多种多肽递送到胸导管、淋巴系统和/或血流的通用平台或系统，其包括本文所公开的组合物和方法。

本公开提供了例如将多肽递送到受试者、例如递送到受试者的胸导管、淋巴系统和/或血流的组合物和方法。在多个实施方案中，本公开的组合物或方法将多肽递送到血流且具有有益的药代动力学特征。在多个实施方案中，有益药代动力学特征可源自多肽经由淋巴系统、例如经由胸导管的分布。因此，本公开明确包括例如经由胸导管将多肽递送到淋巴系统的方法和组合物。

在多个实施方案中，多肽制剂的多肽的特征在于，其在多个样品、系统和/或多肽分子中(例如在将多肽制剂口服施用于每一受试者后的多个受试者中)具有至少15小时的中值、平均或众数半衰期，任选地其中半衰期为至少20小时、25小时、30小时、35小时、40小时、45小时、50小时、55小时、60小时或更长时间，任选地其中中值、平均或众数半衰期在下限为30小时、35小时、40小时、45小时或50小时且上限为35小时、40小时、45小时、50小时、55小时、60小时或更长时间的范围内。在多个实施方案中，在向受试者口服施用本公开的多肽制剂后，多肽制剂的多肽具有至少15小时的半衰期，任选地其中半衰期为至少20小时、25小时、30小时、35小时、40小时、45小时、50小时、55小时或60小时或更长时间，任选地其中半衰期在下限为30小时、35小时、40小时、45小时或50小时且上限为35小时、40小时、45小时、50小时、55小时、60小时或更长时间的范围内。

在多个实施方案中，多肽制剂的多肽的特征在于，其在多个样品、系统和/或多肽分子中(例如在将多肽制剂口服施用于每一受试者后的多个受试者中)的中值、平均或众数半衰期比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的中值、平均或众数半衰期大至少10％，任选地其中多肽制剂的多肽(例如在口服施用后)的中值、平均或众数半衰期比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的中值、平均或众数半衰期大至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、2倍、3倍或4倍。在多个实施方案中，在向受试者口服施用多肽制剂后，多肽制剂的多肽的半衰期比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的半衰期大至少10％，任选地其中多肽制剂的多肽在口服施用于受试者后的半衰期比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的半衰期大至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、2倍、3倍或4倍。

在多个实施方案中，多肽制剂的多肽的特征在于，其在多个样品、系统和/或多肽分子中(例如在将多肽制剂口服施用于每一受试者后的多个受试者中)的中值、平均或众数T_max比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的中值、平均或众数T_max大至少10％，任选地其中多肽制剂的多肽(例如在口服施用后)的中值、平均或众数T_max比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的中值、平均或众数T_max大至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、2倍、3倍或4倍、5倍、10倍或20倍。在多个实施方案中，在向受试者口服施用多肽制剂后，多肽制剂的多肽的T_max比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的T_max大至少10％，任选地其中多肽制剂的多肽在口服施用于受试者后的T_max比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的T_max大至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、2倍、3倍或4倍、5倍、10倍或20倍。

在多个实施方案中，多肽制剂的多肽的特征在于，其在多个样品、系统和/或多肽分子中(例如在将多肽制剂口服施用于每一受试者后的多个受试者中)的中值、平均或众数生物利用度比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的中值、平均或众数生物利用度大至少1％，任选地其中多肽制剂的多肽(例如在口服施用后)的中值、平均或众数生物利用度比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的中值、平均或众数生物利用度大至少1％、1.5％、2％、3％、4％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、2倍、3倍、4倍或5倍。在多个实施方案中，在向受试者口服施用多肽制剂后，多肽制剂的多肽的生物利用度比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的生物利用度大至少1％，任选地其中多肽制剂的多肽在口服施用于受试者后的生物利用度比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的生物利用度大至少1％、1.5％、2％、3％、4％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、2倍、3倍、4倍或5倍。在多个实施方案中，多肽制剂的多肽的特征在于，其在多个样品、系统和/或多肽分子中(例如在将多肽制剂口服施用于每一受试者后的多个受试者中)的中值、平均或众数生物利用度为至少1％，例如至少1％、1.5％、2％、3％、4％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％。

在多个实施方案中，多肽制剂的多肽的特征在于，其在多个样品、系统和/或多肽分子中(例如在将多肽制剂口服施用于每一受试者后的多个受试者中)的中值、平均或众数C_max比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的中值、平均或众数C_max小至少10％，任选地其中多肽制剂的多肽(例如在口服施用后)的中值、平均或众数C_max比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的中值、平均或众数C_max小至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。在多个实施方案中，在向受试者口服施用多肽制剂后，多肽制剂的多肽的C_max比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的C_max小至少10％，任选地其中多肽制剂的多肽在口服施用于受试者后的C_max比通过向参考注射(例如皮下施用)多肽(例如根据多肽的标准护理施用途径)达成的C_max小至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。

在多个实施方案中，本公开的方法可包括将本公开的组合物施用于有需要的受试者，其中组合物包括用于治疗受试者所患疾病或疾患的多肽。

本文还公开了治疗哺乳动物的疾病或病症的方法，其包括向哺乳动物施用包括治疗有效量的多肽的本公开的组合物，且其中制剂还包括药学上可接受的降粘剂、聚集减少剂或如上文所述的其它添加剂；且其中治疗制剂可有效地治疗疾病或病症。在一些实施方案中，治疗制剂与参考制剂相比具有改良的稳定性。在一些实施方案中，赋形剂化合物是基本上纯的。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测癌症，例如乳腺癌、胃癌、非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin’sLymphoma)、尿路上皮癌和实体瘤、转移性结直肠癌、非鳞状非小细胞肺癌、转移性乳腺癌、霍奇金淋巴瘤、胆管癌、急性髓系白血病、前列腺癌、多发性骨髓瘤、骨实体瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌、急性髓性白血病、转移性黑色素瘤、转移性鳞状非小细胞癌、间变型星形细胞瘤；脑癌、神经胶母细胞瘤、神经胶质瘤、头颈癌、默克细胞癌(Merkel cell carcinoma)、鼻咽癌、食管癌、肝细胞癌、难治性神经母细胞瘤、骨肉瘤、腹膜癌、输卵管癌、间皮瘤、转移性黑色素瘤、肾细胞癌、NR-LU-10癌、狼疮、慢性淋巴细胞性白血病、软组织肉瘤、卵巢癌、膀胱癌、食道癌、胃鼻咽癌、肾上腺皮质癌、HER2阳性乳腺癌、腺癌、肉芽肿性多血管炎(GPA)、显微多血管炎、特发性肺纤维化、局灶性节段性肾小球硬化症、泌乳素瘤和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测自身免疫疾病，例如类风湿性关节炎(RA)、骨关节炎、青少年特发性关节炎(JIA)、牛皮癣关节炎(PsA)、强直性脊柱炎(AS)、克罗恩病(Crohn’s Disease，CD)、溃疡性结肠炎(UC)、斑块状牛皮癣(Ps)、全身性红斑狼疮、狼疮性肾炎、家族性寒冷型自身炎症综合征(FCAS)、舍格伦病(Sjogren's syndrome)和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测另一自身免疫相关病症，例如白血球减少症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)、非典型溶血性尿毒综合征(aHUS)、血栓性微血管病(TMA)、炎症性肠病、溃疡性结肠炎和移植排斥、手术相关的危及生命的不受控出血和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测感染性疾病，如难养芽孢梭菌(Clostridium difficile)感染、呼吸道合胞病毒(RSV)疾病、炭疽、流感病毒感染、流行性感冒病毒感染、乙型肝炎病毒感染、狂犬病病毒(Rabies virus)感染、侵袭性念珠菌(Candida)感染、细菌性败血性休克、HIV感染、医院获得性肺炎、葡萄球菌感染(Staphylococcal infection)、引起腹泻和HUS(溶血性尿毒综合征)的STEC(产志贺样毒素(Shiga-like toxin)大肠杆菌(Escherichia coli)或大肠杆菌(E.coli)血清型O121)感染、巨细胞病毒、肉毒中毒、埃博拉病毒(Ebola Virus)和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测心血管疾病，例如心脏缺血性并发症、经皮冠状动脉介入、急性心肌梗塞、肺栓塞、深静脉血栓形成、动脉血栓形成或栓塞、动静脉套管闭塞、血小板减少症伴慢性免疫性(特发性)血小板减少紫斑症(ITP)和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测眼部病症，例如年龄相关性黄斑变性(AMD)、黄斑水肿、视网膜静脉阻塞(RVO)、糖尿病性黄斑水肿、视神经脊髓炎和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测呼吸病症，例如哮喘、慢性特发性荨麻疹、急性支气管痉挛或哮喘持续状态、慢性阻塞性肺病和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测代谢病症，如高脂血症、1型和2型糖尿病、高胆固醇血症、血脂异常和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测遗传病症，如甲型和乙型血友病、普拉德-威利综合征(Prader-Willi syndrome)、特纳综合征(Turnersyndrome)、冷吡啉相关周期性综合征(CAPS)、穆-韦综合征(Muckle-Wells Syndrome，MWS)、X连锁低磷血症、镰状细胞疼痛危象和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测骨相关疾病，如骨质疏松症、再生障碍性贫血和它们的组合。

