CN117192120A - Rna结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用 - Google Patents
Rna结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117192120A CN117192120A CN202311069267.1A CN202311069267A CN117192120A CN 117192120 A CN117192120 A CN 117192120A CN 202311069267 A CN202311069267 A CN 202311069267A CN 117192120 A CN117192120 A CN 117192120A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- osteosarcoma
- zfp36l1
- binding protein
- rna binding
- metastasis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 title claims abstract description 154
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 title claims abstract description 82
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 title claims abstract description 82
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 title claims abstract description 34
- 101710159080 Aconitate hydratase A Proteins 0.000 title claims abstract description 13
- 101710159078 Aconitate hydratase B Proteins 0.000 title claims abstract description 13
- 102000044126 RNA-Binding Proteins Human genes 0.000 title claims abstract description 13
- 101710105008 RNA-binding protein Proteins 0.000 title claims abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 239000012502 diagnostic product Substances 0.000 title description 3
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 title description 3
- 102100034702 mRNA decay activator protein ZFP36L1 Human genes 0.000 claims abstract description 60
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 27
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 claims abstract description 26
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 claims abstract description 26
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical group C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 65
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 32
- 101000740519 Homo sapiens Syndecan-4 Proteins 0.000 claims description 25
- 102100037220 Syndecan-4 Human genes 0.000 claims description 25
- 108010079292 betaglycan Proteins 0.000 claims description 17
- 230000007705 epithelial mesenchymal transition Effects 0.000 claims description 16
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 10
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 6
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 5
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 5
- 230000009993 protective function Effects 0.000 claims description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 84
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 29
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 28
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 26
