CN116761610A - Ahr抑制剂和其用途 - Google Patents

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CN116761610A CN202180080581.2A CN202180080581A CN116761610A CN 116761610 A CN116761610 A CN 116761610A CN 202180080581 A CN202180080581 A CN 202180080581A CN 116761610 A CN116761610 A CN 116761610A
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X·M·张
J·塞格
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Ekina Oncology
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Abstract

本发明提供AHR抑制剂和其使用方法。

Description

AHR抑制剂和其用途
技术领域
本发明涉及一种AHR抑制剂(R)-N-(2-(5-氟吡啶-3-基)-8-异丙基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-3-胺(化合物A)以及其与PDx抑制剂(如纳武单抗(nivolumab))组合用于治疗癌症的用途。
背景技术
芳烃受体(AHR)是配体激活的核转录因子，在与配体结合后，所述配体激活的核转录因子从细胞质转移到核，并与芳烃受体核转运蛋白(ARNT)形成异源二聚体(Stevens,2009)。AHR-ARNT复合物与含有二噁英反应元件(DRE)的基因结合以激活转录。许多基因通过AHR调控；最充分证明的基因包含细胞色素P450(CYP)基因CYP1B1和CYP1A1(Murray,2014)。
多种内源性和外源性配体能够结合并激活AHR(Shinde和McGaha,2018；Rothhammer,2019)。AHR的一种内源性配体是犬尿氨酸，其由来自前体色氨酸的吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)和色氨酸2,3-双加氧酶(TDO2)产生。许多癌症过度表达IDO1和/或TDO2，从而产生高水平的犬尿氨酸。通过犬尿氨酸或其它配体激活AHR会更改多种免疫调节基因的基因表达，从而导致先天性免疫系统和适应性免疫系统两者内的免疫抑制(Opitz,2011)。AHR激活导致初始T细胞朝向调控性T细胞(Treg)分化，而不是朝向效应T细胞分化(Funatake,2005；Quintana 2008)。最近示出，激活的AHR上调CD8+T细胞上的程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)以降低其细胞毒性活性(Liu,2018)。在骨髓细胞中，AHR激活导致树突状细胞出现耐受性表型(Vogel,2013)。另外，AHR激活驱动抑制肿瘤巨噬细胞中NF-κB的KLF4的表达，并促进阻断CD8+T细胞功能的CD39表达(Takenaka,2019)。
AHR介导的免疫抑制在癌症中发挥作用，因为其活性会阻止免疫细胞识别和攻击正在生长的肿瘤(Murray,2014；Xue,2018；Takenaka,2019)。
当前的免疫疗法努力试图通过通过治疗性疫苗接种引入癌症抗原或通过调节免疫系统的调节检查点来打破免疫系统对肿瘤细胞和抗原的表观耐受性。T细胞刺激是一个复杂的过程，除了T细胞受体(TCR)识别抗原外，还涉及许多正向和负向共刺激信号的整合(Greenwald等人,Annu Rev Immunol.2004；23:515-48)。总的来说，这些信号控制着T细胞激活与耐受之间的平衡。
最近，免疫治疗方法在几种癌症类型中证明了临床功效，包括黑色素瘤和激素难治性前列腺癌。肿瘤可以通过多种机制调节和逃避宿主免疫反应，包括肿瘤特异性抗原表达和呈递的下调、抗炎细胞因子的分泌以及抑制性配体的上调。T细胞检查点调节剂，如程序性死亡1(PD-1、CD279)是细胞表面分子，当与其同源配体结合时会诱导下调T细胞激活和增殖的信号级联反应。
PD-1是一种关键的免疫检查点受体，由激活的T细胞和B细胞表达并介导免疫抑制。PD-1是CD28受体家族的成员，所述家族包括CD28、CTLA-4、ICOS、PD-1和BTLA。已经鉴定出PD-1的两种细胞表面糖蛋白配体，即程序性死亡配体-1(PD-L1)和程序性死亡配体-2(PD-L2)，它们在抗原呈递细胞以及许多人类癌症中表达并已显示在与PD-1结合后下调T细胞激活和细胞因子分泌。PD-1/PD-L1相互作用的抑制在临床前模型中介导有效的抗肿瘤活性(美国专利第8,008,449号和第7,943,743号)，并且PD-1/PD-L1相互作用的抗体抑制剂用于治疗癌症已进入临床试验(Brahmer等人,2010；Topalian等人,20l2a；Topalian等人,2014；Hamid等人,2013；Brahmer等人,2012；Flies等人,2011；Pardoll,2012；Hamid和Carvajal,2013)，并且目前已获准用于某些癌症适应症。
发明内容
已发现AHR抑制剂(R)-N-(2-(5-氟吡啶-3-基)-8-异丙基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-3-胺(化合物A)与PDx抑制剂(如纳武单抗)的组合在治疗癌症方面具有协同作用。
因此，在一个方面，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，以及PDx抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂选自本文所述的那些。在一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-1抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-L1/L2抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是抗PD-1抗体。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是派姆单抗(pembrolizuma b)。
在另一方面，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及PDx抑制剂。在一些实施方案中，化合物A的代谢物选自本文所述的那些。在一些实施方案中，PDx抑制剂选自本文所述的那些。在一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-1抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-L1/L2抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是抗PD-1抗体。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是派姆单抗。
在一些实施方案中，癌症选自本文所述的那些。
还发现化合物A与拓扑异构酶抑制剂如多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物的组合在治疗癌症方面具有协同作用。在另一方面，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，以及多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。在另一方面，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。在一些实施方案中，化合物A的代谢物选自本文所述的那些。
在一些实施方案中，癌症选自本文所述的那些。
附图说明
图1展示了化合物A、抗PD-1抗体以及化合物A和抗PD-1抗体的组合疗法对C57Bl/6小鼠中B16-IDO1肿瘤生长的影响。
图2展示了化合物A、抗PD-1抗体以及化合物A和抗PD-1抗体的组合疗法对BALB/cJ小鼠中CT26.WT肿瘤生长的影响。
图3展示了化合物A、抗PD-1抗体以及化合物A和抗PD-1抗体的组合疗法对CT26.WT小鼠模型中的生存期的影响。
图4展示了脂质体多柔比星Doxil导致增加的AHR途径激活并增加IFN-γ表达。
图5展示了化合物A与脂质体多柔比星Doxil的组合对BALB/cJ小鼠中CT26.WT肿瘤生长的协同活性。
图6展示了化合物A与脂质体多柔比星Doxil的组合对CT26.WT小鼠模型中生存的协同活性。
图7展示了化合物A治疗不影响脂质体多柔比星Doxil的代谢。
具体实施方式
1.本发明的某些实施方案的一般描述
如本文所述，化合物A和PDx抑制剂的组合在各种肿瘤模型中展示了治疗癌症的意想不到的协同作用，包括例如改善长期肿瘤生长抑制和持久的完全反应，以及提高生存率。
化合物A是一种被设计成靶向和选择性地抑制AHR的新型的合成小分子抑制剂，并且正在开发为经口施用治疗剂。已发现有多种肿瘤类型具有如通过AHR基因特征确定的高水平的AHR信号传导。犬尿氨酸和其它配体水平升高引起的高水平AHR激活，以及其在驱动免疫抑制性肿瘤微环境(TME)中的作用，使AHR成为多种癌症类型的有吸引力的治疗靶标。
化合物A有效抑制人和啮齿动物细胞系中的AHR活性(约35-150nM半数最大抑制浓度[IC50])，并且对AHR的选择性高于其它受体、转运蛋白和激酶。在人T细胞测定中，化合物A诱导激活的T细胞状态。化合物A抑制CYP1A1和白介素(IL)-22基因表达，并导致促炎细胞因子，如IL-2和IL-9增加。
化合物A的非临床安全性已在啮齿动物和非啮齿动物物种的一系列药理学、单剂量和重复剂量毒理学研究中进行了评估，包含在大鼠和猴子中进行的28天良好实验室规范(GLP)研究。这些与人潜在相关的研究中值得注意的发现包含：呕吐、便溏、脱水、体重减轻、非腺胃溃疡和水肿(大鼠)、细精管变性和附睾管腔中的碎片(大鼠)、至多11％的QTc延长(猴子)以及胸腺重量和皮质淋巴细胞减少(猴子)。除大鼠睾丸变化外，所有变化均在停止给药2周之后消退或正在消退。来自这些研究的非临床安全性评估支持化合物A在人体中的临床评估。200mg、400mg、800mg和1200mg每天一次(QD)化合物A的剂量已在人类患者中进行了测试，作为单药疗法没有出现严重不良事件(SAE)。
纳武单抗(BMS-936558)是一种人单克隆抗体(IgG4κ免疫球蛋白)，可阻断PD-1以及其配体PD-L1和PD-L2之间的相互作用。在体外，纳武单抗(BMS-936558)以高亲和力(EC500.39-2.62nM)结合PD-1，并抑制PD-1与其配体PD-L1和PD-L2的结合(IC50±1nM)。纳武单抗特异性结合PD-1。纳武单抗对PD-1途径的阻断导致混合淋巴细胞反应(MLR)中增殖和IFN-γ释放的可再现增强。使用人外周血单核细胞(PBMC)的巨细胞病毒(CMV)再刺激分析，纳武单抗对抗原特异性回忆反应的影响表明，相对于同型匹配对照，纳武单抗以剂量依赖性方式增强CMV特异性记忆T细胞的IFN-γ分泌。在几种具有免疫活性的小鼠肿瘤模型(MC38、SA1/N和PAN02)中，纳武单抗的鼠类类似物对PD-1的体内阻断增强了抗肿瘤免疫反应并导致肿瘤排斥(Wolchok JD,Clin Cancer Res.2009；15:7412-20)。
在参与者中研究了纳武单抗的药物动力学(PK)，剂量范围为0.1至10mg/kg，作为单剂量或每2或3周多个剂量的纳武单抗施用。几何平均(％CV％)清除率(CL)为9.5mL/h(49.7％)，几何平均稳态分布体积(Vss)为8.0L(30.4％)，并且几何平均消除半衰期(t1/2)为26.7天(101％)。当以3mg/kg Q2W施用时，截至12周达到纳武单抗的稳态浓度，并且全身蓄积约为3倍。在每2周施用0.1至10mg/kg的剂量范围内，纳武单抗的暴露量与剂量成比例增加。纳武单抗的清除率随体重增加而增加。PK分析表明，以下因素对纳武单抗的CL没有临床重要影响：年龄(29至87岁)、性别、种族、基线LDH、PD-L1。PK分析表明，基于年龄、性别、种族、肿瘤类型、基线肿瘤大小和肝功能损害，纳武单抗的CL没有差异。
尽管ECOG状态、基线肾小球滤过率(GFR)、白蛋白和体重对纳武单抗CL有影响，但该影响没有临床意义。当纳武单抗与伊匹单抗(ipilimumab)组合施用时，纳武单抗的CL增加24％，而对伊匹单抗的清除率没有影响。另外，除了3mg/kg Q2W方案外，还进行了PK和暴露反应分析以支持使用240mg Q2W和480mg Q4W剂量。使用PK模型，纳武单抗在240mg固定剂量Q2W和480mg固定剂量4QW下的时间平均暴露几乎与体重为80kg的参与者的3mg/kg剂量相同，80kg是纳武单抗临床试验中的近似中位体重。
免疫疗法的最佳持续时间是一个重要的问题，并且仍在继续研究中。越来越多的数据表明，两年的PD-1检查点抑制剂治疗足以获得长期益处。CA209003是一项剂量递增队列扩展试验，用于评估纳武单抗在先前接受过治疗的晚期实体瘤患者(包括129名非小细胞肺癌受试者)中的安全性和临床活性，规定最长治疗持续时间为2年。在完成2年治疗后停用纳武单抗的16名非小细胞肺癌(NSCLC)受试者中，12名受试者生存>5年并且在没有任何后续疗法的情况下保持无进展。在CA209003NSCLC队列中，总生存(OS)曲线在2年后开始趋于稳定，2年OS率为25％，并且3年为18％(Brahmer J等人.口头报告发表于：AmericanAssociation for Cancer Research(AACR)Annual Meeting；2017年4月1-5日；Washington,DC,USA.中)。这些生存结果与之前接受过治疗的NSCLC的3期研究相似，在该研究中纳武单抗治疗一直持续到进展或不可接受的毒性(鳞状和非鳞状NSCLC的2年OS率分别为23％和29％，并且3年OS率分别为16％-18％)(Felip E等人,Three-year follow-upfrom Checkmate 017/057:Nivolumab versus docetaxel in patients with previouslytreated advanced non-small lung cancer(NSCLC).European Society of MedicalOncology Annual Meeting的海报讨论报告.2017年9月8-12日；Madrid,Spain.Poster1301PD)。
在另一种PD-1抑制剂派姆单抗的临床研究中已经报道了类似的结果。Keynote-010是派姆单抗(每3周2mg/kg或10mg/kg)与多西他赛在先前接受过治疗的PD-L1阳性晚期NSCLC受试者中进行的一项随机3期试验，规定最长治疗持续时间为派姆单抗2年。与多西他赛相比，派姆单抗2mg/kg(HR 0.72，p＝0.00017)和派姆单抗10mg/kg(HR 0.60，p<0.00001)均显著延长OS，两个派姆单抗组的OS稳定期均超过2年。在接受派姆单抗治疗的690名患者中，47名患者完成了2年的派姆单抗治疗并停止了治疗。大多数人能够保持他们的反应，包括那些病情稳定的患者，只有2名患者(4％)在停药2年后确认进展(Herbst RS等人.WorldConference on Lung Cancer的海报发表2016年12月4-7日；Vienna,Austria.)。Keynote-006是一项比较派姆单抗与伊匹单抗治疗晚期黑色素瘤患者的随机3期研究，所述研究也规定了派姆单抗治疗的最长持续时间为2年。556名随机接受派姆单抗治疗的患者中有104名(19％)完成了2年的治疗。派姆单抗完成后的中位随访时间为9个月，这些患者的进展或死亡估计风险为9％(Robert,C等人；Journal of Clinical Oncology 2017 35:15_增刊,9504-9504)。
相比之下，仅1年的较短纳武单抗疗程与先前接受过治疗的NSCLC患者进展风险增加相关，表明可能需要超过1年的治疗。在CA209153中，完成1年纳武单抗疗法的先前接受过治疗的晚期NSCLC患者被随机分至继续治疗或停止治疗，并可选择在进展时重新治疗。在1年时仍在接受治疗且没有进展的163名患者中，与随机分至停止治疗的患者相比，随机分至接继续纳武单抗治疗的患者的无进展生存期(PFS)显著改善，中位PFS(随机分组后)分别为未达到与10.3个月；HR＝0.42(95％ CI，0.25至0.71)。随机分组后的中位随访时间为14.9个月，继续治疗的患者也有更长寿的趋势(OS HR＝0.63[95％ CI：0.33，1.20])。值得注意的是，两组的PFS曲线在随机分组后约1年(即，治疗开始后2年)达到稳定状态，表明延长治疗超过2年的益处可能微乎其微(Spigel DR等人,European Society of MedicalOncology Annual Meeting的口头发表.2017年9月8-12日；Madrid,Spain)。
纳武单抗已获得监管批准用于多种癌症类型，包括局部晚期或转移性尿路上皮癌患者，所述患者在含铂化疗期间或之后有疾病进展，或者在含铂化疗的新辅助或辅助治疗后的12个月内病情进展。尽管纳武单抗在改善罹患多种癌症类型的患者的结果方面取得了成功，但仍有机会通过将其与其它疗法(包括化合物A)组合来改善纳武单抗的临床活性。
AHR已被证明可以上调CD8+T细胞上的PD-1。不希望受理论束缚或限制，对于至少某些癌症患者亚群，化合物A可以克服驱动对PDx抑制剂(例如纳武单抗)的抗性的免疫抑制作用，并且因此化合物A和PDx抑制剂的组合可以具有协同效应。如本文所述，化合物和PDx抑制剂的组合在各种小鼠肿瘤模型中表现出协同作用，包括例如改善长期肿瘤生长抑制和持久完全反应，以及提高生存率。例如，在工程改造为过度表达IDO1的小鼠B16黑色素瘤模型(一种皮内植入的原位模型)中，与媒剂相比，化合物A与PDx抑制剂的组合产生86％的显著TGI(p＝0.0001)，并且与抗PD-1抗体单药疗法组相比为71.2％(p＝0.0109)(图1)。另外，在具有导致高水平犬尿氨酸的高内源性IDO1表达的BALB/c小鼠的CT26小鼠结肠腺癌模型中，化合物A与PDx抑制剂的组合在10只小鼠中的7只中导致长期肿瘤生长抑制和持久的完全反应，相比之下，PDx抑制剂单药疗法队列中有4例完全反应。
因此，本文提供用于治疗癌症的方法和用途，其包括向有需要的患者施用化合物A和PDx抑制剂，例如抗PD-1抗体。本文显示的数据表明，当与PDx抑制剂(例如抗PD-1抗体)组合时，化合物A会产生协同效应并增强长期抗肿瘤反应。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。
在一个方面，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐和PDx抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂选自本文所述的那些。在一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-1抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-L1/L2抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是抗PD-1抗体。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是派姆单抗。
在另一方面，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，和PDx抑制剂。在一些实施方案中，化合物A的代谢物选自本文所述的那些。在一些实施方案中，PDx抑制剂选自本文所述的那些。在一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-1抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-L1/L2抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是抗PD-1抗体。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是派姆单抗。
在一些实施方案中，癌症选自本文所述的那些。
还如本文所述，化合物A和拓扑异构酶抑制剂即脂质体多柔比星Doxil的组合在治疗癌症中表现出意想不到的协同作用，包括例如改善长期肿瘤生长抑制和持久的完全反应，以及提高生存率。
多柔比星是一种DNA嵌入剂，它干扰基因组DNA复制和损伤修复反应，并充当拓扑异构酶抑制剂。多柔比星诱导免疫原性细胞死亡，这可以通过激活树突状细胞和随后激活特异性T细胞反应来增强抗肿瘤免疫反应(Casares等人,2005)。多柔比星用作多种癌症，例如卵巢癌、各种肉瘤和多发性骨髓瘤的化疗药物。
如本文所述，化合物A与脂质体多柔比星Doxil的组合的抗肿瘤活性在结肠直肠癌的鼠类同源模型(CT26.WT)中进行了探索。化合物A和脂质体多柔比星Doxil的组合在该模型中表现出协同作用，包括例如改善长期肿瘤生长抑制和持久的完全反应，以及提高生存率。
因此，本文提供用于治疗癌症的方法和用途，其包括向有需要的患者施用化合物A和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。本文所示的数据表明，当与多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物组合时，化合物A会产生协同效应并增强长期抗肿瘤反应。
在一个方面，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。
在另一方面，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。在一些实施方案中，化合物A的代谢物选自本文所述的那些。
在一些实施方案中，癌症选自本文所述的那些。在一些实施方案中，多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物选自本文所述的那些。
2.定义
如本文所用，术语“化合物A”是指下式的AHR抑制剂(R)-N-(2-(5-氟吡啶-3-基)-8-异丙基吡唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-4-基)-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-3-胺：
在一些实施方案中，化合物A或其药学上可接受的盐是无定形的。在一些实施方案中，化合物A或其药学上可接受的盐呈晶体形式。
如本文所用，术语“化合物A的代谢物”是指化合物A在代谢之后的中间体或最终产物。在一些实施方案中，化合物A的代谢物是下式的化合物：
(化合物B)，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，化合物A的代谢物是下式的化合物：/>(化合物C)，或其药学上可接受的盐。
如本文所用，术语“其前药”是指在代谢之后产生所叙述的化合物的化合物。在一些实施方案中，化合物A的代谢物的前药是在代谢之后产生化合物A的代谢物的化合物。在一些实施方案中，化合物A的代谢物的前药是在代谢之后产生化合物B或其药学上可接受的盐的化合物。在一些实施方案中，化合物A的代谢物的前药是在代谢之后产生化合物C或其药学上可接受的盐的化合物。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指在合理的医学判断范围内适合用于与人和低等动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应等并与合理的益处/风险比相称的那些盐。药学上可接受的盐是本领域众所周知的。例如，S.M.Berge等人在J.Pharmaceutical Sciences,1977,66,1-19中详细描述了药学上可接受的盐，所述文献通过引用并入本文。本发明的化合物的药学上可接受的盐包含衍生自合适的无机和有机酸和碱的盐。药学上可接受的无毒的酸加成盐的实例是与无机酸，如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸或与有机酸，如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸形成或通过使用本领域中所使用的其它方法，如离子交换形成的具有氨基的盐。其它药学上可接受的盐包含己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、十二烷基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等。
衍生自适当碱的盐包含碱金属盐、碱土金属盐、铵盐和N+(C1–4烷基)4盐。代表性碱金属或碱土金属盐包含钠、锂、钾、钙、镁等。在适当的情况下，另外的药学上可接受的盐包含使用如卤化物、氢氧化物、羧酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、低级烷基磺酸盐和芳基磺酸盐等抗衡离子形成的无毒铵、季铵和胺阳离子。
除非另有说明，否则本文描绘的结构也意味着包含结构的所有异构(例如，对映、非对映和几何(或构象))形式；例如，每个不对称中心的R和S构型、Z和E双键异构体以及Z和E构象异构体。因此，本发明的化合物的单一立体化学异构体以及对映体、非对映体及几何体(或构象)混合物处于本发明的范围内。除非另有说明，否则本发明的化合物的所有互变异构形式均处于本发明的范围内。另外，除非另有说明，否则本文所描绘的结构也意指包含不同之处仅为存在一或多个同位素富集原子的化合物。例如，具有包含由氘或氚置换氢或由13C-或14C-富集碳置换碳的本发明结构的化合物处于本发明的范围内。根据本发明，此类化合物可用作例如分析工具、生物分析中的探针或治疗剂。
如本文所用，“PDx抑制剂”是指抑制PD-1信号传导途径的任何抑制剂或阻断剂或拮抗剂。因此，PDx抑制剂包括通过阻断或抑制PD-1受体和/或通过阻断或抑制PD-1配体PD-L1和/或PD-L2来抑制PD-1信号传导的任何抑制剂或阻断剂或拮抗剂。换句话说，术语PDx抑制剂涵盖本文所述的术语PD-1抑制剂和PD-L1/L2抑制剂。PD-1信号传导已显示可抑制CD28介导的IL-2、IL-10、IL-13、干扰素-γ(IFN-γ)和Bcl-xL的上调。还注意到PD-1表达会抑制T细胞激活和先前激活细胞的扩增。PD-1负调节作用的证据来自对PD-1缺陷小鼠的研究，所述小鼠会产生多种自身免疫表型(Sharpe AH等人,Nature Immunol.2007；8:237-245)。
如本文所用，“PD-1抑制剂”可以是任何PD-1抑制剂或PD-1阻断剂。在一些实施方案中，其选自本文所述的PD-1抑制剂或阻断剂之一。关于PD-1抑制剂，术语“抑制剂”和“阻断剂”在本文中可互换使用。在一些实施方案中，PD-1抑制剂是指抗体、其抗原结合部分、抗原结合片段、变体、缀合物或生物类似物。在一些实施方案中，PD-1抑制剂是指化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、水合物、共晶或前药。
在一些实施方案中，PD-1抑制剂是抗体、其抗原结合片段或其抗原结合部分，包括Fab片段或单链可变片段(scFv)。在一些实施方案中，PD-1抑制剂是多克隆抗体。在一些实施方案中，PD-1抑制剂是单克隆抗体。在一些实施方案中，PD-1抑制剂与PD-1竞争结合，和/或结合PD-1上的表位。在一些实施方案中，PD-1抗体与PD-1竞争结合，和/或结合PD-1上的表位。在一些实施方案中，PD-1抑制剂对PD-1具有选择性，因为PD-1抑制剂与PD-1结合或相互作用的浓度远低于它与其它受体结合或相互作用的浓度。适用于所公开的组合物、方法和用途的抗PD-1抗体是以高特异性和亲和力结合PD-1、阻断PD-L1和/或PD-L2的结合并抑制PD-1信号传导途径的免疫抑制作用的抗体。在本文公开的任何组合物、方法或用途中，抗PD-1“抗体”包括结合PD-1受体并在抑制配体结合和上调免疫系统方面表现出与PD-1受体相似的功能特性的抗原结合部分或抗原结合片段全抗体。