在一些实施方案中，本公开组合物的治疗用途可包括治疗和/或检测其它病症，包括去除毒液；阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease)、背痛(坐骨神经痛)、偏头痛、异位性皮炎、杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy)、肝纤维化、囊性纤维化、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)感染、呼吸机相关肺炎和它们的组合。

在多个实施方案中，本公开提供了制造本公开的制剂的方法，其包括例如以下步骤：(1)制备核心，其包括无定形多肽组合物或结晶多肽组合物和包括维生素E剂的药学上可接受的载体，和(2)将核心囊封于药学上可接受的胶囊中。在多个实施方案中，本公开提供了制造本公开的制剂的方法，其包括例如以下步骤：(1)使多肽结晶以产生无定形多肽组合物或结晶多肽组合物；(2)制备核心，其包括结晶多肽或无定形多肽组合物和包括维生素E剂的药学上可接受的载体，和(3)将核心囊封于药学上可接受的胶囊中。

实施例

以下实施例展示了用于口服施用多肽的方法和组合物，其包括多肽和维生素E剂。以下实施例进一步展示了本公开的口服制剂的优点，包括与通过注射施用的相同多肽的参考液体制剂相比改良的半衰期和生物利用度。

本实施例提供了包括多肽(为结晶多肽或无定形多肽)和维生素E剂的口服制剂的配制和测试。本实施例利用分批结晶来制造结晶多肽组合物。如本领域的技术人员根据本公开应了解，晶体的具体制造方法、大小、大小分布、形状和形状分布并非根据本文所提供的方法和组合物成功配制多肽的必要特征。本实施例明确展示，可有利地制造包括无定形多肽或结晶多肽的本公开的口服制剂。

实施例1：曲妥珠单抗的结晶

本实施例展示了用于如本文所公开的口服制剂的结晶曲妥珠单抗的形成。曲妥珠单抗是在市面上以(Roche)出售的人源化单克隆抗体。曲妥珠单抗是IgG1κ抗体，其含有人类框架区和与HER2结合的鼠类抗体(4D5)的互补决定区。曲妥珠单抗已广泛地用于治疗过表达表皮生长因子受体2蛋白HER2的细胞外结构域的乳腺癌。本实施例包括以下认识：曲妥珠单抗是口服制剂将有利的多肽的例示。

曲妥珠单抗在其原始440mg瓶中以无菌冻干粉末储存，随后溶解于5ml无菌水中。所溶解曲妥珠单抗溶液包括88mg/ml曲妥珠单抗、39.6mg L-组氨酸HCl、25.6mg L-组氨酸、1600mgα,α-海藻糖二水合物和7.2mg聚山梨醇酯20，USP。

为了产生曲妥珠单抗微粒，将曲妥珠单抗(88mg/ml)于含有3.96mg/ml L-组氨酸HCl、2.56mg/ml L-组氨酸、160mg/mlα,α-海藻糖二水合物和0.72mg/ml聚山梨醇酯20，USP的缓冲液中的500μl等份试样与含有20％PEG 300、10％PEG 8000、10％甘油、100mM Tris(pH8.5)的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中曲妥珠单抗的最终浓度是29.33mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得曲妥珠单抗微粒。(图1)。95％的输入曲妥珠单抗通过该方法形成微粒。

实施例2：利拉鲁肽的结晶

本实施例展示了用于如本文所公开的口服制剂的结晶利拉鲁肽的形成。利拉鲁肽以商标名(Novo Nordisk)出售。利拉鲁肽是使用重组技术制造的人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的合成类似物且用作GLP-1受体激动剂。利拉鲁肽与天然人GLP-1为97％同源，在位置34处将精氨酸取代为赖氨酸。利拉鲁肽包括在肽前体的位置26的剩余赖氨酸残基上具有谷氨酸间隔体的C-16脂肪酸(棕榈酸)。利拉鲁肽的治疗作用包括增加胰岛素从胰腺释放和减少过量胰高血糖素释放。本实施例包括以下认识：利拉鲁肽是口服制剂将有利的多肽的例示。

利拉鲁肽半衰期是治疗用途中的重要考虑因素。内源GLP-1因被到处存在的酶二肽基肽酶-4(DPP4)和中性肽链内切酶(NEP)降解而具有1.5-2分钟的血浆半衰期。肌内注射后的半衰期为约半小时，因此即使以这种方式施用，其作为治疗剂的用途仍然有限。GLP-1的代谢活性形式是内源GLP-1-(7-36)NH₂和更罕见的GLP-1-(7-37)。利拉鲁肽作用的延长通过将脂肪酸分子连接在GLP-1-(7-37)分子的一个位置、从而使其能够自我缔合和结合至白蛋白来达成。活性GLP-1随后以缓慢恒定的速率从白蛋白释放。

为用于本实施例中，利拉鲁肽以澄清、无色或几乎无色的溶液VICTOZA形式获取。每1mL VICTOZA溶液含有6mg利拉鲁肽和以下无活性成分：磷酸二钠二水合物，1.42mg；丙二醇，14mg；苯酚，5.5mg；和注射用水。每一预填充笔含有等效于18mg利拉鲁肽(无水游离碱)的3mL VICTOZA溶液。

