CN116490174A - 淋巴靶向制剂 - Google Patents

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约翰·温莎
洪志沅
伊恩·肯尼斯·斯泰尔斯
陆子俊
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Abstract

本发明涉及包含脂肪酶抑制剂和长链脂肪酸的药物制剂。所述制剂能够将脂肪酶抑制剂递送至肠淋巴，并从而可用于治疗或预防由胰脂肪酶介导的疾病和病症，例如急性胰腺炎和相关综合征。

Description

淋巴靶向制剂
技术领域
本发明涉及包含脂肪酶抑制剂的药物制剂及其在治疗或预防由胰脂肪酶介导的疾病和病症中的用途，特别是在治疗或预防急性胰腺炎和相关综合征中的用途。
背景技术
胰腺产生帮助食物消化和吸收的酶，包括消化脂质(即脂肪)的酶胰脂肪酶。急性胰腺炎是胰腺的炎性疾病之一，其临床进程不可预测。它是由于胃肠疾病而住院的最常见原因之一(Peery,A.F.,et al.Gastroenterology2019,156,254-272e211)。在美国全国对几乎500万患有急性胰腺炎的患者进行的研究(2002至2013)中，发生率从每1000例住院中9.48例显著提高至12.19例(28％)(Brindise,E.,el al.Pancreas,2019,48,169-175)。它在美国占每年入院的超过270,000，成本为25亿美元(Forsmark,C.E.,elal.N Engl J Med,2016,375,1972-1981)。急性胰腺炎有多种病因和可变的临床进程，并且严重性范围与死亡风险相关。中等严重、严重和危重AP的死亡率为2.8％、40％和54％(Zubia-Olaskoaga,F.,et al.Crit Care Med,2016,44,910-917)。
急性胰腺炎的结局的最重要决定因素是向全身炎症反应综合征(systemicinflammatory response syndrome，SIRS，其导致多器官功能障碍综合征(multiple organdysfunction syndrome，MODS)和器官衰竭)的进展。急性胰腺炎患者中的20至30％发展为器官衰竭，当器官衰竭持续时，死亡风险高至50％(Johnson,C.D.&Abu-Hilal,M.Gut,2004,53,1340-1344；Petrov,M.S.,et al.Gastroenterology,2010,139,813-820)。引人注目的是，对于急性胰腺炎没有特定且有效的治疗，而对于SIRS、MODS和器官衰竭也没有特定的预防或治疗。目前的管理标准是支持性护理(例如一般流体和营养治疗)以及当发生并发症时管理并发症。
相对近期的发现提供了令人信服的证据：来自肠的“毒性因子”包括胰脂肪酶和脂肪酶产生的脂毒素(lipotoxin)进入淋巴和血液循环，以在急性胰腺炎和其他急性疾病的情况下促进SIRS、MODS、器官衰竭和死亡(Mittal,A.,et al.American Journal ofPhysiology-Gastrointestinal and Liver Physiology,2012,303,G969-G978；Deitch,E.A.Lymphatics in the Digestive System:Physiology,Health,and Disease,2010,1207,E103-E111；Fanous,M.Y.,Phillips,A.J.&Windsor,J.A.JOP,2007,8,374-399；Escott,A.B.,Phillips,A.R.&Windsor,J.A.The Role of the Intestine andMesenteric Lymph in the Development of Systemic Inflammation and MODS inSevere Acute Pancreatitis.The Pancreas(ed.H.G.Beger,et al.),2018,166-172)。通过使肠和淋巴中的胰脂肪酶失活，这种“肠-淋巴概念”打开了治疗急性疾病例如胰腺炎的潜力。
已开发了许多胰脂肪酶抑制剂作为抗肥胖药物(Sternby,B.,et al.ClinicalNutrition,2002,21,395-402；Guerciolini,R.Journal of the InternationalAssociation for the Study of Obesity,1997,21,S12-23)。在这种情况下，脂肪酶抑制剂通过抑制所摄入脂肪的消化和吸收来降低卡路里摄入。胰脂肪酶抑制剂的一些实例包括新利司他(cetilistat)、利普司他汀(lipstatin)和奥利司他(orlistat)(由Roche作为Xenical销售以及由GlaxoSmithKline作为Alli销售)。还报道了当肠胃外施用时，奥利司他在小鼠黑素瘤模型中促进细胞凋亡、降低细胞生长和淋巴结转移(Seguin,F.,et al.Br JCancer,2012,107,977-987；Carvalho,M.A.,et al.International Journal of Cancer,2008,123,2557-2565)。
目前销售的用于治疗肥胖的脂肪酶抑制剂的制剂由以标准干粉制剂施用的脂肪酶抑制剂组成。在进食或禁食状态下在以这些标准制剂经口施用之后，脂肪酶抑制剂奥利司他的吸收和生物利用度最小(<1％剂量，Zhi,J.,et al.The Journal of ClinicalPharmacology,1996,36,1006-1011)。这是由于高的首过代谢、与胰脂肪酶的结合和在肠腔中饮食脂肪滴内的捕获，所述脂肪滴在存在奥利司他的情况下不被消化(Zhi,J.,Mulligan,T.E.&Hauptman,J.B.The Journal of Clinical Pharmacology,1999,39,41-46)。在健康志愿者和人患者中，在以标准胶囊制剂经口施用之后，奥利司他的血浆浓度可忽略不计，其中超过97％的剂量在健康志愿者的粪便中回收并且83.1％以非代谢形式回收(Zhi,J.,et al.The Journal of Clinical Pharmacology,1995,35,1103-1108；Zhi,J.,Mulligan,T.E.&Hauptman,J.B.The Journal of Clinical Pharmacology,1999,39,41-46)。在以标准制剂经口施用之后奥利司他的低吸收性限制了其治疗全身性病症例如急性胰腺炎的潜力。
因此，存在开发用于治疗由胰脂肪酶介导的疾病和病症的新的制剂和方法的需求，所述疾病和病症包括急性疾病，例如急性胰腺炎和相关综合征。
发明内容
提供了将脂肪酶抑制剂递送至肠淋巴的新的制剂和方法。
因此，在一个方面中，本发明提供了包含脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸的药物制剂。
在另一方面中，本发明提供了在有此需要的对象中治疗或预防由胰脂肪酶介导的疾病或病症的方法，其包括向所述对象施用有效量的根据本发明的药物制剂。
在另一方面中，本发明提供了在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的方法，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，所述方法包括向所述对象施用有效量的根据本发明的药物制剂。
在另一方面中，本发明提供了在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的方法，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，所述方法包括向所述对象肠内(enterally)施用有效量的脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸，其中所述一种或更多种长链脂肪酸以足以增强或促进所述脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在。
在另一方面中，本发明提供了在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的方法，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，所述方法包括向所述对象施用包含有效量的脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸的制剂，其中所述制剂是自乳化药物递送系统，并且其中所述一种或更多种长链脂肪酸以足以增强或促进所述脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在于所述制剂中。
在又一方面中，本发明提供了根据本发明的药物制剂，其用于在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征。