- 101000802094 Homo sapiens mRNA decay activator protein ZFP36L1 Proteins 0.000 description 20
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 15
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 12
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 11
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 102100033663 Transforming growth factor beta receptor type 3 Human genes 0.000 description 8
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 8
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 7
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 6
- 238000003197 gene knockdown Methods 0.000 description 6
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 6
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 3
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 3
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 3
- 108050000637 N-cadherin Proteins 0.000 description 3
- 108010065472 Vimentin Proteins 0.000 description 3
- 102000013127 Vimentin Human genes 0.000 description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 3
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 3
- 210000005048 vimentin Anatomy 0.000 description 3
- DWJXYEABWRJFSP-XOBRGWDASA-N DAPT Chemical compound N([C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)OC(C)(C)C)C=1C=CC=CC=1)C(=O)CC1=CC(F)=CC(F)=C1 DWJXYEABWRJFSP-XOBRGWDASA-N 0.000 description 2
- 229940125373 Gamma-Secretase Inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 229940124761 MMP inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 101710143111 Mothers against decapentaplegic homolog 3 Proteins 0.000 description 2
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 2
- 102000049939 Smad3 Human genes 0.000 description 2
- 241000021375 Xenogenes Species 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011977 dual antiplatelet therapy Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000003540 gamma secretase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 238000011729 BALB/c nude mouse Methods 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101710088172 HTH-type transcriptional regulator RipA Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 206010006007 bone sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940125400 channel inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000749 co-immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 1
