CN116270277A - 紫云英苷和米奎莲宁的组合用于抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性 - Google Patents

紫云英苷和米奎莲宁的组合用于抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性 Download PDF

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Abstract

本发明涉及组合物,其包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q),K/Q质量比为1/1.5至1/3.5。本发明还涉及根据本发明的组合物的用途,特别是用于预防和/或降低金黄色葡萄球菌的毒力,和/或预防和/或减少其在健康皮肤和/或健康粘膜上的不适和/或不美观,和/或用于治疗由金黄色葡萄球菌引起的皮肤和/或粘膜感染。

Description

紫云英苷和米奎莲宁的组合用于抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶 活性
技术领域
本发明属于皮肤病学或美容化妆组合物领域,并且特别是用于预防和/或降低金黄色葡萄球菌(S.aureus)毒力,和/或用于预防和/或减少健康皮肤和/或健康粘膜的不适和/或不美观表现,和/或用于治疗由金黄色葡萄球菌引起的皮肤和/或粘膜感染的组合物。本发明特别涉及两种化合物山萘酚(kampferol)-3-O-葡糖苷和槲皮素(quercetin)-3-O-葡糖苷酸的组合,其具有协同作用,特别是抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性。
背景技术
皮炎是皮肤表面的炎症,其特征在于水泡、红斑、水肿、渗出、脱皮或结痂病变和剧烈瘙痒。皮炎有不同类型:接触性皮炎,其可以由皮肤接触的刺激物或个体过敏的非刺激性物质引起;特应性皮炎,其是以严重瘙痒为特征的慢性疾病;脂溢性皮炎,其是主要影响面部和头皮的鳞状疾病。
皮炎由皮肤微生物群的不平衡引起,这意味着细菌多样性的降低和机会性细菌金黄色葡萄球菌的大量定植。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)脂肪酶(SAL)又称为甘油酯水解酶,将皮脂中的甘油三酯水解成甘油和游离脂肪酸。一些游离脂肪酸用作营养物质,促进金黄色葡萄球菌的生长。另外,其它游离脂肪酸,例如油酸,破坏皮肤的屏障功能,使其更容易受到过敏原和污染物的影响。油酸也是表皮细胞的刺激物,可导致炎性细胞因子(例如白细胞介素1α)的分泌。
因此,抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶(SAL)活性可以用于治疗金黄色葡萄球菌引起的皮肤感染,特别是皮炎。
金黄色葡萄球菌脂肪酶活性不一定会导致皮肤和/或粘膜病理学。在健康皮肤上,它也可能导致一些不适和/或不美观的表现,例如皮肤和/或粘膜干燥,皮肤和/或粘膜颜色失去均匀性,特别是皮肤和/或粘膜发红、紧绷感、刺痒感、刺痛感、紧张和/或瘙痒,皮肤和/或粘膜粗糙和/或触摸时失去柔软。这些不适和/或不美观的表现在敏感、过敏、脆弱、虚弱、干燥和/或有特应性倾向的皮肤和/或粘膜的情况中更为突出。
因此,仍然需要确定金黄色葡萄球菌脂肪酶(SAL)活性抑制剂作为先前描述和销售的替代品,特别是用于治疗金黄色葡萄球菌引起的病理学,特别是皮炎,但也用于改善敏感、过敏、脆弱、虚弱、干燥和/或有特应性倾向的皮肤和/或粘膜的外观和/或舒适性。
米奎莲宁(法文:Miquélianine,英文:Miquelianin)(Q),也称为槲皮素-3-O-葡糖苷酸,是下式(Q)的黄酮醇([化学式1])。已知米奎莲宁具有抗糖尿病、抗氧化和抗抑郁的特性。该分子主要存在于以下植物中:欧洲栗(Castanea sativa)(叶、花)、金丝桃(Hypericumperforatum)、莲(Nelumbo nucifera)、白珠树(Gaultheria miqueliana)、铁线蕨(Adiantum capillus veneris)、菜豆(Phaseolus vulgaris)、千叶蕃(Achilleamillefolium)、山金车(Arnica montana)、积雪草(Centella asiatica)、茴香(Foeniculumvulgare)、覆盆子(Rubus idaeus)、折扇叶(Myrothamnus flabellifolius)、月见草(Oenothera biennis)、葡萄(Vitis vinifera)和栽培草莓(Strawberry cultivars)。
[化学式1]
Figure BDA0004003772160000021