在结合所附实施例和权利要求书阅读以下详细描述之后，本发明的这些和其他方面对技术人员来说将变得更明显。
附图说明
在此将仅参考以下非限制性附图通过示例的方式来描述本发明，其中：
图1示出了制剂脂质类型对奥利司他在淋巴插管大鼠中的肠系膜淋巴转运和血浆药代动力学的影响。图A：总奥利司他(开环和闭环形式)随时间的累积淋巴转运，图B：闭环奥利司他随时间的累积淋巴转运，图C：总奥利司他(开环和闭环形式)随时间的剂量归一化淋巴浓度，图D：闭环奥利司他随时间的剂量归一化淋巴浓度，图E：总奥利司他(主要为开环形式)随时间的剂量归一化血浆浓度，以及图F：在十二指肠内输注制剂0至2小时之后，在肠系膜淋巴管插管的麻醉大鼠中，总奥利司他随时间的淋巴与血浆浓度之比。对于油酸LC-FA(圆形，n＝5)、辛酸MC-FA(菱形，n＝4)、橄榄油LC-TG(正方形，n＝4)和对照无脂质(三角形，n＝3)制剂，数据以平均值±SEM表示。对于图E，显著性仅应用于无脂质相对于MC-FA和无脂质相对于LC-TG。根据单因素ANOVA确定的与其他组的显著性差异：***p≤0.001，*p≤0.05。
图2示出了脂质剂量对奥利司他在淋巴插管大鼠中的肠系膜淋巴转运和血浆药代动力学的影响。图A：总奥利司他(开环和闭环形式)随时间的累积淋巴转运，图B：闭环奥利司他随时间的累积淋巴转运，图C：总奥利司他(开环和闭环形式)随时间的剂量归一化淋巴浓度，图D：闭环奥利司他随时间的剂量归一化淋巴浓度，图E：总奥利司他(主要为开环形式)随时间的剂量归一化血浆浓度，以及图F：在十二指肠内输注制剂0至2小时之后，在肠系膜淋巴管插管的麻醉大鼠中，总奥利司他随时间的淋巴与血浆浓度之比。对于80mg LC-FA(空心圆，n＝4)、40mg LC-FA(黑色圆，n＝5)和对照(三角形，n＝3)，数据以平均值±SEM表示。来自单因素ANOVA的与其他组的显著性差异：**p≤0.01，*p≤0.05。
图3示出了脂质类型对奥利司他的全身暴露的作用。在2小时内在十二指肠内输注制剂之后，在经麻醉的颈动脉插管和肠系膜淋巴管插管(虚线)或淋巴完整(实线)大鼠中，总奥利司他(其主要为开环形式)随时间的剂量归一化血浆浓度。对于LC-FA(空心圆，n＝5，淋巴插管；以及阴影圆，n＝4，淋巴完整)和LC-TG(黑色正方形，n＝4，淋巴插管；以及阴影正方形，n＝3，淋巴完整)，数据以平均值±SEM表示。根据单因素ANOVA确定的与其他组的显著性差异：***p≤0.001，*p≤0.05。
图4示出了在经肠施用空白长链脂肪酸(long chain fatty acid，LC-FA)、奥利司他LC-FA(LC-FA+O)或奥利司他无脂质制剂(LFF+O)的淋巴转移或淋巴完整的假(sham)或急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)大鼠中，奥利司他的淋巴和血浆药代动力学。总奥利司他(开环和闭环形式)随时间的剂量归一化淋巴浓度(图A)，总奥利司他(开环和闭环形式)随时间的累积淋巴转运(图B)，甘油三酯(TG)的肠-淋巴浓度(图C)，肠-淋巴中的累积TG质量转运(图D)，总奥利司他(开环和闭环形式)的剂量归一化血浆浓度(图E)，以及奥利司他随时间的淋巴与血浆浓度之比(图F)。对于用奥利司他LC-FA给药的淋巴转移假大鼠(三角形，n＝5)；用奥利司他LC-FA给药的淋巴转移AP大鼠(正方形，n＝3)；用空白LC-FA给药的淋巴转移AP大鼠(正方形，n＝5)；用奥利司他LC-FA给药的淋巴完整AP大鼠(正方形，n＝5)；以及用奥利司他LFF给药的淋巴完整AP大鼠(菱形，n＝3)，数据以平均值±SEM表示。来自未配对t检验(用于2组之间的比较)或来自单因素ANOVA(用于3组或更多组之间的比较)的显著性：*p≤0.05，**p≤0.001。
图5示出了在用对照培养基(5％v/v FBS)或5％v/v肠-淋巴孵育之后的L2肺细胞和HMEC-1内皮细胞生存力，所述肠-淋巴来自施用了长链脂肪酸(LC-FA)制剂中的奥利司他(O)或空白LC-FA制剂的假(SH)或急性胰腺炎(AP)大鼠。图A至B：分别为L2细胞和HMEC-1细胞的细胞生存力。除了用对照培养基孵育的HMEC-1(其中数据仅以n＝2的平均值表示)，数据以平均值±SEM表示。除了用对照培养基孵育(n＝4)的L2细胞、用来自AP 0.5小时p.i.(n＝4)和2.5小时p.i.(n＝3)的淋巴孵育的L2和HMEC-1细胞、用来自AP+O 2.5小时p.i.的淋巴孵育的L2和HMEC-1细胞(n＝4)、以及在5％FBS中孵育(n＝2)的HMEC-1之外，每组的重复为5。来自单因素ANOVA的显著性：***p≤0.001，****p＜0.0001。
图6示出了在施用空白长链脂肪酸(LC-FA)或奥利司他LC-FA(LC-FA+O)或奥利司他无脂质制剂(LFF+O)的淋巴转移或淋巴完整的假或急性胰腺炎(AP)大鼠中的血清心脏功能生物标志物浓度。在每个实验结束时(即在开始制剂施用之后4小时和在诱导AP之后3.5小时)收集的血清中，测量了心肌肌钙蛋白I(图A)、心肌肌钙蛋白T(图B)、肌肉肌酸激酶(creatine kinase muscle，CKM)(图C)、脂肪酸结合蛋白3(fatty acid binding protein3，FABP-3)(图D)、卵泡抑制素样蛋白1(follistatin-like protein 1，FSTL1)(图E)、肌球蛋白轻链3(myosin light chain 3，MYL3)(图F)和金属蛋白酶-1组织抑制剂(tissueinhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)(图G)的水平。数据以平均值±SEM表示。除了AP、淋巴转移、LC-FA+O(n＝3)；AP、淋巴转移、LC-FA(n＝6)；AP、淋巴完整、LFF+O(n＝3)之外，每组的重复为5。来自单因素ANOVA的显著性：*p≤0.05，**p≤0.01。
图7示出了奥利司他在一系列脂质赋形剂中的溶解度(mg/g)。
图8示出了在各IIIA型制剂的体外分散和消化实验期间，(A)油相和(B)水相中奥利司他的质量。数据为平均值±SD(n＝3)。
图9示出了在十二指肠内输注制剂0至2小时之后，在肠系膜淋巴管插管的麻醉大鼠中总奥利司他(开环和闭环形式)的肠系膜淋巴浓度。所有制剂均包含8mg/kg奥利司他。数据显示了与其中奥利司他分散在具有25mg吐温80和5.6ml PBS的40mg油酸、辛酸(MC-FA)或橄榄油(LC-TG)中的制剂相比，在施用IIIA-1型制剂(40mg油酸、50mg P35-Eco、10mgPPG400)和IIIA-5型制剂(60mg油酸、20mg吐温80、20mg PEG400)之后的淋巴浓度。数据以n＝3至5的平均值±SEM表示。红色虚线显示奥利司他在淋巴中抑制胰脂肪酶的IC50。
具体实施方式
本发明涉及包含脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸的药物制剂及其在治疗急性胰腺炎和相关综合征中的用途。本发明至少部分基于以下发现：胰脂肪酶和脂肪酶产生的脂毒素进入到肠-淋巴中，并随后进入到全身血液循环中，在急性胰腺炎的情况下促进全身炎症反应综合征(SIRS)、多器官功能障碍综合征(MODS)和多器官衰竭。本发明提供了改善的制剂，其能够促进脂肪酶抑制剂从肠中的吸收以及摄入到肠淋巴和血液循环中。
所销售的用于肠内或肠胃外施用的基于脂质的药物制剂通常由甘油酯、表面活性剂和/或助溶剂的混合物组成。实际上，先前在急性胰腺炎实验模型中测试的脂肪酶抑制剂的脂质制剂由甘油酯和表面活性剂包括天然胆汁盐的混合物组成。脂质，例如甘油三酯，使用独特的代谢途径进入淋巴(并最终进入体循环)。在摄入之后，饮食甘油三酯被腔(luminal)脂肪酶水解，以使每个甘油三酯分子释放一个甘油单酯和两个脂肪酸。甘油单酯和两个脂肪酸随后被吸收到肠上皮细胞中，在此其被重新酯化成甘油三酯。
再合成的甘油三酯被组装成肠脂蛋白(主要是乳糜微粒)，并且如此形成的乳糜微粒从肠上皮细胞中胞吐(exocytose)而出，并随后优先进入肠淋巴。在淋巴内，乳糜微粒形式的脂质通过一系列毛细血管、结和管排出，最终在左锁骨下静脉与颈内静脉的连接处进入体循环。在进入血液循环之后，乳糜微粒中的甘油三酯优先并有效地被高表达脂蛋白脂肪酶的组织吸收，所述组织例如脂肪组织、肝和潜在的某些类型的肿瘤组织。
然而，就其本质而言，脂肪酶抑制剂阻止甘油酯的消化和随后脂质向肠淋巴的转运。因此，需要将脂肪酶抑制剂转运至肠淋巴的新的方法。
出乎意料地发现，与长链脂肪酸配制在一起脂肪酶抑制剂能够在没有脂肪酶介导的制剂消化下实现吸收。包含脂肪酶抑制剂和长链脂肪酸的药物制剂比用甘油酯和中链脂肪酸配制的药物制剂有效得多。认为这是因为长链脂肪酸促进脂蛋白的形成和其向肠-淋巴中的转运，并因此可提高药物向肠-淋巴中的转运(Trevaskis,N.L.,et al.Pharm Res,2013,30,3254-3270)。
因此，在一个实施方案中，本发明提供了药物制剂，其包含脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸。
