CN117281083A - 一种抑郁症动物模型的构建装置及系统 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种抑郁症动物模型的构建装置及系统,装置包括动物笼和用于给予模型组动物不同的应激条件的应激干预组件;应激干预组件包括:第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七应激干预组件;处理过程:用第一应激干预组件处理动物,得到一次处理动物;用第二应激干预组件处理一次处理动物,得到二次处理动物;用第三应激干预组件处理二次处理动物,得到三次处理动物;用第四应激干预组件处理三次处理动物,得到四次处理动物;用第五应激干预组件处理四次处理动物,得到五次处理动物;用第六应激干预组件处理五次处理动物,得到六次处理动物;用第七应激干预组件处理六次处理动物,得到七次处理动物;重复处理过程至得到动物模型。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域,更具体地,涉及一种抑郁症动物模型的构建装置及系统。
背景技术
抑郁症的特征是持续最少两星期在大多数情况下处于情绪低落的状态。主要临床表现包括核心症状及其他相关症状,核心症状主要为心境低落、兴趣丧失以及精力缺乏。抑郁障碍患者在心境低落的基础上常常还伴有其他认知、生理以及行为症状,如注意力不集中、失眠、反应迟钝、行为活动减少及疲乏感,并且伴随抑郁发作的躯体性症状也十分明显,包括呼吸急促、乏力、胃肠道不适、食少纳差、头晕乏力等,使得抑郁患者经受了更多的痛苦,由于抑郁发作的平均病程较长,并且治愈时间长,复发率高等特点,抑郁患者也承担了沉重的经济压力,大部分患者由于经济负担无法接触到合适的用药,导致疾病进入一个恶性循环。
环境因素,如压力生活事件,或者创伤,通过改变大脑结构或功能,产生生物化学物质,增加抑郁症的发生风险。长期暴露于社会、心理或身体压力源为研究大脑如何将环境压力暴露转化为抑郁样情绪提供了疾病发生背景,其中慢性温和应激性刺激模型(ChronicMild Stress,CMS)最接近人长期处于应激性压力环境下发展为抑郁症的疾病状态,因此,CMS抑郁模型是探究抑郁症疾病发病原因以及病理机制的一种操作方法灵活,条件需求简单,安全便利的模型。
但是目前CMS的操作规程还未标准化,CMS所涉及的应激种类较多,同时强调“随机”,各实验室的CMS操作流程几乎都不相同,如何构建操作的标准流程成为模型发展的一个关键问题。目前操作流程存在几方面问题:应激项目没有公认的选择方案,应激的操作顺序没有统一规范;各文献所选组合方法不一,且未说明组合原因。另外,由于应激种类和模式的选择不同,导致模型在抑郁疾病研究过程中并不稳定,有自发恢复的情况,从而影响研究结果的准确性。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此,本发明提供一种抑郁症动物模型的构建装置及系统;通过长时间的探索、重复和验证,总结归纳得出本发明所述的构建装置和系统,统一规范了CMS抑郁症模型的操作流程和操作顺序,以为抑郁症的发病原因和病理机制研究提供稳定性、可复制性的研究模型。
本申请第一方面公开一种抑郁症动物模型的构建装置,所述装置包括:动物笼和应激干预组件;所述动物笼用于束缚和饲养模型组动物;所述应激干预组件用于给予所述模型组动物不同的应激条件,包括:
第一应激干预组件,包括:空笼、放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼;第二应激干预组件,包括:用于悬吊动物尾部的悬吊工具、光照工具、盛液体的工具;第三应激干预组件,包括:放置在动物笼底端内侧的垫层、光照工具;第四应激干预组件,包括:放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼、空笼;第五应激干预组件,包括:光照工具、用于悬吊动物尾部的悬吊工具、盛液体的工具;第六应激干预组件,包括:空笼、光照工具、放置在动物笼底端内侧的垫层;第七应激干预组件,包括:放置在动物笼底端内侧的垫层、放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼;
使用时的处理过程如下:采用第一应激干预组件对所述模型组动物进行应激干预处理,得到经第一次处理后的动物;采用第二应激干预组件对所述经第一次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第二次处理后的动物;采用第三应激干预组件对所述经第二次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第三次处理后的动物;采用第四应激干预组件对所述经第三次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第四次处理后的动物;采用第五应激干预组件对所述经第四次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第五次处理后的动物;采用第六应激干预组件对所述经第五次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第六次处理后的动物;采用第七应激干预组件对所述经第六次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第七次处理后的模型组动物;重复所述处理过程A次,直至得到所述动物模型。
