CN116801983A - 具有干试剂组合物的容器及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
提供了包含一种或更多种干试剂组合物的容器。主题容器的各方面可以包括：容器底部，其限定了第一容积并且包含定位在其内表面上的第一干试剂组合物；以及容器壁部，其在将容器底部连接到容器壁部的密封附接区域处附接到所述容器底部。还提供了制造和使用所述容器的方法以及包括所述容器的套件。
Description
相关申请的交叉引用
根据U.S.C.第35卷第119(e)节，本申请要求于2021年2月1日提交的序列号为63/144,185的美国临时专利申请的优先权，该申请的公开内容通过引用整体并入本文。
背景技术
用于确定生物样品流体中分析物的存在和浓度的测定通常依赖于可检测标记与目标分析物的特异性结合。可检测标记可以是可通过肉眼可视化或可通过光谱(例如，荧光或紫外-可见光谱)检测的标记物。典型地，荧光染料可以用作可检测标记，其中，荧光染料包含特定的荧色物。荧光染料可能具有某些特性，例如，其吸收光谱，其在便于激发的波长下的消光系数，其发射光谱和其量子效率。量子效率是为每个吸收的光子发射的光子数。
多重测定允许在单次测定中同时检测多种分析物。对于免疫测定，多重测定涉及抗体混合物(cocktail)，每种抗体都用不同的染料标记。每种抗体都与样品中的特定分析物或抗原结合。这样，可基于不同的染料来区分和定量不同的分析物或抗原。
为了方便起见，多重测定试剂可以作为单独的结合分子(例如抗体)的预混混合物而提供。混合物中可能包含其他反应成分，例如，缓冲液、盐、表面活性剂等。最方便的是包含所有必要成分的混合物(单一测定试剂)。在这种情况下，只需将样品添加到含有混合物的反应器皿中即可进行测定。
提供稳定的测定试剂、特别是在室温下稳定的试剂是很方便的。这使得试剂的运输和储存无需冷藏。这对于在资源(包括电力)可能受限的农村地区进行的测定尤为重要。为此，可以通过干燥试剂的水溶液或通过冻干来提供稳定的试剂。但是，一些标记试剂存在问题。如果这些试剂彼此物理接触，就会发生交联。它们在液体溶液中重新悬浮后仍保持交联，使得标记不再与单个抗体相关联，从而导致错误的结果。例如，在其中通过仅使用一种波长进行激发、使用多种聚合染料来产生多个(例如，10个或更多个)荧光通道的流式细胞术领域中，这可能尤其成问题。然而，这些聚合染料的化学性质阻碍了多种染料在汇集混合物中的储存。已经观察到聚合物实体在溶液中彼此结合。这导致了现实中不可能存在的错误或异常细胞群。
发明内容
提供了包括一种或更多种干试剂组合物的容器。主题容器的各方面可以包括：容器底部，其限定有第一容积并且包括定位在其内表面上的第一干试剂组合物；以及容器壁部，该容器壁部在将容器底部与容器壁部连接的密封附接区域处附接至容器底部。还提供了制造和使用所述容器的方法以及包括所述容器的套件。
附图说明
图1提供了根据本发明的一种实施例的FACS管的两个部分的示例性模型，所述两个部分可以被结合以形成包含干燥的高参数流式细胞术组合(high parameter flowcytometry panel)的液密圆形体的FACS管。
图2提供了根据本发明的一种实施例的将管底部与管颈部组合以形成FACS管的示例性方式的模型。
图3提供了根据本发明的一种实施例的用于制造多个容器的示例性概念。
图4提供了根据本发明的一种实施例，在组装完整的FACS管之前将试剂分配到缩短的管或管底部中的方法的实施例。
图5提供了根据本发明的一种实施例的用于演示5ml的FACS管中可容纳多少100nl试剂分配的计算。
图6提供了根据本发明的一种实施例的管底部的一种实施例，该管底部具有定位在其内表面上的试剂组合物。
图7提供了根据本发明的一种实施例的含有液体的组装好的FACS管的图片。
具体实施方式
提供了包含一种或更多种干试剂组合物的容器。主题容器的各方面可以包括：限定第一容积并且包含位于其内表面上的第一干试剂组合物的容器底部；以及容器壁部，该容器壁部在将容器底部与容器壁部连接的密封附接区域处附接到容器底部。还提供了制造和使用所述容器的方法以及包括所述容器的套件。
在更详细地描述本发明之前，应当理解，本发明不限于所描述的特定实施例，因为这样的实施例当然可以变化。还应当理解，本文中使用的术语仅出于描述特定实施例的目的，而不意在进行限制，因为本发明的范围将仅由所附权利要求限制。
在提供数值范围的情况下，应理解的是，除非上下文另有明确说明，否则，介于该范围的上限和下限之间的每个中间值(到下限的单位的十分之一)以及在所述范围中的任何其他所述值或中间值均包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可以独立地包括在该较小范围内，并且也包括在本发明内，在所述范围内可能存在任何特别的排除的极限。在所述范围包括所述极限中的一个或两个的情况下，本发明还包括排除那些所包括的极限中的一个或两个的范围。
本文中呈现了某些范围，数值之前带有术语“约”。术语“约”在本文中用于为其后的确切数字以及与该术语后的数字接近或近似的数字提供文字支持。在确定数字是否接近或近似于具体列举的数字时，该接近或近似的未列举数字可以是在给出该数字的上下文中提供与具体陈述的数字基本等同的数字。
除非另有限定，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。尽管类似于或等同于本文描述的那些方法和材料的任何方法和材料也能够用于本发明的实践或测试中，但是现在描述的是代表性的示例性方法和材料。
在本说明书中提及的所有出版物和专利均通过引用并入本文(如同每个单独的出版物或专利均被具体地和单独地表明为通过引用并入那样)，并且在本说明书中被通过引用而并入，以公开和描述使得所述的出版物被相关联地提及的方法和/或材料。提及任何出版物均是为了其在申请日之前的公开内容，但是不应被解释为承认本发明无权凭借在先发明而先于此出版物。此外，所提供的出版物的日期可能与实际出版日期有所不同，该实际出版日期可能需要单独确认。
应注意的是，如本文和所附权利要求书中所使用的，单数形式“一(a)”、“一(an)”和“所述”包括复数的所指对象，除非上下文另有明确说明。还应注意的是，权利要求可能被撰写成排除任何可选要素。如此，该陈述意在用作与权利要求要素的叙述结合使用诸如“只”、“仅”等排他性术语，或使用“否定性”限制的前提基础。
对于本领域技术人员而言，在阅读本公开内容时将明显的是，本文描述和示出的实施例中的每个具有离散的部件和特征，所述部件和特征可以容易地与其他若干实施例中的任何一个的特征分离或组合在一起，而不脱离本发明的范围或精神。所陈述的任何的方法都能够按照所陈述的事件的顺序或在逻辑上可行的任何其他顺序进行。
尽管为了语法上的流畅性以及功能说明，已经对系统和方法进行了描述或者将要进行描述，但应明确地理解的是，除非根据35U.S.C.§112进行了明确的阐述，否则权利要求不应被解释为以任何方式必然地受到构建的“装置”或“步骤”限定内容的限制，而应按照司法等同原则被赋予权利要求所提供的限定内容的含义和等同形式的全部范围，并且在权利要求明确地根据35U.S.C.§112进行阐述的情况下，应按照在35U.S.C.§112被赋予全部法定等同形式。
如上面概括的，提供了包括一种或更多种干试剂组合物的容器。在进一步描述本发明的各种实施例时，首先更详细地描述主题容器。接下来，描述容器的制造方法。另外，还提供了主题容器的使用方法以及包括主题容器的套件。
容器
本公开的各方面包括容器。在某些实施例中，容器可用于测定(例如，诸如生物样品的液体样品的测定)，例如，用于测定样品中一种或更多种分析物的有无。根据本公开的某些实施例的容器包括容器底部和容器壁部，该容器底部限定了第一容积，并且包括位于其内表面上的第一干试剂组合物，该容器壁部在将容器底部与容器壁部连接的密封附接区域处附接到容器底部。
容器可以是可与液体样品和/或可能与容器接触的试剂或分析物相容的任何方便的容器。例如，容器可以是被配置为容纳液体样品的液体相容容器。在一些情况下，液体样品可以是含水液体样品，并且在这些情况下，容器可以与含水样品相容。“相容(compatible)”是指容器(例如，制成容器的材料)关于与容器接触的液体和/或试剂或分析物基本上是惰性的(例如，不与其显著发生反应)。
容器可以被配置为保持一定体积的流体(例如，气体或液体)。在某些实施例中，容器被配置为液体容器。例如，液体容器可以被配置为保持一定体积的液体。液体容器的尺寸可以取决于要保持在液体容器中的液体的体积。例如，液体容器可以被配置为保持范围从0.1nl到1000ml的体积(例如，液体的体积)，例如，从0.1ml至900ml，或0.1ml至800ml，或0.1ml至700ml，或0.1ml至600ml，或0.1ml至500ml，或0.1ml至400ml，或0.1ml至300ml，或0.1ml至200ml，或0.1ml至100ml，或0.1ml至50ml，或0.1ml至25ml，或0.1ml至10ml，或0.1ml至5ml，或0.1ml至1ml，或0.1ml至0.5ml。在某些情况下，液体容器被配置为保持范围从0.1ml至200ml的体积(例如，液体的体积)，例如，0.5ml至100ml，例如，1.0ml至50ml。
容器(例如完全组装好的容器)可以包括彼此联接(例如，连接或附接)的单独的部分。在一些情况下，容器包括附接在一起以形成容器的容器底部和容器壁部。容器底部和容器壁部可以以这样的方式附接：使得当完全组装好的容器保持直立时，容器底部形成容器的封闭底端，并且容器壁部形成从容器底部升起的容器壁。容器的容器壁部可以形成用于接收样品的开口，其中，该开口存在于容器的与容器的封闭底端相对的端部处。
容器底部和容器壁部可以通过任何合适的方式附接。在一些情况下，容器底部和容器壁部永久地(即，不可逆地)彼此附接。换句话说，容器底部不可逆地附接到容器壁部上。在一些情况下，容器壁部和容器底部被压配合、卡扣配合或螺纹连接在一起。在一些情况下，容器壁部和容器底部彼此溶剂结合、粘合剂结合(例如，胶粘剂结合)或焊接(例如，摩擦焊接或超声波焊接)。
容器壁部可在将容器底部与容器壁部连接的密封附接区域处附接到容器底部。底部和壁部之间的附接或连接区域中的密封附接区域被构造成防止流体(例如液体)从容器的内部流到外部。亦即，密封附接区域可以基本上防止(如果不是完全抑制的话)容器的内容物(例如，液体容器内的液体)在液体密封附接区域处离开容器(使得它可以被称为液体密封附接区域，因为它是用作密封件以防止液体通过的附接区域)。例如，密封附接区域可以包括在容器底部与容器壁部之间的界面处的防水密封件。密封附接区域可以包括指示容器底部与容器壁部之间的界面的连接线。在一些实施例中，可以在密封附接区域中使用密封件或垫圈。例如，连接线可以指示容器底部和容器壁部交汇并彼此附接的位置。在一些情况下，连接线围绕或横跨容器的横截面的周边延伸。在一些情况下，连接线围绕或横跨容器的横截面的周边的一部分延伸。连接线可以具有直线和曲线的任何合适的组合。在一些情况下，连接线是直线。
底部可以包括封闭端和从封闭端升起的壁。容器底部可以具有内表面和外表面。容器底部的内表面可以是容器底部的面向容器底部的内部的表面。一旦容器组装好，该内表面可以与容器的内容物接触。如下所述，一种或更多种干试剂组合物可以定位在容器底部的内表面上。容器底部的外表面是容器底部的背对容器底部的内部的表面。一旦容器组装好，外表面就不会接触容器的内容物。在一些实施例中，可以给内表面施加涂层以改变材料特性，改善分配粘附和/或分离。根据需要，可以采用能够赋予这种功能的任何方便类型的涂层。在一些情况下，容器底部包括管或小瓶的底部封闭端，包括例如管或小瓶的圆形封闭端。封闭端和从其升起的壁可以具有任何合适的横截面形状，包括例如直线横截面形状(例如，正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)，曲线横截面形状(例如圆形、椭圆形)，以及不规则形状(例如抛物线形状)。
容器底部可以具有任何合适的尺寸。在一些情况下，例如0.1至3cm并且包括1.1至2cm。在一些情况下，容器底部具有范围从0.1至15cm(例如0.1至3cm且包括1.0至2cm)的宽度(例如直径)。在一些情况下，由容器底部限定的第一容积的范围从0.01至1000ml，例如0.01至50ml并且包括0.1至0.6ml。
容器壁部可以包括细长构件，该细长构件具有在一端处连接到容器底部的壁(如上所述)以及在容器底部的远侧的开口顶端。在一些情况下，容器壁部被构造为管或小瓶的颈部。细长构件可以具有任何合适的横截面形状，包括例如直线横截面形状(例如正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)，曲线横截面形状(例如圆形、椭圆形等)，以及不规则形状(例如抛物线形状)。容器壁部可以具有任何合适的尺寸。在一些情况下，容器壁部的高度(即，延伸了细长构件的从连接到容器底部的端部到开口顶端的长度的尺寸)在0.5至100cm的范围内，例如，0.5至15cm并且包括3至8cm。在一些情况下，容器壁部的宽度(例如直径)在0.1至15cm范围内，例如，0.1至3cm并且包括1.0至2cm，其中，在一些情况下，容器壁部的宽度尺寸与容器底部的宽度尺寸相匹配。在一些情况下，容器壁部限定0.5至1000ml的范围内的容积，例如，0.5至20ml并且包括3至8ml。
完全组装好的容器(即，由例如如上所述的彼此附接的容器底部和容器壁部构成的容器)的形状可以变化并且可以取决于容器的用途。例如，如文中所述，容器可以用于测定，例如液体样品(例如，生物样品)的测定。在这些情况下，容器可以被配置为具有与测定和/或用于执行测定的方法或其他装置相容的形状。在一些实施例中，容器可以应用于血液采集。例如，容器可以被配置为具有用于执行测定的典型实验室器具的形状或与用于执行测定的其他装置相容的形状。如上所述，容器可以被配置为液体容器。在这些实施例中，液体容器可以是小瓶或试管。在某些情况下，液体容器是小瓶。在某些情况下，液体容器是试管。如上所述，液体容器可以被配置为保持一定体积(例如，一定体积的液体)。在液体容器是小瓶或试管的实施例中，液体容器可以被配置为保持范围为从1*10^-7ml至1000ml的体积(例如，液体的体积)，例如，0.5ml至900ml，或0.5ml至800ml，或0.5ml至700ml，或0.5ml至600ml，或0.5ml至500ml，或0.5ml至400ml，或0.5ml至300ml，或0.5ml至200ml，或0.5ml至100ml，或0.5ml至50ml，或0.5ml至25ml，或0.5ml至10ml，或0.5ml至5ml，或1ml至5ml。在某些情况下，小瓶或试管被配置为保持范围为0.5ml至5ml的体积(例如，液体的体积)。