为了产生利拉鲁肽微粒，将利拉鲁肽对水透析24hr，更换三次并冻干以获得干燥粉末。然后将利拉鲁肽的冻干粉末以80mg/mL的浓度溶解于水中。然后使用下文所述的多种方法使利拉鲁肽等份试样结晶。

结晶方法1：将利拉鲁肽(80mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有1.34M硫酸铵、3.35％(v/v)PEG 400、0.05M硫酸镁、0.1M Tris碱/盐酸(pH 8.5)的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中利拉鲁肽的最终浓度是26.67mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得利拉鲁肽微粒。(图2)。75％的输入利拉鲁肽通过该方法形成微粒。

结晶方法2：将利拉鲁肽(80mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有35％(v/v)MPD、100mM Tris碱/盐酸(pH 7.0)、200mM氯化钠的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中利拉鲁肽的最终浓度是26.67mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得利拉鲁肽微粒。(图3)。85％的输入利拉鲁肽通过该方法形成微粒。

结晶方法3：将利拉鲁肽(80mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有1,000mM磷酸氢二铵、100mM柠檬酸钠/柠檬酸(pH 5.5)、200mM氯化钠的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中利拉鲁肽的最终浓度是26.67mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得利拉鲁肽微粒。(图4)。90％的输入利拉鲁肽通过该方法形成微粒。

结晶方法4：将利拉鲁肽(80mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有25％(w/v)PEG1500、100mM SPG缓冲液(pH 8.5)的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中利拉鲁肽的最终浓度是26.67mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得利拉鲁肽微粒。(图5)。85％的输入利拉鲁肽通过该方法形成微粒。

结晶方法5：将利拉鲁肽(80mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有40％(v/v)乙二醇、100mM MES/氢氧化钠(pH 6.0)、200mM乙酸锌的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中利拉鲁肽的最终浓度是26.67mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得利拉鲁肽微粒。(图6)。75％的输入利拉鲁肽通过该方法形成微粒。

结晶方法6：将利拉鲁肽(80mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有3M氯化钠、5％(v/v)MPD、0.1M氯化钙、0.1M咪唑/盐酸(pH 6.5)的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中利拉鲁肽的最终浓度是26.67mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得利拉鲁肽微粒。(图7)。80％的输入利拉鲁肽通过该方法形成微粒。

结晶方法7：将利拉鲁肽(80mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有0.429M氯化钠、9.9％(v/v)异丙醇、0.1M氯化钙、0.1M咪唑/盐酸(pH 6.5)的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中利拉鲁肽的最终浓度是26.67mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得利拉鲁肽微粒。(图8)。70％的输入利拉鲁肽通过该方法形成微粒。

结晶方法8：将利拉鲁肽(80mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有5.36％(v/v)MPD、0.67M磷酸氢二钾/磷酸二氢钠(pH 8.5)的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中利拉鲁肽的最终浓度是26.67mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得利拉鲁肽微粒。(图9)。85％的输入利拉鲁肽通过该方法形成微粒。

实施例3：胰岛素的结晶

本实施例展示了用于如本文所公开的口服制剂的结晶胰岛素的形成。R是结构与在大肠杆菌细菌的非致病实验室菌株中经由rDNA技术合成的人胰岛素相同的多肽激素。Humulin R指示为饮食和锻炼的辅助以改良患有1型和2型糖尿病的成人和儿童的血糖控制。Humulin R在皮下使用时通常在饭前给予三次或更多次。本实施例包括以下认识：胰岛素是口服制剂将有利的多肽的例示。

本实施例利用Humulin R(胰岛素(人类重组))U-100(100单位/mL)。为了产生胰岛素微粒，使用0.01N NaOH如下对胰岛素(Sigma Chemical Company)脱盐。将62mg胰岛素溶解于4mL 0.01N HCl(pH2.0)中。通过每次添加10uL的0.1N NaOH直到多肽发生沉淀来增加多肽溶液的pH。收集沉淀的多肽并在5mL水中洗涤两次，每次单独收集水。向收集的水中添加0.1N NaOH以从水收集溶解的多肽。最后，将所有沉淀物溶解于1mL 0.01N HCl中。然后使用下文所述的多种方法使胰岛素等份试样结晶。

结晶方法1：将胰岛素(约62mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有40％(v/v)PEG300、100mM二甲基胂酸钠/盐酸(pH 6.5)、200mM乙酸钙的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中胰岛素的最终浓度是15.5mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得胰岛素微粒。(图10)。90％的输入胰岛素通过该方法形成微粒。

结晶方法2：将胰岛素(约62mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有40％(v/v)PEG600、100mM二甲基胂酸钠/盐酸(pH 6.5)、200mM乙酸钙的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中胰岛素的最终浓度是15.5mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得胰岛素微粒。(图11)。90％的输入胰岛素通过该方法形成微粒。

结晶方法3：将胰岛素(约62mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有40％(v/v)1,2-丙二醇、100mM乙酸钠/乙酸(pH 4.5)、50mM乙酸钙的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中胰岛素的最终浓度是15.5mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得胰岛素微粒。(图12)。90％的输入胰岛素通过该方法形成微粒。

结晶方法4：将胰岛素(约62mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有14.4％(w/v)PEG 8000、80mM二甲基胂酸钠/盐酸(pH 6.5)、160mM乙酸钙、20％(v/v)甘油的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中胰岛素的最终浓度是15.5mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得胰岛素微粒。(图13)。90％的输入胰岛素通过该方法形成微粒。

结晶方法5：将胰岛素(约62mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有20％(w/v)PEG3000、100mM Tris碱/盐酸(pH 7.0)、200mM乙酸钙的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中胰岛素的最终浓度是15.5mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得胰岛素微粒。(图14)。90％的输入胰岛素通过该方法形成微粒。

结晶方法6：将胰岛素(约62mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有20％(w/v)PEG1000、100mM二甲基胂酸钠/盐酸(pH 6.5)、200mM氯化镁的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中胰岛素的最终浓度是15.5mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得胰岛素微粒。(图15)。90％的输入胰岛素通过该方法形成微粒。

结晶方法7：将胰岛素(约62mg/ml)于水中的500μl等份试样与含有10％(v/v)2-丙醇、100mM MES/氢氧化钠(pH 6.0)、200mM乙酸钙的1,000μl试剂混合，且在室温下孵育过夜。溶液中胰岛素的最终浓度是15.5mg/ml。然后使用涡旋混合该混合物且在室温下静置。在第二天获得胰岛素微粒。(图16)。90％的输入胰岛素通过该方法形成微粒。

实施例4：新西兰白兔中含有维生素E的利拉鲁肽制剂的药代动力学研究

本实施例展示了例示本文所公开口服制剂的利拉鲁肽口服制剂具有治疗有效的药代动力学概况，例如与不经肠施用同一多肽相比具有有利的性质。

本实施例包括如下制备的结晶多肽的口服制剂：将在商业上获得的Nordisk(3mL溶液含有6mg/mL利拉鲁肽、5.5mg苯酚、氢氧化钠、盐酸和注射用水)在4℃下对水透析24hr且更换三次。然后根据实施例2下所提及的程序使用透析的利拉鲁肽来制备微粒。然后将微粒利拉鲁肽在用冷异丙醇洗涤后冻干。然后将冻干的利拉鲁肽(表2下所提及的剂量)转移到含有50μL维生素E(Sigma Chemical Company)的1号透明明胶胶囊。然后将胶囊储存在4℃下直到进一步使用。