本文中使用的术语“长链脂肪酸”将被理解为意指具有饱和或不饱和的长脂族链的羧酸。通常，这些长链脂肪酸包含直链或非支链的饱和或不饱和C14至C24碳链，但是也考虑了支链脂肪酸。术语“长链脂肪酸”不包括例如与甘油二酯或甘油三酯形式的甘油缀合的脂肪酸。
合适的饱和长链脂肪酸包括但不限于十四烷酸(肉豆蔻酸)、十五烷酸、十六烷酸(棕榈酸)、十七烷酸(十七烷酸(margaric acid))、十八烷酸(硬脂酸)、十九烷酸、二十烷酸(花生酸)、二十一烷酸、二十二烷酸(山嵛酸)、二十三烷酸、二十四烷酸、及其组合。
合适的不饱和长链脂肪酸包括但不限于棕榈油酸、油酸、亚油酸、α-亚油酸、亚麻酸、十八碳四烯酸、异油酸、反油酸、反亚油酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、二十烯酸、顺-11-二十碳烯酸(gondoic acid)、芥酸、神经酸、米德酸、二十二碳四烯酸、二十二碳六烯酸、及其组合。在一个实施方案中，不饱和长链脂肪酸是油酸。
长链脂肪酸必须以足以增强或促进脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在于制剂中。应当理解，该量可变化，例如，这取决于被治疗的对象和施用途径。合适的量可在0.5重量％至95重量％的范围内，例如在1重量％至80重量％、2重量％至60重量％、3重量％至50重量％、和4重量％至40重量％的范围内。在一个实施方案中，长链脂肪酸以至少5重量％的量存在于制剂中。在另一个实施方案中，长链脂肪酸以至少10重量％的量存在于制剂中，例如以至少15重量％、至少20重量％、至少30重量％、至少40重量％或至少50重量％的量存在于制剂中。
在急性胰腺炎的实验模型中，出乎意料地发现本发明的导向肠淋巴的肠内制剂中的脂肪酶抑制剂的施用降低了与急性胰腺炎相关的指数。脂肪酶抑制剂通常具有非常高的亲脂性(log P>5)，并因此被认为当与作为本发明主题的脂肪酸制剂一起施用时，与脂质消化、吸收和脂蛋白组装途径相关，引起药物在脂蛋白内以缔合的形式被摄入到淋巴中。适合于本发明的药物制剂和方法的脂肪酶抑制剂是本领域技术人员已知的，并且包括但不限于新利司他、利普司他汀、奥利司他、韧革菌素(vibralactone)、厄比内酯(ebelactone)、pancilin D、缬基内酯(valilactone)、抑酯酶素(esterastin)、及其组合。在一个实施方案中，脂肪酶抑制剂是奥利司他。
本发明限制了与脂肪酶相关的肠淋巴毒性，从而降低了与急性胰腺炎和其他急性危重疾病相关的疾病进展和并发症的可能性。因此，在一个实施方案中，本发明提供了在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的方法，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，所述方法包括向对象施用有效量的根据本发明的药物制剂。
在另一个实施方案中，本发明提供了根据本发明的药物制剂，其用于在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征。
如上所述，长链脂肪酸必须以足以增强或促进脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在。因此，在另一个实施方案中，本发明提供了在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的方法，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，所述方法包括向对象肠内施用有效量的脂肪酶抑制剂和长链脂肪酸，其中长链脂肪酸以足以增强或促进脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在。
在又一个实施方案中，本发明提供了脂肪酶抑制剂在制备用于在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的药物中的用途，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，其中所述脂肪酶抑制剂与长链脂肪酸配制在一起，并且其中所述长链脂肪酸以在施用时足以增强或促进脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在。
如前所述，为了在施用时增强或促进脂肪酶抑制剂向肠淋巴的转运，一种或更多种长链脂肪酸可以以至少5重量％，例如至少10重量％、至少15重量％、至少20重量％、至少30重量％、至少40重量％、或至少50重量％的量存在。
因此，在另一个实施方案中，本发明提供了脂肪酶抑制剂在制备用于在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的药物中的用途，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，其中所述脂肪酶抑制剂与长链脂肪酸配制在一起，并且其中所述长链脂肪酸以至少5重量％的量存在。
在一个实施方案中，根据本发明的制剂被制备为自乳化药物递送系统(self-emulsifying drug delivery system，SEDDS)，其中所述制剂被制备为预乳剂(pre-emulsion)，其在与水或缓冲剂接触后形成乳剂。在一个实施方案中，将SEDDS以合适的形式，例如以胶囊剂形式施用于对象，以在与肠液接触后形成乳剂。在另一个实施方案中，将SEDDS在通过例如鼻-空肠管或鼻-胃管施用于患者之前与缓冲剂预混合。作为SEDDS制备的制剂的优点包括储存和运输，因为它避免了制备、储存和运输大体积液体乳剂的需要。作为SEDDS制备的制剂还可避免与液体乳剂相关的长期物理和化学稳定性问题，包括相分离、细菌生长和药物水解的可能性。
本发明的药物制剂也可有效治疗其中脂肪酶发挥作用的其他病症。这些病症包括代谢综合征、癌症以及与全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征相关的其他急性和危重病症，包括由以下的所有病因引起的脓毒症和严重脓毒症，所述病因包括肺炎、脑膜炎、肝或脾脓肿、胆囊炎、胆管炎、感染性坏死性胰腺炎、阑尾炎、胃肠穿孔/腹膜炎、来自胃肠吻合的渗漏、暴发性溃疡性结肠炎、憩室炎、肾盂肾炎、骨髓炎、产后脓毒症、软组织感染/坏疽、中性粒细胞减少性脓毒症、免疫抑制患者中的非典型感染、SARS/COVID、HIV；重大创伤；重大烧伤；大出血或休克；心源性休克；以及过敏性休克。
因此，在另一个实施方案中，本发明提供了在有此需要的对象中治疗或预防由胰脂肪酶介导的疾病或病症的方法，其包括向对象施用有效量的根据本发明的药物制剂。
术语“对象”旨在包括生物体，例如哺乳动物，例如人、狗、牛、马、猪、绵羊、山羊、猫、小鼠、兔、大鼠和转基因非人动物。在一个实施方案中，对象是人，例如患有急性胰腺炎或相关综合征、处于患有急性胰腺炎或相关综合征的风险中、或者潜在地可能患有急性胰腺炎或相关综合征的人。在某些实施方案中，对象是猫或狗，例如患有急性胰腺炎或相关综合征、处于患有急性胰腺炎或相关综合征的风险中、或者潜在地可能患有急性胰腺炎或相关综合征的猫或狗。
如本文中使用的，如果对象将在生物学上、在医学上或在生活品质上从治疗中受益，则这样的对象“需要”这样的治疗。
如本文中使用的，除非本文中另外指明或与上下文明显矛盾，否则在本发明的上下文中，尤其是在权利要求书的上下文中使用的没有数量词修饰的名词以及类似术语，应被解释为一个/种或更多个/种。
本文中使用的术语“治疗”及其变化形式涵盖对动物，优选哺乳动物，包括人中的病症或疾病进行的任何治疗，并且包括对急性胰腺炎和相关综合征例如全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征进行的治疗。还设想了本发明的药物制剂可用于治疗与不期望的脂肪酶活性相关的任何疾病或障碍。
本文中使用的术语“预防”及其变化形式涵盖预防或防止动物，优选哺乳动物，更优选人中的病症或疾病，并且包括预防急性胰腺炎和相关综合征例如全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，以及与不期望的脂肪酶活性相关的任何疾病或障碍。
本发明的淋巴导向制剂由与一种或更多种长链脂肪酸配制在一起的脂肪酶抑制剂组成。认为与通过肠胃外途径施用(例如腹膜内施用)相比，通过肠内途径施用制剂将增强与肠-腔和肠-淋巴中胰脂肪酶的接近，如先前在急性胰腺炎实验模型中所测试的(Navina,S.,et al.Science Translational Medicine,2011,3,107ra110；Patel,K.,etal.The American Journal of Pathology,2015,185,808-819；Durgampudi,C.,et al.TheAmerican Journal of Pathology,2014,184,1773-1784)。
