CN117337281A - 作为可溶性环氧化物水解酶抑制剂的哌啶脲衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明描述了用于治疗由可溶性环氧化物水解酶介导的病症和疾病的新的哌啶脲衍生的化合物及其药物组合物。

Description

作为可溶性环氧化物水解酶抑制剂的哌啶脲衍生物
技术领域
本发明公开的主题总体上涉及用于治疗疼痛和神经退行性疾病的方法和组合物，具体地，选择用于治疗神经性疼痛和神经退行性疾病的哌啶脲衍生化合物，以及涉及由可溶性环氧化物水解酶介导的病症和疾病的治疗方法。
背景技术
在炎症和损伤过程中，细胞色素P450酶对花生四烯酸进行环氧化，产生环氧二十碳三烯酸(EET)。EET具有多种生物学效应，包括调节炎症、内皮功能和神经元细胞存活。EET水平受可溶性环氧化物水解酶(sEH)调节，sEH是负责将EET降解并转化为无活性二羟基二十碳三烯酸(DHET)的主要酶。因此，sEH限制了EET的许多生物学作用。EET产生重要的生物效应，特别是在血管和神经系统中。抑制sEH会延长EET的半衰期，从而转化为有益的治疗效果。
sEH抑制剂可能可用于治疗神经性疼痛和炎性疼痛、神经退行性疾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)和克罗恩病[Biomolecules(2020),10,703-724；Proc.Natl.Acad.Sciences.(2018),115,E5815–E5823,Neurotherapeutics.(2020),17(3),900-916；Proc.Natl.Acad.Sciences.(2008),105(48),18901–18906；Pharmacology&Therapeutics 180(2017)62–76；Nat.Rev.Drug.Discov.(2009),8(10),794-805；Cardiovasc.Hematol.Agents Med.Chem.(2012),Sep,10(3),212-22；Prostaglandins and Other Lipid Mediators 140(2019)31–39,Progress in Neurobiology,(2019),172,23-39,Inflamm.Allergy Drug Targets(2012)Apr,11(2),143-58；Mol.Pain(2011),4,7-78；Drug Discov Today.2015Nov；20(11):1382-90,Biomolecules.2020 May 1；10(5):703,Prostaglandins Other Lipid Mediat.(2011),96,76-83,Pharmacology&Therapeutics 180(2017)62–76；Pharmacol Ther.2017 Jun 19,S0163-7258(17)30154-7]；Biochimie 159(2019)59-65。sEH抑制剂降低炎症基因的表达，并在炎症性疾病中显示出潜在效用(Inflamm.Allergy Drug Targets(2012)Apr,11(2):143-58)。14,15-EET的药效大约是吗啡的35倍，并刺激大脑中的脑啡肽，这表明它具有潜在的镇痛作用(JPharmacol Exp.Ther.(2008),Aug,326(2),614-22)。
多项研究证实EET和sEH抑制具有神经保护特性。sEH在大脑中高表达，脑中EET的产生和代谢跨越许多区域，并延伸到周围和中枢神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞、血管内皮和平滑肌细胞[JHistochem Cytochem.2008 Jun；56(6):551-9,Am J Physiol 263:H519–251992,J Neurochem 61:150–9 1993 Prostaglandins Other Lipid Mediat.91:68–84 2010]。研究表明EET或sEH抑制-i)防止细胞因子和氧化剂介导的神经元细胞损伤；ii)预防内质网(ER)应激，这是导致多巴胺能神经元损失的一个关键因素；iii)增加星形胶质细胞释放血管内皮生长因子和氧糖剥夺后的神经元恢复；iv)促进轴突生长[Am J Physiol Heart Circ Physiol 296:H1352-63,2009,Expert Rev Mol Med 13:7-12 2011,Expert Rev Mol Med 13:7-12,1998,Expert Rev Mol Med 13:7-12,2014,Neuropathol Appl Neurobiol.42:607-620,2016,Proc Natl Acad Sci U S A.112:9082–9087 2015,J Neurosci 27:4642-9 2007,J Neurochem.117:632-42 2011以及Neuroscience 223:68-762012]。sEH缺乏减轻百草枯诱导的帕金森病小鼠模型中多巴胺能神经元细胞的损失[Mol Neurobiol.52(1):187-95 2015]。在多种动物模型中，抑制sEH可减轻神经病变和神经性疼痛，包括糖尿病神经性疼痛[Proc Natl Acad Sci U S A.2008 Dec 2；105(48):18901-6,Eur J Pharmacol.2013 Jan 30；700(1-3):93-101,J Pain.2014 Sep；15(9):907-14,Proc Natl Acad Sci U S A.2015 Jul 21；112(29):9082-7,Behav Brain Res.2017 May 30；326:69-76]。认知障碍受试者的皮质脑组织中sEH水平升高，并且sEH抑制可防止H2O2诱导的tau蛋白过度磷酸化，这是阿尔茨海默病发病机制的关键因素[Prostaglandins Other Lipid Mediat.2014 Oct；113-115:30-7,J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci.2016Dec；36(6):785-790]。sEH抑制在缺血性和糖尿病性中风的啮齿动物模型中具有保护作用[Future Neurol.2009 Mar 1；4(2):179-199,Am J Pathol.2009 Jun；174(6):2086-95,PLoS One.2014 May 13；9(5):e97529,Am J Physiol Heart Circ Physiol.2013 Dec 1；305(11):H1605-13]。
因此，本发明的目的是提供用于治疗疼痛和神经退行性疾病的方法和新的组合物，具体地，选择用于治疗神经性疼痛和帕金森氏病的哌啶脲衍生化合物，以及治疗由可溶性环氧化物水解酶介导的病症和疾病的方法。
对本申请中任何文件的引用或标识并不承认该文件可作为本发明的现有技术。
发明内容
根据本发明，通过在第一实施例中提供可包含至少一种式I化合物的组合物来实现上述目的：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中：
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且其中R1可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2NHR2、COR3的基团或取代基取代一次或多次，
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组，
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组，
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组，
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组，
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组。芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次，
X选自O、(CH2)p、NH；其中p选自0-2以及
Y1-Y2选自CH2-CH2、CH2-O或CH＝CH；然而，当Y1-Y2是CH2-O时，X选自O或NH；或R1不是氢，
Y3选自H或Me。
在进一步的实施例中，可以根据式II提供组合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中：
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且其中R1可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2NHR2、COR3的基团或取代基取代一次或多次，
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组，
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组，
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组，
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组，
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组。芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次，
X选自O、(CH2)p、NH；其中p选自0-2以及
Y1-Y2选自CH2-CH2、CH2-O或CH＝CH；然而，当Y1-Y2是CH2-O时，X选自O或NH；或R1不是氢。
在又一个实施例中，可以根据式III提供组合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且其中R1可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2R5、SO2NHR2、COR3的基团或取代基取代一次或多次，
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组，
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组，
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组，
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组，
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组。芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次，
X选自O、(CH2)p、NH；其中p选自0-2。
在又一个实施例中，可以提供具有根据式IV的组成的组合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中，R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且其中R1可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2R5、SO2NHR2、COR3的基团或取代基取代一次或多次，
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组，
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组，
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组，
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组，
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组。芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次，
X选自O、(CH2)p、NH；其中p选自0-2。
此外，组合物可以包含一种或多种以下化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐；
此外，本发明可以提供包含药学受体载体和至少一种如本发明所示的化合物的药物组合物。
在另一个实施例中，可以提供一种用于治疗需要这种治疗的受试者中的疼痛或神经退行性疾病或其他炎性疾病的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的至少一种根据式I的化合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
更进一步，该方法可以包括向受试者施用治疗有效量的至少一种根据式II的化合物，用于治疗疼痛或神经退行性疾病：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
此外，该方法可以包括向受试者施用治疗有效量的至少一种根据式III的化合物，用于治疗疼痛或神经退行性疾病：
其立体异构体或其药学上可接受的盐。
此外，该方法可以包括向受试者施用治疗有效量的至少一种根据式IV的化合物，用于治疗疼痛或神经退行性疾病：
其立体异构体或其药学上可接受的盐。
更进一步，该方法可以包括向受试者施用治疗有效量的至少一种用于治疗疼痛或神经退行性疾病的化合物，所述化合物选自以下的一种或多种：
更进一步，本发明可以提供一种用于治疗需要这种治疗的受试者的神经性疼痛或炎性疼痛的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本发明所述的组合物。
此外，可以提供一种用于治疗需要这种治疗的受试者的帕金森氏病的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本发明所述的组合物。
在考虑示例性实施例的以下详细描述后，示例性实施例的这些和其他方面、目标、特征和优点对于本领域普通技术人员来说将是显而易见的。
附图说明
将通过参考以下详细描述来理解本发明的特征和优点，该详细描述阐述了说明性实施例(利用本发明原理)及其附图，其中：
图1示出了表1，式I的化合物的可溶性环氧化物水解酶抑制效力。
图2示出了式I的化合物在神经性疼痛模型中的功效。
图3示出了式I的化合物A在糖尿病周围神经病变模型中的功效。
图4示出了式I的化合物B在帕金森病模型中的功效(运动活性的改善)。
图5示出了式I的化合物B在帕金森病模型中的神经保护作用。
图6示出了式I的化合物B在帕金森氏病的啮齿动物模型中的功效(运动活性的改善)。
本发明的附图仅用于说明目的并且不一定按比例绘制。
示例性实施例的详细描述
在更详细地描述本发明之前，应当理解，本发明不限于所描述的特定实施例，并且因此当然可以变化。还应当理解，本发明中使用的术语仅用于描述特定实施例的目的，而不旨在进行限制。
除非特别说明，本发明中使用的术语和短语及其变体，除非另有明确说明，应被解释为开放式的而不是限制性的。同样，与连词“和”链接的一组项目不应被理解为要求这些项目中的每一个都出现在该组中，而应被理解为“和/或”，除非另有明确说明。类似地，与连词“或”链接的一组项目不应被理解为需要该组之间的相互排他性，而还应该被理解为“和/或”，除非另有明确说明。
此外，虽然本发明的项目、元件或部件可以单数进行描述或要求保护，但是复数被认为落入其范围内，除非明确说明限制于单数。在某些情况下，出现“一个或多个”、“至少”、“但不限于”或其他类似短语等拓宽的词语和短语，不应理解为在可能不存在此类拓宽短语的情况下有意或需要使用较窄的情况。
除非另有定义，本发明中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。尽管与本发明描述的那些类似或等同的任何方法和材料也可以用于本发明的实践或测试，但是现在描述优选的方法和材料。
引用本说明书中引用的所有出版物和专利是为了公开和描述引用这些出版物的方法和/或材料。所有这样的出版物和专利通过引用并入本文，所有此类出版物和专利均通过引用并入本发明，如同每个单独的出版物或专利被具体且单独地指示通过引用并入一样。这种通过引用的并入明确限于所引用的出版物和专利中描述的方法和/或材料，并且不扩展到引用的出版物或专利中的任何词典学定义。引用的出版物和专利中未在本申请中明确重复的任何词典学定义不应被视为词典学定义，也不应被解读为对所附权利要求中出现的任何术语的定义。引用任何出版物是为了在提交日期之前披露，不应被解释为承认本披露。
如本领域技术人员在阅读本发明后将显而易见的是，本发明中描述和示出的各个实施例中的每一个都具有分立的部件和特征，这些部件和特征可以容易地与其他若干实施例中的任何一个的特征分离或组合，而不背离脱离本发明的范围或精神。任何所叙述的方法可以按照所叙述的事件的顺序或者以逻辑上可能的任何其他顺序来执行。
当表达范围时，另一实施例包括从一个特定值和/或到另一特定值。通过端点列举的数值范围包括包含在各个范围内的所有数字和分数，以及所列举的端点。在提供数值的范围的情况下，应当理解，除非上下文另有明确规定，否则在该范围的上限和下限与该范围中的任何其他所述或中间值之间的每一个中间值，到下限的单位的十分之一，都包含在本发明中。这些较小范围的上限和下限可以独立地包括在较小范围中，并且也包括在本发明中，受所述范围中的任何特别排除的限制。当所述范围包括一个或两个限制时，排除这些所包括的限制中的一个或两个的范围也包括在本发明中。例如，当所述范围包括一个或两个限制时，排除这些所包括的限制中的一个或两个的范围也包括在本发明中，例如短语“x到y”包括从‘x’到‘y’的范围以及大于‘x’且小于‘y’的范围。该范围也可以表示为上限，例如“约x、y、z或更少”并且应当被解释为包括“约x”、“约y”和“约z”的具体范围以及“小于x”、小于y'和'小于z'的范围。同样，短语“约x、y、z或更大”应解释为包括“约x”、“约y”和“约z”的具体范围以及“大于x”、“大于y”和“大于z”的范围。另外，短语“约‘x’到‘y’”，其中‘x’和‘y’是数值，包括“约‘x’到约‘y’”。
应当注意的是，比率、浓度、量和其他数值数据可以在本发明中以范围格式表达。还应当理解，每个范围的端点相对于另一个端点都是重要的，并且独立于另一个端点。还应当理解，本发明公开了多个值，并且除了值本身之外，每个值在本发明中还公开为“约”该特定值。例如，如果公开了值“10”，则也公开了“约10”。范围在本发明中可表达为从“约”一个特定值和/或至“约”另一特定值。类似地，当通过使用先行词“约”将值表达为近似值时，将理解的是特定值形成了另一方面。例如，如果公开了值“约10”，则也公开了“10”。
应当理解，这样的范围格式是为了方便和简洁而使用的，因此应该以灵活的方式解释为不仅包括明确列举为范围界限的数值，而且还包括所有单独的数值或包含在该范围内子范围，如同每个数值和子范围都被明确地列举一样。为了说明，“约0.1％至5％”的数值范围应解释为不仅包括明确列举的约0.1％至约5％的数值，但也包括单独的值(例如，约1％、约2％、约3％和约4％)和指定范围内的子范围(例如，约0.5％至约1.1％；约5％至约2.4％；约0.5％至约3.2％和约0.5％至约4.4％，以及其他可能的子范围)。
如本发明所用，单数形式“一”、“一个”和“该”包括单数和复数指示物，除非上下文另外明确指出。
如本发明所使用的，“约”、“大约”、“基本上”等当与诸如参数、量、持续时间等之类的可测量变量结合使用时，是指包含特定值的变化，包括实验误差范围内的变化(其可以通过例如给定的数据集、领域接受的标准和/或例如给定的置信区间(例如距平均值的90％、95％或更多置信区间)来确定，例如指定值的+/-10％或更少、+/-5％或更少、+/-1％或更少、以及+/-0.1％或更少的变化，只要这些变化适合于在本发明中执行。如本发明所使用的，术语“约”、“大约”、“等于或大”和“基本上”可以指所讨论的量或值可以是权利要求中所述或本文教导的提供等效结果或效果的精确值或值。也就是说，应当理解，量、大小、配方、参数和其他数量和特征不是且不必是精确的，而是可以根据需要是近似的和/或更大或更小，反映公差、转换因子、四舍五入、测量误差等、以及本领域技术人员已知的其他因素，以获得等同的结果或效果。在某些情况下，无法合理确定提供同等结果或效果的值。一般而言，量、大小、配方、参数或其他数量或特征是“约”、“近似”或“等于或约”，无论是否明确说明。应当理解，在定量值之前使用“大约”、“约”或“处于或约”的情况下，参数还包括具体定量值本身，除非另外具体说明。
如本发明所用，“生物样品”可以含有全细胞和/或活细胞和/或细胞碎片。
生物样品可以包含(或源自)“体液”。本发明涵盖实施例，其中体液选自羊水、房水、玻璃体液、胆汁、血清、母乳、脑脊液、耵聍(耳垢)、乳糜、食糜、内淋巴、外淋巴、渗出液、粪便、女性精液、胃酸、胃液、淋巴液、粘液(包括鼻腔引流液和痰)、心包液、腹膜液、胸膜液、脓液、大黄液、唾液、皮脂(皮肤油脂)、精液、痰液、滑液、汗液、眼泪、尿液、阴道分泌物、呕吐物及其一种或多种的混合物。生物样品包括细胞培养物、体液和来自体液的细胞培养物。体液可以从哺乳动物有机体获得，例如通过穿刺或其他收集或取样程序。
如本发明所用，“试剂”是指可以向受试者施用的任何物质、化合物、分子等。试剂可以是惰性的。试剂可以是活性试剂。试剂可以是主要活性剂，或者换言之，组合物的组分，组合物的全部或部分效果归因于该组分。试剂可以是辅助试剂，或者换言之，组合物的组分，组合物的附加部分和/或其他效果归因于该组分。
如本发明所用，“活性剂”或“活性成分”是指具有生物活性或在其所施用的受试者上诱导生物或生理学效应的物质、化合物或分子。换句话说，“活性剂”或“活性成分”是指组合物的一种或多种组分，组合物的全部或部分效果归因于该一种或多种组分。
如本发明所用，“施用”是指对于所递送的药剂和/或接受所述药剂的受试者的任何合适的施用，并且可以是口服、局部、静脉内、皮下、经皮、透皮、肌内、关节内、肠胃外、小动脉内、皮内、心室内、骨内、眼内、颅内、腹膜内、病灶内、鼻内、心内、关节内、海绵窦内、鞘内、病毒内、脑内、脑室内、鼓室内、耳蜗内、直肠、阴道、吸入、导管、支架或通过植入式储液器或其他装置主动或被动(例如通过扩散)将组合物施用至血管周围空间和外膜。例如，诸如支架的医疗装置可以包含布置在其表面上的组合物或制剂，然后该组合物或制剂可以溶解或以其他方式分布到周围的组织和细胞。术语“肠胃外”可包括皮下、静脉内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内和颅内注射或输注技术。施用途径可以是例如耳(耳部)、颊、结膜、皮肤、牙科、电渗、宫颈内、窦内(endosinusial)、气管内、肠内、硬膜外、羊膜外、体外、血液透析、浸润、间质、腹内、羊膜内、动脉内、关节内、胆道内、支气管内、囊内(intrabursal)、心内、软骨内、尾内、海绵窦内、腔内、脑内、脑池内、角膜内、冠状内(牙齿)、冠状动脉内、海绵体内、皮内、椎间盘内、导管内、十二指肠内、硬膜内、表皮内、食管内、胃内、龈内、回肠内、病灶内、管腔内、淋巴内、髓内、脑膜内、肌内、眼内、卵巢内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、鼻内、脊柱内、滑膜内、腱内、睾丸内、鞘内、胸腔内、管内、肿瘤内、鼓膜内恐慌、子宫内、血管内、静脉内、静脉推注、静脉滴注、心室内、膀胱内、玻璃体内、离子电渗疗法、冲洗、喉、鼻、鼻胃、闭塞敷料技术、眼科、口腔、口咽、其他，肠胃外、经皮、关节周围、硬膜外、神经周、牙周、直肠、呼吸(吸入)、球后、软组织、蛛网膜下腔、结膜下、皮下、舌下、粘膜下、局部、透皮、经粘膜、经胎盘、经气管、经鼓膜、输尿管、尿道和/或阴道给药和/或上述施用途径的任意组合，其通常取决于待治疗的疾病、待治疗的受试者和/或待施用的药剂。
如本发明所用，“对照”可以指实验中用于比较目的的替代受试者或样本，并包括在内，以最大限度地减少或区分自变量以外的变量的影响。
术语“可选的”或“可选地”是指随后描述的事件、情况或替代物可能发生或可能不发生，并且该描述包括事件或情况发生的情况和不发生的情况。
本发明所用的“剂量”、“单位剂量”或“剂量”可以指适合在受试者中使用的物理上离散的单位，每个单位包含预定量的药物制剂，该药物制剂经计算可产生与其给药相关的一种或多种所需反应。
如本发明所用，术语“分子量”通常可以指材料的质量或平均质量。
术语“受试者”、“个体”和“患者”在本发明中可互换使用，是指脊椎动物，优选哺乳动物，更优选人类。哺乳动物包括但不限于鼠科动物、猿猴、人类、家畜、运动动物和宠物。体内获得或体外培养的生物实体的组织、细胞及其后代也包含在“受试者”一词中。
如本发明所用，“基本上纯的”可以指目标物种是存在的主要物种(即，以摩尔计，它比组合物中的任何其他单独物种更丰富)，并且优选地，基本上纯化的级分是这样的组合物，其中目标物种约占现有物种的50％。一般而言，基本上纯的组合物将包含大于约80％的组合物中存在的所有物质，更优选大于约85％、90％、95％和99％。最优选地，将目标物种纯化至基本均匀性(通过常规检测方法不能在组合物中检测到污染物物种)，其中组合物基本上由单个物种组成。
如本发明中可互换使用的，术语“足够”和“有效”可以指实现一种或多种期望的和/或规定的结果所需的量(例如质量、体积、剂量、浓度和/或时间段)。例如，治疗有效量是指实现一种或多种治疗效果所需的量。
如本发明所使用的，“有形表达媒介”是指物理上有形或可访问的媒介，而不仅仅是抽象思想或未记录的口语。“表达的有形介质”包括但不限于纤维素或塑料材料上的文字，或存储在合适的计算机可读存储器形式中的数据。数据可以存储在单元设备上，如闪存或CD-ROM，也可以存储在用户可以通过网络接口访问的服务器上。
如本发明所用，术语“治疗的(treating)”和“治疗(treatment)”通常可以指获得期望的药理学和/或生理学效果。该效果可以是但不一定必须是预防性的，即预防或部分预防疾病、其症状或病症，例如癌症和/或间接辐射损伤。该效果可以是治疗性的，即部分或完全治愈疾病，病症，症状或由疾病、病症或病症导致的副作用。本发明所用的术语“治疗(treatment)”涵盖受试者、特别是人类和/或伴侣动物中的癌症和/或间接辐射损伤的任何治疗，并且可以包括以下任何一种或多种：(a)预防疾病或可能易患该疾病但尚未被诊断患有该疾病的受试者中发生的损害；(b)抑制疾病，即阻止其发展；(c)缓解疾病，即减轻或改善疾病和/或其症状或病症。本发明所用的术语“治疗(treatment)”可指单独的治疗性治疗、单独的预防性治疗、或治疗性治疗和预防性治疗两者。需要治疗的那些(需要其的受试者)可以包括已经患有该病症的那些和/或其中要预防该病症的那些。如本发明所用，术语“治疗的(treating)”可包括抑制疾病、不适或病症，例如阻止其进展；并缓解疾病、不适或病症，例如引起疾病、不适和/或病症的消退。治疗疾病、不适或病症可以包括改善特定疾病、不适或病症的至少一种症状，即使潜在的病理生理学不受影响，例如通过施用镇痛剂来治疗受试者的疼痛，即使这种药物不能治疗疼痛的原因。
如本发明所用，可以互换使用的术语“重量百分比”、“wt％”和“wt.％”表示给定组分基于其作为组分的组合物的总重量的重量百分比，除非另有说明。也就是说，除非另有说明，所有wt％值均基于组合物的总重量。应当理解，公开的组合物或制剂中所有组分的wt％值的总和等于100。或者，如果wt％值基于组合物中组分子集的总重量，则应当理解，所公开的组合物或制剂中指定组分的wt％值之和等于100。