- 210000002758 humerus Anatomy 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N n-[(2s,3r,4r,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-5-acetamido-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(4-methyl-2-oxochromen-7-yl)oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]acetamide Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](NC(C)=O)[C@H](OC=2C=C3OC(=O)C=C(C)C3=CC=2)O[C@@H]1CO UPSFMJHZUCSEHU-JYGUBCOQSA-N 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 238000010814 radioimmunoprecipitation assay Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本申请涉及生物医学技术领域，尤其涉及一种RNA结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用，一方面，通过定量地分析RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，可以在早期进行预测骨肉瘤细胞是否有发生肺转移，为骨肉瘤肺转移提供客观依据，另一方面，由于与RNA结合蛋白ZFP36L1相关的ZFP36L1‑SDC4‑TGFBR3信号轴作为靶点，能够有效调控骨肉瘤细胞内TGF‑β信号通路治疗骨肉瘤肺转移，为制备治疗骨肉瘤肺转移的药物提供了新的策略。
Description
技术领域
本申请属于生物医学技术领域，尤其涉及一种RNA结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用。
背景技术
在骨骼相关肿瘤中，骨肉瘤是目前最常见的恶性肿瘤之一，常发生在股骨远端(43％)、胫骨近端(23％)以及肱骨近端(10％)，临床上主要表现为局部疼痛、肿胀以及功能障碍等症状。由于其好发于20岁以下儿童以及青少年人群中，骨肉瘤已经严重影响了社会青年群体的学习和工作能力。目前，骨肉瘤的治疗方法主要以外科手术以及辅助放化疗为主，临床数据显示，这一标准治疗方法已经将骨肉瘤患者的5年整体生存率提高到了60％-75％。
然而，有15％-20％的骨肉瘤患者在首次确诊前已经发生了远处转移，其中肺转移约占80％。一旦骨肉瘤发生肺转移，患者预后将会大大降低，其5年整体生存率仅有20％-30％。此外，发生肺转移的骨肉瘤病灶也极大地限制了外科手术完全切除的可能性，对患者的治疗带来了巨大困难，骨肉瘤肺转移的治疗已经成为临床工作中的一大严峻挑战。
因此，目前的临床工作中，亟需寻找一种新的方法能够快速准确地确定骨肉瘤是否出现肺转移，以便更好地确定治疗方案。
发明内容
本申请的目的在于提供一种RNA结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用，旨在解决现有技术中没有有效手段能够抑制骨肉瘤发生肺转移的问题。
为实现上述申请目的，本申请采用的技术方案如下：
第一方面，本申请提供RNA结合蛋白ZFP36L1在制备诊断骨肉瘤肺转移的产品中的应用。
在一些实施例中，产品通过检测RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平来诊断骨肉瘤肺转移。
在一些实施例中，产品包括：通过酶联免疫吸附测定法、免疫比浊法或化学发光法进行检测RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平以诊断骨肉瘤肺转移的产品。
在一些实施例中，产品包括用于诊断骨肉瘤肺转移的试剂盒。
在一些实施例中，试剂盒包括特异性识别RNA结合蛋白ZFP36L1的试剂。
在一些实施例中，试剂盒还包括基于酶联免疫吸附测定法反应使用的试剂、基于免疫比浊法反应使用的试剂、基于化学发光法反应使用的试剂中的至少一种。
第二方面，本申请提供RNA结合蛋白ZFP36L1在制备治疗骨肉瘤肺转移的药物中的应用。
在一些实施例中，药物通过靶向阻断ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴进而治疗骨肉瘤肺转移。
在一些实施例中，药物通过靶向阻断ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴的作用包括：药物通过提高RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，下调SDC4表达，减弱SDC4对TGFBR3受体脱落的保护功能，促进TGFBR3受体在MMP作用下脱落，以抑制骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路，抑制骨肉瘤细胞发生上皮间质转化过程，进而抑制骨肉瘤细胞发生肺转移，实现治疗骨肉瘤肺转移。
在一些实施例中，药物包括RNA结合蛋白ZFP36L1的促进剂、SDC4的抑制剂中的至少一种。
本申请第一方面提供的RNA结合蛋白ZFP36L1在制备诊断骨肉瘤肺转移的产品中的应用，通过定量地分析RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，可以在早期进行预测骨肉瘤细胞是否有发生肺转移，为骨肉瘤肺转移提供客观依据。在进行诊断过程中，只需要直接检测RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，检测速率较高，方法简单，在应用过程中准确性和敏感度较高，可准确判断骨肉瘤肺转移的情况，具有良好的临床应用价值。
本申请第二方面提供的RNA结合蛋白ZFP36L1在制备治疗骨肉瘤肺转移的药物中的应用，由于与RNA结合蛋白ZFP36L1相关的ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴作为靶点，能够有效调控骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路治疗骨肉瘤肺转移，因此，以RNA结合蛋白ZFP36L1为制备治疗骨肉瘤肺转移的药物提供了新的策略，有助于广泛应用。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本申请实施例提供的骨肉瘤细胞内ZFP36L1/SDC4敲减试验结果。
