CN117143804A - 一种细胞外泌体的纯化方法及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明属于外泌体纯化技术领域，具体的说是一种细胞外泌体的纯化方法及装置，该纯化装置为试管架，包括沥水盒；所述沥水盒两侧固定连接有一对侧板，且一对侧板之间固定连接有中间板；所述沥水盒内部设置有托块；所述托块上侧均布有一组放置槽；所述放置槽内部均放置有试管，且试管顶部穿过限位环内部；所述托块表面均布有一组电磁铁，且电磁铁的两端均朝向试管；将试管放置于放置槽内部，然后向试管内部添加相关试剂，需要进行磁吸附时，可以将电磁铁通电，进而电磁铁的两端均可以吸附试管内的磁性物质，从而不需要将试管转移到磁分离架上，无需进行频繁的试管转移工作，简化操作步骤，防止将试管打翻，提高细胞外泌体的纯化效率。
Description
技术领域
本发明属于外泌体纯化技术领域，具体的说是一种细胞外泌体的纯化方法及装置。
背景技术
外泌体来源广泛，淋巴细胞、树突状细胞、肥大细胞及上皮细胞、肿瘤细胞等都可以分泌外泌体，其内含物包含过度表达的特异性的蛋白标志物，还含有大量的miRNA、cirRNA和DNA片段等，包含的生物信息非常丰富，可以用于肿瘤的早期筛查。但是正常细胞与肿瘤细胞都会分泌外泌体，对于肿瘤的检测来说，只有特定肿瘤细胞分泌的外泌体才具有临床意义，而从成千上万的各种细胞外泌体以及其他杂质中，纯化出来源于特定肿瘤细胞的外泌体是一个难题。
中国专利申请CN113249302B的一项专利公开了一种高效的外泌体分离纯化方法，其技术方案要点是：包括分离血浆，加入阳离子聚合物孵育；滤膜截留与阳离子聚合物结合的外泌体并漂洗外泌体；离液剂洗脱外泌体；加入磁珠吸附并富集外泌体；洗脱获得外泌体浓缩液。与现有技术相比，该发明不借助大型离心设备，采用阳离子聚合物对外泌体进行包覆后，采用离液剂解除阳离子聚合物与外泌体作用，通过简单的过滤，实现外泌体回收，然后通过磁性吸附剂对回收的外泌体进行浓缩，纯化。该发明有效缩短分离时间、提高外泌体回收效率、提高处理样本通量、提升外泌体分离纯度、降低外泌体分离所需试剂及耗材成本，分离得到的高纯度外泌体可用于核酸提取Westernblot、粒径分析、电镜检测等实验。
但上述技术往往存在以下缺陷：现有技术在纯化细胞外泌体时通常需要使用试管架，将试管放置于试管架上更容易操作，便于试剂的添加，但是在纯化过程中还需要使用到磁分离架对试管内的磁性物质进行吸附，这就需要将试管频繁地从试管架与磁分离架之间移动取放，不仅操作繁琐，还容易将试管打翻。
为此，本发明提供一种细胞外泌体的纯化方法及装置。
发明内容
为了弥补现有技术的不足，解决背景技术中所提出的至少一个技术问题。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种细胞外泌体的纯化装置，该纯化装置为试管架，包括沥水盒；所述沥水盒两侧固定连接有一对侧板，且一对侧板之间固定连接有中间板；所述中间板两侧均布有一组限位环；所述沥水盒内部设置有托块；所述托块上侧均布有一组放置槽；所述放置槽内部均放置有试管，且试管顶部穿过限位环内部；所述托块表面均布有一组电磁铁，且电磁铁的两端均朝向试管；