“卤素或卤代”是指氟、氯、溴或碘。
“烷基”是指直链或支链烷基。示例性烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、己基、庚基、辛基等。除非另有说明，烷基通常具有约1至约10个碳原子。
“环烷基”是指可以是单环或双环的环状烷基。示例性环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。除非另有说明，环烷基通常具有约3至约10个碳原子。
“卤代烷基”是指直链或支链烷基，其中至少一个氢被卤素或卤代基团取代。示例性卤代烷基包括三氟甲基、氯乙基、二氟甲基、二氟乙基等。
“羟烷基”基团是指具有1至3个碳原子的直链单价烃基或被一个或两个羟基取代的三至五个碳的支链单价烃基，前提是如果存在两个羟基，它们不都在同一个碳原子上。代表性实施例包括羟甲基、2-羟乙基、2-羟丙基、3-羟丙基。
“烷氧基烷基”是指1至6个碳原子的直链单价烃基或被烷氧基取代的三至六个碳的支链单价烃基，如上文所定义，例如甲氧基甲基，2-甲氧基乙基，1-、2-或3-甲氧基丙基。
“杂环烷基”是指包含碳和氢原子以及至少一个杂原子(优选地，选自氮、氧和硫的1至4个杂原子)的非芳族单环或多环。杂环烷基在环中可以具有一个或多个碳-碳双键或碳-杂原子双键，只要该环不因它们的存在而变成芳香族。杂环烷基的实施例包括吡咯烷基(pyrrolidinyl)、吡咯烷基(pyrrolidino)、哌啶基(piperidinyl)、哌啶基(piperidino)、哌嗪基(piperazinyl)、哌嗪基(piperazino)、吗啉基、吗啉代、四氢呋喃基、四氢吡喃基和吡喃基。
“烷氧基”是指-O(烷基)基团，其中烷基如上所定义。示例性烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、异丙氧基、异丁氧基等。除非另有说明，烷氧基通常具有1至约10个碳原子。
“胺”是指伯胺基、仲胺基或叔胺基。仲胺和叔胺可含有烷基、环烷基或芳基取代基。胺的一些实施例包括NH2、NHMe、NMe2NH(环丙基)。除非另有说明，胺上的烷基或环烷基通常具有1至约8个碳原子。
“芳基”是指任选取代的约6至约14个碳原子的单环或多环芳香环系统。示例性芳基包括苯基、萘基等。除非另有说明，芳基通常具有6至约14个碳原子。
“杂芳基”是指约4至约12个碳原子的芳族单环或多环环系统，具有选自O-、-N-、-S-、-SO2或-CO的至少一个杂原子或杂基团。示例性杂芳基包括吡嗪基、异噻唑基、恶唑基、吡唑基、吡咯基、四唑基、咪唑基、三唑基、哒嗪基、噻吩并嘧啶基、呋喃基、吲哚基、异吲哚基、苯并[1,3]二氧杂环戊烯基(benzo[1,3]dioxolyl)、苯并咪唑基、1,3-苯并氧杂硫基、吡咯烷2,4-二酮基、喹唑啉基、吡啶基、嘧啶基、苯硫基等中的一种或多种。除非另有说明，杂芳基通常具有4至约10个碳原子。
“5-至6-元杂芳基”是具有5或6个环原子的芳族单环的环系统，具有选自-O-、-N-、-S-、-SO2或-CO的至少一个杂原子或杂基团。示例性的“5-至6-元杂芳基”基团包括吡嗪基、异噻唑基、恶唑基、吡唑基、吡咯基、哒嗪基、吡啶基、噻吩并嘧啶基、四唑基、咪唑基、三唑基、呋喃基等中的一种或多种。
“任选取代的”是指取代是任选的，因此，指定的原子或分子可以是未取代的。如果需要取代，则这种取代意味着指定原子上的任何数量的氢被选定基团取代，前提是不超过指定原子的正常化合价，并且该取代导致足够稳定的化合物以供使用。
“盐”是指当给予接受者时能够(直接或间接)提供本发明所述的化合物的任何酸或碱盐、药学上可接受的溶剂化物或任何复合物。然而，应当理解，非药学上可接受的盐也落入本发明的范围内。盐的制备可以使用已知的方法进行。例如，本发明预期有用的化合物的药学上可接受的盐可以通过常规化学方法使用含有碱或酸官能团的母体化合物来合成。一般而言，此类盐可以例如通过制备化合物的游离酸或碱形式并与化学计量量的适当的碱或酸在水或有机溶剂或两者的混合物中反应来制备。一般而言，可以使用非水介质，诸如一种或多种溶剂，例如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。酸加成盐的实施例包括一种或多种无机酸加成盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、磷酸盐；和有机酸加成盐，诸如乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸盐和对甲苯磺酸盐中的一种或多种。碱加成盐的实施例包括一种或多种无机盐，诸如钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、镁盐和锂盐；以及有机碱盐，诸如乙二胺、乙醇胺、N,N-二烷基-乙醇胺、三乙醇胺和碱性氨基酸盐中的一种或多种。
短语“治疗有效”表示试剂或组合预防疾病或改善疾病严重性的能力，同时通常避免会阻止患者服用所施用试剂的不良副作用。本发明的治疗有效的组合物可以包括剂量为约10至约3000mg的本发明的化合物。确切的剂量可以根据多种因素确定，包括患者的特征和所需治疗的程度。
如本发明所用，“治疗有效量”是指施用给受试者的本发明化合物的剂量或量以及导致某些治疗反应的施用频率。本领域普通技术人员可通过使用已知技术并通过观察在类似情况下获得的结果而容易地确定待向受试者施用的剂量或有效量以及向受试者施用的频率。在确定有效量或剂量时，主治诊断医生可以考虑许多因素，包括但不限于所用化合物的效力和作用持续时间；待治疗疾病的性质和严重程度以及待治疗对象的性别、年龄、体重、一般健康状况和个人反应性以及其他相关情况。
本发明所述的化合物可以与一种或多种药学上可接受的赋形剂或载体混合以药物组合物的形式施用。“组合物”可以包含一种化合物或化合物的混合物。“药物组合物”是可用于或潜在可用于在施用此类药物组合物的受试者中产生生理反应的任何组合物。
就赋形剂而言，术语“药学上可接受的”用于定义通常适用于人类或动物药物产品的无毒物质。药物组合物可以是通常使用的形式，例如片剂、胶囊、粉剂、糖浆、溶液、混悬剂等。药物组合物可含有在合适的固体或液体载体或稀释剂中或在合适的无菌介质中的调味剂、甜味剂等以形成可注射溶液或悬浮液。此类组合物通常含有按重量计约0.1％至约50％、并且在一些实施例中约1％至约20％的活性化合物，组合物的其余部分是药学上可接受的载体、稀释剂或溶剂。
下面描述各种实施例。应当注意的是，具体实施例并不旨在作为穷举描述或作为对本发明所讨论的更广泛方面的限制。结合特定实施例描述的一个方面不必限于该实施例并且可以与任何其他实施例一起实践。在整个说明书中提及的“一个实施例”、“实施例”、“示例性实施例”意味着结合该实施例描述的特定特征、结构或特性被包括在本发明的至少一个实施例中。因此，在整个说明书的各个地方出现的短语“在一个实施例中”、“在实施例中”或“示例性实施例”不一定都指代相同的实施例，而是可以指代相同的实施例。此外，在一个或多个实施例中，特定特征、结构或特性可以以任何合适的方式组合，根据本发明对本领域技术人员将是显而易见。此外，虽然本发明描述的一些实施例包括其他实施例中包括的一些但不包括其他特征，但是不同的实施例的特征的组合均应落入本发明的范围内。例如，在所附权利要求中，任何要求保护的实施例可以以任何组合使用。
本发明引用的所有专利、专利申请、公开的申请以及出版物、数据库、网站和其他公开的材料均通过引用并入本发明，其程度与每个单独的出版物、公开的专利文献或专利申请被具体且单独地以引用的形式并入本文的程度相同。
套件
本发明描述的任何化合物和/或制剂可以作为组合套件提供。本发明所用的术语“组合套件”或“多零件套件”是指用于包装、销售、营销、递送和/或施用包括在其中的元素或单一元素(例如活性成分)的组合的化合物、组合物、制剂、颗粒、细胞(cell)和任何额外的部件。这些额外的部件包括但不限于包装、注射器、泡罩包装、瓶子等。当同时施用包含在套件中的本发明的化合物、组合物、制剂、颗粒、细胞或其组合(例如，药剂)的一种或多种时，组合套件可以将活性剂包含在单个制剂中，例如药物制剂(例如片剂、液体制剂、脱水制剂等)或单独制剂中。当本发明的化合物、组合物、制剂、颗粒和细胞或其组合和/或套件组分不同时施用时，组合套件可将每种试剂或其他部件包含在单独的药物制剂中。单独的套件部件可以包含在套件内的单个包装中或单独的包装中。
在一些实施例中，组合套件还包括印刷在有形表达介质上或以其他方式包含在有形表达介质中的说明书。说明书可以提供关于化合物和/或制剂的含量的信息、关于化合物和制剂(例如，药物制剂)的含量的安全信息、关于其中包含的化合物和/或药物制剂的剂量、使用适应症和/或推荐的治疗方案的信息。在一些实施例中，说明书可以提供用于向有需要的受试者施用本发明所述的化合物和/或制剂的指导和方案。在一些实施例中，说明书可以提供用于施用其药物制剂的方法的一个或多个实施例，诸如本发明其他地方更详细描述的任何方法。
具体实施方式
现在将详细参考本发明的实施例，下面阐述其一个或多个实施例。每个实施例都是通过解释本发明的方式提供的，而不是对本发明的限制。事实上，在不脱离本发明的范围或精神的情况下，可以对本发明进行各种修改，对于本领域技术人员来说是显而易见的。例如，作为一个实施例的一部分示出或描述的特征可以用在另一实施例上以产生又一实施例。因此，本发明旨在覆盖落入所附权利要求及其等同物的范围内的此类修改和变化。本发明的其他目的、特征和方面在以下详细描述中公开，或者从以下详细描述中显而易见。
为了便于参考，本发明将根据对人类受试者的施用进行描述。然而，应当理解，此类描述不限于对人类施用，而是还包括对其他动物施用，除非另外明确说明。
预期的衍生物是当将本发明的化合物施用给受试者时可改善此类化合物的溶解或增加其生物利用度的那些衍生物(例如，通过使口服施用的化合物更容易吸收)。式I的化合物可以是无定形的、半结晶的或结晶的，并且可以作为母体化合物、其盐和/或以溶剂化形式给出。溶剂化物可以是晶格的一部分或表面缔合的。所有这些形式均应落入本发明的范围内。溶剂化方法是本领域公知的。合适的溶剂化物是药学上可接受的溶剂化物。在一个实施例中，溶剂化物是水合物。
一方面，本发明涉及式I的新化合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且其中R1可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2NHR2、COR3的基团或取代基取代一次或多次，
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组，
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组，
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组，
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组，
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组。芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次，
X选自O、(CH2)p、NH；其中p选自0-2以及
Y1-Y2选自CH2-CH2、CH2-O或CH＝CH；然而，当Y1-Y2是CH2-O时，X选自O或NH以及R1不是氢，
Y3选自H或Me。
另一方面，本发明涉及式II的新化合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且其中R1可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2NHR2、COR3的基团或取代基取代一次或多次，
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组，
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组，
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组，
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组，
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组。芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次，
X选自O、(CH2)p、NH；其中p选自0-2以及
Y1-Y2选自CH2-CH2、CH2-O或CH＝CH；然而，当Y1-Y2是CH2-O时，X选自O或NH以及R1不是氢。
另一方面，本发明涉及式III的新化合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且其中R1可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2R5、SO2NHR2、COR3的基团或取代基取代一次或多次，
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组，
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组，
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组，
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组，
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组。芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次，
X选自O、(CH2)p、NH；其中p选自0-2。
在另一个方面，本发明涉及式IV的新化合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且其中R1可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2R5、SO2NHR2、COR3的基团或取代基取代一次或多次，
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组，
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组，
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组，
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组，
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组。芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次，
X选自O、(CH2)p、NH；其中p选自0-2。
此外，所述组合物可以包含一种或多种以下化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐；
/>
又一方面，本发明涉及式I的新化合物、其立体异构体、互变异构体和/或其药学上可接受的盐，其可用作可溶性环氧化物水解酶(sEH)的抑制剂。
另一方面，本发明涉及一种用于在需要这种治疗的受试者中预防和/或治疗疼痛、神经退行性疾病和炎性病症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式I化合物、其立体异构体和/或其药学上可接受的盐。此外，式I化合物、其立体异构体和/或药学上可接受的盐可用于预防或治疗糖尿病周围神经病、化疗诱发的神经病、带状疱疹后神经痛、三叉神经痛、纤维肌痛和其他神经性疼痛或炎性疼痛状况。
此外，式I化合物可以任选地与一种或多种抗炎或镇痛药物诸如cox-2抑制剂、NSAID、普瑞巴林、加巴喷丁或阿片类药物组合，然后施用于受试者以治疗炎症和/或疼痛情况。
在另一个实施例中，式I的立体异构体和/或药学上可接受的盐可用于治疗神经退行性疾病诸如帕金森氏病。
为了便于参考，本发明将根据对人类受试者的施用进行描述。然而，应当理解，此类描述不限于对人类施用，而是还包括对其他动物施用，除非另外明确说明。
预期的衍生物是当将本发明的化合物施用给受试者时可改善此类化合物的溶解或增加其生物利用度的那些衍生物(例如，通过使口服施用的化合物更容易吸收)。式I化合物可以是无定形的、半结晶的或结晶的，并且可以作为母体化合物、其盐和/或以溶剂化形式给出。溶剂化物可以是晶格的一部分或表面缔合的。所有这些形式均应落入本发明的范围内。溶剂化方法是本领域公知的。合适的溶剂化物是药学上可接受的溶剂化物。在一个实施例中，溶剂化物是水合物。
在一个实施例中，本发明的化合物(式I的那些)可用于治疗炎性疼痛、神经性疼痛、类风湿性关节炎、骨关节炎、糖尿病性肾病、高血压、糖尿病和/或代谢综合征。式I化合物可用于提高受试者的环氧二十碳三烯酸(EET)水平以预防和治疗炎症和/或疼痛病症。
因此，式I化合物、其药学上可接受的盐和/或其溶剂化物可以用于预防和/或治疗本发明讨论的疾病或病症。含有治疗有效量的式I化合物、其药学上可接受的盐和/或其溶剂化物，可能连同药学上可接受的赋形剂的药物组合物是本发明的另外的方面。
必须施用治疗有效量的式I化合物、其药学上可接受的盐和/或溶剂化物，以及用化合物治疗病理状态的剂量将取决于许多因素，包括年龄、患者的状态、疾病的严重程度、给药途径和频率、所使用的调节剂化合物等。
合适的药学上可接受的载体可以包括固体填充剂或稀释剂以及无菌水性或有机溶液。活性成分可以以足以提供上述范围内的所需剂量的量存在于此类药物组合物中。因此，对于口服施用，活性成分可以与合适的固体或液体载体或稀释剂组合以形成胶囊、片剂、粉剂、糖浆、溶液、悬浮液等。对于肠胃外给药，活性成分可以与无菌水性或有机介质组合以形成可注射溶液或混悬液。例如，可以使用芝麻油或花生油、丙二醇水溶液等溶液，以及化合物的水溶性药学上可接受的酸加成盐或与碱的盐的水溶液。活性成分溶解在药学上可接受的溶剂例如多羟基化蓖麻油中的水溶液也可用于注射溶液。然后可以将以此方式制备的注射溶液静脉内、腹膜内、皮下或肌肉内施用，其中肌肉内施用对于人类通常是优选的。
以下示例描述了本发明的示例性实施例。通过考虑本发明所公开的说明书或实践本发明，本发明的权利要求范围内的其他实施例对于本领域技术人员来说将是显而易见的。本说明书与实施例都被认为是示例性的，本发明的范围和精神由实施例后面的权利要求书来指示。
常规合成工艺
本发明的化合物可以通过遵循方案I-VIII中概述的工艺来合成。所建议的方法并非旨在进行限制。可以采用这些合成方法或文献中报道的方法的变体来合成本发明范围内的化合物。
方案I
方案I示出了本发明的式I的化合物7的合成方法。在第一步中，取代的苄基卤1(Z＝Cl，Br)与磷酸三烷基酯反应生成取代的膦酸苄酯2。该反应可以通过将1与磷酸三烷基酯在120-150℃下在有或没有溶剂诸如二甲基乙酰胺的情况下加热10-20小时来进行。由中间体2生成内鎓盐(ylid)并与取代哌啶酮3反应合成取代烯烃4。由2形成内鎓盐可以使用碱诸如氢化钠或氢化钾在冠醚存在下在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷或二乙醚中进行。该反应可以在低温(0±5℃)下引发，随后将反应混合物升温至约20℃并搅拌另外20-60分钟。由2生成的内鎓盐与3之间的反应可以在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷、二乙醚或甲苯中进行并在低温(0±5℃)下引发反应，随后将反应混合物升温至约20-40℃并搅拌8-20小时。在酸存在下将4的氨基甲酸酯脱保护，得到哌啶中间体5。该反应可以在溶剂诸如二氯甲烷或二氯乙烷中并使用酸诸如三氟乙酸通过在0-25℃的温度下搅拌反应混合物20-90分钟来进行。5与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应得到目标化合物7。该反应可以使用溶剂诸如二甲亚砜或二甲基乙酰胺和碱诸如三乙胺、二异丙基乙胺通过在40-60℃下加热反应组分3-6小时来进行。
取代的环丙烷氨基甲酸酯6可以由相应的环丙胺8通过与氯甲酸芳基酯(R＝Ph或Ar)使用溶剂诸如二氯甲烷和碱诸如二异丙基乙胺反应来合成。反应可以在低温(0±5℃)下引发，随后通过将反应混合物升温至约20-30℃并搅拌20-40分钟。方案I中使用的取代的苄基卤1和取代的哌啶酮3可以商业购买或由易于获得的试剂合成。
方案II
方案II示出了本发明的式I的化合物11的合成方法。在第一步中，使用方案I中描述的方法合成化合物4，并将其氢化以产生饱和化合物9。该反应可以使用催化加氢(使用例如，Pd/C或Pt/C)在溶剂诸如甲醇或乙醇中在Parr氢化装置中进行。氨基甲酸酯9在酸存在下脱保护，得到哌啶中间体10。该反应可以在溶剂诸如二氯甲烷或二氯乙烷中并使用酸诸如三氟乙酸通过在0-25℃的温度下搅拌反应混合物20-90分钟来进行。10与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应得到目标化合物11。该反应可以使用溶剂诸如二甲亚砜或二甲基乙酰胺和碱诸如三乙胺、二异丙基乙胺通过在40-60℃下加热反应组分3-6小时来进行。
方案III
方案III示出了本发明的化合物18和19的合成方法。在第一步中，含有杂芳基环A的化合物12(诸如吡啶、嘧啶、吡嗪)与取代苯酚13反应生成14。该反应可以在溶剂诸如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺中使用碱诸如碳酸钾、碳酸钠或碳酸铯并通过将反应混合物在80-120℃加热3-6小时来进行。通过与亚硫酰氯反应，将所得取代的苯甲醇转化为相应的苄基卤15。该反应可以使用溶剂诸如二氯甲烷并用亚硫酰氯在0-25℃下处理1-3小时来进行。取代的苄基卤15与磷酸三烷基酯反应，得到取代的膦酸苄酯16。该反应可以通过将15与磷酸三烷基酯在120-150℃下在有或没有溶剂诸如二甲基乙酰胺的情况下加热10-20小时来进行。由中间体16生成内鎓盐并与取代哌啶酮3反应合成取代烯烃17。由16形成内鎓盐可以使用碱诸如氢化钠或氢化钾在冠醚存在下在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷或二乙醚中进行。反应可以在低温(0±5℃)下引发，随后将反应混合物升温至约20℃并搅拌另外20-60分钟。由16生成的内鎓盐与3之间的反应可以在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷、二乙醚或甲苯中并在低温(0±5℃)下引发反应，随后将反应混合物升温至约20℃-40℃并搅拌8-20小时来进行。17至18的转化可按照方案I中所述的在酸存在下氨基甲酸酯脱保护并与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的步骤进行。17至19的转化可使用包括如方案II中所述的氢化、氨基甲酸酯脱保护以及与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的连续步骤来完成。
方案IV
方案IV示出了本发明的化合物26和27的合成方法。在第一步中，化合物20与取代苯酚21反应生成22。该反应可以在溶剂诸如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺中使用碱诸如碳酸铯通过将反应混合物在80-120℃加热3-8小时来进行。通过与亚硫酰氯反应，将所得取代的苯甲醇转化为相应的苄基卤23。该反应可以使用溶剂诸如二氯甲烷并用亚硫酰氯在0-25℃下处理1-3小时来进行。取代的苄基卤23与磷酸三烷基酯反应，得到取代的膦酸苄酯24。该反应可以通过将23与磷酸三烷基酯在120-150℃下在有或没有溶剂诸如二甲基乙酰胺的情况下加热10-20小时来进行。由中间体24生成内鎓盐并与取代哌啶酮3反应合成取代烯烃25。由24形成内鎓盐可以使用碱诸如氢化钠或氢化钾在冠醚存在下在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷或二乙醚中进行。反应可以在低温(0±5℃)下引发，随后将反应混合物升温至约20℃并搅拌另外20-60分钟。由24生成的内鎓盐与3之间的反应可以在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷、二乙醚或甲苯中并在低温(0±5℃)下引发反应，随后将反应混合物升温至约20℃-40℃并搅拌8-20小时来进行。25至26的转化可按照方案I中所述在酸存在下氨基甲酸酯脱保护并与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的步骤进行。25至27的转化可使用包括如方案II中所述的氢化、氨基甲酸酯脱保护以及与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的连续步骤来完成。
方案V
方案V示出了本发明的化合物33和34的合成方法。在第一步中，取代的苄基卤28与磷酸三烷基酯反应，得到取代的膦酸苄酯29。该反应可以通过将28与磷酸三烷基酯在120-150℃下在有或没有溶剂诸如二甲基乙酰胺的情况下加热10-20小时来进行。由中间体29生成内鎓盐并与取代哌啶酮3反应合成取代烯烃30。由29形成内鎓盐可以使用碱诸如氢化钠或氢化钾在冠醚存在下在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷或二乙醚中进行。反应可以在低温(0±5℃)下引发，随后将反应混合物升温至约20℃并再搅拌20-60分钟。由29生成的内鎓盐与3之间的反应可以在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷、乙醚或甲苯中并在低温(0±5℃)下引发反应进行，随后将反应混合物升温至约20℃-40℃并搅拌8-20小时来进行。由30与相应的杂环诸如吡咯烷、吗啉、哌啶反应合成含杂环基A的中间体31。该反应可以通过使用碳酸铯和催化剂诸如乙酸钯和2，2’-双(二苯基膦)-1，1′-联萘(BINAP)用环A杂环处理30来进行。该反应可以使用溶剂诸如1，4-二恶烷通过在20-100℃处理反应混合物5-20小时来进行。31至33的转化可以按照方案I中所述的在酸存在下氨基甲酸酯脱保护并与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的步骤进行。
31至32的转化可以使用催化加氢(Pd/C，H2)来完成，如方案II中所述。类似地，32至34的转化可按照包括如方案II中所述的氨基甲酸酯脱保护并与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的方法进行。
方案VI
方案VI示出了本发明的化合物40的合成方法。在第一步中，含有杂芳环A(诸如吡啶、嘧啶、吡嗪)的化合物35与取代苯酚36反应生成37。该反应可以在溶剂诸如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺中使用碱诸如碳酸钾、碳酸钠或碳酸铯，通过将反应混合物在80-120℃加热3-8小时来进行。取代的苯酚37与甲磺酸哌啶38反应得到39。该反应可以在溶剂诸如二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺中使用碱诸如碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯并将反应混合物在60-80℃加热6-8小时来进行。39至40的转化可以按照如方案I中所述的在酸存在下氨基甲酸酯脱保护并与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的步骤进行。
