CN116747266A - 用于抑制胶原酶活性的组合物和方法 - Google Patents
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Abstract
公开了一种用于向受试者施用的组合物。所述组合物包含至少一种植物活性组分。所述植物活性组分以有效抑制受试者皮肤中的胶原酶活性的量存在于所述组合物中。所述植物活性组分包含选自下组的至少一种提取物:i)金花茶花的提取物;ii)金花茶叶的提取物;和iii)i)和ii)的组合。所述组合物可以是局部组合物的形式,例如用于局部施加。所述组合物也可以是口服组合物的形式,例如用于摄入。还提供了一种抑制受试者皮肤中的胶原酶活性的方法。所述方法包括向受试者施用有效量的所述组合物。
Description
发明领域
本发明大体上涉及用于抑制胶原酶活性的组合物和方法,更具体地,涉及用于抑制受试者皮肤中的胶原酶活性的含植物提取物的组合物。也提供了相关的方法。
发明背景
胶原蛋白是一种纤维状细胞外基质蛋白,是人体结缔组织的主要组分,约占体内总组织蛋白的3-6%。皮肤的功能特性取决于真皮中胶原蛋白的完整性。胶原蛋白的沉积受到精细控制,取决于身体的生理状态以及在伤口愈合、新骨发育和衰老过程中发生的沉积速率的变化。因此,胶原蛋白代谢的控制可用于各种治疗和美容应用。最近,来自植物的生物活性分子由于其减缓内在皮肤老化过程的速率和区分外在皮肤老化过程的优异性质而广泛用作药妆成分。一些天然产物和提取物已被报道用于开发抗衰老护肤产品。例如,绿茶中的多酚,如表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)已被配制为抗衰老护肤产品,其表现出有限的胶原酶抑制作用。
鉴于上述情况,仍然有机会提供新的和有用的胶原酶抑制剂。这样的抑制剂可提供用于减轻由胶原酶引起的皮肤老化,如皱纹形成的潜在预防性和治疗性方法。因此,也仍然有机会提供新的和有用的抑制胶原酶活性的组合物和方法。
发明概述
提供一种用于向受试者施用的组合物。所述组合物包含至少一种植物活性组分。植物活性组分通常以有效抑制受试者皮肤中的胶原酶的量存在于所述组合物中。植物活性组分包含选自下组的至少一种提取物:i)金花茶(Camellia chrysantha)花的提取物;ii)金花茶叶的提取物;和iii)i)和ii)的组合。
在各种实施方案中,所述组合物是配制为局部施用于受试者的局部组合物。在另一些实施方案中,所述组合物是配制为口服施用于受试者的口服组合物。
所述组合物可用于抑制受试者皮肤中的胶原酶。一种抑制受试者皮肤中的胶原酶的方法包括向受试者施用有效量的所述组合物。
附图简述
图1是显示使用金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama.)(花)-水提取物的胶原酶平均抑制率的图;
图2是显示使用金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama.)(花)-乙醇提取物的胶原酶平均抑制率的图;
图3是显示使用金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama)(叶)-水提取物的胶原酶平均抑制率的图;
图4是显示使用金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama)(叶)-乙醇提取物的胶原酶平均抑制率的图;和
图5是显示使用作为对照的EGCG的胶原酶平均抑制率的图。
当前实施方案的详述
公开了一种用于向受试者施用的组合物。该组合物包含至少一种植物活性组分。下面描述该组合物,随后描述相关用途和方法。
如根据本公开将会理解,除植物活性组分,特别是其提取物,以及相关的组分和方法外,对该组合物没有特别限制。因此,该组合物可配制为例如局部组合物(例如化妆品组合物),或配制为口服组合物或保健品、药品或补充剂,并可作为唯一和独立的治疗剂使用或与其它与其相容的治疗剂联合使用。
该组合物可用于治疗、预防和/或改善各种状况,如与衰老有关的状况。具体地,如根据以下描述和实施例将会认识到,相信本实施方案的组合物能够抑制胶原酶活性,更具体地,抑制由受试者皮肤中的胶原酶引起的胶原蛋白降解。
因此,该组合物可用于治疗(即减缓、预防、逆转等)年龄相关的状况或其它通常与胶原酶活性有关的状况,如皱纹形成。
如上文介绍,该组合物包含植物活性组分。更具体地,植物活性组分包含至少一种提取物,任选基本由至少一种提取物组成,或任选由至少一种提取物组成,所述提取物选自:i)金花茶花的提取物;ii)金花茶叶的提取物;和iii)i)和ii)的组合。在某些实施方案中,本公开的组合物不含其它活性成分。“其它活性成分”通常是指该组合物不含与上述提取物和下面例举的提取物不同的其它类型的中药(“TCM”;或“Chinese medicines”)。其它类型的TCM是本领域中理解的。
在某些实施方案中,两种提取物i)至ii)中只有一种存在于该组合物中。在另一些实施方案中,提取物i)和ii)都存在于该组合物中。每种单独的提取物i)和ii)可被简单地称为“植物提取物(botanical extract)”或统称为“植物提取物(botanical extracts)”,并在下面依次描述。
术语“提取物”在本文中在常规意义上使用以指通过从源材料中流体提取而获得的组合物。因此,术语“植物提取物”应理解为是通过流体提取(例如溶剂提取、气体提取、CO2提取等)从植物来源(即植物材料)获得的组合物。适用于该组合物的植物提取物可通过本领域已知的任何提取方法或这些方法的组合获得,包括水提取、蒸汽提取、溶剂提取等。下面描述示例性的提取技术。但是,植物提取物通常不限于特定提取方法,或用于获得植物提取物的附加/辅助技术,而是可根据本文所述的参数而变化。另外,提取步骤不是制备植物活性组分和/或该组合物所必需的,因为合适的提取物(例如标准化提取物)可容易地获自许多商业供应商。
适合用于或用作植物活性组分的植物提取物包括通过溶剂提取获得的那些,例如通过使用极性溶剂如醇(例如甲醇、乙醇、丁二醇等)、醚(例如乙醚、甲基叔丁基醚等)、酮(例如丙酮)、酯(例如乙酸乙酯)、酚、水等,非极性溶剂如苯、二甲苯、甲苯等,及其衍生物、改性物和组合(例如溶剂-水共混物,包括醇-水、丙酮-水等)。另外的和替代性的提取技术包括逐次分馏(sequential fractionations)、总水-乙醇提取(total hydro-ethanolicextractions)、一次性提取(1ump-sum extractions)、超临界流体提取(例如用CO2)等,以及利用由第一提取物的逐次或二次提取的那些(例如获自极性溶剂提取的植物提取物的非极性溶剂提取物)或其它加工技术,如过滤、纯化、蒸馏、脱水、蒸发、浓缩、干燥等。合适的提取方法的具体实例描述在美国专利No.7,897,184中,其经此引用并入本文。
如本领域中理解的,植物的各个部分或部位可用于获得精油和提取物,如皮、浆果、花、果实、叶、外皮、树脂、根茎、根、种子和/或木材。精油可通过许多方法获得,如通过蒸馏(例如使用蒸汽)、压榨、溶剂萃取、净油萃取(absolute oil extraction)、采脂(resintapping)和/或冷榨。
在各种实施方案中,用于获得适用于本公开的植物提取物的溶剂是所得植物提取物和/或其后续形式(例如植物提取物粉末)适合在其中摄取(ingestion)的溶剂。例如,溶剂是水或乙醇。
在一个实例中,植物提取物可使用有机溶剂提取技术获得。在另一个实例中,可使用溶剂逐次分馏(solvent sequential fractionation)获得植物提取物。总水-乙醇提取(total hydro-ethanolic extraction)技术也可用于获得植物提取物。通常,这被称为一次性提取(1ump-sum extraction)。在该方法中生成的植物提取物含有存在于提取材料中的多种多样的植物化学物质,包括脂溶性和水溶性植物化学物质。在收集植物提取物溶液后,蒸发溶剂,以得到植物提取物。
也可使用总乙醇提取。这种技术使用乙醇作为溶剂。这种提取技术生成除水溶性化合物外还可能包括脂溶性和/或亲脂性化合物的植物提取物。总甲醇提取也可以类似的方式使用,具有类似的结果。
可用于获得植物提取物的提取技术的另一个实例是超临界流体二氧化碳提取(SFE)。在这种提取程序中,要提取的材料没有暴露于任何有机溶剂。相反,提取溶剂是在超临界条件下(例如>31.3℃和>73.8巴)的二氧化碳(CO2),存在或不存在改性剂。本领域技术人员会认识到,可改变温度和压力条件以获得植物提取物的最佳收率。类似于也可使用的总己烷和乙酸乙酯提取技术,这种技术生成脂溶性和/或亲脂性化合物的植物提取物。
上述各提取方法还可包括一个或多个本领域中理解的另外的加工步骤和/或与其结合使用。例如,可将植物材料粉碎、打碎、研磨等。还可能存在一个或多个过滤步骤以除去例如纤维素材料/纤维材料或其它固体材料。还可能存在一个或多个纯化步骤以除去例如某些成分和/或污染物。这样的纯化可例如通过蒸馏、蒸发、离心等实现。还可能存在一个或多个浓缩和/或干燥步骤以除去水和/或其它挥发物,例如醇、更轻的化合物、VOC等。此外,可加入酸和/或碱以调节pH或中和。根据最终/终末植物提取物的所需形式,还可使用本领域中理解的各种另外的步骤,如筛分、压制、碾磨(milling)、研磨(grinding)、混合、分散等。要认识到,也考虑了这些另外的加工步骤以重复和/或不同顺序的组合。
金花茶
在一些实施方案中,植物活性组分和因此该组合物,包含金花茶的提取物,即,包含来自开花植物物种金花茶的材料如花和/或叶的提取物、任选基本由来自开花植物物种金花茶的材料如花和/或叶组成的提取物。金花茶提取物不受特别限制,并可包含或是来自适用于本文中的实施方案的金花茶植物的任何花提取物、叶提取物或提取物的组合。更具体地,示例性的金花茶花和/或叶提取物包括能够抑制胶原酶活性或引发/表现出本文中描述的任何其它此类活性的那些作为植物活性组分的一部分。
金花茶已被报道含有各种生物活性组分,如多酚、类黄酮(例如儿茶素类)、酚酸、花青素类、绿原酸、多糖、人参皂苷和其它化合物。金花茶可简称为C.chrysantha,或可称为Camellia chrysantha(Hu)Tuyama,其是公认名称Camellia petelotti(Merr.)Sealy的同义词。金花茶也可通过各种其它名称来指代,如C.petelotti,Camellia nitidissima,Camellia achrysantha,Thea petelotti,Theopsis chrysantha,Golden Camellia,Kin-Ka Cha或金花茶。
金花茶提取物的具体实例是本领域中已知的。因此,金花茶提取物可以是购买的或以其它方式从各种来源商业获得的、制备的(例如使用本领域已知的任何常规提取技术,如本文所述的那些中的任一种)或其组合。在某些实施方案中,金花茶的提取物通过金花茶的植物材料,包括但不限于花和/或叶的醇提取(例如乙醇提取)获得。在另一些实施方案中,金花茶的提取物可通过金花茶的植物材料的水提取(或水性提取)获得。
在特定实施方案中,金花茶花的提取物通过金花茶的花或花基植物材料的水提取(或水性提取)获得。在进一步或另一些实施方案中,金花茶花的提取物通过金花茶的花或花基植物材料的醇提取(例如乙醇提取)获得。花可以是新鲜的或干燥的,通常是干燥的以防止腐烂。然后可将干燥的花形成粉末,其本身可用作提取物,或更通常地,如下所述将粉末状的花进一步加工形成提取物。
在另一些特定实施方案中,金花茶叶的提取物通过金花茶的叶或叶基植物材料的醇提取(例如乙醇提取)或水性提取获得。在进一步或另一些实施方案中,金花茶叶的提取物通过金花茶的叶或叶基植物材料的醇提取(例如乙醇提取)获得。叶可以是新鲜的或干燥的,通常是干燥的以防止腐烂。然后可将干燥的叶形成粉末,其本身可用作提取物,或更通常地,如下所述将粉末状的叶进一步加工形成提取物。
如本领域技术人员所理解的,金花茶的栽培主要是为了它的花和/或叶。因此,在各种实施方案中,金花茶的提取物是金花茶花和/或叶的提取物。合适的提取包括上文指出的那些,例如叶的乙醇和水提取。花和/或叶可来自一株或多株植物,并且可以是新鲜的、干燥的或以其它方式陈化的。
例如,可获得某些提取物,其中将金花茶(例如花、叶)在磨机中粉碎成均匀大小。接着,所得粉末用乙醇溶液提取。然后过滤溶液,滤液可在减压下浓缩以得到糖浆。然后可将糖浆冷冻干燥至干以获得提取物。
在各种实施方案中,植物活性组分由金花茶花和/或叶的提取物组成。在进一步或另一些实施方案中,该组合物基本不含至完全不含获自金花茶的非花基植物材料和/或非叶基植物材料的组分。在这些实施方案中,金花茶的非花基和非叶基植物材料可以是例如金花茶植物的根、茎干、皮、根茎或种子。不受制于任何特定理论,但相信,金花茶的花和叶对胶原酶抑制作用最有效;而金花茶的其它部位则没有(如下面的实施例部分中说明的)。
合适的花和叶提取物可被加工(例如脱脂、部分脱脂、研磨、干燥、沉淀、洗涤、过滤、筛选、提取、蒸馏、浓缩等)以获得金花茶花和/或叶提取物。同样地,金花茶花和/或叶可以原始形式提取,或在金花茶花和/或叶提取物的提取之前加工(例如以原始形式、悬浮形式、脱水形式、浓缩形式等使用)。在另一些实施方案中,金花茶提取物可包含来自植物的任何部位或部位组合的材料,并且不限于花和/或叶提取物。例如,金花茶提取物可包含从金花茶植物的一种或多种部位提取的材料,包括其根、茎干、皮、根茎、叶、芽、花、种子和/或果实。
植物活性组分中使用的金花茶提取物的量可变,并基于植物活性组分中使用的组分的数量和类型进行选择。在某些实施方案中,植物活性组分包含1至2000mg金花茶提取物,如1至1000mg,任选2至800mg、任选20至750mg、或任选50至500mg。但是,也可使用在这些范围以外的量。例如,在某些实施方案中,植物活性组分包括至少1mg、任选至少大约20mg、任选至少大约50mg、任选至少100mg、任选至少250mg、任选至少500mg、任选至少1000mg、或任选至少1500mg的量的金花茶提取物。在这些或另一些实施方案中,可选择上限以使植物活性组分包含≤100、≤250、≤500、≤750、≤1000、≤2000、≤5000mg的量的金花茶提取物。在各种实施方案中,植物活性组分可包括基于植物活性组分的总重量计任选大于1、任选大于5、任选大于10、任选大于25、任选大于50、任选大于75、任选大于80或任选大于95重量%的量的金花茶提取物的量。在这样的实施方案中,可选择上限为通常基于植物活性组分的总重量计分别≤10、≤20、≤30、≤40、≤50、≤60、≤70、≤80、≤90和≤99重量%。
在某些实施方案中,植物活性组分包含多于一种的金花茶提取物,如2、3、4或更多种金花茶提取物。在这样的实施方案中,各金花茶提取物独立地选择,可与任何其它金花茶提取物相同或不同,并各自以如上所述的量使用。
金花茶提取物可以任何形式使用,如纯的(即不存在溶剂、载体媒介物、稀释剂等),或置于载体媒介物,如溶剂或分散剂中。如果存在,载体媒介物可包含水性溶剂(例如水)、有机溶剂、流体或油等,或其组合。当使用时,载体媒介物应基于植物活性组分和/或该组合物的特定组分,如所用的特定金花茶提取物进行选择。要认识到,如果使用载体媒介物,金花茶提取物可在与植物活性组分和/或组合物的任何其它组分合并之前、期间或之后与载体媒介物合并。
定义
为了提供说明书和权利要求书的清楚和一致的理解,提供以下定义。
“改善至少一种衰老迹象”和“改善衰老迹象”在本文中可互换使用以表示预防、阻止、逆转、改善、减少和/或减轻衰老迹象。代表性的衰老迹象包括但不限于纹、细纹、皱纹、鱼尾纹、黑眼圈、瑕疵、老年斑、妊娠纹或其组合。
“改善皮肤外观”和“改善皮肤的美学外观”在本文中可互换使用以表示皮肤外观的美学改善。代表性的改善可包括但不限于与皮肤厚度、弹性、回弹性、保湿、光滑度、色调、纹理、光泽、亮泽度、明亮度、透明度、轮廓、紧实度、张紧度、柔顺度(suppleness)、柔软度、敏感度、毛孔大小或其组合有关的有利特征和/或性质。这些术语也可用于表示不良皮肤状况的改善。受这种不良皮肤状况影响、导致这种不良皮肤状况或由这种不良皮肤状况造成的代表性的不良状况包括但不限于银屑病、湿疹、皮脂溢、皮炎、晒伤、雌激素失衡、色素沉着过度、色素沉着不足、变色、黄化、雀斑、皮肤萎缩、皮肤长痘(skin breakout)、皮肤脆弱、干燥、触觉粗糙、皲裂、下垂、变薄、增生、纤维化、毛孔增大、脂肪团形成、挫伤、痤疮形成、凋亡、细胞分化、细胞去分化、预防肿瘤诱导或肿瘤进展、病毒感染、真菌感染、细菌感染、蜘蛛静脉(毛细血管扩张)、多毛症、酒渣鼻、瘙痒症、胼胝、疣、鸡眼或其组合。
术语“组合物”或“制剂”是指治疗、改善、促进、增加、管理、控制、维持、优化、修饰、减少、抑制或预防与自然状态、生物过程或疾病或障碍相关的特定状况的产品。例如,组合物或制剂改善受试者的至少一种皮肤衰老迹象和/或最小化或抑制皮肤(例如成熟皮肤)中的糖化。术语组合物和制剂包括但不限于药品(即,药物)、非处方药(OTC)、化妆品、食品、食品成分或膳食补充剂组合物,其包括有效量的提取物、其至少一种组分或其混合物。示例性的组合物和/或制剂包括乳膏剂、化妆水(cosmetic lotion)、面膜(pack)或粉剂,或作为乳剂、洗剂、搽剂泡沫(liniment foam)、片剂、硬膏剂、颗粒剂或软膏剂。优选的组合物配制用于局部施加/施用和用于口服施用/摄入。
如本文所用,纯化合物、组合物、提取物、提取物混合物、提取物的组分和/或活性剂或成分或其组合的术语“有效量”或“治疗有效量”是指在足以实现所需结果的剂量和时间段内有效的量。例如,“有效量”或“治疗有效量”是指当施用于受试者(例如哺乳动物,如人)时足以实现治疗,如改善老化皮肤和/或最小化或抑制成熟皮肤中的糖化的本发明的纯化合物、组合物、提取物、植物提取物、提取物混合物、植物提取物混合物、提取物的组分和/或活性剂或成分或其组合的量。构成“有效量”或“治疗有效治疗”的本公开的组合物、提取物、植物提取物、提取物混合物、植物提取物混合物、提取物的组分和/或活性剂或成分的量将随活性剂或化合物、所治疗的状况及其严重程度、施用方式、治疗的持续时间或治疗的受试者的年龄而变,但可由本领域普通技术人员根据其自己的知识和根据本公开以常规方式确定。
术语“可药用”是指适合与人和低等动物的组织接触使用而没有不适当的毒性、不相容性、不稳定性、刺激性等、与合理的效益/风险比相称的那些药物、药剂、提取物或惰性成分。
术语“施加”和“施用”被定义为通过本领域中已知的途径向受试者提供组合物,包括但不限于局部、静脉内、动脉内、口服、肠胃外、颊含、透皮、直肠、肌内、皮下、骨内、透粘膜或腹膜内施用途径。在优选实施方案中,所述组合物的局部和/或口服施用途径是合适的。
术语“最小化”、“减少”、“阻止”、“降低”和/或“抑制”是指与不存在如本文所述的植物成分或植物提取物时,如对照样品中的胶原酶活性和/或表达相比,在如本文所述的植物成分或植物提取物的存在下,胶原酶活性和/或表达和/或其下游效应的降低或减少。胶原酶活性和/或表达和/或其下游效应的降低或抑制程度将随存在的植物成分或植物提取物的性质和量而变,但是明显可见,例如,作为胶原酶活性和/或表达的可检测的降低;与不存在该植物成分或植物提取物时的胶原酶活性和/或表达相比,降低程度理想地大于大约5%、大约10%、大约15%、大约20%、大约25%、大约50%、大约75%、大约90%、大约95%或大约99%(或在大约5%至大约99%的范围内的任何降低程度)。例如,包含金花茶的植物成分或植物提取物的组合物可使皮肤如成熟皮肤中的胶原酶活性最小化或降低。
本文所用的术语“受试者”或“个体”包括可施以组合物的哺乳动物。哺乳动物的非限制性实例包括人、非人灵长类动物、啮齿类动物(包括转基因和非转基因小鼠)等。在一些实施方案中,受试者是哺乳动物,在一些实施方案中,受试者是人。
组合物(或制剂)
该组合物可包括任何量的植物活性组分,其基于整个组合物中使用的组分的数量和类型进行选择。一般而言,植物活性组分以有效抑制受试者皮肤中的胶原酶的量存在于该组合物中。
在某些实施方案中,组合物包含1至5000、任选2至2000、任选5至1750、任选10至1500、任选15至1250、任选20至1000、任选25至750、任选30至500、任选35至500、任选40至500、任选45至450、任选50至450、或任选50至400mg的量的植物活性组分。但是,也可使用在这些范围外和/或与这些范围重叠的量。例如,要认识到,上文关于植物活性组分中的各植物提取物的量描述的范围可同样适用于整个组合物中的各植物提取物的量,如当植物活性组分由植物提取物的仅一种组成时。
在该组合物的具体实施方案中,制剂包含:金花茶花的水和/或乙醇提取物和/或金花茶叶的水和/或乙醇提取物的一种或多种。
调味香精和/或代糖可包括在该组合物中并且可以是本领域中理解的任何类型的常规组分,例如调味剂(flavoring agents)。植物提取物可各自如上所述。下面进一步描述合适的调味剂的实例。
一般而言,除包含植物活性组分及其植物提取物外,该组合物在制剂、外围成分、形式、功能数等方面不受限制。相反,该组合物可以变化,并可以与本公开相符的任何方式配制。
通常,该组合物配制为或以其它方式调整为适合施用于哺乳动物受试者(例如人)。例如,在各种实施方案中,使该组合物适合局部施用或使用(consumed)和/或口服施用于人类受试者。
在某些实施方案中,该组合物进一步被定义为配制成局部施用于受试者的局部组合物。在这样的实施方案中,该组合物也可被称为化妆品组合物,并且通常除生物活性剂组合物外还包含至少一种化妆品可接受的载体。在具体实施方案中,化妆品可接受的载体不是天然存在的。换言之,载体在这些具体实施方案中不是天然产物。在另一些实施方案中,载体选自本领域中理解的常规载体,并且可以常规量使用。
在另一些实施方案中,该组合物进一步被定义为配制成口服施用于受试者的口服组合物。在这样的实施方案中,该组合物也可被称为可摄入组合物,并且通常除生物活性剂组合物外还包含至少一种可药用添加剂。在具体实施方案中,可药用添加剂不是天然存在的。换言之,可药用添加剂在这些具体实施方案中不是天然产物。在另一些实施方案中,可药用添加剂选自本领域中理解的常规添加剂,并且可以常规量使用。
因此,应该认识到,存在于该组合物中或与该组合物组合的特定添加剂、载体、辅助剂、填料等可变。此外,该组合物的物理形式不受限制,并且将基于该组合物的特定组分、该组合物的预期用途等进行选择。因此,如根据本文的描述将理解的是,该组合物可配制为液体、干粉、混悬液、乳液、凝胶、糊剂等,及其组合。在某些实施方案中,将该组合物配制为无菌、无热原的液体溶液或混悬液、包衣胶囊、栓剂、冻干粉末、透皮贴剂、软胶囊或其它已知的形式。合适形式的其它实例包括固体、凝胶、液体、乳膏剂、洗剂(lottions)、润发油(pomades)、摩丝(mousses)、粉末、泡沫、喷雾剂、软膏剂或其它这样的制剂,其中将植物活性组分置于适当的载体媒介物,如本文所述的那些中的任一种中。在特定实施方案中,该组合物被配制为或以其它方式提供为局部施用的眼霜或面膜。
该组合物可使用各种方法制备。例如,该组合物的活性物(如植物提取物)和任选一种或多种无活性物(如一种或多种常规组分、添加剂、赋形剂等)可使用本领域中理解的各种技术混合或掺合和压缩或配混。本公开的组合物不限于特定的制备步骤顺序或制备方法。
在各种实施方案中,该组合物通过施加于受试者的皮肤而局部施用。受试者通常是人,并且可包括各种年龄的男性和女性。本公开的方法/组合物不限于特定受试者。
该组合物可以是各种形式。合适形式的实例包括固体、凝胶和液体。例如,该组合物可配制成作为凝胶、乳膏剂、洗剂(lotions)、润发油(pomades)、摩丝(mousses)、粉末或泡沫施加以施加于受试者的皮肤。在另一实例中,该组合物可配制成喷雾施加到受试者的皮肤上。该组合物可配制成作为气溶胶喷雾剂或泵式喷雾剂喷施。在再一实例中,该组合物可配制成使用预湿纸巾施加。在另一实例中,该组合物可配制为固体,将其擦涂到受试者的皮肤上。在另一实例中,该组合物配制成通过粘附于受试者皮肤的贴剂递送。
除植物活性组分(即“活性物”或“活性成分”)外,该组合物还可包括作为无活性物(或“无活性成分”)的可药用添加剂,包括但不限于赋形剂,如稀释剂和粘合剂;造粒剂;助流剂(或流动助剂);填料;润滑剂;防腐剂;稳定剂;包衣剂;崩解剂;香料;和颜料。活性成分和可药用添加剂可按需要组合或配混以形成在局部施加时向人类受试者提供所需量的活性成分的单剂(individual dose)。
任选地,该组合物可包括一种或多种另外的组分,如添加剂。合适的添加剂包括本领域中理解的那些,包括但不限于保湿剂、润肤剂、乳化剂、表面活性剂、油、提取物、皮肤保护剂、消毒剂、防腐剂、药物和原料药、止痛化合物、止神经痛化合物、抗氧化剂、血液循环促进剂、抗抑郁化合物、抗焦虑化合物、抗应激化合物、防晒剂、驱虫剂、防腐剂、剥脱剂、香料、着色剂、填料、溶剂、媒介物、载体、本领域技术人员已知的其它类型的添加剂,及其组合。这些添加剂可独自使用或组合使用。一般而言,任选的添加剂可以是用于个人护理产品和化妆品的任何类型。
赋形剂可进一步分类为其它组分。具体地,用于口服固体剂型的赋形剂已基于其功能分类为以下组:如稀释剂、崩解剂、粘合剂、压缩助剂、造粒剂、助流剂、润滑剂、控释聚合物、稳定剂(如抗氧化剂、螯合剂和pH调节剂)、膜包衣聚合物、包衣剂、媒介物、增塑剂、表面活性剂、着色剂、甜味剂和调味剂(flavors)。
在各种实施方案中,该组合物包含选自粘合剂、润滑剂、助流剂及其组合的至少一种组分。在某些实施方案中,该组合物包括一种或多种化合物,包括但不限于甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、邻苯二甲酸乙酸纤维素、阿拉伯树胶、树胶、蜡、单硬脂酸甘油酯、丙烯酸聚合物和共聚物、甲基丙烯酸、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯、乳糖、硫酸钙、磷酸氢钙、糖、微晶纤维素(MCC)、淀粉、羟乙酸淀粉钠、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和硬脂酸镁。可使用这些组分的组合,并且这些组分和在常规片剂中使用的其它组分是本领域中理解的。
本文所用的“稀释剂”可以是为增加组合物的体积以使片剂达到用于压缩的实用尺寸而加入的惰性物质。因此,它们也可被称为填充剂。常用的稀释剂包括但不限于微晶纤维素(MCC)、木纤维素、玉米淀粉、改性玉米淀粉、磷酸(三)钙、硫酸钙、乳糖、高岭土、甘露醇、氯化钠、干淀粉、(粉状)糖、右旋糖、甘露醇、山梨醇等。稀释剂/填充剂可独自使用或以各种混合物使用,并以本领域中已知用于口服组合物的任何量使用。
本文所用的“调味剂”是旨在赋予组合物更可口的味道的化合物。调味剂在它们的化学结构上差别很大,从简单的酯、醇和醛到碳水化合物和复杂的挥发油。现在可获得几乎任何所需类型的合成调味剂并且是本领域公知的。如果可通过调味或加香抑制来源于原料的涩味、酸味或苦味,则该组合物中可包括酸化剂(例如柠檬酸、酒石酸、苹果酸、抗坏血酸等)、甜味剂(例如糖精钠、甘草酸二钾、阿斯巴甜、甜叶菊、索马甜(thaumatin)等)或香精(例如含有柠檬油、橙油或草莓的各种水果香精,以及酸奶、薄荷、薄荷醇等)。调味剂可独自使用或以各种混合物使用,并以本领域中已知用于口服组合物的任何量使用。
本文所用的“润滑剂”是履行与组合物有关的许多功能的材料。在某些实施方案,如片剂制备中,润滑剂履行一种或多种功能,如改进片剂制粒的流动速率、防止片剂材料粘附于模具和冲头的表面、减少粒子间的摩擦和促进片剂从模腔中排出。合适的润滑剂的实例包括但不限于硬脂酸锌、阿拉伯树胶粉末、可可脂、巴西棕榈蜡、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、caropeptide、水性二氧化硅、干燥氢氧化铝凝胶、甘油、硅酸镁、轻质无水硅酸、轻质液体石蜡、结晶纤维素、硬化油、合成硅酸铝、芝麻油、面粉淀粉(flour starch)、白蜂蜡、氧化镁、二甲基聚硅氧烷、酒石酸钾钠、蔗糖脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、硅树脂、氢氧化铝凝胶、硬脂醇、硬脂酸、硬脂酸铝、硬脂酸钙、聚氧乙烯硬脂酸酯(polyoxyl stearate)、硬脂酸镁、鲸蜡醇、明胶、滑石、碳酸镁、沉淀碳酸钙、玉米淀粉、乳糖、硬脂肪、蔗糖、马铃薯淀粉、羟丙基纤维素、富马酸、硬脂基富马酸钠、聚乙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯二醇、聚山梨酯、蜂蜡、偏硅酸铝镁(magnesium aluminometasilicate)、甲基纤维素、日本蜡、单硬脂酸甘油酯、十二烷基硫酸钠、硫酸钙、硫酸镁、液体石蜡、磷酸、棕榈酸和氢化植物油和脂肪。润滑剂可独自使用或以各种混合物使用,并以本领域中已知用于口服组合物的任何量使用。
本文所用的“粘合剂”是用于赋予粉末材料内聚性的试剂。粘合剂或有时称为“造粒剂”,赋予片剂制剂内聚力,其确保片剂在压制后保持完好,以及通过配制所需硬度和大小的颗粒来改进自由流动性质。通常用作粘合剂的材料包括淀粉,如玉米淀粉和预胶化淀粉;明胶;糖,如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糖蜜和乳糖;天然和合成树胶,如阿拉伯树胶、藻酸钠、爱尔兰藓提取物、panwar树胶、印度树胶、isapol壳的粘液、羧甲基纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、Veegum、微晶纤维素、微晶右旋糖、直链淀粉、落叶松阿拉伯半乳聚糖、乙基纤维素、乙酸纤维素等。粘合剂可独自使用或以各种混合物使用,并以本领域中已知用于口服组合物的任何量使用。
本文所用的“着色剂”是赋予组合物更宜人外观的试剂,此外还有助于制造商在产品制备过程中控制产品并有助于使用者识别产品。任何经批准的认证水溶性FD&C染料、其混合物或其相应的色淀都可用于为片剂着色。色淀是通过水溶性染料吸附于重金属的水合氧化物而得的组合,从而得到该染料的不溶形式。着色剂可独自使用或以各种混合物使用,并以本领域中已知用于口服组合物的任何量使用。
可任选存在于组合物中的其它常规成分包括防腐剂、稳定剂、抗粘附剂或二氧化硅流动调节剂或助流剂,如二氧化硅。这些成分可独自使用或以各种混合物使用,并以本领域中已知用于口服组合物的任何量使用。
要认识到,某些组分或添加剂可能归类在不同的技术术语下,并且仅由于组分或添加剂归类在该术语下并不意味着它们局限于该功能。如果使用,一种或多种添加剂可以各种量存在于该组合物中。例如当适用于局部或口服施用时,任选用于该组合物的另外的成分描述在美国专利Nos.5,747,006;5,980,904;6,994,874;7,060,304;7,247,321;7,348,034;7,364,759;7,700,110;7,722,904;8,202,556;8,916,212;9,445,975;9,801,809;10,307,366;10,532,024;和10,537,516;和美国公开Nos.2006/0257509;2007/0224154;2008/0081082;2008/0124409;2013/0302265;2017/0252293;2017/0281666;2018/0200285;2019/0083566;2019/0160117;2020/0171117;2020/0383898;2021/0017240;和202I/0212926中;它们的公开内容全文经此引用并入本文。
施用方法
该组合物可按需要、每天、每天几次或以任何合适的方案施用或施加,以实现期望的结果。在本公开的方法中,施用(例如局部施加)的频率可取决于几个因素,包括所需的胶原酶抑制水平。通常,方案包括每天施加该组合物一次或两次,包括在早晨施用和/或在晚上施用。该组合物的施加量和/或频率可取决于几个因素,包括期望结果的水平和具体组合物。
可通过外部、内部或其某种组合施用本发明的制剂以实现改善的皮肤外观。优选地,本发明的制剂与可接受的载体一起施用。例如,本发明的制剂可与可接受的载体一起以凝胶、洗剂(lotion)、乳膏剂、护肤液(tonic)、乳剂等形式外部施用。作为进一步实例,本发明的制剂可与可接受的载体一起以丸剂、片剂、粉剂、棒、饮料等形式内服施用。因此,本文所述的制剂可用于多种多样的成品,包括药品、食品和饮料组合物。优选地,该产品可用于为哺乳动物皮肤提供改善的外观。
当本发明的制剂以液体形式口服施用时,液体可以是水基的、乳基的、茶基的、果汁基的或它们的某种组合。根据本发明用于内服施用的固体和液体制剂可进一步包含增稠剂,包括黄原胶、羧甲基纤维素、羧乙基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、淀粉、糊精、发酵乳清、豆腐、麦芽糖糊精、多元醇,包括糖醇(例如山梨醇和甘露醇)、碳水化合物(例如乳糖)、藻酸丙二醇酯、结冷胶、瓜尔胶、果胶、黄蓍胶、金合欢胶、刺槐豆胶、阿拉伯树胶、明胶,以及这些增稠剂的混合物。这些增稠剂通常以最多大约0.1%的含量包含在本发明的制剂中,取决于所涉及的特定增稠剂和所需的粘度效果。
本发明的固体和液体(食品和饮料)制剂可以含有并且通常含有有效量的一种或多种甜味剂,包括碳水化合物甜味剂和天然和/或人造无热量/低热量甜味剂。本发明的制剂中所用的甜味剂的量不等,但通常取决于所用甜味剂的类型和所需的甜味强度。
在另一实例中,本发明的制剂以如下形式局部施用:溶液、凝胶、洗剂、乳膏剂、软膏剂、水包油乳剂、油包水乳剂、棒、喷雾剂、糊剂、摩丝、护肤液(tonic)、粉底、面膜或其它化妆品和局部合适的形式。
优选地,适合局部施用的本发明的制剂与可接受的载体混合。可接受的载体可各式各样地充当该组合物的成分的溶剂、载体、稀释剂或分散剂,并允许成分在适当稀释下均匀施加到皮肤表面。可接受的载体也可促进该组合物渗透到皮肤中。
在用于局部施加的制剂的一个实例中,可接受的载体构成总组合物的大约70重量%至大约99.99重量%。在另一些实例中,可接受的载体构成总组合物的大约85重量%至99.99重量%。可接受的载体也可构成总组合物的大约90重量%至大约99.99重量%;或总组合物的大约99.95重量%至大约99.999重量%。可接受的载体可在不存在其它化妆品辅助剂或添加剂的情况下构成该组合物的余量。
用于实施本发明的各种成分可能可溶于或不溶于可接受的载体。如果制剂的所有成分可溶于可接受的载体,则该媒介物充当溶剂。但是,如果制剂的所有或一些成分不溶于可接受的载体,则这些成分借助例如悬浮液、乳剂、凝胶、乳膏剂或糊剂等分散在该媒介物中。
因此,本领域技术人员显而易见的是,可能的可接受的载体的范围非常宽。例如,可接受的载体可以是乳剂、洗剂(lotions)、乳膏剂或护肤液(tonics)。可接受的载体可包含水、乙醇、丁二醇或其它各种有助于皮肤渗透的溶剂。合适媒介物的一些实例描述在美国专利Nos.6,184,247和6,579,516中,其全部内容经此引用并入本文。
优选地,用于实施本发明的可接受的载体包含水和乙醇。任选地,可接受的载体还含有丁二醇。例如,可接受的载体可包含按组合物的重量计2-5%的丁二醇。在本发明的实践中,优选将这种可接受的载体与构成总组合物的2重量%的本发明的制剂混合。在另一些实例中,将可接受的载体与构成总组合物的0.001重量%至30重量%;总组合物的1重量%至5重量%;总组合物的0.01重量%至15重量%;或总组合物的0.5重量%至1.0重量%的本发明的制剂混合。
但是,一般而言,根据本发明的可接受的载体可包含,但不限于包含以下实例的任一种:水;蓖麻油;乙二醇单丁醚;二乙二醇单乙基醚;玉米油;二甲亚砜;乙二醇;异丙醇;大豆油;甘油;可溶性胶原蛋白;红花籽油;白芒花籽油;矿物油;角鲨烯;牛油树脂;琉璃苣油;或米糠油;聚季铵盐-10;对羟基苯甲酸甲酯;PEG-8;月桂酰两性基二乙酸二钠;十三烷醇聚醚硫酸钠;己二醇;甲基椰油酰基牛磺酸钠;月桂醇硫酸酯TEA盐;月桂基甜菜碱;肉豆蔻酰基肌氨酸钠;PEG-150二硬脂酸酯;无水柠檬酸;柠檬酸钠-二水合物;重氮烷基脲;EDTA二钠;对羟基苯甲酸丙酯;聚山梨酯60;棕榈酸异丙酯;棕榈酸辛酯;苯甲酸C12-15烷基酯;二苯甲酸二丙二醇酯;PPG-15十八烷基醚苯甲酸酯;异十二烷;异二十烷;角鲨烷;荷荷巴油;聚二甲基硅氧烷;硬脂酸甘油酯;PEG-100硬脂酸酯;鲸蜡醇;丁二醇;氯苯甘醚;香料;聚丙烯酰胺;C13-14异链烷烃;月桂醇聚醚-7;芦荟粉;芦荟凝胶、丙烯酸羟乙酯;丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物;山嵛醇;生育酚乙酸酯;新戊酸异癸酯;三辛酸甘油酯;鲸蜡硬脂醇;鲸蜡硬脂基葡糖苷;母菊花提取物;生物糖胶-1;十五内酯;二丙二醇;环甲硅油;PEG/PPG-18/18聚二甲基硅氧烷;环戊硅氧烷;二硬脂二甲铵锂蒙脱石;SD醇40;苯氧基乙醇;对羟基苯甲酸乙酯;三甲基硅烷氧基硅酸酯;三乙氧基辛基硅烷;微粉化二氧化钛;二氧化钛;氧化锌;氧化铁(黄色;红色;黑色;等);辛基硅烷;氯化钠;二聚亚油酸二异丙酯;氢氧化铝;硬脂酸;聚乙烯珠(polyethelene beads);苯甲酸C12-15烷基酯;丙烯酸酯/丙烯酸C10-30烷基酯;黄原胶;失水山梨糖醇月桂酸酯;泛醇;凡士林;异硬脂酸异丙酯;聚二甲基硅氧烷;精氨酸;苯氧基乙醇;丙烯酰二甲基牛磺酸盐共聚物;异十六烷;聚山梨酯80;丙烯酸羟乙酯;丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物;octinoxate(甲氧基肉桂酸辛酯);羟苯甲酮(oxybenzone);二辛基醚;新戊酸异癸酯;鲸蜡硬脂醇;鲸蜡硬脂基葡糖苷;苄醇;HDI/三羟甲基己内酯交联聚合物;二氧化硅;新戊酸异癸酯;椰油基葡糖苷;C20-22烷基磷酸酯;C20-22醇;棕榈酰脯氨酸;棕榈酰谷氨酸镁;棕榈酰肌氨酸钠;C30-45烷基鲸蜡硬脂基交联聚合物;聚丙烯酸酯13;聚异丁烯;聚山梨酯20;碘丙炔醇丁基氨基甲酸酯;硅酸钠镁;甲基葡糖醇聚醚-20;异山梨醇二甲醚;二氧化硅;SD醇40-B;水杨酸;鲸蜡醇聚醚-20;香料;或金缕梅。
另外,用于本发明的可接受的载体可任选包含一种或多种湿润剂,包括但不限于:邻苯二甲酸二丁酯;可溶性胶原蛋白;山梨醇;或2-吡咯烷酮-5-甲酸钠。可用于实施本发明的湿润剂的其它实例可见于CFTA Cosmetic Ingredient Handbook,其相关部分经此引用并入本文。
另外,本发明中的可接受的载体可任选包含一种或多种润肤剂,包括但不限于:丁-1,3-二醇;棕榈酸鲸蜡酯;二甲基聚硅氧烷;单蓖麻油酸甘油酯;单硬脂酸甘油酯;棕榈酸异丁酯;硬脂酸异鲸蜡酯;棕榈酸异丙酯;硬脂酸异丙酯;硬脂酸丁酯;月桂酸异丙酯;月桂酸己酯;油酸癸酯;肉豆蔻酸异丙酯;乳酸月桂酯;十八烷-2-醇;辛酸甘油三酯;癸酸甘油三酯;聚乙二醇;丙-1,2-二醇;三乙二醇;芝麻油;椰子油;红花油;月桂酸异戊酯;壬苯醇醚-9;泛醇;氢化植物油;生育酚乙酸酯;生育酚亚油酸酯;尿囊素;丙二醇;花生油;蓖麻油;异硬脂酸;棕榈酸;亚油酸异丙酯;乳酸月桂酯;乳酸十四烷酯;油酸癸酯;或肉豆蔻酸十四烷酯。可用于实施本发明的润肤剂的其它实例可见于CFTA Cosmetic IngredientHandbook,其相关部分经此引用并入本文。
另外,用于本发明的可接受的载体可任选包含一种或多种渗透促进剂,包括但不限于:吡咯烷酮,例如2-吡咯烷酮;醇,如乙醇;烷醇,如癸醇;二醇,如丙二醇、二丙二醇、丁二醇;表面活性剂;或萜烯。
可用于实施本发明的其它可接受的载体是本领域技术人员显而易见的并包括在本发明的范围内。
例如,可接受的载体可以是局部施加的洗剂(lotion)。洗剂可包含卡波姆981、水、甘油、肉豆蔻酸异丙酯、矿物油、牛油树脂、硬脂酸、硬脂酸乙二醇酯、鲸蜡醇、聚二甲基硅氧烷、防腐剂、三乙醇胺(tea)和本发明制剂的各种成分。
本发明的制剂还可含有各种已知的和常规的化妆品辅助剂,只要它们不会有害地影响由该制剂提供的所需皮肤改善和保湿效果。例如,本发明的制剂可进一步包括一种或多种本领域众所周知的添加剂或其它任选成分,其可包括但不限于填料(例如固体、半固体、液体等);载体;稀释剂;增稠剂;胶凝剂;维生素、类维生素A类和视黄醇类(例如维生素B3、维生素A等);颜料;香料;化学防晒剂(sunscreens)和物理防晒剂(sunblocks);抗氧化剂和自由基清除剂;有机羟基酸;剥脱剂;皮肤调理剂;保湿剂;神经酰胺、假神经酰胺、磷脂、鞘脂、胆固醇、葡糖胺、可药用渗透剂(例如正癸基甲基亚砜、卵磷脂有机凝胶、酪氨酸、赖氨酸等);防腐剂;抗微生物剂;氨基酸,如脯氨酸、吡咯烷酮甲酸、其衍生物和盐、糖类同分异构体(saccharide isomerate)、泛醇、与碱如三乙醇胺或氢氧化钠一起的缓冲剂;蜡,如蜂蜡、地蜡、石蜡;植物提取物,如芦荟、矢车菊、金缕梅、接骨木花或黄瓜,及其组合。其它合适的添加剂和/或辅助剂描述在美国专利No.6,184,247中,其全部内容经此引用并入本文。
该制剂可包括另外的无活性成分,包括但不限于表面活性剂、助溶剂和赋形剂。表面活性剂,如亲水性和疏水性表面活性剂,可包括在该制剂中。可基于该制剂的总体组成和该制剂的预期递送使用特定的表面活性剂。可用的表面活性剂包括聚乙氧基化(PEG)脂肪酸、PEG-脂肪酸二酯、PEG-脂肪酸单酯和二酯混合物、聚乙二醇甘油脂肪酸酯、醇-油酯交换产物、聚甘油化脂肪酸、丙二醇脂肪酸酯、丙二醇酯-甘油酯的混合物、甘油单酯和甘油二酯、甾醇和甾醇衍生物、聚乙二醇山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚乙二醇烷基醚、多糖酯、聚乙二醇烷基酚、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、山梨糖醇酐脂肪酸酯、低级醇脂肪酸酯、离子型表面活性剂及其混合物。
该制剂还可包括助溶剂,如醇和多元醇、聚乙二醇醚、酰胺、酯、其它合适的助溶剂及其混合物。该制剂还可包括赋形剂或添加剂,如甜味剂、调味剂、着色剂、抗氧化剂、防腐剂、螯合剂、粘度调节剂、张力调节剂(tonicifiers)、气味剂、乳浊剂、悬浮剂、粘合剂及其混合物。
通常,本发明的制剂至少每天局部或口服施用一段时间,该时间足以带来所需的皮肤外观改善水平。本发明的制剂的局部施加或口服施用可持续任何合适的时间段。更具体地,在最初施加或摄入的几小时内至几天内,使用者可能注意到皮肤具有改善的外观。应该认识到,本发明的制剂的施加或摄入频率根据所需的外观改善水平而变。特别地,美容增强的程度将直接随所用组合物的总量而变。
有用的剂型可通过本领域技术人员充分理解的方法和技术制备,并可包括在片剂、胶囊或液体剂型的生产中使用另外的成分。
工业适用性
本公开提供新的和有用的胶原酶抑制剂,其包括本文所述的植物提取物。这样的胶原酶抑制剂可提供用于降低由胶原酶活性引起的皮肤老化,如皱纹形成的风险的潜在预防性和治疗性方法。因此,本文所述的组合物和方法可用于抑制胶原酶。
本公开提供的一般组合物和产品系列涉及利用这样的胶原酶抑制剂的皮肤护理和营养美容产品,且具体实例包括利用这样的胶原酶抑制剂的眼霜、面霜和面膜。
不加遏制的胶原酶可不理想地降解纤维,如胶原蛋白,从而降低皮肤弹性,增加皱纹的出现并导致愈合缺陷。因此,本文的组合物和方法可用于胶原酶抑制或皮肤老化预防,并因此可增加皮肤弹性、减少皱纹的出现,并另外促进皮肤愈合。本公开的组合物和方法还提供用于降低由胶原酶活性引起的皮肤老化的风险的潜在预防性和治疗性方法。
例示本公开的组合物和方法的以下实施例意在举例说明而非限制本公开。
实施例
评价四种植物的乙醇和/或水提取物对胶原酶活性的抑制作用。具体地,评价六种金花茶花提取物样品和六种金花茶叶提取物样品的抑制胶原酶活性的潜力。如下表和附图中所示,十二种提取物都表现出抑制。提取物在实验室中制备,但也可购得。
胶原酶的抑制
评估了金花茶的水提取物和乙醇提取物的胶原酶抑制活性。将样品混合物(10μL)、10μ g/mL酶(源自溶组织梭菌的胶原酶)和50mM Tricine缓冲液(pH 7.5)添加到96孔微量滴定板中。提取物的最终浓度为100、50、25、12.5和6.25μg/mL,一式三份。在37℃下孵育10分钟后,加入底物溶液((7-甲氧基香豆素-4-基)乙酰基-L-脯氨酰-L-亮氨酰甘氨酰-L-亮氨酰-[Nβ-(2,4-二硝基苯基)-L-2,3-二氨基丙酰基]-L-丙氨酰-L-精氨酸酰胺)以使终浓度为10μM,使其反应。在37℃下孵育0分钟和30分钟后,使用荧光酶标仪(EnSpire,PerkinElmer,Inc.,Japan)在320nm的激发和405nm的发射下测量荧光值。EGCG用作阳性对照。作为胶原酶抑制活性的百分比的胶原酶的抑制率通过公式(ΔOD对照-ΔOD样品)/(ΔOD对照)×100计算,其中ΔOD对照是在缓冲液、胶原酶、样品溶剂和底物存在下30分钟内的荧光差,ΔOD样品是缓冲液、胶原酶、提取物和底物的荧光差。结果显示在下表中。也可参考附图理解平均抑制率。
表1:
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*也参见图1(其中X轴是浓度且Y轴是平均抑制%)。
表2:
*也参见图2(其中X轴是浓度且Y轴是平均抑制%)。
表3:
*也参见图3(其中X轴是浓度且Y轴是平均抑制%)。
表4:*也参见图4(其中X轴是浓度且Y轴是平均抑制%)。
*也参见图4(其中X轴是浓度且Y轴是平均抑制%)。
表5:
*也参见图5(其中X轴是浓度且Y轴是平均抑制%)。
术语“包含”在本文中以它们的最广泛意义使用以表示和涵盖“包括”、“基本由…组成”和“由…组成”的概念。使用“例如”、“如”和“包括”列举说明性的实例并不仅限于所列的实例。因此,“例如”或“如”是指“例如但不限于”或“如但不限于”并涵盖其它类似或等同的实例。本文所用的术语“大约”用于合理地涵盖或描述通过仪器分析测得或由样品处理引起的数值的轻微变化。这样的轻微变化可为数值的大约±0-10、±0-5或±0-2.5%。此外,当与数值范围相关时,术语“大约”适用于这两个数值。此外,即使没有明确表述,术语“大约”也可适用于数值。
通常,如本文所用,数值范围中的连字符“-”或连接号“-”是“至”或“到”;“>”是“高于”或“大于”;“≥”是“至少”或“大于等于”;“<”是“低于”或“小于”;且“≤”是“最多”或“小于等于”。在逐个基础上,各上述专利申请、专利和/或专利申请公开在一个或多个非限制性实施方案中明确地全文经此引用并入本文。
要理解的是,所附权利要求书不限于详述中描述的明确和特定的化合物、组合物或方法,它们可能在落在所附权利要求书范围内的特定实施方案之间变化。关于本文中赖以描述各种实施方案的特定特征或方面的任何马库什群组,要认识到,可由各马库什群组的各成员独立于所有其它马库什成员获得不同、特殊和/或出乎意料的结果。可以单独和/或组合依赖马库什群组的各成员并为所附权利要求书范围内的具体实施方案提供足够的支持。
还要理解的是,赖以描述本发明的各种实施方案的任何范围和子范围独立地和共同地落在所附权利要求书的范围内,并被理解为描述和考虑了包括其中的整数和/或分数值的所有范围,即使在本文中没有明确写出这些值。本领域技术人员容易认识到,所列举的范围和子范围足以描述和实现本发明的各种实施方案,且这样的范围和子范围可进一步描绘成相关的1/2、1/3、1/4、1/5,诸如此类。仅举一例,“0.1至0.9”的范围可进一步描绘成下1/3,即0.1至0.3,中间1/3,即0.4至0.6,和上1/3,即0.7至0.9,它们独立地和共同地在所附权利要求书的范围内并可独立地和/或共同地赖以为所附权利要求书范围内的具体实施方案提供足够的支持。此外,关于界定或修饰范围的词语,如“至少”、“大于”、“小于”、“不大于”等,要理解的是,这样的词语包括子范围和/或上限或下限。作为另一实例,“至少10”的范围固有地包括至少10至35的子范围、至少10至25的子范围、25至35的子范围,诸如此类,并且可以独立地和/或共同地依赖各子范围并为所附权利要求书范围内的具体实施方案提供足够的支持。最后,可以依赖所公开的范围内的独立数值并为所附权利要求书范围内的具体实施方案提供足够的支持。例如,“1至9”的范围包括各个独立整数,如3,以及含小数点的独立数值(或分数),如4.1,可以依赖它们并为所附权利要求书范围内的具体实施方案提供足够的支持。
本文已经以示例性方式描述了本发明,并且要理解的是,所用术语意为描述性而非限制性的。可以根据上述教导作出本发明的许多修改和变动。可与所附权利要求书的范围内的具体描述不同地实施本发明。在本文中明确考虑了独立和从属权利要求(包括单项和多项从属权利要求)的所有组合的主题。
Claims (17)
1.用于向受试者施用的组合物,所述组合物包含至少一种植物活性组分,其中所述植物活性组分包含选自下组的至少一种提取物:
i)金花茶花的提取物;
ii)金花茶叶的提取物;和
iii)i)和ii)的组合;
其中所述植物活性组分以有效抑制受试者皮肤中的胶原酶活性的量存在于所述组合物中。
2.根据权利要求1的组合物,其中所述植物活性组分包含金花茶花的提取物,任选其中所述植物活性组分由金花茶花的提取物组成。
3.根据权利要求1或2的组合物,其中金花茶花的提取物通过金花茶的花或花基植物材料的醇提取,任选乙醇提取获得。
4.根据权利要求1或2的组合物,其中金花茶花的提取物通过金花茶的花或花基植物材料的水提取(或水性提取)获得。
5.根据权利要求1至4任一项的组合物,其中所述组合物基本不含至完全不含获自金花茶的非花基植物材料的组分。
6.根据权利要求1至5任一项的组合物,其中所述植物活性组分包含金花茶叶的提取物,任选其中所述植物活性组分由金花茶叶的提取物组成。
7.根据权利要求1至6任一项的组合物,其中金花茶叶的提取物通过金花茶的叶或叶基植物材料的醇提取,任选乙醇提取获得。
8.根据权利要求1至6任一项的组合物,其中金花茶叶的提取物通过金花茶的叶或叶基植物材料的水提取(或水性提取)获得。
9.根据权利要求1至8任一项的组合物,其中所述组合物基本不含至完全不含获自金花茶的非叶基植物材料的组分。
10.根据权利要求1至9任一项的组合物,其中所述组合物进一步被定义为配制成局部施用于受试者的局部组合物。
11.根据权利要求10的组合物,其进一步包含化妆品可接受的载体,任选其中所述化妆品可接受的载体不是天然存在的。
12.根据权利要求1至9任一项的组合物,其中所述组合物进一步被定义为配制成口服施用于受试者的口服组合物。
13.根据权利要求12的组合物,其进一步包含可药用的添加剂,任选其中所述可药用的添加剂不是天然存在的。
14.根据权利要求1至13任一项的组合物用于抑制受试者皮肤中的胶原酶活性的用途。
15.抑制受试者皮肤中的胶原酶活性的方法,所述方法包括向受试者施用有效量的组合物,其中所述组合物根据权利要求1至13任一项。
16.权利要求15的方法,其中所述组合物局部施用于受试者。
17.权利要求15的方法,其中所述组合物口服施用于受试者。
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