紫云英苷(K),也称为山萘酚-3-O-葡糖苷,是下式(K)的黄酮醇([化学式2])。该分子主要存在于以下植物中:欧洲栗(Castanea sativa)、黄芪属物种(Astragalus sp)和葡萄(Vitis vinifera)。紫云英苷(K)被认为是抗炎剂、抗氧化剂、抗ROS剂和对抗紫外线辐射和应力的皮肤保护剂(JP07118151;US7211567;和WO2004/037184)。
[化学式2]
Figure BDA0004003772160000031
1:1比例的紫云英苷与槲皮素的组合在韩国专利申请KR2012012684中公开,其对特应性皮炎、刺激和炎症具有活性。该组合特别用于止痒。
发明简述
在本文中,本发明人已经发现两种化合物紫云英苷(K)和米奎莲宁的组合显著抑制金黄色葡萄球菌的毒力,特别是金黄色葡萄球菌脂肪酶(SAL)的活性。这种抑制作用显著大于单个化合物产生的抑制作用。因此,本发明人已经发现紫云英苷和米奎莲宁的组合使用具有协同作用,抑制SAL活性,从而降低金黄色葡萄球菌的毒力。
本发明人特别发现,该组合可以用作美容化妆剂,特别是用于改善健康皮肤和/或健康粘膜的外观和/或舒适性,和/或用于健康皮肤和/或健康粘膜的美容化妆护理,特别敏感、过敏、脆弱、虚弱、干燥和/或有特应性倾向的健康皮肤。该组合通过其抑制金黄色葡萄球菌活性的特性,可以预防和/或防止皮肤屏障的退化,从而限制不易察觉的水分损失。因此,它也可以用作皮肤和/或粘膜的舒缓剂,和/或皮肤和/或粘膜的保湿剂。该组合也可以用作药物或皮肤病学组合物中的活性成分,特别是作为抗炎剂、抗菌剂,因为它抑制金黄色葡萄球菌的毒力,和/或治疗和/或预防金黄色葡萄球菌引起的皮肤感染,例如湿疹、脂溢性皮炎或特应性皮炎、痤疮,和金黄色葡萄球菌引起的皮肤或粘膜炎症,和/或红斑,特别是婴儿的臀部红斑,和/或用于预防和/或治疗药物中,特别是与反应性和/或特应性皮肤相关的疾病的皮肤学预防和/或治疗药物。该组合可用于过敏性和/或反应性皮肤和/或婴儿皮肤的皮肤病学护理,以预防婴儿臀部红斑。
本发明人还发现,当K/Q质量比为1/1.5至1/3.5时,可以获得更好的协同作用。
因此,本发明涉及包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合物,其特征在于,K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3。
根据本发明的组合物有利地用于局部施用。
根据本发明的组合物有利地特征在于紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合包含在植物提取物中,优选富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物,K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3。
有利的是,通过在水中,优选在70℃至90℃的温度提取例如30分钟至2小时来获得提取物。
有利的是,提取物包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,其量为0.001g/100mL提取物至1g/100mL提取物,优选0.01g/100mL提取物至0.1g/100mL提取物,特别是0.02g/100mL提取物至0.03g/100mL提取物。
相对于组合物总质量,根据本发明的组合物有利地包含0.4%至0.6%质量的紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合。
本发明还涉及美容化妆组合物,其包含根据本发明的组合物和美容化妆可接受的赋形剂。
本发明的目的还涉及根据本发明的美容化妆组合物的非治疗性美容化妆用途,用于防止和/或降低金黄色葡萄球菌毒力在皮肤和/或粘膜上的不适和/或不健康表现,和/或用于敏感的健康皮肤和/或粘膜、过敏的健康皮肤和/或粘膜、脆弱和/或虚弱的健康皮肤和/或粘膜、干燥的健康皮肤和/或粘膜以及有特应性倾向的健康皮肤和/或粘膜的美容化妆处理,和/或作为舒缓剂或保湿剂。
本发明的目的还涉及美容化妆护理方法,其特征在于该方法包括将根据本发明的美容化妆组合物局部施用于健康皮肤和/或健康粘膜的至少一个区域,用于敏感的健康皮肤和/或健康粘膜、过敏的健康皮肤和/或健康粘膜、脆弱和/或虚弱的健康皮肤和/或健康粘膜、干燥的健康皮肤和/或健康粘膜以及有特应性倾向的健康皮肤和/或健康粘膜的美容化妆处理,和/或作为舒缓剂或保湿剂。
本发明还涉及药物组合物和/或皮肤病学组合物,该组合物包含根据本发明的组合物以及药学和/或皮肤病学上可接受的赋形剂。