因此，本发明药物制剂的施用途径旨在包括肠内施用。液体制剂可通过鼻胃管或者通过胃或食管来肠内施用。
液体制剂也可以以液体填充胶囊剂、可饮用制剂、糖浆剂、酏剂等形式经口施用。在一个实施方案中，液体制剂作为SEDDS经口施用，例如以液体填充胶囊剂的形式经口施用。
在一个实施方案中，本发明提供了包含脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸的药物制剂，其中所述药物制剂是液体制剂，并且其中所述一种或更多种长链脂肪酸以至少5重量％，例如至少10重量％、至少15重量％、至少20重量％、至少30重量％、至少40重量％或至少50重量％的量存在于所述制剂中。
在一些实施方案中，本发明的药物制剂可包含有效量的脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸，而没有另外的表面活性剂、助表面活性剂或助乳化剂或助溶剂，换言之，药物制剂将基本上由有效量的脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸组成。在另一些实施方案中，本发明的药物制剂可包含有效量的脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸以及一种或更多种水不溶性表面活性剂，任选地以及一种或更多种助溶剂。在另一些实施方案中，本发明的药物制剂可包含有效量的脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸以及一种或更多种水溶性表面活性剂，任选地以及一种或更多种助溶剂。在一些实施方案中，药物制剂包含有效量的脂肪酶抑制剂以及长链脂肪酸、表面活性剂和助溶剂的混合物。在一些实施方案中，药物制剂基本上由有效量的脂肪酶抑制剂、一种或更多种长链脂肪酸、一种或更多种表面活性剂/助表面活性剂/助乳化剂、和/或溶剂/助溶剂组成。
用于脂质制剂的合适的表面活性剂包括：C8-C22脂肪酸的丙二醇单酯和二酯，例如但不限于，丙二醇单辛酸酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇单月桂酸酯，以商品名例如Span 80、90、/>PG、/>FCC销售；糖脂肪酸酯，例如但不限于，蔗糖棕榈酸酯、蔗糖月桂酸酯、蔗糖硬脂酸酯；山梨糖醇脂肪酸酯，例如但不限于，山梨糖醇月桂酸酯、山梨糖醇棕榈酸酯、山梨糖醇油酸酯；聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯，例如但不限于，聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80(吐温80)、聚山梨醇酯85；聚氧乙烯单和二脂肪酸酯，包括但不限于，聚氧乙烯40硬脂酸酯和聚氧乙烯40油酸酯；C8-C22脂肪酸的聚氧乙烯单酯和二酯与C8-C22脂肪酸的甘油单酯、二酯和三酯的混合物，如以商品名例如/>44/14、/>50/13、/>销售；聚氧乙烯蓖麻油化合物，例如但不限于，聚氧乙烯35蓖麻油、聚氧乙烯40氢化蓖麻油和聚氧乙烯60氢化蓖麻油，如以商品名例如Super RefinedTM P35 Castor Oil、P35-ECO、/Kolliphor EL、/>RH40、RH60销售；聚氧乙烯烷基醚，包括但不限于，聚氧乙烯20鲸蜡硬脂醇醚和聚氧乙烯10油基醚；如可以以商品名销售的DL-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯；甘油单酯、二酯和三酯；C8-C22脂肪酸的甘油单酯、二酯和三酯；蔗糖单酯、二酯和三酯；琥珀酸二辛酯磺酸钠(sodium dioctylsulfosuccinate)；聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，例如但不限于，泊洛沙姆124、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407；C8-C22脂肪醇的聚氧乙烯醚，包括但不限于，聚氧乙烯月桂醇、聚氧乙烯鲸蜡醇、聚氧乙烯硬脂醇、聚氧乙烯油醇，如以商品名例如35、/>58、/>78、/>98销售；或者其任意两种或更多种的混合物。
助乳化剂或助表面活性剂可用于制剂中。合适的助乳化剂或助表面活性剂可以是磷酸甘油酯或磷脂，例如卵磷脂。
合适的溶剂/助溶剂包括水、盐水、磷酸缓冲盐水(phosphate-buffered saline，PBS)、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、聚丙二醇、二乙二醇单乙醚和甘油。
聚合物也可用于药物制剂中，以抑制药物沉淀或改变药物释放速率。一系列聚合物已显示出赋予了这些特性，并且是本领域技术人员公知的。合适的聚合物包括羟丙基甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素乙酰琥珀酸酯、其他纤维素来源的聚合物例如甲基纤维素；聚(甲基)丙烯酸酯，例如Eudragit系列聚合物，包括Eudragit E100、聚乙烯吡咯烷酮或其他如例如在Warren et al.Mol.Pharmaceutics,2013,10,2823-2848中所述的。
可特别地选择药物制剂以提供脂肪酶抑制剂在胃肠(gastrointestinal，GI)道中的持续释放，以控制吸收速率。许多不同的方法可用于实现这些目的，包括使用在GI道中缓慢分散/侵蚀(erode)的高熔点脂质、或形成缓慢侵蚀的基质的聚合物。这些制剂可采取大的整体剂型的形式，或者可作为微米或纳米颗粒基质存在，如例如在Wilson and CrowleyControlled Release in Oral Drug Delivery,Springer,NY,ISBN 978-1-4614-1004-1(2011)或Wise,Handbook of Pharmaceutical Controlled Release Technology,MarcelDekker,NY,ISBN 0-82467-0369-3(2000)中所述的。
药物制剂还可包含通常本领域技术人员已知的包含在基于脂质的制剂中的物质，包括抗氧化剂例如丁基化羟基茴香醚(butylated hydroxyanisole，BHA)或丁基化羟基甲苯(butylated hydroxytoluene，BHT)、以及固化剂例如微孔二氧化硅例如镁铝偏硅酸盐(Neusilin)。
除了脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸之外，药物制剂可包含惰性稀释剂或可被吸收的可食用载体。药物制剂可被包封在硬壳或软壳明胶胶囊剂中，或者可直接与饮食中的食物合并。对于经口治疗施用，药物制剂可包括赋形剂，并以可摄入的片剂、锭剂、丸剂、胶囊剂等形式施用。这样的治疗上可用的制剂中的脂肪酶抑制剂的量是使得将获得合适的剂量的量。
片剂、锭剂、丸剂、胶囊剂等也可包含如以下列出的组分：黏结剂，例如树胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂例如磷酸二钙；崩解剂，例如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸等；润滑剂，例如硬脂酸镁；并且可添加的甜味剂例如蔗糖、乳糖或糖精，或者矫味剂例如薄荷、冬青油或樱桃矫味剂。当剂量单位形式是胶囊剂时，除了上述类型的物质之外，其还可包含液体载体。在一些实施方案中，一种或更多种长链脂肪酸可充当液体载体。在另一些实施方案中，可添加另外的液体载体，例如本文中所述的助溶剂。多种其他物质可作为包衣存在，或者以其他方式改变剂量单位的物理形式。例如，片剂、丸剂或胶囊剂可用虫胶、糖或二者包被。糖浆剂或酏剂可包含活性化合物，作为甜味剂的蔗糖，作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯，染料和矫味剂例如樱桃或橙子矫味剂。当然，用于制备任何剂量单位形式的任何物质都应是药学纯的，并且在使用量下基本上无毒。另外，可将本发明的药物制剂并入到持续释放制剂中，包括允许将药剂特异性递送至肠特定区域的那些制剂。
术语“制剂”旨在包括脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸以及作为载体的包封物质的制剂，以得到其中脂肪酶抑制剂(有或没有其他载体)被载体包围的胶囊。
如本领域技术人员将容易理解的，可药用载体的性质将取决于病症的性质和待治疗的哺乳动物。认为特定载体或递送系统的选择可由本领域技术人员容易地确定。在制备任何含有活性化合物的制剂时，应注意确保脂肪酶抑制剂的活性在该过程中不被破坏，并且活性化合物能够到达其作用位点而不被破坏。在一些情况下，可能必须通过本领域已知的手段例如微囊化来保护脂肪酶抑制剂。
可药用载剂和/或稀释剂包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等张剂和吸收延迟剂等。这样的介质和药剂用于药物活性物质的用途在本领域中是公知的。除非任何常规介质或药剂与活性成分不相容，否则考虑其在治疗组合物中的用途。补充活性成分也可并入到制剂中。