本领域已知的抗PD-1抗体可用于本文所述的方法和用途。美国专利第8,008,449号中公开了多种以高亲和力特异性结合PD-1的人单克隆抗体，包括纳武单抗。美国专利第8,008,449号中公开的抗PD-1人抗体已被证明具有以下一种或多种特征：(a)以1×107M或更小的KD结合人PD-1，如使用Biacore生物传感器系统通过表面等离子体共振所测定；(b)基本上不与人类CD28、CTLA-4或ICOS结合；(c)在混合淋巴细胞反应(MLR)分析中增加T细胞增殖；(d)在MLR分析中增加干扰素的产生；(e)在MLR分析中增加IL-2分泌；(f)与人PD-1和食蟹猴PD-1结合；(g)抑制PD-L1和/或PD-L2与PD-1的结合；(h)刺激抗原特异性记忆反应；(i)刺激抗体反应；以及(j)在体内抑制肿瘤细胞生长。用于本文所述的方法和用途的抗PD-1抗体包括特异性结合人PD-1并表现出至少一种，在一些实施方案中，至少五种前述特征的单克隆抗体。
其它抗PD-1单克隆抗体已描述于例如以下各者中：美国专利第6,808,710号、第7,488,802号、第8,168,757号和第8,354,509号、美国公开案第2016/0272708号和PCT公开案第WO 2012/145493号、第WO 2008/156712号、第WO 2015/112900号、第WO 2015/112800号、第WO 2014/206107号、第WO 2015/35606号、第WO 2015/085847号、第WO 2014/179664号、第WO 2017/020291号、第WO 2017/020858号、第WO 2016/197367号、第WO 2017/024515号、第WO 2017/025051号、第WO 2017/123557号、第WO 2016/106159号、第WO 2014/194302号、第WO 2017/040790号、第WO 2017/132827号、第WO 2017/106061号、第WO 2017/19846号、第WO2017/024465号、第WO 2017/025016号、第WO 2017/132825号和第WO 2017/133540号，其各自的内容通过引用整体并入本文中。
在一些实施方案中，用于本文所述的方法和用途的抗PD-1抗体选自纳武单抗(也称为、5C4、BMS-936558、MDX-1106和ONO-4538)、派姆单抗(pembrolizumab)(Merck；也称为/>、兰博利珠单抗(lambrolizumab)和MK-3475；参见WO2008/156712)、PDR001(Novartis；也称为斯巴达珠单抗(spartalizumab)；参见WO 2015/112900)、MEDI-0680(AstraZeneca；也称为AMP-514；参见WO 2012/145493)、西米普利单抗(cemiplimab)(Regeneron；也称为REGN-2810；参见WO 2015/112800)、JS001或“特瑞普利单抗(toripalimab)”(TAIZHOU JUNSHI PHARMA；参见Si-Yang Liu等人,J.Hematol.Oncol.70:136(2017))、BGB-A317(“替雷利珠单抗(Tislelizumab)”；Beigene；参见WO 2015/35606和US 2015/0079109)、INCSHR1210(Jiangsu Hengrui Medicine；也称为“卡瑞利珠单抗(camrelizumab)”、SHR-1210；参见WO 2015/085847；Si-Yang Liu等人,J.Hematol.Oncol.70:136(2017))、TSR-042或“多塔利单抗(dostarlimab)”(TesaroBiopharmaceutical；也称为ANB011；参见WO2014/179664)，GLS-010(Wuxi/Harbin GloriaPharmaceuticals；也称为WBP3055；参见Si-Yang Liu等人,J.Hematol.Oncol.70:136(2017))、AM-0001(Armo)、STI-1110(Sorrento Therapeutics；参见WO 2014/194302)、AGEN2034或“巴替利单抗(balstilimab)”(Agenus；参见WO 2017/040790)、MGA012或“瑞弗利单抗(retifanlimab)”(Macrogenics，参见WO 2017/19846)、IBI308或“信迪利单抗(sinitilimab)”(Innovent；参见WO 2017/024465、WO 2017/025016、WO 2017/132825和WO2017/133540)、BCD-100或“贝伐珠单抗(bevacizumab)”(Biocad)、JTX-4014(JounceTherapeutics)。
因此，在一些实施方案中，用于本文所述的方法和用途的抗PD-1抗体选自纳武单抗、派姆单抗、斯巴达珠单抗、MEDI-0680、西米普利单抗、特瑞普利单抗、替雷利珠单抗、卡瑞利珠单抗、多塔利单抗、GLS-010、AM-0001、巴替利单抗、瑞弗利单抗、信迪利单抗、贝伐珠单抗和JTX-4014。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是纳武单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是派姆单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是斯巴达珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是MEDI-0680。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是西米普利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是特瑞普利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是替雷利珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是卡瑞利珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是多塔利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是GLS-010。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是AM-0001。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是巴替利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是瑞弗利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是信迪利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是贝伐珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抑制剂是JTX-4014。
在一些实施方案中，用于本文所述的方法和用途的抗PD-1抗体是纳武单抗。纳武单抗在国际专利公开案第WO 2006/121168号中称为5C4。纳武单抗的CAS登记号为946414-94-4，并且本领域普通技术人员也称为BMS-936558、MDX-1106或ONO-4538。纳武单抗是一种全人IgG4(S228P)抗体，可阻断PD-1受体并选择性地阻止与PD-1配体(PD-L1和PD-L2)的相互作用，从而阻断抗肿瘤T细胞功能的下调(美国专利第8,008,449号；Wang等人,2014)。纳武单抗在各种形式的癌症中的临床安全性和有效性描述于Wang等人,Cancer ImmunolRes.2014,2,846-56；Page等人,Ann.Rev.Med.,2014,65,185-202；和Weber等人,J.Clin.Oncology,2013,31,4311-4318中。纳武单抗已在多种晚期实体瘤中显示出活性，包括肾细胞癌(肾腺癌或肾上腺样瘤)、黑色素瘤和非小细胞肺癌(NSCLC)(Topalian等人,2012；Topalian等人,2014；Drake等人,2013；WO 2013/173223)。
纳武单抗单克隆抗体包含具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的重链和具有SEQ IDNO:2的氨基酸序列的轻链。纳武单抗具有22-96、140-196、254-314、360-418、22″-96″、140″-196″、254″-314″和360″-418″处的重链内二硫键；23'-88'、134'-194'、23′″-88′″和134′″-194′″处的轻链内二硫键；127-214'、127″-214′″处的重-轻链间二硫键；219-219″和222-222″处的重-重链间二硫键；以及290、290″处的N-糖基化位点(H CH2 84.4)。
在其它实施方案中，抗PD-1抗体包含纳武单抗的重链和轻链CDR或可变区(VR)。纳武单抗的可变重(VH)区包含SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列，并且纳武单抗的可变轻(VL)区包含SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列。纳武单抗抗PD-1抗体包含分别具有SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7中所阐述的序列的重链CDR1、CDR2和CDR3结构域，以及分别具有SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10中所阐述的序列的轻链CDR1、CDR2和CDR3结构域。
在一些实施方案中，抗PD-1抗体是根据美国专利第8,008,449号或第8,779,105号公开和/或制备的抗体，所述专利的内容通过引用整体并入本文中。例如，在一个实施方案中，抗PD-1抗体选自5C4(本文称为纳武单抗)、17D8、2D3、4H1、4AH1、7D3和5F4，描述于美国专利第8,008,449号中，所述专利的内容通过引用整体并入本文中。抗PD-1抗体17D8、2D3、4H1、5C4和4A11均针对人PD-1，特异性结合PD-1，不结合CD28家族的其它成员。这些抗体的序列和CDR区提供于美国专利第8,008,449号，特别是图1至图12中；其全部通过引用整体并入本文中。
在一些实施方案中，用于方法和本文所述的抗PD-1抗体是派姆单抗。派姆单抗是针对人细胞表面受体PD-1(程序性死亡-1或程序性细胞死亡-1)的人源化单克隆IgG4(S228P)抗体，并且描述于例如美国专利第8,354,509号和第8,900,587号中。派姆单抗在国际专利公开案第WO 2008/156712 A1号、美国专利第8,354,509号、第8,900,587号和第8,952,136号中称为h409A11，所述文献的内容均通过引用整体并入本文中。派姆单抗具有免疫球蛋白G4，抗(人蛋白PDCD1(程序性细胞死亡1))(人-小家鼠(Mus musculus)单克隆重链)，与人-小鼠单克隆轻链的二硫键，二聚体结构。派姆单抗的结构也可描述为免疫球蛋白G4，抗(人类程序性细胞死亡1)；人源化小鼠单克隆[228-L-脯氨酸(H10—S>P)]γ4重链(134-218')-与人源化小鼠单克隆κ轻链二聚体的二硫键(226-226″:229-229″)-双二硫键。派姆单抗的CAS登记号为1374853-91-4，并且也称为兰博利珠单抗、MK-3475和SCH—900475。派姆单抗在各种癌症中的临床安全性和有效性描述于Fuerst,Oncology Times,2014,36,35-36；Robert等人,Lancet,2014,384,1109-17；和Thomas等人,Exp.Opin.Biol.Ther.,2014,14,1061-1064中。派姆单抗单克隆抗体包含一条氨基酸序列为SEQ ID NO:12的重链和一条氨基酸序列为SEQ ID NO:14的轻链，二硫键和糖基化信息如下所示：
重链
轻链
二硫键
糖基化位点(N)
Asn-297 Asn-297”
在其它实施方案中，抗PD-1抗体包含派姆单抗的重链和轻链CDR或VR。派姆单抗的可变重(VH)区包含SEQ ID NO:11的氨基酸残基20至446的序列，并且可变轻(VL)区包含SEQID NO:14中所示的序列。派姆单抗抗PD-1人抗体包含SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16和SEQID NO:17的三个轻链CDR，以及SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20的三个重链CDR。
在其它实施方案中，抗PD-1抗体是美国专利第8,354,509号、第8,900,587号和第8,952,136号中公开的抗体，所述文献的内容通过引用整体并入本文中。在另一实施方案中，抗PD-1抗体和其它PD-1抑制剂包括美国专利第8,287,856号、第8,580,247号和第8,168,757号，以及美国专利申请公开案第2009/0028857A1号、第2010/0285013A1号、第2013/0022600A1号和第2011/0008369A1号中描述的那些，所述文献的内容通过引用整体并入本文中。
用于公开的组合物、方法和用途的抗PD-1抗体还包括分离的抗体，其特异性结合人PD-1并与本文公开的任何抗PD-1抗体，例如纳武单抗交叉竞争结合人PD-1(参见例如美国专利第8,008,449号和第8,779,105号；WO 2013/173223)。在一些实施方案中，抗PD-1抗体结合与本文所述的任何抗PD-1抗体，例如纳武单抗相同的表位。抗体交叉竞争结合抗原的能力表明这些单克隆抗体结合抗原的相同表位区域并在空间上阻碍其它交叉竞争抗体与所述特定表位区域的结合。由于它们与PD-1的相同表位区域结合，预期这些交叉竞争抗体具有与参考抗体，例如纳武单抗非常相似的功能特性。交叉竞争抗体可以根据它们在标准PD-1结合分析，例如Biacore分析、ELISA分析或流式细胞术中与纳武单抗交叉竞争的能力轻松鉴定(参见例如WO 2013/173223)。
在某些实施方案中，交叉竞争结合人PD-1，或结合人PD-1抗体(例如纳武单抗)的相同表位区域的抗体是单克隆抗体。对于施用于人类受试者，这些交叉竞争抗体是嵌合抗体、工程化抗体或人源化抗体或人抗体。此类嵌合、工程化、人源化或人单克隆抗体可以通过本领域熟知的方法制备和分离。
在另一实施方案中，抗PD-1抗体是美国专利第8,735,553B号中公开的抗体，所述专利的内容通过引用整体并入本文中。在另一实施方案中，抗PD-1抗体是市售单克隆抗体，例如抗m-PD-1克隆J43(目录号BE0033-2)和RMPI-14(目录号BE0146)(Bio X Cell,Inc.,West Lebanon,N.H.,USA)。
前述实施方案中讨论和引用的抗PD-1抗体序列汇总于表1中。
表1
表1-续
表1-续
在一些实施方案中，PD-1抑制剂是非抗体生物制剂，例如融合蛋白。在一些实施方案中，PD-1抑制剂是AMP-224(AstraZeneca)。
PD-1抑制剂也可以是小分子或肽，或肽衍生物，例如美国专利第8,907,053号、第9,096,642号、第9,044,442号和美国专利申请公开案第2015/0087581号中所述的那些；1,2,4噁二唑化合物和衍生物，例如美国专利申请公开案第2015/0073024号中所述的那些；环状拟肽化合物和衍生物，例如美国专利申请公开案第2015/0073042号中所述的那些；环状化合物和衍生物，例如美国专利申请公开案第2015/0125491号中所述的那些；1,3,4噁二唑和1,3,4噻二唑化合物和衍生物，例如国际专利申请公开案第WO 2015/033301号中所述的那些；基于肽的化合物和衍生物，例如国际专利申请公开案第WO 2015/036927号和第WO2015/04490号中所述的那些；或基于大环肽的化合物和衍生物，例如美国专利申请公开案第2014/0294898号中所述的那些；所述文献各自的内容均通过引用整体并入本文中。
如本文所用，“PD-L1/L2抑制剂”可以是任何PD-L1或PD-L2抑制剂或PD-L1或PD-L2阻断剂。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂选自本文所述的PD-L1或PD-L2抑制剂或阻断剂之一。关于PD-L1和PD-L2抑制剂，术语“抑制剂”和“阻断剂”在本文中可互换使用。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是指抗体或其抗原结合部分、抗原结合片段、变体、缀合物或生物类似物。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、水合物、共晶或前药。
在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是抗PD-L1或抗PD-L2抗体、其抗原结合片段或其抗原结合部分，包括Fab片段或单链可变片段(scFv)。在一些实施方案中，抗PD-L1或抗PD-L2抗体竞争结合和/或结合PD-L1和/或PD-L2上的表位。在一些实施方案中，PD-L1或PD-L2抑制剂是单克隆抗体。在一些实施方案中，PD-L1或PD-L2抑制剂是多克隆抗体。在本文公开的任何组合物、方法或用途中，抗PD-L1/L2“抗体”包括结合PD-L1/L2受体并在抑制结合和上调免疫系统方面表现出与完整抗体类似的功能特性的抗原结合部分或抗原结合片段。
在一些实施方案中，PD-L1抑制剂对PD-L1具有选择性，因为抑制剂与PD-L1结合或相互作用的浓度远低于它与其它受体(包括PD-L2受体)结合或相互作用的浓度。
因为抗PD-1和抗PD-L1靶向相同的信号传导途径，并且已在临床试验中显示在包括肾细胞癌在内的多种癌症中表现出相似水平的疗效(参见Brahmer等人(2012)N Engl JMed 366:2455-65；Topalian等人(20l2a)N Engl J Med 366:2443-54；WO 2013/173223)，所以抗PD-L1抗体可在本文公开的任何治疗方法中替代抗PD-1抗体。本领域已知的抗PD-L1抗体可用于本文所述的方法和用途。可用于本文所述的组合物、方法和用途的抗PD-L1抗体的非限制性实例包括美国专利第9,580,507号中公开的抗体。美国专利第9,580,507号中公开的抗PD-L1人单克隆抗体已被证明具有以下一种或多种特性：(a)以1×107M或更小的KD与人PD-L1结合，如使用Biacore生物传感器系统通过表面等离子体共振所测定；(b)在混合淋巴细胞反应(MLR)分析中增加T细胞增殖；(c)在MLR分析中增加干扰素-g的产生；(d)在MLR分析中增加IL-2分泌；(e)刺激抗体反应；以及(f)逆转T调节细胞对T细胞效应细胞和/或树突状细胞的影响。
在一些实施方案中，用于本文所述的方法和用途的PD-L1/L2抑制剂选自BMS-936559(也称为12A4、MDX-1105；参见例如美国专利第7,943,743号和WO 2013/173223)、德瓦鲁单抗(durvalumab)(AstraZeneca；也称为IMFINZITM、MEDI-4736；参见WO 2011/066389)、阿特珠单抗(atezolizumab)(Roche；也称为；MPDL 3280A、RG7446；参见ETS 8,217,149；也参见Herbst等人(2013)J Clin Oncol 3l(增刊)：3000)、阿维鲁单抗(avelumab)(Pfizer；也称为/>，MSB-0010718C；参见WO 2013/079174)、STI-1014(Sorrento；参见WO2013/181634)、CX-072(Cytomx；参见W02016/149201)、KN035或恩沃利单抗(envafolimab)(3D Med/Alphamab；参见Zhang等人,CellDiscov.7:3(2017年3月)、LY3300054(El i Lilly Co.；参见例如WO 2017/034916)、CK-301或柯希利单抗(cos ibelimab)(Checkpoint Therapeutics；参见Gorelik等人,AACR:Abstract 4606(2016年4月))、AUNP12(Aurigene)和CA-170(Aurigene/Curis)。
因此，在一些实施方案中，用于本文所述的方法和用途的PD-L1/L2抑制剂选自BMS-936559、德瓦鲁单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、STI-1014、CX-072、恩沃利单抗、LY3300054、柯希利单抗、AUNP12(Aurigene)和CA-170。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是BMS-936559。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是阿特珠单抗。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是德瓦鲁单抗。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是阿维鲁单抗。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是STI-1014。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是CX-072。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是恩沃利单抗。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是LY3300054。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是柯希利单抗。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是AUNP12。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是CA-170。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是BMS-986189(Bristol-Myers Squibb)
在一些实施方案中，用于本文所述的方法和用途的抗PD-L1/L2抗体是德瓦鲁单抗。德瓦鲁单抗，也称为MEDI4736或IMFINZITM，是一种人IgG1κ单克隆抗PD-L1抗体，由AstraZeneca plc的子公司Medimmune,LLC,Gaithersburg,Md.生产，并公开于美国专利第8,779,108号或美国专利申请公开案第2013/0034559号中，所述文献各自的内容均通过引用整体并入本文。德瓦鲁单抗(MEDI4736、SEQ ID NO:30和SEQ ID NO:31)的临床疗效已公开于以下各者中：Page等人,Ann.Rev.Med.,2014,65,185-202；Brahmer等人,J.Clin.Oncol.2014,32,5s(增刊，摘要8021)和McDermott等人,Cancer Treatment Rev.,2014,40,1056-64。
德瓦鲁单抗单克隆抗体包含具有SEQ ID NO:30的氨基酸序列的重链和具有SEQID NO:31的氨基酸序列的轻链。德瓦鲁单抗单克隆抗体包括22-96、22″-96″、23′-89′、23′″-89′″、135′-195′、135′″-195′″、148-204、148″-204″、215′-224、215′″-224″、230-230″、233-233″、265-325、265″-325″、371-429和371″-429′处的二硫键；以及Asn-301和Asn-301″处的N-糖基化位点。
在其它实施方案中，抗PD-L1抗体包含德瓦鲁单抗的重链和轻链CDR或可变区(VR)。德瓦鲁单抗的可变重(VH)区包含SEQ ID NO:32(对应于美国专利第8,779,108号中所示的SEQ ID NO:72)中所示的氨基酸序列，并且可变轻(VL)区包含SEQ ID NO:33(对应于美国专利第8,779,108号中的SEQ ID NO:77)中所示的氨基酸序列。德瓦鲁单抗抗PD-L1抗体包含分别具有SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36(分别对应于美国专利第8,779,108号中的SEQ ID NO:23、24和25)中所阐述的序列的重链CDR1、CDR2和CDR3结构域以及分别具有SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:38和SEQ ID NO:39(分别对应于美国专利第8,779,108号中的SEQ ID NO:28、29和30)中所阐述的序列的轻链CDR1、CDR2和CDR3结构域。
在一些实施方案中，用于本文所述的方法和用途的抗PD-L1/L2抗体是阿特珠单抗。阿特珠单抗是一种完全人源化的IgG1单克隆抗PD-L1抗体(也称为或MPDL3280A或RG7446，由Roche的子公司Genentech,Inc.生产)并且公开于例如美国专利第8,217,149号、美国专利申请公开案第2010/0203056A1号、第2013/0045200A1号、第2013/0045201A1号、第2013/0045202A1号或第2014/0065135A1号中，所述文献各自的内容通过引用整体并入本文中。
阿特珠单抗单克隆抗体包含具有SEQ ID NO:64的氨基酸序列的重链和具有SEQID NO:65的氨基酸序列的轻链。阿特珠单抗具有22-96、145-201、262-322、368-426、22″-96″、145″-201″、262″-322″和368″-426″处的重链内二硫键(C23-C104)；23'-88'、134'-194'、23′″-88′″和134′″-194′″处的轻链内二硫键(C23-C104)；221-214'和221″-214′″处的重-轻链内二硫键(h 5-CL 126)；227-227″和230-230″处的重-重链内二硫键(h 11、h14)；以及298和298'处的N-糖基化位点(H CH2N84.4>A)。
在其它实施方案中，抗PD-L1抗体包含阿特珠单抗的重链和轻链CDR或可变区(VR)。阿特珠单抗的可变重(VH)区包含SEQ ID NO:66(对应于美国专利第8,217,149号中的SEQ ID NO:20)中所示的氨基酸序列，并且阿特珠单抗的可变轻(VL)区包含SEQ ID NO:67(对应于美国专利第8,217,149号中的SEQ ID NO:21)中所示的氨基酸序列。阿特珠单抗抗PD-L1抗体包含重链CDR1、CDR2和CD R3结构域，所述结构域分别具有SEQ ID NO:68(GFTFSX1SWIH，对应于美国专利第8,217,149号中的SEQ ID NO:1)、SEQ ID NO:69(AWIX2PYGGSX3YYADSVKG，对应于美国专利第8,217,149号中的SEQ ID NO:2)和SEQ ID NO:70(RHWPGGFDY，对应于美国专利第8,217,149号中的SEQ ID NO:3)中所阐述的序列，另外，其中X1是D或G，X2是S或L，并且X3是T或S)，以及轻链CDR1、CDR2和CDR3结构域，所述结构域分别具有SEQ ID NO:71(RAS QX4X5X6TX7X8A，对应于美国专利第8,217,149号中的SEQ ID NO:8)、SEQ ID NO:72(SASX9LX10S，对应于美国专利第8,217,149号中的SEQ ID NO:9)和SEQ IDNO:73(QQX11X12X13X14PX15T)(对应于美国专利第8,217,149号中的SEQ ID NO:10)中所阐述的序列，另外，其中：X是D或V；X5是V或I；X6是S或N；X7是A或F；X8是V或L；X9是F或T；X10是Y或A；X11是Y、G、F或S；X12是L、Y、F或W；X13是Y、N、A、T、G、F或I，X14是H、V、P、T或I，并且X15是A、W、R、P或T。