在称重为1.5kg的雄性新西兰白兔中实施5天的药代动力学分析。实验设计显示于表2中。兔维持含有碳酸氢钠的饮食(20gm普通饮食+3gm碳酸氢钠，通过添加水制备小丸/饮食球)。在给药前第-3天至第0天动物维持上述饮食，然后仅在实验时间段期间维持普通正常饮食。通过LRT ELISA试剂盒根据ABBEXA方案分析在不同时间点收集的血浆样品。该试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附分析技术。将抗体抗利拉鲁肽预包被到96孔板上。将标准物、测试样品和生物素缀合试剂添加到孔中并孵育。竞争性抑制反应发生在预包被抗体上的生物素标记的LRT与未经标记的LRT之间。然后添加HRP缀合试剂，且孵育整个板。在每一阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。使用TMB底物量化HRP酶反应。添加TMB底物后，仅含有足够LRT的孔将产生蓝色产物，该产物随后在添加酸性终止溶液后变成黄色。黄色的强度与板上结合的LRT的量成反比。在微量板读数器上在450nm下以分光光度计法测量OD，可根据其计算LRT的浓度。

在血浆中使用特定酶联免疫吸附分析(ELISA)来分析利拉鲁肽。使用非分室方法使用PK Solutions软件测定药代动力学终点。使用梯形法则对观察到的浓度估算AUC。将每一利拉鲁肽剂量的C_max导出为所有有效浓度的最大值，然后t_max确定为对应于C_max的时间点。通过浓度-时间曲线末端部分的对数线性回归估计终末消除速率常数(λ_z)，然后将t_1/2计算为t_1/2＝ln2/λ_z。

表3和图17中的数据展示不同时间点的利拉鲁肽的平均血浆浓度。与SC相比，经口施用的利拉鲁肽制剂显示39％的生物利用度。

表2.药代动力学分析的实验设计

表3.药代动力学性质

实施例5：比格犬(Beagle Dog)中含有维生素E的利拉鲁肽制剂的药代动力学研究

本实施例展示了例示本文所公开口服制剂的利拉鲁肽口服制剂具有治疗有效的药代动力学概况，例如与不经肠施用同一多肽相比具有有利的性质。

本实施例包括如下制备的结晶多肽的口服制剂：将在商业上获得的Nordisk(3mL溶液含有6mg/mL利拉鲁肽、5.5mg苯酚、氢氧化钠、盐酸和注射用水)在4℃下对水透析24hr且更换三次。然后根据实施例2下所提及的程序处理透析的利拉鲁肽来制备微粒。然后在用冷异丙醇洗涤后将微粒利拉鲁肽冻干。然后将冻干的利拉鲁肽(表4下所提及的剂量)转移到含有50μL维生素E(Sigma Chemical Company)的1号透明明胶胶囊。然后将胶囊储存在4℃下直到进一步使用。

在称重为15kg的比格犬中实施5天的药代动力学分析。实验设计显示于表4中。通过LRT ELISA试剂盒根据ABBEXA方案分析在不同时间点收集的血浆样品。该试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附分析技术。将抗体抗利拉鲁肽预包被到96孔板上。将标准物、测试样品和生物素缀合试剂添加到孔中且孵育。竞争性抑制反应发生在预包被抗体上的生物素标记的LRT与未经标记的LRT之间。然后添加HRP缀合试剂，且孵育整个板。在每一阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。使用TMB底物量化HRP酶反应。添加TMB底物后，仅含有足够LRT的孔将产生蓝色产物，该产物随后在添加酸性终止溶液后变成黄色。黄色的强度与板上结合的LRT的量成反比。在微量板读数器上在450nm下以分光光度计法测量OD，可根据其计算LRT的浓度。

表5和图18中的数据展示不同时间点的利拉鲁肽的平均血浆浓度。与SC对照(SC，1.5mg，其中第二次注射在第一次注射后96hr施用)相比，经口施用的利拉鲁肽制剂(15mg于胶囊制剂中)显示19％的生物利用度。

在血浆中使用特定酶联免疫吸附分析(ELISA)来分析利拉鲁肽。使用非分室方法使用PK Solutions软件测定药代动力学终点。使用梯形法则对观察到的浓度估算AUC。将每一利拉鲁肽剂量的C_max导出为所有有效浓度的最大值，然后t_max确定为对应于C_max的时间点。通过浓度-时间曲线末端部分的对数线性回归估计终末消除速率常数(λ_z)，然后将t_1/2计算为t_1/2＝ln2/λ_z。

表4：药代动力学分析的实验设计

表5.药代动力学性质

实施例6：小型猪中含有维生素E的利拉鲁肽制剂的药代动力学研究

本实施例展示了例示本文所公开口服制剂的利拉鲁肽口服制剂具有治疗有效的药代动力学概况，例如与不经肠施用同一多肽相比具有有利的性质。

本实施例包括如下制备的结晶多肽的口服制剂：将在商业上获得的Nordisk(3mL溶液含有6mg/mL利拉鲁肽、5.5mg苯酚、氢氧化钠、盐酸和注射用水)在4℃下对水透析24hr且更换三次。然后根据实施例2下所提及的程序处理透析的利拉鲁肽来制备微粒。然后将微粒利拉鲁肽在用冷异丙醇洗涤后冻干。然后将冻干的利拉鲁肽(表6下所提及的剂量)转移到含有50μL维生素E(Sigma Chemical Company)的1号透明明胶胶囊。然后将胶囊储存在4℃下直到进一步使用。

在称重为12kg的小型猪中实施5天的药代动力学分析。实验设计显示于表6中。通过LRT ELISA试剂盒根据ABBEXA方案分析在不同时间点收集的血浆样品。该试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附分析技术。将抗体抗利拉鲁肽预包被到96孔板上。将标准物、测试样品和生物素缀合试剂添加到孔中且孵育。竞争性抑制反应发生在预包被抗体上的生物素标记的LRT与未经标记的LRT之间。然后添加HRP缀合试剂，且孵育整个板。在每一阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。使用TMB底物量化HRP酶反应。添加TMB底物后，仅含有足够LRT的孔将产生蓝色产物，该产物随后在添加酸性终止溶液后变成黄色。黄色的强度与板上结合的LRT的量成反比。在微量板读数器上在450nm下以分光光度计法测量OD，可根据其计算LRT的浓度。

表7和图19中的数据展示不同时间点的利拉鲁肽的平均血浆浓度。与SC(0.0625mg)相比，经口施用的利拉鲁肽制剂(1.250mg于胶囊制剂中)显示38％的生物利用度。

在血浆中使用特定酶联免疫吸附分析(ELISA)来分析利拉鲁肽。使用非分室方法使用PK Solutions软件测定药代动力学终点。使用梯形法则对观察到的浓度估算AUC。将每一利拉鲁肽剂量的C_max导出为所有有效浓度的最大值，然后t_max确定为对应于C_max的时间点。通过浓度-时间曲线末端部分的对数线性回归估计终末消除速率常数(λ_z)，然后将t_1/2计算为t_1/2＝ln2/λ_z。