通过与适当的基质(例如乳化基质或水溶性基质)混合，可以以栓剂的形式来制备肠内制剂。
本发明的药物制剂也可与一种或更多种另外的治疗剂组合施用。所述组合可允许将如上文中所述的活性成分与其他活性成分分开施用、顺序施用或同时施用。所述组合可在包含一种或更多种长链脂肪酸的药物制剂中提供。
本文中使用的术语“组合”是指组合物或成套药盒，其中如上限定的组合伴侣可依赖性地或独立地施用，或通过使用具有不同量的组合伴侣的不同固定组合而施用，即同时或在不同时间点施用。然后，组合伴侣可例如同时施用或按时间顺序交错施用，即在不同时间点并以相同或不同的时间间隔施用成套药盒的任何部分。可改变在组合中施用的组合伴侣的总量的比例，例如以应对待治疗患者亚群的需求或单个患者的需求，其中不同的需求可能是由于患者的年龄、性别、体重等引起的。
以剂量单位形式配制脂肪酶抑制剂和药物制剂对于方便施用和剂量均匀是尤其有利的。如本文中使用的剂量单位形式是指适合作为用于待治疗哺乳动物对象的单位剂量的物理分散单元；每个单元包含经计算与所需可药用载剂缔合产生期望治疗作用的预定量的活性物质。本发明的新的剂量单位形式的规格由以下指示并且直接取决于以下：(a)活性物质的独特特征和待实现的特定治疗作用，以及(b)对用于在患有其中身体健康受损的疾病病症的活的对象中治疗疾病的活性物质进行复配的领域中的固有局限性，如本文中详细公开的。
如上所述，可将主要活性成分以治疗有效量与合适的可药用载剂以剂量单位形式进行复配，以用于方便且有效地施用。例如，单位剂型可包含0.25μg至约2000mg的量的脂肪酶抑制剂。以比例表示，活性化合物可以以约0.25μg至约2000mg/mL载体存在。在组合物包含补充活性成分的情况下，剂量是通过参考所述成分的常规剂量和施用方式来确定的。
本文中使用的术语“有效量”是指当根据期望的给药方案来施用时，提供期望的治疗活性的化合物的量。给药可发生一次，或者间隔数分钟或数小时给药，或者在这些时间段中的任一者内连续给药。合适的剂量可在每剂约0.1ng/kg体重至1g/kg体重的范围内。通常剂量在每剂1μg/kg体重至1g/kg体重的范围内，例如每剂1mg/kg体重至1g/kg体重的范围内。在一个实施方案中，剂量可以在每剂1mg/kg体重至500mg/kg体重的范围内。在另一个实施方案中，剂量可以在每剂1mg/kg体重至250mg/kg体重的范围内。在又一个实施方案中，剂量可以在每剂1mg/kg体重至100mg/kg体重的范围内，例如高至每剂50mg/kg体重。
在整个本说明书和随附的权利要求书中，除非上下文另有要求，否则词语“包含(comprise)”及变体例如“包括(comprises)”或“含有(comprising)”将被理解为暗示包括陈述的整数或整数的组或步骤，但不排除任何其他的整数或整数的组。
本说明书中对任何先前出版物(或来源于其的信息)或任何已知事项的引用均不是且不应被视为承认或认可或任何形式示意先前出版物(或来源于其的信息)或已知事项构成本说明书所涉及的努力的领域中的公知常识的一部分。
现在将参照以下非限制性实施例来描述本发明。以下实施例是通式(I)的代表，并提供了用于制备本发明的示例性化合物的详细方法。
实施例1.在长链脂肪酸制剂中进行经肠递送使得奥利司他能够进行肠系膜淋巴转运和全身暴露
1.1方法
1.1.1实验设计
制备了如表1中所详述的一系列基于脂质的制剂以评价脂质类型和剂量对奥利司他的肠吸收、淋巴转运和全身利用度的作用。在三重插管的麻醉大鼠模型中确定淋巴转运，所述大鼠模型具有分别插入到肠系膜淋巴管、颈动脉和十二指肠以用于淋巴和血液收集和制剂输注的插管。在淋巴完整的麻醉大鼠中确定全身利用度，所述大鼠具有分别插入到颈动脉和十二指肠以用于血液收集和制剂输注的插管。为了能够计算绝对生物利用度，另一组通过颈静脉插管来静脉内施用奥利司他，并随时间从颈动脉插管收集血液样品。
表1.实验组，包括制剂、进行的研究和施用细节。除非另有说明，否则所有制剂均在5.6ml PBS中制备，并以2.8ml/小时的速率十二指肠内输注2小时。除了最后一行的静脉内施用组之外，对所有实验组进行了淋巴摄取研究。
a进行了生物利用度研究
为了确定脂质类型对奥利司他吸收的作用，测试了三种不同类型的脂质：油酸形式的长链脂肪酸(LC-FA)、中链脂肪酸(辛酸，MC-FA)和长链甘油三酯(橄榄油，LC-TG)。另外，评价了作为对照制剂的无脂质制剂。在确定与油酸(LC-FA)共施用促进了奥利司他的最高吸收和淋巴转运之后，进一步的研究集中在基于油酸的制剂上。测试了三种脂质剂量：0mg油酸、40mg油酸和80mg油酸。药物剂量一致保持在8mg/kg。
1.1.2奥利司他基于脂质的制剂和对照制剂的制备
1.1.2.1用于经肠施用的奥利司他基于脂质的制剂
如表2中所列出的，制备了奥利司他的多种基于脂质的制剂。将奥利司他添加到玻璃小瓶中，与脂质和吐温80按照表1中每种制剂所需的浓度混合，并在37℃下孵育2小时，随后在室温下孵育10至12小时。随后，将所需体积的磷酸缓冲盐水(PBS，pH 7.4)添加至脂质相(即奥利司他、脂质和吐温80混合物)。用Misonix XL 2020超声处理器(Misonix,Farmingdale,NY,USA)或Qsonica Q700超声处理器(Qsonica,CT,USA)乳化制剂。制剂中的药物浓度如下通过LC-MS/MS分析进行确定。
1.1.2.2用于经肠施用的奥利司他无脂质制剂
对于无脂质对照制剂，将奥利司他以如表2中限定的所需浓度溶解在吐温80中。随后，添加所需体积的PBS(pH 7.4)。然后，将制剂用Soniclean160HT超声清洗器在室温下乳化30分钟。制剂中的药物浓度如下通过LC-MS/MS分析进行确定。
1.1.2.3用于静脉内输注的奥利司他制剂
为了制备静脉内奥利司他制剂，将0.1mg奥利司他溶解在玻璃小瓶中的120mg大豆油中。随后，将1ml在水中的2％甘油和1％EPC添加至脂质相，并将制剂用与针对基于脂质的制剂所述相同的超声处理器、微探针尖端和超声处理设置在冰水浴中以5分钟开启和5秒钟关闭的间隔来乳化1小时。
1.1.3动物研究
所有动物实验均由当地动物伦理委员会(animal ethics committee)批准，并根据澳大利亚和新西兰研究和教学动物保护委员会(Australian and New Zealand Councilfor the Care of Animals in Research and Teaching)的指南进行。将260至310g的雄性Wistar大鼠维持在标准饮食下并在实验开始之前在自由取水的情况下禁食过夜(14至16小时)。用通过整流罩(nose cone)递送的1.5至5％v/v异氟烷诱导并维持麻醉。为了维持体温，在整个实验中，将大鼠保持在37℃的加热垫上。
1.1.3.1淋巴转运研究
在施用所有制剂之后，评估了奥利司他的淋巴转运和血浆浓度。在这些实验中，如前所述对肠系膜淋巴管、颈动脉和十二指肠进行插管(Trevaskis,N.L.,et al.,JVis.Exp.2015,6(97),p.e52389；Edwards,G.A.,etal.,Advanced Drug DeliveryReviews,2001,50(1),45-60)。在手术之后，以2.8ml/小时通过十二指肠内输注生理盐水使大鼠水合至少30分钟。然后将对照或基于脂质的奥利司他制剂以2.8ml/小时持续2小时输注到十二指肠中。在完成制剂给药之后，对于实验的剩余部分，将十二指肠内输注切换回2.8ml/小时的生理盐水。在开始制剂给药之后，连续8小时将肠系膜淋巴收集到预称重的含10至20μl 1000IU/ml肝素的聚乙烯管中。每小时更换淋巴收集管，并通过重量分析确定淋巴流(lymph flow)。将100μl淋巴的等分试样储存在-20℃下，以用于之后通过HPLC-MS/MS进行的药物或TG分析。还在以下10个时间点从颈动脉收集了250μl血液并将其与3μl1000IU/ml肝素一起置于聚乙烯管中：0分钟、5分钟、15分钟、30分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、6小时和8小时。将血液样品在2000g下离心5分钟以分离血浆。
1.1.3.2血浆药代动力学和生物利用度研究
为了能够确定所选制剂(即，包含8mg/kg奥利司他的40mg油酸和橄榄油制剂)的经肠给药之后的全身利用度，对单独的淋巴完整动物(即，非淋巴插管动物)组在十二指肠和颈动脉分别进行插管以使得能够实现制剂施用和血液收集。在手术之后，通过十二指肠内输注2.8ml/小时的生理盐水至少30分钟使大鼠水合，随后以2.8ml/小时通过十二指肠内输注制剂2小时。大鼠的水合、血液样品的收集、血浆的分离和安乐死均与淋巴转运研究中所述的相同。
还完成了静脉内药代动力学研究，以使得能够计算经肠施用之后的绝对生物利用度。在该研究中，如上所述对大鼠的颈静脉和颈动脉进行插管。在手术之后，通过颈静脉以0.5ml/小时输注生理盐水至少30分钟，使大鼠再水合。在5分钟内，将奥利司他(0.4mg/kg)脂质乳剂(在PBS中的2％甘油、1％卵磷脂酰胆碱)作为短的1ml IV输注施用到颈静脉插管中。在完成制剂给药之后，对于实验的剩余部分，将颈静脉输注切换回0.5ml/小时的生理盐水。血液样品的收集、血浆的分离和安乐死均与淋巴转运研究中所述的相同。