本发明还涉及根据本发明的药物组合物和/或皮肤病学组合物,其用作抗炎剂、抗菌剂和/或用于治疗和/或预防与金黄色葡萄球菌相关的皮肤和/或粘膜感染,例如湿疹、脂溢性皮炎或特应性皮炎、痤疮和金黄色葡萄球菌引起的皮肤或粘膜炎症,和/或红斑,特别是婴儿的臀部红斑,和/或用于预防和/或治疗药物中,特别是与反应性和/或特应性皮肤相关的疾病的皮肤学预防和/或治疗药物。
发明详述
对于本发明的目的,“美容化妆用途”和/或“美容化妆组合物”是指非药物用途和/或组合物,即不旨在用于治疗用途,并且应用于身体的健康部分,特别是皮肤的健康区域。
对于本发明的目的,“健康皮肤和/或粘膜”是指使用根据本发明的活性剂或组合物并且被皮肤科医生称为“非病理学”的人皮肤和/或粘膜区域,即没有显示任何感染、疤痕、疾病或皮肤病症,例如念珠菌病、脓疱病、银屑病、湿疹、炎症、鱼鳞病、痤疮或皮炎,或任何伤口或损伤。
对于本发明的目的,“皮肤”是指身体、特别是人体的全部或部分的皮肤,优选选自腿、脚、腋窝、手、股、腹部、胸部、颈、手臂、躯干、背、面部和/或头皮,有利地选自颈和/或面部,甚至更有利地是面部。
对于本发明的目的,“粘膜”是指鼻、眼、阴道、泌尿生殖道和/或口腔粘膜,特别是唇和/或牙龈粘膜,优选鼻、泌尿生殖道和/或口腔粘膜,并且甚至更优选鼻粘膜。
对于本发明的目的,“预防和/或降低”是指与未经处理(特别是美容化妆、皮肤病学或药物(安慰剂))的测量相比,防止增加和/或降低。
对于本发明的目的,“金黄色葡萄球菌毒力”是指金黄色葡萄球菌毒力因子的表达,特别是金黄色葡萄球菌的粘附能力、金黄色葡萄球菌脂肪酶活性、金黄色葡萄球菌的透明质酸酶活性、金黄色葡萄球菌将纤溶酶原活化为纤溶酶、金黄色葡萄球菌生物膜的形成,优选金黄色葡萄球菌脂肪酶活性。
对于本发明的目的,“抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性”是指金黄色葡萄球菌脂肪酶活性比在没有处理(包括美容化妆、皮肤病学或药物(安慰剂)处理)的情况下测量的金黄色葡萄球菌脂肪酶活性降低至少10%,优选至少20%,甚至更优选至少30%。有利的是,根据实施例2或3中描述的方案测量对金黄色葡萄球菌脂肪酶活性的抑制。
对于本发明的目的,“生理上可接受的赋形剂”是指适用于局部应用的赋形剂,用于美容化妆、药物或皮肤病学用途,无毒、对皮肤无刺激性,不会引起过敏反应,并且在化学上不是不稳定的。
一般而言,“敏感的皮肤和/或粘膜”可以定义为健康的皮肤和/或粘膜,其本质上对攻击性物质的耐受性非常低,特别是对环境物质例如污染物,气候因素(风、冷、热),UV暴露,情绪因素例如压力和/或化学物质(重金属、洗涤剂、美容化妆处理中包含的化合物例如芳香剂、防腐剂、醇、pH、AHA或皮肤病学活性剂例如维生素A酸)和/或攻击性条件例如出汗和机械攻击例如脱毛、剃须、摩擦,甚至水,特别是硬水。与过敏的皮肤不同,敏感皮肤不是病理性皮肤。但是,它们可能会对攻击性物质和/或条件作出反应,表现为皮肤和/或粘膜不美观和/或不适,例如皮肤和/或粘膜干燥、皮肤和/或粘膜颜色不均匀,特别是出现发红、紧绷感、刺痛感、刺痒感、紧张和/或瘙痒,皮肤和/或粘膜粗糙和/或触摸时失去柔软。因此,“敏感皮肤”的特征可以由个体自己用主观皮肤感觉来评估,或者可以由皮肤科医生用客观皮肤反应来评估。
不美观和/或不适的表现可以概括为全身,但大多数情况下,它们可能有明确的位置,例如头皮、面部、皮肤褶皱、婴儿臀部等。因此,它们可能是敏感的皮肤和/或粘膜的区域。
类似地,“敏感的皮肤和/或粘膜”是指健康的皮肤和/或健康的粘膜,暂时敏感,从而不具有病理性。
“脆弱或虚弱(即暂时脆弱)的皮肤和/或粘膜”是指屏障功能减弱的健康皮肤和/或健康粘膜。这种情况可能与个人状况有关,和/或与年龄有关,例如老年人和婴儿具有脆弱的皮肤。这种情况也可能是化学或物理攻击(磨损、摩擦、割伤)的结果。
“有特应性倾向的皮肤和/或粘膜”是指非常脆弱和/或虚弱的健康皮肤和/或健康粘膜,其通透性因屏障功能减弱而增加,并且在遗传上易受多种内外因素的影响发展为特应性皮炎的病理状态。因此,“有特应性倾向的皮肤”的特征可以由个体自己用主观皮肤感觉来评估,也可以由皮肤科医生用客观皮肤反应来评估。
过敏、脆弱和/或虚弱的皮肤和/或粘膜的不适和/或不美观表现与敏感的皮肤和/或粘膜的不适和/或不美观表现相同,这些表现和/或皮肤状况与疾病的预防和/或治疗无关。“反应性皮肤和/或粘膜”也称为不耐受、易受刺激或过敏性皮肤和/或粘膜,其耐受阈值降低并且引起过度反应。“特应性皮肤和/或粘膜”是指患有特应性皮炎的皮肤和/或粘膜。
“反应性皮肤和/或粘膜”和“特应性皮肤和/或粘膜”的特征可以由皮肤科医生用客观的皮肤反应来评估。
在本发明的含义中,“不美观和/或不适的表现”是指金黄色葡萄球菌的毒力,特别是金黄色葡萄球菌脂肪酶活性、皮肤和/或粘膜干燥、皮肤和/或粘膜颜色均匀性的丧失,特别是出现发红、紧绷感、发烧、发热、刺痒、发麻、紧张和/或瘙痒,皮肤和/或粘膜粗糙和/或触摸皮肤和/或粘膜时失去柔软。因此,金黄色葡萄球菌毒性,特别是金黄色葡萄球菌脂肪酶活性的不美观和/或不适表现在健康皮肤和/或健康粘膜上,优选敏感、过敏、脆弱、虚弱、干燥和/或有特应性倾向的皮肤和/或粘膜。