表6：药代动力学分析的实验设计

表7.药代动力学性质

实施例7：新西兰白兔中含有维生素E的曲妥珠单抗制剂的药代动力学研究

本实施例展示了例示本文所公开口服制剂的曲妥珠单抗口服制剂具有治疗有效的药代动力学概况，例如与不经肠施用同一多肽相比具有有利的性质。

本实施例包括如下制备的结晶多肽的口服制剂：将在商业上获得的曲妥珠单抗(冻干粉末含有440mg曲妥珠单抗、9.9mg L-组氨酸.HCl、6.4mg L-组氨酸、400mg的α,α,-海藻糖二水合物和1.8mg聚山梨醇酯20，USP；和20mL注射用水用于复原)在6mL注射用水中复原。然后根据实施例1下所提及的程序处理复原的曲妥珠单抗来制备微粒。然后用冷异丙醇洗涤微粒曲妥珠单抗。然后将曲妥珠单抗(表8下所提及的剂量)转移到含有50μL维生素E(Sigma Chemical Company)的00号透明明胶胶囊。然后将胶囊储存在4℃下直到进一步使用。

在称重为1.5kg的雄性新西兰白兔中实施14天的药代动力学分析。实验设计显示于表8中。兔维持含有碳酸氢钠的饮食(20gm普通饮食+3gm碳酸氢钠，通过添加水制备小丸/饮食球)。在给药前第-3天至第0天动物维持上述饮食，然后仅在实验时间段期间维持普通正常饮食。通过ELISA分析在不同时间点收集的血浆样品。简单地说，将MAXISORP NUNC免疫板用碳酸钠缓冲液(pH 9.6)中的2μg/mL抗曲妥珠单抗包被抗体(Abcam)在4℃下包被过夜。用洗涤缓冲液(PBS+0.01％Tween 20)洗涤包被的板。将洗涤后的板用封闭缓冲液(PBS+1％BSA)在RT下封闭3小时。将欲分析的血浆样品在PBS中稀释且与包被抗体一起孵育1小时，然后洗涤并添加山羊抗人IgG(Fc特异性)-过氧化物酶捕获抗体(Sigma)。使用TMB底物在450nm下进行检测。

结果

表9和图20中的数据展示不同时间点的曲妥珠单抗的平均血浆浓度。与IV(复原Herclon(Roche)瓶含有21mg/mL曲妥珠单抗、L-组氨酸盐酸盐、L-组氨酸、-海藻糖二水合物、聚山梨醇酯20和注射用水)相比，经口施用的曲妥珠单抗制剂显示26％的生物利用度。

在血浆中使用特定酶联免疫吸附分析(ELISA)来分析曲妥珠单抗。使用非分室方法使用PK Solutions软件测定药代动力学终点。使用梯形法则对观察到的浓度估算AUC。将每一曲妥珠单抗剂量的C_max导出为所有有效浓度的最大值，然后t_max确定为对应于C_max的时间点。通过浓度-时间曲线末端部分的对数线性回归估计终末消除速率常数(λ_z)，然后将t_1/2计算为t_1/2＝ln2/λ_z。

表8：药代动力学分析的实验设计

表9.药代动力学性质

实施例8：新西兰白兔中含有维生素E的曲妥珠单抗制剂的药代动力学研究

本实施例展示了例示本文所公开口服制剂的曲妥珠单抗口服制剂具有治疗有效的药代动力学概况，例如与不经肠施用同一多肽相比具有有利的性质。

本实施例包括如下制备的结晶多肽的口服制剂：将在商业上获得的曲妥珠单抗(冻干粉末含有440mg曲妥珠单抗、9.9mg L-组氨酸.HCl、6.4mg L-组氨酸、400mg的α,α,-海藻糖二水合物和1.8mg聚山梨醇酯20，USP；和20mL注射用水用于复原)在6mL注射用水中复原。然后根据实施例1下所提及的程序处理复原的曲妥珠单抗来制备微粒。然后将微粒曲妥珠单抗在用冷异丙醇洗涤后冻干。然后将冻干的曲妥珠单抗(表10下所提及的剂量)转移到含有50μL维生素E(Sigma Chemical Company)的00号透明明胶胶囊。然后将胶囊储存在4℃下直到进一步使用。

在称重为1.5kg的雄性新西兰白兔中实施5天的药代动力学分析。实验设计显示于表10中。兔维持含有碳酸氢钠的饮食(20gm普通饮食+3gm碳酸氢钠，通过添加水制备小丸/饮食球)。在给药前第-3天至第0天动物维持上述饮食，然后仅在实验时间段期间维持普通正常饮食。通过ELISA分析在不同时间点收集的血浆样品。简单地说，将MAXISORP NUNC免疫板用碳酸钠缓冲液(pH 9.6)中的2μg/mL抗曲妥珠单抗包被抗体(Abcam)在4℃下包被过夜。用洗涤缓冲液(PBS+0.01％Tween 20)洗涤包被的板。将洗涤后的板用封闭缓冲液(PBS+1％BSA)在RT下封闭3小时。将欲分析的血浆样品在PBS中稀释且与包被抗体一起孵育1小时，然后洗涤并添加山羊抗人IgG(Fc特异性)-过氧化物酶捕获抗体(Sigma)。使用TMB底物在450nm下进行检测。

表11和图21中的数据展示不同时间点的曲妥珠单抗的平均血浆浓度。与IV相比，经口施用的曲妥珠单抗制剂(Herclon-Roche-复原瓶含有21mg/mL曲妥珠单抗、L-组氨酸盐酸盐、L-组氨酸、-海藻糖二水合物、聚山梨醇酯20和注射用水)显示2％的生物利用度。在血浆中使用特定酶联免疫吸附分析(ELISA)来分析曲妥珠单抗。使用非分室方法使用PKSolutions软件测定药代动力学终点。使用梯形法则对观察到的浓度估算AUC。将每一曲妥珠单抗剂量的C_max导出为所有有效浓度的最大值，然后t_max确定为对应于C_max的时间点。通过浓度-时间曲线末端部分的对数线性回归估计终末消除速率常数(λ_z)，然后将t_1/2计算为t_1/2＝ln2/λ_z。

表10：药代动力学分析的实验设计

表11.药代动力学性质

实施例9：新西兰白兔中含有维生素E的胰岛素制剂的药代动力学研究

本实施例展示了例示本文所公开口服制剂的胰岛素口服制剂具有治疗有效的药代动力学概况，例如与不经肠施用同一多肽相比具有有利的性质。本实施例展示维生素E的胰岛素悬浮制剂，其证实肠溶制剂并非本公开制剂的有利应用所必需。

本实施例包括如下制备的结晶多肽的口服制剂：在商业上获得的常规型胰岛素Humulin R(Humulin R(胰岛素人类重组)U-100是无菌、澄清且无色的水溶液，其含有人胰岛素(rDNA来源)100单位/mL、丙三醇16mg/mL和间甲酚2.5mg/mL、内源锌(约0.015mg/100单位)和注射用水。pH为7.0至7.8。将胰岛素对水透析24hr且冻干。将冻干的胰岛素在稀酸中复原。然后根据实施例3下所提及的程序处理复原的胰岛素来制备微粒。然后将微粒胰岛素在用冷异丙醇洗涤后冻干。然后将冻干的胰岛素(表12下所提及的剂量)悬浮于500μL维生素E(Sigma Chemical Company)中。然后将样品储存在4℃下直到进一步使用。