如上所述，容器的实施例可以与与容器接触的液体样品和/或试剂或分析物相容。合适的容器材料的示例包括但不限于玻璃和塑料。例如，容器可以由玻璃组成，例如但不限于硅酸盐玻璃、硼硅酸盐玻璃、硼硅酸钠玻璃(例如PYREXTM)、熔凝石英玻璃、熔融石英玻璃等。合适的容器材料的其他示例包括塑料，例如但不限于聚苯乙烯、聚丙烯、聚甲基戊烯、聚四氟乙烯(PTFE)、全氟醚(PFE)、氟化乙烯丙烯(FEP)、全氟烷氧基烷烃(PFA)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚乙烯(PE)、聚醚醚酮(PEEK)等。
在一些实施例中，如上所述，容器被配置为保持一定体积的流体(例如，气体或液体)。在一些情况下，容器被配置用于保持一定体积的液体(例如，液体容器)。在容器被配置为液体容器的一些实施例中，液体容器可以被密封。亦即，液体容器可以包括基本上防止液体容器的内容物(例如，液体容器内的液体)离开液体容器的密封件。液体容器的密封件还可以基本上防止其他物质进入液体容器。例如，密封件可以是基本上防止液体进入或离开容器的水密密封件，或者可以是基本上防止气体进入或离开容器的气密密封件。在一些情况下，密封件是可移除的或可破坏的密封件，使得液体容器的内容物在需要时(例如，如果希望去除液体容器的一部分内容物)可以暴露于周围环境。在一些情况下，密封件由弹性材料制成以提供用于将样品保留在容器中的屏障(例如，水密和/或气密密封)。密封件的具体类型包括但不限于膜(例如聚合物膜)、罩帽等，这取决于容器的类型。用于密封件的合适的材料包括例如橡胶或聚合物密封件，例如但不限于硅橡胶、天然橡胶、苯乙烯丁二烯橡胶、乙烯-丙烯共聚物、聚氯丁二烯、聚丙烯酸酯、聚丁二烯、聚氨酯、苯乙烯丁二烯等，以及它们的组合。例如，在某些实施例中，密封件是可由针、注射器或插管刺穿的隔膜。密封件还可以提供对容器中的样品的方便取用，以及覆盖容器开口的保护屏障。在一些情况下，密封件是可移除的密封件，例如螺纹或卡扣式罩帽或可应用于容器开口的其他合适的密封元件。例如，可以在将样品添加到容器之前或之后将螺纹罩帽螺接到开口上。
如上所述，容器可以被配置为保持一定体积的流体(例如，气体或液体)。在一些情况下，容器(例如，液体容器)具有内表面和外表面。在这些实施例中，容器的内表面是容器(例如，容器)的面向容器内部的表面。内表面可以与容器的内容物接触。因此，容器可以包括容器的内表面，例如液体容器的内表面。容器的外表面是容器的背对容器内部的表面。外表面不接触容器的内容物。因此，容器可以包括容器的外表面，例如，液体容器的外表面。
如上所述，容器，例如容器底部，可以包括干试剂组合物。在某些实施例中，干试剂组合物定位在容器的表面(例如，内表面)上。在一些情况下，干试剂组合物位于容器底部的内表面上。容器可以包含位于容器表面(例如容器底部的内表面)上的一种或更多种干试剂组合物(例如，染料组合物)，例如，2种或更多种干试剂组合物，或位于容器底部的内表面上的3种或更多种、或4种或更多种、或5种或更多种、或6种或更多种、或7种或更多种、或8种或更多种、或9种或更多种、或10种或更多种、或11种或更多种、或12种或更多种、或13种或更多种、或14种或更多种、或15种或更多种、或16种或更多种、或17种或更多种、或18种或更多种、或19种或更多种、或20种或更多种、或25种或更多种、或30种或更多种、或35种或更多种、或40种或更多，或45种或更多种、或50种或更多种干试剂组合物。在一些实施例中，容器包括位于内表面上的2至50种干试剂组合物，例如位于内表面上的2至40种、或2至30种、或2至20种、或2至15种、或2至10种、或2至7种、或2至5种干试剂组合物。例如，容器可以包括位于容器底部的内表面上的2种、或3种、或4种、或5种、或6种、或7种、或8种、或9种、或10种、或11种、或12种、或13种、或14种、或15种、或16种、或17种、或18种、或19种、或20种干试剂组合物。在某些情况下，容器包括位于容器底部的内表面上的2种干试剂组合物。在某些情况下，容器包括定位在容器底部的内表面上的5种干试剂组合物。在某些情况下，容器包括位于容器底部的内表面上的7种干试剂组合物。在某些情况下，容器包括位于容器底部的内表面上的10种干试剂组合物。在某些情况下，容器包括位于容器底部的内表面上的15种干试剂组合物。
如上所述，容器可以包括相对于容器的表面(例如，容器底部的内表面)定位的两种或更多种干试剂组合物。在一些情况下，容器底部可以包括位于其内表面上的第二干试剂组合物。在一些情况下，第一和第二(例如两种或更多种)干试剂组合物附着至容器底部的内表面。附着是指干试剂组合物与它们所处的内表面的位置稳定地关联，使得当它们在处于干燥状态时不会从它们所处的内表面的位置移动。重构后，干试剂组合物的试剂(例如染料)从它们所处的表面位置脱离，使得它们存在于用于重构干试剂组合物的液体中。干试剂组合物可以定位在容器底部的内表面上的不同位置。例如，第一和第二干试剂组合物可以不同地定位在容器底部的内表面上。“不同的位置”或“不同地定位”是指干试剂组合物设置在与另一干试剂组合物的位置不同的位置处。干试剂组合物的位置可以指干试剂组合物在容器表面上的位置，和/或可以指干试剂组合物相对于容器表面的位置。在一些情况下，干试剂组合物占据限定体积的空间。例如，干试剂组合物可以占据容器表面上的一定体积的空间。不同地定位的干试剂组合物可以占据与另一种干试剂组合物所占据的空间体积不明显重合或重叠的空间体积，其中在一些情况下，它与另一种干试剂组合物所占据的空间体积完全不重合或重叠。干试剂组合物不同地定位的实施例可以提供每个干试剂组合物之间的相互作用(例如，染料-染料相互作用)的最小化。
换句话说，不同地定位的干试剂组合物不与另一干试剂组合物(例如，聚合染料组合物)明显地混合在一起，例如，不同地定位的干试剂组合物的任何部分基本上不会与另一干试剂组合物(例如，聚合染料组合物)的一部分混合。在一些情况下，不同地定位的干试剂组合物不与另一干试剂组合物(例如，聚合染料组合物)混合在一起，例如，不同地定位的干试剂组合物的任何部分都不与另一干试剂组合物(例如，聚合染料组合物)的一部分混合。在某些实施例中，不同地定位的干试剂组合物包括单一试剂。例如，不同地定位的干试剂组合物可以基本上由单一试剂组成并且不包括显著量的另一种试剂。不同地定位的干试剂组合物可以包含相对于干试剂组合物中可能存在的任何其他试剂大幅超过的试剂，例如，相对于干试剂组合物中可能存在的任何其他试剂，诸如75wt％或更多，例如，80wt％或更多、或者85wt％或更多、或90wt％或更多、或95wt％或更多、或97wt％或更多、或99wt％或更多、或100wt％的试剂。在某些实施例中，不同地定位的干试剂组合物包含单一染料。例如，不同地定位的干试剂组合物可以基本上由单一染料组成并且不包含显著量的另一种染料。不同地定位的干试剂组合物可以包含相对于干试剂组合物中可能存在的任何其他染料大幅超过的染料，例如，相对于干试剂组合物中可能存在的任何其他染料，诸如75wt％或更多，例如，80wt％或更多、或85wt％或更多、或90wt％或更多、或95wt％或更多、或97wt％或更多、或99wt％或更多、或100wt％的染料。在一些情况下，干试剂组合物包含两种或更多种试剂。在一些情况下，第一和/或第二干试剂组合物包含两种或更多种试剂，包括例如三种或更多种试剂、四种或更多种试剂、五种或更多种试剂、六种或更多种试剂、七种或更多种试剂、八种或更多种试剂、九种或更多种试剂、或十种或更多种试剂。在一些情况下，干试剂组合物包含两种或更多种染料。在一些情况下，第一和/或第二干试剂组合物包含两种或更多种染料，包括例如三种或更多种染料、四种或更多种染料、五种或更多种染料、六种或更多种染料、七种或更多种染料、八种或更多种染料、九种或更多种染料、或十种或更多种染料。
在一些情况下，不同地定位的干试剂组合物在容器表面上的不同位置处彼此间隔开。与另一种干试剂组合物间隔开的干试剂组合物可以与相邻的干试剂组合物物理分离。例如，不同地定位的干试剂组合物可以定位在容器表面上单独的位置处，使得干试剂组合物的边缘与相邻的干试剂组合物的边缘之间存在一定距离。在一些实施例中，容器表面上干试剂组合物的单独位置之间的距离为0.1mm或更大，例如，0.5mm或更大，或1mm或更大，或2mm或更大，或3mm或更大，或4mm或更大，或5mm或更大，或6mm或更大，或7mm或更大，或8mm或更大，或9mm或更大，或10mm或更大，或12mm或更大，或14mm或更大，或16mm或更大，或18mm或更大，或20mm或更大，或25mm或更大，或30mm或更大，或35mm或更大，或40mm或更大，或50mm或更大，或60mm或更大，或70mm或更大，或80mm或更大，或90mm或更大，或100mm或更大，或110mm或更大，或120mm或更大，或130mm或更大，或140mm或更大，或150mm或更大，或160mm或更大，或170mm或更大，或180mm或更大，或190mm或更大，或200mm或更大。例如，容器表面上干试剂组合物的单独位置之间的距离可以在0.1mm至200mm的范围内，例如，0.1mm至190mm，或0.1mm至180mm，或0.1mm至170mm，或0.1mm至160mm，或0.1mm至150mm，或0.1mm至140mm，或0.1mm至130mm，或0.1mm至120mm，或0.1mm至110mm，或0.1mm至100mm，或0.1mm至90mm，或0.1mm至80mm，或0.1mm至70mm，或0.1mm至60mm，或0.1mm至50mm，或0.1mm至40mm，或0.1mm至30mm，或0.1mm至20mm，或0.1mm至10mm，或0.1mm至9mm，或0.1mm至8mm，或0.1mm至7mm，或0.1mm至6mm，或0.1mm至5mm，或0.1mm至4mm，或0.1mm至3mm，或0.1mm至2mm，或0.1mm至1mm，或0.1mm至0.5mm。在某些情况下，容器表面上干试剂组合物的单独位置之间的距离在0.1mm至200mm的范围内。在一些情况下，容器表面上干试剂组合物的单独位置之间的距离在0.1mm至10mm的范围内。
在某些实施例中，不同地定位的干试剂组合物在容器(例如，容器底部)的内表面上彼此相邻地定位，但彼此不间隔开。在这些情况下，一种干试剂组合物的边缘可以接触相邻的干试剂组合物的边缘。例如，干试剂组合物占据的空间体积可以与另一种(相邻)干试剂组合物占据的空间体积接触，但不明显重叠。在这些实施例中，相邻的干试剂组合物可以彼此接触，但不明显地混合在一起，例如，不同地定位的干试剂组合物的任何部分基本上不与另一(相邻)干试剂组合物的一部分混合。
不同地定位的干试剂组合物可以存在于容器的同一表面(例如，容器底部的内表面)上，但可以设置在容器的表面(例如，容器底部的内表面)上或相对于容器的表面(例如，容器底部的内表面)的不同位置处。例如，如上所述，容器可以被配置为液体容器，并且因此可以包括内表面和外表面。在某些情况下，干试剂组合物定位在液体容器的表面(例如，容器底部的内表面)上。在一些情况下，干试剂组合物不同地定位在液体容器的内表面(例如，容器底部的内表面)上。
不同地定位的干试剂组合物的示例包括干试剂组合物设置在容器的表面(例如，容器底部的内表面)上某个位置处并且另一种干试剂组合物也设置在该容器的表面上的不同位置处的实施例。因此，不同地定位的干试剂组合物可以定位在容器的表面上的不同的位置处。例如，容器的实施例可以包括第一和第二干试剂组合物，其中第一干试剂组合物定位在容器底部的内表面上的某个位置处，而第二干试剂组合物定位在容器底部的内表面上的与第一干试剂组合物不同的位置处。如上所述，第一和第二干试剂组合物可以彼此间隔开，使得容器的表面(例如，容器底部的内表面)上的第一和第二干试剂组合物的单独的位置之间存在一定距离。第一和第二干试剂组合物之间的距离可以对应于如上所述的范围和值。
干试剂组合物可以具有任何合适的尺寸。在一些情况下，第一和第二干试剂组合物具有相同的尺寸。在某些实施例中，第一和第二干试剂组合物具有不同的尺寸。干试剂组合物可以具有任何合适的横截面形状，包括例如：直线横截面形状，例如正方形、长方形、梯形、三角形、六边形等；曲线横截面形状，例如圆形、椭圆形；以及不规则形状，例如抛物线形状。在一些情况下，第一和第二干试剂组合物的直径范围为0.01mm至5mm，包括例如，0.01mm至4mm、0.01mm至3mm、0.01mm至2mm、0.01mm至1mm、0.1mm至5mm、0.1mm至4mm、0.1mm至3mm、0.1mm至2mm、0.1mm至1mm、0.5mm至5mm、0.5mm至4mm、0.5mm至3mm、0.5至2mm、0.5至1mm。在一些情况下，第一和第二干试剂组合物的表面积范围为5×10 -5mm2至20mm2，包括例如，5×10-5mm2至20mm2、5×10-3mm2至20mm2、0.1mm2至20mm2、5×10-5mm2至0.5mm2、5×10-3mm2至0.5mm2、0.1mm2至0.5mm2。
在容器的内表面(例如，容器底部的内表面)上可以设置有另外的干试剂组合物。例如，容器可以包括不同地定位在容器底部的内表面上的第三干试剂组合物(例如，染料组合物)。该第三干试剂组合物可以相对于第一干试剂组合物不同地定位，并且也可以相对于第二干试剂组合物不同地定位。因此，每个干试剂组合物(例如，第一、第二和第三干试剂组合物)可以相对于彼此不同地定位在容器底部的内表面上，如文中所述。如上所述，可以在容器的表面上提供额外的不同地定位的干试剂组合物，例如4种或更多种不同地定位的干试剂组合物，或5种或更多种、7种或更多种、10种或更多种等。在一些情况下，干试剂组合物附着至容器底部的内表面。