在一些实施方案中，用于本文所述的方法和用途的抗PD-L1/L2抗体是阿维鲁单抗。阿维鲁单抗，也称为或MSB0010718C，由Merck KGaA/EMD Serono生产，是一种人IgG1λ单克隆抗PD-L1抗体并且，公开于美国专利申请公开案US 2014/0341917A1号中，所述公开案的内容通过引用整体并入本文中。
阿维鲁单抗单克隆抗体包含具有SEQ ID NO:74的氨基酸序列的重链和具有SEQID NO:75的氨基酸序列的轻链。阿维鲁单抗具有22-96、147-203、264-324、370-428、22″-96″、147″-203″、264″-324″和370″-428″处的重链内二硫键(C23-C104)；22'-90'、138′-197′、22′″-90′″和138′″-197′″处的轻链内二硫键(C23-C104)；223-215′和223″-215′″处的重-轻链内二硫键(h 5-CL 126)；229-229″和232-232″处的重-重链内二硫键(h 11、h14)；300、300″处的N-糖基化位点(H CH2 N84.4)；岩藻糖基化复合双天线CHO型聚糖；以及450和450′处的H CHS K2 C端赖氨酸剪切。
在其它实施方案中，抗PD-Ll抗体包含阿维鲁单抗的重链和轻链CDR或可变区(VR)。阿维鲁单抗的可变重(VH)区包含SEQ ID NO:76(对应于美国专利申请公开案第US2014/0341917 A1号中的SEQ ID NO:24)中所示的氨基酸序列，并且纳武单抗的可变重(VL)区包含SEQ ID NO:77(对应于美国专利申请公开案第US 2014/0341917 A1号中的SEQ IDNO:25)中所示的氨基酸序列。阿维鲁单抗抗PD-L1抗体包含重链CDR1、CDR2和CDR3结构域，所述结构域分别具有SEQ ID NO:78(对应于美国专利申请公开案第US 2014/0341917 A1号中的SEQ ID NO:15)、SEQ ID NO:79(对应于美国专利申请公开案第US 2014/0341917A1号中的SEQ ID NO:16)和SEQ ID NO:80(对应于美国专利申请公开案第US 2014/0341917 A1号中的SEQ ID NO:17)中所阐述的序列，以及轻链CDR1、CDR2和CDR3结构域，所述结构域分别具有SEQ ID NO:81(对应于美国专利申请公开案第US 2014/0341917A1号中的SEQ IDNO:18)、SEQ ID NO:82(对应于美国专利申请公开案第US 2014/0341917 A1号中的SEQ IDNO:19)和SEQ ID NO:82(对应于美国专利申请公开案第US 2014/0341917 A1号中的SEQ IDNO:20)中所阐述的序列。
在其它实施方案中，抗PD-L1抗体是MDX-1105，也称为BMS-935559，其公开于美国专利第7,943,743B2号中，所述专利的内容通过引用整体并入本文中。在一些实施方案中，抗PD-L1抗体选自美国专利第7,943,743B2号中公开的任何抗PD-L1抗体，所述专利的内容通过引用整体并入本文中。
在一些实施方案中，抗PD-L1抗体是市售的单克隆抗体，例如INVIVOMAB抗m-PD-L1克隆10F.9G2(目录号BE0101，Bio X Cell,Inc.,West Lebanon,N.H.,USA)或AFFYMETRIXEBIOSCIENCE(MIH1)。在一些实施方案中，抗PD-L2抗体是市售的单克隆抗体，例如BIOLEGEND 24F.10C12小鼠IgG2a，κ同型(目录号329602Biolegend,Inc.,San Diego,Calif.)、SIGMA抗PD-L2抗体(目录号SAB3500395，Sigma-Aldrich Co,St.Louis,Mo.)。
用于所公开的组合物和方法中的抗PD-L1抗体还包括分离的抗体，其特异性结合人PD-L1并与本文公开的任何抗PD-L1抗体，例如阿特珠单抗、德瓦鲁单抗和/或阿维鲁单抗交叉竞争结合人PD-L1。在一些实施方案中，抗PD-Ll抗体结合与本文所述的任何抗PD-Ll抗体，例如阿特珠单抗、德瓦鲁单抗和/或阿维鲁单抗相同的表位。抗体交叉竞争结合抗原的能力表明这些抗体结合抗原的相同表位区域并在空间上阻碍其它交叉竞争抗体与所述特定表位区域的结合。由于结合PD-L1的相同表位区域，这些交叉竞争抗体预期具有与参考抗体，例如阿特珠单抗和/或阿维鲁单抗非常相似的功能特性。交叉竞争抗体可以根据它们在标准PD-L1结合分析，例如Biacore分析、ELISA分析或流式细胞术中与阿特珠单抗和/或阿维鲁单抗交叉竞争的能力容易地鉴定(参见例如WO 2013/173223)。
在某些实施方案中，交叉竞争结合人PD-L1，或结合与阿特珠单抗、德瓦鲁单抗和/或阿维鲁单抗相同的人PD-L1抗体表位区域的抗体是单克隆抗体。对于施用于人类受试者，这些交叉竞争抗体是嵌合抗体、工程化抗体或人源化抗体或人抗体。此类嵌合、工程化、人源化或人单克隆抗体可以通过本领域熟知的方法制备和分离。
适用于公开的组合物和方法的抗PD-L1抗体是以高特异性和亲和力结合PD-L1、阻断PD-1的结合并抑制PD-1信号传导途径的免疫抑制作用的抗体。在本文公开的任何组合物或方法中，抗PD-L1“抗体”包括结合PD-L1，并在抑制受体结合和上调免疫系统方面表现出与完整抗体相似的功能特性的抗原结合部分或片段。在某些实施方案中，抗PD-L1抗体或其抗原结合部分与阿特珠单抗、德瓦鲁单抗和/或阿维鲁单抗交叉竞争结合人PD-L1。
可用于本文所述的方法和用途的抗PD-L1抗体可以是特异性结合PD-L1的任何PD-L1抗体，例如与德瓦鲁单抗、阿维鲁单抗或阿特珠单抗交叉竞争结合人PD-1的抗体，例如与德瓦鲁单抗、阿维鲁单抗或阿特珠单抗结合相同表位的抗体。
前述实施方案中引用的抗PD-L1抗体序列汇总于表2中。
表2
表续
表2-续
表2-续
在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是小分子。
在一些实施方案中，当用于治疗癌症的方法和用途包括施用化合物A和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物时，多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物是盐酸多柔比星。盐酸多柔比星是(8S,10S)-10-[(3-氨基-2,3,6-三脱氧基-α-L-来苏-己吡喃糖基)氧基]-8-乙醇酰-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-1-甲氧基-5,12-并四苯二酮盐酸盐。它是一种从波塞链霉菌表灰变种(Streptomyces peucetius var caesius)中分离出来的蒽环类拓扑异构酶抑制剂。所述药物的分子式为C27H29NO11 HCl，分子量为579.99。商品名为阿霉素(Adriamycin)。它以冻干粉或盐水溶液的形式提供，可每隔约3周以60-75mg/m通过静脉内注射施用。
在一些实施方案中，多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物选自吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯并-多柔比星和脱氧多柔比星或其药学上可接受的盐。
为了降低毒性，已经制备了各种形式的多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。在一些实施方案中，多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物是包封在脂质体中的PEG化多柔比星，以商品名DOXIL销售。在一些实施方案中，多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物是未PEG化的脂质体多柔比星，以商品名Myocet销售。在一些实施方案中，多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物是用在注射时选择性结合白蛋白的反应性接头分子修饰的多柔比星(称为“阿多柔比星(aldoxorubicin)”)。脂质体是由磷脂双层构成的微囊泡，能够包封活性药物。的/>脂质体由表面结合的甲氧基聚乙二醇(MPEG)配制而成，这一过程通常称为聚乙二醇化，以保护脂质体免受单核吞噬细胞系统(MPS)的检测并增加血液循环时间。/>脂质体在人体中的半衰期约为55小时。它们在血液中稳定，并且脂质体多柔比星的直接测量表明至少90％的药物在循环过程中保持脂质体包封。
如本文所用，术语“约”或“大约”具有给定值或范围的20％以内的含义。在一些实施方案中，术语“约”是指在给定值的20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％内。
3.示范性方法和用途的描述
在一些方面和实施方案中，本发明提供了一种用于治疗患者癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐和PDx抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。
在一些方面和实施方案中，本发明提供了一种用于治疗患者癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及PDx抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物B或其药学上可接受的盐或其前药，以及PDx抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物C或其药学上可接受的盐或其前药，以及PDx抑制剂。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。
在一些方面和实施方案中，本发明提供化合物A或其药学上可接受的盐与PDx抑制剂组合用于治疗癌症的用途。在一些实施方案中，本发明提供化合物A或其药学上可接受的盐在制造用于治疗癌症的药剂中的用途，其中所述药剂与PDx抑制剂组合使用。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。在一些实施方案中，药剂包含化合物A或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，包含化合物A或其药学上可接受的盐的药物组合物如本文所述。
在一些方面和实施方案中，本发明提供化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药用于治疗癌症的用途。在一些实施方案中，本发明提供化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药在制造用于治疗癌症的药剂中的用途，其中所述药剂与PDx抑制剂组合使用。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。在一些实施方案中，本发明提供化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药在制造用于治疗癌症的药剂中的用途，其中所述药剂与多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物组合使用。在一些实施方案中，药剂包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施方案中，包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐的药物组合物如本文所述。在一些实施方案中，化合物A的代谢物选自本文所述的那些。
在一些方面和实施方案中，本发明提供一种用于治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。
在一些方面和实施方案中，本发明提供一种用于治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。
在一些实施方案中，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物B或其药学上可接受的盐或其前药，和多柔比星或其药学上可接受的盐或其衍生物。
在一些实施方案中，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物C或其药学上可接受的盐或其前药，和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。
在一些方面和实施方案中，本发明提供化合物A或其药学上可接受的盐与多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物组合用于治疗癌症的用途。在一些实施方案中，本发明提供化合物A或其药学上可接受的盐在制造用于治疗癌症的药剂中的用途，其中所述药剂与多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物组合使用。
在一些实施方案中，癌症选自本文所述的那些。
在这些方法和用途以及本文描述的所有此类方法和用途的一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-1抑制剂。在一些实施方案中，PD-1抑制剂选自本文所述的那些。
在一些实施方案中，PD-1抑制剂是抗PD-1抗体。在一些实施方案中，抗PD-1抗体选自纳武单抗、派姆单抗、斯巴达珠单抗、MEDI-0680、西米普利单抗、特瑞普利单抗、替雷利珠单抗、卡瑞利珠单抗、多塔利单抗、GLS-010、AM-0001、巴替利单抗、瑞弗利单抗、信迪利单抗、贝伐珠单抗和JTX-4014。
在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是派姆单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是斯巴达珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是MEDI-0680。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是西米普利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是特瑞普利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是替雷利珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是卡瑞利珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是多塔利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是GLS-010。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是AM-0001。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是巴替利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是瑞弗利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是信迪利单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是贝伐珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是JTX-4014。
在这些方法和本文所述的所有此类方法的一些实施方案中，PDx抑制剂是PD-L1/L2抑制剂。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂选自本文所述的那些。
在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是抗PD-L1/L2抗体。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体选自BMS-936559、德瓦鲁单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、STI-1014、CX-072、恩沃利单抗、LY3300054和柯希利单抗。
在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是BMS-936559。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是阿特珠单抗。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是德瓦鲁单抗。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是阿维鲁单抗。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是STI-1014。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是CX-072。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是恩沃利单抗。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是LY3300054。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体是柯希利单抗。
在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是小分子或肽，或肽衍生物，如本文所述。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是AUNP12。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是CA-170。在一些实施方案中，PD-L1/L2抑制剂是BMS-986189(Bristol-Myers Squibb)。
如本文所用，术语“治疗(treatment/treat/treating)”是指逆转、缓解、延迟如本文所描述的疾病或其一或多种症状的发作或抑制其进展。在一些实施方案中，可以在患上一或多种症状后施用治疗。在其它实施方案中，可以在不存在症状的情况下施用治疗。例如，可以在症状发作之前(例如，根据症状历史和/或根据遗传或其它易感因素)向易感个体施用治疗。还可以在症状消退后继续治疗，例如以预防或延迟其复发。
如本文所用，“需要预防”、“需要治疗”或“有需要”的患者或受试者是指根据适当的执业医师(例如，医生、护士，或在所述患者或受试者是人的情况下是执业护士；在所述患者或受试者是非人哺乳动物的情况下是兽医)的判断，将合理地从给定的治疗或疗法中受益的患者或受试者。
例如化合物A和/或PDx抑制剂，或多柔比星，或其药学上可接受的盐或衍生物等药物或治疗剂的“治疗有效量”或“治疗有效剂量”是当药物单独使用或与另一种治疗剂组合使用时保护患者或受试者免受如癌症等疾病的发作，或促进疾病消退的任何量，所述疾病消退通过疾病症状的严重程度降低、无疾病症状期的频率和持续时间增加或预防因疾病折磨引起的损害或残疾来证明。例如化合物A和/或PDx抑制剂，或多柔比星，或其药学上可接受的盐或衍生物等治疗剂促进疾病消退的能力可以使用熟练的从业人员已知的多种方法，如在临床试验期间的人受试者中、在可预测人中的功效的动物模型系统中或通过在体外分析中分析药剂的活性来评估。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。
在优选实施方案中，治疗有效量的例如化合物A和/或PDx抑制剂，或多柔比星，或其药学上可接受的盐或衍生物等药物在单独或组合使用时促进癌症消退到消除癌症的程度。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。术语“促进癌症消退”意指单独或与一种或多种额外抗肿瘤剂组合施用的有效量的药物导致肿瘤生长或大小减少、肿瘤坏死、至少一种疾病症状的严重程度降低、无疾病症状期的频率和持续时间增加，或预防因疾病折磨引起的损害或残疾。另外，关于治疗的术语“有效”和“有效性”包含药理学有效性和生理安全性两者。药理学有效性是指药物促进患者的癌症消退的能力。生理安全性是指由施用药物引起的细胞、器官和/或生物体水平的毒性或其它不良生理作用(不良作用)的水平。
如本文所用，术语“治疗益处”或“疗法益处”是指总生存期、无进展生存期、部分反应率、完全反应率和总体反应率中的一或多项的改善，并且还可以包含癌症或肿瘤生长或大小减少、疾病症状的严重程度降低、无疾病症状期的频率和持续时间增加或预防因疾病折磨引起的损害或残疾。
术语“免疫疗法”是指通过包括诱导、增强、抑制或以其它方式改变免疫反应的方法来治疗患有疾病或有感染疾病或遭受疾病复发风险的受试者。
“免疫反应”是如本领域所理解的，并且通常是指脊椎动物体内针对外来病原体或异常细胞例如癌细胞的生物反应，所述反应保护生物体免受这些病原体和由它们引起的疾病的影响。免疫反应由免疫系统的一种或多种细胞(例如，T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、树突状细胞或中性粒细胞)和可溶性大分子的作用介导由任何这些细胞或肝脏产生(包括抗体、细胞因子和补体)，导致选择性靶向、结合、损害、破坏和/或消除脊椎动物体内的入侵病原体、细胞或组织病原体、癌细胞或其它异常细胞，或者在自身免疫或病理性炎症的情况下，正常人体细胞或组织。免疫反应包括例如激活或抑制T细胞，例如效应T细胞、Th细胞、CD4+细胞、CD8+T细胞或Treg细胞，或激活或抑制任何其它细胞免疫系统，例如NK细胞。
“免疫相关反应模式”是指在用免疫治疗剂治疗的癌症患者中经常观察到的临床反应模式，所述免疫治疗剂通过诱导癌症特异性免疫反应或通过改变天然免疫过程产生抗肿瘤作用。这种反应模式的特征为在肿瘤负荷初始增加或新病灶出现后产生有益的治疗效果，在传统化学治疗剂的评估中，这将被归类为疾病进展，并与药物失败同义。因此，正确评估免疫治疗剂可能需要长期监测这些药剂对目标疾病的影响。
“免疫调节剂”或“免疫调控剂”是指一种药剂，例如一种靶向可参与调节、调控或修饰免疫反应的信号传导途径组分的药剂。“调节”、“调控”或“修饰”免疫反应是指免疫系统细胞或此类细胞(例如效应T细胞，如Thl细胞)的活性的任何改变。这种调节包括免疫系统的刺激或抑制，这可以通过各种细胞类型数量的增加或减少、这些细胞活性的增加或减少或免疫系统内可能发生的任何其它变化来证明。抑制性和刺激性免疫调节剂均已被鉴定，其中一些可以在肿瘤微环境中具有增强的功能。在一些实施方案中，免疫调节剂靶向T细胞表面上的分子。“免疫调节靶标”或“免疫调控靶标”是一种分子，例如细胞表面分子，其被物质、试剂、部分、化合物或分子靶向结合，并且其活性被物质、试剂、部分、化合物或分子的结合改变。免疫调节靶标包括例如细胞表面的受体(“免疫调节受体”)和受体配体(“免疫调节配体”)。
“免疫疗法”是指通过包括诱导、增强、抑制或以其它方式改变免疫系统或免疫反应的方法来治疗患有疾病或有感染或遭受疾病复发风险的受试者。在某些实施方案中，免疫疗法包括向受试者施用抗体。在其它实施方案中，免疫疗法包括向受试者施用小分子。在其它实施方案中，免疫疗法包括施用细胞因子或其类似物、变体或片段。
“免疫刺激疗法(immuno stimulating therapy)”或“免疫刺激疗法(immunostimulatory therapy)”是指导致增加(诱导或增强)受试者的免疫反应以例如治疗癌症的疗法。
“增强内源性免疫反应”意指增加受试者中现有免疫反应的有效性或效力。这种有效性和效力的增加可以通过例如克服抑制内源性宿主免疫反应的机制或通过刺激增强内源性宿主免疫反应的机制来实现。
本文所用的术语“患者”或“受试者”意指动物，优选哺乳动物，并且最优选人。
在一些实施方案中，患者为18岁或更大年龄。
在一些实施方案中，患者是患有组织学上证实的实体瘤的患者，所述患者患有局部复发性或转移性疾病，所述疾病在进行治疗医师认为合适的所有标准护理疗法时或其之后已经进展，或者所述患者不是标准治疗的候选者。
在一些实施方案中，患者患有尿路上皮癌和组织学上证实的尿路上皮癌，和/或患有不可切除的局部复发性或转移性疾病，所述疾病在进行治疗医师认为合适的所有标准护理疗法(例如，包括含铂的方案和检查点抑制剂)或其之后已经进展，或者所述患者不是标准治疗的候选者。
在一些实施方案中，患者已接受多种不同的先前治疗方案。
在一些实施方案中，患者接受过PDx抑制剂的先前疗法。在一些实施方案中，PDx抑制剂的先前疗法恰好先于用本文所述的方法治疗。在一些实施方案中，PDx抑制剂的先前疗法并非恰好先于用本文所述的方法治疗。在一些此类实施方案中，患者必须在完成先前PDx抑制剂疗法时或完成后3个月内发生进展。
在一些实施方案中，如通过当地研究人员/放射学评估，患者患有根据RECISTv1.1的可测量的疾病。在一些实施方案中，如果已在此类病变中证实了进展，则位于先前照射区域中的病变被认为是可测量的。
在一些实施方案中，患者具有可以安全地进入以进行多个芯活检的肿瘤。
在一些实施方案中，患者在至少两周内未接受全身性细胞毒性化疗。在一些实施方案中，患者在至少六周内未接受全身性亚硝基脲或全身性丝裂霉素-C。在一些实施方案中，患者在至少三周内未接受生物疗法(例如，抗体)。在一些实施方案中，患者在比小分子的半衰期长至少5倍的时间段内未接受小分子疗法。在一些实施方案中，患者在至少四周内未接受研究药剂。
在一些实施方案中，患者在用本文所述的化合物A和PDx抑制剂治疗之前的7天内测得的中性粒细胞绝对计数(ANC)≥1500/μL。在一些实施方案中，患者在用本文所述的化合物A和PDx抑制剂治疗之前7天内测得的血红蛋白＞8g/dL。在一些实施方案中，患者在用本文所述的化合物A和PDx抑制剂治疗之前7天内测得的血小板计数>80,000/μL。在一些实施方案中，在用本文所述的化合物A和PDx抑制剂治疗之前的7天内所测量，患者的血清肌酐≤1.5×正常上限(ULN)，或者对于肌酐水平>1.5×惯例ULN(使用Cockcroft-Gault公式)的患者，肌酐清除率≥50mL/min。在一些实施方案中，在用本文所述的化合物A和PDx抑制剂治疗之前的7天内所测量，患者的血清总胆红素≤1.5×ULN，或对于总胆红素水平>1.5×ULN的患者，直接胆红素≤ULN。在一些实施方案中，在用本文所述的化合物A和PDx抑制剂治疗之前的7天内所测量，患者的天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)≤2.5×ULN(或如果存在肝转移，则为≤5×ULN)。在一些实施方案中，在用本文所述的化合物A和PDx抑制剂治疗之前的7天内所测量，患者的凝血：≤1.5×ULN，除非受试者正在接受抗凝疗法，只要PT或aPTT在抗凝剂的预期用途的治疗范围内。在一些实施方案中，PDx抑制剂是纳武单抗。
在一些实施方案中，患者不具有临床上不稳定的中枢神经系统(CNS)肿瘤或脑转移(为避免疑义，患者可具有稳定和/或无症状的CNS转移，例如，如果他们不需要立即治疗，或已接受治疗并在神经学上恢复到基线(与CNS治疗相关的残留体征或症状除外)。在一些实施方案中，患者在本治疗之前已停用皮质类固醇，或每天服用≤10mg稳定或递减剂量的泼尼松(或等效物)至少2周。
在一些实施反中，患者不是因先前疗法而未从所有AE恢复到≤1级或基线的患者。在一些实施方案中，患者患有≤2级神经病变。
在一些实施方案中，患者不是患有在过去2年内需要用疾病调节剂、皮质类固醇或免疫抑制药物进行全身治疗(为避免疑义，患者可能已使用非甾体类抗炎药(NSAID))的活动性自身免疫疾病的患者。在一些实施方案中，本文所述的方法和用途可用于患有I型糖尿病、仅需要激素替代的甲状腺功能减退症、不需要全身治疗的皮肤病症(例如白斑、牛皮癣或脱发)或在没有外部触发的情况下预期不会复发的病况的患者。
在一些实施方案中，患者不是患有需要在本发明治疗之前2周内用皮质类固醇(泼尼松(prednisone)当量>10mg/天)或其它免疫抑制药物进行持续全身治疗的任何病状的患者。(在一些实施方案中，在不存在活动性临床显著[即，严重]自身免疫疾病的情况下，允许患者吸入或局部使用类固醇和至多10mg/天的泼尼松当量的生理替代剂量)。
在一些实施方案中，患者不是具有任何其它并行抗肿瘤治疗的患者，除了允许对病变进行局部放射以用于缓解(在治疗之后被认为是非靶病变)和激素消融。
在一些实施方案中，患者不是患有不受控制的或危及生命的症状性伴随疾病(包含已知的症状性人免疫缺陷病毒(HIV)、症状性活动性乙型或丙型肝炎或活动性结核病)的患者。在一些实施方案中，如果患者满足以下条件，则所述患者是HIV患者：根据临床指征，他们在治疗前接受了至少4周的抗逆转录病毒疗法(ART)；患者根据临床指征继续接受ART；当地医疗保健提供者根据护理标准监测CD4计数和病毒载量。在一些实施方案中，患者不是具有表明存在病毒的乙型肝炎病毒(HBV)阳性测试结果，例如乙型肝炎表面抗原(HBsAg，澳大利亚抗原)阳性的患者。在一些实施方案中，患者不是具有任何表明存在活跃病毒复制(例如，可检测的HCV-RNA)的丙型肝炎病毒(HCV)阳性测试结果的患者。在一些实施方案中，患者是具有阳性HCV抗体和不可检测的HCV RNA的患者。
在一些实施方案中，患者不是在本发明治疗的3周内经历过大型手术或在本发明治疗之前没有充分愈合或从手术并发症中恢复的患者。
在一些实施方案中，患者不是在本发明治疗的2周内接受过先前放射疗法的患者。在一些实施方案中，患者可以是已从所有放射相关毒性中恢复、不需要皮质类固醇并且未患有放射性肺炎的受试者。在一些实施方案中，对于非CNS疾病的姑息性放射[≤2周的放射疗法]，允许进行1周的清除。
在一些实施方案中，患者不是先前已接受AHR抑制剂治疗的患者。
在一些实施方案中，患者不是在过去3年内患有需要全身治疗的潜在危及生命的第二恶性肿瘤的患者。在一些实施方案中，患者是具有先前早期基底/鳞状细胞皮肤癌或非侵入性或原位癌病史的患者，其曾在任何时间接受过确定性治疗。
在一些实施方案中，患者不是具有限制口服摄取或显著降低化合物A的吸收的胃肠功能损害的医疗问题的患者。
在一些实施方案中，患者不是患有临床显著(即，活动性)心血管疾病的患者：脑血管意外/中风(在本发明治疗之前<6个月)、心肌梗塞(在本发明治疗之前<6个月)、不稳定型心绞痛、充血性心力衰竭(≥纽约心脏协会分类II级)或存在任何可能增加促心律失常风险的情况(例如，低钾血症、心动过缓、心脏传导阻滞)，包含任何新的、不稳定的或严重的需要药物的心律失常，或可能干扰研究ECG解读的其它基线心律失常(例如，束支传导阻滞)。
在一些实施方案中，患者在筛选ECG时，男性的QTcF不>450毫秒，女性的QTcF不>470毫秒。在一些实施方案中，患者不具有QTcF>450毫秒的束支传导阻滞。在一些实施方案中，正在服用已知QTcF延长的稳定剂量的伴随药物(例如，选择性血清素再摄取抑制剂抗抑郁药)的男性患者的QTcF>470毫秒。
在一些实施方案中，患者在本发明治疗期间不伴随地使用强CYP3A抑制剂。在一些实施方案中，强CYP3A抑制剂选自由以下组成的组：阿瑞匹坦(aprepitant)、克拉霉素(clarithromycin)、伊曲康唑(itraconazole)、酮康唑(ketoconazole)、奈法唑酮(nefazodone)、泊沙康唑(posaconazole)、泰利霉素(telithromycin)、维拉帕米(verapamil)和伏立康唑(voriconazole)。
在一些实施方案中，患者在本发明治疗期间不伴随地使用强CYP3A诱导物。在一些实施方案中，强CYP3A诱导物选自由以下组成的组：苯妥英(phenytoin)、利福平(rifampin)、卡马西平(carbamazepine)、圣约翰草(St John's Wort)、波生坦(bosentan)、莫达非尼(modafinil)和萘夫西林(nafcillin)。
在一些实施方案中，患者不服用强CYP3A4/5抑制剂，除非患者可以在在本发明治疗之前≥5个半衰期内转用其它药剂。
在一些实施方案中，患者不服用仅通过CYP3A4/5、CYP2C8、CYP2C9、CYP2B6代谢或作为其敏感底物，并且具有窄治疗窗的伴随药物。在一些实施方案中，仅通过CYP3A4/5、CYP2C8、CYP2C9、CYP2B6代谢或作为其敏感底物，并且具有窄治疗窗的药物选自由以下组成的组：瑞格列奈(repaglinide)、华法林(warfarin)、苯妥英(phenytoin)、阿芬太尼(alfentanil)、环孢霉素(cyclosporine)、二麦角胺(diergotamine)、麦角胺(ergotamine)、芬太尼(fentanyl)、匹莫齐特(pimozide)、奎尼丁(quinidine)、西罗莫司(sirolimus)、依法韦仑(efavirenz)、安非他酮(bupropion)、氯胺酮(ketamine)、美沙酮(methadone)、丙泊酚(propofol)、曲马多(tramadol)和他克莫司(tacrolimus)。
在一些实施方案中，患者不服用作为p-糖蛋白或乳腺癌耐药蛋白(BCRP)转运蛋白底物并且具有窄治疗窗的伴随药物。在一些实施方案中，作为p-糖蛋白或乳腺癌耐药蛋白(BCRP)转运蛋白的底物并且具有窄治疗窗的药物选自由以下组成的组：达比加群(dabigatran)、地高辛(digoxin)、非索非那定(E)(fexofenadine(e))、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)。
在一些实施方案中，患者未患有需要全身疗法的活动性感染。
在一些实施方案中，患者在本治疗前2周内不服用或使用任何补充药物(例如，草药补充剂或传统中药)。在一些实施方案中，如果将此类药物用作支持性护理，则可以使用此类药物。
在一些实施方案中，患者没有与先前免疫治疗相关的危及生命的毒性病史(例如，抗CTLA-4或抗PD-1/PD-L1治疗或任何其它特异性靶向T-细胞共刺激或免疫检查点途径的抗体或药物)，除了那些不太可能通过标准对策再次发生的情况(例如，肾上腺危象后的激素替代)。
在一些实施方案中，患者不是在本发明治疗之前具有呈阳性的妊娠测试的有生育能力的女性(WOCBP)。在一些实施方案中，患者在本发明治疗的预计持续时间内未进行母乳喂养或预期怀孕或生孩子。
在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约100-2000mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约150-1800mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约200-1600mg化合物A或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约200mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约400mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约600mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约800mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约1000mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天一次施用化合物A的配制物或单位剂型。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天两次施用化合物A的配制物或单位剂型。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天三次施用化合物A的配制物或单位剂型。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天四次施用化合物A的配制物或单位剂型。
在一些实施方案中，在每天向患者施用约1200mg的化合物A或其药学上可接受的盐的情况下，给药为每天两次或BID，即，两次单独的约600mg剂量。在一些实施方案中，在每天向患者施用约1200mg的化合物A或其药学上可接受的盐的情况下，给药为每天三次或TID，即，三次单独的约400mg剂量。在一些实施方案中，在每天向患者施用约1200mg的化合物A或其药学上可接受的盐的情况下，给药为每天四次或QID，即，四次单独的约300mg剂量。
在一些实施方案中，在每天向患者施用约1600mg的化合物A或其药学上可接受的盐的情况下，给药为每天两次或BID，即，两个单独的约800mg剂量。在一些实施方案中，在每天向患者施用约1600mg的化合物A或其药学上可接受的盐的情况下，给药为每天三次或TID，即，三个单独的约533mg剂量。在一些实施方案中，在每天向患者施用约1600mg的化合物A或其药学上可接受的盐的情况下，给药为每天四次或QID，即，四个单独的约400mg剂量。
在一些实施方案中，本发明的方法包括施用化合物A的配制物或单位剂型，其中两次连续施用之间为约4-24小时。在一些实施方案中，化合物A的配制物或单位剂型的两次连续施用之间为约4小时、约6小时、约8小时、约12小时、约18小时或约24小时。
在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，其中化合物A血浆浓度为约11,200ng/mL或更低。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，其中化合物A血浆浓度为约9,520ng/mL或更低、约8,400ng/mL或更低或约7,280ng/mL或更低。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，其中化合物A血浆浓度为约5,600ng/mL或更低。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用如本文所描述的配制物或单位剂型，其中化合物A血浆浓度为约5,000ng/mL或更低。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用如本文所描述的配制物或单位剂型，其中化合物A血浆浓度为约4,000ng/mL或更低。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用如本文所描述的配制物或单位剂型，其中化合物A血浆浓度为约3,000ng/mL或更低。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用如本文所描述的配制物或单位剂型，其中化合物A血浆浓度为约2500ng/mL、约2250ng/mL、约2000ng/mL、约1750ng/mL、约1500ng/mL、约1250ng/mL、约1000ng/mL、约750ng/mL或约500ng/mL。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用如本文所描述的配制物或单位剂型，其中化合物A血浆浓度为约500ng/mL或更低。
在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，其中化合物A血浆AUC为约188,000纳克*小时/毫升或更低。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，其中化合物A血浆AUC为约159,800纳克*小时/毫升或更低、约141,000纳克*小时/毫升或更低或约122,200纳克*小时/毫升或更低。在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，其中化合物A血浆AUC为约94,000纳克*小时/毫升或更低。
在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用治疗有效量的抗PD-1抗体作为PDx抑制剂。在一些实施方案中，抗PD-1抗体作为基于体重的剂量施用。本文所指的术语“基于体重的剂量”意指施用于患者的剂量是基于患者的体重计算的。例如，当60kg体重的患者需要3mg/kg的抗PD-1抗体时，可以计算并使用适量的抗PD-1抗体(即180mg)进行施用。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每2、3或4周以约0.1mg/kg至约10.0mg/kg体重范围内的剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每2周或约每3周以约2mg/kg、约3mg/kg、约4mg/kg、约5mg/kg、约6mg/kg、约7mg/kg、约8mg/kg、约9mg/kg或约10mg/kg体重的剂量施用一次。在具体实施方案中，抗PD-1抗体约每3周以约2mg/kg体重的剂量施用一次。在具体实施方案中，抗PD-1抗体约每3周以约3mg/kg体重的剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每3周以约4mg/kg体重的剂量施用一次。在其它实施方案中，抗PD-1抗体约每3周以约5mg/kg体重的剂量施用一次。在其它实施方案中，抗PD-1抗体约每3周以约10mg/kg体重的剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。
在一些实施方案中，抗PD-1抗体以固定剂量施用。关于本文所述的方法和剂量使用的术语“固定剂量”是指在不考虑患者的体重或体表面积(BSA)的情况下施用于患者的剂量。因此，固定剂量不是以mg/kg剂量提供，而是以药剂(例如，抗PD-1抗体)的绝对量提供。在一些实施方案中，以至少约200mg、至少约220mg、至少约240mg、至少约260mg、至少约280mg、至少约300mg、至少约320mg、至少约340mg、至少约360mg、至少约380mg、至少约400mg、至少约420mg、至少约440mg、至少约460mg、至少约480mg、至少约500mg或至少约550mg的固定剂量施用。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每1、2、3或4周以固定剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每3周以约360mg的固定剂量施用一次(Q3W)。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每2周以约240mg的固定剂量施用一次(Q2W)。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每4周以约480mg的固定剂量施用一次(Q4W)。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每6周以约720mg的固定剂量施用一次(Q6W)。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。
在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每3周以约200mg的固定剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每6周以约400mg的固定剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每4周以约300mg的固定剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每个月以约300mg的固定剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体约每两个月以约400mg的固定剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-1抗体是纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法包括向患者施用治疗有效量的抗PD-L1/L2抗体作为PDx抑制剂。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体作为基于体重的剂量施用。在一些实施方案中，抗PD-/L2抗体约每2、3或4周以约0.1mg/kg至约15.0mg/kg体重范围内的剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每2或3周以约3mg/kg或约5mg/kg体重的剂量施用一次。在具体实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每2周以约2mg/kg体重的剂量施用一次。在具体实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每2周以约3mg/kg体重的剂量施用一次。在具体实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每2周以约4mg/kg体重的剂量施用一次。在其它实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每2周以约5mg/kg体重的剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每2周以约6mg/kg体重的剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每2周以约7mg/kg体重的剂量施用一次。在其它实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每2周以约8mg/kg体重的剂量施用一次。在其它实施方案中，抗PD-L1抗体约每2周以约10mg/kg体重的剂量施用一次。
在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体以固定剂量施用。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体以至少约240mg、至少约300mg、至少约320mg、至少约400mg、至少约480mg、至少约500mg、至少约560mg、至少约600mg、至少约640mg、至少约700mg、至少720mg、至少约800mg、至少约880mg、至少约900mg、至少960mg、至少约1000mg、至少约1040mg、至少约1100mg、至少约1120mg、至少约1200mg、至少约1280mg、至少约1300mg、至少约1360mg、至少约1400mg或至少约1500mg的固定剂量施用。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每1、2、3或4周以固定剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每3周以约1200mg的固定剂量施用一次。在其它实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每3周以约1000mg的固定剂量施用一次。在一些实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每3周以约1100mg的固定剂量施用一次。在其它实施方案中，抗PD-L1/L2抗体约每3周以约1500mg的固定剂量施用一次。
在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约100-2000mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约150-1800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约200-1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约200mg的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约400mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约1000mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天一次施用包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药的配制物或单位剂型。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天两次施用包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药的配制物或单位剂型。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天三次施用包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药的配制物或单位剂型。在一些实施方案中，本发明的方法包括每天四次施用包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药的配制物或单位剂型。
在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天两次或BID，即两个单独约600mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天三次或TID，即三个单独的约400mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天四次或QID，即四个单独的约300mg剂量。
在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天两次或BID，即两个单独的约800mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天三次或TID，即三个单独的约533mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天四次或QID，即四个单独的约400mg剂量。
在一些实施方案中，本发明的方法包括施用包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药的配制物或单位剂型，其中在两次连续施用之间存在约4-24小时。在一些实施方案中，包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药的配制物或单位剂型的两次连续施用之间存在约4、约6、约8、约12、约18或约24小时。
4.用途、配方和施用
药学上可接受的组合物
在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含化合物A或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体、佐剂或媒剂。在某些实施方案中，本发明组合物中化合物A或其药学上可接受的盐的量使得在生物样本或患者中有效地可测量地抑制AHR或其变体或突变体。
在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及药学上可接受的载体、佐剂或媒剂。在某些实施方案中，化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药在本发明的组合物中的量使得在生物样本或患者中有效地可测量地抑制AHR或其变体或突变体。
在某些实施方案中，本发明的组合物被配制用于向需要此类组合物的患者施用。在一些实施方案中，本发明的组合物被配制用于向患者经口施用。
术语“药学上可接受的载体、佐剂或媒剂”是指不破坏其所配制的化合物的药理活性的无毒载体、佐剂或媒剂。可用于本发明组合物的药学上可接受的载体、佐剂或媒剂包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白如人血清白蛋白、缓冲物质如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质，例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素类物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
本发明的组合物可经口、肠胃外、通过吸入喷雾、局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或通过植入贮器施用。如本文所用，“施用”是指使用本领域技术人员已知的各种方法和递送系统中的任一者将包含治疗剂的组合物物理引入受试者。化合物A的优选施用途径是经口施用。PDx抑制剂，例如抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体，或多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物的优选施用途径包括静脉内、肌内、皮下、腹膜内、脊髓内或其它肠胃外施用途径，例如通过注射或输注。本文所用的短语“肠胃外施用”意指除肠道和局部施用以外的施用方式，通常通过注射，并且包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、淋巴内、病灶内、囊内、眼眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外和胸骨内注射和输注，以及体内电穿孔。其它非肠胃外途径包括经口、局部、表皮或粘膜施用途径，例如鼻内、经阴道、经直肠、舌下或局部。也可以例如一次、多次和/或在一个或多个延长的时间段内进行施用。
本发明组合物的无菌可注射形式可以是水性或油性悬浮液。可以根据本领域已知的技术使用合适的分散剂或润湿剂和助悬剂来配制这些悬浮液。无菌可注射制剂还可以是无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如作为1,3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的媒剂和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的不挥发性油常规地用作溶剂或悬浮介质。
为此，可以使用任何温和的不挥发性油，包括合成甘油单酯或甘油二酯。脂肪酸，如油酸和其甘油酯衍生物可用于制备注射剂，天然药学上可接受的油，如橄榄油或蓖麻油，尤其是它们的聚氧乙烯化形式同样如此。这些油溶液或悬浮液还可含有长链醇稀释剂或分散剂，例如羧甲基纤维素或通常用于配制药学上可接受的剂型(包括乳液和分散液)的类似分散剂。其它常用的表面活性剂，如Tweens、Spans和其它常用于制造药学上可接受的固体、液体或其它剂型的乳化剂或生物可用性增强剂也可用于配制目的。
本发明的药学上可接受的组合物可以任何口服可接受的剂型，包括但不限于胶囊、片剂、水性悬浮液或溶液经口施用。在口服片剂的情况下，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。典型地还添加润滑剂，例如硬脂酸镁。对于以胶囊形式经口施用，有用的稀释剂包括乳糖和干玉米淀粉。当口服需要水性悬浮液时，将活性成分与乳化剂和助悬剂结合。如果需要，还可以添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。
或者，本发明的药学上可接受的组合物可以经直肠施用的栓剂形式施用。这些可以通过将药剂与合适的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在室温下为固体但在直肠温度下为液体，并且因此会在直肠中融化以释放药物。此类材料包括可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。
本发明的药学上可接受的组合物也可以局部施用，特别是当治疗目标包括容易通过局部应用到达的区域或器官，包括眼睛、皮肤或下肠道疾病时。可以容易地为这些区域或器官中的每一者制备合适的局部配制物。
可以在直肠栓剂配制物(见上文)或合适的灌肠剂配制物中对下肠道进行局部应用。也可以使用局部透皮贴剂。
对于局部应用，所提供的药学上可接受的组合物可以在合适的软膏中配制，所述软膏含有悬浮或溶解在一种或多种载体中的活性成分。用于本发明化合物局部施用的载体包括但不限于矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，所提供的药学上可接受的组合物可以配制成合适的洗剂或乳膏，其中含有悬浮或溶解在一种或多种药学上可接受的载体中的活性成分。合适的载体包括但不限于矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、十六烷基酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
对于眼科用途，所提供的药学上可接受的组合物可以配制为在等渗、pH调节的无菌盐水中的微粉化悬浮液，或者优选地，作为在等渗、pH调节的无菌盐水中的溶液，具有或不具有防腐剂例如苯扎氯铵。或者，对于眼科用途，可在软膏例如凡士林中配制药学上可接受的组合物。
本发明的药学上可接受的组合物也可以通过鼻气雾剂或吸入给药。此类组合物根据药物配制物领域众所周知的技术制备并且可以使用苯甲醇或其它合适的防腐剂、提高生物可用性的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其它常规增溶剂或分散剂制备成盐水溶液。
最优选地，将本发明的药学上可接受的组合物配制用于经口施用。此类配制物可以与或不与食物一起施用。在一些实施方案中，本发明的药学上可接受的组合物不与食物一起施用。在其它实施方案中，本发明的药学上可接受的组合物与食物一起施用。
可与载体材料组合以产生单一剂型的组合物的本发明化合物(化合物A或其药学上可接受的盐；化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药)的量因所治疗的宿主、特定施用方式而异。优选地，所提供的组合物应被配制成使得可以将0.01-100mg/kg体重/天的剂量的抑制剂施用于接受这些组合物的患者。
还应理解，用于任何特定患者的特定剂量和治疗方案取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、排泄率、药物组合和主治医师的判断以及所治疗的特定疾病的严重程度。组合物中本发明化合物的量还取决于组合物中的特定化合物。
化合物和药学上可接受的组合物的用途
在一些实施方案中，本发明提供一种用于治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐或其药物组合物，以及PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐或其药物组合物，和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。在一些实施方案中，本发明提供一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。
癌症
如本文所用，“癌症”是指以体内异常细胞不受控制的生长为特征的一大组各种疾病。不受控制的细胞分裂和生长分裂和生长导致恶性肿瘤的形成，所述肿瘤侵入邻近组织并且还可以通过淋巴系统或血流转移到身体的远处部分。
要使用本发明治疗的癌症包括但不限于血液系统癌症、淋巴瘤、骨髓瘤、白血病、神经系统癌症、皮肤癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、肺癌、头颈癌、胃肠癌、肝癌、胰腺癌、泌尿生殖系统癌症、骨癌、肾癌和血管癌。
要使用本文所描述的方法和用途治疗的癌症可以选自尿路上皮癌，包含但不限于膀胱癌和所有移行细胞癌；头颈部鳞状细胞癌；黑色素瘤，包含但不限于葡萄膜黑色素瘤；卵巢癌，包含但不限于卵巢癌的浆液性亚型；肾细胞癌，包含但不限于透明细胞肾细胞癌亚型；宫颈癌；胃肠/胃(GIST)癌，包含但不限于胃癌；非小细胞肺癌(NSCLC)；急性髓性白血病(AML)；以及食道癌。
在一些实施方案中，癌症是尿路上皮癌。在一些实施方案中，癌症是膀胱癌。在一些实施方案中，癌症是移行细胞癌。在一些实施方案中，癌症是头颈部鳞状细胞癌。在一些实施方案中，癌症是黑色素瘤。在一些实施方案中，癌症是葡萄膜黑色素瘤。在一些实施方案中，癌症是卵巢癌。在一些实施方案中，癌症是卵巢癌的浆液性亚型。在一些实施方案中，癌症是肾细胞癌。在一些实施方案中，癌症是透明细胞肾细胞癌亚型。在一些实施方案中，癌症是宫颈癌。在一些实施方案中，癌症是胃肠/胃(GIST)癌。在一些实施方案中，癌症是胃癌。在一些实施方案中，癌症是非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方案中，癌症是晚期和/或转移性NSCLC。在一些实施方案中，癌症是食道癌。
在一些实施方案中，癌症是肺癌、甲状腺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、前列腺癌、胰腺癌、食道癌、肝癌、乳腺癌、皮肤癌或间皮瘤。在一些实施方案中，癌症是间皮瘤，例如恶性间皮瘤。
在一些实施方案中，癌症是卵巢癌。卵巢癌的非限制性实例包括高级别浆液性卵巢癌、低级别浆液性卵巢癌、子宫内膜样卵巢癌、透明细胞卵巢癌和粘液性卵巢癌。
在一些实施方案中，癌症包括但不限于：白血病(例如，急性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、急性成髓细胞性白血病、急性早幼粒细胞性白血病、急性髓单核细胞性白血病、急性单核细胞性白血病、急性红白血病、慢性白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病)、真性红细胞增多症、淋巴瘤(例如，霍奇金氏病(Hodgkin's disease)或非霍奇金氏病(non-Hodgkin'sdisease))、华氏巨球蛋白血症(Waldenstrom's macroglobulinemia)、多发性骨髓瘤、重链病以及实体瘤，如肉瘤和癌(例如，纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、成骨性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤文氏瘤(Ewing's tumor)、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝癌、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎癌、维尔姆斯氏瘤(Wilm's tumor)、宫颈癌、子宫癌、睾丸癌、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、胶质瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤(GBM，也称为胶质母细胞瘤)、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、神经纤维肉瘤、脑膜瘤、黑色素瘤、神经母细胞瘤和视网膜母细胞瘤)。
在一些实施方案中，癌症是胶质瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤(GBM，也称为胶质母细胞瘤)、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、成血管细胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、神经纤维肉瘤、脑膜瘤、黑色素瘤、神经母细胞瘤或视网膜母细胞瘤。
在一些实施方案中，癌症是听神经瘤、星形细胞瘤(例如I级-毛细胞型星形细胞瘤、II级-低级星形细胞瘤、III级-间变型星形细胞瘤或IV级-胶质母细胞瘤(GBM))、脊索瘤、CNS淋巴瘤、颅咽管瘤、脑干胶质瘤、室管膜瘤、混合型胶质瘤、视神经胶质瘤、室管膜下瘤、成神经管细胞瘤、脑膜瘤、转移性脑肿瘤、少突神经胶质瘤、垂体瘤、原始神经外胚层(PNET)肿瘤或神经鞘瘤。在一些实施方案中，癌症是相比成人中，在儿童中更常见的类型，如脑干胶质瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、青少年毛细胞型星形细胞瘤(JPA)、成神经管细胞瘤、视神经胶质瘤、松果体肿瘤、原始神经外胚层肿瘤(PNET)或横纹肌样瘤。在一些实施方案中，患者是成人。在一些实施方案中，患者是儿童或小儿患者。
在另一实施方案中，癌症包含但不限于：间皮瘤、肝细胞(肝和胆管)癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、皮肤或眼内黑色素瘤、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肛门癌、胃癌、胃肠癌(胃癌、结肠直肠癌和十二指肠癌)、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、睾丸癌、慢性或急性白血病、慢性粒细胞白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾或输尿管癌、肾细胞癌、肾盂癌、非霍奇金淋巴瘤、脊髓轴肿瘤、脑干胶质瘤、垂体腺瘤、肾上腺皮质癌、胆囊癌、多发性骨髓瘤、胆管癌、纤维肉瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤或前述癌症中的一或多种的组合。
在一些实施方案中，癌症选自肝细胞癌、卵巢癌、卵巢上皮癌或输卵管癌；乳头状浆液性囊腺癌或子宫乳头状浆液性癌(UPSC)；前列腺癌；睾丸癌；胆囊癌；胆管肝癌；软组织和骨滑膜肉瘤；横纹肌肉瘤；骨肉瘤；软骨肉瘤；尤文氏肉瘤；甲状腺未分化癌；肾上腺皮质腺瘤；胰腺癌；胰腺导管癌或胰腺癌；胃肠/胃(GIST)癌；淋巴瘤；头颈部鳞状细胞癌(SCCHN)；唾液腺癌；胶质瘤或脑癌；1型神经纤维瘤病相关恶性周围神经鞘瘤(MPNST)；华氏巨球蛋白血症；或成神经管细胞瘤。
在一些实施方案中，癌症选自肝细胞癌(HCC)、肝母细胞癌、结肠癌、直肠癌、卵巢癌、卵巢上皮癌、输卵管癌、乳头状浆液性囊腺癌、子宫乳头状浆液性癌(UPSC)、胆管肝癌、软组织和骨滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、甲状腺未分化癌、肾上腺皮质腺瘤、胰腺癌、胰腺导管癌、胰腺癌、胶质瘤、1型神经纤维瘤病相关恶性周围神经鞘瘤(MPNST)、华氏巨球蛋白血症或成神经管细胞瘤。
在一些实施方案中，癌症是如肉瘤、癌或淋巴瘤等实体瘤。实体瘤通常包括异常组织质量，其通常不包含囊肿或液体区域。在一些实施方案中，癌症选自肾细胞癌或肾癌；肝细胞癌(HCC)或肝母细胞癌或肝癌；黑色素瘤；乳腺癌；结肠直肠癌(colorectal carcinoma或colorectal cancer)；结肠癌；直肠癌；肛门癌；如非小细胞性肺癌(NSCLC)或小细胞性肺癌(SCLC)等肺癌；卵巢癌(ovarian cancer)、卵巢上皮癌、卵巢癌(ovarian carcinoma)或输卵管癌；乳头状浆液性囊腺癌或子宫乳头状浆液性癌(UPSC)；前列腺癌；睾丸癌；胆囊癌；胆管肝癌；软组织和骨滑膜肉瘤；横纹肌肉瘤；骨肉瘤；软骨肉瘤；尤文氏肉瘤；甲状腺未分化癌；肾上腺皮质癌；胰腺癌；胰腺导管癌或胰腺癌；胃肠/胃(GIST)癌；淋巴瘤；头颈部鳞状细胞癌(SCCHN)；唾液腺癌；胶质瘤或脑癌；1型神经纤维瘤病相关恶性周围神经鞘瘤(MPNST)；华氏巨球蛋白血症；或成神经管细胞瘤。
在一些实施方案中，癌症选自肾细胞癌、肝细胞癌(HCC)、肝母细胞癌、结肠直肠癌(colorectal carcinoma/colorectal cancer)、结肠癌、直肠癌、肛门癌、卵巢癌(ovariancancer)、卵巢上皮癌、卵巢癌(ovarian carcinoma)、输卵管癌、乳头状浆液性囊腺癌、子宫乳头状浆液性癌(UPSC)、胆管肝癌、软组织和骨滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、甲状腺未分化癌、肾上腺皮质癌、胰腺癌、胰腺导管癌、胰腺癌、胶质瘤、脑癌、1型神经纤维瘤病相关恶性周围神经鞘瘤(MPNST)、华氏巨球蛋白血症或成神经管细胞瘤。
在一些实施方案中，癌症选自肝细胞癌(HCC)、肝母细胞癌、结肠癌、直肠癌、卵巢癌(ovarian cancer)、卵巢上皮癌、卵巢癌(ovarian carcinoma)、输卵管癌、乳头状浆液性囊腺癌、子宫乳头状浆液性癌(UPSC)、胆管肝癌、软组织和骨滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、甲状腺未分化癌、肾上腺皮质癌、胰腺癌、胰腺导管癌、胰腺癌、胶质瘤、1型神经纤维瘤病相关恶性周围神经鞘瘤(MPNST)、华氏巨球蛋白血症或成神经管细胞瘤。
在一些实施方案中，癌症是肝细胞癌(HCC)。在一些实施方案中，癌症是肝母细胞癌。在一些实施方案中，癌症是结肠癌。在一些实施方案中，癌症是直肠癌。在一些实施方案中，癌症是卵巢癌(ovarian cancer/ovarian carcinoma)。在一些实施方案中，癌症是卵巢上皮癌。在一些实施方案中，癌症是输卵管癌。在一些实施方案中，癌症是乳头状浆液性囊腺癌。在一些实施方案中，癌症是子宫乳头状浆液性癌(UPSC)。在一些实施方案中，癌症是胆管肝癌。在一些实施方案中，癌症是软组织和骨滑膜肉瘤。在一些实施方案中，癌症是横纹肌肉瘤。在一些实施方案中，癌症是骨肉瘤。在一些实施方案中，癌症是甲状腺未分化癌。在一些实施方案中，癌症是肾上腺皮质癌。在一些实施方案中，癌症是胰腺癌或胰腺导管癌。在一些实施方案中，癌症是胰腺癌。在一些实施方案中，癌症是胶质瘤。在一些实施方案中，癌症是恶性周围神经鞘瘤(MPNST)。在一些实施方案中，癌症是1型神经纤维瘤病相关MPNST。在一些实施方案中，癌症是华氏巨球蛋白血症。在一些实施方案中，癌症是成神经管细胞瘤。
在一些实施方案中，癌症是急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性髓性白血病(AML)、肾上腺皮质癌、肛门癌、阑尾癌、非典型畸胎瘤样/横纹肌样瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑肿瘤、星形细胞瘤、脑和脊髓肿瘤、脑干胶质瘤、中枢神经系统非典型畸胎瘤样/横纹肌样瘤、中枢神经系统胚胎瘤、乳腺癌、支气管肿瘤、伯基特淋巴瘤(BurkittLymphoma)、类癌瘤、原发灶不明的转移癌、中枢神经系统癌、宫颈癌、儿童期癌症、脊索瘤、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、慢性髓细胞性白血病(CML)、慢性骨髓增殖性病症、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、原位癌(DCIS)、胚胎瘤、子宫内膜癌、成室管膜细胞瘤、室管膜瘤、食道癌、鼻腔神经胶质瘤、尤文氏肉瘤、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞瘤、肝外胆管癌、眼癌、骨纤维组织细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠类癌瘤、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞瘤、卵巢生殖细胞瘤、妊娠滋养细胞瘤、胶质瘤、毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝细胞癌、组织细胞增生症、朗格汉斯细胞癌(Langerhans Cell Cancer)、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、眼内黑色素瘤、胰岛细胞瘤、卡波西肉瘤(Kaposi Sarcoma)、肾癌、朗格汉斯细胞组织细胞增生症(Langerhans Cell Histiocytosis)、喉癌、白血病、唇和口腔癌、肝癌、小叶原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、AIDS相关淋巴瘤、巨球蛋白血症、男性乳腺癌、成神经管细胞瘤、髓质上皮瘤、黑色素瘤、梅克尔细胞癌(Merkel Cell Carcinoma)、恶性间皮瘤、原发灶隐匿转移性颈部鳞状细胞癌、涉及NUT基因的中线道癌、口癌、多发性内分泌瘤综合征、多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤、蕈样肉芽肿(Mycosis Fungoides)、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤、慢性髓细胞性白血病(CML)、急性髓性白血病(AML)、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、慢性骨髓增殖性病症、鼻腔癌、副鼻窦癌、鼻咽癌、成神经细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、口腔癌(Oral Cancer/Oral Cavity Cancer)、唇癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳头瘤病、副神经节瘤、副鼻窦癌、鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽癌、嗜铬细胞瘤、中度分化的松果体实质肿瘤、松果体母细胞瘤、垂体瘤、浆细胞瘤、胸膜肺母细胞瘤、乳腺癌、原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直肠癌、肾细胞癌、透明细胞肾细胞癌、肾盂癌、输尿管癌、移行细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤、塞扎里综合征(Sezary Syndrome)、皮肤癌、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、原发灶隐匿鳞状颈癌、头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)、胃癌、幕上原始神经外胚层肿瘤、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤、胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、三阴性乳腺癌(TNBC)、妊娠滋养细胞瘤、未知原发灶、儿童期罕见癌症、尿道癌、子宫癌、子宫肉瘤、华氏巨球蛋白血症或威尔姆氏瘤(Wilms Tumor)。
在某些实施方案中，癌症选自膀胱癌、乳腺癌(包含TNBC)、宫颈癌、结肠直肠癌、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、食道腺癌、胶质母细胞瘤、头颈癌、白血病(急性和慢性)、低级胶质瘤、肺癌(包含腺癌、非小细胞肺癌和鳞状细胞癌)、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、黑色素瘤、多发性骨髓瘤(MM)、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌(包含肾透明细胞癌和肾乳头状细胞癌)和胃癌。
在一些实施方案中，癌症为小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、多发性骨髓瘤、急性髓性白血病AML、急性成淋巴细胞性白血病ALL、胰腺癌、肝癌、肝细胞癌、成神经细胞瘤、其它实体瘤或其它血液癌。
在一些实施方案中，癌症为小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、多发性骨髓瘤或AML。
本发明的特征进一步在于用于病毒相关癌症的诊断、预后和治疗的方法和组合物，所述病毒相关癌症包含：人免疫缺陷病毒(HIV)相关实体瘤、人乳头瘤病毒(HPV)-16阳性无法治愈性实体瘤和成人T细胞白血病，其由人T细胞白血病病毒I型(HTLV-I)引起，并且是特征在于HTLV-I在白血病细胞中的克隆整合的CD4+T细胞白血病的一种高度侵袭性形式(参见https://clinicaltrials.gov/ct2/show/study/NC T02631746)；以及胃癌、鼻咽癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、头颈部鳞状细胞癌和梅克尔细胞癌中的病毒相关肿瘤。(参见https://clinicalt rials.gov/ct2/show/study/NCT02488759；还参见https://clinicaltrials.gov/ct2/show/study/NCT0240886；https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02426892)
在一些实施方案中，本文所述的方法或用途抑制或减少或阻止或改善癌症或肿瘤的生长或扩散。在一些实施方案中，通过阻止、减少或抑制癌症或肿瘤的进一步生长来治疗肿瘤。在一些实施方案中，本文所述的方法或用途增加或加强或激活一种或多种免疫反应以抑制或减少或阻止或改善癌症或肿瘤的生长或扩散。在一些实施方案中，通过相对于治疗之前的癌症或肿瘤的大小将癌症或肿瘤的大小(例如，体积或质量)减小至少5％、至少10％、至少25％、至少50％、至少75％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％来治疗癌症或肿瘤。在一些实施方案中，通过相对于治疗之前的肿瘤的数量将患者的癌症或肿瘤的数量减少至少5％、至少10％、至少25％、至少50％、至少75％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％来治疗癌症或肿瘤。
在一些实施方案中，使用本文所述的方法或用途治疗的患者在施用化合物A和PDx抑制剂，如纳武单抗之后表现出至少约一个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约一年、至少约18个月、至少约两年、至少约三年、至少约四年或至少约五年的无进展生存期。在一些实施方案中，使用本文所述的方法或用途治疗的患者在施用化合物A和PDx抑制剂，如纳武单抗之后表现出至少约一个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约一年、至少约14个月、至少约16个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约22个月、至少约两年、至少约三年、至少约四年或至少约五年的总生存期。
在一些实施方案中，使用本文所述的方法或用途治疗的患者在施用化合物A和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物之后表现出至少约一个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约一年、至少约十八个月、至少约两年、至少约三年、至少约四年或至少约五年的无进展生存期。在一些实施方案中，使用本文所述的方法或用途治疗的患者在施用化合物A和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物之后表现出至少约一个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约一年、至少约14个月、至少约16个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约22个月、至少约两年、至少约三年、至少约四年或至少约五年的总生存期。
在一些实施方案中，使用本文所述的方法或用途治疗的患者表现出至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％的客观反应率(ORR)。
本文所述的化合物和组合物可以使用有效治疗癌症或减轻癌症严重程度的任何量和任何施用途径施用。所需的确切量因受试者而异，取决于受试者的物种、年龄和一般状况、疾病或病况的严重程度、特定药剂、其施用方式等。优选将本发明的化合物配制成剂量单位形式以便于施用和剂量均匀。如本文所用的表述“剂量单位形式”是指适合于待治疗患者的药剂的物理离散单位。然而，应当理解，本发明的化合物和组合物的每天总用量由主治医师在合理的医学判断范围内决定。任何特定患者或生物体的具体有效剂量水平将取决于多种因素，包括正在治疗的病症和病症的严重程度；所用特定化合物的活性；使用的具体成分；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所用特定化合物的施用时间、施用途径和排泄率；治疗的持续时间；与所用的特定化合物组合使用或同时使用的药物，以及医学领域众所周知的类似因素。如本文所用，术语“患者”或“受试者”是指动物，优选哺乳动物，最优选人。
取决于正在治疗的疾病或病症的严重程度，本发明的药学上可接受的组合物可以经口、经直肠、肠胃外、脑池内、阴道内、腹膜内、局部(如通过粉末、软膏或滴剂)、经颊、作为口腔或鼻腔喷雾剂等施用于人类和其它动物。在某些实施方案中，本发明的化合物可以每天约0.01mg/kg至约50mg/kg且优选约1mg/kg至约25mg/kg受试者体重的剂量水平经口或肠胃外施用，一天一次或多次，以获得所需的治疗效果。
用于经口施用的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性化合物外，液体剂型可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄基醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇脂肪酸酯以及其混合物。除了惰性稀释剂外，口服组合物还可以包括佐剂，例如润湿剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性混悬剂可根据已知技术使用合适的分散剂或润湿剂和助悬剂配制。无菌可注射制剂也可以是在无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如1,3-丁二醇溶液。可以使用的可接受的媒剂和溶剂包括水、林格氏溶液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的不挥发性油通常用作溶剂或悬浮介质。为此，可以使用任何温和的不挥发性油，包括合成甘油单酯或甘油二酯。另外，如油酸等脂肪酸也用于制备注射剂。
可注射制剂可以被灭菌，例如通过经由细菌截留过滤器过滤，或通过掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂，其可以在使用前溶解或分散在无菌水或其它无菌可注射介质中。
为了延长本发明化合物的作用，通常需要减缓皮下或肌内注射对化合物的吸收。这可以通过使用水溶性差的结晶或非晶形材料的液体悬浮液来实现。化合物的吸收速率则取决于其溶解速率，而溶解速率又可能取决于晶体大小和结晶形式。或者，肠胃外施用的化合物形式的延迟吸收通过将化合物溶解或悬浮在油媒剂中来实现。可注射储库形式是通过在可生物降解的聚合物(例如聚丙交酯-聚乙交酯)中形成化合物的微囊基质制成的。取决于化合物与聚合物的比率和所用特定聚合物的性质，可以控制化合物的释放速率。其它生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。还可以通过将化合物包裹在与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备储库可注射配制物。
用于经直肠或经阴道施用的组合物优选是栓剂，其可以通过将本发明的化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，所述赋形剂或载体在环境温度下为固体但在体温下为液体，并且因此在直肠或阴道腔中融化并释放活性化合物。
用于经口施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物与以下各者混合：至少一种惰性、药学上可接受的赋形剂或载体，例如柠檬酸钠或磷酸氢钙和/或a)填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)保湿剂，例如甘油，d)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂，例如石蜡，f)吸收促进剂，例如季铵化合物，g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯，h)吸收剂，例如高岭土和膨润土，以及i)润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。
类似类型的固体组合物也可以使用赋形剂，例如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇等在软和硬填充明胶胶囊中用作填充剂。片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可以用包衣和壳体，例如肠溶包衣和药物配制领域熟知的其它包衣来制备。它们可以任选地含有遮光剂并且也可以是这样的组合物，即它们仅或优选地在肠道的某个部分释放活性成分，任选地以延迟的方式释放。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。类似类型的固体组合物也可使用赋形剂，例如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇等在软和硬填充明胶胶囊中用作填充剂。
活性化合物也可以与一种或多种如上所述的赋形剂一起呈微囊化形式。片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可以用包衣和壳体，例如肠溶包衣、控释包衣和药物配制领域熟知的其它包衣来制备。在此类固体剂型中，活性化合物可以与至少一种惰性稀释剂例如蔗糖、乳糖或淀粉混合。此类剂型还可以按照惯例包含除惰性稀释剂之外的其它物质，例如压片润滑剂和其它压片助剂，例如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。它们可以任选地含有遮光剂并且也可以是这样的组合物，即它们仅或优选地在肠道的某个部分释放活性成分，任选地以延迟的方式释放。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。
用于本发明化合物的局部或透皮施用的剂型包括软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、散剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴剂。活性成分在无菌条件下与药学上可接受的载体和可能需要的任何所需防腐剂或缓冲液混合。眼用配制物、滴耳剂和滴眼剂也被认为在本发明的范围内。另外，本发明考虑使用透皮贴剂，其具有向身体提供化合物的受控递送的额外优点。此类剂型可以通过将化合物溶解或分散在适当的介质中来制备。吸收增强剂也可用于增加化合物穿过皮肤的流量。可以通过提供速率控制膜或通过将化合物分散在聚合物基质或凝胶中来控制速率。
与PDx抑制剂或多柔比星或其药学上可接受的盐或其衍生物的组合
如本文所用，术语“组合”、“组合的”和相关术语是指治疗剂的同时或顺序施用。例如，化合物A可以与PDx抑制剂例如纳武单抗，或多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物以单独的单位剂型同时或顺序施用，或以单一单位剂型一起施用。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约100-2000mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约150-1800mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200-1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约400mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约800mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约100-2000mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约150-1800mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200-1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约400mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约800mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约100-2000mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约150-1800mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200-1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约400mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约800mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐时，给药是每天两次或BID，即两个单独的约600mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐时，给药是每天三次或TID，即三个单独的约400mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐时，给药是每天四次或QID，即四个单独的约300mg剂量。
在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐时，给药是每天两次或BID，即两个单独的约800mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐时，给药是每天三次或TID，即三个单独的约533mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐时，给药是每天四次或QID，即四个单独的约400mg剂量。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约100-2000mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约150-1800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200-1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约400mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每2周一次约240mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约100-2000mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约150-1800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200-1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约400mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每4周一次约480mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约100-2000mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约150-1800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200-1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约400mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。在一些实施方案中，本发明的方法或用途包括：每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，以及每6周一次约720mg固定剂量的PDx抑制剂，例如纳武单抗。
在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天两次或BID，即两个单独的约600mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天三次或TID，即三个单独的约400mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天四次或QID，即四个单独的约300mg剂量。
在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天两次或BID，即两个单独的约800mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天三次或TID，即三个单独的约533mg剂量。在一些实施方案中，当每天向患者施用约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药时，给药是每天四次或QID，即四个单独的约400mg剂量。
提供以下实施例仅用于说明目的，并且不应解释为以任何方式限制本发明。
范例
化合物A可以通过本领域普通技术人员已知的方法制备，例如，如WO2018195397和美国专利号10,570,138中所描述，其每一篇的内容通过引用以其整体并入本文。
缩写列表
AE 不良事件
AHR 芳烃受体
AIP 芳烃受体相互作用蛋白
ALP 碱性磷酸酶
ALT 丙氨酸转氨酶
ANC 中性粒细胞绝对计数
aPTT 激活部分凝血活酶时间
ARNT 芳烃受体核转运蛋白
AST 天冬氨酸转氨酶
ATCC 美国典型培养物保藏中心
AUC 血浆浓度-时间曲线下面积
AUC0-24 从时间0到24小时的血浆浓度-时间曲线下面积
BCRP 乳腺癌耐药蛋白
BID 每天两次
BOR 最佳总体反应
C#D# 周期数天数
CI 置信区间
CL 清除率
Cmax 观察到的最大{血浆/血液/血清}浓度
CNS 中枢神经系统
CR 完全反应
CT26.WT 小鼠结肠癌细胞系
CSR 临床研究报告
CT 计算机断层扫描
CYP 细胞色素
DCR 疾病控制率
DLT 剂量限制性毒性
DOR 反应持续时间
Doxil 多柔比星的聚乙二醇化(聚乙二醇涂布)脂质体包封形式
DOT 治疗持续时间
DPBS 杜尔贝科氏磷酸盐缓冲盐水
DRE 二噁英反应元件
ECG 心电图
ECI 临床上所关注的事件
ECOG 东部肿瘤协作组
eCRF 病例报告表(电子版或纸质版)
EDTA 乙二胺四乙酸
EOS 研究结束
EOT 治疗结束
ET 早期终止
FBS 胎牛血清
FDA 美国食品和药物管理局(Food and Drug Administration)
FDG 氟-2-脱氧葡萄糖
FIH 首次人用
FSH 促卵泡激素
GCP 良好临床实践
G-CSF 粒细胞集落刺激因子
GI 胃肠
GFR 肾小球滤过率
GLP 良好实验室实践
GM-CSF 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
HED 人体等效剂量
HIV 人免疫缺陷病毒
HRT 激素替代疗法
HNSTD 最高非严重毒性剂量
IACUC 机构动物护理和使用委员会
IB 研究人员手册
IC50 半最大抑制浓度
ICF 知情同意书
ICH 国际协调委员会
IDO1 吲哚胺2,3-双加氧酶
IEC 机构伦理委员会
IL 白介素
INR 国际标准化比率
irAE 免疫相关不良事件
iRECIST 实体瘤免疫反应评估标准
IRB 机构审查委员会
IV 静脉内(地)
MC 甲基纤维素
PO 经口
Q7D 每7天，每周一次
QD 每天，每日
LLN 正常下限
LV 左心室
LVEF 左心室射血分数
MedDRA 药事管理医学词典
MRI 磁共振成像
MTD 最大耐受剂量
mTPI 经改良的毒性概率区间试验设计
mTPI-2 经改良的毒性概率区间试验设计的修正
NCI-CTCAE 美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准
(National Cancer Institute Common TerminologyCriteria for AdverseEvents)
NLNT 新病变，非靶标
RPMI-1640 洛斯维帕克纪念研究所-1640培养基
SC 皮下
NLT 新病变-靶标
NSAID 非甾体类抗炎药
ORR 客观反应率
PCR 聚合酶链反应
PD 进行性疾病
PD-1 程序性细胞死亡1
PET 正电子发射断层扫描
PFS 无进展生存期
PK 药物动力学
PO 经口
PR 部分反应
PT 凝血酶原时间
q8h 每8小时
q12h 每12小时
q4w 每4周
QD 每天一次
QID 每天四次
SEM 平均值的标准误差
QTcF 由Fridericia校正公式校正的QT间期
RECIST 1.1 实体瘤反应评估标准1.1版
RP2D 推荐的第2期剂量
SAE 严重不良事件
SD 稳定型疾病
SAP 统计分析计划
SoE 事件时间表
SRM 研究参考手册
STD10 针对10％动物的严重毒性剂量
SRC 安全审查委员会(Safety Review Committee)
SUSAR 疑似未预料到的严重不良反应
t1/2 半衰期
TDO2 色氨酸2,3-双加氧酶2
TGI 肿瘤生长抑制
TME 肿瘤微环境
UPLC 超高压液相色谱
TEAE 治疗中出现的不良事件
TID 每天三次
Treg 调控性T细胞
ULN 正常上限
Vss 稳态分布容积
WHO 世界卫生组织(World Health Organization)
WOCBP 有生育能力的女性
实施例1：证明化合物A单独和与PDx抑制剂组合或与脂质体多柔比星Doxil的组合的效力和功效的非临床研究
非临床药理学
体外药理学
在细胞系和在原代免疫细胞中进行了一系列细胞测定以确定化合物A的效力和作用机制。
化合物A在小鼠和大鼠细胞系中的体外活性
通过测量2种啮齿动物肝癌细胞系在AHR激动剂刺激后的Cyp1A1酶活性的变化，在体外检查了化合物A抑制AHR依赖性Cyp1A1基因表达的能力。在存在多种浓度的化合物A的情况下，分别用AHR激动剂VAF347和L-犬尿氨酸处理小鼠Hepa1.6和大鼠H411E肝癌细胞，持续24小时。随后通过使用P450-Glo测定测量Cyp1A1酶活性来评估Cyp1A1表达的抑制。在用2μM VAF347处理的鼠Hepa1.6细胞中，化合物A以浓度依赖性方式抑制Cyp1A1的AHR依赖性表达，其中平均IC50为36nM。在用100μM L-犬尿氨酸处理的大鼠肝癌H411E细胞中，化合物A以浓度依赖性方式抑制AHR依赖性Cyp1A1表达，其中IC50为151nM。
化合物A和代谢物在人细胞系中的体外活性
进行体外实验以检查化合物A对HepG2 DRE-Luc报告细胞系中AHR介导的转录激活的抑制活性。此人肝癌细胞系稳定地表达在AHR响应性DRE增强子元件控制下的荧光素酶报告基因(Han,2004)。用80nM VAF347处理HepG2 DRE-Luc报告细胞以激活AHR。化合物A以浓度依赖性方式抑制VAF347刺激的荧光素酶表达，其中IC50为91nM(n＝2)。
还在HepG2 DRE-Luc细胞系中测定了人化合物A代谢物，即化合物B和化合物C的抑制性活性。用80nM VAF347和多种浓度下的每种代谢物刺激报告细胞。两种化合物A代谢物均显示出以浓度依赖性方式有效抑制AHR依赖性荧光素酶表达。化合物B的IC50为23nM，而化合物C的IC50为213nM(针对两者，n＝2)。
化合物A在食蟹猴外周血单核细胞中的体外活性
在食蟹猴的外周血单核细胞(PBMC)中评估化合物A对AHR依赖性基因表达的影响，以评估非啮齿类毒素物种中的活性。用化合物A离体处理食蟹猴PBMC，并使用QuantigenePlex(QGP)定制面板对AHR依赖性基因CYP1B1和AHR的基因表达进行定量。化合物A以浓度依赖性方式抑制AHR靶基因Cyp1B1和AHR，其中IC50值分别为6nM和30nM，从而证明非人灵长类物种的PBMC中的AHR抑制。
化合物A在人T细胞和全血中的体外活性
AHR在免疫细胞中起关键作用，并且其抑制作用旨在逆转免疫抑制并激活T细胞。在原代人T细胞中评估了化合物A抑制AHR依赖性CYP1A1表达和细胞因子产生的能力。AHR直接调控免疫抑制细胞因子IL-22的表达。用CD3/CD28四聚体激活从健康供体PBMC中分离的人T细胞，并用化合物A温育24小时。通过定量逆转录聚合酶链反应对细胞沉淀物进行RNA分离和CYP1A1分析。对于细胞因子分析测定，用化合物A处理CD3/CD28激活的T细胞，并在48小时后收集培养上清液以用于使用Meso Scale Discovery V-plex IL-22板分析IL-22水平。化合物A通过以浓度依赖性方式降低CYP1A1的表达来抑制激活的人T细胞中的AHR依赖性基因表达。IC50测定为63nM。化合物A还以浓度依赖性方式抑制激活的T细胞分泌IL-22，其中IC50值为7nM。
为了进一步检查化合物A对人免疫细胞中基础和配体激活的AHR依赖性基因表达的影响，在存在或不存在20μM L-犬尿氨酸的情况下，将来自2名健康人供体的血液样本离体暴露于化合物A，以激活AHR。在24小时之后，评估细胞的CYP1B1基因表达。在没有AHR激活的全血样本中，CYP1B1表达的基础水平在两个供体中均被化合物A处理抑制。化合物A还在来自2个不同供体的经处理的全血中抑制AHR配体L-犬尿氨酸诱导的CYP1B1。在两个供体中，>0.5μM的化合物A浓度在基础和配体激活条件下抑制超过50％的CYP1B1基因表达。
体内药理学
通过犬尿氨酸或其它配体激活AHR会更改多种免疫调节基因的基因表达，从而导致先天性免疫系统和适应性免疫系统两者内的免疫抑制(Opitz,2011)。此AHR介导的免疫抑制在癌症中发挥作用，因为其活性会阻止免疫细胞识别和攻击正在生长的肿瘤(Murray,2014；Xue,2018；Takenaka,2019)。用化合物A进行体内研究以证明AHR在药效动力学研究和在TGI中作为单一药剂，以及与检查点抑制剂抗PD-1组合，以及与脂质体多柔比星Doxil组合使用在多个肿瘤模型中的在靶抑制。
化合物A在鼠肝和脾中的药效动力学
在C57BL/6小鼠中检查了化合物A在肝和脾中抑制AHR依赖性基因表达的药效动力学作用。在这项研究中，通过向小鼠口服给药VAG539，即活性激动剂VAF347的前药来激活AHR(Hauben,2008)。
通过口服强饲以30mg/kg用媒剂或AHR激动剂VAG539治疗C57BL/6雌性小鼠。在一些小鼠中，在以5mg/kg、10mg/kg和25mg/kg口服给药化合物A后立即施用VAG539。给药后4小时和10小时处死小鼠并提取RNA，并对CYP1A1和管家基因小鼠甘油醛3-磷酸脱氢酶的基因表达进行定量。将每个剂量组的肝组织和脾组织的CYP1A1 mRNA表达水平归一化到对照组。
在单独施用30mg/kg VAG539后，肝中的AHR依赖性CYP1A1表达在治疗后4小时和10小时增加了895倍和132倍。通过与化合物A共同施用以剂量依赖性方式抑制肝中增加的CYP1A1 mRNA表达。在25mg/kg剂量的化合物A的情况下观察到完全抑制VAG539诱导的CYP1A1 mRNA增加。VAG539诱导的CYP1A1表达在小鼠脾中较低，其中在治疗后4小时和10小时增加了12.9倍和1.8倍。化合物A与VAG539共同施用导致脾中CYP1A1 mRNA诱导的剂量依赖性抑制，其中当用25mg/kg化合物A治疗小鼠4小时时达到完全抑制。这项研究证明了化合物A在小鼠肝和脾中对AHR的剂量依赖性和在靶抑制。
化合物A与抗PD-1抗体(BioXcell RMP1-14)的组合在B16-IDO1原位小鼠黑色素瘤 癌症模型中的活性
在原位黑色素瘤的C57Bl/6小鼠同基因模型中确定了单独的化合物A治疗以及其与抗PD-1抗体(BioXcell RMP1-14)组合治疗对肿瘤生长的影响。对B16-F10鼠黑色素瘤肿瘤细胞进行工程化以过表达已知将色氨酸分解代谢成犬尿氨酸的IDO1，由此激活AHR(Holmgaard,2015)。
C57Bl/6雌性小鼠皮内接种B16-IDO1肿瘤细胞。一旦肿瘤形成，用媒剂、化合物A、抗PD-1抗体或抗PD-1抗体和化合物A的组合治疗动物。化合物A(25mg/kg)每天口服施用一次(QD)，持续12天，而抗PD-1抗体(250μg/小鼠)每3天腹膜内(IP)施用一次，总计5个剂量。
与媒剂对照组相比，抗PD-1抗体的施用导致TGI为51.4％(p＝0.025)。与媒剂相比，化合物A和抗PD-1抗体的组合导致显著的TGI为86％(p＝0.0001)，与产生1种CR的抗PD-1抗体单一疗法组相比，TGI为71.2％(p＝0.0109)(图1)。这些数据证明了化合物A和抗PD-1抗体对鼠黑色素瘤模型中TGI的协同组合作用。
单独的化合物A和其与抗PD-1抗体(BioXcell RMP1-14)组合时对携带CT26.WT鼠 结肠直肠癌模型的小鼠肿瘤生长和宿主生存的影响
在结肠直肠癌的CT26.WT同基因模型中评估了单一药剂化合物A和化合物A与抗PD-1抗体(BioXcell RMP1-14)组合对TGI和肿瘤存活的影响。用肿瘤细胞皮下接种Balb/cJ雌性小鼠，并且在接种后4天，QD口服施用化合物A(10mg/kg或25mg/kg)或媒剂，总计53剂量。同时，每周两次IP施用抗PD-1抗体(10mg/kg)，总计5剂量。
与媒剂对照组相比，化合物A作为单一药剂产生显著的TGI。相对于媒剂治疗的小鼠，口服施用10mg/kg和25mg/kg化合物A导致TGI分别为39.8％(p＝0.0061)和40.9％(p＝0.0015)。相对于媒剂治疗的小鼠，抗PD-1抗体的IP施用导致TGI为72.1％(p≤0.0001)。相对于媒剂治疗的小鼠，10mg/kg或25mg/kg化合物A和抗PD-1抗体的组合产生显著的TGI分别为72.9％(p≤0.0001)和86.5％(p≤0.0001)。(图2)。25mg/kg化合物A与抗PD-1抗体的组合导致10只小鼠中有7只出现完全反应(CR)(在CR测定后>95天开始肿瘤再激发)，而抗PD-1种抗体作为单一疗法导致4种CR。因此，25mg/kg化合物A与抗PD-1抗体的组合显示出优于抗PD-1抗体单一疗法的生存益处(图3)。10mg/kg化合物A与抗PD-1抗体的组合还导致2只小鼠出现CR。
在用化合物A和抗PD-1抗体的组合治疗的小鼠中出现CR后≥95天时，用CT26.WT细胞再激发反应动物。五只初始小鼠也被注射了CT26.WT细胞作为肿瘤形成的阳性对照。细胞接种后二十一天，所有初始小鼠均出现肿瘤，但在抗PD-1抗体单独组或10mg/kg化合物A和抗PD-1抗体组的CR小鼠中未检测到肿瘤生长。在25mg/kg化合物A组和抗PD-1抗体组中，1种CR具有小肿瘤(>104mm3)，并且7种CR中有6种没有任何可检测到的肿瘤生长的肿瘤，从而证明存在对抗CT26.WT细胞的T细胞记忆细胞。
这些研究表明，化合物A的抗肿瘤活性与免疫检查点阻断抑制剂协同作用并增强其活性。
单独的化合物A和其与脂质体多柔比星组合时对携带CT26.WT小鼠结肠直肠癌模 型的小鼠的肿瘤生长和宿主生存的影响
在BALB/cJ雌性小鼠的后胁以5×105个细胞/小鼠皮下(SC)接种CT26.WT肿瘤细胞，注射体积为100μL。细胞接种后4天，当仍无法检测到肿瘤生长时，将动物随机分为4组。动物被给予媒剂、化合物A、脂质体多柔比星Doxil、或化合物A和脂质体多柔比星Doxil的组合。化合物A治疗在细胞接种后7天开始，而脂质体多柔比星Doxil治疗在细胞接种后4天开始。在第7天，动物的平均肿瘤体积为85mm3(范围：50至160mm3肿瘤体积)。每天(QD)以PO施用化合物A(25mg/kg)和媒剂对照(0.5％ MC)，共计28个剂量。脂质体多柔比星Doxil(1mg/kg)和媒剂对照(DPBS)以IV Q7D施用，总共4个剂量。每周进行3次肿瘤和体重测量。计算肿瘤体积并测定与媒剂对照相比，化合物A作为单一药剂或与脂质体多柔比星Doxil组合时对肿瘤生长的抑制百分比。
CT26.WT接种物的制备
CT26是N-亚硝基-N-甲基氨基甲酸酯诱导的鼠类未分化结肠癌细胞系。它被克隆以产生命名为CT26.WT的细胞系。CT26.WT细胞购自美国典型培养物保藏中心(ATCC)。细胞在RPMI GlutaMAX+10％ FBS的培养物中生长，并保持在37℃和5％ CO2下。细胞每周传代2至3次。在植入当天，细胞约80％汇合，此时将其用DPBS清洗一次并用胰蛋白酶消化5分钟。通过添加完全培养基来中和胰蛋白酶-EDTA。对细胞进行计数并以5×106个细胞/mL的浓度再悬浮。每只雌性BALB/cJ小鼠在后胁区域皮下接受100μL注射液(5×105)。
肿瘤的发展和治疗
细胞接种后四天(检测不到肿瘤)，脂质体多柔比星Doxil(1mg/kg)和媒剂对照(DPBS)以IV Q7D施用，总共4个剂量。小鼠接受根据最近体重调整的2.5mL/kg剂量体积。细胞接种后7天(50至160mm3肿瘤体积)，将小鼠随机分为4组，平均肿瘤体积为85mm3。化合物A(25mg/kg)和媒剂对照(0.5％ MC)通过口服强饲法以PO QD施用28天。小鼠接受根据最近体重调整的5mL/kg剂量体积。使用数显卡尺测量肿瘤的长度和宽度。每周评估体重和肿瘤体积测量值三次。从治疗的第一天起体重减轻超过20％，肿瘤体积测量超过2,000mm3，或肿瘤溃疡导致安乐死。在第二剂也是最后一剂脂质体多柔比星Doxil后八天，对小鼠实施安乐死并将肿瘤快速冷冻在液氮中用于qPCR分析。
CR小鼠的再攻击
在最后一次CR出现100多天后，将1×106个CT26.WT以SC再攻击至CR小鼠的左下腹。三只初始小鼠也注射CT26.WT作为肿瘤接种的阳性对照。每周进行3次肿瘤测量。从治疗的第一天起体重减轻超过20％，肿瘤体积测量超过2,000mm3，或肿瘤溃疡导致安乐死。如针对初始肿瘤攻击所述计算肿瘤体积。
基因表达的定量PCR
根据制造商说明书，使用Magmax Mirvana总RNA分离试剂盒分离RNA。RNA浓度和纯度由Nanodrop测量，并根据制造商说明书使用SuperScript IV VILO预混液进行逆转录。通过q-PCR使用TaqMan Fast Advanced基因表达预混液和TaqMan探针定量小鼠靶基因细胞色素P450 1B1(Cyp1b1)、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和干扰素-γ(IFN-γ)以及管家基因小鼠次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1(HPRT1)的表达。确定了肿瘤组织的靶基因和HPRT1循环阈值(Ct)，并将靶基因表达标准化为HPRT1作为内部对照。使用ΔΔCt方法将每个治疗组的相对靶基因mRNA表达水平相对于媒剂对照组标准化。在Graphpad Prism中，独立样本t检验用于治疗组与媒剂对照组之间的统计比较。
血浆中多柔比星的水平
为了分析血浆中多柔比星的水平，使用眼眶后静脉采血收集血液。在4℃下将血液在EDTA二钾管中离心10分钟后产生血浆。将血浆转移到新管中并储存在-80℃下。
通过UPLC分析血浆中的多柔比星水平。
结果
化合物A+脂质体多柔比星Doxil的组合导致显著的TGI，与媒剂相比为82.4％(p<0.0001)，并且与脂质体多柔比星Doxil单药疗法组相比为64.2％(p＝0.0116)(图5和表3)。此外，化合物A与脂质体多柔比星Doxil的组合在10只小鼠中有1只导致CR(反应持续时间：>96天；肿瘤再攻击时间)，而脂质体多柔比星Doxil作为单药疗法未导致任何CR。因此，化合物A与脂质体多柔比星Doxil的组合显示优于脂质体多柔比星Doxil单药疗法的生存益处(图6)。没有动物因体重减轻超过20％而被安乐死。
表3.
在化合物A+脂质体多柔比星Doxil组合组中CR小鼠出现100多天后，用1×106个CT26.WT细胞再攻击至达到CR的小鼠的左下腹。三只初始小鼠也注射CT26.WT细胞作为肿瘤接种的阳性对照。每周进行3次肿瘤测量。细胞接种二十天后，初始小鼠的肿瘤>2,000mm3并被处死。在证明存在针对CT26.WT细胞的T细胞记忆细胞的再攻击后，在具有CR的小鼠中未检测到肿瘤生长。
为了确定化合物A治疗是否对多柔比星代谢有任何影响，在细胞接种后第28天分析血浆中多柔比星的水平。如图7中所示，用化合物A治疗小鼠对血浆中的多柔比星药物水平没有任何影响。
如本文所证明，化合物A加脂质体多柔比星Doxil的组合导致与媒剂相比显著的82.4％(p<0.0001)的TGI和与脂质体多柔比星Doxil单药疗法组相比显著的64.2％(p＝0.0116)的TGI。此外，化合物A与脂质体多柔比星Doxil的组合在10只小鼠中有1只导致CR，而脂质体多柔比星Doxil作为单药疗法未导致任何CR。因此，化合物A与脂质体多柔比星Doxil的组合显示优于脂质体多柔比星Doxil单药疗法的生存益处。对CR小鼠的再攻击研究证明了针对CT26.WT的抗肿瘤记忆。这些数据表明，化合物A与脂质体多柔比星Doxil协同作用并增强其对结肠直肠癌鼠类模型的TGI和生存的活性。
实施例2：化合物A(一种口服芳烃受体(AHR)抑制剂)与纳武单抗(一种PD-1检查点抑制剂)的组合在患有局部晚期或转移性实体瘤和尿路上皮癌的患者中的1期开放标记、剂量递增和扩展研究
1.目标：
主要：
·为了确定化合物A作为单一药剂以及与纳武单抗组合时的最大耐受剂量(MTD)并为了表征剂量限制毒性(DLT)
·为了评估化合物A作为单一药剂以及与纳武单抗组合时在确定化合物A的推荐的2期剂量(RP2D)时的另外的安全性和耐受性，包含急性和慢性毒性
次要：
·为了评估和表征化合物A和任何主要活性代谢物的PK
·为了评估作为单一药剂或与纳武单抗组合时的化合物A治疗的疾病反应
·为了在收集的配对肿瘤活检中评估化合物A作为单一药剂以及与纳武单抗组合时的药效动力学免疫作用
探究性：
·为了评估肿瘤AHR核定位作为对作为单一药剂以及与纳武单抗组合使用时的化合物A的疾病反应的预测标志物
·为了评估化合物A作为单一药剂以及与纳武单抗组合时对配对抽血和配对肿瘤活检中AHR靶基因表达的药效动力学作用
·为了评估化合物A作为单一药剂以及与纳武单抗组合时对配对抽血中外周免疫细胞和趋化因子/细胞因子的药效动力学作用
·为了评估肿瘤或血液中的候选基线生物标志物，以更好地了解作为单一药剂以及与纳武单抗组合时的化合物A治疗与治疗反应或耐药性之间的关系。
2.终点：
主要：
·符合方案定义的DLT标准的不良事件(AE)的比例。
·安全性终点：不良事件(AE)的总体频率，按等级、与研究治疗的关系、发作时间、事件持续时间、消退持续时间和伴随施用药物
次要：
·确定化合物A PK参数，包含半衰期(t1/2)、血浆浓度-时间曲线下的面积(AUC)和观察到的最大血浆浓度(Cmax)
·根据RECIST 1.1的初步抗肿瘤活性终点：客观反应率(ORR)、无进展生存期(PFS)、治疗持续时间(DOT)、疾病控制率(DCR)、反应持续时间(DOR)。对于患有尿路上皮癌的患者，研究人员可自行决定，另外的抗肿瘤终点包含根据iRECIST进行的评估
·免疫药效动力学终点：包含但不限于在化合物A治疗之前和期间收集的肿瘤活检中肿瘤浸润性细胞毒性T细胞的表征。
探究性：
·根据RECIST 1.1和iRECIST，与初步抗肿瘤活性终点相关的AHR核定位评估测试呈阳性的受试者比例。
·在研究药物治疗之后的血细胞和肿瘤组织中AHR靶基因表达的变化
·在研究药物治疗之后的免疫细胞类型的变化，包含但不限于循环辅助T细胞、细胞毒性T细胞和调控性单核细胞
·基线肿瘤生物标志物的相关性，包含但不限于AHR、IDO1和TDO2蛋白表达、AHR靶基因表达和免疫反应的基因表达谱
研究设计
这是一项首次人体(FIH)、开放标签、多中心、剂量递增和扩展研究，以评估口服(PO)化合物A的安全性、耐受性、PK、药效学和初步抗肿瘤活性。将有两个组：在晚期实体瘤和尿路上皮癌患者中，单一药剂化合物A组和化合物A与纳武单抗的组合组。安全审查委员会(SRC)由参与研究的研究人员和发起人构成，将使用mTPI-2设计(Guo,2017)并评估所有可用的安全数据，以指导剂量递增和递减决策以及两组的受试者入组。为了评估尿路上皮癌患者初步抗肿瘤活性的证据，两组采用了Simon 2阶段设计(Simon,1989)。
基线筛选期之后是单剂量磨合期(最多7天)，以评估化合物A在没有食物的情况下的PK。单一药剂治疗组包括每天在进食状态下口服给予化合物A。联合治疗组包括每天在进食状态下口服化合物A和每4周(q4w)以480mg的剂量单次静脉内输注纳武单抗。治疗期从第1天开始，并且由于化合物A的时间表没有计划中断，两组的一个治疗周期均被定义为治疗4周(即，每28天一次)，但单一药剂剂量递增阶段除外，其中一个治疗周期定义为治疗3周(即，21天)。受试者可以继续治疗直到疾病进展、产生不可接受的毒性或同意书撤回。至少，30天和90天随访应分别在最后一次研究药物施用后第30天和第90天(±7天)进行。如果在此时间段期间开始替代性疗法，则应在第一剂量的替代性疗法之前进行30天和/或90天随访。
可以收集档案肿瘤组织以探索肿瘤AHR核定位作为两组中患有尿路上皮癌的患者的预测性生物标志物。患有尿路上皮癌的患者可以在筛选期之前同意AHR核定位评估。优先考虑评估为阳性的那些患者。在预筛选期期间，此评估不存在时间限制(即，窗口)。除非与发起人另行讨论，否则应在档案肿瘤组织加入后1年内使用。
根据美国国家癌症研究所不良事件(AE)通用术语标准(NCI-CTC AE)v5.0评估毒性。本文定义了DLT事件。将评估AE，并获得实验室值(如本文所指定的化学、血液学、凝血、甲状腺功能和尿液分析)、生命体征和12导联三重心电图(ECG)以评估作为单一药剂以及与纳武单抗组合时化合物A的安全性和耐受性。
将目标DLT率约为30％的改良毒性概率区间(mTPI-2)设计(Guo,2017)应用于剂量递增和确认，以确定作为单一药剂以及与纳武单抗组合使用时的化合物A扩展剂量。研究了化合物A的几种剂量水平，计划从每天200mg到1600mg。超过1200mg的化合物A的剂量预期以BID给药，使得总剂量在两个剂量之间平均分配(例如，1600mg的剂量作为800mg q12h给予)。在组合治疗组中施用固定剂量的纳武单抗。如果SRC同意，则剂量水平0与+2之间的单一药剂剂量递增计划为至多100％。然而，如果1名或更多名受试者在DLT期间经历2级或更高级别的治疗紧急不良事件(TEAE)，则单一药剂队列之间的剂量增加不超过50％，除非所述事件明显与药物无关(例如疾病进展、环境因素、不相关的创伤、现有的合并症等)，由研究者所确定。组合治疗剂量递增开始于单一药物治疗组MTD(最大耐受剂量)以下的一个剂量水平。如果起始剂量被认为在任一组中都不能耐受，则化合物A的递减剂量也是可用的。所有剂量递增和递减决定均基于第1周期治疗期间给定剂量下DLT的发生情况，并由SRC做出。
在剂量递增期间，每个剂量至少需要3名患者。根据DLT的累积率和发生率，每个新剂量可能纳入3名、4名、5名或6名患者，直到最后一名患者完成DLT。基于mTPI-2设计，在剂量被认为是不可接受的毒性之前，纳入在某一剂量下但尚未完全评估DLT评估的患者的数量可能不会超过有风险患上DLT的剩余患者的数量。通常，在给定剂量水平下可以纳入3到14名患者来评估安全性。向每个新剂量队列中的前2名患者施用研究药物，之间交错开最少15小时。在任何时间，在灵长类动物中注意到QTc增加(即，Cmax为8,400ng/mL或AUC为141,000纳克*小时/毫升)的情况下，化合物A血浆暴露接近11,200ng/mL Cmax或188,000纳克*小时/毫升AUC的75％或75％以内的水平，剂量递增步骤限制为前一剂量的50％。
在14名患者已以发现可接受的任何所选剂量的化合物A作为单一药剂以及与纳武单抗组合进行治疗之后，剂量递增和安全性确认扩展结束。在选择剂量以继续进行给药之前考虑全部数据，并且可以基于整个研究中出现的PK、药效动力学和安全性数据来调整递增时间表以确定研究结束时的RP2D。
用于确定MTD的受试者群体包括满足研究的最低安全性评估要求和/或经历过DLT的受试者。
获得系列血液样本以表征化合物A和其主要活性代谢物的血浆PK。初始采样策略基于此化合物的预测人PK。如果在评估PK的过程中，确定替代性采样方案将更具信息性，则如果针对PK获得的血液和抽血总量没有增加，则可以实施所述替代性采样方案。此外，如果初始采样方案被认为不必要地密集，则可以在任何时间减少样本总数。
由于预期化合物A的起始剂量和任何更高剂量接近或处于药理学活性范围，因此要求每个受试者进行抽血和肿瘤活检以用于次要和探究性药效动力学终点。血液和肿瘤组织样本用于确认AHR靶参与。经发起人讨论并事先同意，个别受试者可以免除肿瘤活检要求。初始采样策略基于化合物A的预测人药效动力学。如果在评估药效动力学的过程中，确定替代性采样方案将更具信息性，则如果针对药效动力学获得的血液、抽血和肿瘤活检总量没有增加，则可以实施所述替代性采样方案。此外，如果初始采样方案被认为不必要地密集，则可以在任何时间减少样本总数。
尽管这项研究的主要终点是安全性和耐受性，但通过计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)测量肿瘤大小的变化来评估可能与作为单一药剂以及与纳武单抗组合时的化合物A相关的初步抗肿瘤活性。除非基于临床体征和/或症状出现进展，否则在前6个月的每8周治疗完成之后使用实体瘤反应评估标准1.1版(RECIST 1.1)进行肿瘤评估。对于患有尿路上皮癌的受试者，研究人员可以自行决定根据免疫RECIST(iRECIST)进行超出进展的治疗与另外的肿瘤评估。接受多于6个月疗法的受试者在每12周治疗完成之后定期进行肿瘤评估。
为了评估患有尿路上皮癌患者的化合物A初步抗肿瘤活性的证据，使用了Simon 2阶段设计(Simon,1989)。在这些最初的11到14名患有尿路上皮癌的受试者中需要至少1例反应才能进入第二阶段，在第二阶段中，纳入另外的患有尿路上皮癌的受试者以完成28名受试者队列。在这28名受试者中总共有4例反应表明，在α＝0.05、单侧的此受试者群体中，基于此设计，有必要进行另外的药物研究，从而排除反应率为0.05或更低的零假设。预期反应率为0.20。此设计的功率约为0.80至0.83。基于预期的纳入率，发起人可以选择在第1阶段与第2阶段之间不暂停纳入。
为了评估化合物A和纳武单抗作为组合在患有检查点抑制剂治疗的尿路上皮癌的受试者中的初步抗肿瘤活性的证据，使用Simon 2阶段设计。在最初的11-14名患有尿路上皮癌的受试者中需要至少有1例反应才能进入第二阶段，在第二阶段中，将纳入另外的患有尿路上皮癌的受试者以完成28名受试者的队列。这28名受试者中总共有4例反应表明，在α＝0.05、单边的此受试者群体中，基于此设计，有必要进行另外的药物研究，从而排除反应率为0.05或更小的零假设。预期反应率为0.20。此设计的功率约为0.80至0.83。基于预期的纳入率，发起人可以选择在第1阶段与第2阶段之间不暂停纳入。
入选的主要标准：
1.患者≥18岁。
2.患有组织学上证实的实体瘤的患者，所述患者患有局部复发性或转移性疾病，所述疾病在进行治疗医师认为合适的所有标准护理疗法时或其之后已经进展，或者所述患者不是标准治疗的候选者。
3.对于患有尿路上皮癌的患者，患者必须患有组织学上证实的尿路上皮癌，并且患有不可切除的局部复发性或转移性疾病，所述疾病在进行治疗医师认为合适的所有标准护理疗法(例如，包含含铂的方案和检查点抑制剂)或其之后已经进展，或者所述患者不是标准治疗的候选者。对先前治疗方案的数量没有限制。使用PDx抑制剂(例如抗PD-1或抗PD-L1)的检查点抑制剂疗法不一定需要直接在研究之前进行，但患者必须在完成疗法期间或完成疗法后的3个月内取得进展才能纳入组合组。
4.如通过当地研究人员/放射学评估，患有根据RECIST v1.1的可测量的疾病。如果已在此类病变中证实了进展，则位于先前照射区域中的病变被认为是可测量的。患有可评估且可进行多次活检但根据RECIST v1.1无法测量的癌症的患者在与发起人讨论后可能获得资格。
5.除非与发起人讨论，否则可以安全地进入肿瘤以进行多个芯活检，并且患者愿意在治疗之前和治疗期间从可用的档案和新获得的活检中提供组织。
6.自用于潜在地治疗恶性肿瘤的先前疗法(包含其它研究疗法)以来的最近一次剂量的时间：
a.全身性细胞毒性化疗：≥前一方案的最近周期的持续时间(除了6周的全身性亚硝基脲或全身性丝裂霉素-C之外，所有方案至少2周)；
b.生物疗法(例如抗体)：≥3周
c.小分子疗法：≥5×半衰期。
7.具有0到1的东部肿瘤协作组(ECOG)表现状态。
8.充分的器官功能如下。样本必须在进入单剂量磨合期之前的7天内采集。
a.中性粒细胞绝对计数(ANC)≥1500/μL；
b.血红蛋白>8g/dL；
c.血小板计数>80,000/μL；
d.血清肌酐≤1.5×正常上限(ULN)或者对于肌酐水平>1.5×机构ULN(使用Cockcroft-Gault公式)的患者，肌酐清除率≥40毫升/分钟；
e.血清总胆红素≤1.5×ULN或者对于总胆红素水平>1.5×ULN的患者，直接胆红素≤ULN。如果总胆红素<3×ULN，则允许已知的吉尔伯特综合征(Gilbert syndrome)
f.天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)≤2.5×ULN(或者如果存在肝转移并与发起人讨论，则≤5×ULN)；
g.凝血：≤1.5×ULN，除非受试者正在接受抗凝血疗法，只要PT或aPTT在抗凝剂的预期用途的治疗范围内。
9.如果存在受孕的可能性，则从筛选到最后一次服用研究药物后120天，对男性患者和女性患者两者均进行高效避孕。
10.患者能够并愿意提供书面知情同意书并遵守研究方案和计划的手术程序。
排除的主要标准
1.临床上不稳定的中枢神经系统(CNS)肿瘤或脑转移(允许稳定和/或无症状的CNS转移)。如果CNS转移无症状且不需要立即治疗，或者已经接受治疗且参与者的神经功能恢复到基线(与CNS治疗相关的残留体征或症状除外)，则参与者符合条件。此外，参与者必须在治疗前至少2周内停用皮质类固醇，或者每天服用≤10mg稳定剂量或递减剂量的泼尼松(或等效物)。治疗前28天内进行的成像必须记录CNS病变的放射学稳定性，并在完成任何CNS定向疗法后进行
2.因先前疗法而未从所有AE恢复到≤1级或基线的患者(与发起人讨论之后，≤2级神经病变的患者可能有资格)。
3.患有在过去2年内需要用疾病调节剂、皮质类固醇或免疫抑制药物进行全身治疗的活动性自身免疫疾病；允许非甾体类抗炎药(NSAID)。允许纳入患有I型糖尿病、仅需要激素替代的甲状腺功能减退症、不需要全身治疗的皮肤病症(如白斑病、牛皮癣或脱发)或在没有外部触发的情况下预期不会复发的病况的参与者。
4.需要在第一剂量的研究治疗之前2周内用皮质类固醇(泼尼松当量>10mg/天)或其它免疫抑制药物进行持续全身治疗的任何病状。(在不存在活动性临床显著[即，严重]自身免疫疾病的情况下，允许吸入或局部使用类固醇和至多10mg/天的泼尼松当量的生理替代剂量)。
5.任何其它并行抗肿瘤治疗或研究药物，除了允许对病变进行局部放射以用于缓解(在治疗之后被认为是非靶病变)和激素消融。
6.不受控制的或危及生命的症状性伴随疾病(包含已知的症状性人免疫缺陷病毒(HIV)、症状性活动性乙型或丙型肝炎或活动性结核病)。已知人类免疫缺陷病毒(HIV)呈阳性并在过去一年内定义为机会性感染的AIDS，或当前CD4计数<350个细胞/μL。患有HIV的参与者在以下情况下符合条件：在纳入研究时，他们根据临床指征在治疗前接受了至少4周的抗逆转录病毒疗法(ART)；在纳入研究时，他们根据临床指征继续接受ART；当地医疗保健提供者根据护理标准监测CD4计数和病毒载量。HIV检测必须在当地规定的地点进行。在当地强制要求的情况下，必须排除HIV阳性参与者。乙型肝炎病毒(HBV)的任何阳性检测结果表明存在病毒，例如乙型肝炎表面抗原(HBsAg，澳大利亚抗原)阳性。丙型肝炎病毒(HCV)的任何阳性检测结果表明存在活跃的病毒复制(可检测的HCV-RNA)。具有阳性HCV抗体和不可检测的HCV RNA的参与者有资格纳入。
7.首次研究治疗后30天内使用任何活疫苗/减毒疫苗进行治疗
8.在开始试验治疗的3周内经历过大型手术或在开始试验治疗之前没有充分愈合或从手术并发症中恢复。
9.在研究治疗开始2周内接受过先前放射疗法。受试者必须已从所有放射相关毒性中恢复、不需要皮质类固醇并且未患有放射性肺炎。对于非CNS疾病的姑息性放射[≤2周的放射疗法]，允许进行1周的清除。
10.未经发起人许可的先前AHR抑制剂治疗。
11.需要在过去3年内患有需要全身治疗或者妨碍对治疗反应的评估的潜在危及生命的第二恶性肿瘤。先前有早期基底细胞/鳞状细胞皮肤癌或非侵入性或原位癌病史且在任何时间接受过确定性治疗的参与者也有资格。
12.限制口服摄取或显著降低化合物A的吸收的胃肠功能损害的医疗问题。
13.临床显著(即，活动性)心血管疾病：脑血管意外/中风(在纳入之前<6个月)、心肌梗塞(在纳入之前<6个月)、不稳定型心绞痛、充血性心力衰竭(≥纽约心脏协会分类II级)或存在任何可能增加促心律失常风险的情况(例如，低钾血症、心动过缓、心脏传导阻滞)，包含任何新的、不稳定的或严重的需要药物的心律失常，或可能干扰研究ECG解读的其它基线心律失常(例如，束支传导阻滞)。排除在筛选ECG时，男性的QTcF>450毫秒，女性的QTcF>470毫秒的患者。任何患有束支传导阻滞的QTcF>450毫秒的患者将被排除。仅针对QTcF>470毫秒，排除正在服用已知QTcF延长的稳定剂量的伴随药物(例如，选择性血清素再摄取抑制剂抗抑郁药)的男性。
14.服用强CYP3A4/5抑制剂(例如，阿瑞匹坦、克拉霉素、伊曲康唑、酮康唑、奈法唑酮、泊沙康唑、泰利霉素、维拉帕米和伏立康唑)或诱导剂(例如，苯妥英、利福平、卡马西平、圣约翰草、波生坦、莫达非尼和萘夫西林)的患者被排除在研究之外，除非其可以在给药前≥5个半衰期内转用其它药物。应避免在研究中伴随使用强CYP3A抑制剂或诱导剂的药物。
15.服用仅通过CYP3A4/5、CYP2C8、CYP2C9、CYP2B6、p-糖蛋白或乳腺癌耐药蛋白(BCRP)转运蛋白代谢或作为其敏感底物，并且具有窄治疗窗(例如，瑞格列奈、华法林、苯妥英、阿芬太尼、环孢霉素、二麦角胺、麦角胺、芬太尼、匹莫齐特、奎尼丁、西罗莫司、依法韦仑、安非他酮、氯胺酮、美沙酮、丙泊酚、曲马多和他克莫司)的伴随药物的患者应谨慎其用法，并在可能的情况下提供可接受的替代品。
16.患有需要全身疗法的活动性感染。
17.在首次研究治疗之前2周内用补充药物(例如，草药补充剂或中药)进行治疗以治疗研究中的疾病。如果将此类药物用作支持性治疗，则允许使用此类药物。
18.与先前免疫疗法相关的危及生命的毒性史(例如，抗CTLA-4或抗PD-1/PD-L1治疗或任何其它特异性靶向T细胞共刺激或免疫检查点途径的抗体或药物)，除了那些不太可能通过标准对策再次发生的情况(例如，肾上腺危象后的激素替代)
16.在治疗之前具有呈阳性的妊娠测试的具有生育能力的女性(WOCBP)。
17.在研究的预计持续时间内，即从筛选访视开始到最近一次剂量研究治疗后的120天，未进行母乳喂养或预期怀孕或生孩子的患者。
受试者的数量(计划的):
预计将有大约95名患者被纳入所述研究。本研究的总体样本量取决于观察到的化合物A作为单一药剂以及与纳武单抗组合的DLT概况。计划使用单一药剂和组合剂量递增的26名实体瘤受试者的目标样本量。在单一药物治疗组中，至少研究了五个剂量水平，每个剂量水平至少有3名受试者，然后纳入11名额外受试者以确认所选的扩展剂量，并纳入至多28名患有尿路上皮癌的受试者以评估Simon 2阶段设计的疗效。组合治疗剂量递增开始于单一药物治疗组MTD以下的一个剂量水平，至少要探索3名受试者，然后在剂量扩展阶段纳入11名额外的患有尿路上皮癌的受试者，以确认所选的扩展剂量。至少10名具有阳性AHR核定位评估结果的尿路上皮癌受试者被纳入组合治疗剂量扩展组，并且因此，总共至多38名受试者可以被纳入组合治疗组。
在DLT期期间因药物相关AE以外的原因退出治疗的受试者将被替换。
治疗组和持续时间：
单剂量磨合期
在单剂量磨合期期间，在进入治疗期之前，受试者在禁食状态下以分配的剂量水平用单剂量化合物A治疗。为了单剂量磨合期，除非发起人另有说明或与发起人讨论，否则禁食状态被定义为从单剂量前一晚的午夜到服用剂量后的2小时内，除水和药物外，没有固体食物或液体。如事件时间表(SoE)所指示，进行PK采样以比较进食相对于禁食化合物A的施用情况。在单剂量磨合期内没有施用纳武单抗剂量。
治疗期
一个治疗周期定义为每4周(q4w)，但单一药剂剂量递增阶段除外，其中一个治疗周期定义为3周的治疗(即，21天)。虽然超过28天的连续4周治疗被认为是1个治疗周期，但化合物A的每日施用最初没有计划中断。
单一药剂治疗组
化合物A，从200mg QD的剂量开始，最初在进食状态(即，在每天服用化合物A之前，在进食含有≥6克脂肪的膳食后30分钟内，除其它情况外应维持正常饮食，除非需要调整以控制AE，如腹泻、恶心或呕吐)下口服施用(PO)。要探索的化合物A的初步连续剂量水平包含给予400mg QD、800mg QD、1200mg QD以及每天给予1600mg，按q12h给予800mg。超过1200mg的剂量预计q12h给药一次，使得总剂量在两个剂量之间平均分配(例如，1600mg剂量按800mg q12h给予)。如果出现可行性问题(例如，难以摄取片剂的数量)或PK指示化合物A暴露量不成比例增加，可以将剂量分成每天两次(BID或q12h)、每天3次(TID或q8h)或每天四次(QID或q6h)。
组合治疗组
化合物A在进食状态下每天PO施用(即，在每天服用化合物A之前进食含有≥6克脂肪的膳食后30分钟内，但应另外保持正常饮食)。起始剂量比单剂MTD低一个剂量水平，并且纳武单抗在每个周期的第1天通过0.2微米至1.2微米孔径的低蛋白结合在线过滤器作为单剂量IV输注施用。当研究治疗(化合物A和纳武单抗)将在同一天(即，每个周期的第1天)施用时，首先施用化合物A。纳武单抗不会增加或减少剂量。
任何需要将化合物A剂量减少至低于50mg QD的受试者将停止治疗。如果认为连续治疗不能耐受，可以探索替代性时间表(例如，2周治疗/1周休息或3周治疗/1周休息)。
受试者最初不会接受止吐药的预防性治疗。然而，在定义DLT之前，止吐药可以用于治疗已确立的化合物A相关恶心和/或呕吐。1级或2级腹泻可以用标准剂量的洛哌丁胺(loperamide)治疗。
除非证明是剂量限制性的，否则不会用全身性皮质类固醇治疗与治疗相关的炎症。
在方案中描述了另外的剂量调整和监测计划。
每个受试者的研究持续时间包含入选研究的筛选期、在治疗期开始之前的至多7天和不少于2天的以评估食物对化合物A的影响的单剂量磨合期和每4周(即，28天)重复一次治疗周期的疗程、治疗结束30天随访以及治疗结束90天随访/研究结束访视。受试者可以继续治疗直到疾病进展、产生不可接受的毒性或同意书撤回，随后在最近一次研究药物施用之后进行最少30天和90天的随访。对于患有尿路上皮癌的患者，研究者可自行决定可使用iRECIST进行疾病进展以外的治疗。
单一药剂治疗组的预期纳入期为29个月至第1阶段(剂量递增)结束，并且组合治疗组为21个月。
统计学考虑因素：
样本量的确定：
这项研究的总样本量取决于所观察到的化合物A的DLT曲线。计划用于剂量递增的目标样本量为26名受试者并且用于剂量扩展的目标样本量为67名受试者。
单一药剂治疗
Simon 2阶段的第一阶段的样本量基于在Simon 2阶段设计的所选扩展剂量下治疗的来自剂量递增阶段的尿路上皮癌受试者的子集。至少14名患有尿路上皮癌的患者以所选扩展剂量纳入。Simon 2阶段设计的总样本量为28名患有尿路上皮癌的受试者。
具体地，将需要在11到14名患有尿路上皮癌的初始受试者中有至少1例反应，并且在28名受试者中有总共4例反应，以指示在α＝0.05、单边的此受试者群体中基于此设计进行另外的药物研究，从而排除反应率为0.05或更低的零假设。预期反应率为0.20。此设计的功率为约0.80到0.83。基于预期的纳入率，发起人可以选择在第1阶段与第2阶段之间不暂停纳入。
组合治疗
Simon 2阶段的第一阶段的样本量基于来自剂量递增阶段的以Simon 2阶段设计的选定扩展剂量治疗的尿路上皮癌受试者的子集。至少有14名尿路上皮癌患者以选定的扩展剂量纳入。Simon 2阶段设计的总样本量为28名患有尿路上皮癌的受试者。
具体地，将需要在11到14名患有尿路上皮癌的初始受试者中有至少1例反应，并且在28名受试者中有总共4例反应，以指示在α＝0.05、单边的此受试者群体中基于此设计进行另外的药物研究，从而排除反应率为0.05或更低的零假设。预期反应率为0.20。此设计的功率约为0.80至0.83。基于预期的纳入率，发起人可以选择在第1阶段与第2阶段之间不暂停纳入。至少有10名具有阳性AHR核定位评估的患者被纳入组合治疗组。
结果
在剂量递增单一药剂治疗组中没有任何药物相关严重不良事件(SAE)的情况下，完成了包含三(3)名受试者的剂量队列，每名受试者在进食状态下服用200mg、400mg、800mg和1200mg(QD或每天一次)的化合物A。
对母体(化合物A)和两种活性代谢物(化合物B和化合物C)进行中期队列药物动力学评估。对于所有三种分析物(化合物A、化合物B、化合物C)，观察到暴露随剂量的增加而增加。对于所有三种分析物，PK在第2周期第1天(C2D1)似乎大于剂量比例。到第8天，所有三种分析物均达到了稳态PK。在超过200mg剂量的队列中，在C2D1下，化合物B代谢物比率增加。在重复给药超过200mg的情况下，观察到化合物B的累积。化合物B的AUC(曲线下面积)大于化合物A的AUC，其中2/3的受试者以400mg和800mg重复给药。在不希望受到理论约束或限制的情况下，消除速率限制的动力学可能通过对CYP1A1的在靶抑制而有助于化合物B的累积。
与400mg剂量相比，在C2D1下，化合物B与化合物A的比率在800mg剂量下几乎相同(1.3-1.4x母体)。在800mg剂量下，化合物C与化合物A的比率也与在400mg剂量下所观察到的比率类似(AUC为母体的15-20％)。
基于这些结果，化合物B和化合物C可以被认为是基于暴露和效力的“活性”代谢物(除化合物A外)。化合物B的AUC 0-24或24小时后的暴露与母体化合物，即化合物A的AUC 0-24或24小时后的暴露类似或大于其。化合物B的IC50为母体化合物，即化合物A的IC50的约4倍。
在全血测定中分析了AHR靶基因的药效动力学(PD)调节。在200mg、400mg和800mg队列中的所有受试者中观察到对AHR靶基因CYP1B1表达的稳健抑制。
尽管已描述了本发明的多个实施方案，但显而易见的是，可以更改基本实例以便提供利用本发明的化合物和方法的其它实施方案。因此，应理解，本发明的范围将由本申请和权利要求而不是由已通过举例表示的具体实施方案限定。

Claims (77)

1.一种治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐和PDx抑制剂。
2.一种治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药和PDx抑制剂。
3.如权利要求1或2所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约200-1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约200-1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约200mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
5.如权利要求1-3中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约400mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约400mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
6.如权利要求1-3中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约600mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
7.如权利要求1-3中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约800mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
8.如权利要求1-3中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
9.如权利要求1-3中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
10.如权利要求8所述的方法，其中将所述约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐，或所述约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药作为约600mg的两个单独剂量每天给药两次。
11.如权利要求9所述的方法，其中将所述约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，或所述约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药作为约800mg的两个单独剂量每天给药两次。
12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述PDx抑制剂是抗PD-1抗体或抗PD-L1/L2抗体。
13.如权利要求12所述的方法，其中所述抗PD-1抗体与纳武单抗交叉竞争结合人PD-1。
14.如权利要求12或13所述的方法，其中所述抗PD-1抗体与纳武单抗结合相同的表位。
15.如权利要求12至14中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是嵌合抗体、人源化抗体、人单克隆抗体或其抗原结合部分。
16.如权利要求12至15中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含人IgG1同型或人IgG4同型的重链恒定区。
17.如权利要求12至16中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。
18.如权利要求12至17中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。
19.如权利要求12至18中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体以0.1mg/kg至10.0mg/kg体重范围内的剂量每2、3或4周施用一次。
20.如权利要求12至19中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体以3mg/kg、5mg/kg或10mg/kg体重的剂量每3周施用一次。
21.如权利要求12至18中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体以固定剂量施用。
22.如权利要求21所述的方法，其中所述抗PD-1抗体以至少约200mg、至少约220mg、至少约240mg、至少约260mg、至少约280mg、至少约300mg、至少约320mg、至少约340mg、至少约360mg、至少约380mg、至少约400mg、至少约420mg、至少约440mg、至少约460mg、至少约480mg、至少约500mg或至少约550mg的固定剂量施用。
23.如权利要求21或22所述的方法，其中所述抗PD-1抗体约每1、2、3或4周以固定剂量施用一次。
24.如权利要求12至13、21和22中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体约每3周以约360mg的固定剂量施用一次。
25.如权利要求12至13、21和22中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体约每2周以约240mg的固定剂量施用一次。
26.如权利要求12至13、21和22中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体约每4周以约480mg的固定剂量施用一次。
27.如权利要求12所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体是嵌合抗体、人源化抗体、人单克隆抗体或其抗原结合部分。
28.如权利要求12或27所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体包含人IgG1同型的重链恒定区。
29.如权利要求12、27和28中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体与选自阿特珠单抗、德瓦鲁单抗和阿维鲁单抗的抗体交叉竞争结合人PD-L1。
30.如权利要求12和27-29中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体与选自阿特珠单抗、德瓦鲁单抗和阿维鲁单抗的抗体结合人PD-L1上相同的表位。
31.如权利要求12和27-30中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体是阿特珠单抗、德瓦鲁单抗或阿维鲁单抗。
32.如权利要求12和27-29中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体每2、3或4周以0.1mg/kg至15.0mg/kg体重范围内的剂量施用一次。
33.如权利要求12和27-32中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体每2周以3mg/kg或5mg/kg体重的剂量施用一次。
34.如权利要求12和27-32中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体每3周以10mg/kg体重的剂量施用一次。
35.如权利要求12和27-31中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体以固定剂量施用。
36.如权利要求35所述的方法，其中所述抗PD-L1/L2抗体以至少约240mg、至少约300mg、至少约320mg、至少约400mg、至少约480mg、至少约500mg、至少约560mg、至少约600mg、至少约640mg、至少约700mg、至少720mg、至少约800mg、至少约880mg、至少约900mg、至少960mg、至少约1000mg、至少约1040mg、至少约1100mg、至少约1120mg、至少约1200mg、至少约1280mg、至少约1300mg、至少约1360mg、至少约1400mg或至少约1500mg的固定剂量施用。
37.如权利要求35或36所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体约每1、2、3或4周以固定剂量施用一次。
38.如权利要求12、27-31和35-37中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体约每3周以约1200mg的固定剂量施用一次。
39.如权利要求3所述的方法，其中：
a.化合物A或其药学上可接受的盐，或化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药每天以800mg的剂量施用；并且
b.所述抗PD-1抗体约每4周以约480mg的固定剂量施用一次。
40.如权利要求3所述的方法，其中：
a.化合物A或其药学上可接受的盐，或化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药每天以1200mg的剂量施用；并且
b.所述抗PD-1抗体约每4周以约480mg的固定剂量施用一次。
41.如权利要求1至40中任一项所述的方法，其中所述患者在所述施用后表现出至少约一个月的无进展生存期。
42.如权利要求1至41中任一项所述的方法，其中所述患者在所述施用后表现出至少约一个月的总生存期。
43.如权利要求1至42中任一项所述的方法，其中所述患者表现出至少约15％的客观反应率。
44.如权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述癌症选自血液系统癌症、淋巴瘤、骨髓瘤、白血病、神经系统癌症、皮肤癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、肺癌、头颈癌、胃肠癌、肝癌、胰腺癌、泌尿生殖系统癌症、骨癌、肾癌和血管癌。
45.如权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述癌症选自尿路上皮癌；头颈部鳞状细胞癌；黑色素瘤；卵巢癌；肾细胞癌；宫颈癌；胃肠/胃(GIST)癌；非小细胞肺癌(NSCLC)；急性髓性白血病(AML)；和食道癌。
46.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是尿路上皮癌。
47.如权利要求46所述的方法，其中所述尿路上皮癌是膀胱癌。
48.如权利要求46所述的方法，其中所述尿路上皮癌是移行细胞癌。
49.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是头颈部鳞状细胞癌。
50.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是黑色素瘤。
51.如权利要求50所述的方法，其中所述黑色素瘤是葡萄膜黑色素瘤。
52.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是卵巢癌。
53.如权利要求52所述的方法，其中所述卵巢癌是卵巢癌的浆液性亚型。
54.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是肾细胞癌。
55.如权利要求54所述的方法，其中所述肾细胞癌是透明细胞肾细胞癌亚型。
56.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是宫颈癌。
57.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是胃肠/胃(GIST)癌。
58.如权利要求57所述的方法，其中所述癌症是胃癌。
59.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是非小细胞肺癌(NSCLC)。
60.如权利要求59所述的方法，其中所述NSCLC是晚期和/或转移性NSCLC。
61.如权利要求45所述的方法，其中所述癌症是食道癌。
62.一种治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐，和多柔比星或其药学上可接受的盐或衍生物。
63.一种治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药，和多柔比星或其药学上可接受的盐或其衍生物。
64.如权利要求62或63所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约200-1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约200-1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
65.如权利要求62-64中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约200mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
66.如权利要求62-64中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约400mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约400mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
67.如权利要求62-64中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约600mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
68.如权利要求62-64中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约800mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约800mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
69.如权利要求62-64中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
70.如权利要求62-64中任一项所述的方法，所述方法包括每天向所述患者施用约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，或约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药。
71.如权利要求69所述的方法，其中将所述约1200mg化合物A或其药学上可接受的盐，或所述约1200mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药以约600mg的两个单独剂量每天给药两次。
72.如权利要求70所述的方法，其中将所述约1600mg化合物A或其药学上可接受的盐，或所述约1600mg化合物A的代谢物或其药学上可接受的盐或其前药以约800mg的两个单独剂量每天给药两次。
73.如权利要求62-72中任一项所述的方法，其中所述患者在所述施用后表现出至少约一个月的无进展生存期。
74.如权利要求62-73中任一项所述的方法，其中所述患者在所述施用后表现出至少约一个月的总生存期。
75.如权利要求62-74中任一项所述的方法，其中所述患者表现出至少约15％的客观反应率。
76.如权利要求62-75中任一项所述的方法，其中所述癌症选自血液系统癌症、淋巴瘤、骨髓瘤、白血病、神经系统癌症、皮肤癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、肺癌、头颈癌、胃肠癌、肝癌、胰腺癌、泌尿生殖系统癌症、骨癌、肾癌和血管癌。
77.如权利要求62-75中任一项所述的方法，其中所述癌症是卵巢癌。
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