1.1.4HPLC-MS/MS样品制备和分析
通过HPLC-MS/MS对开环形式(在抑制PL上活性较低)和闭环形式(在抑制PL上活性最高)的奥利司他的淋巴和血浆浓度进行定量。使用Shimadzu LCMS-8050系统(ShimadzuScientific Instruments,Kyoto,Japan)分析淋巴、血浆和制剂中奥利司他的浓度，所述系统由CBM-20A系统控制器、DGU-20A5R脱气单元、两个Nexera X2 LC-30AD液相色谱泵、Nexera X2 SIL-30AC自动进样器、CTO-20A柱温箱(保持在40℃下)和具有大气压化学电离(atmospheric-pressure chemical ionization，APCI)接口的LCMS-8050三重四极杆质谱仪组成。
1.1.5淋巴转运、药代动力学和生物利用度研究的数据分析
对于淋巴转运研究，通过将收集的淋巴的体积乘以由HPLC-MS/MS分析确定的淋巴中奥利司他的测量浓度来计算淋巴中奥利司他的质量转运。淋巴:血浆浓度之比通过将每小时收集期的平均奥利司他淋巴浓度除以每小时收集期结束时测得的奥利司他血浆浓度来计算。
当确定淋巴:血浆浓度之比时，将血浆浓度低于0.05μg/ml的时间点的血浆浓度设置为定量下限(即0.05μg/ml)。
对于血浆药代动力学研究，奥利司他的经肠递送之后的绝对生物利用度根据以下计算：
其中AUC0至8小时经肠施用和IV施用分别为在经肠施用和IV施用之后从时间0至8小时的血浆浓度时间曲线下面积。使用线性梯形法计算血浆AUC。
对于IV施用组，使用软件(/>专业版5.2.1，PharsightCorporation，CA，USA)计算非房室和房室药代动力学参数(相对于0.4mg/kg奥利司他进行归一化)。
1.1.6统计学
使用GraphPad Prism for Windows V7.01.180(GraphPad Software Inc.Ca,USA)进行统计学分析。使用单因素ANOVA，随后使用Tukey多重比较检验(用于三组或更多组之间的比较)或未配对t检验(用于两组之间的比较)来确定显著性差异，其中p＝0.05的水平被设置为显著(除非另有说明)。
1.2结果
1.2.1脂质类型对奥利司他和甘油三酯的淋巴转运的作用
当与无脂质(即对照)制剂、基于LC-TG(橄榄油)和MC-FA(辛酸)的制剂(其中总奥利司他在8小时内的淋巴转运相对低，为<剂量的0.9％)相比时，当奥利司他在基于LC-FA(油酸)的制剂中施用时，奥利司他的累积淋巴转运显著更高(在8小时内，总奥利司他为剂量的2.6％，以及闭环奥利司他为剂量的0.6％)(图1，图A和图B以及表2)。因此，相对于无脂质制剂，基于LC-TG和MC-FA的制剂不促进奥利司他的淋巴转运。
对于所有制剂，奥利司他在淋巴中的峰浓度(C最大)通常出现在给药之后2至3小时，在该时间之后，奥利司他的淋巴浓度降低。当与LC-TG、MC-FA和无脂质制剂相比时，当奥利司他在LC-FA制剂中施用时，淋巴中的奥利司他C最大显著更高，如根据更高的累积淋巴转运所预期的(图1，图A至D)。
表2.在施用不同制剂的淋巴插管大鼠中，奥利司他的肠系膜淋巴转运和血浆C最大的总结。
/>
每组n＝3至6只大鼠，数据以平均值±SEM表示。通过单因素ANOVA确定组之间的统计学显著性。
a对于相同参数，除了施用80mg LC-FA中8mg/kg奥利司他(2小时输注)和160mgLC-FA中30mg/kg奥利司他(8小时输注)的组之外，当与所有其他实验组相比时显著更高(p≤0.001)
b对于相同参数，除了施用160mg LC-FA中32mg/kg奥利司他(8小时输注)的组之外，当与所有其他实验组相比时显著更高(p≤0.001)
在淋巴插管动物的血浆中，仅开环形式的奥利司他可测量。一些样品中存在闭环形式，但低于定量限。与淋巴谱相对比，当与基于脂质的制剂相比时，在无脂质制剂中施用之后奥利司他的血浆浓度显著更高(图1，图E)。在所有制剂中，血浆C最大通常出现在给药之后2至3小时，随后在给药之后超过6小时时降低。在所有时间点和所有组中，奥利司他的血浆浓度比淋巴中的浓度更低(2至56倍)。当与其他制剂相比时，在施用LC-FA制剂之后，总奥利司他在给药之后3小时时的淋巴:血浆浓度之比显著更高(图1，图F)。
1.2.2脂质剂量对奥利司他的淋巴转运的作用
因此，与其他LBF和无脂质制剂相比，基于LC-FA的制剂支持奥利司他的淋巴转运提高(图1)。接下来，测试了将LC-FA(即油酸)剂量从40mg提高至80mg同时保持药物剂量恒定的影响。将LC-FA剂量加倍至80mg显著增强了奥利司他的淋巴转运。对于40mg和80mg LC-FA制剂，总奥利司他(开环和闭环形式)在淋巴中的平均转运分别为剂量的2.6％和3.6％，活性更高的闭环形式奥利司他的平均转运分别为剂量的0.6％和1.6％。当与无脂质对照相比时，两种LC-FA制剂均增强了奥利司他淋巴转运(图2，图A和B，以及表3)。当与40mg LC-FA相比时，在与80mg共施用之后，总奥利司他和闭环形式奥利司他的淋巴C最大(即2至3小时时间点)也显著更高(图2，图C和D)。当与血浆相比时，两种LC-FA制剂均导致淋巴中奥利司他的浓度更高(图2，图E)。与在淋巴浓度中看到的差异相对比，在与40mg或80mg油酸共施用之后，总奥利司他(几乎完全以开环形式存在于血浆中)的血浆浓度相似(图2，图E)。因此，当与40mg LC-FA相比时，在以80mg施用之后，在给药之后持续至多4小时，总奥利司他的淋巴与血浆浓度之比更高(图2，图F)。
1.2.3奥利司他的生物利用度和全身暴露
为了进一步量化在LBF中施用之后淋巴转运对奥利司他的全身利用度的贡献，在施用基于LC-FA和LC-TG的制剂的淋巴完整和淋巴插管大鼠中比较了总奥利司他的血浆浓度相对于时间的谱之下的面积(AUC)。在施用这些制剂的组中总奥利司他的绝对生物利用度还通过与施用奥利司他0.4mg/kg IV的大鼠比较总奥利司他的血浆AUC来确定。在经肠和IV施用奥利司他的两组中，血浆奥利司他几乎完全以开环形式存在，表明奥利司他在体循环中迅速水解。在一些样品中检测到闭环形式，但低于测定的定量限(0.05μg/ml)。当与LC-TG制剂(生物利用度为0.5％)相比时，对于LC-FA，归因于奥利司他开环形式的随时间的血浆浓度和生物利用度显著更高(生物利用度为3.9％)(图3和表3)。在将奥利司他施用到肠中的所有大鼠中，奥利司他的血浆C最大出现在给药之后3至4小时时，随后是超过6小时时的降低。在施用基于LC-TG的制剂的大鼠中，在淋巴完整组与淋巴插管组之间的总奥利司他血浆浓度没有显著差异。相比之下，在给药LC-FA制剂之后，在开始给药之后2小时和3小时时，淋巴完整大鼠相对于淋巴插管大鼠的奥利司他血浆浓度显著更高(图3)。通过确定淋巴完整大鼠相对于淋巴插管/转移大鼠的血浆AUC的成比例降低，估计对于LC-FA和LC-TG制剂，分别约37％和0％的奥利司他全身暴露由淋巴转运的药物贡献。因此，当与LC-TG制剂相比时，对于基于LC-FA的制剂，显著更大百分比的全身暴露显示由淋巴转运贡献。这与奥利司他淋巴转运数据一致(表3)。
表3.在施用40mg LC-FA或LC-TG中8mg/kg奥利司他的淋巴插管(lymphcannulated，LC)vs淋巴完整(lymph intact，LI)大鼠中，奥利司他的血浆和淋巴药代动力学数据的总结。数据以n＝3至5只大鼠的平均值±SEM表示。注意，在所有动物中，血浆中的奥利司他几乎完全是开环形式。
实施例2.胰脂肪酶抑制剂奥利司他的经肠递送减轻了淋巴细胞毒性和急性胰腺炎的疾病严重程度
2.1方法
2.1.1实验设计
为了确定通过在肠-淋巴和/或胃肠腔中抑制胰脂肪酶(pancreatic lipase，PL)来减轻急性胰腺炎疾病严重程度的可能性，按照表4进行了总共六组(三组淋巴转移和三组淋巴完整)。
在先前的研究中，确定了在健康大鼠中，当与在无脂质制剂(lipid freeformulation，LFF)中施用相比，在长链脂肪酸(LC-FA)制剂中施用奥利司他促进了淋巴药物转运。然而，在急性胰腺炎中，淋巴转运和全身暴露的程度可不同，因为肠渗透性增强是由于肠缺血导致(P.O.Juvonen,E.M.A.J.A.T.,Scandinavian Journal ofGastroenterology,2000,35(12),1314-1318；Wu,X.-N.,World Journal ofGastroenterology,2000,6(1),32-36)。因此，将空白、LC-FA制剂、奥利司他LC-FA制剂和LFF给药于淋巴向外转移或淋巴完整的AP大鼠和假大鼠。在淋巴转移大鼠中，收集淋巴和匹配的血液样品，以使得能够测量淋巴和血浆中的奥利司他浓度、血清中的SIRS/MODS标志物浓度、和肠-淋巴细胞毒性。在淋巴完整大鼠中，收集血液样品以分析奥利司他血浆浓度和SIRS的标志物。还确定了血压和心率。
表4.实验组，包括淋巴干预、动物模型和所施用制剂