根据本发明的组合物
本发明涉及组合物,特别是美容化妆组合物、药物组合物,并且特别是皮肤病学组合物,其包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q),K/Q质量比为1/1.5至1/3.5。本发明人已经令人惊讶地确定,特定比例的这两种化合物具有协同作用。
根据本发明的组合物可以是用于局部施用的组合物。有利的是,根据本发明的组合物是局部施用的组合物。“局部施用”是指将组合物直接局部应用和/或喷洒至皮肤和/或粘膜表面。因此,该组合物可以局部应用于身体皮肤的全部或部分,有利地选自腿、脚、腋窝、手、股、腹部、胸部、颈、手臂、躯干、背部、面部,包括前额、脸颊、鼻、颞部、T区(前额、鼻和下巴)和/或头皮和/或粘膜的全部或部分。
在本发明中,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合用作组合物中的活性剂,特别是用作美容化妆、药物或皮肤病学活性剂。
有利的是,根据本发明的组合物包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q),K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1。紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,具有抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性的协同作用。对于本发明的目的,“协同作用”是指金黄色葡萄球菌脂肪酶活性降低比单独存在紫云英苷(K)或米奎莲宁(Q)测量的金黄色葡萄球菌脂肪酶活性降低多至少3%,有利地至少5%并且更有利地至少7%。在非常特别的实施方案中,协同作用是使用紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合金黄色葡萄球菌脂肪酶活性降低大于单独使用紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)降低金黄色葡萄球菌脂肪酶活性之和。金黄色葡萄球菌脂肪酶活性可以根据实施例2或3所示的方案进行测试。
因此,本发明涉及组合物,其包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1,所述组合物有利地包含占组合物总质量的1×10%至0.1%,优选1×10%至0.1%的量的紫云英苷(K),和占组合物总质量的1×10%至2.3×10%,优选1×10%至2.3×10%的量的米奎莲宁(Q)。
有利的是,当分子包含在植物提取物中,特别是欧洲栗(Castanea sativa)提取物中时,所述提取物中黄烷醇糖苷的含量等于或大于至少20ppm。
在一个有利的实施方案中,根据本发明的组合物还包含生理上可接受的赋形剂,特别是在美容化妆、药学或皮肤病学上可接受的赋形剂。
根据一个实施方案,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)以纯化的分子使用,特别是不与其它黄酮醇结合。特别的是,它们不是以植物提取物的形式添加。
在本发明的可选择的实施方案中,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)从植物提取物中获得。“植物提取物”是指植物的全部或部分的提取物,所述植物的全部或部分选自地上部分、叶、花、花瓣、茎、果实、果皮、种子、根、根状茎及其任何组合。
在一个实施方案中,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)在组合物中作为纯化的或富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的提取物提供。一方面,这两种分子都从一种植物提取物中获得。另一方面,这两种分子从两种不同的植物提取物中获得。