不同地定位的干试剂组合物的另外的示例包括其中干试剂组合物设置在容器表面(例如，容器底部的内表面)上某个位置处并且另一种干试剂组合物定位在相同位置处的实施例。因此，不同地定位的干试剂组合物可以共同位于容器表面(例如，容器底部的内表面)的相同位置处。干试剂组合物可以共同位于同一位置处，但仍被不同地定位。例如，干试剂组合物可以通过非染料材料彼此分离。在一些情况下，非染料材料介设在不同地定位的干试剂组合物之间。非染料材料可以基本上覆盖干试剂组合物的表面，使得相邻的干试剂组合物与该干试剂组合物分离。例如，干试剂组合物可以具有设置在干试剂组合物的表面上的非染料材料，而另一种干试剂组合物可以设置在非染料材料的表面上。在这些情况下，干试剂组合物可以通过非染料材料与其他干试剂组合物物理分离。在一些情况下，可以将不同地定位的干试剂组合物设置为容器表面上的干试剂组合物和非染料材料的交替层。因此，在某些实施例中，两种或更多种干试剂组合物相对于彼此不同地定位并且还共同位于容器表面的同一位置处。
在某些实施例中，非染料材料是与使用期间容器中可能存在的其他测定成分(例如，试剂、缓冲剂、分析物等)相容的材料。非染料材料可以相对于使用期间容器中可能存在的其他测定成分(例如，试剂、缓冲剂、分析物等)是基本上惰性的，使得非染料材料与该其他测定成分之间不存在明显的反应。非染料材料的示例包括但不限于稳定剂、缓冲剂、可溶性惰性材料(例如，水溶性惰性材料)等。感兴趣的稳定剂包括但不限于：糖和多元醇。适用于冻干的染料组合物的糖和多元醇包括与所使用的其他试剂、缓冲剂、染料和样品成分相容的糖。合适的糖的示例包括但不限于蔗糖、麦芽糖、海藻糖、2-羟丙基-β-环糊精(β-HPCD)、乳糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、葡糖胺等以及它们的组合。在某些情况下，糖是二糖。例如，二糖可以是蔗糖。合适的多元醇的示例包括但不限于甘露醇、甘油、赤藓醇、苏糖醇、木糖醇、山梨醇等以及它们的组合。非染料材料可以包括例如牛血清白蛋白(BSA)、叠氮化钠、甘油、苯甲磺酰氟(PMSF)、乙二胺四乙酸(EDTA)、缓冲柠檬酸盐、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、氯化钠、多聚甲醛等以及它们的组合。
例如，容器的实施例可以包括第一和第二干试剂组合物，其中，第一干试剂组合物定位在容器的表面(例如，容器底部的内表面)上的某个位置处，而第二干试剂组合物共同位于与第一干试剂组合物相同的位置处。如上所述，第一和第二干试剂组合物可以彼此间隔开，使得第一和第二干试剂组合物之间存在一定距离。例如，第一和第二干试剂组合物可以通过非染料材料彼此分离，如上所述。第一和第二干试剂组合物之间的距离可以对应于如上所述的范围和值。例如，非染料材料可以介设在不同地定位的第一和第二干试剂组合物之间。在这些实施例中，第一干试剂组合物可以定位在容器的表面上，非染料材料可以作为一层设置在第一干试剂组合物的表面上，而第二干试剂组合物可以设置在非染料组合物的表面上。在这些情况下，第一干试剂组合物可以通过非染料材料与第二干试剂组合物物理分离。因此，在某些实施例中，第一和第二干试剂组合物相对于彼此不同地定位并且也共同位于容器表面的同一位置处。例如，第一干试剂组合物的表面上的非染料材料层可以基本上覆盖第一干试剂组合物的整个表面。在这些情况下，设置在非染料组合物表面上的第二干试剂组合物可不明显地接触第一干试剂组合物。在一些情况下，非染料材料是第一干试剂组合物的表面上的基本上连续的非染料材料层。例如，非染料材料可以覆盖第一干试剂组合物的大部分表面，例如第一干试剂组合物的表面的75％或更多，或80％或更多，或85％或更多，或90％或更多，或95％或更多，或97％或更多，或99％或更多。第一干试剂组合物的表面基本上被非染料材料覆盖的实施例可以提供第一和第二干试剂组合物之间的染料-染料相互作用的最小化。
在某些实施例中，非染料材料的厚度范围为0.01mm至5mm，例如，0.05mm至5mm，或0.1mm至5mm，或0.1mm至4mm，或0.1mm至3mm，或0.1mm至2mm，或0.1mm至1mm，或0.1mm至0.9mm，或0.1mm至0.8mm，或0.1mm至0.7mm，或0.1mm至0.6mm，或0.1mm至0.5mm。在某些情况下，非染料材料的厚度为0.1mm至1mm。在一些情况下，非染料材料的厚度为0.1mm至0.05mm。
还可以提供额外的干试剂组合物。例如，容器可以包括相对于第一和第二干试剂组合物不同地定位的第三干试剂组合物。因此，第三干试剂组合物可以相对于第一干试剂组合物不同地定位，并且也可以相对于第二干试剂组合物不同地定位。因此，每种干试剂组合物(例如，第一、第二和第三干试剂组合物)可以相对于彼此不同地定位，如文中所述。在一些情况下，每种干试剂组合物可以通过非染料材料彼此分离。例如，每种干试剂组合物可以通过非染料材料彼此分离。在一些情况下，非染料材料介设在每种不同地定位的干试剂组合物之间。在某些情况下，每种不同地定位的干试剂组合物作为一层提供，并且每种不同地定位的干试剂组合物之间具有非染料材料层。如上所述，可以提供另外的不同地定位的干试剂组合物的层，例如4种或更多种不同地定位的干试剂组合物，或5种或更多种、7种或更多种、10种或更多种等。因此，多种干试剂组合物可以相对于彼此不同地定位，并且也共同位于容器的表面(例如，容器底部的内表面)的同一位置处。
在某些实施例中，容器的表面上的干试剂组合物是例如包含染料的干染料组合物。干染料组合物是包含少量溶剂的染料组合物。例如，干染料组合物可以包含少量的液体，例如水。在一些情况下，干染料组合物基本上不包含溶剂。例如，干染料组合物可以基本上不包含液体(例如水)。在某些实施例中，干染料组合物包含25wt％或更少的溶剂，例如，20wt％或更少、或15wt％或更少、或10wt％或更少、或5wt％或更少、或3wt％或更少、或1wt％或更少、或0.5wt％或更少的溶剂。在一些情况下，干染料组合物不是流体。在一些情况下，干染料组合物基本上是固体。例如，干染料组合物在标准条件下可以具有高粘度，例如10,000cP或更高、或25,000cP或更高、或50,000cP或更高、或75,000cP或更高、或100,000cP或更高、或150,000cP或更高、或200,000cP或更高、或250,000cP或更高的粘度。
在一些情况下，染料组合物是冻干的染料组合物。在某些情况下，冻干的染料组合物是其中水已通过升华从染料组合物中被除去的染料组合物，其中染料组合物中的水经历从固体到气体的相变。例如，冻干的染料组合物可以是其中通过冷冻染料组合物(例如，冷冻染料组合物中的水)然后降低染料组合物周围的压力使得染料组合物中的水发生升华而从组合物中除去水的染料组合物。在某些情况下，冻干的染料组合物包含通过KarlFischer(KF)滴定测量的较低量的水，例如25％或更少、或20％或更少、或15％或更少、或10％或更少、或9％或更少、或8％或更少、或7％或更少、或6％或更少、或5％或更少、或4％或更少、或3％或更少、或2％或更少、或1％或更少、或0.5％或更少、或0.25％或更少、或0.1％或更少的水。在一些情况下，冻干的染料组合物具有通过Karl Fischer滴定法测量的3％或更少的水。在一些情况下，冻干的染料组合物具有通过Karl Fischer滴定测量的1％或更少的水。在一些情况下，冻干的染料组合物具有通过Karl Fischer滴定测量的0.5％或更少的水。冻干的染料组合物可以包含添加剂和/或赋形剂，例如稳定剂。在一些情况下，冻干的染料组合物包含稳定剂，例如糖或多元醇。适用于冻干的染料组合物中的糖和多元醇包括与所使用的其他试剂、缓冲剂、染料和样品成分相容的糖。合适的糖的示例包括但不限于蔗糖、麦芽糖、海藻糖、2-羟丙基-β-环糊精(β-HPCD)、乳糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、葡糖胺等以及它们的组合。在某些情况下，糖是二糖。例如，二糖可以是蔗糖。合适的多元醇的示例包括但不限于甘露醇、甘油、赤藓醇、苏糖醇、木糖醇、山梨醇等以及它们的组合。
染料组合物中的染料可以用作可检测标记。在某些情况下，染料包含可基于例如荧光发射最大值、荧光偏振、荧光寿命、光散射、质量、分子质量或它们的组合来检测的可检测部分或标记物。在某些实施例中，可检测标记是荧光团(即，荧光标记、荧光染料等)。感兴趣的荧光团可以包括但不限于适用于分析应用(例如流式细胞术、成像等)的染料。
在一些情况下，荧光团是聚合染料。在该方法的一些情况下，聚合染料包括共轭聚合物。共轭聚合物(CP)的特点在于不定域电子结构(delocalized electronicstructure)，其包括具有交替的不饱和键(例如双键和/或三键)和饱和键(例如单键)的主链，其中π电子可以从一个键移动到另一个键。因此，共轭主链可以为聚合染料上的延伸的线性结构赋予聚合物的重复单元之间的有限键合角度。例如，蛋白质和核酸虽然也是聚合物，但在某些情况下不会形成延伸棒结构，而是折叠成更高阶的三维形状。另外，CP可以形成“刚性棒”聚合物主链，并且在沿聚合物主链的单体重复单元之间经历有限的扭转(例如扭曲)角度。在一些情况下，聚合染料包括具有刚性棒结构的CP。聚合染料的结构特征会影响分子的荧光性质。
感兴趣的聚合染料包括但不限于Gaylord等人在以下文献中描述的那些染料：美国公开号20040142344、20080293164、20080064042、20100136702、20110256549、20110257374、20120028828、20120252986、20130190193、20160264737、20160266131、20180231530、20180009990、20180009989和20180163054，这些申请的公开内容通过引用整体并入本文；和“J.Am.Chem.Soc.”(Gaylord等人，2001年，123(26)，第6417-6418页)；“Chem.Soc.Rev.”(Feng等人，2010年，39，第2411-2419页)；以及“J.Am.Chem.Soc.”(Traina等人，2011年,133(32)，第12600-12607页)，它们的公开内容通过引用整体并入本文。
聚合染料可以具有一种或更多种期望的光谱性质，例如，特定的吸收最大波长、特定的发射最大波长、消光系数、量子产率等(参见例如Chattopadhyay等人在“CytometryPart A”(81A(6)，第456-466页，2012年)中的“Brilliant violet fluorophores:A newclass of ultrabright fluorescent compounds for immunofluorescence experiments(亮紫荧光团：一类用于免疫荧光实验的新型超亮荧光化合物))。在一些实施例中，聚合染料具有在280nm与475nm之间的吸收曲线。在某些实施例中，聚合染料具有在280nm至475nm的范围内的吸收最大值(激发最大值)。在一些实施例中，聚合染料吸收波长在280nm与475nm之间的范围内的入射光。在一些实施例中，聚合染料的发射最大波长范围为400nm至850nm，例如415nm至800nm，其中，感兴趣的发射最大值的具体示例包括但不限于：421nm、510nm、570nm、602nm、650nm、711nm和786nm。在一些情况下，聚合染料具有在选自包括410nm至430nm、500nm至520nm、560nm至580nm、590nm至610nm、640nm至660nm、700nm至720nm以及775nm至795nm的群组的范围内的最大发射波长。在某些实施例中，聚合染料具有421nm的最大发射波长。在一些情况下，聚合染料具有510nm的最大发射波长。在一些情况下，聚合染料具有570nm的最大发射波长。在某些实施例中，聚合染料具有602nm的最大发射波长。在一些情况下，聚合染料具有650nm的最大发射波长。在某些情况下，聚合染料具有711nm的最大发射波长。在一些实施例中，聚合染料具有786nm的最大发射波长。在某些情况下，聚合染料具有421nm±5nm的最大发射波长。在一些实施例中，聚合染料具有510nm±5nm的最大发射波长。在某些情况下，聚合染料具有570nm±5nm的最大发射波长。在一些情况下，聚合染料具有602nm±5nm的最大发射波长。在一些实施例中，聚合染料具有650nm±5nm的最大发射波长。在某些情况下，聚合染料具有711nm±5nm的最大发射波长。在一些情况下，聚合染料具有786nm±5nm的最大发射波长。在某些实施例中，聚合染料具有选自包括421nm、510nm、570nm、602nm、650nm、711nm和786nm的群组的发射最大值。
可以采用的特定聚合染料包括但不限于BD Horizon BrilliantTM染料，例如BDHorizon BrilliantTM紫色染料(例如，BV421、BV480、BV510、BV570、BV605、BV650、BV711、BV786、BV829)；BD Horizon BrilliantTM紫外线染料(例如，BUV395、BUV496、BUV563、BUV615、BUV661、BUV737、BUV805)；和BD Horizon BrilliantTM蓝色染料(例如BB515、BB630、BB660、BB700、BB755、BB790)(BD Biosciences，SanJose，CA)。
在某些实施例中，如上所述，容器(例如，容器底部)包括多于一种染料组合物，例如，两种染料组合物(例如，第一和第二染料组合物)。在这些实施例中，染料组合物可以是如上所述的聚合染料组合物。例如，容器可以包含第一和第二聚合染料组合物。如上所述，第一和第二聚合染料可以是共轭聚合物(CP)。在某些情况下，第一和第二聚合染料是水溶性共轭聚合物，如上所述。在一些情况下，包含在容器中的染料组合物可以是不同的染料组合物，例如不同的聚合染料组合物。不同的染料组合物可以在化学组成和/或染料的一种或多种性能方面彼此不同。例如，不同的染料组合物可以因激发最大值和发射最大值中的至少一者而彼此不同。在一些情况下，不同的染料组合物因其激发最大值而彼此不同。在一些情况下，不同的染料组合物因其发射最大值而彼此不同。在一些情况下，不同的染料组合物因其激发最大值和发射最大值两者而彼此不同。因此，在包括第一和第二染料的实施例中，第一和第二染料可以因激发最大值和发射最大值中的至少一者而彼此不同。例如，第一和第二染料可以因激发最大值、因发射最大值、或者因激发和发射最大值两者而彼此不同。容器中可以包含另外的染料组合物，其中容器中的每种染料组合物彼此不同，如上所述。
在某些实施例中，容器(例如容器底部)还包括其他类型的染料组合物，例如一种或更多种非聚合染料组合物。如上所述，染料可以包含可基于例如荧光发射最大值、荧光偏振、荧光寿命、光散射、质量、分子质量或它们的组合检测的可检测部分或标记。在某些实施例中，非聚合染料包括荧光团(即，荧光标记、荧光染料等)。感兴趣的荧光团可以包括但不限于适用于分析应用(例如，流式细胞术、成像等)中的染料。大量非聚合染料可以从多种来源购得，例如从Molecular Probes(Eugene，OR)和Exciton(Dayton，OH)购得。例如，非聚合染料的荧光团可以是4-乙酰氨基-4'-异硫氰酸二苯乙烯-2,2'二磺酸；吖啶及诸如吖啶、吖啶橙、吖啶黄、吖啶红、吖啶异硫氰酸酯的衍生物；5-(2'-氨基乙基)氨基萘-1-磺酸(EDANS)；4-氨基-N-[3-乙烯基磺酰基)苯基]萘二甲酰亚胺-3,5二磺酸酯(荧光黄VS)；N-(4-苯胺基-1-萘基)马来酰亚胺；邻氨基苯甲酰胺；亮黄色；香豆素及诸如香豆素、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC、香豆素120)、7-氨基-4-三氟甲基香豆素(香豆满151)的衍生物；花青及诸如花青、Cy3、Cy3.5、Cy5、Cy5.5和Cy7的衍生物；4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)；5',5”-二溴连苯三酚-磺酞(溴连苯三酚红)；7-二乙氨基-3-(4'-异硫氰酸苯基)-4-甲基香豆素；二乙氨基香豆素；二乙烯三胺五乙酸盐；4,4'-二异硫氰酸二氢二苯乙烯-2,2'-二磺酸；4,4'-二异硫氰酸二苯乙烯-2,2'-二磺酸；5-[二甲氨基]萘-1-磺酰氯(DNS，丹磺酰氯)；4-(4'-二甲基氨基苯基偶氮)苯甲酸(DABCYL)；4-二甲氨基苯基偶氮苯基-4'-异硫氰酸酯(DABITC)；曙红及诸如曙红和异硫氰酸曙红的衍生物；赤藓红及诸如赤藓红B和异硫氰酸赤藓红的衍生物；乙锭；荧光素及诸如5-羧基荧光素(FAM)、5-(4,6-二氯三嗪-2-基)氨基荧光素(DTAF)、2'7'-二甲氧基-4'5'-二氯-6-羧基荧光素(JOE)、异硫氰酸荧光素(FITC)、氯三嗪荧光素、萘荧光素和QFITC(XRITC)的衍生物；荧光胺；IR144；IR1446；绿色荧光蛋白(GFP)；礁珊瑚荧光蛋白(RCFP)；丽丝胺TM；丽丝胺罗丹明、路西法黄；孔雀石绿异硫氰酸盐；4-甲基伞形酮；邻甲酚酞；硝基酪氨酸；副玫瑰苯胺；尼罗红；俄勒冈绿；酚红；B-藻红蛋白(PE)；邻苯二醛；芘及诸如芘、芘丁酸酯、1-芘丁酸琥珀酰亚胺酯的衍生物；活性红4(CibacronTM艳红3B-A)；罗丹明及诸如6-羧基-X-罗丹明(ROX)、6-羧基罗丹明(R6G)、4,7-二氯罗丹明丽丝胺、罗丹明B磺酰氯、罗丹明(Rhod)、罗丹明B、罗丹明123、罗丹明X异硫氰酸酯，磺基罗丹明B、磺基罗丹明101、磺基罗丹明101的磺酰氯衍生物(德克萨斯红)、N,N,N',N'-四甲基-6-羧基罗丹明(TAMRA)、四甲基罗丹明和四甲基罗丹明异硫氰酸酯(TRITC)的衍生物；核黄素；玫瑰果酸和铽螯合物衍生物；呫吨；类胡萝卜素-蛋白质复合物，例如多甲素-叶绿素蛋白(PerCP)；别藻蓝蛋白(APC)；或它们的组合。
在某些实施例中，包含在容器(例如容器底部)中的染料组合物包括聚合染料组合物，如上所述。在一些情况下，包含在容器中的染料组合物包括非聚合染料组合物，如上所述。在一些情况下，包含在容器中的染料组合物包括聚合染料组合物和非聚合染料组合物。如上所述，每种染料组合物(例如，聚合和非聚合染料组合物)可以不同地定位在容器的容器表面上。在一些情况下，如上所述的，容器包含多种染料组合物。例如，容器可包括两种或更多种(例如三种或更多种)不同的聚合染料组合物和两种或更多种(例如三种或更多种、或四种或更多种、或五种或更多种)不同的非聚合染料组合物。在一些情况下，容器包括三种或更多种不同的聚合染料组合物和五种或更多种不同的非聚合染料组合物。
如上所述，容器可以包含聚合染料组合物和非聚合染料组合物两者。在一些情况下，将聚合染料组合物与非聚合染料组合物混合。在某些实施例中，聚合染料组合物和非聚合染料组合物的混合物在聚合染料组合物与非聚合染料组合物之间不发生明显的染料-染料相互作用。例如，聚合染料组合物的荧光发射能量不会因与非聚合染料组合物的相互作用而明显猝灭。在一些情况下，聚合染料组合物的荧光发射能量没有因非辐射跃迁而被明显耗散。在这些实施例中，与不存在非聚合染料组合物时聚合染料组合物的荧光相比，聚合染料组合物的可检测荧光不明显小于预期。类似地，在一些实施例中，非聚合染料组合物的荧光发射能量不会因与聚合染料组合物的相互作用而明显猝灭。例如，非聚合染料组合物的荧光发射能量不会因非辐射跃迁而被明显耗散。在这些实施例中，与不存在聚合染料组合物时非聚合染料组合物的荧光相比，非聚合染料组合物的可检测荧光不明显小于预期。
在某些实施例中，染料组合物包含染料，例如聚合和/或非聚合染料，如上所述。染料组合物还可以包含其他成分，例如但不限于溶剂、缓冲剂、稳定剂等。例如，染料组合物可以包含减少和/或基本上防止染料组合物中染料的降解的稳定剂。在一些情况下，染料组合物中稳定剂的存在足以减少和/或基本上防止染料组合物中的染料降解一段时间，例如24小时或更长，或48小时或更长，或72小时或更长，或4天或更长，或5天或更长，或6天或更长，或1周或更长，或2周或更长，或3周或更长，或4周或更长，或2个月或更长，或3个月或更长，或4个月或更长，或5个月或更长，或6个月或更长，或9个月或更长，或1年或更长。稳定剂的示例包括但不限于牛血清白蛋白(BSA)、叠氮化钠、甘油、苯甲磺酰氟(PMSF)等。组合物中还可以存在另外的添加剂，例如保存全血中存在的细胞的添加剂，例如血小板稳定因子等。组合物中可以包含的添加剂的示例是诸如乙二胺四乙酸(EDTA)、缓冲柠檬酸盐、肝素等的抗凝剂。该组合物可以包含液态或干燥状态的这些添加剂。
在一些情况下，给定的干燥染料组合物的染料成分是染料部分和特异性结合成员的轭合物。特异性结合成员和染料部分可经由可选的连接物(linker)在两个分子的任何方便的位置处彼此缀合(例如，共价结合)。
如本文所使用的，术语“特异性结合成员”是指对彼此具有结合特异性的一对分子中的一个成员。该分子对中的一个成员可以在其表面上具有区域或空腔，其特异性地结合到该分子对中的另一个成员的表面上的区域或其中的空腔。因此，该对的成员具有彼此特异性结合以产生结合复合物的特性。在一些实施例中，结合复合物中的特异性结合成员之间的亲和力的特点在于其Kd(解离常数)为10-6M或更小，例如，10-7M或更小，包括10-8M或更小，例如，10-9M或更小、10-10M或更小、10-11M或更小、10-12M或更小、10-13M或更小、10-14M或更小，包括10-15M或更小。在一些实施例中，特异性结合成员以高亲合力特异性结合。高亲和力是指结合成员以表观亲和力特异性结合，所述表观亲和力的特点是表观Kd为10×10-9M或更小，例如1×10-9M或更小、3×10-10M或更小、1×10-10M或更小、3×10-11M或更小、1×10-11M或更小、3×10-12M或更小、或1×10-12M或更小。
特异性结合成员可以是蛋白质的。如本文所使用的，术语“蛋白质的”是指由氨基酸残基组成的部分。蛋白质部分可以是多肽。在某些情况下，蛋白质特异性结合成员是抗体。在某些实施例中，蛋白质特异性结合成员是抗体片段，例如，抗体的与聚合染料特异性结合的结合片段。如本文所使用的，术语“抗体”和“抗体分子”可互换地使用，并且是指包含基本上由全部或部分的已识别的免疫球蛋白基因编码的一种或更多种多肽的蛋白质。例如，在人类中，已识别的免疫球蛋白基因包括kappa(k)、lambda(l)和重链遗传基因座，它们共同包含无数可变区基因以及分别编码IgM、IgD、IgG、IgE和IgA同种型的恒定区基因mu(u)、delta(d)、gamma(g)、sigma(e)和alpha(a)。免疫球蛋白轻链或重链可变区域包含被三个高变区域中断的“框架”区域(FR)，也称为“互补决定区域”或“CDR”。框架区域和CDR的范围已被精确定义(参见“Sequences of Proteins of Immunological Interest(具有免疫学意义的蛋白质序列)”，E.Kabat等人，美国卫生与公众服务部，(1991年))。本文讨论的所有抗体氨基酸序列的编号均符合Kabat系统。不同轻链或重链的框架区域的序列在一个物种内相对保守。抗体的框架区域，即轻链和重链的组合框架区域，用于定位和对齐CDR。CDR主要负责与抗原的表位结合。术语抗体意在包括全长抗体并且可以指来自任何生物体的天然抗体、工程抗体或重组产生的用于实验、治疗或如下面进一步定义的其他目的的抗体。
感兴趣的抗体片段包括但不限于Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv或抗体的其他抗原结合子序列，通过完整抗体的修饰产生或使用重组DNA技术从头合成。抗体可以是单克隆或多克隆的，并且可以对细胞具有其他特定活性(例如，拮抗剂，激动剂，中和性、抑制性或刺激性抗体)。应当理解，抗体可以具有对抗原结合或其他抗体功能基本上没有影响的额外的保守氨基酸取代。
在某些实施例中，特异性结合成员是Fab片段、F(ab')2片段、scFv、双抗体或三抗体。在某些实施例中，特异性结合成员是抗体。在一些情况下，特异性结合成员是鼠抗体或其结合片段。在某些情况下，特异性结合成员是重组抗体或其结合片段。
在某些实施例中，容器还包括校准标准品。校准标准品可以用于确定测定的准确性并确保后续测定之间的一致性。在一些情况下，校准标准品包括标记的珠粒，例如，荧光标记的珠粒。荧光标记的珠粒可以是通常用作校准标准品的标准荧光标记的珠粒。标准荧光标记的珠粒的示例包括但不限于荧光标记的微粒或纳米颗粒。在一些情况下，荧光标记的珠粒被配置为使得它们保持悬浮在测定混合物中并且基本上不沉降或聚集。在一些实施例中，荧光标记的珠粒包括但不限于荧光标记的聚苯乙烯珠粒、荧光素珠粒、罗丹明珠粒和用荧光染料标记的其他珠粒。美国专利No.6,350,619；7,738,094和8,248,597中描述了荧光标记的珠粒的其他示例，它们中的每一者的公开内容均通过引用整体并入本文。
在一些情况下，容器便于染料组合物的延长时间段的储存。例如，容器可以是储存稳定的容器。在一些情况下，容器中包含的染料组合物是储存稳定的染料组合物，其中，染料组合物在延长的时间段内基本上稳定。“稳定”或“储存稳定”或“基本上稳定”意指染料组合物在延长的时间段内不会明显降解和/或失去活性。例如，储存稳定的染料组合物不会因染料组合物在延长时间段内降解而明显损失荧光活性，例如，荧光活性损失为10％或更少，或者在延长的时间段内的荧光活性损失为9％或更少，或8％或更少，或7％或更少，或6％或更少，或5％或更少，或4％或更少，或3％或更少，或2％或更少，或1％或更少。在某些情况下，储存稳定的染料组合物在延长的时间段内的荧光活性损失为5％或更少。在一些情况下，储存稳定的染料组合物在延长的时间段内基本上保留其荧光活性，例如，保留其100％的活性，或在延长的时间段内保留其99％或更多、或98％或更多、或97％或更多、或96％或更多、或95％或更多、或94％或更多、或93％或更多、或92％或更多、或91％或更多、或90％或更多、或85％或更多、或80％或更多、或75％或更多的活性。例如，储存稳定的染料组合物可以在延长的时间段内保留其90％或更多的荧光活性。在一些情况下，储存稳定的组合物在延长的时间段内保留其95％或更多的荧光活性。延长的时间段是一段时间，例如1周或更长、或2周或更长、或3周或更长、或1个月或更长、或2个月或更长、或3个月或更长、或4个月或更长，或6个月或更长，或9个月或更长、或1年或更长、或1.5年(例如，18个月)或更长、或2年或更长、或2.5年(例如，30个月)或更长、或3年或更长、或3.5年(例如，42个月)或更长、或4年或更长、或4.5年(例如，54个月)或更长、或5年或更长。例如，延长的时间段可以是6个月或更长。在某些情况下，延长的时间段为9个月或更长。在一些情况下，延长的时间段为1年(例如，12个月)或更长。在一些情况下，延长的时间段为1.5年(例如，18个月)或更长。在一些情况下，延长的时间段为2年(例如，24个月)或更长。在一些情况下，延长的时间段为10年或较短，例如7.5年或更短，包括5年或更短，例如2年或更短。
图1提供了根据本发明的一种实施例的容器100的图示。图1所示的容器100由FACS管的两个部分110和120组成，这两个部分组合以形成液密的圆形体的FACS管100，其中，该管可以包括由不同地定位在管的内表面上的多种干染料组合物组成的干燥高参数流式细胞术组合。容器100包括截头FACS管底部形式的容器底部120和FACS管颈部形式的容器壁部110。截头管底部120和管颈部110可被附接以形成液密圆形体的FACS管100。图2示出了用于将管底部与管颈部组合以形成本发明的FACS管(例如，如图1所示)的示例性方式的模型。组合A提供了螺纹组件的图示，组合B提供了压配合组件的图示，组合C提供了卡扣配合组件的图示。
制造方法
如上面所概括的，本公开的方面包括制造如本文所述的包含试剂的容器的方法。该方法可以生产完全组装好的容器，其中，容器的单独部分被连接。例如，该方法可以生产如上所述的具有附接或连接到容器壁部的容器底部的容器。在此类实施例中，容器底部和容器壁部可以被配置为彼此附接。包含试剂的容器可以包括定位在容器底部的内表面上的一种或更多种干试剂组合物，如文中所述。在某些实施例中，完全组装好的包含试剂的容器可以在用于测定之前进行包装。
在实践制造方法的实施例时，制造方法的方面可以包括将第一液体试剂组合物定位在限定第一容积的容器底部的内表面上，干燥第一液体试剂组合物以产生第一干试剂组合物，以及将容器底部附接到容器壁部以形成将容器底部连接到容器壁部的液体密封附接区域以产生包含试剂的容器。
如上面概括的，主题方法的各方面可以包括将液体试剂组合物(例如，第一液体试剂组合物)定位在限定第一容积的容器底部的内表面上。在某些实施例中，首先将液体试剂组合物(例如，液体染料组合物)定位在容器底部的表面上，然后使该液体试剂组合物干燥以在容器底部的内表面上提供干试剂组合物。该方法还可以包括将两种或更多种液体试剂组合物定位在容器底部的内表面上。在一些情况下，容器底部以某种方式配置，例如具有合适的高度，该高度允许通过液体处理器将具有纳升体积的一种或更多种液体试剂组合物定位在其内表面上。在某些实施例中，该方法进一步包括将第二液体试剂组合物定位在容器底部的内表面上。该方法还可以包括干燥第二液体试剂组合物以产生第二干试剂组合物。在一些实施例中，染料组合物可以作为液体染料组合物提供，并且液体染料组合物可以不同地定位在容器底部的表面上。可以使不同地定位的液体染料组合物干燥以在容器底部的内表面上提供不同地定位的干燥染料组合物。可以使用任何方便的液体处理设备——例如但不限于注射器、针头、移液管、抽吸器以及其他液体处理装置——将液体染料组合物不同地定位在容器底部的表面上。液体处理设备可以被配置为沉积纳升容积的每种液体试剂组合物(例如，第一和第二液体试剂组合物)。在某些实施例中，试剂组合物的定位包括沉积来自液体处理装置的液体试剂组合物(例如，第一和第二液体试剂组合物)。感兴趣的液体处理装置包括但不限于市售的基于真空的纳升分配技术等。在一些情况下，可以使用打印机——例如但不限于喷墨打印机——将液体试剂组合物不同地定位在容器底部的表面上。
可以使用任何方便的干燥方案来干燥不同地定位在容器底部的表面上的液体试剂组合物。可以在容器底部附接到容器壁部之前或之后干燥液体试剂组合物。在一些情况下，干燥包括空气干燥或允许液体试剂组合物在室温下干燥。空气干燥可以在例如20℃至22℃的温度范围内进行。在一些情况下，容器底部可以被加热或放置在温度高于标准条件的环境中。在某些情况下，该温度是高于足以干燥液体试剂组合物(例如液体染料组合物)的标准条件但低于会导致试剂组合物降解的温度的温度。例如，可以将容器底部加热至在30℃至50℃、例如30℃至45℃的范围内的温度，以提供干染料组合物。在某些实施例中，对容器底部施加温度足以干燥染料组合物的时间，例如1分钟或更长，或5分钟或更长，或10分钟或更长，或15分钟或更长，或20分钟或更长，或30分钟或更长。在容器底部的表面上包括两种或更多种试剂组合物(例如染料组合物)的实施例中，可以将不同的试剂组合物顺次地定位在容器底部的表面上并干燥，或者可以将每种试剂组合物定位在容器底部的表面上并且可以同时干燥所有试剂组合物。在某些实施例中，通过冻干来干燥液体试剂组合物。
定位在容器底部中的液体试剂组合物(例如，第一和第二液体试剂组合物)的体积可以变化。在一些情况下，液体试剂组合物具有相同的体积。在一些情况下，液体试剂组合物具有彼此不同的体积。在一些情况下，该体积可以在1nl至1000ul的范围内，包括例如1nl至900ul、1nl至800ul、1nl至700ul、1nl至600ul、1nl至500ul、1nl至400ul、1nl至300ul、1nl至200ul、1nl至100ul、10nl至900ul、10nl至800ul、10nl至700ul、10nl至600ul、10nl至500ul、10nl至400ul、10nl至300ul、10nl至200ul、或10nl至100ul。在一些情况下，定位在容器底部中的每种液体试剂组合物的体积是纳升体积。该纳升体积可以在1nl至1000nl的范围内，包括例如1nl至900nl、1nl至800nl、1nl至700nl、1nl至600nl、1nl至500nl、1nl至400nl、1nl至300nl、1nl至200nl、1nl至100nl、10nl至900nl、10nl至800nl、10nl至700nl、10nl至600nl、10nl至500nl、10nl至400nl、10nl至300nl、10nl至200nl、或10nl至100nl。
如本文中所述，容器可以包含不同地定位在容器底部的表面上的两种或更多种试剂组合物(例如，染料组合物)。因此，在一些情况下，该方法包括将液体试剂组合物定位在容器底部的内表面上的不同位置处。在一些情况下，该方法进一步包括将第二液体试剂组合物定位在容器底部的内表面上与第一液体试剂组合物分开的位置处。例如，该方法可以包括将第一和第二聚合染料组合物定位在容器底部的表面上不同的位置处。可以在容器底部的表面上提供额外的液体试剂组合物(例如，染料组合物)，例如第三聚合染料组合物。在这些实施例中，该方法还可以包括将第三液体试剂组合物(例如聚合染料组合物)不同地定位在容器底部的表面上。另外的液体试剂组合物，例如聚合的和/或非聚合的染料组合物，也可以不同地定位在容器底部的表面上。
在某些实施例中，容器包括共同定位在容器底部的表面的同一位置处的两种或更多种试剂组合物(例如，染料组合物)。因此，在这些实施例中，该方法可以包括将液体试剂组合物共同定位在容器底部的表面的同一位置处。在一些情况下，该方法进一步包括将第二液体试剂组合物定位在容器底部的内表面上与第一液体试剂组合物共处一处的位置处。例如，该方法可以包括将第一和第二染料组合物(例如，第一和第二聚合染料组合物)共同定位在容器底部的表面的同一位置处。在一些情况下，该方法还包括将非染料材料定位在共同定位的试剂组合物(例如，染料组合物)之间。例如，该方法可以包括将非染料材料定位在第一聚合染料组合物和第二聚合染料组合物之间。另外的试剂组合物(例如，染料组合物)可以共同位于容器底部的表面的同一位置处，例如第三聚合染料组合物。在这些实施例中，该方法还可以包括将第三液体试剂组合物(例如，第三聚合染料组合物)不同地定位在容器底部的表面的同一位置处。另外的液体试剂组合物，例如聚合的和/或非聚合的染料组合物，也可以不同地定位在容器底部的表面的同一位置处。
在一些情况下，本公开提供了使用容器底部的阵列来制造本发明的容器的方法。在这样的情况下，容器底部的阵列可以包括布置成行和列的多个容器底部。阵列中的容器底部可以在侧面处彼此连接。在这些情况下，该阵列可以包括多个容器底部，例如2个或更多个、或10个或更多个、或50个或更多个、或75个或更多个、或100个或更多个、或300个或更多个、或500个或更多个、或750个或更多个、或1000个或更多个、或1500个或更多个、或2000个或更多个容器底部。这些容器底部中的一个或更多个可以能够附接到容器壁部，如本文中所述。在一些情况下，每个容器底部都可以附接到容器壁部，如本文中所述。容器底部的阵列的示例可以包括例如6、24、96、384或1536个容器底部。在某些实施例中，所述阵列是多孔板并且容器底部是多孔板的孔。图3示出了用于在板孔阵列中制造容器底部(例如短管或管底部形式的)以允许更有效地分配和干燥试剂的示例性概念。以类似于多孔板的方式布置的缩短的管允许在附接容器壁部(例如管颈部)并且使用切割仪器分离各个完全组装好的容器(例如为本发明的FACS管的形式的容器)之前进行多次试剂分配和干燥。
如上所述，该方法还可以包括将容器底部附接到容器壁部以形成将容器底部连接到容器壁部的液体密封附接区域，从而产生包含试剂的容器。在附接之前，容器壁部可以包括细长构件，该细长构件具有由壁分隔开的开放的第一端和第二端。容器底部，例如容器底部的开口端，可以在容器壁部的开口第一端或开口第二端部处附接到容器壁部。容器底部可以通过任何合适的方式附接到容器壁部。在一些情况下，附接包括将容器底部和容器壁部彼此压配合、卡扣配合或螺纹连接。在一些情况下，附接包括溶剂结合、粘合剂结合或将容器底部和容器壁部彼此焊接。
如上面回顾，在一些情况下，容器底部可以是阵列中的多个容器底部之一。在此类实施例中，该方法可以包括将一种或更多种液体试剂组合物定位在阵列中的一个或更多个容器底部中。该方法还可以包括根据本文描述的干燥方法中的任一种干燥一个或更多个容器底部中的液体试剂组合物。在一些情况下，阵列中的每个容器底部都可以单独附接到容器壁部。在一些情况下，阵列中的容器底部之一附接到一个容器壁部以形成容器，并且该容器与容器底部的阵列分离，例如脱离。在这样的实施例中，附接到阵列的容器底部可以与该阵列分离。
在将容器底部与容器壁部连接以形成容器之后，该方法还可以包括密封容器。例如，该方法可以包括对液体容器应用密封件。如上所述，密封件可以是水密密封件和/或气密密封件。在一些情况下，密封件是可移除的或可破坏的密封件，其允许用户随后获取液体容器的内容物。
如上所述，容器还可以包括校准标准品，例如标准荧光标记的珠粒。在这些实施例中，该方法还可以包括将一组标准荧光标记的珠粒定位在容器的表面(例如，容器底部的内表面)上。可以使用任何方便的用于处理珠粒的技术来进行定位。例如，珠粒可以提供在液体中，例如，珠粒悬浮在液体中。在这些情况下，可以使用任何方便的液体处理设备将含有珠粒的液体定位在容器的表面上，例如但不限于使用注射器、针头、移液管、抽吸器以及其他液体处理装置。在一些情况下，可以使用打印机(例如但不限于喷墨打印机)来将含有珠粒的液体定位在容器的表面上。
使用方法
如以上所概括的，本公开的方面还包括使用主题容器或包含试剂的容器的方法。如上所述，容器可以包括不同地定位在容器的表面(例如，容器底部的内表面)上的一种或更多种干试剂组合物(例如，第一和第二聚合染料组合物)。因此，使用包含试剂的容器的方法可以包括重构干试剂组合物。在一些情况下，干试剂组合物是染料组合物，例如聚合染料组合物。聚合染料组合物可以是干聚合染料组合物。因此，使用容器的方法可以包括重构染料组合物。在某些实施例中，该方法包括以足以产生重构组合物(例如，重构染料组合物)的方式结合一定体积的液体和容器。可以使用任何方便的液体处理设备将一定体积的液体添加到容器中，例如但不限于使用注射器、针头、移液管、抽吸器以及其他液体处理装置。
在实施主题方法的实施例时，该方法可以包括将一定体积的液体引入到包含试剂的容器中，以产生重构的组合物，该容器包括：限定第一容积并且包括定位在其内表面上的第一干试剂组合物的容器底部；以及容器壁部，该容器壁部在将容器底部连接到容器壁部的液体密封附接区域处附接到容器底部。
在一些情况下，如上所述，容器被配置为液体容器，并且因此包括内表面和外表面。如上所述，液体容器(例如，容器底部)的内表面可以包含一种或更多种干试剂组合物(例如，干聚合染料组合物)。在这些情况下，该方法的结合步骤可以包括将一定体积的液体定位在容器内。通过将一定体积的液体定位在容器内，液体可以接触液体容器的内表面上的干试剂组合物(例如，聚合染料组合物)。在一些情况下，液体(例如水)可以被干试剂组合物(例如干聚合染料组合物)吸收，从而重构干聚合染料组合物。
在某些实施例中，液体包括生物样品。在一些情况下，生物样品可以源自特定的生物流体，例如但不限于血液、粘液、淋巴液、滑液、脑脊液、唾液、支气管肺泡灌洗液、羊水、羊膜脐带血、尿液、阴道液和精液。在一些实施例中，生物样品包括全血或其一部分。在一些实施例中，生物样品包括血浆。
在某些实施例中，容器是密封容器，例如，容器包括密封件(例如，水密和/或气密密封件)。在这些情况下，该方法可以包括在将一定体积的液体定位在或引入液体容器内部之前去除密封件。去除容器上的密封件可以将液体容器的内容物暴露于周围环境并允许进入液体容器的内部体积。因此，能够到达液体容器的内部容积的使用者可以将一定体积的液体定位在液体容器内，以重构液体容器内的干聚合染料组合物。
在某些实施例中，该方法还包括在将一定体积的液体定位在液体容器内之后混合液体容器的内容物。可以使用任何方便的方案进行混合。例如，可以使用搅拌器进行混合。搅拌器可以是足以混合液体容器内的液体的任何方便的搅拌器，包括但不限于涡旋器、超声波仪、摇动器(例如，手动的、机械式或电动摇动器)、摇杆、振荡板、磁力搅拌器、静态混合器、旋转器、搅拌器、混合器、滚筒(tumbler)、轨道摇床以及其他搅拌方案。
在一些情况下，该方法还包括测定重构的组合物，例如重构的染料组合物。可以使用任何合适的测定设备来测定重构的组合物，例如重构的染料组合物。例如，测定设备可以是流式细胞仪。在这些实施例中，测定包括使用流式细胞术来分析重构的组合物，例如重构的染料组合物。在一些情况下，测定包括使重构的组合物(例如重构的染料组合物)接触电磁辐射(例如光)，例如具有对应于重构的组合物(例如重构的染料组合物)的激发最大值的波长的电磁辐射。测定还可以包括检测从激发的试剂组合物(例如，染料组合物)出射的光。例如，该方法可以包括检测从激发的试剂组合物(例如，染料组合物)发出的对应于该试剂组合物(例如，染料组合物)的发射最大值的一种或多种波长的光。
合适的流式细胞术系统可以包括但不限于在以下文献中描述的那些：Ormerod(主编)的Flow Cytometry:A Practical Approach，牛津大学出版社(1997)；Jaroszeski等人(主编)的Flow Cytometry Protocols,分子生物学方法第91期,胡马纳出版社(1997)；Practical Flow Cytometry，第三版，韦利-李斯出版社(1995)；Virgo等人(2012)的AnnClin Biochem，一月，第49章(第一节)，第17-28页；Linden等人的Semin Throm Hemost，2004年10月，30(5):502-11；Alison等人，J Pathol，2010年10月，222(4):335-344；以及Herbig等人(2007)，Crit Rev Ther Drug Carrier Syst.，24(3):203-255，所述文献的公开内容通过引用并入本文。在某些情况下，感兴趣的流式细胞术系统包括：BD BiosciencesFACSCantoTMII流式细胞仪、BD AccuriTM流式细胞仪、BD Biosciences FACSCelestaTM流式细胞仪、BD Biosciences FACSLyricTM流式细胞仪、BD Biosciences FACSVerseTM流式细胞仪、BD Biosciences FACSymphonyTM流式细胞仪、BD Biosciences LSRFortessaTM流式细胞仪、BD Biosciences LSRFortessTM X-20流式细胞仪和BD Biosciences FACSCaliburTM细胞分选仪、BD Biosciences FACSCountTM细胞分选仪、BD Biosciences FACSLyricTM细胞分选仪和BD Biosciences ViaTM细胞分选仪、BD Biosciences InfluxTM细胞分选仪、BDBiosciences JazzTM细胞分选仪、BD Biosciences AriaTM细胞分选仪和BD BiosciencesFACSMelodyTM细胞分选仪等。
在某些实施例中，主题流式细胞术系统被配置为分选样品的一种或多种颗粒(例如，细胞)。术语“分选”在本文中以其常规含义用来指分离样品的成分(例如，细胞、非细胞颗粒，例如生物大分子)，并且在一些情况下将分离的成分递送至一个或更多个样品收集容器。例如，主题系统可以被配置用于分选具有2种或更多种成分的样品，例如3种或更多种成分，例如4种或更多种成分，例如5种或更多种成分，例如10种或更多种成分，例如15种或更多种成分，并且包括分选具有25种或更多种成分的样品。样品成分中的一种或更多种可以与样品分离并被递送至样品收集容器，例如2种或更多种样品成分、例如3种或更多种样品成分、例如4种或更多种样品成分、例如5种或更多种样品成分、例如10种或更多种样品成分并且包括15种或更多种样品成分可以与样品分离并被递送至样品收集容器。
在一些实施例中，感兴趣的颗粒分选系统被配置为使用封闭的颗粒分选模块来分选颗粒，例如2017年3月28日提交的美国专利公开No.2017/0299493中描述的那些，其公开内容通过引用并入本文。在某些实施例中，使用具有多个分选决策单元的分选决策模块分选样品的颗粒(例如，细胞)，例如使用2019年12月23日提交的美国专利申请No.16/725,756中描述的那些，其公开内容通过引用并入本文。
在一些实施例中，流式细胞仪系统是例如以下美国专利号中描述的流式细胞仪系统：10,006,852；9,952,076；9,933,341；9,784,661；9,726,527；9,453,789；9,200,334；9,097,640；9,095,494；9,092,034；8,975,595；8,753,573；8,233,146；8,140,300；7,544,326；7,201,875；7,129,505；6,821,740；6,813,017；6,809,804；6,372,506；5,700,692；5,643,796；5,627,040；5,620,842；5,602,039；这些专利文献的公开内容通过引用整体并入本文。
也可以使用其他分析方法，例如但不限于液相色谱-质谱系统或气相色谱-质谱系统。例如，测定可以包括使用分析分离装置，例如液相色谱仪(LC)(包括高性能液相色谱仪(HPLC)、微量或纳米液相色谱仪或超高压液相色谱仪(UHPLC)装置)、毛细管电泳设备(CE)或毛细管电泳色谱仪(CEC)设备。质谱仪(MS)系统也可用于测定试剂组合物，例如，染料组合物。质谱仪的示例可以包括但不限于，例如，电喷雾电离(ESI)、大气压化学电离(APCI)、电子轰击(EI)、大气压光电离(APPI)、基质辅助的激光解吸电离(MALDI)或感应耦合离子体(ICP)电离或它们的任意组合。同样，可以采用多种不同质量分析仪中的任何一种，包括飞行时间(TOF)、傅里叶变换离子回旋共振(FTICR)、离子阱、四极或双聚焦磁电扇区质量分析仪，或它们的任意组合。
在某些实施例中，容器包含在完全自动化的设备中。“完全自动化”是指该设备接收容器并制备重构的组合物，例如重构的染料组合物，几乎不需要或不需要人为干预或手动输入到主题系统中。在某些实施例中，主题系统被配置为制备和分析重构的组合物，例如重构的染料组合物，而无需任何人工干预。
在某些实施例中，该方法还包括将重构的组合物(例如，重构的染料组合物)储存一段时间。重构的组合物(例如，重构的染料组合物)可以在测定重构的组合物(例如，重构的染料组合物)之前、期间和/或之后储存一段时间。在一些情况下，将重构的组合物(例如，重构的染料组合物)储存一段时间，例如24小时或更长，或48小时或更长，或72小时或更长时间，或4天或更长时间，或5天或更长时间，或6天或更长时间，或1周或更长时间，或2周或更长时间，或3周或更长时间，或4周或更长时间，或2个月或更长时间，或3个月或更长时间，或4个月或更长时间，或5个月或更长时间，或6个月或更长时间，或9个月或更长时间，或1年或更长时间。在某些情况下，将重构的组合物储存24小时或更长时间。在某些情况下，将重构的组合物储存48小时或更长时间。在某些情况下，将重构的组合物储存72小时或更长时间。在某些情况下，将重构的组合物储存1周或更长时间。在某些情况下，将重构的组合物储存2周或更长时间。在某些情况下，将重构的组合物储存3周或更长时间。
该方法的实施例还可以包括将重构的组合物运输到远程地点。“远程地点”是除了重构染料组合物的地点之外的地点。例如，远程地点可以是同一城市的另一地点(例如，办公室、实验室等)、不同城市的另一地点、不同州的另一地点、不同国家的另一地点等。因此，当一个物品(item)被称为在另一个物品的“远程”时，这意味着这两个物品可以在同一个房间但被分开，或者至少在不同的房间或不同的建筑物中，并且可以相距至少一英里、十英里或一百英里或更远。
实用性
主题容器和方法可用于其中可能需要对生物样品进行细胞分析以用于研究、实验室测试或用于治疗的应用中。在一些实施例中，主题容器和方法有利于分析从流体或组织样品(例如疾病样本，所述疾病包括但不限于肿瘤)获得的细胞。本公开的容器和方法还允许以提高的效率和低成本分析来自生物样品(例如，器官、组织、组织片段、流体)的细胞。
主题容器和方法可用于需要使用两种或更多种试剂(例如，染料组合物)分析样品的应用中。例如，主题容器和方法可用于其中需要使用两种或更多种聚合染料组合物来分析样品的应用中。主题容器和方法的实施例还可用于需要使用两种或更多种聚合染料组合物并结合使用一种或更多种非聚合染料组合物来分析样品的应用中。因此，主题容器和方法可用于使用两种或更多种对应的聚合染料组合物来分析样品中的两种或更多种感兴趣的分析物的应用中。在一些情况下，在容器中还包含非聚合染料组合物的情况下，主题容器和方法可用于使用两种或更多种对应的聚合染料组合物和非聚合染料组合物来分析样品的两种或更多种感兴趣的分析物的应用中。
主题容器和方法可用于需要最小化染料-染料相互作用的应用中。如文中所述，主题容器和方法的实施例提供了不同地定位在容器底部的内表面上的两种或更多种干聚合染料组合物。因此，染料组合物在容器底部的表面上相对于彼此的不同定位有利于染料-染料相互作用的最小化。染料-染料相互作用的最小化可以有利于收集关于使用主题容器进行的测定的更精确和/或准确的数据。例如，与其中提供了两种或更多种染料组合物但这些染料组合物相对于彼此没有不同地定位的容器相比，主题容器和方法可以有利于减少染料-染料相互作用。
套件
本公开的方面还包括套件。所述套件可以包括例如根据本文描述的任何实施例的包含试剂的容器。包含试剂的容器的各方面可以包括：容器底部，该容器底部限定了第一容积并且包含定位在其内表面上的第一干试剂组合物；以及容器壁部，该容器壁部在将容器底部连接到容器壁部的液体密封附接区域处附接到容器底部。
在某些实施例中，该套件包括主题容器和被配置为保持该容器的包装。所述包装可以是密封包装，例如防水蒸气容器，其可选地处于气密和/或真空密封下。在某些情况下，包装是无菌包装，其被配置为将封装在包装中的装置保持在无菌环境中。“无菌”是指基本上不存在微生物(例如真菌、细菌、病毒、孢子形式等)。该套件还可以包括缓冲液。例如，套件可以包括缓冲液，例如样品缓冲液、洗涤缓冲液、测定缓冲液等。套件还可以包括另外的试剂，例如但不限于可检测标记(例如，荧光标记、比色标记、化学发光标记、多色试剂、抗生物素蛋白-链霉抗生物素相关检测试剂、放射性标记、金颗粒、磁性标记等)，等等。在某些实施例中，套件还可以包括校准标准品。例如，套件可以包括一组有标记的珠粒，例如一组标准荧光标记的珠粒。
除了上述组件之外，主题套件还可以包括用于实践主题方法的说明。这些说明可以多种形式存在于主题套件中，其中的一种或多种可以存在于套件中。这些说明可以存在的一种形式是作为在合适的介质或基底上的印刷信息，例如，套件的包装中、在包装插页中等中的一张或多张纸，在其上印刷了信息。另一方式可以是其上已记录或存储有信息的计算机可读介质，例如CD、DVD、蓝光、计算机可读存储器(例如，闪存)等。可能存在的又一种形式是网址，可以通过互联网使用该网址来访问已移除站点处的信息。套件中可以存在任何方便形式的说明。
提供以下示例是为了说明而不是限制。
实验
大部分液体处理器使用飞行液滴分配方案(flying droplet dispenseprotocol)来分配试剂。由于液滴漂移，这种分配方案的位置精度高度依赖于分配高度(分配喷嘴与目标表面之间的距离)。甚至用于样品分析的最小体积的FACS管的总高度也使得很难将分配的位置精度控制在合理的公差内。这种位置精度是实现湿试剂的多次分配同时保持试剂分离并防止BD的Horizon Sirigen染料组合的染料-染料相互作用所需的。例如，当将体积小于500nl的湿试剂分配到5ml的圆底管中时，液滴在到达管底部之前可能会与管的侧面接触，并且如果它确实到达管底部，几乎不可能确保它不会接触之前分配的湿试剂，从而导致染料-染料相互作用。
图4示出了在组装FACS管之前将试剂分配到缩短的管或管底部中的方法的一种实施例。该方法包括(a)分配到容器底部(例如呈缩短的FACS管的形式)中，以减少分配高度影响液滴放置精度的问题，然后干燥分配的试剂，此后(b)附接容器壁部(例如呈管颈部的形式)，以产生本发明的一实施例的完整的容器(例如为完整的FACS管的形式)。如图4所示的2部分式FACS管的方法和设计允许将飞行液滴在纳升范围内精确地分配到FACS管底部的精确的预定位置。
该方法可以最优化地利用市售的基于真空的纳升分配技术来将聚合染料(例如，如上所述的BD HorizonTM Sirigen试剂)空间上分离地分配到短圆底管中。分配到缩短的管中并在液体试剂干燥后构建完整的管提供了提高分配的空间精度的机会。通过短管和管组装技术，可以使用能够在纳升范围内精确地分配体积的许多不同的液体处理器。具有分离的干燥试剂组合的液密管可以与患者样本一起孵育并在流式细胞仪上运行。
减小分配高度降低了液滴漂移导致飞行液滴分配系统中的空间不准确的风险。由于分配长度小于5mm，因此可以分配多种试剂并使它们在短管中保持空间分离。利用的纳升点涂能力(nanoliter spotting capability)，这为生产高参数组合提供了机会，该高参数组合包含多种空间分离的试剂，例如，包括BD HorizonTM Sirigen染料和非聚合染料。随着纳升范围内分配精度的提高，底管中具有较大的表面积以构建更复杂的组合。使用两部分式FACS管和基于真空的分配方法，在一些情况下，除了包含非聚合染料的9色试剂混合物之外，还可以将十种或更多种BD HorizonTM Sirigen染料独立地分配到管的底部孔中。通过纳升分配，8种非聚合染料和1种BD HorizonTM Sirigen染料可以分配在管孔的中心中，并且最多可在其周围点涂10种BD HorizonTM Sirigen染料。管底部的管几何形状计算考虑了用于在分配或干燥期间的液滴漂移的空间因素，以预测在一根管中分配多达19种试剂的可能性。
图5提供了用于演示在5ml FACS管中能适合多少100nl试剂分配(例如，在5mlFACS管中，多少100nl的BD HorizonTM Sirigen染料能适合围绕较大的混合物分配)的计算。
图6示出了截头管中的空间分离的液体分配。图7示出了完全组装好的FACS管，其具有指示管底部和管颈部的界面的连接线700。
尽管有随附的权利要求，本公开还通过以下项(clause)来限定：
1.一种包含试剂的容器，包括：
容器底部，其限定第一容积，并包含定位在其内表面上的第一干试剂组合物，和
容器壁部，其在将容器底部连接到容器壁部的附接区域处附接到容器底部。
2.根据项1的包含试剂的容器，其中，所述容器底部不可逆地附接到所述容器壁部。
3.根据项1-2的包含试剂的容器，其中，所述容器底部包括封闭端和从所述封闭端升起的壁。
4.根据项1-3中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器壁部包括具有壁和开口的第一端的细长构件。
5.根据项1-4中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器壁部和所述容器底部被压配合、卡扣配合或螺纹连接在一起。
6.根据项1-5中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器壁部和所述容器底部彼此溶剂结合、粘合剂结合或焊接。
7.根据项1-6中任一项的包含试剂的容器，其中，所述密封附接区域包括指示所述容器底部与所述容器壁部之间的界面的连接线。
8.根据项1-7中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器底部包括定位在其内表面上的第二干试剂组合物。
9.根据项8的包含试剂的容器，其中，所述第一试剂组合物和第二干试剂组合物包含染料。
10.根据项9的包含试剂的容器，其中，所述染料是聚合染料。
11.根据项10的包含试剂的容器，其中，所述聚合染料是水溶性共轭聚合物。
12.根据项9的包含试剂的容器，其中，所述染料是非聚合染料。
13.根据项9-12中任一项的包含试剂的容器，其中，所述染料是染料部分和特异性结合成员的轭合物。
14.根据项13的包含试剂的容器，其中，所述特异性结合成员包括抗体或其结合片段。
15.根据项8-14中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物附着至所述容器底部的内表面。
16.根据项8-15中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物的直径在0.01mm至5mm的范围内。
17.根据项8-16中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物的表面积在5×10-5mm2到20mm2的范围内。
18.根据项8-17中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物包括相同的尺寸。
19.根据项8-17中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物具有不同的尺寸。
20.根据项8-19中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物或第二干试剂组合物包含两种或更多种染料。
21.根据项8-20中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物定位在所述容器底部的内表面上的不同位置处。
22.根据项8-21中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物通过在0.1mm至200mm的范围内的距离分开。
23.根据项8-20中任一项的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物共同位于所述容器底部的内表面的同一位置处。
24.根据项23的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物通过非染料材料彼此分开。
25.根据项9-24中任一项的包含试剂的容器，其中，第一干试剂组合物和第二干试剂组合物的染料彼此之间的不同之处在于激发最大值和发射最大值中的至少一者。
26.根据项1-25中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器底部包含定位在其内表面上的三种或更多种、四种或更多种、五种或更多种、六种或更多种、十种或更多种、十五种或更多种、或十九种或更多种干试剂组合物。
27.根据项1-26中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器底部的高度在1cm至20cm的范围内。
28.根据项1-27中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器底部的宽度在1cm至20cm的范围。
29.根据项1-28中任一项的包含试剂的容器，其中，由所述容器底部限定的第一容积在0.1ml至10ml的范围内。
30.根据项1-29中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器壁部的高度在1cm至30cm的范围内。
31.根据项1-30中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器壁部限定了在0.1ml至40ml的范围内的容积。
32.根据项1-31中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器的容积在0.1ml至50ml的范围内。
33.根据项1-32中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器是管或小瓶。
34.根据项1-33中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器底部是多孔板的孔。
35.根据项1-34中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器包含玻璃。
36.根据项1-34中任一项的包含试剂的容器，其中，所述容器包含塑料。
37.一种制造包含试剂的容器的方法，该方法包括：
将第一液体试剂组合物定位在限定了第一容积的容器底部的内表面上；
使所述第一液体试剂组合物干燥以产生第一干试剂组合物；以及
将所述容器底部附接到容器壁部，以形成将所述容器底部连接到所述容器壁部的密封附接区域，从而产生包含试剂的容器。
38.根据项37的方法，其中，所述方法进一步包括将第二液体试剂组合物定位在所述容器底部的内表面上与所述第一液体试剂组合物分开的位置处。
39.根据项38的方法，其中，所述第一和第二液体试剂组合物以在0.1mm至200mm的范围内的距离分开。
40.根据项37所述的方法，其中，所述方法进一步包括将第二液体试剂组合物定位在容器底部的内表面上与所述第一液体试剂组合物共处一处的位置处。
41.根据项40的方法，其中，所述第一和第二液体试剂组合物通过非染料材料彼此分开。
42.根据项38-41中任一项的方法，其中，定位所述第一和第二液体试剂组合物包括沉积来自液体处理装置的第一和第二液体试剂组合物。
43.根据项42的方法，其中，所述液体处理装置被配置为沉积纳升体积的所述第一和第二液体试剂组合物中的每一者。
44.根据项43的方法，其中，所述纳升体积的范围为10nl至500nl。
45.根据项38-44中任一项的方法，其中，所述第一和第二液体试剂组合物具有相同的体积。
46.根据项38-44中任一项的方法，其中，所述第一和第二液体试剂组合物具有不同的体积。
47.根据项38-46中任一项的方法，其中，所述方法进一步包括干燥所述第二液体试剂组合物以产生第二干试剂组合物。
48.根据项37-47中任一项的方法，其中，所述干燥包括空气干燥。
49.根据项37-48中任一项的方法，其中，所述干燥包括冻干。
50.根据项37-49中任一项的方法，其中，所述干燥包括加热。
51.根据项37-50中任一项的方法，其中，所述附接包括将所述容器底部和所述容器壁部彼此压配合、卡扣配合或螺纹连接。
52.根据项37-51中任一项的方法，其中，所述附接包括将所述容器底部和所述容器壁部彼此溶剂结合、粘合剂结合或焊接。
53.根据项37-52中任一项的方法，其中，所述方法进一步包括密封所述容器。
54.根据项37-53中任一项的方法，其中，所述容器底部包括封闭端和从所述封闭端升起的壁。
55.根据项37-54中任一项的方法，其中，所述容器壁部包括细长构件，该细长构件具有由壁分隔开的开口的第一端和第二端。
56.根据项37-55中任一项的方法，其中，所述密封附接区域包括指示所述容器底部与所述容器壁部之间的界面的连接线。
57.根据项38-56中任一项的方法，其中，所述第一和第二液体试剂组合物包含染料。
58.根据项57的方法，其中，所述染料是聚合染料。
59.根据项58的方法，其中，所述聚合染料是水溶性共轭聚合物。
60.根据项57的方法，其中，所述染料是非聚合染料。
61.根据项57-60中任一项的方法，其中，所述染料是染料部分和特异性结合成员的轭合物。
62.根据项61的方法，其中，所述特异性结合成员包括抗体或其结合片段。
63.根据项38-62中任一项的方法，其中，所述第一或第二液体试剂组合物包含两种或更多种染料。
64.根据项57-63中任一项的方法，其中，所述第一和第二液体试剂组合物的染料彼此相差激发最大值和发射最大值中的至少一者。
65.根据项37-64中任一项的方法，其中，所述方法包括将三种或更多种、四种或更多种、五种或更多种、六种或更多种、十种或更多种、十五种或更多种、或十九种或更多种液体试剂组合物定位在所述容器底部的内表面上。
66.根据项47-65中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物附着至所述容器底部的内表面。
67.根据项47-66中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物的直径在0.01mm至5mm的范围内。
68.根据项47-67中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物的表面积在5×10-5mm2至20mm2的范围内。
69.根据项47-68中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物具有相同的尺寸。
70.根据项47-68中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物具有不同的尺寸。
71.根据项37-70中任一项的方法，其中，所述容器底部的高度在1cm至20cm的范围内。
72.根据项37-71中任一项的方法，其中，所述容器底部的宽度在1cm至20cm的范围内。
73.根据项37-72中任一项的方法，其中，由所述容器底部限定的第一容积在0.1ml至10ml的范围内。
74.根据项37-73中任一项的方法，其中，所述容器壁部的高度在1cm至30cm的范围内。
75.根据项37-74中任一项的方法，其中，所述容器壁部限定了在0.1ml至40ml的范围内的容积。
76.根据项37-75中任一项的方法，其中，所述容器的容积在0.1ml至50ml的范围内。
77.根据项37-76中任一项的方法，其中，所述容器是管或小瓶。
78.根据项37-77中任一项的方法，其中，所述容器底部是多孔板的孔。
79.根据项37-78中任一项的方法，其中，所述容器包含玻璃。
80.根据项37-78中任一项的方法，其中，所述容器包含塑料。
81.一种方法，包括：
将一定体积的液体引入到包含试剂的容器中，以产生重构的组合物，所述容器包括：
容器底部，其限定了第一容积，并包含定位在其内表面上的第一干试剂组合物，和
容器壁部，其在将所述容器底部连接到所述容器壁部的密封附接区域处附接到所述容器底部。
82.根据项81的方法，其中，所述液体包含生物样品。
83.根据项81-82中任一项的方法，其中，所述容器被密封，并且所述方法包括在结合所述一定体积的液体和所述容器之前去除密封。
84.根据项81-83中任一项的方法，其中，所述结合包括将所述一定体积的液体引入所述容器内部。
85.根据项81-84中任一项的方法，其中，所述方法进一步包括测定重构的组合物。
86.根据项85的方法，其中，所述测定包括流式细胞术地分析所述重构的组合物。
87.根据项81-86中任一项的方法，其中，所述方法进一步包括将所述重构的组合物储存一段时间。
88.根据项81-87中任一项的方法，其中，所述方法进一步包括将所述重构的组合物运输至远程地点。
89.根据项81-88中任一项的方法，其中，所述容器底部包括封闭端和从所述封闭端升起的壁。
90.根据项81-89中任一项的方法，其中，所述容器壁部包括具有壁和开口的第一端的细长构件。
91.根据项81-90中任一项的方法，其中，所述容器壁部和所述容器底部被压配合、卡扣配合或螺纹连接在一起。
92.根据项81-91中任一项的方法，其中，所述容器壁部和所述容器底部彼此溶剂结合、粘合剂结合或焊接。
93.根据项81-92中任一项的方法，其中，所述容器壁部和所述容器底部永久地彼此附接。
94.根据项81-93中任一项的方法，其中，所述密封附接区域包括指示所述容器底部与所述容器壁部之间的界面的连接线。
95.根据项81-94中任一项的方法，其中，所述容器底部包括定位在其内表面上的第二干试剂组合物。
96.根据项95的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物包含染料。
97.根据项96的方法，其中，所述染料是聚合染料。
98.根据项97的方法，其中，所述聚合染料是水溶性共轭聚合物。
99.根据项96的方法，其中，所述染料是非聚合染料。
100.根据项96-99中任一项的方法，其中，所述染料是染料部分和特异性结合成员的轭合物。
101.根据项100的方法，其中，所述特异性结合成员包括抗体或其结合片段。
102.根据项95-101中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物附着至所述容器底部的内表面。
103.根据项95-102中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物的直径在0.01mm至5mm的范围内。
104.根据项95-102中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物的表面积在5×10-5mm2至20mm2的范围内。
105.根据项95-104中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物具有相同的尺寸。
106.根据项95-105中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物具有不同的尺寸。
107.根据项95-106中任一项的方法，其中，所述第一或第二干试剂组合物包含两种或更多种染料。
108.根据项95-107中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物定位在所述容器底部的内表面上的分离的位置处。
109.根据项95-108中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物以在0.1mm至200mm的范围内的距离分开。
110.根据项95-107中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物共同位于容器底部的内表面的同一位置处。
111.根据项110的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物通过非染料材料彼此分开。
112.根据项95-111中任一项的方法，其中，所述第一和第二干试剂组合物的染料彼此之间的不同之处在于激发最大值和发射最大值中的至少一者。
113.根据项81-112中任一项的方法，其中，其中，所述容器底部包括定位在其内表面上的三种或更多种、四种或更多种、五种或更多种、六种或更多种、十种或更多种、十五种或更多种、或十九种或更多种干试剂组合物。
114.根据项81-113中任一项的方法，其中，所述容器底部的高度在1cm至20cm的范围内。
115.根据项81-114中任一项的方法，其中，所述容器底部的宽度在1cm至20cm的范围内。
116.根据项81-115中任一项的方法，其中，由所述容器底部限定的第一容积在0.1ml至10ml的范围内。
117.根据项81-116中任一项的方法，其中，所述容器壁部的高度在1cm至30cm的范围内。
118.根据项81-117中任一项的方法，其中，所述容器壁部限定了在0.1ml至40ml的范围内的容积。
119.根据项81-118中任一项的方法，其中，所述容器的容积在0.1ml至50ml范围内。
120.根据项81-119中任一项的方法，其中，所述容器是管或小瓶。
121.根据项81-120中任一项的方法，其中，所述容器底部是多孔板的孔。
122.根据项81-121中任一项的方法，其中，所述容器包含玻璃。
123.根据项81-121中任一项的方法，其中，所述容器包含塑料。
124.一种套件，包括：
包含试剂的容器，该容器包括：
容器底部，其限定了第一容积并且包含定位在其内表面上的第一干试剂组合物，和
容器壁部，其在将所述容器底部连接到所述容器壁部的密封附接区域处附接到所述容器底部。
125.根据项124的套件，其中，所述容器底部包括封闭端和从封闭端升起的壁。
126.根据项124-125中任一项的套件，其中，所述容器壁部包括具有壁和开口的第一端的细长构件。
127.根据项124-126中任一项的套件，其中，所述容器壁部和所述容器底部被压配合、卡扣配合或螺纹连接在一起。
128.根据项124-127中任一项的套件，其中，所述容器壁部和所述容器底部彼此溶剂结合、粘合剂结合或焊接。
129.根据项124-128中任一项的套件，其中，所述容器壁部和所述容器底部永久地彼此附接。
130.根据项124-129中任一项的套件，其中，所述密封附接区域包括指示所述容器底部与所述容器壁部之间的界面的连接线。
131.根据项124-130中任一项的套件，其中，所述容器底部包括定位在其内表面上的第二干试剂组合物。
132.根据项131的套件，其中，第一和第二干试剂组合物包含染料。
133.根据项132的套件，其中，所述染料是聚合染料。
134.根据项133的套件，其中，所述聚合染料是水溶性共轭聚合物。
135.根据项132的套件，其中，所述染料是非聚合染料。
136.根据项132-135中任一项的套件，其中，所述染料是染料部分和特异性结合成员的轭合物。
137.根据项136的套件，其中，所述特异性结合成员包括抗体或其结合片段。
138.根据项131-137中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物附着至所述容器底部的内表面。
139.根据项131-138中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物的直径在0.01mm至5mm的范围内。
140.根据项131-139中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物的表面积在5×10-5mm2至20mm2的范围内。
141.根据项131-140中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物具有相同的尺寸。
142.根据项131-140中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物具有不同的尺寸。
143.根据项131-142中任一项的套件，其中，所述第一或第二干试剂组合物包含两种或更多种染料。
144.根据项131-143中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物定位在所述容器底部的内表面上的分离的位置处。
145.根据项131-144中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物以在0.1mm至200mm的范围内的距离分离。
146.根据项131-143中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物共同位于容器底部的内表面的同一位置处。
147.根据项146所述的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物通过非染料材料彼此分开。
148.根据项132-147中任一项的套件，其中，所述第一和第二干试剂组合物的染料彼此之间的不同之处在于激发最大值和发射最大值中的至少一者。
149.根据项124-148中任一项的套件，其中，所述容器底部包括定位在其内表面上的三种或更多种、四种或更多种、五种或更多种、六种或更多种、十种或更多种、十五种或更多种、或十九种或更多种干试剂组合物。
150.根据项124-149中任一项的套件，其中，所述容器底部的高度在1cm至20cm的范围内。
151.根据项124-150中任一项的套件，其中，所述容器底部的宽度在1cm至20cm的范围内。
152.根据项124-151中任一项的套件，其中，由所述容器底部限定的第一容积在0.1ml至10ml的范围内。
153.根据项124-152中任一项的套件，其中，所述容器壁部的高度在1cm至30cm的范围内。
154.根据项124-153中任一项的套件，其中，所述容器壁部限定了在0.1ml至40ml的范围内的容积。
155.根据项124-154中任一项的套件，其中，所述容器的容积在0.1ml至50ml范围内。
156.根据项124-155中任一项的套件，其中，所述容器是管或小瓶。
157.根据项124-156中任一项的套件，其中，所述容器底部是多孔板的孔。
158.根据项124-157中任一项的套件，其中，所述容器包含玻璃。
159.根据项124-157中任一项的套件，其中，所述容器包含塑料。
在至少一些先前描述的实施例中，在一个实施例中使用的一个或多个元件可以可互换地在另一个实施例中使用，除非这样的替换在技术上不可行。本领域技术人员将理解，在不脱离要求保护的主题的范围的情况下，可以对上述方法和结构进行各种其他省略、添加和修改。所有这样的修改和变更意在落入通过所附权利要求限定的主题的范围内。
本领域技术人员应当理解，一般而言，本文中使用的术语并且尤其是所附权利要求(例如，所附权利要求的主体)中使用的术语通常意在作为“开放”术语(例如，术语“包含”应被解释为“包含但不限于”，术语“具有”应被解释为“至少具有”，术语“包括”应解释为“包括但不限于”，等等)。本领域技术人员还应当理解，如果意在引入特定数量的权利要求叙述，那么将在权利要求中明确地叙述这样的意图，并且在没有这样的叙述的情况下，不存在这样的意图。例如，为了帮助理解，以下所附权利要求可能包含使用介绍性用语“至少一个”和“一个或更多个”以引入权利要求叙述。然而，此类用语的使用不应被解释为暗示通过不定冠词“一(a)”或“一(an)”引入权利要求叙述将包含此类引入的权利要求叙述的任何特定权利要求限制为仅包含一个这种叙述的实施例，即使当同一权利要求包括介绍性用语“一个或更多个”或“至少一个”以及不定冠词如“一(a)”或“一(an)”(例如，“一(a)”或“一(an)”应被解释为表示“至少一个”或“一个或多个”)也是如此；这同样适用于使用定冠词来引入权利要求叙述。另外，即使明确叙述了所引入的权利要求叙述的具体数量，本领域技术人员也将认识到，这种叙述应当被解释为意味着至少所叙述的数量(例如，仅叙述“两次叙述”而没有其他修饰语表示至少两次叙述，或两次或更多次叙述)。此外，在那些使用类似于“A、B和C等中的至少一者”的惯用语的情况下，一般而言，这样的构造意图是本领域技术人员将理解的该惯用语的含义(例如，“具有A、B和C中的至少一者的系统”将包括但不限于单独具有A、单独具有B、单独具有C、具有A和B一起、具有A和C一起、具有B和C一起和/或具有A、B和C一起等的系统)。在那些使用类似于“A、B或C等中的至少一者”的惯用语的情况下，一般而言，这样的构造意图是本领域技术人员将理解的该惯用语的含义(例如，“具有A、B或C中的至少一者的系统”将包括但不限于单独具有A、单独具有B、单独具有C、具有A和B一起、具有A和C一起、具有B和C一起和/或具有A、B和C一起等的系统)。本领域技术人员还应理解，实际上任何呈现两个或更多个替代术语的转折词和/或用语，无论是在说明书、权利要求书还是附图中，都应被理解为考虑了包括术语中的一项、任一项或两项的可能性。例如，用语“A或B”应理解为包括“A”或“B”或“A和B”的可能性。
另外，在以马库什组合(markush group)的形式描述本公开的特征或方面的情况下，本领域的技术人员应认识到，本公开由此也以马库什组合的任何个体成员或成员子组合的形式进行了描述。
如本领域技术人员应理解的，出于任何和所有目的，例如就提供书面描述而言，本文公开的所有范围还涵盖其任何和所有可能的子范围及子范围的组合。任何列出的范围可以容易地被认为充分描述并且使得相同的范围能够被分解为至少相等的两份、三份、四份、五份、十份等。作为非限制性示例，本文讨论的每个范围可以容易地分解为下面三分之一、中间三分之一和上面三分之一，等等。本领域技术人员还应理解，所有语言如“直到”、“至少”、“大于”、“小于”等包括所叙述的数字并涉及随后可被分解为若干子范围的范围，如上所述的。最后，如本领域技术人员将理解的，范围包括每个单独的成员。因此，例如，具有1-3个物品的组合涉及具有1、2或3个物品的组合。类似地，具有1-5个物品的组合涉及具有1、2、3、4或5个物品的组合，由此类推。
尽管出于清楚理解的目的已经通过图示和示例的方式对前述发明进行了详细描述，但是根据本发明的教导，对于本领域的普通技术人员而言明显的是，在不背离所附权利要求书的精神或范围的前提下，可以对本发明进行某些变更和修改。
相应地，前面仅说明了本发明的原理。应当理解，本领域技术人员将能够设计出各种布置，尽管本文没有明确描述或示出，但是这些布置体现了本发明的原理并且包括在本发明的精神和范围内。此外，本文列举的所有示例和条件语言主要意在帮助读者理解本发明的原理和发明人为进一步发展本领域所做出的构思，并且应解释为不限于这种具体列举的示例和条件。此外，本文中阐述本发明的原理、方面和实施例及其特定示例的所有描述意在涵盖其结构和功能上的等同物。另外，意在使这样的等同物包括当前已知的等同物和将来改进的等同物，即，执行相同功能的改进的任何元件，而与结构无关。而且，无论在权利要求中是否明确地叙述，本文公开的内容都不意在献给公众。
因此，本发明的范围不意在限于本文中示出和描述的示例性实施例。相反，本发明的范围和精神由所附权利要求体现。在权利要求中，35U.S.C.§112(f)或35U.S.C.§112(6)明确地限定了：针对权利要求中的限定内容，仅当在权利要求中的这种限定内容的开头叙述了确切的措词“用于……的装置”或确切的措词“针对……的步骤”时，才得以援引；如果在权利要求的限定内容中没有使用这种确切的措词，则不援引35U.S.C.§112(f)或35U.S.C.§112(6)。
Claims (15)
1.一种包含试剂的容器，包括：
容器底部，其限定了第一容积，并且包含定位在其内表面上的第一干试剂组合物，和
容器壁部，其在将所述容器底部连接到所述容器壁部的附接区域处附接到所述容器底部。
2.根据权利要求1所述的包含试剂的容器，其中，所述容器底部不可逆地附接到所述容器壁部。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的包含试剂的容器，其中，所述容器壁部和所述容器底部被彼此溶剂结合、粘合剂结合或焊接。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的包含试剂的容器，其中，所述容器底部包含定位在其内表面上的第二干试剂组合物。
5.根据权利要求4所述的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物包含染料。
6.根据权利要求5所述的包含试剂的容器，其中，所述染料是聚合染料。
7.根据权利要求4-6中任一项所述的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物和第二干试剂组合物附着至所述容器底部的内表面。
8.根据权利要求4-7中任一项所述的包含试剂的容器，其中，所述第一干试剂组合物或第二干试剂组合物包含两种或更多种染料。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的包含试剂的容器，其中，所述容器底部包含定位在其内表面上的三种或更多种、四种或更多种、五种或更多种、六种或更多种、十种或更多种、十五种或更多种、或十九种或更多种干试剂组合物。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的包含试剂的容器，其中，所述容器是管或小瓶。
11.根据权利要求1-9中任一项所述的包含试剂的容器，其中，所述容器底部是多孔板的孔。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的包含试剂的容器，其中，所述容器包含玻璃或塑料。
13.一种制造包含试剂的容器的方法，该方法包括：
将第一液体试剂组合物定位在限定了第一容积的容器底部的内表面上；
干燥所述第一液体试剂组合物以产生第一干试剂组合物；和
将所述容器底部附接到容器壁部以形成将所述容器底部连接到所述容器壁部的密封附接区域，以产生所述的包含试剂的容器。
14.一种方法，包括：
将一定体积的液体引入到包含试剂的容器中，以产生重构的组合物，所述容器包括：
容器底部，其限定了第一容积，并且包含定位在其内表面上的第一干试剂组合物，和
容器壁部，其在将所述容器底部连接到所述容器壁部的密封附接区域处附接到所述容器底部。
15.一种套件，包括：
包含试剂的容器，所述包含试剂的容器包括：
容器底部，其限定了第一容积并且包含定位在其内表面上的第一干试剂组合物，和
容器壁部，其在将所述容器底部连接到所述容器壁部的密封附接区域处附接到所述容器底部。
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