在称重为1.5kg的雄性新西兰白兔中实施2天的药代动力学分析。实验设计显示于表12中。兔维持含有碳酸氢钠的饮食(20gm普通饮食+3gm碳酸氢钠，通过添加水制备小丸/饮食球)。在给药前第-3天至第0天动物维持上述饮食，然后仅在实验时间段期间维持普通正常饮食。经由可直到胃的G管进行胰岛素的口服递送。然后用10mL椰子油冲洗G管以去除粘到管壁的任何样品。通过ELISA分析在不同时间点收集的血浆样品。简单地说，将MAXISORP NUNC免疫板用碳酸钠缓冲液(pH 9.6)中的2μg/mL抗胰岛素包被抗体(CrystalChem)在4℃下包被过夜。用洗涤缓冲液(PBS+0.01％Tween20)洗涤包被的板。将洗涤后的板用封闭缓冲液(PBS+1％BSA)在RT下封闭3小时。将欲分析的血浆样品在PBS中稀释且与包被抗体一起孵育1小时，然后洗涤并添加山羊抗人IgG(Fc特异性)-过氧化物酶捕获抗体(Sigma)。使用TMB底物在450nm下进行检测。

表13和图22中的数据展示不同时间点的胰岛素的平均血浆浓度。与SC相比，经口施用的胰岛素制剂显示4％的生物利用度。在血浆中使用特定酶联免疫吸附分析(ELISA)来分析胰岛素。使用非分室方法使用PK Solutions软件测定药代动力学终点。使用梯形法则对观察到的浓度估算AUC。将每一胰岛素剂量的C_max导出为所有有效浓度的最大值，然后t_max确定为对应于C_max的时间点。通过浓度-时间曲线末端部分的对数线性回归估计终末消除速率常数(λ_z)，然后将t_1/2计算为t_1/2＝ln2/λ_z。

表12：药代动力学分析的实验设计

表13.药代动力学性质

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实施例10：新西兰白兔中曲妥珠单抗制剂的药代动力学研究

本实施例展示了与具有其它相似的药学上可接受的载体的制剂相比，曲妥珠单抗的口服制剂在与维生素E一起配制时具有明显的口服施用性质。本实施例展示维生素E的曲妥珠单抗悬浮制剂，其证实肠溶制剂并非本公开制剂的有利应用所必需。

本实施例包括如下制备的结晶多肽的口服制剂：将在商业上获得的曲妥珠单抗(冻干粉末含有440mg曲妥珠单抗、9.9mg L-组氨酸.HCl、6.4mg L-组氨酸、400mg的α,α,-海藻糖二水合物和1.8mg聚山梨醇酯20，USP；和20mL注射用水用于复原)在6mL注射用水中复原。然后如上述实施例中所述处理复原的曲妥珠单抗来制备微粒。然后用冷异丙醇洗涤微粒曲妥珠单抗。将微粒曲妥珠单抗的样品以21mg/mL悬浮于口服制剂的以下药学上可接受的载体中的任一者中：维生素E、椰子油、鱼肝油和酥油。

在称重为1.5kg的雄性新西兰白兔中实施14天的药代动力学分析。实验设计显示于表14中。如表14中所示经口施用每一口服制剂。又如表14(复原Herclon(Roche)瓶含有21mg/mL曲妥珠单抗、L-组氨酸盐酸盐、L-组氨酸、α,α,--海藻糖二水合物、聚山梨醇酯20和注射用水)中所示，通过皮下注射施用对照标准护理制剂(其不包括微粒或悬浮液)。兔维持含有碳酸氢钠的饮食(20gm普通饮食+3gm碳酸氢钠，通过添加水制备小丸/饮食球)。在给药前第-3天至第0天动物维持上述饮食，然后仅在实验时间段期间维持普通正常饮食。使用G管实施动物的口服给药。使用注射器使悬浮制剂通过G管。施用后用5mL椰子油洗涤管，然后用5mL水洗涤。

通过ELISA分析在不同时间点收集的血浆样品。简单地说，将MAXISORP NUNC免疫板用碳酸钠缓冲液(pH 9.6)中的2μg/mL抗曲妥珠单抗包被抗体(Abcam)在4℃下包被过夜。用洗涤缓冲液(PBS+0.01％Tween 20)洗涤包被的板。将洗涤后的板用封闭缓冲液(PBS+1％BSA)在RT下封闭3小时。将欲分析的血浆样品在PBS中稀释且与包被抗体一起孵育1小时，然后洗涤并添加山羊抗人IgG(Fc特异性)-过氧化物酶捕获抗体(Sigma)。使用TMB底物在450nm下进行检测。

表14.药代动力学分析的实验设计

结果

图23中的数据展示不同时间点的曲妥珠单抗的平均血浆浓度。椰子油、酥油或鱼肝油在任一时间点皆未展示高于0的显著血浆浓度，而皮下施用的商业“创新”制剂和口服维生素E制剂皆产生实质性血浆浓度(例如对于维生素E口服制剂在100小时为约50μg/mL，且对于皮下施用的商业“创新”制剂在100小时为约150μg/mL)。所述数据令人惊奇且出人意料地展示，与各种其它相似制剂不同，施用本公开的维生素E口服制剂在治疗和商业上是可行的。

实施例11：新西兰白兔中含有维生素E的利拉鲁肽制剂(无定形)的药代动力学研究

本实施例展示了包括无定形利拉鲁肽且例示本公开的口服制剂的口服制剂具有治疗有效的药代动力学概况，例如与不经肠施用同一多肽相比具有有利的性质。

本实施例包括如下制备的无定形利拉鲁肽的口服制剂：将呈无定形形式的市售冻干原料药利拉鲁肽粉末化且通过25微米筛以获得小于25微米的粒度。然后将冻干的利拉鲁肽(表15下所提及的剂量)转移到含有100μL维生素E(Sigma Chemical Company)和50μL小麦胚芽油的00号肠溶包衣胶囊。然后将胶囊储存在4℃下直到进一步使用。

在称重为1.5kg的雄性新西兰白兔中实施5天的药代动力学分析。实验设计显示于表15中。兔维持正常饮食。通过利拉鲁肽(LRT)ELISA试剂盒根据ABBEXA方案分析在不同时间点收集的血浆样品。该试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附分析技术。将抗体抗利拉鲁肽预包被到96孔板上。将标准物、测试样品和生物素缀合试剂添加到孔中且孵育。竞争性抑制反应发生在预包被抗体上的生物素标记的LRT与未经标记的LRT之间。然后添加HRP缀合试剂，且孵育整个板。在每一阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。使用TMB底物量化HRP酶反应。添加TMB底物后，仅含有足够LRT的孔将产生蓝色产物，该产物随后在添加酸性终止溶液后变成黄色。黄色的强度与板上结合的LRT的量成反比。在微量板读数器上在450nm下以分光光度计法测量OD，可根据其计算LRT的浓度。