所述垫层包括:潮湿垫料、脏垫料;潮湿垫料满足动物笼为湿笼的应激条件,脏垫料满足对动物异味应激的应激条件;所述悬吊工具位于动物笼的任意侧,满足夹动物尾部的应激条件;所述光照工具位于动物笼的任意侧,满足对动物持续光照和/或频闪照射的应激条件;所述放置在动物笼底端外侧的工具满足动物笼倾斜的应激条件;所述盛液体的工具满足动物冰水游泳的应激条件;所述空笼为笼内除了单只动物不放置任一物品,满足动物社交剥夺和舒适生存环境剥夺的应激条件。
所述第一应激干预组件或第二应激干预组件或第三应激干预组件或第四应激干预组件或第五应激干预组件或第六应激干预组件或第七应激干预组件中的任一组件包含的应激条件种类不重复,且至少包含3种;所述第一应激干预组件或第二应激干预组件或第三应激干预组件或第四应激干预组件或第五应激干预组件或第六应激干预组件或第七应激干预组件中的任意连续3个组件包含的应激条件种类不重复。
所述应激条件的种类包括:空笼、24小时禁食禁水、24小时倾斜45°角笼位的动物笼、动物尾悬吊a分钟、24小时持续光照环境、0℃冰水游泳b分钟、24小时湿笼(潮湿垫料)、c小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时。
所述A为至少为3次,即至少3周;上一周所述第B天使用的应激干预组件与下一周第B天的应激干预组件相同,B为1-7中的任一整数。
所述第一应激干预组件包含的应激条件种类包括:无垫料空笼、24小时禁食禁水、24小时倾斜45°角笼位的动物笼;第二应激干预组件包含的应激条件种类包括:动物尾悬吊a分钟、24小时持续光照环境、0℃冰水游泳b分钟;第三应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时湿笼(潮湿垫料)、B小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时;第四应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时倾斜45°角笼位的动物笼、无垫料空笼、24小时禁食禁水;第五应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时持续光照环境、动物尾悬吊a分钟、0℃冰水游泳b分钟;第六应激干预组件包含的应激条件种类包括:c小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时、无垫料空笼;第七应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时禁食禁水、24小时湿笼(潮湿垫料)、24小时倾斜45°角笼位的动物笼;其中,a为20,b为8,c为12,d为12。
所述动物笼内还束缚和饲养对照组动物;所述装置还包括抑郁行为检测组件,用于对未经过应激干预组件作用的对照组和经过应激干预组件作用的模型组中的动物进行抑郁行为检测,得到检测结果;当所述检测结果符合抑郁样行为判定标准时,得到所述抑郁症动物模型。
所述抑郁行为检测组件包括:糖水偏好件和强迫游泳件;所述糖水偏好件包括:用于喂动物水和糖溶液的工具、用于固定所述用于喂动物水和糖溶液工具的固定件;利用工具分别给予动物1%糖溶液和普通水;通过糖的总消耗量与水和糖的总消耗量计算动物的糖水偏好值;所述强迫游泳件包括:用于动物游泳的透明烧杯、用于记录透明烧杯内动物行为的摄像机、用于分析动物行为时间的分析软件(Smart软件);通过摄像机和分析软件(Smart软件)记录动物漂浮或静止不动的时间作为动物强迫游泳不动时间。
所述抑郁样行为判定标准包括:所述模型组动物24小时糖水偏好值小于等于60%,且模型组动物强迫游泳不动时间是对照组动物强迫游泳不动时间的1.5倍及以上。
本申请第二方面公开一种抑郁症动物模型的构建系统,所述系统包括:
第一处理单元,用于采用第一应激干预组件对所述模型组动物进行应激干预处理,得到经第一次处理后的动物;
第二处理单元,用于采用第二应激干预组件对所述经第一次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第二次处理后的动物;
第三处理单元,用于采用第三应激干预组件对所述经第二次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第三次处理后的动物;