方案VII
方案VII示出了本发明的式45和46的化合物的合成方法。在第一步中，含有杂芳基硼酸酯的化合物41与芳基卤42反应生成43。该反应可以通过在溶剂诸如二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺中使用2N碳酸钠溶液和四(三苯基膦)钯(0)在环境温度20-25℃下反应12-18小时处理41和42来进行。43至45的转化可按照如方案I中所述的在酸存在下氨基甲酸酯脱保护并与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的步骤进行。
43至44的转化可使用催化加氢(Pd/C，H2)，如方案II中所述。类似地，44至46的转化可按照包括如方案II中所述的氨基甲酸酯脱保护并与取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6反应的方法进行。
方案VIII
方案VIII示出了本发明的式54化合物的合成方法。在第一步中，取代的苄基卤47与磷酸三烷基酯反应生成取代的膦酸苄酯48。该反应可以通过将47与磷酸三烷基酯在120-150℃下加热10-20小时来进行。取代的烯烃49是通过由中间体48生成的内鎓盐与取代哌啶酮3反应而合成的。由48形成内鎓盐可以使用碱诸如氢化钠或氢化钾在冠醚存在下在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷或二乙醚中进行。反应可以在低温(0±5℃)下引发，随后将反应混合物升温至约20℃并再搅拌20-60分钟。由48生成的内鎓盐与3之间的反应可以在溶剂诸如THF、二甲氧基乙烷、二乙醚或甲苯中并在低温(0±5℃)下引发反应，随后将反应混合物升温至约20℃-40℃并搅拌8-20小时来进行。49至50的转化可以使用催化加氢(Pd/C、H2)来完成。该反应可以使用催化加氢(使用例如，Pd/C或Pt/C)在溶剂诸如甲醇或乙醇中在Parr氢化装置中进行。在下一步中，通过使50与取代的1-氟-2-硝基苯51在置换反应中反应来完成52的合成。该反应可以通过在溶剂诸如二甲基甲酰胺中用51处理50与并在碳酸铯存在下在80-120℃下加热反应混合物10-20小时来进行。苯并咪唑化合物53的合成可以通过在Pd/C存在下在约25℃下用甲酸和甲酸钠处理52并将混合物在约100-120℃下加热12-20小时来完成。53至54的转化可以通过如方案II中所述的用取代的环丙烷氨基甲酸酯中间体6处理来进行。
实施例
本发明的实施例提供了使用以下实施例中阐述的工艺制备式I的新化合物。本领域技术人员将理解，以下制备工艺的条件和方法的已知变化可用于制备这些化合物。此外，通过利用本发明描述的工艺，本领域普通技术人员可以制备本发明要求保护的本发明的另外的化合物。
实施例1：4-(3-甲氧基-亚苄基)-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-向(3-甲氧基-苯基)-甲醇(20.0g，0.14mol)和吡啶(5.8mL，0.72mol)在苯(120mL)中的混合物中滴加亚硫酰氯(74mL，1.01mol)同时在冰浴中搅拌反应。除冰后，使反应混合物在室温下搅拌2小时。将所得反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)快速冷却(quenched)，用乙酸乙酯(2×300mL)萃取，并用硫酸钠干燥。通过硅胶(230-400)柱(5％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化挥发物蒸发后获得的粗产物，得到黄色油状产物2，20.01g(88％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):3.84(s,3H),4.58(s,2H),6.86-6.90(m,1H),6.95-7.00(m,2H),7.26-7.32(m,1H)。
步骤2-将2(20g，0.12mol)在磷酸三乙酯(29.0mL，0.16mol)中的溶液在150℃下加热17小时。将反应混合物冷却至室温，并通过硅胶(230-400)柱)(20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化蒸发挥发物后获得的粗产物，得到呈无色油状的产物3，27.0g(81％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.26(t,J＝7.2Hz,6H),3.11(s,1H),3.18(s,1H),3.81(s,3H),4.01-4.03(m,4H),6.79-6.91(m,3H),7.21-7.28(m,1H)。
步骤3-向3(11.0g，43.0mmol)的THF(44mL)溶液中添加15-冠醚(0.2mL，0.9mmol)。将反应冷却(冰浴)并分批添加NaH(580mg，24.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并使用冰浴重新冷却。在冰温下向上述反应混合物中加入4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯4(8.5g，43.0mmol)的THF(44mL)溶液，并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用水(100mL)稀释，用乙酸乙酯萃取并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(25％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈黄色油状的产物5，7.0g(54％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.49(s,9H),2.32-2.36(m,2H),2.44-2.50(m,2H),3.42(t,J＝5.7Hz,2H),3.52(t,J＝5.7Hz,2H),3.84(s,3H),6.35(s,1H),6.75-6.81(m,3H),7.25-7.25(m,1H)。
步骤4-在冰温下向5(1.0g，3.2mmol)的二氯甲烷(8.0mL)溶液中添加三氟乙酸(4.25mL，4.25vol)并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将蒸发挥发物后获得的粗产物用乙醚洗涤，得到呈白色固体的6(600mg，89％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.54-2.62(m,4H),3.07-3.17(m,4H),3.75(s,3H),6.44(s,1H),6.77-6.84(m,3H),7.27(t,J＝7.8Hz,1H),8.79(bs,2H)。
步骤5-在冰浴温度下向反式-2-苯基环丙胺2A(3.5g，0.02mol)在二氯甲烷(35mL)中的悬浮液中添加三乙胺(0.06mol)、氯甲酸苯酯1A(4.8g，0.03mol)。然后除去冰浴并将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将所得反应混合物用乙酸乙酯(200mL)稀释，用水(2×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(10％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物7，2.6g(50％)。熔点:113.6–115.3℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.14-1.26(m,2H),2.03-2.09(m,1H),2.72-2.75(m,1H),7.10-7.40(m,10H),8.18(bs,1H).MS:254(M+H)。
步骤6：在25℃下，向胺6(300mg，0.94mmol)的二甲亚砜(6mL)溶液中添加二异丙基乙胺(0.5mL，2.82mmol)和氨基甲酸酯7(238mg，0.94mmol)。将反应混合物在55℃搅拌4小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(250mL)稀释，用水(4×75mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物8，226mg(65％)。熔点:104.7-106.4℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.15-1.27(m,2H),2.02-2.09(m,1H),2.40(t,J＝5.7Hz,2H),2.54(t,J＝5.7Hz,2H),2.87(bs,1H),3.39(t,J＝5.7Hz,2H),3.49(t,J＝5.7Hz,2H),3.82(s,3H),4.87(s,1H,-CONH-,可交换1H),6.37(s,1H),6.75-6.81(m,3H),7.18-7.30(m,6H).13C NMR(75MHz,CDCl3)δ(ppm):16.44,25.10,29.14,33.19,35.72,44.60,45.60,55.18,111.88,114.60,121.36,124.76,125.95,126.65,128.28,129.16,137.90,138.70,140.88,157.95和159.53.MS:363(M+H)。
实施例2：4-[3-(吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在室温下向2-氟-吡啶(25.8g，0.27mol)的DMF(300mL)溶液中加入3-羟基苯基-甲醇(30.0g，0.24mol)和碳酸铯(117.3g，0.36mol)。将反应混合物在100℃搅拌5小时。然后将所得混合物达到室温，用水(250mL)稀释，用乙酸乙酯(3×500mL)萃取，有机层经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物2，34.5g(71％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):4.49-4.51(m,2H),5.24-5.30(m,1H),6.98-7.15(m,5H),7.33-7.40(m,1H),7.82-7.89(m,1H),8.14-8.16(m,1H)。
步骤2-向2(34.5g，0.17mol)的二氯甲烷(345mL)溶液中滴加亚硫酰氯(13.9mL，0.18mol)，同时在冰浴中搅拌反应。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后减压蒸发挥发物并用甲苯(25mL)稀释并减压蒸发甲苯。重复该共沸工艺3次以获得棕色油状的产物3(36.8g，98％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):4.77(s,2H),7.04-7.20(m,4H),7.27-7.29(m,1H),7.42(t,J＝8.4Hz,1H),7.84-7.90(m,1H),8.14-8.16(m,1H)。
步骤3-将3(36.7g，0.16mol)的磷酸三乙酯(41.6mL，0.26mol)溶液在150℃下加热6小时。使反应混合物达到室温，蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(60％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到无色油状物的产物4，41.33g。产物含有未使用的磷酸三乙酯，无需额外纯化即可用于下一步。
步骤4-向[3-(吡啶-2-基氧基)-苄基]-膦酸二乙酯4(30.0g，93.0mmol)的THF(120mL)溶液中添加15-冠醚(0.41g，1.8mmol)。将反应冷却(冰浴)并分批添加NaH(3.35g，0.14mol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下向上述反应混合物中加入4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯5(18.6g，93.0mmol)的THF(120mL)溶液并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用水(500mL)稀释，用乙酸乙酯(3×500mL)萃取并用硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(3％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈黄色油状物的产物6，24.3g(71％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.41(s,9H),2.27(t,J＝5.4Hz,2H),2.40(t,J＝5.4Hz,2H),3.33(bs,2H),3.40(t,J＝5.4Hz,2H),6.37(s,1H),6.95-7.15(m,4H),7.37(t,J＝7.8Hz,2H),7.83-7.88(m,1H),8.14-8.16(m,1H)。
步骤5-向4-[3-(吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯6(12.0g，33.0mmol)的二氯甲烷(120.0mL)溶液中在冰温下添加三氟乙酸(51mL)并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将挥发物蒸发后获得的棕色油7(13.7g，85％)用于下一步而无需额外纯化。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.56-2.63(m,4H),3.10-3.16(m,4H),6.46(s,1H),6.99-7.15(m,5H),7.39(t,J＝7.5Hz,1H),7.83-7.88(m,1H),8.14-8.16(m,1H)。
步骤6-在25℃下向胺7(15.0g，26.0mmol)的二甲亚砜(150mL)溶液中加入二异丙基乙胺(13.6mL，78.0mmol)和实施例1步骤5的产物(6.7g，26.0mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(1.2L)稀释，用水(3×150mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色固体状的产物8，9.1g(81％)。熔点:52.3-54.1℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.06-1.18(m,2H),1.88(bs,1H),2.26(m,2H),2.28(m,2H),2.69-2.72(m,1H),3.29-3.38(m,4H),6.36(s,1H),6.85-6.86(bs,1H,-CONH-,可交换1H),6.95-7.40(m,10H),7.86(t,J＝6.3Hz,1H),8.14-8.16(m,2H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ(ppm):15.99,27.74,29.40,34.42,36.08,44.41,45.47,112.09,119.31,119.52,121.60,123.58,125.24,125.80,126.41,128.52,129.88,139.19,140.09,140.56,142.42,147.91,154.42,158.09和163.45.MS:426(M+H)。
实施例3：4-[3-(5-三氟甲基-吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在室温下向5-三氟甲基-2-氯-吡啶(23.0g，0.12mol)的DMF(230mL)溶液中添加3-羟基苯基-甲醇(17.4g，0.13mol)和碳酸钾(26.3g，0.19mol)。将反应混合物在100℃搅拌5小时。然后使所得混合物达到室温，用水(200mL)稀释，用乙酸乙酯(3×400mL)萃取，并将有机层经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(12％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物2，28.1g(82％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):4.75(s,2H),7.03-7.10(m,2H),7.19(s,1H),7.26-7.28(m,1H),7.44(t,J＝7.8Hz,1H),7.90-7.94(m,1H),8.45(s,1H)。
步骤2-向2(28.0g，0.10mol)的二氯甲烷(280mL)溶液中滴加亚硫酰氯(8.5mL，0.11mol)，同时在冰浴中搅拌反应。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后减压蒸发挥发物，用甲苯(15mL)稀释并减压蒸发甲苯。将该共沸过程重复3次，得到红色油状的产物3(29.6g，99％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):4.62(s,2H),7.05(d,J＝8.7Hz,1H),7.12-7.13(m,1H),7.23-7.32(m,2H),7.42-7.47(m,1H),7.92-7.95(m,1H),8.46(s,1H)。
步骤3-将3(29.0g，0.10mol)的磷酸三乙酯(26.2mL，0.15mol)溶液在150℃下加热6小时。使反应混合物达到室温并将混合物添加至正庚烷(150mL)中以获得浅橙色沉淀物。将获得的沉淀物过滤并在真空下干燥，得到呈白色固体的产物4(30.8g，94％)，并将其不经进一步纯化而用于下一步骤。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.16(t,J＝6.9Hz,6H),3.24和3.31(2s,2H),3.90-4.00(m,4H),7.07-7.10(m,2H),7.17-7.25(m,2H),7.39(d,J＝8.7Hz,1H),8.23-8.26(m,1H),8.55(s,1H)。
步骤4-向酯4(25.0g，64.0mmol)的THF(100mL)溶液中添加15-冠醚(0.28g，1.3mmol)。将反应冷却(冰浴)并在5分钟内分批添加NaH(2.3g，96.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下向上述反应混合物中加入4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯5(12.81g，64.0mmol)的THF(100mL)溶液，并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用水稀释，得到白色沉淀物。过滤沉淀物并干燥，得到呈白色固体状的产物6(24.4g，87％)。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ(ppm):1.48(s,9H),2.36(t,J＝5.1Hz,2H),2.49(t,J＝5.4Hz,2H),3.43(t,J＝5.7Hz,2H),3.52(t,J＝5.7Hz,2H),6.43(s,1H),7.01-7.03(m,2H),7.14(d,J＝8.4Hz,2H),7.38-7.44(m,1H),8.09-8.12(m,1H),8.44(bs,1H)。
步骤5-在冰温下向6(10.0g，23.0mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中添加三氟乙酸(42.5mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后减压除去挥发物以获得红色油状产物(10.7g，83％)。粗产物7不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.60-2.64(m,4H),3.11-3.17(m,4H),6.47(s,1H),7.08-7.26(m,4H),7.43(t,J＝8.1Hz,1H),8.21-8.23(m,1H),8.56(s,1H),8.76(bs,1H)。
步骤6-在25℃下向胺7(10.5g，18.7mmol)的二甲亚砜(10mL)溶液中加入二异丙基乙胺(9.8mL，56.1mmol)和实施例1步骤5的产物(4.74g，18.7mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(1.0L)稀释，用水(3×150mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物8，7.0g(76％)。熔点:98.9–101.5℃1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.08-1.18(m,2H),1.85-1.90(m,1H),2.77(bs,2H),2.39(bs,2H),2.69-2.72(m,1H),3.32-3.39(m,4H),6.37(s,1H),6.85(s,1H,D2O可交换1H),7.04-7.24(m,9H),7.41(t,J＝7.8Hz,1H),8.22-8.25(m,1H),8.58(s,1H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ(ppm):15.99,24.74,29.39,34.44,36.07,44.37,45.44,112.25,118.97,119.81,120.23,120.66,121.09,121.53,122.08,122.57,123.42,125.79,126.15,126.38,128.52,129.76,130.08,137.98,138.01,139.42,140.34,142.42,145.72,145.77,153.38,158.08,166.01.MS:494(M+H)。
实施例4：4-[3-(吡啶-2-基氧基)-苄基]-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在室温下向实施例2步骤4的产物(6)的甲醇(17mL)溶液中添加10％Pd/C(900mg)，并将反应混合物在氢气球压力下搅拌1小时。将所得反应混合物通过硅藻土床过滤，并将滤液减压浓缩，得到呈黄色油状的产物7(850mg，66％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):0.98-1.04(m,2H),1.37(s,9H),1.43-1.56(m,3H),2.60(m,4H),3.88-3.92(m,2H),6.91-7.02(m,2H),7.10-7.17(m,2H),7.25-7.31(m,2H),7.84-7.89(m,1H),8.14-8.16(m,1H)。
步骤2-在冰温下向酯7(800mg，2.17mmol)的二氯甲烷(8mL)溶液中添加三氟乙酸(3.4mL，4.25体积)并将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后减压除去挥发物以获得棕色油状的产物(800mg，74％)。粗产物8无需进一步纯化即可用于下一步骤。
步骤3-在25℃向粗胺8(500mg，1.0mmol)的二甲亚砜(10mL)溶液中加入二异丙基乙胺(0.5mL，2.82mmol)和实施例1步骤5的产物(256mg，1.0mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(250mL)稀释，用水(4×75mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(60％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物9，230mg(53％)。熔点:126.8-128.6℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.12-1.27(m,4H),1.68-1.71(m,3H),1.89-2.06(m,1H),2.56(d,J＝6.6Hz,2H),2.73(t,J＝11.4Hz,2H),2.82-2.86(m,1H),3.92(d,J＝13.5Hz,2H),4.84(s,1H,-CONH-,可交换1H),6.90-7.03(m,5H),7.15-7.35(m,6H),7.68-7.74(m,1H),8.21-8.23(m,2H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ(ppm):16.45,25.06,29.65,31.82,33.18,37.88,42.86,44.24,111.61,118.48,118.61,121.66,125.36,125.88,126.66,128.24,129.40,139.37,141.02,141.99,147.80,154.28,158.21和163.73.MS:428(M+H)。
实施例5：实施例2的外消旋产物的手性分离
在化合物洗脱之前，使用流动相(正己烷：异丙醇；80:20v/v)平衡手性柱(CHIRALPACK IA 250mm×10mm 5μm)15个柱体积。然后注入500μL的储备溶液，并并根据色谱图中的分离结果收集馏分，该储备溶液通过将500mg实施例2的产物溶解在5mL正己烷和异丙醇(8:2)中制备。馏分FI是第一个洗脱馏分(保留时间：11.5分钟至13.00分钟)和F2来自手性柱的第二个洗脱馏分(保留时间：13.50分钟至15.50分钟)。重复进样以完成剩余(4.5mL)储备溶液的分离。然后分别减压除去F-1和F-2的溶剂，分别得到手性产物5A(entA)(140mg)和5B(entB)(150mg)。
5A 4-[3-(吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸{(1S，2R)-2-苯基-环丙基)}-酰胺。HPLC：99.98％(手性纯度：98.55％)。熔点:45.0-47.1℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.06-1.10(m,1H),1.15-1.18(m,1H),1.87(m,1H),2.24-2.28(m,2H),2.38-2.40(m,2H),2.69-2.72(m,1H),3.29-3.40(m,4H),6.36(s,1H),6.85-6.86(m,1H),6.95-7.27(m,10H),7.37(t,J＝7.8Hz,1H),7.83-7.85(m,1H),8.14-8.16(m,1H).MS:426(M+H)。