表15.药代动力学分析的实验设计

本实施例的利拉鲁肽ELISA方案阐述于下文中。使如下试剂在使用前达到室温：(1)检测试剂A和B：使用分析稀释剂A和B分别将检测试剂A和B稀释到1:100的比率；(2)洗涤缓冲液(30×)：稀释：为了制得洗涤缓冲液(1×)，将20ml洗涤缓冲液(30×)添加到580mlDI水中。这是工作溶液；(3)标准利拉鲁肽(1ml)：将标准瓶短暂离心且将1ml样品稀释剂添加到瓶中以获得1000pg/ml，并进一步连续稀释以获得333.33pg/ml、111.1pg/ml、37.03pg/ml、12.34pg/ml；和(4)TMB底物溶液。一旦解冻，便立即将试剂适当等分且冷冻-解冻不超过2次。所有试剂在即将使用时进行稀释。适用于小体积，在稀释前，将瓶快速旋转以使其沉降在所提供的瓶的底部。根据以下步骤实施ELISA：(1)向每一预先指定的孔中添加50μl标准物、空白或样品；(2)将50μl检测试剂A工作溶液立即添加到每孔中且用板密封器覆盖。轻轻搅动板以确保充分混合，且在37℃下孵育1小时；(3)使用多通道吸量管吸出每孔的液体且通过添加约350μl洗涤缓冲液洗涤3次；(4)在完全吸出之前允许每一洗涤物静置1-2分钟；(5)在末次洗涤后，吸出任何剩余的洗涤缓冲液，然后将板吸到干净的吸水纸上；(6)向所有孔中添加100μl检测试剂B工作溶液且轻轻搅动以确保充分混合，且用新板密封器覆盖板并在37℃下孵育30分钟；(7)使用多通道吸量管吸出每孔的液体且通过添加约350μl洗涤缓冲液洗涤3次；(8)将90μl TMB底物溶液添加到每孔中且将板在37℃下在黑暗中孵育10-20min；(9)孵育后，将50μl终止溶液以与TMB底物溶液相同的顺序和时间添加到每孔中，且轻轻搅动板；(10)立即使用设定为450nm的微量板读数器读取每孔的光学密度(OD值)。结果提供于表16-27中。

表16：新西兰白兔中口服利拉鲁肽制剂的药代动力学

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表17：新西兰白兔中口服利拉鲁肽制剂的药代动力学

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表18：新西兰白兔中口服利拉鲁肽制剂的药代动力学的汇总表

向新西兰白兔施用口服制剂后利拉鲁肽的浓度于图24中制成图表。

表19：新西兰白兔中口服利拉鲁肽制剂的药代动力学

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表20：新西兰白兔中静脉内(IV)利拉鲁肽制剂的药代动力学

表21：新西兰白兔中静脉内(IV)利拉鲁肽制剂的药代动力学

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表22：新西兰白兔中静脉内(IV)利拉鲁肽制剂的药代动力学的汇总表

向新西兰白兔施用静脉内制剂后利拉鲁肽的浓度于图25中制成图表。

表23：新西兰白兔中静脉内(IV)利拉鲁肽制剂的药代动力学

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表24：新西兰白兔中皮下(S.C)利拉鲁肽制剂的药代动力学

表25：新西兰白兔中皮下(S.C)利拉鲁肽制剂的药代动力学

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表26：新西兰白兔中皮下(S.C)利拉鲁肽制剂的药代动力学的汇总表

向新西兰白兔施用皮下制剂后利拉鲁肽的浓度于图26中制成图表。

表27：新西兰白兔中皮下(S.C)利拉鲁肽制剂的药代动力学

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其它实施方案

尽管我们已经阐述了多个实施方案，但应明了，我们的基本公开内容和实施例可提供使用本文所述的组合物和方法或本文所述的组合物和方法涵盖的其它实施方案。因此，应了解，本发明的范围将由可根据本公开理解的内容和所附权利要求书来定义，而非由借助实例表示的特定实施方案来定义。

本文所引用的所有参考文献皆以引用的方式并入本文中。

Claims (23)

1.一种用于口服递送的多肽制剂，所述多肽制剂包含(i)结晶多肽组合物或无定形多肽组合物，和(ii)包含维生素E剂的药学上可接受的载体，

任选地其中(i)所述多肽制剂是囊封多肽制剂，所述囊封多肽制剂包含核心和药学上可接受的胶囊，其中所述核心包含所述结晶多肽组合物或所述无定形多肽组合物和所述药学上可接受的载体，或(ii)所述多肽制剂是悬浮制剂。

2.一种将多肽递送到受试者血流的方法，所述方法包括向所述受试者经口施用多肽制剂，所述多肽制剂包含(i)结晶多肽组合物或无定形多肽组合物，和(ii)包含维生素E剂的药学上可接受的载体，

任选地其中(i)所述多肽制剂是囊封多肽制剂，所述囊封多肽制剂包含核心和药学上可接受的胶囊，其中所述核心包含所述结晶多肽组合物或所述无定形多肽组合物和所述药学上可接受的载体，或(ii)所述多肽制剂是悬浮制剂。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述多肽经由淋巴系统递送到所述血流，任选地其中所述多肽经由胸导管递送到所述血流。

4.一种将多肽递送到受试者胸导管或淋巴的方法，所述方法包括向所述受试者经口施用多肽制剂，所述多肽制剂包含(i)结晶多肽组合物或无定形多肽组合物，和(ii)包含维生素E剂的药学上可接受的载体，

任选地其中(i)所述多肽制剂是囊封多肽制剂，所述囊封多肽制剂包含核心和药学上可接受的胶囊，其中所述核心包含所述结晶多肽组合物或所述无定形多肽组合物和所述药学上可接受的载体，或(ii)所述多肽制剂是悬浮制剂。

5.一种制造用于口服递送的囊封多肽制剂的方法，所述方法包括将核心囊封于胶囊内，所述核心包含(i)无定形多肽组合物或结晶多肽组合物，和(ii)包含维生素E剂的药学上可接受的载体。

6.一种制造用于口服递送的多肽悬浮液的方法，所述方法包括将(i)结晶多肽组合物或无定形多肽组合物悬浮于(ii)包含维生素E剂的药学上可接受的载体中。

7.如权利要求1-6所述的多肽制剂或方法，其中所述多肽包含：

(i)治疗性多肽；

(ii)抗体剂或其片段；

(iii)单克隆抗体或其片段；

(iv)融合多肽；

(v)免疫球蛋白；

(vi)酶；或

(vii)(i)-(vi)中任一者的类似物和/或修饰形式，任选地其中所述多肽通过以下中的一者或多者修饰：聚乙二醇化、乙酰化、酰胺化、脂化、甲基化、磷酸化、糖基化、糖化、硫酸化、甘露糖化、亚硝基化、酰化、棕榈酰化、异戊二烯化、脂肪酸或它们的组合。