图2是本申请实施例提供的ZFP36L1对骨肉瘤侵袭能力影响试验结果。
图3是本申请实施例提供的ZFP36L1依赖TGF-β信号通路抑制骨肉瘤侵袭能力试验结果。
图4是本申请实施例提供的ZFP36L1依赖SDC4抑制骨肉瘤侵袭能力以及TGF-β信号通路的试验结果。
图5是本申请实施例提供的SDC4保护TGFBR3免受MMP切割脱落试验结果。
图6是本申请实施例提供的骨肉瘤肺转移裸鼠模型构建示意图。
图7是本申请实施例提供的小鼠体内骨肉瘤肺转移情况对比分析图。
图8是本申请实施例提供的小鼠体内骨肉瘤肺转移情况统计图。
具体实施方式
为了使本申请要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。
本申请中，术语“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，A和/或B，可以表示：单独存在A，同时存在A和B，单独存在B的情况。其中A，B可以是单数或者复数。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
本申请中，“至少一个”是指一个或者多个，“多个”是指两个或两个以上。“以下至少一项(个)”或其类似表达，是指的这些项中的任意组合，包括单项(个)或复数项(个)的任意组合。例如，“a,b,或c中的至少一项(个)”，或，“a,b,和c中的至少一项(个)”，均可以表示：a,b,c,a-b(即a和b),a-c,b-c,或a-b-c，其中a,b,c分别可以是单个，也可以是多个。
应理解，在本申请的各种实施例中，上述各过程的序号的大小并不意味着执行顺序的先后，部分或全部步骤可以并行执行或先后执行，各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定，而不应对本申请实施例的实施过程构成任何限定。
在本申请实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本申请。在本申请实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。
本申请实施例说明书中所提到的相关成分的重量不仅仅可以指代各组分的具体含量，也可以表示各组分间重量的比例关系，因此，只要是按照本申请实施例说明书相关组分的含量按比例放大或缩小均在本申请实施例说明书公开的范围之内。具体地，本申请实施例说明书中的质量可以是μg、mg、g、kg等化工领域公知的质量单位。
术语“第一“、“第二”仅用于描述目的，用来将目的如物质彼此区分开，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。例如，在不脱离本申请实施例范围的情况下，第一XX也可以被称为第二XX，类似地，第二XX也可以被称为第一XX。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。
本申请实施例第一方面提供RNA结合蛋白ZFP36L1在制备诊断骨肉瘤肺转移的产品中的应用。
本申请实施例第一方面提供的RNA结合蛋白ZFP36L1在制备诊断骨肉瘤肺转移的产品中的应用，通过定量地分析RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，可以在早期进行预测骨肉瘤细胞是否有发生肺转移，为骨肉瘤肺转移提供客观依据。在进行诊断过程中，只需要直接检测RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，检测速率较高，方法简单，在应用过程中准确性和敏感度较高，可准确判断骨肉瘤肺转移的情况，具有良好的临床应用价值。
通过前期的研究发现，在骨肉瘤肺转移灶中，RNA结合蛋白ZFP36L1表达量明显下调。进一步研究证实了ZFP36L1能够抑制骨肉瘤细胞发生EMT过程，进而抑制骨肉瘤细胞发生肺转移。通过对其中机制的深入研究，ZFP36L1主要通过下调SDC4表达，减弱SDC4对TGFBR3受体脱落的保护功能，促进TGFBR3受体在MMP作用下脱落，以抑制骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路，从而实现抑制骨肉瘤细胞EMT过程以及肺转移的功能。因此，通过测定RNA结合蛋白ZFP36L1表达量进一步分析骨肉瘤细胞是否发生肺转移。
在一些实施例中，产品通过检测RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平来诊断骨肉瘤肺转移。
在一些实施例中，产品包括：通过酶联免疫吸附测定法、免疫比浊法或化学发光法进行检测RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平以诊断骨肉瘤肺转移的产品。
在一些实施例中，产品包括用于诊断骨肉瘤肺转移的试剂盒。
在一些实施例中，试剂盒包括特异性识别RNA结合蛋白ZFP36L1的试剂。
在一些具体实施例中，特异性识别RNA结合蛋白ZFP36L1的试剂包括与RNA结合蛋白ZFP36L1特异性结合的抗体，其中，提供的抗体可以是多克隆抗体也可以是单克隆抗体。
提供的抗体可以选择购买商业抗体，或者采用本领域已知的方法来制备。在一个实施方式中，将纯化的RNA结合蛋白ZFP36L1注入动物体内以产生多克隆抗体。在另一个实施方式中，可以采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。
在一些实施例中，试剂盒还包括基于酶联免疫吸附测定法反应使用的试剂、基于免疫比浊法反应使用的试剂、基于化学发光法反应使用的试剂中的至少一种。根据具体选择的检测RNA结合蛋白ZFP36L1的含量的方法进一步确定反应的试剂盒。
本申请实施例第二方面提供RNA结合蛋白ZFP36L1在制备治疗骨肉瘤肺转移的药物中的应用。
本申请实施例第二方面提供的RNA结合蛋白ZFP36L1在制备治疗骨肉瘤肺转移的药物中的应用，由于与RNA结合蛋白ZFP36L1相关的ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴作为靶点，能够有效调控骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路治疗骨肉瘤肺转移，因此，以RNA结合蛋白ZFP36L1为制备治疗骨肉瘤肺转移的药物提供了新的策略，有助于广泛应用。