5B 4-[3-(吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸{(1R，2S)-2-苯基-环丙基)}-酰胺。HPLC：99.89％(手性纯度：98.93％)。熔点:51.0-54.3℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.06-1.08(m,1H),1.15-1.18(m,1H),1.87(m,1H),2.24-2.26(m,2H),2.38-2.40(m,2H),2.69-2.72(m,1H),3.29-3.40(m,4H),6.36(s,1H),6.84-6.85(m,1H),6.95-7.27(m,10H),7.37(t,J＝7.8Hz,1H),7.83-7.85(m,1H),8.14-8.16(m,1H MS:426(M+H)。
实施例6：4-[3-(嘧啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在室温下向3-羟基苯基-甲醇(500mg，4.0mmol)的DMF(5mL)溶液中添加碳酸铯(2.6g，8.0mmol)和2-氯嘧啶(680mg，6.0mmol)。将反应混合物在100℃搅拌5小时。然后使所得反应混合物冷却至室温，过滤除去碳酸铯，滤液用水(50mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL)萃取，有机层用硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物1，440mg(54％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):4.52(s,2H),5.28(bs,1H),7.03-7.99(m,5H),8.63(d,J＝1.2Hz,2H)。
步骤2-向1(440mg，2.1mmol)的二氯甲烷(8mL)溶液中滴加亚硫酰氯(0.19mL，2.6mmol)，同时在冰浴中搅拌反应。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得反应混合物用冰冷水(10mL)快速冷却并用乙酸乙酯(100mL)萃取并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(25％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅粉色固体的产物2，400mg(83％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):4.78(s,2H),7.17-7.19(m,1H),7.28-7.34(m,3H),7.42-7.45(m,1H),8.65(d,J＝4.5Hz,2H)。
步骤3-将2-(3-氯甲基-苯氧基)-嘧啶2(400mg，1.8mmol)的磷酸三乙酯(0.45mL，2.7mmol)溶液在150℃下加热6小时。使反应混合物达到室温，并挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物3，400mg(69％)).1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.16(t,J＝6.9Hz,6H),3.23(s,1H),3.30(s,1H),3.90-4.00(m,4H),7.06-7.09(m,2H),7.16-7.18(m,1H),7.25-7.28(m,1H),7.37(t,J＝7.5Hz,1H),8.64(d,J＝4.8Hz,2H)。
步骤4-向酯3(400mg，1.2mmol)的THF(2.5mL)溶液中添加15-冠醚(5μL，0.02mmol)。将反应冷却(冰浴)并分批添加NaH(44mg，1.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下向上述反应混合物中添加4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(250mg，1.2mmol)的THF(2.5mL)溶液，并在室温下搅拌16小时内。将所得反应混合物用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL)萃取并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(25％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物4，360mg(80％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.41(s,9H),2.28(t,J＝5.4Hz,2H),2.41(t,J＝5.7Hz,2H),3.33-3.41(m,4H),6.38(s,1H),7.03-7.13(m,3H),7.26(t,J＝4.8Hz,1H),7.39(t,J＝7.8Hz,1H),8.65(d,J＝4.8Hz,2H)。
步骤5-在冰温下向4(360mg，0.97mmol)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中添加三氟乙酸(1.7mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将溶剂蒸发后获得的粗产物用二乙醚洗涤，得到呈灰白色固体状的产物5，0.31g(83％)，并且无需额外纯化即可用于下一步。
步骤6-在25℃下向胺5(310mg，0.6mmol)的二甲亚砜(4.0mL)溶液中加入二异丙基乙胺(0.5mL，3.1mmol)和实施例1步骤5的产物(0.58g，2.4mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，用水(3×50mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(60％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物6，210mg(77％)。熔点:52.7–57.6℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.04-1.06(m,1H),1.14-1.20(m,1H),1.85-1.88(m,1H),2.27(bs,2H),2.39(bs,2H),2.70-2.71(m,1H),3.32-3.39(m,4H),6.37(s,1H),6.85(bs,1H,CONH可交换1H),7.03-7.15(m,6H),7.22-7.28(m,3H),7.39(t,J＝7.8Hz,1H),8.65(d,J＝7.8Hz,2H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ(ppm):16.03,24.76,29.37,34.50,36.10,44.37,45.41,117.37,119.95,122.23,123.49,125.80,126.00,126.34,128.54,129.91,139.19,140.21,142.44,153.20,158.05,160.47和165.21.MS:427(M+H)。
实施例7：4-{3-[1-(2-苯基-环丙基氨基甲酰基)-哌啶-4-亚叉基甲基(ylidenemethyl)]-苯氧基}-苯甲酸甲酯的合成：
步骤1-在室温下向3-羟基苯基-甲醇2(5.0g，40.2mmol)在DMF(50mL)中的溶液中添加碳酸铯(26.2g，80.5mmol)和酯1(7.5g，48.3mmol)。将反应混合物在100℃搅拌5小时。然后使所得反应混合物达到室温并过滤以除去碳酸铯。滤液用水(200mL)稀释，用乙酸乙酯(2×250mL)萃取，有机层经硫酸钠干燥。蒸发后得到的粗产物通过硅胶(230-400)柱(30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化挥发物，得到浅黄色油状产物3，3.2g(31％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):3.81(s,3H),4.51(d,J＝5.7Hz,2H),5.28(t,J＝5.7Hz,1H),6.98-7.06(m,4H),7.17-7.19(m,1H),7.38-7.40(m,1H),7.95-7.98(m,2H)。
步骤2-向醇3(3.2g，12.3mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中滴加亚硫酰氯(1.7mL，14.8mmol)，同时在冰浴中搅拌反应。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得反应混合物用冰冷的水(50mL)快速冷却并用乙酸乙酯(250mL)萃取并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(5％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到无色油状的产物4，2.3g(67％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):3.83(s,3H),4.78(s,2H),7.06-7.12(m,3H),7.21(bs,1H),7.30-7.33(m,1H),7.44-7.49(m,1H),7.98(d,J＝8.7Hz,2H)。
步骤3-将化合物4(2.3g，7.9mmol)的磷酸三乙酯(2.3mL，11.9mmol)溶液在150℃下加热6小时。使反应混合物达到室温，蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物5，3.5g(91％).1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.15(t,J＝6.9Hz,6H),3.23(s,1H),3.30(s,1H),3.83(s,3H),3.89-3.99(m,4H),7.00-7.06(m,4H),7.15-7.17(m,1H),7.39(t,J＝7.8Hz,1H),7.97(d,J＝8.7Hz,2H)。
步骤4-向5(3.5g，9.2mmol)的THF(20mL)溶液中添加15-冠醚(40μL，0.18mmol)。将反应冷却(冰浴)并分批添加NaH(560mg，13.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下向上述反应混合物中加入4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯6(1.9g，9.2mmol)的THF(15mL)溶液，并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用饱和氯化铵(50mL)快速冷却，用乙酸乙酯(500mL)萃取并经硫酸钠干燥。所得粗产物蒸发挥发物后，通过硅胶(230-400)柱(10％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体状的产物7，1.8g(46％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.40(s,9H),2.27-2.40(m,4H),3.40-3.60(m,4H),3.83(s,3H),6.37(s,1H),6.94-6.99(m,2H),7.05-7.12(m,3H),7.39-7.41(m,1H),7.98(d,J＝8.7Hz,2H)。
步骤5-在冰温下向叔丁基酯7(1.8g，4.2mmol)的二氯甲烷(18.0mL)溶液中添加三氟乙酸(9.0mL)并将反应混合物在室温下搅拌1h。将蒸发溶剂得到的粗产物用正己烷洗涤，得到粘稠黑色液体状的产物8，1.5g(83％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.63-2.72(m,4H),3.16-3.28(m,4H),3.91(s,3H),6.49(s,1H),6.86(s,1H),6.95-7.02(m,4H),7.36(t,J＝8.1Hz,1H),8.03(t,J＝8.4Hz,2H)。
步骤6-在25℃向胺8(1.5g，3.4mmol)的二甲亚砜(15.0mL)溶液中加入二异丙基乙胺(2.0mL，10.2mmol)和实施例1步骤5的产物(0.86g，3.4mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(250mL)稀释，用水(2×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(25％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物9，0.9g(54％)。熔点:48.5-53.2℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.10-1.20(m,2H),1.88(bs,1H),2.26(bs,2H),2.37(bs,2H),2.70-2.71(m,1H),3.31-3.38(m,4H),3.83(s,3H),6.36(s,1H),6.84(bs,1H,CONH可交换1H),6.94-7.26(m,10H),7.42(t,J＝7.8Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,2H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ(ppm):16.02,24.76,29.40,34.49,36.07,44.32,45.38,52.44,117.81,118.27,120.49,123.40,124.51,125.61,125.79,126.33,128.53,130.59,132.02,139.85,140.45,142.43,155.40,158.04,161.73和166.11.MS:483(M+H)。
实施例8：4-{3-[1-(2-苯基-环丙基氨基甲酰基)-哌啶-4-亚叉基甲基(ylidenemethyl)]-苯氧基}-苯甲酸的合成：
在25℃下向实施例7步骤6的产物(0.5g，1.03mmol)的甲醇(3.0mL)溶液中添加氢氧化钠(120mg，3.1mmol)的水(2.0mL)溶液。将反应混合物在55℃搅拌16小时。将溶剂蒸发后获得的粗产物用水(20.0mL)稀释并用乙酸乙酯(2×20mL)洗涤水层。然后将水层酸化(pH＝2，1.0N HCl)，用固体NaCl饱和并用乙酸乙酯(2×150mL)萃取产物。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩，得到白色固体产物350mg(72％)。熔点:99.4-102.5℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.15-1.29(m,2H),1.88(bs,1H),2.26(bs,2H),2.37(bs,2H),2.71(bs,1H),3.32-3.38(m,4H),6.36(s,1H),6.84(bs,1H,CONH可交换1H),6.93-7.44(m,11H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),12.83(bs,1H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ(ppm):16.02,24.75,29.40,34.51,36.07,44.31,45.37,117.76,118.17,120.38,123.43,125.47,125.79,126.32,128.54,130.57,132.13,139.81,140.41,144.44,155.59,158.03,163.36和167.22.MS:467(M-H)。
实施例9：4-(3-吡咯烷-1-基-苄基)-哌啶-1-羧酸-(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-3-溴苄基溴(6.0g，24.0mmol)的磷酸三乙酯(6.2mL，36.0mmol)溶液在130℃下加热16小时。将反应混合物冷却并使其达到室温，并通过硅胶(230-400)柱(30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化挥发物蒸发后获得的粗产物，得到呈无色油状的产物2，6.5g(89％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.17(t,J＝7.2Hz,6H),3.24(s,1H),3.31(s,1H),3.91-4.01(m,4H),7.28-7.29(m,2H),7.43-7.50(m,2H).MS:307.0(M+)和309.0(M+2)。
步骤2-向2(3.0g，9.7mmol)的THF(20mL)溶液中添加15-冠醚(0.04mL，0.19mmol)。将反应冷却(冰浴)并分批添加NaH(0.58g，14.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下向上述反应混合物中加入4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.95g，9.7mmol)的THF(10mL)溶液，并在室温下搅拌在16小时。将所得反应混合物用水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(5％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈黄色油状的产物3，1.8g(53％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.41(s,9H),2.28(bs,2H),2.38(bs,2H),3.34-3.41(m,4H),6.36(s,1H),7.25-7.30(m,2H),7.41-7.43(m,2H).MS:252.0(M-BOC)。
步骤3-在氩气氛下在室温下向化合物3(2.0g，7.0mmol)的1,4-二恶烷(20.0mL)溶液中添加吡咯烷(0.9mL，10.6mmol)、碳酸铯(7.0g，21.2mmol)、外消旋BINAP(0.9g，1.4mmol)和乙酸钯(0.95g，1.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后在回流下搅拌16小时。将所得反应物质通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯(250mL)洗涤。用水(2×100mL)洗涤乙酸乙酯层，经硫酸钠干燥并浓缩。将得到的粗产物通过硅胶柱色谱法(15％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物4，0.6g(32％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.49(s,9H),2.01(bs,4H),2.33-2.35(m,2H),2.50-2.53(m,2H),3.27-3.29(m,4H),3.39-3.49(m,2H),3.50-3.54(m,2H),6.36-6.53(m,4H),7.19(t,J＝8.1Hz,1H).MS:343.7(M+H)。
步骤4-向化合物4(0.6g，1.7mmol)的四氢呋喃(10.0mL)溶液中添加10％Pd/C(240mg)。将反应物料在氢气压力(1kg/cm2)下在室温搅拌两小时。释放氢气压力后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤，用四氢呋喃洗涤，浓缩滤液，得到呈淡黄色液体的产物5(0.6g)。粗产物不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.10-1.21(m,2H),1.49(s,9H),1.64-1.72(m,3H),1.98-2.03(m,4H),2.49(d,J＝6.9Hz,2H),2.65(t,J＝12.3Hz,2H).3.27-3.31(m,2H),4.07-4.15(m,2H),6.35(s,1H),6.42-6.47(m,2H),7.14(t,J＝7.8Hz,1H).MS:345.7(M+H)。
步骤5-在冰温下向化合物5(0.6g，1.7mmol)的二氯甲烷(6.0mL)溶液中添加三氟乙酸(3mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发挥发物后获得的棕色油6(0.6g)无需额外纯化即可用于下一步骤。
步骤6-在25℃向胺6(600mg，1.9mmol)的二甲亚砜(6.0mL)溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(1.1mL，5.8mmol)和实施例1步骤5的产物(0.5g，1.9mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)并通过制备型HPLC(phenomenex 250×221.20mm,10μM，0.1％TFA水溶液和乙腈流动相)纯化得到呈浅黄色固体产物7，160mg(23％)。熔点:145.6℃–151.5℃.IR:3334,2842,1620,1600,1545,1252和752cm-1.1H NMR:(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):0.95-1.19(m,3H),1.13-1.17(m,1H),1.50-1.55(m,2H),1.63-1.66(m,1H),1.81-1.87(m,1H),1.93(bs,4H),2.40-2.42(m,2H),2.56-2.60(m,2H),2.67-2.68(m,1H),3.19(bs,4H),3.90(d,J＝12.9Hz,2H),6.32-6.40(m,3H),6.71(bs,1H),7.02-7.15(m,4H),7.21-7.26(m,2H).MS:404.5(M+H)。
实施例10：4-(3-吗啉-4-基-苄基)-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在氩气氛下在室温下向实施例9步骤2的产物(1.5g，4.2mmol)的1,4-二恶烷(15.0mL)溶液中添加吗啉(0.45mL，5.1mmol)、碳酸铯(4.1g，12.6mmol)、外消旋BINAP(0.52g，0.84mmol)和乙酸钯(0.56g，0.84mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后在回流下搅拌16小时。将所得反应物质冷却并通过硅藻土垫过滤并用乙酸乙酯(250mL)洗涤。用水(2×100mL)洗涤乙酸乙酯层，用硫酸钠干燥有机层并浓缩。将得到的粗产物通过硅胶柱色谱法(15％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色油状的粗产物2，0.35g。
步骤2-向化合物2(0.85g，2.37mmol)的四氢呋喃(10.0mL)溶液中添加10％Pd/C(350mg)。将反应物料在氢气压力(1kg/cm2)下在室温搅拌两小时。释放氢气压力后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤，浓缩滤液，得到呈浅黄色液体的产物3(0.8g)。产物无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤3-在冰温下向粗化合物3(0.8g，2.2mmol)的二氯甲烷(8.0mL)中的溶液中添加三氟乙酸(4mL)并将反应混合物在室温下搅拌1h。挥发物蒸发后获得的棕色油4(0.8g)无需进一步纯化用于下一步骤。
在25℃向胺4(800mg，2.3mmol)的二甲亚砜(8.0mL)溶液中添加二异丙基乙胺(1.3mL，7.0mmol)和实施例1步骤5的产物(0.6g，2.3mmol)。将反应混合物在60℃搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色固体的产物5，420mg。熔点:182.3℃-186.0℃.IR:3330,2841,1620,1600,1545,1247和756cm-1.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):0.95-1.08(m,3H),1.11-1.18(m,1H),1.49-1.53(m,2H),1.61-1.67(m,1H),1.85-1.88(m,1H),2.43-2.61(m,4H),2.67-2.68(m,1H),3.08(t,J＝4.5Hz,4H),3.74(t,J＝4.5Hz,4H),3.90(d,J＝12.6Hz,2H),6.61(d,J＝7.2Hz,1H),6.70-6.76(m,3H,一个1H is D2O可交换),7.07-7.15(m,4H),7.22-7.27(m,2H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ(ppm):16.01,24.75,32.08,34.56,37.96,43.17,43.98,49.00,66.61,113.09,116.43,120.52,125.77,126.29,128.53,129.12,141.31,142.51,151.50,158.28.MS:420.2(M+H)。
实施例11：4-[3-(吡啶-2-基氧基)-苯氧基]-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-向1,3-二羟基苯(1.0g，9.0mmol)的DMF(10.0mL)溶液中添加Cs2CO3(5.92g，18.0mmol)和2-氟吡啶(0.8mL，9.0mmol)。将反应混合物加热至100℃并保持16小时。然后使所得混合物达到室温，用水(250mL)稀释，用乙酸乙酯(3×500mL)萃取，并用硫酸钠干燥有机层。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(10％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物3，400mg(23％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):6.20(s,1H),6.48-6.53(m,1H),6.61(d,J＝8.1Hz,1H),6.98(d,J＝8.1Hz,1H),7.11-7.21(m,2H),7.84(t,J＝8.1Hz,1H),8.18(bs,1H),9.61(s,1H,D2O可交换1H).MS:187.9(M+H)。
步骤2-在室温下向化合物3(400mg，2.14mmol)的DMF(8.0mL)溶液中添加CS2CO3(1.4g，4.2mmol)。将反应混合物搅拌5分钟，然后在室温下将DMF(2.0mL)中的化合物4(600mg，2.14mmol)添加到反应混合物中并将反应混合物在65℃搅拌8小时。将反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(3×50mL)洗涤，并用硫酸钠干燥乙酸乙酯层。蒸发后得到的粗产物挥发物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物5，540mg(67％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.40(s,9H),1.48-1.51(m,2H),1.89-1.92(m,2H),3.14-3.16(m,2H),3.63-3.68(m,2H),4.56-4.58(m,1H),6.65-6.68(m,1H),6.75(s,1H),6.80-6.84(m,1H),6.99-7.02(m,1H),7.14(d,J＝5.1Hz,1H),7.29(t,J＝7.8Hz,1H),7.85(t,J＝7.5Hz,1H),8.17(d,J＝5.1Hz,1H).MS:371.4(M+H)。