第四处理单元,用于采用第四应激干预组件对所述经第三次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第四次处理后的动物;
第五处理单元,用于采用第五应激干预组件对所述经第四次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第五次处理后的动物;
第六处理单元,用于采用第六应激干预组件对所述经第五次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第六次处理后的动物;
第七处理单元,用于采用第七应激干预组件对所述经第六次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第七次处理后的模型组动物;
重复单元,用于循环重复所述第一处理单元、第二处理单元、第三处理单元、第四处理单元、第五处理单元、第六处理单元、第七处理单元的处理过程A次,直至得到符合要求的所述动物模型。
本申请具有以下有益效果:
1、抑郁症动物模型的构建过程中,应激条件的组合性、多变性、不可预测性,以及动物对于应激条件的反应是模型成功的关键。正是由于本申请对应激条件的规范性和统一性,也能很好地改善目前应激项目没有公认的选择方案,应激的操作顺序没有统一规范,各文献所选组合方法不一的现状。本申请中的七个应激组合干预是经过规范统一验证的,若解除七个应激组合干预中任何一个,将延长模型构建成功的时间,甚至在相同的应激干预时间内,构建模型的成功率下降到百分之五十以下。
2、本申请创新性的统一规范并优化了CMS抑郁症模型的操作流程和操作顺序,本申请的具体技术方案得到了实验结果验证,不会存在现有技术中模型自发恢复的情况,从而影响研究结果的准确性,从而为抑郁症的发病原因和病理机制研究提供稳定性、可复制性的CMS抑郁症模型。
3、本申请创新性地公开包括构建抑郁症动物模型的系统,可以将本系统置入装置内形成实验上的“自动加工站”,保证该模型构建的标准化和自动化;与此同时,本申请还还公开了系统中所使用的动物笼、应激干预组件等具体结构,完全可以实现“自动加工站”的技术效果。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获取其他的附图。
图1是本发明实施例第二方面提供的系统流程示意图;
图2是本发明实施例提供的对照组和模型组动物强迫游泳行为监测示意图;
图3是本发明实施例提供的建立模型过程中,连续5周监测比较动物24小时糖水偏好摄取百分比和游泳不定时间的统计结果图;
图4是本发明实施例提供的建立模型过程中模型成功率的统计结果图。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案,下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
在本发明的说明书和权利要求书及上述附图中的描述的一些流程中,包含了按照特定顺序出现的多个操作,但是应该清楚了解,这些操作可以不按照其在本文中出现的顺序来执行或并行执行,操作的序号如101、102等,仅仅是用于区分开各个不同的操作,序号本身不代表任何的执行顺序。另外,这些流程可以包括更多或更少的操作,并且这些操作可以按顺序执行或并行执行。需要说明的是,本文中的“第一”、“第二”等描述,是用于区分不同的消息、设备、模块等,不代表先后顺序,也不限定“第一”和“第二”是不同的类型。
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获取的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明实施例第一方面公开一种抑郁症动物模型的构建装置,所述装置包括:动物笼和应激干预组件;所述动物笼用于束缚和饲养模型组动物;所述应激干预组件用于给予所述模型组动物不同的应激条件,包括:
第一应激干预组件,包括:空笼、放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼;第二应激干预组件,包括:用于悬吊动物尾部的悬吊工具(提供鼠尾悬吊的条件)、光照工具(提供持续光照环境)、盛液体的工具(提供冰水强迫游泳的条件);第三应激干预组件,包括:放置在动物笼底端内侧的垫层(潮湿垫料和脏垫料)、光照工具(提供频闪灯光照射环境);第四应激干预组件,包括:放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼(提供倾斜45°角笼位的条件)、空笼;第五应激干预组件,包括:光照工具(提供持续光照环境)、用于悬吊动物尾部的悬吊工具(提供鼠尾悬吊的条件)、盛液体的工具(提供冰水强迫游泳的条件);第六应激干预组件,包括:空笼、光照工具(提供频闪灯光照射环境)、放置在动物笼底端内侧的垫层(脏垫料);第七应激干预组件,包括:放置在动物笼底端内侧的垫层(潮湿垫料)、放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼(提供倾斜45°角笼位的条件);