与现有外科手术治疗方法对比相比，直接靶向骨肉瘤细胞内信号通路能够直接影响细胞在肺转移灶内的生长情况，弥补外科手术治疗无法切除肺部转移病灶的缺陷。同时靶向阻断ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴能够抑制骨肉瘤细胞发生EMT而抑制骨肉瘤肺转移，为骨肉瘤肺转移提供了新的治疗方案。
在一些实施例中，药物通过靶向阻断ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴进而治疗骨肉瘤肺转移。
在一些实施例中，药物通过靶向阻断ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴的作用包括：药物通过提高RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，下调SDC4表达，减弱SDC4对TGFBR3受体脱落的保护功能，促进TGFBR3受体在MMP作用下脱落，以抑制骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路，抑制骨肉瘤细胞发生上皮间质转化过程，进而抑制骨肉瘤细胞发生肺转移，实现治疗骨肉瘤肺转移。
在一些实施例中，药物包括RNA结合蛋白ZFP36L1的促进剂、SDC4的抑制剂中的至少一种。
在一些实施例中，提供的药物还包括药学上可接受的载体，药学上可接受的载体包括稀释剂、填充剂、结合剂、防腐剂、润滑剂、分散剂、湿润剂、甜味剂、香味剂、乳化剂、悬浮剂、保存剂、抗氧化剂、着色剂、稳定剂中的至少一种。
在一些实施例中，药物的施用方式可以是口服、全身施用或肠胃外施用。提供的药物可以被制成多种剂型，如片剂、针剂、胶囊等。用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂的水溶液通过常规方法进行制备药物针剂。片剂和胶囊之类的药物，也可通过本领域技术人员常规方法制备。
下面结合具体实施例进行说明。
实施例1
验证RNA结合蛋白ZFP36L1在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用
(1)骨肉瘤细胞系构建构建
由苏州复百澳生物医药科技有限公司构建pLKO.1-shZFP36L1，pLKO.1-shSDC4，pLVX-ZFP36L1-FLAG，pLVX-SDC4-HA质粒，将目标质粒与psPAX2以及pMD2.G质粒共同转染进入293T细胞，分别收集24h以及48h细胞上清液用于培养骨肉瘤细胞系143B。慢病毒液培养48h后，使用嘌呤霉素或潮霉素进行细胞筛选，最终获Mock、oeZFP36L1、shNC、shZFP36L1、shZFP36L1+shSDC4五种细胞系。
其中，shRNA靶标序列如下：
shZFP36L1#1：5’-GCT CGC GAG ACA GCC GCT TCC-3’；
shZFP36L1#2:5’-GCT TCC GAG ACC GCT CCT TCT-3’；
shSDC4#1：5’-GCC CGG GCA GGA ATC TGA TGA-3’；
shSDC4#2:5’-GCA GGG CAG CAA CAT CTT TGA-3’。
(2)稳转细胞系内ZFP36L1/SDC4表达量检测
①实时定量PCR(qRT-PCR)实验：使用RNA Quick Purification kit(ESscience，#RN001)提取不同骨肉瘤稳转细胞系的RNA，使用Evo M-MLV RT Premix for qPCR kit(Accurate Biology,#AG11706)将RNA逆转录成cDNA，使用SYBR Green Pro Taq HS qPCRKit(Accurate Biology,#AG11718)进行qRT-PCR检测不同骨肉瘤稳转细胞系内mRNA表达量。
②Western blot(WB)实验使用RIPA裂解液提取骨肉瘤稳转细胞蛋白，将等量蛋白使用8–12％ SDS-PAGE分离并转印到PVDF膜上，使用5％脱脂牛奶封闭PVDF膜并使用一抗4℃孵育过夜。一抗孵育后，使用TBST清洗并使用辣根过氧化物酶偶联抗体常温孵育1h，使用ECL detection system检测辣根过氧化物酶活性来比较不同骨肉瘤稳转细胞系内蛋白表达情况。
(3)检测ZFP36L1对骨肉瘤细胞侵袭能力影响
①Transwell实验：将Mock/oeZFP36L1/shNC/shZFP36L1四种骨肉瘤细胞分别种于Transwell小室内24h后，使用4％多聚甲醛固定细胞并使用结晶紫染色，对比不同骨肉瘤细胞的侵袭能力。
②划痕实验：将Mock/oeZFP36L1/shNC/shZFP36L1四种骨肉瘤细胞分别种于12孔板内，待细胞融合率达到90-100％时，使用中枪头在孔板中央划线，在特定时间进行拍照，对比不同骨肉瘤细胞的侵袭能力。
③检测EMT相关分子表达：使用qRT-PCR实验以及WB实验的方法，检测Mock/oeZFP36L1/shNC/shZFP36L1四种骨肉瘤细胞内N-cadherin、Vimentin以及Snail1等EMT相关基因的表达情况。
(4)验证ZFP36L1依赖TGF-β信号通路影响骨肉瘤细胞侵袭能力
①检测TGF-β信号通路激活水平：使用WB实验的方法，检测Mock/oeZFP36L1/shNC/shZFP36L1四种骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路中重要信号分子Smad3磷酸化水平以检测不同骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路激活水平；在Mock/oeZFP36L1/shNC/shZFP36L1四种骨肉瘤细胞内转染SBE-Luc质粒后，检测细胞荧光情况，以检测不同骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路激活水平。