步骤3-在冰温下向化合物5(0.4g，0.8mmol)的二氯甲烷(8.0mL)溶液中添加三氟乙酸(2.0mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发挥发物后获得的棕色油6无需额外纯化即可用于下一步骤。
在25℃向胺6(390mg，0.78mmol)的二甲亚砜(5.0mL)溶液中添加二异丙基乙胺(0.67mL，3.9mmol)和实施例1步骤5的产物(198mg，0.78mmol)。将反应混合物在60℃搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(250mL)稀释，用水(3×10mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(70％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到灰白色低熔点固体状产物。获得的产物通过制备型HPLC进一步纯化，获得呈灰白色低熔点固体的产物7，200mg。熔点:43.9℃–46.8℃.IR:3313,1621,1586,1423和1235cm-1.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.07-1.09(m,1H),1.14-1.18(m,1H),1.46-1.49(m,2H),1.86(bs,3H),2.68-2.69(m,1H),3.08(t,J＝9.6Hz,2H),3.64-3.68(m,2H),4.53(bs,1H),6.64-6.67(m,1H),6.74(bs,1H),6.80(bs,1H),6.83(bs,1H,D2O可交换1H),7.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.08-7.14(m,4H),7.21-7.31(m,3H),8.82(t,J＝7.2Hz,2H),8.16(d,J＝5.1Hz,1H).MS:430.4(M+H)。
实施例12：4-[3-(1H-吡唑-4-基)-苄基]-哌啶-1-羧酸(-2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-向化合物1(2.0g，10.3mmol，Sigma Aldrich)在二甲基甲酰胺(20.0mL)中的冷却(0-5℃)溶液中加入4-二甲基氨基吡啶(0.25g，2.0mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.0mL，15.4mmol)。将所得反应物料在室温下搅拌12小时。反应用水(50.0mL)快速冷却并用乙酸乙酯(200mL)萃取。将乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将得到的粗产物通过硅胶柱色谱法(15％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈灰白色固体的产物2，1.25g(40％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.27(s,12H),1.58(s,9H),7.87(s,1H),8.37(s,1H).MS:195.3(M-BOC+H)。
步骤2-在室温下向实施例9步骤2的化合物产物(1.0g，2.8mmol)的DMF(10mL)溶液中添加化合物2(1.9g，5.6mmol)和2N碳酸钠溶液(4.3mL，8.5mmol)。将反应混合物在氩气氛下搅拌10分钟。然后在氩气下将四(三苯基膦)钯(0)(0.33g，0.28mmol)添加至反应混合物中。将所得反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用水(100mL)快速冷却并用乙酸乙酯(500mL)萃取，用水(2×250mL)和卤水(100mL)洗涤。将乙酸乙酯层用硫酸钠干燥并浓缩。在减压下蒸发溶剂后得到的粗产物通过硅胶柱色谱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到灰白色固体状产物3，550mg(57％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.42(s,9H),2.28-2.31(m,2H),2.42-2.44(m,2H),3.34-3.44(m,4H),6.39(s,1H),7.03(d,J＝7.5Hz,1H),7.31(t,J＝7.5Hz,1H),7.44-7.47(m,2H),7.92(s,1H),8.19(s,1H),12.94(s,1H).MS:338.1(M-H)。
步骤3-向化合物3(0.5g，1.4mmol)在20％甲醇的氯仿(10.0mL)溶液中添加10％Pd/C(200mg)。将反应物料在氢气压力(1kg/cm2)下于室温搅拌24小时。将反应物通过硅藻土垫过滤，浓缩滤液，得到呈浅黄色液体的产物4(0.5g)。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤4-在冰温下向化合物4(0.5g，1.6mmol)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中添加三氟乙酸(2.5mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将挥发物蒸发后获得的棕色油5(0.5g)用于下一步骤，无需额外纯化。
步骤5-在25℃向胺5(500mg，1.0mmol)的二甲亚砜(5.0mL)溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.8mL，4.2mmol)和实施例1步骤5的产物(270mg，1.0mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(3％甲醇的氯仿溶液)纯化，得到呈灰白色固体的产物6，210mg。熔点:157.4℃–163.4℃.IR:3330,1619,1545,1475和753cm-1.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.01-1.17(m,4H),1.51-1.55(m,2H),1.82(bs,1H),1.83-1.85(m,1H),2.54-2.68(m,5H),3.90(d,J＝12.6Hz,2H),6.71(d,J＝2.7Hz,1H,D2O可交换1H),6.98(d,J＝7.5Hz,1H),7.07-7.15(m,3H),7.21-7.27(m,3H),7.41-7.43(m,2H),7.90(s,1H),8.17(s,1H),12.91(s,1H,D2O可交换1H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ(ppm):16.00,24.74,32.06,34.53,37.88,42.81,43.98,121.69,123.17,125.77,126.31,127.05,128.52,128.99,133.22,141.06,142.50,158.22.MS:401.3(M+H)。
实施例13：4-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苄基]-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
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步骤1-向实施例12步骤2的产物(0.7g，2.0mmol)在THF(25mL)中的冷却(0-5℃)溶液中添加氢化钠(0.25g，6.1mmol)和碘甲烷(0.7g，2.0mmol)。0.4mL，6.1mmol)。将所得反应物料在室温下搅拌1小时。将反应混合物用水(100mL)快速冷却并用乙酸乙酯(500mL)萃取。有机层用水(2×250mL)和卤水(100mL)洗涤。将乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥并浓缩。获得的粗产物通过硅胶柱色谱法(20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈灰白色固体的产物1，600mg(83％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.45(s,9H),2.30-2.31(m,2H),2.42-2.44(m,2H),3.35-3.44(m,4H),3.89(s,3H),6.39(s,1H),7.02-7.05(m,1H),7.30(t,J＝7.5Hz,1H),7.39-7.43(m,2H),7.85(s,1H),8.14(s,1H).MS:298.0(M-叔丁基+H)。
步骤2-向化合物1(0.6g，1.7mmol)的20％甲醇的氯仿(10.0mL)溶液中添加10％Pd/C(240mg)。将反应物料在氢气压力(1kg/cm2)下于室温搅拌16小时。将反应物通过硅藻土垫过滤，浓缩滤液，得到呈浅黄色液体的产物2，(0.6g，98％)。获得的产物无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.45(s,9H),2.30-2.31(m,2H),2.42-2.44(m,2H),3.35-3.44(m,4H),3.89(s,3H),6.39(s,1H),7.02-7.05(m,1H),7.30(t,J＝7.5Hz,1H),7.39-7.43(m,2H),7.85(s,1H),8.14(s,1H).MS:298.0(M-叔丁基+H)。
步骤3-在冰温下向化合物2(0.6g,1.6mmol)的二氯甲烷(6.0mL)溶液中加入三氟乙酸(3.0mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发挥发物后获得的棕色油状物3(0.6g)无需额外纯化即可用于下一步骤。
步骤4-在25℃向胺3(600mg,1.6mmol)的二甲亚砜溶液(6.0mL)中加入二异丙基乙胺(1.2mL，6.4mmol)和实施例1步骤5的产物(370mg，1.4mmol)。将反应混合物在60℃搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(3％甲醇的氯仿溶液)纯化，得到呈灰白色固体的产物4，350mg(53％)。熔点:158.4℃–160.3℃.IR:3353,1619,1544,1473和752cm-1.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.01-1.15(m,4H),1.51-1.55(m,2H),1.82-1.83(m,1H),1.84-1.86(m,1H),2.57-2.68(m,4H),3.34-3.37(m,1H),3.85(s,3H),3.90(d,J＝13.2Hz,2H),6.71(d,J＝2.7Hz,1H,D2O可交换1H),6.98(d,J＝7.5Hz,1H),7.07-7.15(m,3H),7.21-7.27(m,3H),7.36-7.38(m,2H),7.83(s,1H),8.11(s,1H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ(ppm):16.00,24.74,32.05,34.53,37.89,42.79,43.99,122.44,122.97,125.77,126.10,126.31,127.15,128.19,128.52,129.05,132.91,136.43,141.11,142.50,158.21.MS:415.0(M+H)。
实施例14：4-(3-苯并咪唑-1-基-苄基)-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-将化合物1(5.0g，23.14mmol)的磷酸三乙酯(5.9mL，37.7mmol)溶液在130℃下加热16小时。将反应混合物冷却至室温，并蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色油状物的产物2，4.9g(89％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.09-1.21(m,6H),3.44(s,1H),3.51(s,1H),3.93-4.07(m,4H),7.60-7.66(m,1H),7.73-7.76(m,1H),8.11-8.14(m,1H),8.19(s,1H).MS:274.1(M+1)。
步骤2-向化合物2(4.9g，20.3mmol)的THF(50mL)溶液中添加15-冠醚(0.08mL，0.04mmol)。将反应冷却(冰浴)并分批添加NaH(1.22g，30.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下向上述反应混合物中添加4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.05g，20.3mmol)的THF(10mL)溶液并在室温下搅拌4小时。将所得反应混合物用水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(3×250mL)萃取并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(5％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈黄色油状的产物3，4.0g(62％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.42(s,9H),2.33(t,J＝5.7Hz,2H),2.41(t,J＝5.7Hz,2H),3.38-3.41(m,2H),3.44(t,J＝5.7Hz,2H),6.50(s,1H),7.61-7.71(m,2H),8.02(s,1H),8.07-8.10(m,1H).MS:219.2(M-BOC+H),263.1(M-叔丁基+1)。
步骤3-向化合物3(4.0g，12.5mmol)的90％甲醇的二氯甲烷(40.0mL)溶液中添加10％Pd/C(3.0g)。将反应物料在氢气压力(1kg/cm2)下于室温搅拌20小时。将反应物通过硅藻土垫过滤，浓缩滤液，得到呈浅黄色液体的产物4(1.5g，41％)。产物不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):0.81-1.00(m,2H),1.38(s,9H),1.77-1.80(m,2H),2.28-2.34(m,2H),2.60-2.72(m,1H),3.90(t,J＝12.6Hz,2H)4.92(s,2H),6.28-6.38(m,3H),6.90(t,J＝12.6Hz,1H).MS:191.1(M-BOC+1)。
步骤4-在室温下向化合物4(1.5g，3.4mmol)的DMF(8.0mL)溶液中添加Cs2CO3(8.9g，25.7mmol)。将反应混合物搅拌5分钟，并在室温下将1-氟-2-硝基苯(0.8g，3.7mmol)的DMF(2.0mL)溶液添加到反应混合物中，并将混合物在100℃搅拌16小时。将反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤。将乙酸乙酯层用硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(7％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈红黄色油状的产物5，500mg(35％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):0.97-1.08(m,2H),1.38(s,9H),1.54-1.58(m,2H),1.65-1.68(m,1H),2.40-2.52(m,2H),2.64-2.73(m,2H),3.91(d,J＝12.9Hz,2H),6.87(t,J＝7.5Hz,1H),7.01(d,J＝7.8Hz,1H),7.13-7.20(m,3H),7.30-7.35(m,1H),7.50(t,J＝6.6Hz,1H),8.11(d,J＝7.5Hz,1H),9.35(s,1H).MS:410.0(M-H)。
步骤5-在室温25℃向化合物5(500mg，1.2mmol)的甲酸(10mL)溶液中添加甲酸钠(290mg，4.3mmol)和Pd/C(10mol％，120mg，0.01mmol)。然后将反应混合物在110℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，然后用20mL甲酸通过硅藻土过滤。将挥发物蒸发后获得的粗产物溶解于5％甲醇的二氯甲烷(50mL)溶液中并过滤以除去无机盐。将滤液浓缩以获得呈灰白色固体状的产物6(350mg)。粗产物不经纯化即用于下一步。
步骤6-在25℃向胺6(350mg，1.2mmol)的二甲亚砜(5.0mL)溶液中加入二异丙基乙胺(1.03mL，6.0mmol)和实施例1步骤5的产物(186mg，1.2mmol)。将反应混合物在60℃搅拌6小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(3×50mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(1.5％甲醇的二氯甲烷)纯化，得到呈灰白色固体的产物7，170mg(31％)。熔点:72.5℃–76.4℃.IR:3347,2931,16161,1542和742cm-1.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.00-1.14(m,4H),1.54-1.57(m,2H),1.71-1.79(m,1H),1.80-1.84(m,1H),2.48-2.65(m,5H),3.92(d,J＝12.9Hz,2H),6.72(d,J＝2.7Hz,1H,D2O可交换1H),7.07-7.15(m,3H),7.21-7.26(m,3H),7.30-7.35(m,3H),7.50-7.54(m,3H),7.60-7.62(m,1H),7.77-7.79(m,1H),8.55(s,1H).MS:451.0(M+H)。
实施例15：4-(3-吡咯烷-1-基-亚苄基)-哌啶-1-羧酸(2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在氩气氛下在室温向实施例9步骤2的产物(2.0g，7.0mmol)的1，4-二恶烷(20.0mL)溶液中添加吡咯烷(0.9mL，10.6mmol)、碳酸铯(7.0g，21.2mmol)、外消旋BINAP(0.9g，1.4mmol)和乙酸钯(0.95g，1.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后在回流下搅拌16小时。将所得反应物质通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯(250mL)洗涤。用水(2×100mL)洗涤乙酸乙酯层，经硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物经硅胶柱色谱纯化(15％乙酸乙酯的石油醚溶液)，得到呈浅黄色油状的产物2，0.6g(32％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.49(s,9H),2.01(bs,4H),2.33-2.35(m,2H),2.50-2.53(m,2H),3.27-3.29(m,4H),3.39-3.49(m,2H),3.50-3.54(m,2H),6.36-6.53(m,4H),7.19(t,J＝8.1Hz,1H).MS:343.7(M+1)。
步骤2-在冰温下向化合物2(0.6g,1.7mmol)的二氯甲烷(6.0mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发挥发物后获得的棕色油状物3(0.6g)无需额外纯化即可用于下一步骤。
步骤3-在25℃向胺3(600mg，1.9mmol)的二甲亚砜(6.0mL)溶液中加入二异丙基乙胺(1.1mL，5.8mmol)和实施例1步骤5的产物(0.5g，1.9mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈灰白色固体的产物4，300mg(42％)。熔点:145.7℃–147.4℃.IR:3292,2963,1626,1533,1263和746cm-1.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.22-1.26(m,2H),2.02(bs,5H),2.38-2.41(m,2H),2.56-2.59(m,2H),2.88(bs,1H),3.30(bs,4H),3.36-3.40(m,2H),3.47-3.51(m,2H),4.87(bs,1H,D2O可交换1H),6.38-6.52(m,3H),7.19-7.46(m,7H).13C NMR(75MHz,CDCl3)δ(ppm):16.01,24.75,32.08,34.56,37.96,43.17,43.98,49.00,66.61,113.09,116.43,120.52,125.77,126.29,128.53,129.12,141.31,142.51,151.50,158.28.MS:402.7(M+H)。
实施例16：苯基N-[(1R，2S)-2-苯基环丙基]氨基甲酸酯的合成：
使用文献(WO2013/057322)中描述的一般方法来合成上述手性中间体。
步骤1-向反式-2-苯基-环丙胺盐酸盐(100g，0.59mol)在水(500mL)中的悬浮液中添加饱和碳酸氢钠溶液在0-5℃下保持20分钟，并碱化至pH>7。将反应混合物在25-30℃下搅拌2小时。将反应混合物用二氯甲烷(3×700mL)萃取，将分离的有机相用硫酸钠干燥并浓缩，得到呈灰白色固体的2-苯基-环丙胺2(71.2g，92％)。
步骤2-在0-5℃下向反式-2-苯基-环丙胺(70g，0.52mol)的乙醇(700mL)溶液中添加L(+)酒石酸(79g，0.52mol)并25-30℃下搅拌续lh。反应完成后，过滤固体并干燥，得到酒石酸盐形式的2-苯基-环丙胺(133g)。将异丙醇:水(3:1)(1.3L)添加到上述盐(130g)中并在70℃下搅拌2小时。使反应混合物在1小时内冷却至室温。通过过滤收集分离的固体，得到呈白色固体的(1R,2S)-N-{[(2R,3R)-3-羧基-2,3-二羟基丙酰基]氧基}-2-苯基环丙-1-胺(3)，(60g，90％)。
步骤3-在0-5℃在20分钟内向(1R,2S)-N-{[(2R,3R)-3-羧基-2,3-二羟基丙酰基]氧基}-2-苯基环丙-1-胺(3)(60g，0.19mol)的水(200mL)溶液中加入1.0M氢氧化钠(194mL，0.19mol)并搅拌1小时。用乙酸乙酯(2×700mL)萃取水相。合并的萃取物用水(2×400mL)、卤水(400mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到呈淡黄色固体的(1R,2S)-2-苯基-环丙胺4(25g，87％)。
步骤4-在冰浴温度下向胺4(15.0g，88.0mmol)在二氯甲烷(150mL)中的悬浮液中添加三乙胺(36.0mL，0.26mol)、氯甲酸苯酯(20.7g，0.13mol)。然后除去冰浴并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(1.0L)稀释，用水(2×200mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(10％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体产物5，16.0g(71％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.15-1.25(m,2H),2.04-2.08(m,1H),2.72-2.75(m,1H),7.10-7.40(m,10H),8.17(bs,1H).MS(M+H)254.3。
步骤5-在0℃-5℃向(1R，2S)-2-苯基-环丙胺4(25.0g，0.19mol)在乙醚(150mL)中的搅拌溶液中添加2.0M HCl的乙醚(140mL，0.28mol)溶液。将反应混合物在20-25℃下搅拌30分钟。将反应混合物减压浓缩。用乙醚(2×100mL)洗涤所得反应物质，得到呈灰白色固体的产物6，(1R,2S)-2-苯基-环丙胺的盐酸盐，30.0g(95％)。熔点:179.2-180.1℃；IR:3643,3054,1979,1501,1160,799,743,696cm-1.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.14-1.19(m,1H),1.43–1.48(m,1H),2.38-2.43(m,1H),2.72-2.76(m,1H),7.09-7.24(m,3H),7.22-7.33(m,2H),8.81(bs,3H).MS(M+H)134.3。手性HPLC纯度：100％。通过将分析和光谱数据与购自Sigma-Aldrich的真实样品(1R,2S)-2-苯基环丙胺盐酸盐进行匹配，进一步证实了6的手性。
实施例17：4-[3-(5-三氟甲基-吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸[(1S,2R)-2-苯基-环丙基)]-酰胺的合成：
步骤1-在冰浴温度下向(1S，2R)-2-苯基环丙-1-胺2(500mg，2.95mmol)在二氯甲烷(5.0mL)中的悬浮液中添加三乙胺(1.21mL，8.85mol)、氯甲酸苯酯1(0.41)mL，3.3mol)。然后移除冰浴并在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(1.0L)稀释，用水(2×200mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(10％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物3，500mg(71％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.19-1.26(m,2H),2.05-2.08(m,1H),2.72-2.75(m,1H),7.11-7.38(m,10H),8.18(bs,1H).MS(M+H)254.5。
