CN116897071A - 生产用于治疗以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒感染的血浆产品的方法 - Google Patents

生产用于治疗以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒感染的血浆产品的方法 Download PDF

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Abstract

一种生产血浆的方法，所述血浆用于治疗受病毒感染影响的人中引起所述病毒感染的病毒，所述病毒感染以促炎细胞因子不受控制地释放为特征，该方法包括以下步骤：将一定量的柠檬酸钠加入管中；将从具有针对病毒的抗体的人供体收集的血液递送到管中；将血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；离心血液以将血液分离成血浆组分和细胞级分；和收集血浆组分。可以将血浆组分施用至感染病毒的患者，该病毒引起以促炎细胞因子不受控制的释放为特征的病毒感染。

Description

生产用于治疗以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒 感染的血浆产品的方法
技术领域
本申请大体上涉及药物，更具体地涉及可用于治疗以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒感染等的方法和组合物。
背景技术
严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)疫情(也称为Covid-19)的爆发在中国和世界范围内迅速蔓延。该病毒引起的并发症和死亡与促炎细胞因子的过度或/和不受控制地释放有关。这种效应被称为“细胞因子风暴”。此前已有报道，细胞因子风暴与组织损伤和严重病毒性流感的不良预后直接相关。严重的细胞因子风暴与促炎细胞因子(包括IL-1)的水平显著升高相关。已经表明，促炎细胞因子IL-1在不同细胞类型(包括远端气道上皮)中驱动MMP-9(基质金属蛋白酶)酶表达的上调及其激活。MMP-9调节急性肺损伤、破坏气道上皮屏障功能并降解多种细胞外基质(ECM)蛋白。最近的研究表明，肺结构细胞中MMP-9缺乏可以保护小鼠免受病毒引起的死亡。MMP的酶活性受到内源抑制剂(TIMP-1、2、3、4)家族的严格控制。
众所周知，TIMP是对细胞生长和存活具有积极作用的分泌蛋白。每种蛋白质在调节MMP酶方面都有独特的作用。例如，TIMP1已被证明比TIMP2更有效地抑制MMP3和MMP9，而TIMP2比TIMP1更有效地抑制MMP2。已经表明促炎细胞因子IL-1在不同细胞类型中驱动MMP酶表达上调和激活。
需要针对COVID-19和引起细胞因子风暴的其他病毒的有效治疗，以及用于治疗以细胞因子风暴为特征的病毒感染的治疗策略。
发明内容
本公开涉及使用天然内源性TIMP和IL-1抑制剂IL-1ra用于MMP9和IL-1抑制的治疗干预，以调节患有引起细胞因子风暴的病毒感染的患者(包括SARS-CoV-2(COVID-19)患者)的炎症过程。
本公开涉及一种包括从供体收集血液的方法。供体可以是已经对病毒免疫的个体，该病毒为例如COVID-19、流感病毒和其他引起细胞因子风暴的病毒。可替代地，供体可以是该方法所针对的患有引起细胞因子风暴的病毒感染的同一患者。在这种情况下，该方法是自体程序。供体也可能是未对引起细胞因子风暴的病毒免疫的个体。优选将收集的血液在约37℃至约38℃下温育约6至约24小时，更优选6至12小时。然后从富集了IL-1ra、TIMP1和TIMP2的温育血液中获得来自供体的血浆。然后可以将该血浆施用至患有以细胞因子风暴为特征的病毒感染(例如COVID-19)的患者，以减轻细胞因子风暴引起的症状。
当供体是已对引起细胞因子风暴的病毒免疫的个体时，来自免疫供体的血浆是免疫血浆。获得的免疫血浆富集了IL-1ra、TIMP1、TIMP2，并且还含有针对引起细胞因子风暴的病毒的抗体。然后可以将免疫血浆施用至患有以细胞因子风暴为特征的病毒感染(例如COVID-19)的患者，以减轻细胞因子风暴引起的症状。
当供体是患有引起细胞因子风暴的病毒的患者时，获得的血浆富集了IL-1ra、TIMP1和TIMP2，然后该血浆被施用至同一患者以减轻细胞因子风暴引起的症状。
根据一个方面，提供了一种生产血浆的方法，所述血浆用于治疗受病毒感染影响的人中引起所述病毒感染的病毒，所述病毒感染以促炎细胞因子不受控制地释放为特征，该方法包括以下步骤：将一定量的柠檬酸钠加入管中；将从具有针对该病毒的抗体的人收集的血液递送到管中；将血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；离心血液以将血液分离成免疫血浆组分和细胞级分；和收集免疫血浆组分。
根据一个方面，提供了治疗感染病毒的患者的方法，该病毒引起以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒感染，该方法包括以下步骤：从具有针对该病毒的抗体的人供体收集血液；将一定量的柠檬酸钠加入管中；将从具有针对该病毒的抗体的人供体收集的血液递送到管中；将血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；离心血液以将血液分离成免疫血浆组分和细胞级分；收集免疫血浆组分；和将免疫血浆施用至患者。
根据另一个方面，提供了一种生产血浆的方法，所述血浆用于治疗受病毒感染影响的患者中引起所述病毒感染的病毒，所述病毒感染以促炎细胞因子不受控制地释放为特征，所述方法包括以下步骤：将一定量的柠檬酸钠加入管中；将从患者收集的血液递送到管中；将血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；离心血液以将血液分离成免疫血浆组分和细胞级分；和收集免疫血浆组分。
根据又另一个方面，提供了一种治疗感染病毒的患者的方法，该病毒引起以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒感染，该方法包括以下步骤：从患者收集血液；将4重量％的量的柠檬酸钠加入管中；将从患者收集的血液递送到管中；将血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；离心血液以将血液分离成免疫血浆组分和细胞级分；收集免疫血浆组分；和将免疫血浆施用至患者。
根据另一个方面，提供了一种生产血浆的方法，所述血浆用于治疗受病毒感染影响的人中引起所述病毒感染的病毒，所述病毒感染以促炎细胞因子不受控制地释放为特征，所述方法包括以下步骤：将一定量的柠檬酸钠加入管中；将从人供体收集的血液递送到管中；将血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；离心血液以将血液分离成血浆组分和细胞级分；和收集血浆组分。
根据另一个方面，提供了一种治疗感染病毒的人患者的方法，该病毒引起以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒感染，该方法包括以下步骤：从人供体收集血液；将一定量的柠檬酸钠加入管中；将从人供体收集的血液递送到管中；将血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；离心血液以将血液分离成血浆组分和细胞级分；收集血浆组分；和将血浆施用至患者。
根据另一个方面，提供了具有富集水平的IL-1ra、TIMP1和TIMP2的组合物用于治疗患有引起细胞因子风暴的病毒的患者的用途。
根据另一个方面，提供了具有富集水平的IL-1ra、TIMP1、TIMP2和治疗有效水平的抗COVID-19IgG的组合物用于治疗患有Covid-19的患者的用途。
根据又另一个方面，提供了包含约1687pg/ml至约3,937pg/ml的IL-1ra、约22,794pg/ml至约51,781pg/ml的TIMP1、约22,029pg/ml至约32,463pg/ml的TIMP2、约171pg/ml至约222pg/ml的IL-1β、约478pg/ml至约583pg/ml的TNFα、约3,227pg/ml至约3,622pg/ml的MMP9、和约378ng/ml至约437ng/ml的抗COVID-19IgG的组合物。
根据又另一个方面，提供了包含约1687pg/ml至约3,937pg/ml的IL-1ra、约22,794pg/ml至约51,781pg/ml的TIMP1、约22,029pg/ml至约32,463pg/ml的TIMP2、和约378ng/ml至约437ng/ml的抗COVID-19IgG的组合物。
根据另一个方面，提供了组合物用于治疗患有引起细胞因子风暴的病毒的患者的用途，该组合物包含约1687pg/ml至约3,937pg/ml的IL-1ra、约22,794pg/ml至约51,781pg/ml的TIMP1、约22,029pg/ml至约32,463pg/ml的TIMP2、约171pg/ml至约222pg/ml的IL-1β、约478pg/ml至约583pg/ml的TNFα、约3,227pg/ml至约3,622pg/ml的MMP9、和约378ng/ml至约437ng/ml的抗COVID-19IgG。
根据另一个方面，提供了组合物用于治疗患有引起细胞因子风暴的病毒的患者的用途，该组合物包含约1687pg/ml至约3,937pg/ml的IL-1ra、约22,794pg/ml至约51,781pg/ml的TIMP1、约22,029pg/ml至约32,463pg/ml的TIMP2、和约378ng/ml至约437ng/ml的抗COVID-19IgG。
根据另一个方面，提供了通过本文所述的方法制备的组合物，其用于治疗患有引起细胞因子风暴的病毒的患者。
附图说明
图1是以pg/ml为单位的IL-1ra浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的12名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中IL-1ra平均水平的比较；
图2a是以pg/ml为单位的TIMP1浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的12名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中TIMP1平均水平的比较；
图2b是以pg/ml为单位的TIMP2浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的12名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中TIMP2平均水平的比较；
图2c是以pg/ml为单位的TIMP1浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的22名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中TIMP1平均水平的比较；
图2d是以pg/ml为单位的TIMP2浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的22名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中TIMP2平均水平的比较；
图3是以pg/ml为单位的IL-1β浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的12名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中IL-1β平均水平的比较；
图4是以pg/ml为单位的TNFα浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的12名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中TNFα平均水平的比较；
图5是以ng/ml为单位的抗COVID-19IgG浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的12名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中抗COVID-19IgG平均水平的比较；
图6是以pg/ml为单位的MMP9浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的12名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中MMP9平均水平的比较；
图7是以pg/ml为单位的IL-1ra浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的22名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中IL-1ra平均水平的比较；
图8是以pg/ml为单位的MMP9浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的22名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中MMP9平均水平的比较；
图9是以pg/ml为单位的IL-1β浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的22名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中IL-1β平均水平的比较；
图10是以pg/ml为单位的TNFα浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的22名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中TNFα平均水平的比较；和
图11是以pg/ml为单位的抗COVID-19IgG浓度与时间的关系图，显示从COVID-19康复的22名健康人供体的血液在37℃下温育后不同时间点供体的血浆中抗COVID-19IgG平均水平的比较。
具体实施方式
本公开涉及一种产生含有抗炎/抗分解代谢组分的无细胞血液产品的方法，基于详细的细胞因子分析，该无细胞血液产品富集IL-1ra(IL-1拮抗剂)、TIMP1和TIMP2(内源性MMP抑制剂)。该方法包括从人供体收集血液的第一步。人供体可以是已对感染的个体中引起细胞因子风暴的病毒产生免疫力的个体。优选将血液收集到含有4重量％的量的柠檬酸的玻璃管中，柠檬酸可以是4重量％柠檬酸钠的形式。优选地，血液与4重量％柠檬酸的比率为约9:1。然后优选将血液在优选约37℃的温度下温育约6小时至约24小时。然后将血液以约4000rpm离心10分钟以将血液分离成上清液组分(血浆)和细胞级分。当血浆是从对引起细胞因子风暴的病毒(如Covid-19)免疫的供体的血液中获得时，血浆是免疫血浆。然后收集上清液组分，优选使用清楚标记的注射器。上清液组分可以在约-70℃下冷冻和/或在液氮中储存长达一年。优选使用清楚标记的注射器将优选约100ml至约200ml的上清液组分收集到优选标有日期和供体姓名的200ml输液袋中。
本公开的血液产品的功效和安全性已通过机构审查委员会(IRB)批准的临床试验进行了评估，该临床试验证明了在膝骨关节炎的治疗中具有稳定的治疗效果以及高安全性。本公开的从供体血液生产血浆的方法提供了一种免疫调节性血液产品，其通过下调IL-1和MMP-9途径来靶向细胞因子风暴，并支持感染引起细胞因子风暴的病毒的患者的免疫系统，具有来自已经从该病毒感染中康复的供体的高中和抗体滴度。可替代地，供体可以是本公开的方法所针对的患有引起细胞因子风暴的病毒的患者。供体也可以是不含有针对引起细胞因子风暴的病毒的抗体的人。
体外数据已经显示，经SARS-CoV-2(COVID-19)免疫的患者血浆含有升高水平的抗分解代谢蛋白TIMP1和TIMP2。分子细胞因子分析表明，应用产生含有抗炎/抗分解代谢组分的无细胞血液产品的方法导致IL-1ra富集，而不影响最终血液产品中的抗COVID-19IgG浓度。
实施例
本公开的血液产品是根据以下程序由从COVID-19中康复的12名健康志愿者人供体制备的：
·从对象身上将100mL至约400mL的血液收集至玻璃管中，该玻璃管标有对象ID；并且含有4重量％柠檬酸，比率为9:1(血液:4重量％柠檬酸)。
·将血液(在先前标记的同一管内)在37℃的温度下温育6小时至24小时。
·将血液以4000rpm离心10分钟，以将血液在先前标记的同一管内分离成上清液组分(血浆)和细胞级分。
·从每个管中收集样本进行血清学分析。
·使用清楚标记的注射器将2.5至3mL血浆/免疫血浆组分收集到标有日期和供体姓名的200ml输液袋中。
血浆组分可以任选地在-70℃下冷冻储存长达一年。
实施例1-IL-1ra水平
测量了从12名康复的COVID-19患者的温育血液样本中获得的血浆中IL-1ra的水平。图1显示了在不同时间点从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体的温育血液中获得的血浆中测得的IL-1ra平均水平。结果显示，在37℃下温育6小时后，IL-1ra开始显著富集，如单因素方差分析(ANOVA)检验所示。图1所示的不同时间点IL-1ra水平的测量结果总结于表1中。
表1-12名人供体在不同时间点测量的IL-1ra平均水平
时间(小时) IL-1ra平均浓度(pg/ml)
0(对照) 365.934
6 1687.02
12 2,597.95
24 3,936.9
根据相同程序，从22名从COVID-19中康复的健康人供体收集了更多数据。22名健康人供体在不同时间点的IL-1ra水平测量结果如图7所示，并总结于表2中。
表2-22名人供体在不同时间点测量的IL-1ra平均水平
时间(小时) IL-1ra平均浓度(pg/ml)
0(对照) 286.187
6 1,783.25
24 3,666.96
22名从COVID-19中康复的健康人供体的结果与从最初测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体获得的结果一致。
实施例2–TIMP1水平和TIMP2水平
测量了从康复的COVID-19患者的温育血液样本中获得的血浆中TIMP1的水平。图2a显示了在不同时间点从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体的温育血液中获得的血浆中测得的TIMP1平均水平。同样，还测量了康复的COVID-19患者的温育血液样本中TIMP2的水平。图2b显示了在不同时间点从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体的温育血液中获得的血浆中测得的TIMP2平均水平。结果表明，从COVID-19中康复的健康供体的血浆含有增加的TIMP1和TIMP2基线浓度，而这些浓度不受从人血液中生产增强的抗炎/抗分解代谢剂的方案的影响。单因素方差分析(ANOVA)检验表明，未暴露于COVID-19个体的平均基线TIMP1浓度为6000pg/ml，而未暴露于COVID-19个体中的平均基线TIMP2浓度为3900pg/ml。
如图2a所示的在不同时间点从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体的温育血液中获得的血浆中测得的TIMP1平均水平总结于表3中。
表3-12名人供体在不同时间点测量的TIMP1平均水平
时间(小时) TIMP1平均浓度(pg/ml)
0(对照) 22,742.505
6 24,669.56149
12 23,800.34754
24 22,793.8982
如图2b所示的在不同时间点从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体的温育血液中获得的血浆中测得的TIMP2平均水平总结于表4中。
表4-12名人供体在不同时间点测量的TIMP2平均水平
时间(小时) TIMP2平均浓度(pg/ml)
0(对照) 23,833.88001
6 25,141.12136
12 24,503.00124
24 22,028.90211
根据相同程序，从22名从COVID-19中康复的健康人供体收集了更多数据。来自这些供体的数据显示，从37℃下温育6小时和24小时的温育血液中获得的血浆中TIMP1浓度出现统计学上显著的增加。尽管图2a所示的来自12名供体的与TIMP1测量相关的数据显示出在37℃下温育血液6小时和24小时不具有统计学上的显著差异，但较大样本量的供体在这方面产生不同结果并不罕见。如图2c所示的在不同时间点从经测试的22名从COVID-19中康复的健康人供体的温育血液中获得的血浆中测得的TIMP1平均水平总结于表5中。
表5-在不同时间点测量的22名供体的TIMP1平均水平
根据相同程序，从22名从COVID-19中康复的健康人供体收集了更多数据。22名健康人供体在不同时间点的TIMP2测量结果如图2d所示并总结于表6中。
表6-22名人供体在不同时间点测量的TIMP2平均水平
时间(小时) TIMP2平均浓度(pg/ml)
0(对照) 24,204.1
6 28,492.6
24 32,462.6
从COVID-19中康复的22名健康人供体的结果与从最初测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体获得的结果一致，因为TIMP2平均水平没有统计学上的显著增加。
实施例3-IL-1β水平
图3显示了在不同时间点从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体生产的血液产品中测得的IL-1β平均水平。结果表明，如单因素方差分析(ANOVA)检验表明的，该程序不会导致从COVID-19康复的健康供体中促炎细胞因子IL-1β浓度上调。不同时间点IL-1β水平的测量结果如图3所示，并总结于表7中。
表7 12名人供体在不同时间点测量的IL-1β平均水平
时间(小时) IL-1β平均浓度(pg/ml)
0(对照) 208.378
6 184.905
12 195.708
24 221.752
根据相同程序，从22名从COVID-19中康复的健康人供体收集了更多数据。22名健康人供体在不同时间点的IL-1β水平测量结果如图9所示，并总结于表8中。
表8-22名人供体在不同时间点测量的IL-1β平均水平
时间(小时) IL-1β平均浓度(pg/ml)
0(对照) 180.076
6 171.322
24 197.404
22名从COVID-19中康复的健康人供体的结果与从最初测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体获得的结果一致。
实施例4-TNFα水平
图4显示了在不同时间点从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体生产的血液产品中测得的TNFα平均水平。结果表明，如单因素方差分析(ANOVA)检验表明的，该程序不会导致从COVID-19康复的健康供体中促炎细胞因子TNFα浓度上调。如图4所示的不同时间点TNFα水平的测量结果总结于表9中。
表9-12名人供体在不同时间点测量的TNFα平均水平
时间(小时) TNFα平均浓度(pg/ml)
0(对照) 525.034
6 579.295
12 582.749
24 529.142
根据相同程序，从22名从COVID-19中康复的健康人供体收集了更多数据。22名健康人供体在不同时间点的TNFα水平测量结果如图10所示，并总结于表10中。
表10-22名人供体在不同时间点测量的TNFα平均水平
时间(小时) TNFα平均浓度(pg/ml)
0(对照) 477.759
6 515.274
24 552.886
22名从COVID-19中康复的健康人供体的结果与从最初测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体获得的结果一致。
实施例5-抗COVID-19IgG水平
图5显示了在0小时和6小时从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体生产的血液产品中测得的抗COVID-19IgG平均水平。结果表明，从SARS-CoV-2(COVID-19)康复的供体患者生产血液产品的程序不会下调抗COVID-19IgG浓度。图5所示的不同时间点抗COVID-19IgG水平的测量结果总结于表11中。
表11 12名人供体在不同时间点测量的抗COVID-19IgG平均水平
时间(小时) 抗COVID-19IgG平均浓度(ng/ml)
0(对照) 266.262
6 377.563
根据相同程序，从22名从COVID-19中康复的健康人供体收集了更多数据。22名健康人供体在不同时间点的抗COVID-19IgG水平的测量结果如图11所示，并总结于表12中。
表12-22名人供体在不同时间点测量的抗COVID-19 IgG平均水平
时间(小时) 抗COVID-19IgG平均浓度(ng/ml)
0(对照) 351.922
6 436.961
22名从COVID-19中康复的健康人供体的结果与从最初测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体获得的结果一致。
实施例6-MMP9水平
测量了从12名康复的COVID-19患者的温育血液样本中获得的血浆中MMP9的水平。图6显示了在不同时间点从经测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体的温育血液中获得的血浆中测得的MMP9平均水平。结果表明，如单因素方差分析(ANOVA)检验表明的，该程序不会导致从COVID-19康复的健康供体中促炎细胞因子MMP9浓度上调。如图6所示的不同时间点MMP9水平的测量结果总结于表13中。
表13-12名人供体在不同时间点测量的MMP9平均水平
时间(小时) MMP9浓度(pg/ml)
0(对照) 3,280.34
6 3,449.87
12 3,310.67
24 3,506.69
根据相同程序，从22名从COVID-19中康复的健康人供体收集了更多数据。22名健康人供体在不同时间点的MMP9水平的测量结果如图8所示，并总结于表14中。
表14-22名人供体在不同时间点测量的MMP9平均水平
时间(小时) MMP9平均浓度(pg/ml)
0(对照) 3,226.71
6 3,448.65
24 3,622.36
22名从COVID-19中康复的健康人供体的结果与从最初测试的12名从COVID-19中康复的健康人供体获得的结果一致。
结论
从COVID-19中康复的供体患者的温育血液是抗炎/抗分解代谢剂和再生剂的来源。温育6小时后，COVID-19(SARS-CoV-2)免疫患者血浆含有升高水平的抗分解代谢蛋白TIMP1、TIMP2和抗炎IL-1ra。应用该产生含有抗炎/抗分解代谢组分的无细胞血液产品的方法，导致IL-1ra富集，而促炎性TNFα、IL-1β和MMP9没有上调。应用该产生含有抗炎/抗分解代谢组分的无细胞血液产品的方法不会下调抗COVID-19IgG浓度。
最初的12名供体和另外22名供体的体外结果表明，通过将免疫血浆施用至患有COVID-19或其他引起细胞因子风暴的病毒感染的患者，从COVID-19免疫患者产生免疫血浆可有效治疗COVID-19诱导的细胞因子风暴。
尽管已经参考说明性实施方式描述了本发明，但是应当理解，本发明不限于这些精确的实施方式。在不脱离本发明的范围的情况下，可以对上述本发明的特定实施方式进行多种修改、变化和调整。权利要求的范围不应受到示例中阐述的优选实施方式的限制，而应给予与整个说明书一致的最广泛的解释。

Claims (24)

1.一种生产血浆的方法，所述血浆用于治疗受病毒感染影响的人中引起所述病毒感染的病毒，所述病毒感染以促炎细胞因子不受控制地释放为特征，所述方法包括以下步骤：
将一定量的柠檬酸钠加入管中；
将从具有针对所述病毒的抗体的人收集的血液递送到所述管中；
将所述血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；
离心所述血液以将所述血液分离成免疫血浆组分和细胞级分；和
收集所述免疫血浆组分。
2.根据权利要求1所述的方法，其中将所述血液温育约6小时至约12小时。
3.根据权利要求1所述的方法，其中将所述血液温育约6小时。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述柠檬酸钠是4重量％的柠檬酸钠，血液与4重量％的柠檬酸钠的比率为9:1。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述病毒是COVID-19。
6.一种治疗感染病毒的患者的方法，所述病毒引起以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒感染，所述方法包括以下步骤：
从具有针对所述病毒的抗体的人供体收集血液；
将一定量的柠檬酸钠加入管中；
将从具有针对所述病毒的抗体的人供体收集的所述血液递送到所述管中；
将所述血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；
离心所述血液以将所述血液分离成免疫血浆组分和细胞级分；
收集所述免疫血浆组分；和
将所述免疫血浆施用至所述患者。
7.根据权利要求6所述的方法，其中将所述血液温育约6小时至约12小时。
8.根据权利要求6所述的方法，其中将所述血液温育约6小时。
9.根据权利要求6所述的方法，其中所述柠檬酸钠是4重量％的柠檬酸钠。
10.根据权利要求9所述的方法，其中将收集的血液以9:1的血液与4重量％柠檬酸钠的比率递送到所述管中。
11.一种生产血浆的方法，所述血浆用于治疗受病毒感染影响的患者中引起所述病毒感染的病毒，所述病毒感染以促炎细胞因子不受控制地释放为特征，所述方法包括以下步骤：
将一定量的柠檬酸钠加入管中；
将从所述患者收集的血液递送到所述管中；
将所述血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；
离心所述血液以将所述血液分离成免疫血浆组分和细胞级分；和
收集所述免疫血浆组分。
12.根据权利要求11所述的方法，其中将所述血液温育约6小时至约12小时。
13.根据权利要求11所述的方法，其中将所述血液温育约6小时。
14.根据权利要求11所述的方法，其中所述柠檬酸钠是4重量％的柠檬酸钠。
15.根据权利要求14所述的方法，其中将收集的血液以9:1的血液与4重量％柠檬酸钠的比率递送到所述管中。
16.一种治疗感染病毒的患者的方法，所述病毒引起以促炎细胞因子不受控制地释放为特征的病毒感染，所述方法包括以下步骤：
从所述患者收集血液；
将4重量％的量的柠檬酸钠加入管中；
将从所述患者收集的所述血液递送到所述管中；
将所述血液在约37℃的温度下温育约6小时至约24小时；
离心所述血液以将所述血液分离成免疫血浆组分和细胞级分；
收集所述免疫血浆组分；和
将所述免疫血浆施用至所述患者。
17.一种组合物，包含约1687pg/ml至约3,937pg/ml的IL-1ra、约22,794pg/ml至约51,781pg/ml的TIMP1、约22,029pg/ml至约32,463pg/ml的TIMP2、约171pg/ml至约222pg/ml的IL-1β、约478pg/ml至约583pg/ml的TNFα、约3,227pg/ml至约3,622pg/ml的MMP9、和约378ng/ml至约437ng/ml的抗COVID-19IgG。
18.根据权利要求17的组合物用于治疗患有引起细胞因子风暴的病毒的患者的用途。
19.根据权利要求18所述的用途，其中所述病毒是COVID-19。
20.一种组合物，通过根据权利要求1至16中任一项所述的方法产生。
21.根据权利要求20所述的组合物用于治疗患有引起细胞因子风暴的病毒的患者的用途。
22.根据权利要求21所述的用途，其中所述病毒是COVID-19。
23.具有富集水平的IL-1ra、TIMP1和TIMP2的组合物用于治疗患有引起细胞因子风暴的病毒的患者的用途。
24.具有富集水平的IL-1ra、TIMP1、TIMP2和治疗有效水平的抗COVID-19IgG的组合物用于治疗患有Covid-19的患者的用途。
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