使用时的处理过程如下:采用第一应激干预组件对所述模型组动物进行应激干预处理,得到经第一次处理后的动物;采用第二应激干预组件对所述经第一次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第二次处理后的动物;采用第三应激干预组件对所述经第二次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第三次处理后的动物;采用第四应激干预组件对所述经第三次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第四次处理后的动物;采用第五应激干预组件对所述经第四次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第五次处理后的动物;采用第六应激干预组件对所述经第五次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第六次处理后的动物;采用第七应激干预组件对所述经第六次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第七次处理后的模型组动物;重复所述处理过程A次,直至得到所述动物模型。
在一个实施例中,所述垫层包括:潮湿垫料、脏垫料;潮湿垫料满足动物笼为湿笼的应激条件,脏垫料满足对动物异味应激的应激条件;所述悬吊工具位于动物笼的任意侧,满足夹动物尾部的应激条件;所述光照工具位于动物笼的任意侧,满足对动物持续光照和/或频闪照射的应激条件;所述放置在动物笼底端外侧的工具满足动物笼倾斜的应激条件;所述盛液体的工具满足动物冰水游泳的应激条件;所述空笼为笼内除了单只动物不放置任一物品,满足动物社交剥夺和舒适生存环境剥夺的应激条件。
在一个实施例中,所述第一应激干预组件或第二应激干预组件或第三应激干预组件或第四应激干预组件或第五应激干预组件或第六应激干预组件或第七应激干预组件中的任一组件包含的应激条件种类不重复,且至少包含3种;所述第一应激干预组件或第二应激干预组件或第三应激干预组件或第四应激干预组件或第五应激干预组件或第六应激干预组件或第七应激干预组件中的任意连续3个组件包含的应激条件种类不重复。
在一个实施例中,所述应激条件的种类包括:空笼、24小时禁食禁水、24小时倾斜45°角笼位的动物笼、动物尾悬吊a分钟、24小时持续光照环境、0℃冰水游泳b分钟、24小时湿笼(潮湿垫料)、c小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时。具体地,所述第一应激干预组件包含的应激条件种类包括:无垫料空笼、24小时禁食禁水、24小时倾斜45°角笼位的动物笼;第二应激干预组件包含的应激条件种类包括:动物尾悬吊a分钟、24小时持续光照环境、0℃冰水游泳b分钟;第三应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时湿笼(潮湿垫料)、B小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时;第四应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时倾斜45°角笼位的动物笼、无垫料空笼、24小时禁食禁水;第五应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时持续光照环境、动物尾悬吊a分钟、0℃冰水游泳b分钟;第六应激干预组件包含的应激条件种类包括:c小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时、无垫料空笼;第七应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时禁食禁水、24小时湿笼(潮湿垫料)、24小时倾斜45°角笼位的动物笼;其中,a为20,b为8,c为12,d为12。
在一个实施例中,所述A次至少为3次,即至少3周;上一周所述第B天使用的应激干预组件与下一周第B天的应激干预组件相同,B为1-7中的任一整数。具体地,B为1时,上一周第1天与下一周第1天均使用第一应激干预组件对模型组动物进行处理;B为2时,上一周第2天与下一周第2天均使用第二应激干预组件对模型组动物进行处理;B为3时,上一周第3天与下一周第3天均使用第三应激干预组件对模型组动物进行处理;B为4时,上一周第4天与下一周第4天均使用第四应激干预组件对模型组动物进行处理;B为5时,上一周第5天与下一周第5天均使用第五应激干预组件对模型组动物进行处理;B为6时,上一周第6天与下一周第6天均使用第六应激干预组件对模型组动物进行处理;B为7时,上一周第7天与下一周第7天均使用第七应激干预组件对模型组动物进行处理。
在一个实施例中,所述动物笼内还束缚和饲养对照组动物;所述装置还包括抑郁行为检测组件,用于对未经过应激干预组件作用的对照组和经过应激干预组件作用的模型组中的动物进行抑郁行为检测,得到检测结果;当所述检测结果符合抑郁样行为判定标准时,得到所述抑郁症动物模型。