步骤2-在25℃向实施例3步骤5的产物(1.0g，2.2mmol)的二甲亚砜(10mL)溶液中添加二异丙基乙胺(1.2mL，6.6mmol)和3(556mg，2.2mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌4小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物4，770mg(70％)。熔点:100.2℃-101.0℃.IR:3329,1622,1531,1487,1329,1076cm-1.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.08-1.18(m,2H),1.85-1.90(m,1H),2.27(t,J＝5.6Hz,2H),2.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.69-2.72(m,1H),3.32(t,J＝6.0Hz,2H),3.38(t,J＝6.0Hz,1H),6.37(s,1H),6.85(d,J＝3.2Hz,1H),7.04-7.41(m,10H),8.22-8.25(m,1H),8.58(bs,1H).MS:494.3(M+H).HPLC纯度:99.78％.手性HPLC纯度:100％。
实施例18：4-[3-(5-三氟甲基-吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸[(1R,2S)-2-苯基-环丙基)]-酰胺的合成：
步骤1-在冰浴温度下向(1R,2S)-2-苯基-环丙胺2(500mg，2.95mmol)在二氯甲烷(5.0mL)中的悬浮液中添加三乙胺(1.21mL，8.85mol)、氯甲酸苯酯1(0.41mL)，3.3mol)。然后除去冰浴并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(250mL)稀释，用水(2×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(10％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物3，495mg(70％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.15-1.25(m,2H),2.04-2.08(m,1H),2.72-2.75(m,1H),7.10-7.40(m,10H),8.17(bs,1H).MS(M+H)254.3。
步骤2-在25℃下向实施例3步骤5的产物(1.0g，2.2mmol)的二甲亚砜(10mL)溶液中添加二异丙基乙胺(1.2mL，6.6mmol)和3(556mg，2.2mmol)C。将反应混合物在60℃下搅拌4小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物4，715mg(65％)。熔点:101.8℃-103.2℃.IR:3329,1623,1531,1388,1329,1076,697cm-1.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.07-1.18(m,2H),1.85-1.90(m,1H),2.25–2.40(m,4H),2.67–2.75(m,2H),2.69-2.72(m,1H),3.31(t,J＝6.0Hz,2H),3.38(t,J＝5.6Hz,1H),6.36(s,1H),6.85(s,1H),7.04-7.15(m,6H),7.22-7.41(m,4H),8.22-8.24(m,1H),8.58(bs,1H).MS:494.3(M+H).HPLC纯度:99.96％.手性HPLC纯度:100％
实施例19：4-({3-[(5-甲基吡啶-2-基)氧基]苯基}亚甲基)-N-[2-苯基环丙基]哌啶-1-甲酰胺的合成：
步骤1-在室温下向2-氟-5-甲基-吡啶1(14.76g，0.13mol)的DMF(150mL)溶液中添加3-羟基苯基-甲醇(15.0g，0.12mol)和碳酸铯(59.0g，0.18mol)。将反应混合物在100℃搅拌5小时。然后将所得混合物冷却并使其达到室温，用水(250mL)稀释，用乙酸乙酯(3×500mL)萃取并将有机层经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色油状的产物2，6.0g(23％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.25(s,3H),4.40(d,J＝6.0Hz,2H),5.22(t,J＝6.0Hz,1H),6.91-6.94(m,2H),7.01(s,1H),7.11(d,J＝7.5Hz,1H),7.34(t,J＝7.5Hz,1H),7.66–7.69(m,1H),7.98(d,J＝2.1Hz,1H).MS:(M+H)216.2。
步骤2-向[3-(5-甲基-吡啶-2-基氧基)-苯基]-甲醇2(6.0g，0.027mol)的二氯甲烷(60mL)溶液中滴加亚硫酰氯(2.3mL，0.03mol)mol)，同时在冰浴中搅拌反应。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后减压蒸发挥发物并用甲苯(25mL)稀释并减压蒸发甲苯。重复该共沸过程3次以获得浅棕色油状的产物3(6.2g，95％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.25(s,3H),4.76(s,2H),6.95–6.98(m,2H),7.15–7.26(m,2H),7.38–7.40(m,1H),7.66–7.69(m,1H),7.99–8.0(m,1H).MS:(M+H)234.3。
步骤3-将2-(3-氯甲基-苯氧基)-5-甲基-吡啶(6.2g，0.026mol)的磷酸三乙酯(7.3mL，0.042mol)溶液在150℃下加热6小时。使反应混合物达到室温，蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(60％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物4，8.3g。产物含有未使用的磷酸三乙酯，无需额外纯化即可用于下一步。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.13–1.23(m,6H),2.25(s,3H),3.20–3.27(m,2H),3.89–3.99(m,4H),6.91-6.99(m,3H),7.09(d,J＝7.4Hz,1H),7.32(t,J＝8.1Hz,1H),7.66–7.69(m,1H),7.98–8.32(m,1H).MS:(M+H)336.1。
步骤4-向[3-(5-甲基-吡啶-2-基氧基)-苄基]-膦酸二乙酯4(8.3g，0.024mol)的THF(40mL)溶液中添加15-冠醚(0.1g，0.48mmol)。将反应冷却(冰浴)并分批添加NaH(1.44g，0.036mol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下向上述反应混合物中添加4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.9g，0.024mol)的THF(40mL)溶液，并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用水(250mL)稀释，用乙酸乙酯(3×500mL)萃取并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(3％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色油状的产物5(6.7g，76％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):1.41(s,9H),2.25–2.29(m,5H),2.39(t,J＝6.0Hz,2H),3.36–3.42(m,4H),6.36(s,1H),6.90–6.95(m,3H),7.02-7.05(m,1H),7.35(t,J＝7.8Hz,1H),7.66-7.70(m,1H),7.98(d,J＝2.4Hz,1H).MS:(M+H)381.2。
步骤5-在冰温下向4-[3-(5-甲基-吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯5(6.7g，0.017mol)的二氯甲烷(67.0mL)溶液中加入三氟乙酸(27mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发挥发物后获得的产物6(6.96g)无需另外纯化即可用于下一步骤。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.24(s,3H),2.61(t,J＝6.1Hz,2H),3.10–3.30(m,4H),6.36(s,1H),6.90–6.95(m,3H),7.02-7.05(m,1H),7.35(t,J＝7.8Hz,1H),7.66-7.70(m,1H),7.98(d,J＝2.4Hz,1H),8.70(bs,2H).MS:(M+H)281.3。
步骤6-在25℃向胺6(3.0g，7.0mmol)的二甲亚砜(30mL)溶液中加入二异丙基乙胺(4.2mL，22.0mmol)和实施例1步骤5的产物(1.93g，7.0mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×150mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈灰白色固体的产物7，2.33g(70％)。熔点:87.8℃-91.0℃.IR:3250,2895,1624,1425,1263,848,774cm-1.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.05-1.18(m,2H),1.80–1.95(m,1H),2.23–2.33(m,5H),2.40(t,J＝5.1Hz,2H),2.71(m,1H),3.31(t,J＝5.5Hz,2H),3.38(t,J＝5.5Hz,2H),6.37(s,1H),6.86-6.97(m,4H),7.04-7.22(m,3H),7.23–7.33(m,3H),7.40(td,J＝7.9,2.0Hz,1H),7.70(dt,J＝8.3,2.5Hz,1H),7.99(bs,1H).MS:(M+H)440.5。
实施例20：4-[3-(吡啶-2-基氧基)-苯亚甲基]-哌啶-1-羧酸[2-(4-甲基)苯基-环丙基]-酰胺的合成：
步骤1-将乙酸铵(13.4g，0.17mol)添加至乙酸(100mL)中并搅拌直至完全溶解。然后将硝基甲烷(30.46g，0.49mol)添加到反应混合物中，接着添加4-甲基-苯甲醛(9.82mL，0.083mol)。将反应混合物在100℃回流6小时。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用2M NaHCO3水溶液(pH＝7)快速冷却并用乙酸乙酯(2×300mL)萃取，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将粗品用己烷洗涤，得到呈黄色固体的产物2(10g，74％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.361(s,3H),7.303(d,2H),7.755(d,2H),8.072-8.213(m,2H).MS(M-H)162.9。
步骤2-向氢化钠60％分散在矿物油中(0.98g，0.024mol)在二甲亚砜(10mL)中的溶液中添加三甲基氧碘化锍(6.7g，0.03mol)并在室温下搅拌30分钟。然后添加2(2g，0.012mol)的二甲亚砜(10mL)溶液并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得反应混合物用水(100mL)快速冷却，用乙酸乙酯(2×300mL)萃取并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400目)柱纯化(2％乙酸乙酯的己烷溶液)得到呈浅黄色油状的产物3(300mg，14％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.653-1.704(m,1H),2.203-2.273(m,1H),2.353(s,3H),3.112-3.157(m,1H),4.370-4.417(m,1H),7.015-7.042(d,2H),7.14-7.166(d,2H).MS(M+H)178.1。
步骤3-向3(0.3g，0.0016mol)的异丙醇(12mL)溶液中添加盐酸(6.2mL 2.7N溶液，0.0169mol)，然后分批添加锌粉(1.1g，0.0169mol)。将反应物料在室温下搅拌16小时。将反应物料用10％氢氧化钠溶液中和并通过硅藻土床过滤。将滤液用乙酸乙酯(150mL)稀释，用水(50mL)和卤水溶液(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400目)柱(2％甲醇的氯仿溶液)纯化，得到呈黄色油状的产物4(150mg，60％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):0.879(m,2H),1.667(m,1H),2.229(s,3H),2.293-2.331(m,1H),7.018(d,J＝8.1,2H),6.879(d,J＝8.1,2H).MS(M+H)148.2。
步骤4-在0℃下向4(90mg，0.0006mol)的二氯甲烷(2mL)溶液中添加三乙胺(0.17mL，0.0012mol)和氯甲酸苯酯(115mg，0.0007mol)。将反应物料在室温下搅拌1小时。将所得反应物料用乙酸乙酯(150mL)稀释，用水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400目)柱(10％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到呈白色固体的产物5(30mg，18％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.115-1.123(m,2H),2.245(s,3H),7.000-7.120(m,6H),7.181-7.356(m,1H),7.361-7.395(m,2H).MS(M+H)268.3。
步骤5-在0℃下向实施例2步骤4的产物(1.0g，0.002mol)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加三氟乙酸(4mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发挥发物后获得的产物7(1.3g，97％)无需额外纯化即可用于下一步骤。
步骤6-在室温下向7(0.29g，0.0006mol)的二甲亚砜(3mL)溶液中添加二异丙基乙胺(0.59mL，0.0034mol)和5(0.16g，0.0006mol)。将反应物料在60℃下搅拌5小时。将所得反应物料用乙酸乙酯(200mL)稀释，用水(3×50mL)洗涤并经硫酸钠干燥并减压浓缩。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400目)柱(40％乙酸乙酯的己烷溶液)纯化，得到呈灰白色固体状的产物8(180mg，69％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.001-1.046(m,1H),1.085-1.133(m,1H),1.836-1.845(m,1H),2.249(s,5H),2.382-2.44(m,2H),2.643-2.665(m,1H),3.29-3.326(m,2H),3.365-3.401(m,2H),6.360(s,1H),6.952-7.082(m,8H),7.117-7.157(m,1H),7.348-7.401(m,1H),7.830-7.888(m,1H),8.156-8.166(m,1H).MS(M+H)440.4。
实施例21：4-[3-(嘧啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸[(1R，2S)-2-苯基-环丙基]-酰胺的合成：
步骤1-在25℃向实施例6步骤5的产物胺1(3.02g，7.89mmol)的二甲亚砜(30.0mL)溶液中添加二异丙基乙胺(4.13mL，23.6mmol)和实施例16步骤4的产物2(2.0g，7.89mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(3×150mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(60％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈白色固体的产物3，2.3g(70％)。熔点:62.8-65.2℃.IR:3627,3310,1732,1629,1570,1526,1310,1249,1148,753,696cm-1.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.04-1.18(m,2H),1.85–1.88(m,1H),2.27(t,J＝5.7Hz,2H),2.39(t,J＝5.8Hz,2H),2.71(dt,J＝7.4,3.7Hz,1H),3.31(d,J＝5.9Hz,2H),3.39(d,J＝5.9Hz,2H),6.37(s,1H),6.84(d,J＝3.1Hz,1H),7.03-7.12(m,6H),7.20-7.30(m,3H),7.39(t,J＝4.7Hz,1H),8.64(dd,J＝4.7Hz,1.1Hz,2H).MS:427.4(M+H).HPLC纯度:99.79％.手性HPLC纯度:99.92％.旋光度:-1.190.比旋光度:-111.71
实施例22：4-[3-(5-甲基-吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸((1R,2S)-2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在25℃向实施例19步骤5的产物胺1(3.0g，7.0mmol)的二甲亚砜(30mL)溶液中添加二异丙基乙胺(4.2mL，22.0mmol)和实施例16步骤4的产物(1.93g，7.0mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×150mL)洗涤并经硫酸钠干燥。蒸发挥发物后得到的粗产物通过硅胶(230-400)柱(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色固体的产物3，2.7g(81％)。熔点:53.1-53.9℃.IR:3321,3024,1628,1526,1475,1249,752,695cm-1.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.06-1.21(m,2H),1.80–1.95(m,1H),2.23–2.33(m,5H),2.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.71(m,1H),3.31(t,J＝5.5Hz,2H),3.38(t,J＝5.5Hz,2H),6.37(s,1H),6.86-6.97(m,4H),7.04-7.22(m,3H),7.23–7.33(m,3H),7.40(td,J＝7.9,2.0Hz,1H),7.70(dt,J＝8.3,2.5Hz,1H),7.99(d,J＝2.8Hz,1H).MS(M+H)440.5.HPLC纯度:98.5％.手性HPLC纯度:100％
实施例23：4-[3-(嘧啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸甲基-((1R,2S)-2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在0℃-5℃向实施例21的产物1(150mg，7.89mmol)的二甲基甲酰胺(30.0mL)溶液中添加氢化钠(4.13mL，23.6mmol)和碘甲烷(2.0g，7.89mmol)。将反应混合物在25-30℃下搅拌1小时。将所得反应混合物用水(50mL)稀释，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(25％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色固体的2，77mg(50％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.24(dt,J＝7.8Hz,5.9Hz,2H),2.02–2.07(m,1H),2.27(q,J＝5.9Hz,2H),2.38–2.41(m,2H),2.79(s,4H),3.12-3.33(m,4H),6.34(s,1H),6.97-7.21(m,6H),7.20-7.31(m,3H),7.39(t,J＝7.9Hz,1H),8.65(d,J＝4.8Hz,2H).MS:441.5(M+H).HPLC纯度:98.1％。
实施例24：4-[3-(5-甲基-吡嗪-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸((1R,2S)-2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在室温下向2-氯-5-甲基-吡嗪(10g，0.078mol)的DMF(100mL)溶液中添加3-羟基苯基-甲醇(11.6g，0.094mol)和碳酸铯(76.0g，0.23mol)。
将反应混合物在100℃搅拌5小时。然后使所得混合物达到室温，用水(250mL)稀释，用乙酸乙酯(3×500mL)萃取，并将有机层经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色油状的产物1，6.8g(40％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.45(s,3H),4.50(d,J＝4.5Hz,2H),5.26(t,J＝5.26Hz,1H),7.0–7.18(m,3H),7.37(t,J＝7.5Hz,1H),8.1(s,1H),8.4(d,J＝1.2Hz,1H).MS(M+H)217.2。
步骤2-向1(6.0g，0.027mol)的二氯甲烷(60mL)溶液中滴加亚硫酰氯(2.3mL，0.03mol)，同时在冰浴中搅拌反应混合物。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后减压蒸发挥发物并用甲苯(25mL)稀释并减压蒸发甲苯。重复该共沸过程3次以获得淡棕色油状的产物2(6.2g)。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步。MS(M+H)235.3。
步骤3-将2(6.2g，0.026mol)的磷酸三乙酯(7.3mL，0.042mol)溶液在150℃下加热6小时。将反应混合物冷却并使其达到室温，蒸发挥发物后得到的粗产物通过硅胶(230-400)柱(60％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物3，8.3g。产物含有未使用的磷酸三乙酯，无需额外纯化即可用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.16(t,J＝7.0Hz,6H),2.45(s,3H),3.23(s,1H),3.23(s,1H),3.94(dq,J＝8.2Hz,7.0Hz,4H),7.0-7.12(m,2H),7.13-7.15(m,1H),7.36(t,J＝7.8Hz,1H),8.09(dd,J＝1.4Hz,0.7Hz,1H),8.39(d,J＝1.4Hz,1H).MS(M+H)337.1。
步骤4-向3(8.3g，0.024mol)的THF(40mL)溶液中添加15-冠醚(0.1g，0.48mmol)。将反应冷却(冰浴)并分批添加NaH(1.44g，0.036mol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下向上述反应混合物中加入4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯5(4.9g，0.024mol)的THF(40mL)溶液，并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用水(250mL)稀释，用乙酸乙酯(3×500mL)萃取并经硫酸钠干燥。蒸发挥发物后获得粗产物，得到浅黄色油状的产物4(6.7g)。MS(M+H)382.3。产物4无需进一步纯化即可用于下一步骤。
步骤5-在冰温下向4(6.7g，0.017mol)的二氯甲烷(67.0mL)溶液中添加三氟乙酸(27mL，4V)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发挥发物后获得的产物6(6.96g，90％)无需额外纯化即可用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):2.45(s,3H),2.60–2.67(m,4H),3.10–3.17(m,4H),6.46(s,1H),7.04-7.12(m,4H),7.38(t,J＝7.8Hz,1H),8.09(s,1H),8.40(d,J＝4.4Hz,1H),8.61(bs,2H).MS(M+H)282.3。
步骤6-在25℃向胺6(1.0g，2.5mmol)的二甲亚砜(30mL)溶液中添加二异丙基乙胺(1.4mL，7.5mmol)和实施例16步骤4的氨基甲酸酯产物(0.7g，2.75mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌5小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×150mL)洗涤并经硫酸钠干燥。蒸发挥发物后得到粗产物通过硅胶(230-400)柱(60％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到为浅黄色固体的产物7，0.7g(68％)。熔点:50.8℃.IR:3305,2923,1627,1528,1473,1337,1266,695cm-1.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):1.02-1.20(m,2H),1.82–1.84(m,1H),2.21–2.41(m,4H),2.46(s,3H),2.60–2.70(m,1H),3.26–3.34(m,4H),6.32(s,1H),6.80–7.22(m,9H),7.35(t,J＝7.6,1H),8.06(bs,1H),8.37(bs,J＝8.3,1H).MS:441.4(M+H).HPLC:99.91％。