②Transwell实验：将shNC/shZFP36L1两种骨肉瘤细胞分别种于Transwell小室内，分别给予或不给予TGF-β通路抑制剂SB431542处理24h后，使用4％多聚甲醛固定细胞并使用结晶紫染色，对比不同骨肉瘤细胞的侵袭能力。
③划痕实验：将shNC/shZFP36L1两种骨肉瘤细胞分别种于12孔板内，待细胞融合率达到90-100％时，分别给予或不给予TGF-β通路抑制剂SB431542处理后，使用中枪头在孔板中央划线，在特定时间进行拍照，对比不同骨肉瘤细胞的侵袭能力。
④检测EMT相关分子表达：使用qRT-PCR实验以及WB实验的方法，检测shNC/shZFP36L1两种骨肉瘤细胞在给予或不给予TGF-β通路抑制剂SB431542的情况下，细胞内内N-cadherin、Vimentin以及Snail1等EMT相关基因的表达情况。
(5)验证ZFP36L1依赖SDC4影响骨肉瘤细胞侵袭能力
①Transwell实验：将NC/shZFP36L1/shSDC4/shZFP36L1+shSDC4四种骨肉瘤细胞分别种于Transwell小室内24h后，使用4％多聚甲醛固定细胞并使用结晶紫染色，对比不同骨肉瘤细胞的侵袭能力。
②划痕实验：将NC/shZFP36L1/shSDC4/shZFP36L1+shSDC4四种骨肉瘤细胞分别种于12孔板内，待细胞融合率达到90-100％时，使用中枪头在孔板中央划线，在特定时间进行拍照，对比不同骨肉瘤细胞的侵袭能力。
③检测EMT相关分子表达：使用qRT-PCR实验以及WB实验的方法，检测NC/shZFP36L1/shSDC4/shZFP36L1+shSDC4四种骨肉瘤细胞内内N-cadherin、Vimentin以及Snail1等EMT相关基因的表达情况。
④检测TGF-β信号通路激活水平：使用WB实验的方法，检测NC/shZFP36L1/shSDC4/shZFP36L1+shSDC4四种骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路中重要信号分子Smad3磷酸化水平，以检测不同骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路激活水平。
(6)验证SDC4保护TGFBR3免于MMP切割脱落的作用
①免疫共沉淀(IP)实验：使用IP裂解液裂解143B细胞，向裂解液加入BeyoMagTMProtein A+G磁珠和一抗4℃孵育，过夜孵育后，将磁珠上蛋白洗脱后，使用WB实验进行检测。
②免疫荧光共定位实验：将143B和U2OS细胞种于共聚焦皿上，使用4％多聚甲醛固定，0.5％ Triton X-100通透，山羊血清封闭以及一抗4℃孵育，孵育过夜后，加入二抗孵育1小时，在荧光显微镜下观察。
③酶联免疫吸附测定(ELISA)实验：将NC/shSDC4两种骨肉瘤细胞种于6孔板内，分别给予MMP抑制剂TAPI2和γ-secretase抑制剂DAPT处理后，收集细胞上清液，使用人TGFBR3 ELISA试剂盒检测细胞上清液中游离性TGFBR3含量。
(7)动物模型选择及分组
选择8周龄的雌性BALB/c裸鼠，分为4组，每组5只，分别予以a、尾静脉注射野生型143B细胞；b、尾静脉注射shZFP36L1 143B细胞；c、尾静脉注射shZFP36L1+shSDC4 143B细胞；d、尾静脉注射shZFP36L1 143B细胞以及腹腔注射SB431542。
(8)检测裸鼠体内骨肉瘤肺转移情况
①尾静脉注射143B细胞4周后，(a)使用体内可见光检测方法，比较不同组裸鼠骨肉瘤细胞肺转移情况；(b)使用过量麻醉法将裸鼠处死，取出裸鼠肺部，在大体观下比较不同组小鼠肺部骨肉瘤生长情况；(c)将裸鼠肺部浸与荧光底物并检测可见光强度，比较不同组裸鼠肺部骨肉瘤生长情况；(d)用4％多聚甲醛裸鼠肺部固定，石蜡包埋并切片(5-μm厚)，进行H&E染色比较不同组裸鼠肺部骨肉瘤生长情况。
②体内可见光检测：裸鼠尾静脉注射骨肉瘤细胞4周后，将荧光素底物通过腹腔注射入裸鼠体内，使用Xenogen IVIS200imaging system检测裸鼠肺部荧光强度来评估裸鼠体内骨肉瘤肺转移情况。
离体肺大体观察：裸鼠尾静脉注射骨肉瘤细胞4周后，使用过量麻醉法将裸鼠处死，将裸鼠肺部取出，大体下观察裸鼠肺部骨肉瘤生长情况。
离体肺可见光检测：裸鼠尾静脉注射骨肉瘤细胞4周后，使用过量麻醉法将裸鼠处死，将裸鼠肺部浸泡于荧光素底物溶液中，使用Xenogen IVIS200imaging system检测裸鼠离体肺荧光强度来评估裸鼠体内骨肉瘤肺转移情况。
HE染色：使用4％多聚甲醛固定裸鼠肺组织，石蜡包埋并切片(5um厚度)，石蜡切片进行H&E染色，镜下观察不同组裸鼠肺组织肿瘤生长情况。
(9)实验结果
骨肉瘤细胞内ZFP36L1/SDC4敲减效率如图1所示，图1的A和C为qRT-PCR结果图，可以看出，设计的shZFP36L1和shSDC4质粒均能够有效地将143B细胞内ZFP36L1/SDC4 mRNA敲减到30％水平一下，设计的oeZFP36L1和oeSDC4质粒能够有效提高143B细胞内ZFP36L1/SDC4 mRNA表达至6倍以上；图1的B和D为WB实验结果图，可以看出，设计的shZFP36L1和shSDC4质粒均能够有效地将143B内ZFP36L1/SDC4蛋白敲减到极低水平，设计的oeZFP36L1和oeSDC4质粒能够有效提高143B细胞内ZFP36L1/SDC4蛋白水平。
ZFP36L1对骨肉瘤侵袭能力影响如图2所示，图A和B为划痕实验结果图，可以看出，oeZFP36L1能够有效抑制骨肉瘤细胞迁移，shZFP36L1能够有效促进骨肉瘤细胞迁移；图C和D为Transwell结果图，可以看出，oeZFP36L1能够有效抑制骨肉瘤细胞穿过Transwell小室，shZFP36L1能够有效促进骨肉瘤细胞穿过Transwell小室；图E为WB实验结果图，可以看出，oeZFP36L1能够有效抑制骨肉瘤细胞内EMT相关蛋白表达，shZFP36L1能够有效促进骨肉瘤细胞内EMT相关蛋白表达。由此可见，ZFP36L1主要发挥抑制骨肉瘤细胞侵袭能力的作用。