2.1.2基于脂质的制剂和对照制剂的制备
奥利司他LC-FA制剂和LFF的制备如上所述。
2.1.3动物
所有动物实验均由奥克兰大学动物伦理委员会(University of AucklandAnimal Ethics Committee)批准(批准号R1985)。将420至470g的雄性Sprague-Dawley大鼠维持在标准18％蛋白质啮齿动物饮食下并在实验开始之前在自由取水的情况下禁食过夜(14至16小时)。在诱导室中用5％v/v异氟烷和氧气在2L/分钟下诱导全身麻醉，并使用整流罩用1.5至3％v/v异氟烷维持。给予盐酸丁丙诺啡的皮下注射(30μg/kg体重；Temgesic，SVS)以用于减轻疼痛。为了确保维持体温，在整个实验中，将大鼠保持在37℃的加热垫上，并通过直肠温度计探针(ADinstruments)持续监测温度。
2.1.3.1急性胰腺炎模型
急性胰腺炎(AP)模型是已建立模型的变体，以允许在不同时间点收集血液并连续收集淋巴(Mittal,A.,et al.,JOP,2009,10(2),130-42；Shanbhag,S.T.,et al.,Surgery,2018,163(5),1097-1105)。在该模型中，进行了气管造口术(用于呼吸)、将压力传感器插入到股动脉中(2F 大鼠压力传感器Cat#SPR-320；Millar Instruments Inc.，USA，用于监测体征)、以及颈动脉(用于血液取样)、股静脉(用于复苏)、十二指肠(用于制剂给药)、肠系膜淋巴管(用于淋巴收集)和胆胰管(用于AP诱导)的插管。
在手术之后，随后将奥利司他/空白LC-FA制剂和奥利司他LFF以2.8ml/小时输注到十二指肠中，直至实验结束(即输注开始之后4小时)。对于患有AP的组，在开始输注奥利司他制剂之后0.5小时，将牛磺胆酸钠(在盐水中5％w/v)输注到胆胰管中以诱导AP。
2.1.3.2淋巴和血液取样
在开始制剂给药之后，在实验期间(即开始制剂给药之后至多4小时)连续收集淋巴到保持在冰浴中的预称重的1.5ml管中。每小时更换淋巴收集管，并通过重量分析确定淋巴流。将100μl淋巴的等分试样置于1.5ml有1μl 1000IU/ml肝素的Eppendorf管中，以用于如上所述通过HPLC-MS/MS分析奥利司他。将100μl淋巴的等分试样置于1.5ml无肝素的Eppendorf管中，以用于体外淋巴细胞毒性评估。所有样品均保持在-80℃下以用于长期储存。还在以下5个时间点将250μl来自颈动脉的血液与3μl 1000IU/ml肝素一起收集到Eppendorf管中，以确定血浆奥利司他浓度：制剂给药之后0小时、1 2小时、3小时和4小时。将血液样品在2000×g下离心5分钟以分离血浆。如针对淋巴样品所述储存血浆。通过颈动脉插管进行终末血液收集。将血液立即转移至BD塑料真空采血管以收集血清用于生化、细胞因子和心脏损伤标志物分析。将来自终末血液的血清和血浆样品保持在-80℃下，以用于长期储存。使用Milliplex大鼠细胞因子/趋化因子和大鼠心脏损伤磁珠板96孔板测定试剂盒按照制造商的方案(Merck，Germany)使用血清样品进行细胞因子和心脏损伤标志物分析。
2.1.4淋巴细胞毒性测定
使用大鼠肺上皮细胞(L2，ATCC CCL-149)和人真皮微血管内皮细胞(HMEC-1，ATCCCRL-3243)来确定肠-淋巴的毒性。对于L2细胞，完全生长培养基是有10％FBS和100U/ml青霉素-链霉素的Ham’s F-12K(Kaighn’s)培养基。用于HMEC-1细胞的完全生长培养基是有10％FBS、10mM L-谷氨酰胺、1ug/ml氢化可的松和10ng/ml人重组表皮生长因子的MCDB 131培养基。将两种细胞系在37℃下在95％空气/5％CO2中在75cm2组织培养瓶中在其各自的完全生长培养基中培养至汇合。针对HMEC-1以10,000个细胞/孔以及针对L2以5,000个细胞/孔将细胞接种在具有光学透明底的CellCarrier-96孔黑色板(PerkinElmer,MA,USA)中95μl/孔不含FBS的生长培养基中。然后一式两份地每孔添加5μl(等同于5％v/v)肠-淋巴样品。由于从一些大鼠中收集的淋巴样品体积有限，因此仅测试了AP诱导之后0.5小时和2.5小时收集的淋巴的淋巴细胞毒性。将5μl/孔(等同于5％v/v)的FBS、PBS或无添加物一式四份地添加在同一板的其他孔中作为对照。将细胞在37℃下在95％空气/5％CO2中用处理物孵育24小时。在孵育24小时之后，根据CyQUANTTM Direct Cell Proliferation Assay Kit(Invitrogen,CA,USA)按照制造商的方案制备2×检测试剂，并将100μl 2×检测试剂添加至每个孔中，并在37℃下在95％空气/5％CO2中孵育1小时。CyQUANTTM试剂盒通过细胞渗透性DNA结合染料与掩蔽染料组合来测量细胞生存力；掩蔽染料阻断具有受损细胞膜的细胞(即死细胞)的染色并因此仅健康细胞被染色。通过将100μl测试培养基和100μl 2×检测试剂混合来制备“无细胞对照”，以确定背景荧光。使用Operetta高内涵成像系统(PerkinElmer,MA,USA)在明视场和FITC通道下使用x20长WD物镜在每个孔的4个不同位置处捕获显微图像。使用iD3 SpectraMax板读取器(Molecular Devices,CA,USA)在底部读取(bottom-read)设置下在ex/em 480/535nm处确定总荧光。
2.1.5血清生化组成
使用以下方法在Cobas c311临床化学分析仪(Roche,Mannhelm,Germany)上测量血清中的分析物浓度：酶比色(葡萄糖、脂肪酶、TG、胆固醇)；酶联动力学紫外[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)]；动力学紫外(脲)；动力学比色(肌酐)；比色(总蛋白质、白蛋白、ALP)；UV测试(肌酸激酶)；使用离子选择性电极(钙、钠、钾、氯化物)的直接电位。方案所需的所有试剂均购自Roche(Roche,Mannheim,Germany)。2.1.6血清细胞因子测定
为了同时筛选数种细胞因子，并减少样品浪费，使用了Milliplex大鼠细胞因子/趋化因子磁珠板96孔板测定试剂盒。这些试剂盒能够实现通过技术获得每个样品中多种细胞因子的水平的能力，所述技术涉及与目的分析物偶联随后与报道染料一起孵育的内部的颜色编码微球。
2.1.7数据分析
2.1.7.1淋巴转运和药代动力学
如上所述进行计算。
2.1.7.2淋巴细胞毒性研究
从所有孔中减去背景荧光，并且通过将每个处理组的经校正荧光除以对照培养基(5％FBS)的平均经校正荧光并将比率乘以100来确定淋巴处理之后的％生存力。使用D’Agostino&Pearson正态性检验和Shapiro-Wilk正态性检验来检查数据正态性。
2.1.8统计学
使用GraphPad Prism for Windows V7.01.180(GraphPad Software Inc.Ca,USA)进行统计学分析。使用单因素ANOVA，随后使用Tukey多重比较检验(用于3组或更多组之间的比较)或未配对t检验(用于2组之间的比较)来确定显著性差异，其中p＝0.05的水平被设置为显著。
2.2结果
在患有AP的动物中，发现由于与疾病相关的淋巴流减少和脂质/药物吸收减少，奥利司他的肠-淋巴摄取相对于健康动物减弱(图4)。然而，LC-FA制剂在患有AP的大鼠中仍能够将奥利司他以治疗浓度递送到肠-淋巴中。
向AP大鼠施用奥利司他LC-FA降低了对L2肺和HMEC-1血管内皮细胞的淋巴细胞毒性(图5)。另外，当与用空白LC-FA制剂进行给药的大鼠相比时，用奥利司他LC-FA进行给药的AP大鼠具有降低的血清心脏损伤标志物水平(图6)、血清生化变化(表5)和改善的血压(blood pressure，BP)(表6)。施用奥利司他LFF的AP大鼠显示也显示出在心脏功能障碍方面的一些减少；然而，淋巴导向LC-FA制剂有改善效力的趋势。总之，将奥利司他LC-FA制剂肠内施用于AP大鼠增强了奥利司他被摄取到淋巴中、降低了淋巴细胞毒性和心脏损伤。这些发现支持了肠内施用在淋巴导向LC-FA制剂中的奥利司他可以为来自严重AP的脂肪酶诱导损伤提供有效和特异性治疗。
表5.不同实验组中疾病严重程度的血清生物标志物。
LC-FA，空白长链脂肪酸制剂；LC-FA+O，奥利司他长链脂肪酸制剂；LFF+O，奥利司他无脂质制剂；Na+，钠；K+，钾；Cl-，氯化物；Ca2+，钙；TP，总蛋白质；CK，肌酸激酶；ALT，丙氨酸转氨酶；AST，天冬氨酸转氨酶；ALP，碱性磷酸酶；TG，甘油三酯；Chol，胆固醇。数据以平均值±SEM表示。除了急性胰腺炎(AP)、淋巴转移、LC-FA+O(n＝3)；AP、淋巴转移、LC-FA(n＝6)；AP、淋巴完整、LFF+O(n＝3)之外，每组的重复为5。a通过单因素ANOVA与施用LC-FA+O的假、淋巴转移大鼠相比时，统计学差异为p≤0.05b通过单因素ANOVA与施用LFF+O的AP、淋巴完整大鼠相比时，统计学差异为p≤0.05c通过未配对t检验与施用空白LC-FA制剂的AP、淋巴完整大鼠相比时，统计学差异为p≤0.05d数据点以单一数据点表示，因为其他两个重复的测量结果中有技术误差