实施例25：4-[3-(5-氯-吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸((1R,2S)-2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1-在室温下向5-氯-2-氟吡啶(10.0g，0.0760mol)的DMSO溶液(100mL)中添加3-羟基苯基-甲醇(9.42g，0.0760mol)和碳酸铯(29.72g，0.0912mol)。将反应混合物在100℃搅拌6小时。通过TLC监测反应。将所得混合物冷却至室温，用水(200mL)稀释，用乙酸乙酯(2×400mL)萃取，并将有机层经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(12％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色油状的产物1，12.0g(67％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.17(t,J＝2.4Hz,1H),7.94-7.91(m,1H),7.33(t,J＝8.0Hz,1H),7.14-7.1(m,1H),7.06-7.03(m,2H),6.98–6.95(m,1H),5.22(t,J＝5.6Hz,1H),4.48(d,J＝5.6Hz,2H).MS m/z(M+H):236.0。
步骤2：向1(12.0g，0.0509mol)的二氯甲烷(120mL)溶液中滴加亚硫酰氯(4.1mL，0.0560mol)，同时在冰浴中搅拌反应。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌1小时。原料完全消耗后，减压蒸发挥发物，用乙酸乙酯(250mL)稀释，有机层用饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥并浓缩。蒸发获得的粗产物2不经进一步纯化直接用于下一步(12.5g，96％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.20(d,J＝2.4Hz,1H),8.19-7.95(m,1H),7.42(t,J＝7.6Hz,1H),7.29(d,J＝8.0Hz,1H),7.21(t,J＝2.0Hz,1H),7.12-7.09(m,2H),4.75(s,1H).MS m/z(M+H):254.1。
步骤3：将2(12.5g，0.0494mol)的磷酸三乙酯(20.0mL，0.1235mol)溶液在150℃下加热6小时。使反应混合物达到室温，并将除去挥发物后获得的粗产物添加到正庚烷(150mL)中，得到浅橙色沉淀物。将获得的沉淀物过滤并在真空下干燥，得到呈灰白色固体状的产物3(16.5g，91％)，并且不经进一步纯化而用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.19-8.18(m,1H),7.97-7.94(m,1H),7.34(t,J＝7.6Hz,1H),7.13-7.06(m,1H),7.03-6.99(m,3H),3.95(m,4H),3.27和3.21(2s,2H),1.15(t,J＝4.4Hz,6H).MS m/z(M+H):356.2。
步骤4：向3(15.5g，0.0435mol)的THF(100mL)溶液中添加15冠醚(0.19g，0.87mmol)。将反应冷却(冰浴)并在5分钟内分批添加NaH(2.07g，0.0870mol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下添加4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯5(8.66g，0.0435mol)的THF(50mL)溶液并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用水快速冷却并用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥并浓缩。蒸干挥发物后得到的粗品经硅胶柱层析纯化，得到呈淡黄色液体的产物4，(13.1g，75％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.19(d,J＝2.0Hz,1H),7.96-7.93(m,1H),7.36(t,J＝7.6Hz,1H),7.09-7.06(m,2H),6.99-6.96(m,2H),6.35(s,1H),3.40-3.32(m,4H),2.38(t,J＝5.2Hz,2H),2.26(t,J＝6.0Hz,2H),1.39(s,9H).MS m/z(M+Na):423.2。
步骤5：在冰温下向4(13.0g，0.0325mol)的二氯甲烷(130mL)溶液中添加三氟乙酸(52.0mL)，并将反应混合物在室温下搅拌2小时。通过TLC监测反应。起始原料完全消耗后，减压除去挥发物，得到浅棕色油状产物。将获得的粗产物用乙醚(3×50mL)洗涤，得到呈浅棕色粘稠液体的6(13.8g粗品)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.82(bs,2H),8.19(d,J＝2.8Hz,1H),7.96-7.93(m,1H),7.38(t,J＝8.0Hz,1H),7.09(d,J＝8.8Hz,2H),7.02-7.00(m,2H),6.44(s,1H),3.38-3.33(m,4H),2.60(t,J＝5.6Hz,2H),2.53-2.48(m,2H).MS m/z(M+H):301.2。
步骤6：在25℃向6(15.8g，0.0381mol)的二甲亚砜(78mL)溶液中添加二异丙基-乙基-胺(20.34mL，0.1149mol)和实施例16步骤4的氨基甲酸酯产物(10.62g，0.0419mol)。将反应混合物在60℃下搅拌6小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用水(3×200mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色蓬松固体的产物7(11.6g，66％)。熔程(MR)：44.8-62.6℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.18(d,J＝2.4Hz,1H),7.94-7.91(m,1H),7.35(t,J＝7.6Hz,1H),7.23-7.19(m,2H),7.12-7.05(m,5H),6.95-6.82(m,2H),6.32(s,1H),3.37-3.26(m,4H),2.71-2.69(m,1H),2.36-2.33(t,J＝5.2Hz,2H),2.24-2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(m,1H),1.13(d,J＝4.8Hz,1H),1.04(d,J＝7.6Hz,1H).13C NMR:(100MHz,DMSO-d6):δ161.69,157.57,153.49,145.56,141.99,139.92,139.75,138.80,129.56,128.08,125.85,125.34,125.21,123.04,121.29,119.02,113.05,44.93,43.89,35.63,34.07,28.91,24.32和15.58.MS m/z(M+H):460.32,HPLC纯度:99.36％,手性纯度:99.71％。
实施例26：4-[3-(5-氟-吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸((1R,2S)-2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1：在室温下向2,5-二氟吡啶(8.2g，0.0719mol)的DMSO(80mL)溶液中加入3-羟基苯基-甲醇(8.9g，0.0719mol)和碳酸铯(28.12g，0.0863mol)并将反应混合物在85℃搅拌6小时。通过TLC监测反应。将所得混合物冷却至室温，用水(200mL)稀释，用乙酸乙酯(3×400mL)萃取，并用硫酸钠干燥有机层。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(12％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状的产物1，4.3g(28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.17(t,J＝2.4Hz,1H),7.84-7.78(m,1H),7.35(t,J＝10.4Hz,1H),7.15-6.95(m,4H),5.25(t,J＝7.6Hz,1H),4.50(d,J＝7.6Hz,2H).MS m/z(M+H):220.0。
步骤2：向1(6.5g，0.0296mol)的二氯甲烷(65mL)溶液中滴加亚硫酰氯(2.4mL，0.0326mol)，同时在冰浴中搅拌反应。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌2小时。原料完全消耗后，减压蒸发挥发物，用乙酸乙酯(200mL)稀释，有机层用饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥并浓缩。蒸发所得粗产物2为无需进一步纯化即可直接用于下一步(6.7g,95％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.15(d,J＝2.4Hz,1H),7.83-7.80(m,1H),7.40(t,J＝7.6Hz,1H),7.27-7.25(m,1H),7.19-7.06(m,3H),4.75(s,1H).MS m/z(M+H):238.0。
步骤3：在150℃下将2(6.5g，0.0274mol)的磷酸三乙酯(12.6mL，0.0685mol)溶液加热6小时。将反应混合物冷却至室温，蒸发挥发物后得到的混合物通过硅胶(230-400)柱色谱纯化，得到呈浅黄色液体的产物3，(9.0g，95％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.15(d,J＝4.0Hz,1H),7.86-7.80(m,1H),7.34(t,J＝10.4Hz,1H),7.12-6.97(m,4H),4.02-3.89(m,4H),3.28和3.21(2s,2H),1.15(t,J＝9.2Hz,6H).MS m/z(M+H):340.2。
步骤4：向3(9.0g，0.0256mol)的THF(60mL)溶液中添加15-冠醚(0.12g，0.53mmol)。将反应冷却(冰浴)并在5分钟内分批添加60％NaH(1.26g，0.0530mol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下添加4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯5(5.28g，0.0256mol)的THF(30mL)溶液并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用水快速冷却并用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥并浓缩。蒸发挥发物后得到的粗产物通过硅胶柱色谱纯化，得到呈浅黄色固体的产物4，(8.0g，78％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.15(d,J＝3.2Hz,1H),7.84-7.79(m,1H),7.35(t,J＝8.0Hz,1H),7.12-7.04(m,2H),6.96-6.92(m,2H),6.35(s,1H),3.40-3.32(m,4H),2.37(t,J＝5.6Hz,2H),2.25(t,J＝5.2Hz,2H),1.39(s,9H).MS m/z(M+Na):407.2。
步骤5：在冰温下向4(8.2g，0.0213mol)的二氯甲烷(82mL)溶液中添加三氟乙酸(32.5mL)并且反应将混合物在室温下搅拌1小时。通过TLC监测反应。起始原料完全消耗后，减压除去挥发物，得到红色油状产物。将获得的粗产物用乙醚(3×50mL)洗涤，得到粘稠的棕色油状物6(9.0g粗品).1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.73(bs,2H),8.15(d,J＝3.2Hz,1H),7.84-7.79(m,1H),7.37(t,J＝8.0Hz,1H),7.12-7.06(m,2H),7.00-6.96(m,2H),6.44(s,1H),3.15-3.09(m,4H),2.59(t,J＝6.0Hz,2H),2.49-2.48(m,2H).MS m/z(M+H):285.4。
步骤6：在25℃向6(8.4g，0.021mol)的二甲亚砜(42mL)溶液中添加二异丙基-乙基-胺(11.1mL，0.063mol)和实施例16步骤4的氨基甲酸酯产物(5.8g，0.023mol)。将反应混合物在60℃下搅拌6小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(400mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色蓬松固体的产物7(7.15g，66％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.15(d,J＝2.4Hz,1H),7.82-7.80(m,1H),7.35(t,J＝8.0Hz,1H),7.24-7.21(m,2H),7.14-7.04(m,5H),6.96-6.94(m,2H),6.84(d,J＝2.8Hz,1H),6.34(s,1H),3.38-3.28(m,4H),2.71-2.69(m,1H),2.34(t,J＝5.2Hz,2H),2.23(t,J＝4.8Hz,2H),1.86(m,1H),1.13(d,J＝4.8Hz,1H),1.04(d,J＝7.6Hz,1H).13C NMR:(100MHz,DMSO-d6):δ159.15,157.57,156.01(d,J＝244.7Hz),154.08,141.99,139.69,138.76,134.13(d,J＝26.3Hz),129.54,128.09,127.85(d,J＝20.9Hz),125.86,125.35,124.91,123.09,120.97,118.71,113.01,44.94,43.90,35.63,34.07,28.91,24.32和15.58.MS m/z(M+H):444.3,HPLC纯度:99.21％,手性HPLC:99.37％。
实施例27：6-{3-[1-((1R,2S)-2-苯基-环丙基氨基甲酰基)-哌啶-4-亚基甲基]-苯氧基}-烟酸甲酯的合成：
步骤1：在室温下向6-氯吡啶-3-羧酸甲酯(50.0g，0.29mol)的二甲基乙酰胺(500mL)溶液中加入3-羟基苯基-甲醇(39.79g，0.32mol)和碳酸钾(60.4g)，0.43mol)。将反应混合物在100℃搅拌6小时。通过TLC监测反应。将所得混合物冷却至室温，用水(300mL)稀释，用乙酸乙酯(2×500mL)萃取，并将有机层经硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(12％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色油状的产物1(30.0g，40％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.82(d,J＝2.0Hz,1H),8.30-8.27(m,1H),7.42(t,J＝8.0Hz,1H),7.27-7.19(m,2H),7.09-7.07(m,1H),6.96(d,J＝8.8Hz,1H),4.73(s,2H),3.93(d,J＝3.6Hz,3H).MS m/z(M+H):259.8。
步骤2：向1(30.0g，0.115mol)的二氯甲烷(300mL)溶液中滴加亚硫酰氯(9.4mL，0.127mol)，同时在冰浴中搅拌反应。除去冰浴后，将反应混合物在室温下搅拌2小时。原料完全消耗后，减压蒸发挥发物，用乙酸乙酯(500mL)稀释，有机层用饱和碳酸氢钠(200mL)溶液和水洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥并浓缩。将蒸发得到的粗产物通过硅胶(230-400)柱色谱纯化，得到呈浅黄色液体的产物2(28.0g，87％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.82(d,J＝0.8Hz,1H),8.31-8.28(m,1H),7.43(t,J＝8.0Hz,1H),7.29-7.27(m,1H),7.21(t,J＝2.0Hz,1H),7.14-7.11(m,1H),6.98-6.96(m,1H),4.61(s,2H),3.93(s,3H).MS m/z(M+H):278.0。
步骤3：将2(28.0g，0.10mol)的磷酸三乙酯(41.0mL，0.25mol)溶液在150℃下加热6小时。将反应混合物冷却至室温，并通过硅胶柱色谱法纯化蒸发挥发物后获得的混合物，得到浅黄色液体状的3(32.0g，84％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.65-8.64(m,1H),8.30-8.27(m,1H),7.35(t,J＝8.0Hz,1H),7.16-7.03(m,4H),3.96-3.88(m,4H),3.82(s,3H),3.27和3.21(2s,2H),1.15-1.11(m,6H).MS m/z(M+H):380.2。
步骤4：向3(35.5g，0.093mol)的THF(200mL)溶液中添加15-冠醚(0.41g，1.8mmol)。将反应冷却(冰浴)并在5分钟内分批添加60％NaH(5.5g，0.14mol)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟并再次冷却至冰温。在冰温下添加4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯5(18.7g，0.093mol)的THF(150mL)溶液并在室温下搅拌16小时。将所得反应混合物用饱和氯化铵快速冷却并用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥并浓缩。将挥发物蒸发后获得的粗产物(30.0g)溶解在甲醇(300mL)中并在冰温下添加氢氧化锂水溶液(3.0g，0.0707mol)。将所得反应物质在50℃搅拌2小时。通过TLC监测反应。将挥发物蒸发后获得的粗产物溶解于水(200mL)中并用甲基叔丁基醚(2×200mL)洗涤。使用1.0N HCl水溶液将水层酸化至pH2.0。将沉淀的产物过滤并干燥，得到呈灰白色固体的4(23.0g，61％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):13.19(bs,1H),8.66-8.65(m,1H),8.28-8.25(m,1H),7.39(t,J＝8.0Hz,1H),7.11-7.00(m,4H),6.37(s,1H),3.40-3.32(m,4H),2.39(t,J＝5.6Hz,2H),2.27(t,J＝5.2Hz,2H),1.39(s,9H).MS m/z(M+H):433.2。
步骤5：在冰温下向4(13.0g，0.0317mol)的甲醇(130mL)溶液中加入三甲基氯硅烷(8.9mL，0.0697mol)，并将反应混合物在室温下搅拌12小时并通过TLC监测。起始原料完全消耗后，减压除去挥发物。将获得的粗产物用饱和碳酸氢钠溶液稀释并用乙酸乙酯萃取。有机层用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。蒸发挥发物后得到的粗产物通过硅胶(230-400)柱色谱纯化，得到呈淡黄色液体的产物6(5.2g，51％)。
步骤6：在25℃向6(5.2g，0.016mol)的二甲亚砜(52mL，10V)溶液中添加二异丙基乙胺(8.9mL，0.048mol)和实施例16步骤4的氨基甲酸酯产物(4.0g，0.016摩尔)。将反应混合物在60℃下搅拌6小时。通过TLC监测反应。将所得反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经无水硫酸钠干燥。将蒸发挥发物后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色蓬松固体的产物7(5.0g，65％)。熔程(MR):52.6-72.8℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.68(d,J＝2.0Hz,1H),8.31-8.28(m,1H),7.38(t,J＝8.0Hz,1H),7.24-7.20(m,2H),7.13-7.01(m,7H),6.84-6.83(m,1H),6.35(s,1H),3.84(s,3H),3.38-3.30(m,4H),2.71-2.69(m,1H),2.37(t,J＝5.2Hz,2H),2.25(t,J＝5.2Hz,2H),1.86(m,1H),1.15(d,J＝4.8Hz,1H),1.05(d,J＝6.0Hz,1H).13CNMR:(100MHz,DMSO-d6):δ165.87,164.78,157.57,152.92,149.45,141.99,140.87,139.87,138.88,129.66,128.08,125.85,125.67,125.34,122.97,121.66,120.97,119.39,111.21,52.23,44.92,43.88,35.63,34.07,28.90,24.31和15.57.MS m/z(M+H):484.3,HPLC纯度:98.65％,手性HPLC:99.08％。
实施例28：6-{3-[1-((1R，2S)-2-苯基-环丙基氨基甲酰基)-哌啶-4-亚叉基甲基]-苯氧基}-烟酸的合成：
在冰温下向实施例27的产物1(1.8g，0.0038mol)的甲醇(18mL)溶液中滴加氢氧化锂水溶液(0.32g，0.0076mol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。通过TLC监测反应。蒸发挥发物后获得的粗产物用水(10mL)稀释并用甲基叔丁基醚洗涤水层。将所得水层用1.5NHCl酸化至pH2。将沉淀的产物过滤并干燥，得到呈灰白色固体的2，1.52g(87％)。熔程(MR)141-159℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):13.19(bs,1H),8.66-8.65(m,1H),8.28-8.26(m,1H),7.38(t,J＝8.0Hz,1H),7.24-7.21(m,2H),7.13-7.01(m,7H),6.83(d,J＝3.2Hz,1H),6.35(s,1H),3.38-3.28(m,4H),2.71-2.69(m,1H),2.37(t,J＝5.2Hz,2H),2.25(t,J＝5.2Hz,2H),1.86(m,1H),1.15(d,J＝4.4Hz,1H),1.05(d,J＝7.6Hz,1H).13C NMR:(100MHz,DMSO-d6):δ165.84,165.69,157.57,153.03,149.57,142.0,141.05,139.84,138.86,129.64,128.09,125.85,125.59,125.34,123.0,122.02,121.66,119.40,111.06,44.92,43.89,35.64,34.08,28.91,24.30和15.57.MS m/z(M+H):470.3,HPLC纯度:99.88％,手性HPLC:99.50％。
实施例29：4-[3-(5-羟甲基-吡啶-2-基氧基)-亚苄基的合成]-哌啶-1-羧酸((1R,2S)-2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
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步骤1：在冰温下向实施例27步骤4的产物1(3.6g，0.0085mol)的二甲氧基乙烷(35mL)溶液中添加N-甲基吗啉(1.4mL，0.0128mol)和氯甲酸异丁酯(1.21mL，0.0093mol)并将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将硼氢化钠(1.9g，0.0512mol)分批添加至反应物料中并搅拌12小时。通过TLC监测反应。起始原料1完全消耗后，用水(100mL)快速冷却反应物料并用乙酸乙酯(300mL)萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥并浓缩。将得到的粗产物通过硅胶(230-400)柱色谱纯化，得到呈灰白色固体的产物2(3.2g，92％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.06(m,1H),7.79-7.76(m,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,1H),7.05-6.95(m,4H),6.35(s,1H),5.24(t,J＝6.0Hz,1H),4.45(d,J＝5.6Hz,1H),3.40-3.32(m,4H),2.38(t,J＝5.6Hz,2H),2.25(t,J＝5.2Hz,2H),1.39(s,9H).MS m/z(M+H):397.3。
步骤2：在冰温下向2(3.2g，0.08mol)的二氯甲烷(32mL)溶液中添加三氟乙酸(12.8mL)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。通过TLC监测反应。起始原料完全消耗后，减压除去挥发物，得到棕红色油状的粗产物。将获得的粗产物用乙醚(3×50mL)洗涤，得到呈灰白色固体的3(3.3g粗产物)。MS m/z(M+H):297.17。
步骤3：在25℃向3(3.3g，0.08mmol)的二甲亚砜(30mL)溶液中添加二异丙基乙胺(4.2mL，0.024mol)和实施例16步骤4的氨基甲酸酯产物(2.0g，0.08mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌6小时。将所得反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到呈浅黄色蓬松固体的4(1.82g，58％)。熔程(MR):51-65℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.07(d,J＝2.0Hz,1H),7.80-7.77(m,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,1H),7.26-6.92(m,7H),6.83(d,J＝3.2Hz,1H),6.35(s,1H),5.25(t,J＝6.0Hz,1H),4.45(d,J＝7.2Hz,1H),3.40-3.32(m,4H),2.38(t,J＝5.6Hz,2H),2.25(t,J＝5.2Hz,2H),1.87(m,1H),1.16(d,J＝6.0Hz,1H),1.05(d,J＝7.6Hz,1H).13C NMR:(100MHz,DMSO-d6):δ162.03,157.55,154.11,145.64,141.94,139.57,139.09,138.65,132.95,129.43,128.04,125.84,125.31,124.66,123.11,120.95,118.69,111.17,60.09,44.92,43.87,35.59,34.00,28.88,24.26和15.52.MS m/z(M+H)456.3,HPLC纯度:98.99％,手性HPLC:98.95％.