ZFP36L1依赖TGF-β信号通路抑制骨肉瘤侵袭能力如图3所示，图A和B分别为WB和SBE-Luc实验结果图，可以看出，oeZFP36L1能够有效降低骨肉瘤细胞内TGF-β通路激活水平，shZFP36L1能够有效升高骨肉瘤细胞内TGF-β通路激活水平；图C-F分别为Transwell和划痕实验结果图，可以看出，TGF-β信号通路抑制剂SB431542能够有效减弱shZFP36L1介导的骨肉瘤细胞侵袭能力增强；图G和H分别为qRT-PCR和WB实验结果图，可以看出，TGF-β信号通路抑制剂SB431542能够有效减弱shZFP36L1介导的骨肉瘤细胞内EMT相关蛋白表达增高。由此可见，ZFP36L1依赖TGF-β信号通路抑制骨肉瘤侵袭。
ZFP36L1依赖SDC4抑制骨肉瘤侵袭能力以及TGF-β信号通路如图4所示，图A-D分别为划痕和Transwell实验，可以看出，shSDC4能够有效减弱shZFP36L1介导的骨肉瘤细胞侵袭能力增强；图E为WB实验结果图，可以看出，shSDC4能够有效减弱shZFP36L1介导的骨肉瘤细胞内EMT相关蛋白表达增高；图F为WB实验结果图，可以看出，shSDC4能够有效减弱shZFP36L1介导的骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路水平升高。由此可见，ZFP36L1依赖SDC4抑制骨肉瘤侵袭能力以及TGF-β信号通路。
SDC4保护TGFBR3免受MMP切割脱落如图5所示，图A-B分别为IP和IF实验，可以看出SDC4和TGFBR3蛋白之间存在相互作用以及共定位的关系；图C为ELISA实验，可以看出，添加MMP抑制剂能够有效阻断shSDC4介导的TGFBR3脱落增加，而添加γ-secretase抑制剂DAPT无法阻断shSDC4介导的TGFBR3脱落增加。由此可见，SDC4主要发挥保护TGFBR3免受MMP切割脱落的作用。
裸鼠体内骨肉瘤肺转移情况对比图如图6-8所示，图6为骨肉瘤肺转移裸鼠模型构建示意图；图7从裸鼠体内可见光、离体肺大体照片、离体肺可见光以及肺组织切片H&E染色四个角度对比四组裸鼠体内骨肉瘤细胞肺转移情况；图8为的定量统计结果。可以看出，相较于NC组(空白对照组)，shZFP36L1组裸鼠体内肺转移情况明显增高，而相较于shZFP36L1组，shZFP36L1+shSDC4组和shZFP36L1+SB431542组裸鼠体内肺转移情况明显下降。由此可见，敲减SDC4或使用SB431542阻断TGF-β信号通路能够有效地阻断敲减shZFP36L1导致的骨肉瘤肺转移能力增强的情况。
综上，本申请提供的RNA结合蛋白ZFP36L1在制备诊断骨肉瘤肺转移的产品中的应用，通过定量地分析RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，可以在早期进行预测骨肉瘤细胞是否有发生肺转移，为骨肉瘤肺转移提供客观依据。在进行诊断过程中，只需要直接检测RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，检测速率较高，方法简单，在应用过程中准确性和敏感度较高，可准确判断骨肉瘤肺转移的情况，具有良好的临床应用价值；以及提供的RNA结合蛋白ZFP36L1在制备治疗骨肉瘤肺转移的药物中的应用，由于与RNA结合蛋白ZFP36L1相关的ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴作为靶点，能够有效调控骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路治疗骨肉瘤肺转移，因此，以RNA结合蛋白ZFP36L1为制备治疗骨肉瘤肺转移的药物提供了新的策略，有助于广泛应用。
以上所述仅为本申请的较佳实施例而已，并不用以限制本申请，凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (10)
1.RNA结合蛋白ZFP36L1在制备诊断骨肉瘤肺转移的产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过检测所述RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平来诊断骨肉瘤肺转移。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过酶联免疫吸附测定法、免疫比浊法或化学发光法进行检测所述RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平以诊断骨肉瘤肺转移的产品。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括用于诊断骨肉瘤肺转移的试剂盒。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括特异性识别所述RNA结合蛋白ZFP36L1的试剂。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括基于酶联免疫吸附测定法反应使用的试剂、基于免疫比浊法反应使用的试剂、基于化学发光法反应使用的试剂中的至少一种。
7.RNA结合蛋白ZFP36L1在制备治疗骨肉瘤肺转移的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物通过靶向阻断ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴进而治疗骨肉瘤肺转移。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物通过靶向阻断ZFP36L1-SDC4-TGFBR3信号轴的作用包括：所述药物通过提高RNA结合蛋白ZFP36L1的表达水平，下调SDC4表达，减弱SDC4对TGFBR3受体脱落的保护功能，促进TGFBR3受体在MMP作用下脱落，以抑制骨肉瘤细胞内TGF-β信号通路，抑制骨肉瘤细胞发生上皮间质转化过程，进而抑制骨肉瘤细胞发生肺转移，实现治疗骨肉瘤肺转移。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物包括RNA结合蛋白ZFP36L1的促进剂、SDC4的抑制剂中的至少一种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311069267.1A CN117192120A (zh) | 2023-08-23 | 2023-08-23 | Rna结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311069267.1A CN117192120A (zh) | 2023-08-23 | 2023-08-23 | Rna结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117192120A true CN117192120A (zh) | 2023-12-08 |