在一个实施例中,所述抑郁行为检测组件包括:糖水偏好件和强迫游泳件;所述糖水偏好件包括:用于喂动物水和糖溶液的工具、用于固定所述用于喂动物水和糖溶液工具的固定件;利用工具分别给予动物1%糖溶液和普通水;通过糖的总消耗量与水和糖的总消耗量计算动物的糖水偏好值;所述强迫游泳件包括:用于动物游泳的透明烧杯、用于记录透明烧杯内动物行为的摄像机、用于分析动物行为时间的Smart软件;通过摄像机和Smart软件记录动物漂浮或静止不动的时间作为动物强迫游泳不动时间。
在一个实施例中,所述抑郁样行为判定标准包括:所述模型组动物24小时糖水偏好值小于等于60%,且模型组动物强迫游泳不动时间是对照组动物强迫游泳不动时间的1.5倍及以上。
在一个实施例中,所述动物模型为小鼠模型。可选的,所述动物为鼠,鼠为5周龄野生型小鼠。
在一个实施例中,所述装置还包括随机分配组件,用于将未适应新环境的至少2只动物随机匹配分别形成对照组(Control 组)和模型组(Chronic Mild Stress , CMS组);所述模型组中的每单只动物单笼饲养适应新环境时间C,所述对照组中的至少一只动物饲养适应新环境时间C;在饲养适应新环境过程中对照组和模型组的动物无任何接触。随机分配组件可以是现有技术中的任何能够实现随机分类的器械,例如小鼠经由工厂传输带运出后再平均分向两侧,实现对小鼠的随机平均分配;或者可以是一个杆子,直接将围在一起的小鼠平均分为两部分,在本实施例中不对随机分配组件做限定,其只要是能够实现对小鼠的随机平均分配的功能即可。时间C为一周。
图1是本发明实施例第二方面提供的系统流程示意图,系统包括:
第一处理单元101,用于采用第一应激干预组件对所述模型组动物进行应激干预处理,得到经第一次处理后的动物;
第二处理单元102,用于采用第二应激干预组件对所述经第一次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第二次处理后的动物;
第三处理单元103,用于采用第三应激干预组件对所述经第二次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第三次处理后的动物;
第四处理单元104,用于采用第四应激干预组件对所述经第三次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第四次处理后的动物;
第五处理单元105,用于采用第五应激干预组件对所述经第四次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第五次处理后的动物;
第六处理单元106,用于采用第六应激干预组件对所述经第五次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第六次处理后的动物;
第七处理单元107,用于采用第七应激干预组件对所述经第六次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第七次处理后的模型组动物;
重复单元108,用于循环重复所述第一处理单元、第二处理单元、第三处理单元、第四处理单元、第五处理单元、第六处理单元、第七处理单元的处理过程A次,直至得到符合要求的所述动物模型。
可选的,所述系统还包括分类单元,用于将未适应新环境的至少2只动物随机匹配分别形成对照组和模型组;所述模型组中的每单只动物单笼饲养适应新环境时间C,所述对照组中的至少一只动物饲养适应新环境时间C;在饲养适应新环境过程中对照组和模型组的动物无任何接触;时间C为一周。
可选的,所述系统还包括检测单元,用于对对照组和第二处理单元后得到的模型组的动物进行抑郁样行为检测,得到检测结果;当所述检测结果符合抑郁样行为判定标准时,得到所述抑郁症动物模型。
具体地,本实施例中用野生型C57/BL6小鼠作为实验对象,清洁级 C57/BL6小鼠(雄性,5周龄)均购自北京斯贝福生物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2019-0010。实验动物均在室温 25±2°C,相对湿度 50%-60%的环境下分笼饲养,实验环境安静,12 h/12 h明暗交替。所有动物饮食与饮水自由,饲料由北京斯贝福生物技术有限公司提供。动物在饲养间适应一周后开始实验,所有动物使用依据军事医学研究院伦理委员会和实验动物中心相关规定进行。
小鼠在适应新环境过程中,进行分组:对照组(Control组)和模型组(ChronicMild Stress,CMS组)。CMS组小鼠每只动物单笼饲养适应一周, Control组小鼠每五只动物饲养一笼适应一周,与CMS小鼠无任何接触。两组小鼠饮食与饮水自由,适应环境结束后开始建CMS模型,本发明的CMS抑郁模型建模时间为5周,成功率为72%,我们将24小时蔗糖摄取量的百分比(蔗糖的消耗量/水和蔗糖的总消耗量)和小鼠强迫游泳不动时间作为评估CMS模型是否成功的方法。实验开始后,CMS组小鼠将持续单笼饲养至课题项目结束,我们采用随机安排的常用轻度应激源,对照组不进行任何应激干预,模型组小鼠每天接受至少3种应激源,应激刺激种类每天之间不固定,刺激模式为连续3天不施加相同的应激源,一周之内相同刺激模式要变换顺序,不重复,每周重复上一周刺激模式。如下为第一周第1-7天的应激刺激方法,第一周到第五周不断循环重复:
在使用抑郁行为检测组件对动物的抑郁样行为检测的过程中,主要有以下过程:
1、24小时糖水偏好实验(Source Preference Test):抑郁症引起对糖偏好的降低被认为反映快感缺乏症状。实验开始前,先对动物进行训练,给动物喂两瓶水36小时,然后喂1瓶1%(w/v)糖溶液和1瓶普通水,每12小时调换一次瓶子的位置。训练结束后,老鼠被限制12小时不喝水,然后在24小时内喂一瓶1%糖水喝1瓶普通水,仍然12小时调换一次瓶子的位置。最后糖水偏好是通过将糖的总消耗量/水和糖的总消耗量来计算。
2、强迫游泳实验(Force Swimming Test):实验开始前,对Control组与CMS组小鼠进行强迫游泳学习,连续三天,每天一次,每次5min,去除不会游泳的小鼠。将小鼠置于透明盛水的2L烧杯(高19cm,直径14cm)中,温度为21~24摄氏度,水深14cm,让小鼠游泳6分钟,其中2分钟适应,4分钟记录,通过摄像机从烧杯侧面记录小鼠的行为。然后用Smart软件进行分析,当小鼠漂浮或静止不动时被记录为不动时间内;当小鼠的静止不动时间是对照组小鼠时间的1.5倍及以上时,这种行为被认为绝望行为。如图2所示,图2是本发明实施例提供的对照组和模型组动物强迫游泳行为监测示意图,其中,图2中上面为对照组(Control组),下面为对照组(CMS组),从左至右分别为烧杯内每组6只小鼠强迫游泳的行为监测过程;判定的不动阈值为:小鼠头部浮在水面,没有四肢游动,仅保持呼吸和身体不下沉,时间超过0.5秒。
通过对建立模型过程中,连续5周监测比较动物24小时糖水偏好摄取百分比和游泳不定时间,结果显示建模第五周两项行为学指标均显示与对照组有显著性差异(****P<0.0001),如图3所示;其中,图3A为24小时糖水偏好显示:CMS建模5周后与Control组相比,有显著性差异(****P<0.0001),同时CMS建模5周与CMS建模2周相比具有统计学意义(*P<0.05),CMS建模5周与CMS建模4周相比也具有统计学意义(*P<0.001);图3B为强迫游泳监测小鼠不动时间结果显示:CMS建模5周后与Control组相比,有显著性差异(****P<0.0001),同时CMS建模3周和建模4周与Control组相比也具有统计学意义(*P<0.05,**P<0.01),CMS建模5周与CMS建模4周相比也具有统计学意义(*P<0.01)。
通过对建立模型过程中对模型成功率进行统计,结果如图4所示,在24小时糖水偏好行为中,CMS模型小鼠的成模率为71.43%,不成模率为28.57%;强迫游泳行为中,CMS模型小鼠的成模率为72.37%,不成模率为27.27%。其中,图4A为24小时糖水偏好显示:与刚开始建模时(CMS 0w)相比较,在7只建模动物中,其中有5只(CMS5w-Yes)与CMS0w组相比,有显著统计学差异(****P<0.0001),有2只(CMS5w-No)与CMS0w组相比,无显著性;图4B为 饼图结果显示,所有(7只)建模小鼠中,其中CMS模型成功率为71.43%,CMS模型不模率为28.57%;图4C为强迫游泳不动行为显示:与刚开始建模时(CMS0w)相比较,在11只建模动物中,其中有8只(CMS5w-Yes)与CMS0w组相比,有显著统计学差异(****P<0.0001),有3只(CMS5w-No)与CMS0w组相比,无显著性;图4D为 饼图结果显示,所有(11只)建模小鼠中,其中CMS模型成功率为72.73%,CMS模型不模率为27.24%。
本验证实施例的验证结果表明,为适应症分配固有权重相对于默认设置来说可以适度改善本方法的性能。
所属领域的技术人员可以清楚地了解到,为描述的方便和简洁,上述描述的系统,装置和单元的具体工作过程,可以参考前述方法实施例中的对应过程,在此不再赘述。
在本申请所提供的几个实施例中,应该理解到,所揭露的系统,装置和方法,可以通过其它的方式实现。例如,以上所描述的装置实施例仅仅是示意性的,例如,所述单元的划分,仅仅为一种逻辑功能划分,实际实现时可以有另外的划分方式,例如多个单元或组件可以结合或者可以集成到另一个系统,或一些特征可以忽略,或不执行。另一点,所显示或讨论的相互之间的耦合或直接耦合或通信连接可以是通过一些接口,装置或单元的间接耦合或通信连接,可以是电性,机械或其它的形式。
所述作为分离部件说明的单元可以是或者也可以不是物理上分开的,作为单元显示的部件可以是或者也可以不是物理单元,即可以位于一个地方,或者也可以分布到多个网络单元上。可以根据实际的需要选择其中的部分或者全部单元来实现本实施例方案的目的。
另外,在本发明各个实施例中的各功能单元可以集成在一个处理单元中,也可以是各个单元单独物理存在,也可以两个或两个以上单元集成在一个单元中。上述集成的单元既可以采用硬件的形式实现,也可以采用软件功能单元的形式实现。
本领域普通技术人员可以理解上述实施例的各种方法中的全部或部分步骤是可以通过程序来指令相关的硬件来完成,该程序可以存储于一计算机可读存储介质中,存储介质可以包括:只读存储器(ROM,Read Only Memory)、随机存取存储器(RAM,RandomAccess Memory)、磁盘或光盘等。
本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例方法中的全部或部分步骤是可以通过程序来指令相关的硬件完成,所述的程序可以存储于一种计算机可读存储介质中,上述提到的存储介质可以是只读存储器,磁盘或光盘等。
以上对本发明所提供的一种计算机设备进行了详细介绍,对于本领域的一般技术人员,依据本发明实施例的思想,在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处,综上所述,本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
Claims (10)
1.一种抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述装置包括:动物笼和应激干预组件;所述动物笼用于束缚和饲养模型组动物;所述应激干预组件用于给予所述模型组动物不同的应激条件,包括:
第一应激干预组件,包括:空笼、放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼;第二应激干预组件,包括:用于悬吊动物尾部的悬吊工具、光照工具、盛液体的工具;第三应激干预组件,包括:放置在动物笼底端内侧的垫层、光照工具;第四应激干预组件,包括:放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼、空笼;第五应激干预组件,包括:光照工具、用于悬吊动物尾部的悬吊工具、盛液体的工具;第六应激干预组件,包括:空笼、光照工具、放置在动物笼底端内侧的垫层;第七应激干预组件,包括:放置在动物笼底端内侧的垫层、放置在动物笼底端外侧的工具或倾斜动物笼;
使用时的处理过程如下:采用第一应激干预组件对所述模型组动物进行应激干预处理,得到经第一次处理后的动物;采用第二应激干预组件对所述经第一次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第二次处理后的动物;采用第三应激干预组件对所述经第二次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第三次处理后的动物;采用第四应激干预组件对所述经第三次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第四次处理后的动物;采用第五应激干预组件对所述经第四次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第五次处理后的动物;采用第六应激干预组件对所述经第五次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第六次处理后的动物;采用第七应激干预组件对所述经第六次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第七次处理后的模型组动物;重复所述处理过程A次,直至得到所述动物模型。
2.根据权利要求1所述的抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述垫层包括:潮湿垫料、脏垫料;潮湿垫料满足动物笼为湿笼的应激条件,脏垫料满足对动物异味应激的应激条件;所述悬吊工具位于动物笼的任意侧,满足夹动物尾部的应激条件;所述光照工具位于动物笼的任意侧,满足对动物持续光照和/或频闪照射的应激条件;所述放置在动物笼底端外侧的工具满足动物笼倾斜的应激条件;所述盛液体的工具满足动物冰水游泳的应激条件;所述空笼为笼内除了单只动物不放置任一物品,满足动物社交剥夺和舒适生存环境剥夺的应激条件。
3.根据权利要求1所述的抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述第一应激干预组件或第二应激干预组件或第三应激干预组件或第四应激干预组件或第五应激干预组件或第六应激干预组件或第七应激干预组件中的任一组件包含的应激条件种类不重复,且至少包含3种;所述第一应激干预组件或第二应激干预组件或第三应激干预组件或第四应激干预组件或第五应激干预组件或第六应激干预组件或第七应激干预组件中的任意连续3个组件包含的应激条件种类不重复。
4.根据权利要求1所述的抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述应激条件的种类包括:空笼、24小时禁食禁水、24小时倾斜45°角笼位的动物笼、动物尾悬吊a分钟、24小时持续光照环境、0℃冰水游泳b分钟、24小时湿笼、c小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时。
5.根据权利要求1所述的抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述A次至少为3次,即至少3周;上一周所述第B天使用的应激干预组件与下一周第B天的应激干预组件相同,B为1-7中的任一整数。
6.根据权利要求4所述的抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述第一应激干预组件包含的应激条件种类包括:无垫料空笼、24小时禁食禁水、24小时倾斜45°角笼位的动物笼;第二应激干预组件包含的应激条件种类包括:动物尾悬吊a分钟、24小时持续光照环境、0℃冰水游泳b分钟;第三应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时湿笼、B小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时;第四应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时倾斜45°角笼位的动物笼、无垫料空笼、24小时禁食禁水;第五应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时持续光照环境、动物尾悬吊a分钟、0℃冰水游泳b分钟;第六应激干预组件包含的应激条件种类包括:c小时频闪灯光照射环境、脏垫料饲养d小时、无垫料空笼;第七应激干预组件包含的应激条件种类包括:24小时禁食禁水、24小时湿笼、24小时倾斜45°角笼位的动物笼;其中,a为20,b为8,c为12,d为12。
7.根据权利要求1-5任一项所述的抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述动物笼内还束缚和饲养对照组动物;所述装置还包括抑郁行为检测组件,用于对未经过应激干预组件作用的对照组和经过应激干预组件作用的模型组中的动物进行抑郁行为检测,得到检测结果;当所述检测结果符合抑郁样行为判定标准时,得到所述抑郁症动物模型。
8.根据权利要求6所述的抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述抑郁行为检测组件包括:糖水偏好件和强迫游泳件;所述糖水偏好件包括:用于喂动物水和糖溶液的工具、用于固定所述用于喂动物水和糖溶液工具的固定件;利用工具分别给予动物1%糖溶液和普通水;通过糖的总消耗量与水和糖的总消耗量计算动物的糖水偏好值;所述强迫游泳件包括:用于动物游泳的透明烧杯、用于记录透明烧杯内动物行为的摄像机、用于分析动物行为时间的分析软件;通过摄像机和分析软件记录动物漂浮或静止不动的时间作为动物强迫游泳不动时间。
9.根据权利要求6所述的抑郁症动物模型的构建装置,其特征在于,所述抑郁样行为判定标准包括:所述模型组动物24小时糖水偏好值小于等于60%,且模型组动物强迫游泳不动时间是对照组动物强迫游泳不动时间的1.5倍及以上。
10.一种抑郁症动物模型的构建系统,其特征在于,所述系统包括:
第一处理单元,用于采用第一应激干预组件对所述模型组动物进行应激干预处理,得到经第一次处理后的动物;
第二处理单元,用于采用第二应激干预组件对所述经第一次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第二次处理后的动物;
第三处理单元,用于采用第三应激干预组件对所述经第二次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第三次处理后的动物;
第四处理单元,用于采用第四应激干预组件对所述经第三次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第四次处理后的动物;
第五处理单元,用于采用第五应激干预组件对所述经第四次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第五次处理后的动物;
第六处理单元,用于采用第六应激干预组件对所述经第五次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第六次处理后的动物;
第七处理单元,用于采用第七应激干预组件对所述经第六次处理后的动物进行应激干预处理,得到经第七次处理后的模型组动物;
重复单元,用于循环重复所述第一处理单元、第二处理单元、第三处理单元、第四处理单元、第五处理单元、第六处理单元、第七处理单元的处理过程A次,直至得到符合要求的所述动物模型。
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