表6.实验组在疾病诱导时间段之后0至1.5小时或1.5至3.5小时期间的平均血压。
LC-FA，空白长链脂肪酸制剂；LC-FA+O，奥利司他长链脂肪酸制剂；LFF+O，奥利司他无脂质制剂；MABP，平均动脉血压。数据以平均值±SEM表示。除了AP、淋巴转移、LC-FA+O(n＝3)；AP、淋巴转移、LC-FA(n＝6)；AP、淋巴完整、LFF+O(n＝3)；施用空白LC-FA的AP、淋巴完整大鼠(n＝6)；和施用奥利司他无脂质制剂(LFF+O)的AP、淋巴完整大鼠(n＝3)之外，每组的重复为5。
a通过单因素ANOVA与施用LC-FA+O的假、淋巴转移大鼠相比时，统计学差异为p≤0.05
b通过单因素ANOVA与施用LC-FA+O的AP、淋巴转移大鼠相比时，统计学差异为p≤0.05
实施例3.自乳化药物递送系统(SEDDS)的施用能够实现奥利司他的肠系膜淋巴转运和全身暴露
3.1方法
3.1.1实验设计
在一系列脂质赋形剂中确定了奥利司他的溶解度，所述脂质赋形剂可用于制备SEDDS制剂，其包括LC-FA(油酸、亚油酸)、LC-TG(橄榄油)、表面活性剂(Kolliphor EL或cremophor EL、吐温80、Span 80)和助溶剂(PEG 400)(图1)。这使得能够选择合适的赋形剂来溶解和配制药物。
3.1.2基于脂质的制剂和对照制剂的制备
将LC-FA、表面活性剂和助溶剂的组合制备成IIIA型预乳剂(组合比例在表7中示出)。IIIA型制剂被认为是最有前景的SEDDS类型，因为它们在水或缓冲液中分散时自发形成非常细的乳液并且包含促进淋巴脂质和药物转运所需的长链脂质。所有制剂均包含8mg/kg油酸。对于对照无脂质制剂，奥利司他被分散在112mg吐温80和5.6ml PBS中。
表7.在体外分散和消化实验中测试的IIIA型基于脂质的制剂的组成。PEG 400，聚乙二醇400；P35-ECO，超精制P35蓖麻油；PPG 400，聚丙二醇400
3.2结果
IIIA型制剂在与水或PBS混合时自发产生乳液，并在与模拟的肠消化介质混合时保持药物大部分溶解在油相中(图2)。选择IIIA-1型和IIIA-5型制剂用于在大鼠中研究体内肠系膜淋巴摄取，其中将包含8mg/kg药物和40至60mg油酸的100mg总制剂分散在5.6mlPBS中，并通过在2小时内输注到十二指肠中来施用于大鼠。将这些IIIA型制剂与液体乳剂制剂进行比较，所述液体乳剂制剂中奥利司他分散在具有25mg吐温80和5.6ml PBS的40mg油酸、辛酸(MC-FA)或橄榄油(LC-TG)中。
重要的是，在经肠施用IIIA-1型和IIIA-5型制剂之后，淋巴中奥利司他随时间的浓度与液体乳剂制剂相比几乎相同(图3)。淋巴中的奥利司他浓度也远高于抑制胰脂肪酶所需的IC50。该数据支持了油酸能够在经肠/经口施用之后支持奥利司他的淋巴摄取，并且表面活性剂和助溶剂的微小变化未显著改变该药物的淋巴摄取。重要的是，这些制剂适合于制备用于向患者施用的胶囊剂。或者，它们可储存在小瓶中，并且在经口或通过鼻-胃或鼻-空肠管施用之前与缓冲液混合。

Claims (23)

1.药物制剂，其包含脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸。
2.根据权利要求1所述的药物制剂，其中所述一种或更多种长链脂肪酸以至少5重量％的量存在于所述制剂中。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的药物制剂，其中所述一种或更多种长链脂肪酸以至少10重量％的量存在于所述制剂中。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物制剂，其中所述一种或更多种长链脂肪酸具有至少14个碳原子。
5.根据权利要求1至5中任一项所述的药物制剂，其中所述一种或更多种长链脂肪选自肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈酸、棕榈油酸、十七烷酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、α-亚油酸、亚麻酸、十八碳四烯酸、异油酸、反油酸、反亚油酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、二十烯酸、顺-11-二十碳烯酸、芥酸、神经酸、米德酸、二十二碳四烯酸、二十二碳六烯酸、及其组合。
6.根据权利要求5所述的药物制剂，其中所述长链脂肪酸是油酸。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的药物制剂，其中所述脂肪酶抑制剂选自新利司他、利普司他汀、奥利司他、韧革菌素、厄比内酯、pancilin D、缬基内酯、抑酯酶素、及其组合。
8.根据权利要求7所述的药物制剂，其中所述脂肪酶抑制剂是奥利司他。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的药物制剂，其还包含至少一种可药用载体、稀释剂、表面活性剂或助溶剂。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的药物制剂，其中所述药物制剂为液体制剂。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的药物制剂，其中所述药物制剂为兽用制剂。
12.在有此需要的对象中治疗或预防由胰脂肪酶介导的疾病或病症的方法，其包括向所述对象施用有效量的根据权利要求1至11中任一项所述的药物制剂。
13.在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的方法，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，所述方法包括向所述对象施用有效量的根据权利要求1至11中任一项所述的药物制剂。
14.根据权利要求12或权利要求13所述的方法，其中所述药物制剂的施用是肠内施用。
15.在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的方法，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，所述方法包括向所述对象肠内施用有效量的脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸，其中所述一种或更多种长链脂肪酸以足以增强或促进所述脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在。
16.在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎或急性胰腺炎相关综合征的方法，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，所述方法包括向所述对象施用包含有效量的脂肪酶抑制剂和一种或更多种长链脂肪酸的制剂，其中所述制剂是自乳化药物递送系统，并且其中所述一种或更多种长链脂肪酸以足以增强或促进所述脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在于所述制剂中。
17.根据权利要求1至10中任一项所述的药物制剂，其用于在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎和/或急性胰腺炎相关综合征，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征。
18.脂肪酶抑制剂在制备用于在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎和/或急性胰腺炎相关综合征的药物中的用途，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，其中所述脂肪酶抑制剂与一种或更多种长链脂肪酸配制在一起，并且其中所述一种或更多种长链脂肪酸以至少5重量％的量存在。
19.脂肪酶抑制剂在制备用于在有此需要的对象中治疗或预防急性胰腺炎和/或急性胰腺炎相关综合征的药物中的用途，所述急性胰腺炎相关综合征选自全身炎症反应综合征和/或多器官功能障碍综合征，其中所述脂肪酶抑制剂与一种或更多种长链脂肪酸配制在一起，并且其中所述一种或更多种长链脂肪酸以在施用时足以增强或促进所述脂肪酶抑制剂向肠淋巴转运的量存在。
20.根据权利要求18或19所述的用途，其中所述药物是自乳化药物递送系统。
21.根据权利要求18至20中任一项所述的用途，其中所述一种或更多种长链脂肪酸具有至少14个碳原子。
22.根据权利要求18至21中任一项所述的用途，其中所述长链脂肪酸是油酸。
23.根据权利要求18至22中任一项所述的用途，其中所述脂肪酶抑制剂是奥利司他。
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