8.如权利要求1-7中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述多肽选自抗体(例如抗HER2抗体，例如曲妥珠单抗)、GLP-1受体激动剂、人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)或其类似物(例如合成类似物，例如利拉鲁肽)、甲状旁腺激素(例如重组人甲状旁腺激素类似物，例如特立帕肽)、胰岛素(例如)、利妥昔单抗、贝伐珠单抗、西妥昔单抗、依那西普、英夫利昔单抗、阿加糖酶β、阿加糖酶α、伊米苷酶、阿利苷酶α、维拉苷酶α、阿糖脑苷酶、西贝利帕酶α、拉罗尼酶、艾杜硫酶、艾罗硫酶α、加硫酶、胰脂肪酶、沙丙蝶呤(sapropterin)、艾利司他(eliglustat)、加硫酶、艾司福酶α、培格力酶、艾拉培加酶、沙可罗酶、因子I、因子II、因子III、因子IV、因子V、因子VI、因子VII、因子VIII、因子IX、因子X、因子XI、因子XII、因子XIII、冯·维勒布兰德因子、依那西普、阿柏西普、列洛西普、阿法西普、罗米司亭、阿巴西普/贝拉西普和/或地尼白介素或它们的类似物或衍生物，任选地其中所述多肽是天然、合成或工程化的。

9.如权利要求1-8中任一项所述的多肽制剂或方法，

其中所述多肽的分子量介于约50Da与25kDa之间，任选地其中所述分子量介于约50Da与约1kDa之间、介于约50Da与约2kDa之间、介于约50Da与约3kDa之间、介于约50Da与约4kDa之间、介于约50Da与约5kDa之间、介于约50Da与约10kDa之间、介于约50Da与约15kDa之间、或介于约50Da与约20kDa之间，

或其中所述多肽的分子量介于约25kDa与约1,000kDa之间，任选地其中所述分子量介于约25kDa与约500kDa之间、介于约100kDa与约500kDa之间、介于约120kDa与约250kDa之间、或介于约150kDa与约300kDa之间。

10.如权利要求1-9中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述多肽制剂包含约1μg至约2,000mg的所述多肽，任选地其中所述多肽制剂包含约1μg至约1,000mg、约1μg至约500mg、约1μg至约400mg、约1μg至约300mg、约1μg至约200mg、约1μg至约100mg、约1μg至约50mg、约1μg至约25mg、约1μg至约20mg、约1μg至约15mg、约1μg至约10mg、约1μg至约5mg、约1μg至约1mg、约1μg至约500μg、约1μg至约250μg、约1μg至约200μg、约1μg至约150μg、约1μg至约100μg、约1μg至约50μg、约1mg至约1,000mg、约1mg至约500mg、约1mg至约400mg、约1mg至约300mg、约1mg至约200mg、约1mg至约100mg、约1mg至约50mg、约1mg至约25mg的所述多肽。

11.如权利要求1-10中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述多肽制剂包含约1mg至约2,000mg的维生素E剂，任选地其中所述多肽制剂包含约1mg至约1,000mg、约1mg至约500mg、约1mg至约400mg、约1mg至约300mg、约1mg至约200mg、约1mg至约100mg、约1mg至约50mg、或约1mg至约25mg的维生素E剂。

12.如权利要求1-11中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述多肽制剂包含相对于所述多肽制剂中多肽的量摩尔过量或重量过量的维生素E剂，任选地其中所述过量是至少1.1倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍、500倍或1,000倍的倍数过量。

13.如权利要求1-12中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述结晶多肽组合物包含平均粒度小于25微米、例如小于20微米、15微米、10微米、5微米、4微米、3微米、2微米、1微米或0.5微米的多肽晶体，任选地其中所述多肽晶体的平均粒度介于0.5微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间，或其中所述多肽晶体的平均粒度介于1微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间。

14.如权利要求1-12中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述无定形多肽组合物包含平均粒度小于25微米、例如小于20微米、15微米、10微米、5微米、4微米、3微米、2微米、1微米或0.5微米的多肽粒子，任选地其中所述多肽粒子的平均粒度介于0.5微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间，或其中所述多肽粒子的平均粒度介于1微米与1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、10微米、15微米、20微米或25微米之间。

15.如权利要求1-14中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述多肽组合物包含冻干多肽。

16.如权利要求1-15中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述多肽组合物包含多肽微晶体。

17.如权利要求1-16中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述多肽组合物包含含有结晶多肽的粉末。

18.如权利要求1-17中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述核心是粘性溶液。

19.如权利要求1-18中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述胶囊是硬壳胶囊或软壳胶囊，任选地其中所述胶囊是明胶胶囊或HPMC胶囊。

20.如权利要求1-19中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述胶囊被配制用于递送到肠管，任选地其中所述胶囊被配制用于递送到胃和/或肠。

21.如权利要求1-20中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述胶囊包含肠溶包衣。

22.如权利要求1-21中任一项所述的多肽制剂或方法，其中所述核心还包含选自由以下组成的组的一种或多种赋形剂或添加剂：聚集减少剂、糖或糖醇、多糖、稳定剂、透明质酸酶、缓冲剂、防腐剂、载体、抗氧化剂、螯合剂、天然或合成聚合物、低温保护剂、冻干保护剂、表面活性剂、增积剂、酸化剂、减轻注射部位不适的成分、消泡剂、碱化剂、媒介物、聚集抑制剂、增溶剂、张力调节剂和稳定剂以及它们的组合，

任选地其中所述一种或多种赋形剂或添加剂个别地或累积地以介于0.1mM与约1,000mM之间、介于约0.1mM与约500mM之间、介于约0.1mM与约200mM之间、或介于约0.1mM与约100mM之间的浓度存在。

23.如权利要求22所述的多肽制剂或方法，其中：

(i)所述聚集减少剂选自由以下组成的组：烟酸、柠檬酸咖啡因、烟酸咖啡因、咖啡因、辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷和正十二烷基-β-D-麦芽糖苷和任选地与以下中的一者或多者的组合：精氨酸、色氨酸、组氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、β-丙氨酸、谷氨酸钾、精氨酸乙酯、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、DTPA(二亚乙基三胺五乙酸)、EGTA(氨基聚羧酸)、EDTA(乙二胺四乙酸)、羟丙基β(HP-β)环糊精、羟丙基γ(HP-γ)环糊精、磺丁基醚(SBE)环糊精、TMAO(三甲基胺N-氧化物)、海藻糖、乙二醇、甜菜碱、木糖醇、山梨醇、6-(N-(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑-4-基)氨基)己酸(NBD-X)、乙酰磷酸甲酯(MAP)、柠康酐、焦磷酸盐、柠檬酸盐和它们的组合；

(ii)所述张力调节剂选自由以下组成的组：精氨酸、半胱氨酸、组氨酸、甘氨酸、氯化钠、氯化钾、柠檬酸钠；糖，例如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、丙三醇或甘露醇，和它们的组合；

(iii)所述抗氧化剂选自由以下组成的组：甘氨酸、赖氨酸、EDTA、DTPA、山梨醇、甘露醇、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、次磷酸、一硫代甘油、没食子酸丙酯、亚硫酸氢钠、甲醛次硫酸氢钠、偏二亚硫酸钠、硫代硫酸钠、二氧化硫、生育酚和它们的组合；或

(iv)所述冻干保护剂选自由以下组成的组：蔗糖、乳糖、海藻糖、葡聚糖、赤藻糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨醇、麦芽糖、乳酮糖、麦芽酮糖、葡萄糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、异麦芽酮糖和甘露醇；氨基酸，例如精氨酸或组氨酸或脯氨酸或甘氨酸；易溶盐，例如硫酸镁；

丙二醇、甘油、聚(乙二醇)或聚(丙二醇)；明胶、糊精、改性淀粉、羧甲基纤维素和它们的组合。