现有技术在纯化细胞外泌体时需要使用试管架，将试管放置于试管架上更容易操作，便于试剂的添加，但是在纯化过程中还需要使用到磁分离架对试管内的磁性物质进行吸附，这就需要将试管频繁地从试管架与磁分离架之间移动取放，不仅操作繁琐，还容易将试管打翻；此时本发明通过在试管架上设置电磁铁，在使用时将试管放置于放置槽内部，然后向试管内部添加相关试剂，需要进行磁吸附时，可以将电磁铁通电，进而电磁铁的两端均可以吸附试管内的磁性物质，从而不需要将试管转移到磁分离架上，无需进行频繁的试管转移工作，简化操作步骤，防止将试管打翻，提高细胞外泌体的纯化效率。
优选的，所述托块滑动连接于沥水盒内部；所述沥水盒内部固定连接有安装架；所述安装架内部固定连接有电机；所述电机的输出端连接有转轴；所述转轴表面固定连接有凸轮；所述托块下侧开设有凹槽；所述凹槽内部转动连接有滚轮，且滚轮与凸轮之间互相贴合；所述托块与沥水盒底部之间固定连接有一组弹簧一；将试剂添加进试管内部后，通过电机带动转轴和凸轮转动，进而凸轮通过滚轮向上挤压托块，并在弹簧一的配合作用下，使得托块带动试管不断上下运动，对试管内的试剂进行振荡，提高试剂之间的混合效果，无需手动对试管进行振荡，避免工作人员长期振荡试管而导致腕部劳损。
优选的，所述放置槽侧壁表面圆周均布有一组滑槽；所述滑槽内部均滑动连接有夹块；所述夹块与滑槽端部之间固定连接有弹簧二；所述夹块设置有斜面的一端突出于放置槽侧壁表面；通过设置多个夹块和弹簧二，将试管放入放置槽内部时，通过试管向下挤压夹块的斜面，将夹块挤入滑槽的内部，并将弹簧二压缩，进而利用弹簧二的弹力能够使得夹块将试管夹紧，提高对试管的固定程度，防止托块上下运动的过程中试管从放置槽中脱离。
优选的，所述中间板两侧均布有一组倾斜的沥水杆；所述沥水杆的直径小于试管的内径；在纯化工作结束后，需要对试管进行清洗，通过设置沥水杆，可以将清洗好的试管倒扣在沥水杆表面，使得沥水杆插入试管内部，进而试管内的水分可以向下滴落，便于将试管沥干。
优选的，所述托块表面均布有一组沥水孔；所述放置槽底部开设有连接孔；所述沥水孔和连接孔均贯穿托块；通过设置沥水孔和连接孔，向下滴落的水可以通过沥水孔和连接孔进入沥水盒内部，实现水的收集，防止水滴落至其他位置并造成污染，并且连接孔还可以防止放置槽内存在积水。
优选的，所述中间板下侧均布有一组套管；所述套管内部均滑动密封连接有导柱，且导柱下端与托块固定连接；所述沥水杆内部开设有气孔；所述气孔与导柱之间通过导管互相连通；在沥水的过程中，可以启动电机，促使托块上下运动，当托块向上运动时，能够将导柱推入套管内部，并将套管内部的空气通过导管挤入气孔内部，使得沥水杆上端喷气，对试管内部进行风干，加快试管的干燥效率，当托块向下运动时，能够将导柱从套管中拉出，进而套管内部产生负压，并通过气孔和导管重新吸气，以此方式循环。
优选的，所述沥水杆顶部固定连接有支撑块；所述支撑块采用多孔材料制成，且支撑块与试管内底部的形状之间互相适配；通过设置支撑块，将试管倒扣在沥水杆表面后，支撑块能够支撑在试管与沥水杆之间，从而将二者分隔开，进而从气孔喷出的空气可以通过支撑块内部的多孔结构流动，并对试管内部进行风干，防止沥水杆端部与试管直接接触，而导致气孔被试管堵住的问题，从而保证气流的正常流动。
优选的，所述支撑块采用弹性多孔材料制成(可以是海绵)；所述沥水杆顶部开设有扩孔，且扩孔与气孔连通；所述支撑块靠近扩孔的位置开设有连接槽；所述扩孔内部转动连接有转杆；所述转杆表面固定连接有螺旋状的叶片；所述转杆延伸至连接槽内部的一端固定连接有一组摆条；所述摆条端部固定连接有球珠；所述连接槽内部固定连接有一组拨片；气流在通过扩孔内部时会推动叶片和转杆转动，进而转杆带动摆条转动，使得球珠撞击拨片，进而利用拨片带动支撑块抖动，并传导至试管，促使试管也产生小幅度的振动，加快试管内部水分的滴落，从而进一步提高试管的干燥效率。
一种细胞外泌体的纯化方法，该方法采用上述的细胞外泌体的纯化装置，包括以下步骤：
S1：将试管放置在试管架的放置槽内部，向试管内部加入体液和阳离子多聚物，然后通过电机带动转轴和凸轮转动，使得托块带动试管不断上下运动，对试管内的混合物进行振荡；
S2：将试管架放置于冷藏箱中，3-5℃环境下孵育0.5-1h，然后过滤试管内的混合物，向试管中加入洗脱液进行洗脱，进而加入磁性吸附剂，孵育10-15min后，将电磁铁通电，吸附试管内的磁性物质，去除上清液；
S3：向试管中加入PBS和5％氨水，振荡混匀并孵育5-10min，再次将电磁铁通电，吸附后取出上清液，即得到纯化后的细胞外泌体。
优选的，该方法还包括以下步骤：
S4：对试管进行清洗，然后将清洗好的试管倒扣在沥水杆表面，试管内的水分则向下滴落，从而将试管沥干；
S5：启动电机，促使托块上下运动，将套管内部的空气通过导管挤入气孔内部，使得沥水杆上端喷气，对试管内部进行风干。
本发明的有益效果如下：
1.本发明所述的一种细胞外泌体的纯化方法及装置，通过在试管架上设置电磁铁，在使用时将试管放置于放置槽内部，然后向试管内部添加相关试剂，需要进行磁吸附时，可以将电磁铁通电，进而电磁铁的两端均可以吸附试管内的磁性物质，从而不需要将试管转移到磁分离架上，无需进行频繁的试管转移工作，简化操作步骤，防止将试管打翻，提高细胞外泌体的纯化效率。
2.本发明所述的一种细胞外泌体的纯化方法及装置，将试剂添加进试管内部后，通过电机带动转轴和凸轮转动，进而凸轮通过滚轮向上挤压托块，并在弹簧一的配合作用下，使得托块带动试管不断上下运动，对试管内的试剂进行振荡，提高试剂之间的混合效果，无需手动对试管进行振荡，避免工作人员长期振荡试管而导致腕部劳损。
附图说明
下面结合附图对本发明作进一步说明。
图1是本发明的立体图；
图2是本发明的剖视图；
图3是图2中A处局部放大图；
图4是本发明中托块的立体图；
图5是图4中B处局部放大图；
图6是本发明中试管和沥水杆的剖视图；
图7是图6中C处局部放大图；
图8是本发明的方法流程示意图。
图中：沥水盒1、侧板2、中间板3、限位环4、托块5、放置槽6、试管7、电磁铁8、安装架9、电机10、转轴11、凸轮12、凹槽13、滚轮14、弹簧一15、滑槽16、夹块17、弹簧二18、沥水杆19、沥水孔20、连接孔21、套管22、导柱23、气孔24、导管25、支撑块26、扩孔27、连接槽28、转杆29、叶片30、摆条31、球珠32、拨片33。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
实施例一：
如图1至图5所示，本发明实施例所述的一种细胞外泌体的纯化装置，该纯化装置为试管架，包括沥水盒1；所述沥水盒1两侧固定连接有一对侧板2，且一对侧板2之间固定连接有中间板3；所述中间板3两侧均布有一组限位环4；所述沥水盒1内部设置有托块5；所述托块5上侧均布有一组放置槽6；所述放置槽6内部均放置有试管7，且试管7顶部穿过限位环4内部；所述托块5表面均布有一组电磁铁8，且电磁铁8的两端均朝向试管7；
现有技术在纯化细胞外泌体时需要使用试管架，将试管7放置于试管架上更容易操作，便于试剂的添加，但是在纯化过程中还需要使用到磁分离架对试管7内的磁性物质进行吸附，这就需要将试管7频繁地从试管架与磁分离架之间移动取放，不仅操作繁琐，还容易将试管7打翻；此时本发明通过在试管架上设置电磁铁8，在使用时将试管7放置于放置槽6内部，然后向试管7内部添加相关试剂，需要进行磁吸附时，可以将电磁铁8通电，进而电磁铁8的两端均可以吸附试管7内的磁性物质，从而不需要将试管7转移到磁分离架上，无需进行频繁的试管7转移工作，简化操作步骤，防止将试管7打翻，提高细胞外泌体的纯化效率。
所述托块5滑动连接于沥水盒1内部；所述沥水盒1内部固定连接有安装架9；所述安装架9内部固定连接有电机10；所述电机10的输出端连接有转轴11；所述转轴11表面固定连接有凸轮12；所述托块5下侧开设有凹槽13；所述凹槽13内部转动连接有滚轮14，且滚轮14与凸轮12之间互相贴合；所述托块5与沥水盒1底部之间固定连接有一组弹簧一15；将试剂添加进试管7内部后，通过电机10带动转轴11和凸轮12转动，进而凸轮12通过滚轮14向上挤压托块5，并在弹簧一15的配合作用下，使得托块5带动试管7不断上下运动，对试管7内的试剂进行振荡，提高试剂之间的混合效果，无需手动对试管7进行振荡，避免工作人员长期振荡试管7而导致腕部劳损。
所述放置槽6侧壁表面圆周均布有一组滑槽16；所述滑槽16内部均滑动连接有夹块17；所述夹块17与滑槽16端部之间固定连接有弹簧二18；所述夹块17设置有斜面的一端突出于放置槽6侧壁表面；通过设置多个夹块17和弹簧二18，将试管7放入放置槽6内部时，通过试管7向下挤压夹块17的斜面，将夹块17挤入滑槽16的内部，并将弹簧二18压缩，进而利用弹簧二18的弹力能够使得夹块17将试管7夹紧，提高对试管7的固定程度，防止托块5上下运动的过程中试管7从放置槽6中脱离。
所述中间板3两侧均布有一组倾斜的沥水杆19；所述沥水杆19的直径小于试管7的内径；在纯化工作结束后，需要对试管7进行清洗，通过设置沥水杆19，可以将清洗好的试管7倒扣在沥水杆19表面，使得沥水杆19插入试管7内部，进而试管7内的水分可以向下滴落，便于将试管7沥干。
所述托块5表面均布有一组沥水孔20；所述放置槽6底部开设有连接孔21；所述沥水孔20和连接孔21均贯穿托块5；通过设置沥水孔20和连接孔21，向下滴落的水可以通过沥水孔20和连接孔21进入沥水盒1内部，实现水的收集，防止水滴落至其他位置并造成污染，并且连接孔21还可以防止放置槽6内存在积水。
所述中间板3下侧均布有一组套管22；所述套管22内部均滑动密封连接有导柱23，且导柱23下端与托块5固定连接；所述沥水杆19内部开设有气孔24；所述气孔24与导柱23之间通过导管25互相连通；在沥水的过程中，可以启动电机10，促使托块5上下运动，当托块5向上运动时，能够将导柱23推入套管22内部，并将套管22内部的空气通过导管25挤入气孔24内部，使得沥水杆19上端喷气，对试管7内部进行风干，加快试管7的干燥效率，当托块5向下运动时，能够将导柱23从套管22中拉出，进而套管22内部产生负压，并通过气孔24和导管25重新吸气，以此方式循环。
实施例二：
如图6至图7所示，对比实施例一，其中本发明的另一种实施方式为：所述沥水杆19顶部固定连接有支撑块26；所述支撑块26采用多孔材料制成，且支撑块26与试管7内底部的形状之间互相适配；通过设置支撑块26，将试管7倒扣在沥水杆19表面后，支撑块26能够支撑在试管7与沥水杆19之间，从而将二者分隔开，进而从气孔24喷出的空气可以通过支撑块26内部的多孔结构流动，并对试管7内部进行风干，防止沥水杆19端部与试管7直接接触，而导致气孔24被试管7堵住的问题，从而保证气流的正常流动。
所述支撑块26采用弹性多孔材料制成(可以是海绵)；所述沥水杆19顶部开设有扩孔27，且扩孔27与气孔24连通；所述支撑块26靠近扩孔27的位置开设有连接槽28；所述扩孔27内部转动连接有转杆29；所述转杆29表面固定连接有螺旋状的叶片30；所述转杆29延伸至连接槽28内部的一端固定连接有一组摆条31；所述摆条31端部固定连接有球珠32；所述连接槽28内部固定连接有一组拨片33；气流在通过扩孔27内部时会推动叶片30和转杆29转动，进而转杆29带动摆条31转动，使得球珠32撞击拨片33，进而利用拨片33带动支撑块26抖动，并传导至试管7，促使试管7也产生小幅度的振动，加快试管7内部水分的滴落，从而进一步提高试管7的干燥效率。
如图8所示，一种细胞外泌体的纯化方法，该方法采用上述的细胞外泌体的纯化装置，包括以下步骤：
S1：将试管7放置在试管架的放置槽6内部，向试管7内部加入体液和阳离子多聚物，然后通过电机10带动转轴11和凸轮12转动，使得托块5带动试管7不断上下运动，对试管7内的混合物进行振荡；
S2：将试管架放置于冷藏箱中，3-5℃环境下孵育0.5-1h，然后过滤试管7内的混合物，向试管7中加入洗脱液进行洗脱，进而加入磁性吸附剂，孵育10-15min后，将电磁铁8通电，吸附试管7内的磁性物质，去除上清液；
S3：向试管7中加入PBS和5％氨水，振荡混匀并孵育5-10min，再次将电磁铁8通电，吸附后取出上清液，即得到纯化后的细胞外泌体。
上述阳离子多聚物可以是多聚赖氨酸，洗脱液可以是异硫氰酸胍，磁性吸附剂可以是包裹有二氧化钛的磁珠。
该方法还包括以下步骤：
S4：对试管7进行清洗，然后将清洗好的试管7倒扣在沥水杆19表面，试管7内的水分则向下滴落，从而将试管7沥干；
S5：启动电机10，促使托块5上下运动，将套管22内部的空气通过导管25挤入气孔24内部，使得沥水杆19上端喷气，对试管7内部进行风干。
工作原理：通过在试管架上设置电磁铁8，在使用时将试管7放置于放置槽6内部，然后向试管7内部添加相关试剂，需要进行磁吸附时，可以将电磁铁8通电，进而电磁铁8的两端均可以吸附试管7内的磁性物质，从而不需要将试管7转移到磁分离架上，无需进行频繁的试管7转移工作，简化操作步骤，防止将试管7打翻，提高细胞外泌体的纯化效率；将试剂添加进试管7内部后，通过电机10带动转轴11和凸轮12转动，进而凸轮12通过滚轮14向上挤压托块5，并在弹簧一15的配合作用下，使得托块5带动试管7不断上下运动，对试管7内的试剂进行振荡，提高试剂之间的混合效果，无需手动对试管7进行振荡，避免工作人员长期振荡试管7而导致腕部劳损；通过设置多个夹块17和弹簧二18，将试管7放入放置槽6内部时，通过试管7向下挤压夹块17的斜面，将夹块17挤入滑槽16的内部，并将弹簧二18压缩，进而利用弹簧二18的弹力能够使得夹块17将试管7夹紧，提高对试管7的固定程度，防止托块5上下运动的过程中试管7从放置槽6中脱离；
在纯化工作结束后，需要对试管7进行清洗，通过设置沥水杆19，可以将清洗好的试管7倒扣在沥水杆19表面，使得沥水杆19插入试管7内部，进而试管7内的水分可以向下滴落，便于将试管7沥干；通过设置沥水孔20和连接孔21，向下滴落的水可以通过沥水孔20和连接孔21进入沥水盒1内部，实现水的收集，防止水滴落至其他位置并造成污染，并且连接孔21还可以防止放置槽6内存在积水；在沥水的过程中，可以启动电机10，促使托块5上下运动，当托块5向上运动时，能够将导柱23推入套管22内部，并将套管22内部的空气通过导管25挤入气孔24内部，使得沥水杆19上端喷气，对试管7内部进行风干，加快试管7的干燥效率，当托块5向下运动时，能够将导柱23从套管22中拉出，进而套管22内部产生负压，并通过气孔24和导管25重新吸气，以此方式循环；
通过设置支撑块26，将试管7倒扣在沥水杆19表面后，支撑块26能够支撑在试管7与沥水杆19之间，从而将二者分隔开，进而从气孔24喷出的空气可以通过支撑块26内部的多孔结构流动，并对试管7内部进行风干，防止沥水杆19端部与试管7直接接触，而导致气孔24被试管7堵住的问题，从而保证气流的正常流动；气流在通过扩孔27内部时会推动叶片30和转杆29转动，进而转杆29带动摆条31转动，使得球珠32撞击拨片33，进而利用拨片33带动支撑块26抖动，并传导至试管7，促使试管7也产生小幅度的振动，加快试管7内部水分的滴落，从而进一步提高试管7的干燥效率。
上述前、后、左、右、上、下均以说明书附图中的图1为基准，按照人物观察视角为标准，装置面对观察者的一面定义为前，观察者左侧定义为左，依次类推。
在本发明的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明保护范围的限制。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (10)
1.一种细胞外泌体的纯化装置，该纯化装置为试管架，其特征在于：包括沥水盒(1)；所述沥水盒(1)两侧固定连接有一对侧板(2)，且一对侧板(2)之间固定连接有中间板(3)；所述中间板(3)两侧均布有一组限位环(4)；所述沥水盒(1)内部设置有托块(5)；所述托块(5)上侧均布有一组放置槽(6)；所述放置槽(6)内部均放置有试管(7)，且试管(7)顶部穿过限位环(4)内部；所述托块(5)表面均布有一组电磁铁(8)，且电磁铁(8)的两端均朝向试管(7)。
2.根据权利要求1所述的一种细胞外泌体的纯化装置，其特征在于：所述托块(5)滑动连接于沥水盒(1)内部；所述沥水盒(1)内部固定连接有安装架(9)；所述安装架(9)内部固定连接有电机(10)；所述电机(10)的输出端连接有转轴(11)；所述转轴(11)表面固定连接有凸轮(12)；所述托块(5)下侧开设有凹槽(13)；所述凹槽(13)内部转动连接有滚轮(14)，且滚轮(14)与凸轮(12)之间互相贴合；所述托块(5)与沥水盒(1)底部之间固定连接有一组弹簧一(15)。
3.根据权利要求2所述的一种细胞外泌体的纯化装置，其特征在于：所述放置槽(6)侧壁表面圆周均布有一组滑槽(16)；所述滑槽(16)内部均滑动连接有夹块(17)；所述夹块(17)与滑槽(16)端部之间固定连接有弹簧二(18)；所述夹块(17)设置有斜面的一端突出于放置槽(6)侧壁表面。
4.根据权利要求3所述的一种细胞外泌体的纯化装置，其特征在于：所述中间板(3)两侧均布有一组倾斜的沥水杆(19)；所述沥水杆(19)的直径小于试管(7)的内径。
5.根据权利要求4所述的一种细胞外泌体的纯化装置，其特征在于：所述托块(5)表面均布有一组沥水孔(20)；所述放置槽(6)底部开设有连接孔(21)；所述沥水孔(20)和连接孔(21)均贯穿托块(5)。
6.根据权利要求5所述的一种细胞外泌体的纯化装置，其特征在于：所述中间板(3)下侧均布有一组套管(22)；所述套管(22)内部均滑动密封连接有导柱(23)，且导柱(23)下端与托块(5)固定连接；所述沥水杆(19)内部开设有气孔(24)；所述气孔(24)与导柱(23)之间通过导管(25)互相连通。
7.根据权利要求6所述的一种细胞外泌体的纯化装置，其特征在于：所述沥水杆(19)顶部固定连接有支撑块(26)；所述支撑块(26)采用多孔材料制成，且支撑块(26)与试管(7)内底部的形状之间互相适配。
8.根据权利要求7所述的一种细胞外泌体的纯化装置，其特征在于：所述支撑块(26)采用弹性多孔材料制成；所述沥水杆(19)顶部开设有扩孔(27)，且扩孔(27)与气孔(24)连通；所述支撑块(26)靠近扩孔(27)的位置开设有连接槽(28)；所述扩孔(27)内部转动连接有转杆(29)；所述转杆(29)表面固定连接有螺旋状的叶片(30)；所述转杆(29)延伸至连接槽(28)内部的一端固定连接有一组摆条(31)；所述摆条(31)端部固定连接有球珠(32)；所述连接槽(28)内部固定连接有一组拨片(33)。
9.一种细胞外泌体的纯化方法，该方法采用权利要求8所述的细胞外泌体的纯化装置，其特征在于：包括以下步骤：
S1：将试管(7)放置在试管架的放置槽(6)内部，向试管(7)内部加入体液和阳离子多聚物，然后通过电机(10)带动转轴(11)和凸轮(12)转动，使得托块(5)带动试管(7)不断上下运动，对试管(7)内的混合物进行振荡；
S2：将试管架放置于冷藏箱中，3-5℃环境下孵育0.5-1h，然后过滤试管(7)内的混合物，向试管(7)中加入洗脱液进行洗脱，进而加入磁性吸附剂，孵育10-15min后，将电磁铁(8)通电，吸附试管(7)内的磁性物质，去除上清液；
S3：向试管(7)中加入PBS和5％氨水，振荡混匀并孵育5-10min，再次将电磁铁(8)通电，吸附后取出上清液，即得到纯化后的细胞外泌体。
10.根据权利要求9所述的一种细胞外泌体的纯化方法，其特征在于：该方法还包括以下步骤：
S4：对试管(7)进行清洗，然后将清洗好的试管(7)倒扣在沥水杆(19)表面，试管(7)内的水分则向下滴落，从而将试管(7)沥干；
S5：启动电机(10)，促使托块(5)上下运动，将套管(22)内部的空气通过导管(25)挤入气孔(24)内部，使得沥水杆(19)上端喷气，对试管(7)内部进行风干。
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| CN202311134935.4A CN117143804A (zh) | 2023-09-05 | 2023-09-05 | 一种细胞外泌体的纯化方法及装置 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117683634A (zh) * | 2024-01-31 | 2024-03-12 | 山东格林医学科技有限公司 | 一种糖尿病治疗干细胞培养装置及方法 |
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2023
- 2023-09-05 CN CN202311134935.4A patent/CN117143804A/zh active Pending
Cited By (2)
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| CN117683634B (zh) * | 2024-01-31 | 2024-05-07 | 山东格林医学科技有限公司 | 一种糖尿病治疗干细胞培养装置及方法 |
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