实施例30：4-[3-(5-甲氧基甲基-吡啶-2-基氧基)-亚苄基]-哌啶-1-羧酸((1R，2S)-2-苯基-环丙基)-酰胺的合成：
步骤1:在冰温下向实施例29步骤1的产物1(3.2g，8.0mmol)的四氢呋喃(32mL)溶液中添加60％NaH(0.97g，0.024mol)并将反应混合物在室温下搅拌10分钟。在相同的冰温下将甲基碘(1.56mL，0.024mol)添加至反应物料中并继续搅拌12小时。通过TLC监测反应。起始原料完全消耗后，用饱和氯化铵溶液(100mL)快速冷却反应并用乙酸乙酯(300mL)萃取。有机层进一步用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将得到的粗产物通过硅胶(230-400)柱色谱纯化，得到呈灰白色固体的产物2(2.6g，78％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.08(d,J＝2.0Hz,1H),7.80-7.78(m,1H),7.35(t,J＝8.0Hz,1H),7.06-6.93(m,4H),6.35(s,1H),4.37(s,2H),3.40-3.32(m,4H),3.26(s,3H),2.38(t,J＝5.6Hz,2H),2.25(t,J＝5.6Hz,2H),1.39(s,9H).MS m/z(M+H):411.3。
步骤2：在冰温下向2(2.6g，6.3mmol)的二氯甲烷(26.0mL)溶液中添加三氟乙酸(10.4mL)，并将反应混合物在室温下搅拌2小时。通过TLC监测反应。起始原料完全消耗后，减压除去挥发物，得到棕红色油状产物。将获得的粗产物用乙醚(3×50mL)洗涤，得到呈淡黄色粘稠液体的3(2.9g粗品)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.69(bs,2H),8.09-8.08(m,1H),7.81-7.78(m,1H),7.38(t,J＝7.6Hz,1H),7.08-6.97(m,4H),6.45(s,1H),4.37(s,2H),3.27(s,3H),3.15-3.09(m,4H),2.60(t,J＝5.6Hz,2H),2.45(t,J＝5.6Hz,2H).MS m/z(M+H):311.3。
步骤3：在25℃向3(2.9g，6.8mmol)的二甲亚砜(30mL，10V)溶液中添加二异丙基乙胺(3.5mL，0.0205mol)和实施例16步骤4的氨基甲酸酯产物5(1.7g)，6.8mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌6小时。通过TLC监测反应。将所得反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释，用水(3×100mL)洗涤并经硫酸钠干燥。将挥发物蒸发后获得的粗产物通过硅胶(230-400)柱(30％乙酸乙酯的正己烷溶液)纯化，得到呈浅黄色胶状固体的产物4(2.6g，86％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.08(d,J＝2.0Hz,1H),7.81-7.78(m,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,1H),7.25-7.21(m,2H),7.09-6.93(m,7H),6.83(d,J＝3.2Hz,1H),6.34(s,1H),4.37(s,2H),3.38-3.28(m,4H),3.27(s,3H),2.71-2.69(m,1H),2.36(t,J＝5.6Hz,2H),2.25(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(m,1H),1.13(d,J＝4.8Hz,1H),1.04(d,J＝7.6Hz,1H).13C NMR:(100MHz,DMSO-d6):δ162.60,157.57,153.87,146.76,142.00,140.15,139.65,138.71,129.52,128.87,128.10,125.86,125.35,124.90,123.12,121.21,118.96,111.26,70.58,57.49,44.94,43.90,35.63,34.08,28.92,24.31和15.57.MS m/z(M+H):470.3,HPLC纯度:99.57％,手性HPLC:99.60％。
实施例31：可溶性环氧化物水解酶(sEH)抑制测定：
sEH酶抑制测定是使用来自密歇根州安娜堡的开曼化学公司的市售套件(CaymanCat.No.10011671)。该测定使用3-苯基-氰基(6-甲氧基-2-萘基)-甲酯-2-环氧乙烷乙酸作为sEH的底物。底物水解产生高荧光产物，可以分别在330nm和465nm的激发波长和发射波长下进行监测。检测混合物由96孔板中的185-190μL检测缓冲液和5μL sEH酶组成。添加不同浓度的化合物(在5μL DMSO中)或单独的DMSO(媒介物)，并通过添加5μL底物引发反应。将板在25℃下孵育15分钟。进行数据分析并确定抑制百分比。
在浓度(IC50)低于10μM时抑制可溶性环氧化物水解酶的化合物被认为具有活性。式I化合物的抑制活性在表1中给出，参见图1。
通式I的化合物在神经性疼痛和炎性疼痛中的功效可以使用文献中已知的动物模型来评估(Pain,43,1990,205–218；Pain,153,2012,2380-2392)。
实施例32：下述模型(部分坐骨神经结扎)可用于评价式1化合物治疗神经性疼痛的潜力。
用盐酸氯胺酮注射液(obtained from Neon Laboratories Ltd.ofMumbai,India.)100mg/kg腹腔注射和盐酸甲苯噻嗪注射液(甲苯噻嗪购自IndianImmunologicals Ltd.of Hyderabad,India)10mg/kg腹腔注射按10：1的比例混合麻醉大鼠。在大腿近端区域暴露右侧坐骨神经。在股骨转子附近的位置，小心地从周围的结缔组织中取出神经的背部，该位置正好位于后二头肌半腱肌(PBST)神经从坐骨总神经分支的点的远端。通过捏住神经外膜的背侧将神经固定在其位置，注意不要将神经压在下面的结构上。用3/8弯曲、反向切割迷你针将5-0慕丝线(mersilk)(可从Johnson&Johnson Company,Ethicon获得)插入神经，并紧密结扎，使背侧三分之一到二分之一神经厚度被困在结扎线中。用3-0vicryl可吸收缝合线闭合肌肉，并用皮肤钉缝合皮肤。缝合后磺胺(/>来自将Bayer)撒粉涂抹在肌肉上。每次手术均进行假手术对照，即暴露神经而不结扎，并按上述方法闭合伤口。手术完成后，将动物单独饲养在温暖条件下的笼子中，直至从麻醉中恢复。在第6天，对爪退缩潜伏期进行测量并随机分组。体重测量和至少15分钟适应操作室后，以交错方式向动物施用测试物品(式I的化合物C或化合物D，25mg/kg/天，口服；参考物品加巴喷丁(30mg/kg/天，腹腔注射(ip))或按照研究计划使用赋形剂。施用的剂量体积基于动物的体重。
使用Hargreaves Plantar测试装置(从Indian Immunologicals Ltd.ofHyderabad,India获得)，在给药前一次和给药后两次(第6天和第12天，分别在治疗后lh和3h)测量所有大鼠的两个后爪的爪退缩潜伏期(PWL)。考虑对在各自时间点并基于接受标准(>-25DS％)，考虑了总共3个/爪子的2个密切观察的平均值进行分析。对同一只爪子进行两次连续读数，中间间隔约5分钟。在各自的时间点，手术爪和未手术爪之间的PWL百分比差异分数(％DS)是痛觉过敏的量度。
％DS＝100×(手术爪的PWL-非手术爪的PWL)/非手术爪的PWL。
与媒介物处理组相比示出了显著百分比差异分数的化合物被认为是活性的。图2示出了式I的化合物C和化合物D在神经性疼痛模型中的抗痛觉过敏功效。
实施例33：下述模型(链脲佐菌素诱导的糖尿病神经病变)可用于评价式1化合物治疗周围糖尿病神经病变的潜力。
该研究是按照公布的方案进行的，所有治疗/测量均以盲法进行(Current Protocols in Pharmacology 2015,70.1,5-47；Molecular Pain 2014,10,1744-8069).单剂量链脲佐菌素(55mg/kg，静脉注射)用于诱导大鼠I型糖尿病。到第4天，动物出现明显的糖尿病(血糖水平高达600mg/dl)，并且一直保持糖尿病状态直到研究结束。在注射链脲佐菌素前一天，使用手动冯弗雷细丝(von Frey filaments)(基础值)测量爪退缩阈值(PWT)，并根据动物的PWT值对动物进行分级。对于急性研究，在第10天，对动物给予媒介物、普瑞巴林(30mg/kg)或式I的化合物A，在给药后1、2、4和6小时评估PWT并与假手术和糖尿病对照进行比较(病理对照)动物。对于慢性研究，化合物A(3mg/kg/天)和赋形剂或普瑞巴林继续给药另外5天，并在最后一次给药后第15天的1、2、4和6小时评估PWT，并与假手术和糖尿病对照组进行比较。与糖尿病对照组相比，对血糖和PWT进行了双向ANOVA统计分析，并对AUC(0-6)进行了单向ANOVA，随后以95％置信区间(α0.05)进行了“Dunnett多重比较试验”。
图3示出了在链脲佐菌素诱导的糖尿病周围神经病变模型中，与糖尿病和假手术对照动物相比，化合物A的功效(疼痛调节)。
实施例34：下述模型(斑马鱼中MPTP诱导的帕金森病)可用于评价式1化合物治疗帕金森病的潜力。
Bretaud等人描述的方法(Neurotoxicol Teratol.2004Nov-Dec；26(6),857-64)用于研究斑马鱼的帕金森病。对于MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)诱导的帕金森症，将3μl的60μg/g的MPTP作为沿外侧肌肉的肌内注射对成年斑马鱼进行注射。
通过与鱼饲料颗粒混合来口服给予式I化合物B或L-DOPA。鱼被调节为每天吃三粒颗粒。为了制备含有1ng式I的化合物B的饲料，将1ng/μl化合物B的储备液在林格氏溶液中稀释至10μl，并分配到3个鱼饲料颗粒中(每个颗粒3.3μl)。在添加化合物B之前，将鱼饲料颗粒在37℃干燥1小时以除去水分。添加化合物B溶液并被颗粒吸收后，颗粒在4℃储存。为了制备含有L-DOPA的鱼饲料颗粒，将4μl 1ng/μl的L-DOPA储备溶液分布在3个鱼饲料颗粒中，即1.3μl/颗粒。喂鱼，一天三粒。所施用的化合物的浓度通过颗粒的数量和每个颗粒的化合物的量来控制。不含药物但含有媒介物的颗粒饲料用作安慰剂或对照。
运动活性：通过等距离画三条垂直线将观察池分为四个区域，每个区域的长度为6.25cm。计算成年斑马鱼在5分钟内穿过的线数。在读取读数之前，让鱼在测量池中适应30分钟。测量在化合物给药或MPTP激发之前间隔4小时。
脑病理学：用15℃的水麻醉鱼并通过大脑和脊髓之间的切口处死。解剖脑并用针和刀去除中脑的部分。将脑组织涂片在载玻片上，分别用苏木精&伊红染色各2分钟，然后水洗。使用Labomed LX 400显微镜以45倍放大倍率观察载玻片。对每个涂片的三个视野计数退化神经元的数量。退化神经元的特征是细胞结构丧失、细胞肿胀或收缩、细胞膜形状不规则、染色相对浅，并且按照既定方案在涂片制备过程中细胞溶解率较高(Proc Natl AcadSci U S A.2016Apr 12；113(15):E2189-98；J Cytol.2010Jul；27(3):81–85；JCytol.2011Oct-Dec；28(4):147–158)。
统计分析：使用GraphPad进行统计比较。使用α＝0.05(95％置信区间)的双向方差分析(ANOVA)进行具有95％置信区间的学生t检验，并使用Tukey的多重比较后测试来比较每列的平均值。显著性用星号表示：ns不显著，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。
图4示出了用化合物B治疗完全减轻了MPTP诱导的运动活性变化。然而，继续使用左旋多巴(L-DOPA)治疗(第3天之后)会导致运动行为增强，这可能反映了左旋多巴(L-DOPA)引起的运动障碍，这也在人类中观察到。
图5示出了MPTP治疗组(治疗第6天和第8天)神经退行性细胞显著增加，细胞结构异常，细胞排列紊乱，涂片下细胞容易塌陷，细胞染色浅。在L-DOPA治疗组中，脑病理学示出了出与MPTP治疗组相似的领域，即细胞结构改变的神经退行性病，表明L-DOPA对于减少MPTP诱导的神经元细胞毒性没有显著效果。另一方面，化合物B治疗组的脑涂片主要示出了强染色特征，具有指示正常细胞的完整细胞结构。总体而言，与MPTP治疗组相比，化合物B治疗组中的神经退行性细胞数量显著减少(>80％)。与MPTP组相比，L-DOPA治疗组在第8天神经退行性细胞数量没有显著减少。
实施例35：下述模型(MPTP诱导的小鼠帕金森病)可用于评价式1化合物治疗帕金森病的潜力。通过皮下注射MPTP(20mg/kg)5天，在所有动物中诱导帕金森病。对照组不接受MPTP。
在每次MPTP注射前30分钟，每天一次以15(或30mg/kg)的剂量口服施用式I的化合物B，连续五天。5天治疗后，对小鼠进行行为(光束行走)测试。
光束行走测试-在MPTP注射之前训练小鼠穿过100cm长的窄光束到达明亮的封闭逃生平台(20勒克斯)，其产生厌恶刺激。这会促进小鼠穿过光束到达黑暗的封闭目标箱。第一次注射MPTP后48小时，对个体小鼠进行测试。记录穿过光束到达封闭逃生平台所需的时间以及脚滑的次数。到达该平台的延迟(latency)被用来衡量运动功能和协调性，而脚滑错误的次数被用来评估平衡。
图6示出了与MPTP组动物相比，用式I的化合物B治疗显著减少了穿过光束所需的时间。
在不脱离本发明内容的范围和精神的情况下，本发明内容所描述的方法、药物组合物和套件的各种修改和变化对于本领域技术人员来说将是显而易见的。尽管已经结合具体实施例描述了本发明，但是应当理解，本发明能够进行进一步的修改，并且所要求保护的本发明不应不适当地限于这些具体实施例。事实上，对于本领域技术人员来说显而易见的用于执行本发明的所描述的模式的各种修改旨在落入本发明的范围内。本申请旨在涵盖本发明的任何变化、用途或修改，一般遵循本发明原理并且包括属于本发明所属领域内的已知习惯实践的本发明的偏离，并且可以是适用于之前阐述的基本特征。

Claims (25)

1.一种组合物，其包含至少一种式I化合物：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且当R1是为芳基、杂芳基或杂环烷基时，R1未取代或被烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2NHR2或COR3取代；
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组；
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组；
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5或COR3组成的组；
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组；
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组；
X选自O、(CH2)p、NH以及p为0-2；以及
Y1-Y2选自CH2-CH2、CH2-O或CH＝CH，然而，当Y1-Y2是CH2-O时，X选自O或NH或R1不是氢；以及
Y3选自H或Me。
2.根据权利要求1所述的组合物，根据式II：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且当R1是芳基、杂芳基或杂环烷基时，R1未取代或被烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2NHR2或COR3取代；
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组；
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组；
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组；
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组；
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组；
X选自O、(CH2)p、NH以及p为0-2；以及
Y1-Y2选自CH2-CH2、CH2-O或CH＝CH，然而，当Y1-Y2是CH2-O时，X选自O或NH或R1不是氢。
3.根据权利要求1所述的组合物，根据式III：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且当R1是为芳基、杂芳基或杂环烷基时，R1未取代或被烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2R5、SO2NHR2或COR3取代；
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组；
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组；
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、SO2NHR2、COR3组成的组；
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组；
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组；以及
X选自O、(CH2)p、NH以及p为0-2。
4.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物是根据式IV：
其立体异构体或其药学上可接受的盐；
其中
R1选自由烷基、氢、卤代烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基组成的组，并且当R1是为芳基、杂芳基或杂环烷基时，R1未取代或被烷基、羟基、卤素、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、烷氧基、胺、SO2NHR2、SO2R5、COR3取代；
R2选自由氢、烷基、卤代烷基或环烷基组成的组；
R3选自由烷基、环烷基、羟基、胺、烷基胺或烷氧基组成的组；
R4选自由氢、烷基、卤素、卤代烷基、羟基、胺、烷氧基、SO2R5、COR3组成的组；
R5选自由烷基、卤代烷基、环烷基、芳基或胺组成的组；
R6选自由烷基、环烷基、芳基或杂芳基组成的组；芳基或杂芳基可任选被诸如烷基、羟基、卤素、卤代烷基的基团或取代基取代一次或多次；
X选自O、(CH2)p、NH；其中p为0-2。
5.根据权利要求1所述的组合物，包含一种或多种以下化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐；
6.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和至少一种权利要求1的化合物。
7.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和至少一种权利要求2的化合物。
8.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和至少一种权利要求3的化合物。
9.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和至少一种权利要求4的化合物。
10.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和至少一种权利要求5的化合物。
11.一种用于治疗受试者的疼痛、神经退行性疾病或炎性疾病的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的至少一种式I的化合物
其立体异构体或其药学上可接受的盐。
12.根据权利要求11所述的方法，还包括向受试者施用根据式II的化合物
其立体异构体或其药学上可接受的盐。
13.根据权利要求11所述的方法，还包括向受试者施用根据式III的化合物
其立体异构体或其药学上可接受的盐。
14.根据权利要求11所述的方法，还包括向受试者施用根据式IV的化合物
其立体异构体或其药学上可接受的盐。
15.根据权利要求11所述的方法，还包括向受试者施用选自以下的一种或多种的化合物：
16.一种用于治疗受试者的神经性疼痛或炎性疼痛的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的权利要求1所述的组合物。
17.一种用于治疗受试者的神经性疼痛或炎性疼痛的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的权利要求2所述的组合物。
18.一种用于治疗受试者的帕金森氏病的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的权利要求1所述的组合物。
19.一种用于治疗受试者的帕金森氏病的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的权利要求2所述的组合物。
20.一种用于治疗受试者的糖尿病周围神经病的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的权利要求1所述的组合物。
21.一种用于治疗受试者的糖尿病周围神经病的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的权利要求2所述的组合物。
22.根据权利要求16所述的方法，其中，所述神经性疼痛是周围神经性疼痛。
23.根据权利要求17所述的方法，其中所述神经性疼痛是周围神经性疼痛。
24.根据权利要求16所述的方法，其中所述神经性疼痛选自带状疱疹后神经痛、三叉神经痛、局灶性周围神经损伤、痛性感觉缺失中枢性疼痛、脊髓损伤、多发性硬化症、周围神经病变、HIV或化疗引发的疼痛。
25.根据权利要求17所述的方法，其中所述神经性疼痛选自带状疱疹后神经痛、三叉神经痛、局灶性周围神经损伤、痛性感觉缺失中枢性疼痛、脊髓损伤、多发性硬化症、周围神经病、HIV或化疗引发的疼痛。
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CA2719785A1 (en) * 2008-04-17 2009-10-22 Pfizer Inc. Ether benzylidene piperidine aryl carboxamide compounds
WO2011021645A1 (ja) * 2009-08-19 2011-02-24 大日本住友製薬株式会社 ２環性ウレア誘導体、またはその薬学的に許容される塩
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