Family
ID=88984171
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311069267.1A Pending CN117192120A (zh) | 2023-08-23 | 2023-08-23 | Rna结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117192120A (zh) |
-
2023
- 2023-08-23 CN CN202311069267.1A patent/CN117192120A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105274110B (zh) | 非小细胞肺癌转移及预判其转移风险的miRNA标记物 | |
| US20120107323A1 (en) | Kinase protein binding inhibitors | |
| Ge et al. | CD38 affects the biological behavior and energy metabolism of nasopharyngeal carcinoma cells | |
| CN110538327B (zh) | Gpr31抑制剂在制备治疗脂肪代谢异常及相关疾病的药物中的应用 | |
| US20110312528A1 (en) | Novel synergistic combination of gemcitabine with P276-00 or P1446A in treatment of cancer | |
| Mei et al. | Effects of miR-338 on morphine tolerance by targeting CXCR4 in a rat model of bone cancer pain | |
| Dong et al. | Effects of miR-143 overexpression on proliferation, apoptosis, EGFR and downstream signaling pathways in PC9/GR cell line. | |
| Shen et al. | EDIL3 knockdown inhibits retinal angiogenesis through the induction of cell cycle arrest in vitro | |
| CN110300585A (zh) | 抗癌化合物及其用途 | |
| Geng et al. | MicroRNA‑30a suppresses non‑small‑cell lung cancer by targeting Myb‑related protein B | |
| KR20070114970A (ko) | Ｔｍｐｒｓｓ4 억제제를 유효성분으로 포함하는 항암제 | |
| Wang et al. | Long non-coding RNA KCNQ1OT1 promotes cell viability and migration as well as inhibiting degradation of CHON-001 cells by regulating miR-126-5p/TRPS1 axis | |
| CN115873942B (zh) | Trim35作为抗腺病毒感染治疗药物的新靶点及其应用 | |
| CN117192120A (zh) | Rna结合蛋白在制备骨肉瘤肺转移的诊断产品和治疗药物中的应用 | |
| Huang et al. | ROR1/STAT3 positive feedback loop facilitates cartilage degeneration in osteoarthritis through activation of NF-κB signaling pathway | |
| CN109675040A (zh) | 治疗乳腺癌的组合物及其应用 | |
| CN110904107B (zh) | 人tmeff1基因的用途及相关产品 | |
| Lin et al. | Effects of miR-939 and miR-376A on ulcerative colitis using a decoy strategy to inhibit NF-κB and NFAT expression | |
| KR102241681B1 (ko) | 알파1-안티트립신 억제제를 포함하는 폐암의 예방 또는 치료용 조성물 및 알파1-안티트립신을 포함하는 폐암 진단용 바이오마커 조성물 | |
| WO2017091952A1 (zh) | Akt2在诊断和治疗肿瘤中的用途 | |
| CN110420328B (zh) | Syt14抑制剂在制备肺癌治疗药物中的用途 | |
| CN114099684B (zh) | miR-32-5p在制备提高肿瘤细胞对双氢青蒿素敏感性的药物中的应用 | |
| WO2023082242A1 (zh) | Ctd-2256p15.2及其编码微肽作为靶点在开发肿瘤治疗药物中的应用 | |
| WO2017034173A1 (ko) | Awp1을 포함하는 암 전이 진단용 바이오마커 조성물 | |
| CN114569725B (zh) | Ykl-40在黑色素瘤治疗中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |