CN116671368A - 一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法 - Google Patents
一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提出了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，涉及植物病害防护技术领域。该方法包括如下步骤：将大豆根系发酵物在土壤翻耕之后施入土壤中，将番茄按株距25‑35cm、行距45‑55m在土壤内定植，定植后在番茄的叶面喷施二硫化钼溶液；该方法能够全方位的降低番茄灰霉病的发生率，从而解决现目前番茄灰霉病菌株抗药性高难以抑制的技术问题。
Description
技术领域
本发明涉及植物病害防护技术领域，具体而言，涉及一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法。
背景技术
番茄是全球栽培最广、消费量最大的蔬菜作物，中国是世界最大的番茄生产和消费国家。连年栽培导致番茄病害越来越严重，一般发病田块番茄灰霉病造成的产量损失为20％-40％，重病田块达60％以上，经济损失严重，已成为番茄生产的一大障碍。目前农业生产上缺乏抗灰霉病的番茄品种，长期以来主要依赖化学防治，致使病原菌对多种农药产生了抗药性，且化学农药长期和大量使用也产生了食品安全和环境污染等诸多问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，该方法能够全方位的降低番茄灰霉病的发生率，从而解决现目前番茄灰霉病菌株抗药性高难以抑制的技术问题。
相对于现有技术，本发明的实施例至少具有如下优点或有益效果：
本发明提供了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，首先，纳米二硫化钼可以激活植物内部的一些生理代谢过程，提高植物的免疫力和抗病能力；其次，纳米二硫化钼可以与番茄灰霉病菌体表的分子结构相互作用，破坏其细胞膜，破坏细胞代谢，从而达到抑制病菌生长的效果。而在光照条件下，纳米二硫化钼的效果能够更好地发挥。并且，由于钼元素是植物生长发育所需的微量元素，硫元素是植物生长发育所需的中量元素，二者能够为番茄的生长发育提供营养，增加产量；大豆根系发酵物中含有丰富的生物活性物质，如黄酮类物质、异黄酮类物质、黄烷类物质等，这些物质具有一定的抗菌、抗病毒、抗真菌等生物活性。因此进一步考虑利用大豆根系制作根系发酵物，在地下部进一步抑制番茄灰霉病，以达到更好地抑菌效果。二者相配合共同抑菌，相辅相成，从而达到彻底根除灰霉病的效果，且该方法操作简便，大大降低了番茄灰霉病防治的难度。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为纳米二硫化钼的透射电镜(TEM)图像；
图2为纳米二硫化钼粒子对灰霉菌的抑制效果探究实验。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本发明。
本发明实施例提供了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，包括如下步骤：将大豆根系发酵物在土壤翻耕之后施入土壤中，将番茄按株距25-35cm、行距45-55m在土壤内定植，定植后在番茄的叶面喷施二硫化钼溶液。
在本发明的一些实施例中，上述大豆根系发酵物的制备包括如下步骤：将大豆根系捣碎后与有机肥按照1:(1.5-2.5)的质量比进行混合并得到混合物，调节混合物的pH至6-7后再加入生物菌剂发酵5-7天，即制得大豆根系发酵物。
在本发明的一些实施例中，上述生物菌剂包括胶质芽孢杆菌0.8-1.2×108cfu/g、枯草芽孢杆菌亿0.5-1.5×108cfu/g、玫瑰链孢囊菌0.4-0.6×108cfu/g、生防性链霉菌1-2×108cfu/g和双酶梭菌0.5-1×108cfu/g。上述菌剂均购自成都市四友生物科技有限公司。
在本发明的一些实施例中，上述二硫化钼溶液的质量浓度为1-10％。该浓度范围的二硫化钼溶液能够起到较好抑制番茄灰霉病的效果，当浓度低于或高于该区间时，会导致二硫化钼溶液抑制番茄灰霉病的效果降低。
在本发明的一些实施例中，上述二硫化钼溶液的质量浓度为5％。该浓度区间为二硫化钼溶液抑制番茄灰霉病的最佳浓度，该浓度的二硫化钼溶液在光照条件下对番茄灰霉病的抑制效果达到最佳。
在本发明的一些实施例中，上述二硫化钼溶液的施用时间为番茄定植后的10-15天内。番茄在定植后10-15天后生长出新的叶片和嫩芽，对灰霉病的抵抗力较低，此时施用可以为新生叶芽提供保护。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，包括如下步骤：将大豆根系捣碎后与有机肥按照1:1.5的质量比进行混合并得到混合物，调节混合物的pH至6后再加入含胶质芽孢杆菌0.8×108cfu/g、枯草芽孢杆菌亿0.5×108cfu/g、玫瑰链孢囊菌0.4×108cfu/g、生防性链霉菌1×108cfu/g和双酶梭菌0.5×108cfu/g生物菌剂发酵5天，即制得大豆根系发酵物；将大豆根系发酵物在土壤翻耕之后施入土壤中，将番茄按株距25cm、行距45m在土壤内定植，定植后10天内在番茄的叶面喷施质量浓度为1％的二硫化钼溶液。
实施例2
本实施例提供了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，包括如下步骤：将大豆根系捣碎后与有机肥按照1:2.5的质量比进行混合并得到混合物，调节混合物的pH至7后再加入含胶质芽孢杆菌1.2×108cfu/g、枯草芽孢杆菌亿1.5×108cfu/g、玫瑰链孢囊菌0.6×108cfu/g、生防性链霉菌2×108cfu/g和双酶梭菌1×108cfu/g生物菌剂发酵7天，即制得大豆根系发酵物；将大豆根系发酵物在土壤翻耕之后施入土壤中，将番茄按株距35cm、行距55m在土壤内定植，定植后15天内在番茄的叶面喷施质量浓度为10％的二硫化钼溶液。
实施例3
本实施例提供了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，包括如下步骤：将大豆根系捣碎后与有机肥按照1:2的质量比进行混合并得到混合物，调节混合物的pH至6.5后再加入含胶质芽孢杆菌1.0×108cfu/g、枯草芽孢杆菌亿1.0×108cfu/g、玫瑰链孢囊菌0.5×108cfu/g、生防性链霉菌1.5×108cfu/g和双酶梭菌0.75×108cfu/g生物菌剂发酵6天，即制得大豆根系发酵物；将大豆根系发酵物在土壤翻耕之后施入土壤中，将番茄按株距30cm、行距50m在土壤内定植，定植后12天内在番茄的叶面喷施质量浓度为5％的二硫化钼溶液。
实施例4
本实施例提供了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，包括如下步骤：将大豆根系捣碎后与有机肥按照1:1.7的质量比进行混合并得到混合物，调节混合物的pH至6.2后再加入含胶质芽孢杆菌0.9×108cfu/g、枯草芽孢杆菌亿0.9×108cfu/g、玫瑰链孢囊菌0.48×108cfu/g、生防性链霉菌1.4×108cfu/g和双酶梭菌0.7×108cfu/g生物菌剂发酵6天，即制得大豆根系发酵物；将大豆根系发酵物在土壤翻耕之后施入土壤中，将番茄按株距28cm、行距48m在土壤内定植，定植后11天内在番茄的叶面喷施质量浓度为3％的二硫化钼溶液。
实施例5
本实施例提供了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，包括如下步骤：将大豆根系捣碎后与有机肥按照1:2.2的质量比进行混合并得到混合物，调节混合物的pH至6.7后再加入含胶质芽孢杆菌1.1×108cfu/g、枯草芽孢杆菌亿1.1×108cfu/g、玫瑰链孢囊菌0.55×108cfu/g、生防性链霉菌1.6×108cfu/g和双酶梭菌0.82×108cfu/g生物菌剂发酵6天，即制得大豆根系发酵物；将大豆根系发酵物在土壤翻耕之后施入土壤中，将番茄按株距33cm、行距52m在土壤内定植，定植后14天内在番茄的叶面喷施质量浓度为8％的二硫化钼溶液。
对比例1
将实施例3中的根系发酵物取消，其余步骤与实施例3相同。
对比例2
将实施例3中的纳米二硫化钼溶液取消，其余步骤与实施例3相同。
对比例3
将实施例3中的根系发酵物和纳米二硫化钼溶液均取消，其余步骤与实施例3相同。
实验例1
取总共1200g试验土壤和50g含灰霉菌的PDA。将两者混合并放入盆中。在盆栽中种植番茄幼苗品种。将外观良好、大小均匀的种子用1％次氯酸钠溶液表面灭菌10min，同时用双蒸水连续洗涤。幼苗生长十四天天后，接下来，在番茄茎基部切入伤口(1mm×5mm大小)，并将植株置于25℃的温室中三天。在确保机械损伤不会导致番茄幼苗死亡后，将0.1％，0.5％，1％，5％，10％(m/m)浓度的纳米MoS2喷洒到植株上。同时在其余处理保持不变的情况下，设置光照条件和黑暗条件进行对照，每个处理设六个盆栽，每个盆栽三株番茄幼苗，重复实验三次。在治疗后3天和7天记录发病率。以没有加入含有尖孢镰刀菌的PDA土壤培养和以没有任何处理(切伤口除外)的盆栽为对照，所得结果如表1所示。
表1发病率和平均干重统计表
通过表1可以看出，在5％(m/m)的纳米二硫化钼浓度和光照条件下，灰霉病抑制效果最好，虽然10％(m/m)的纳米二硫化钼浓度下仍然有较好的灰霉病抑制率，但是却由于过高的浓度导致番茄生长不佳，可能是由于过高的浓度在抑制灰霉菌生长的同时也破坏了番茄的细胞结构，导致番茄生长异常。因此我们最终筛选出在光照条件下的5％(m/m)浓度的纳米二硫化钼具有最佳的抑制效果，而其中CK和各组浓度的纳米二硫化钼的处理对比图如图2结果所示，根据图2结果可以看到，相比CK(不做处理)而言，5％(m/m)浓度的纳米二硫化钼(参见左下)对PDA(马铃薯葡萄糖琼脂)培养基中培养的灰霉菌产生了明显的抑制作用。
实验例2
将实施例3和对比例1-3中的番茄种植30天后，分别统计和计算其中番茄灰霉病的发病率以及番茄的产量，所得结果如表2所示。
表2番茄灰霉病的发病率以及番茄产量统计表
| 处理 | 发病率 | 产量(t/hm2) |
| 实施例3 | 10.82％ | 5.81±0.2 |
| 对比例1 | 18.15％ | 5.40±0.2 |
| 对比例2 | 15.73％ | 5.42±0.1 |
| 对比例3 | 20.82％ | 5.00±0.2 |
根据表2结果所示，番茄在实施例3的种植模式下相比于对比例1-3的发病率有明显降低且产量均有提升，说明该方案对于作物生长和产量的影响是有益的。并且该方法使用纳米二硫化钼溶液处理番茄地上部和大豆根系发酵物处理土壤及番茄根系环境，全方位的降低番茄灰霉病的发生率，同时还能改善土壤环境，提高番茄产量和品质。
综上所述，本发明实施例提供了一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法：
首先，纳米二硫化钼可以激活植物内部的一些生理代谢过程，提高植物的免疫力和抗病能力；其次，纳米二硫化钼可以与番茄灰霉病菌体表的分子结构相互作用，破坏其细胞膜，破坏细胞代谢，从而达到抑制病菌生长的效果。而在光照条件下，纳米二硫化钼的效果能够更好地发挥。并且，由于钼元素是植物生长发育所需的微量元素，硫元素是植物生长发育所需的中量元素，二者能够为番茄的生长发育提供营养，增加产量；大豆根系发酵物中含有丰富的生物活性物质，如黄酮类物质、异黄酮类物质、黄烷类物质等，这些物质具有一定的抗菌、抗病毒、抗真菌等生物活性。因此进一步考虑利用大豆根系制作根系发酵物，在地下部进一步抑制番茄灰霉病，以达到更好地抑菌效果。二者相配合共同抑菌，相辅相成，从而达到彻底根除灰霉病的效果，且该方法操作简便，大大降低了番茄灰霉病防治的难度。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
Claims (6)
1.一种利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，其特征在于，包括如下步骤：将大豆根系发酵物在土壤翻耕之后施入土壤中，将番茄按株距25-35cm、行距45-55m在土壤内定植，定植后在所述番茄的叶面喷施二硫化钼溶液。
2.根据权利要求1所述的利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，其特征在于，所述大豆根系发酵物的制备包括如下步骤：将大豆根系捣碎后与有机肥按照1:(1.5-2.5)的质量比进行混合并得到混合物，调节所述混合物的pH至6-7后再加入生物菌剂发酵5-7天，即制得所述大豆根系发酵物。
3.根据权利要求2所述的利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，其特征在于，所述生物菌剂包括胶质芽孢杆菌0.8-1.2×108cfu/g、枯草芽孢杆菌亿0.5-1.5×108cfu/g、玫瑰链孢囊菌0.4-0.6×108cfu/g、生防性链霉菌1-2×108cfu/g和双酶梭菌0.5-1×108cfu/g。
4.根据权利要求1所述的利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，其特征在于，所述二硫化钼溶液的质量浓度为1-10％。
5.根据权利要求4所述的利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，其特征在于，所述二硫化钼溶液的质量浓度为5％。
6.根据权利要求1所述的利用纳米二硫化钼和大豆根系发酵物抑制番茄灰霉病的方法，其特征在于，所述二硫化钼溶液的施用时间为所述番茄定植后的10-15天内。
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