当从两种不同的植物提取物中获得这两种分子时,米奎莲宁(Q)可以从包含它的植物的全部或部分的提取物中纯化,例如选自以下的植物:欧洲栗(Castanea sativa)(叶、花)、金丝桃(Hypericum perforatum)、莲(Nelumbo nucifera)、白珠树(Gaultheriamiqueliana)、铁线蕨(Adiantum capillus veneris)、菜豆(Phaseolus vulgaris)、千叶蕃(Achillea millefolium)、山金车(Arnica montana)、积雪草(Centella asiatica)、茴香(Foeniculum vulgare)、覆盆子(Rubus idaeus)、折扇叶(Myrothamnus flabellifolius)、月见草(Oenothera biennis)、葡萄(Vitis vinifera)和栽培草莓(Strawberrycultivars);并且紫云英苷(K)可以从包含它的植物的全部或部分的提取物中纯化,例如选自以下的植物:欧洲栗(Castanea sativa)(叶)、折扇叶(Myrothamnus flabellifolius)、黄芪属物种(Astragalus sp)和葡萄(Vitis vinifera)。
应当根据紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的含量预先选择植物品种和/或植物部分,并且应当使用常规方法进行提取,以获得所需质量比的紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q),特别是如下所述。在特别的实施方案中,当植物提取物是欧洲栗(Castanea sativa)提取物,特别是欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物时,提取物来自法国,并且更特别来自Cher或Ardèche地区的欧洲栗(Castanea sativa)。
根据优选的实施方案,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)在组合物中作为从一种植物中获得的富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的提取物提供,所述提取物优选是欧洲栗(Castanea sativa)提取物,特别是欧洲栗(Castanea sativa)地上部分的提取物,更特别是欧洲栗(Castanea sativa)叶的提取物。在特别的实施方案中,富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的提取物的K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1。
植物提取物,特别是欧洲栗(Castanea sativa)叶的提取物,可以通过本领域技术人员已知的任何提取方法获得,所述方法选自浸渍、热煎煮、研磨。包括超声研磨,可以借助于搅拌机,或者提取物可以通过在亚临界或超临界(二氧化碳)条件下在水中提取获得。优选地,提取通过浸渍或溶剂提取,特别是在水中获得。
提取可以采用干燥或新鲜的材料进行,这些材料占材料和提取溶剂总质量的0.1%至20%质量,有利地为1%至10%质量,非常有利地为5%至10%质量,并且甚至更有利地为10%。
提取可以在4℃至300℃,包括环境温度,即18℃至25℃进行。在本发明的优选实施方案中,提取在60℃至90℃,优选70℃至90℃,优选70℃至85℃,甚至更优选80℃的温度进行。
在本发明的可选择的实施方案中,提取在4℃至25℃的温度,甚至更优选4℃至20℃,甚至更有利地在环境温度,即18℃至25℃进行。
在本发明的另一个可选择的实施方案中,提取在亚临界条件下在100℃至300℃、有利地为120℃至250℃,有利地为120℃在水中进行。提取可以在给定的单一温度进行,也可以在连续升高的温度进行。在本发明的有利的实施方案中,提取在120℃的单一温度进行。在可选择的实施方案中,提取在100℃至200℃的三个增加温度梯度进行,例如120℃、140℃然后160℃,或者110℃、130℃然后150℃,或者120℃、145℃然后170℃。
“亚临界条件”下提取是指在温度高于100℃并且压力低于221bar在水的存在下提取,以便使水保持液态,但比在室温的水具有更低的粘度和表面张力,从而增加其介电常数。
因此,提取压力为150bar至250bar,优选200至221bar,有利地提取在压力高压釜中进行。
无论采用何种提取方法,提取可以进行30分钟至24小时,优选30分钟至12小时,甚至更优选30分钟至5小时,并且甚至更有利地为30分钟至2小时或者1小时至2小时。非常有利的是,提取进行1小时。
在优选的实施方案中,根据本发明的组合物有利地是欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物,任选与赋形剂组合。更有利的是,欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物通过用水,优选在70℃至90℃,优选在80℃的温度有利地提取30分钟至2小时,或者1小时至2小时,特别是1小时而获得。
因此,根据本发明的提取物有利地通过水作为唯一溶剂提取来获得。
可选择的是,提取可以在非离子表面活性剂的存在下进行,所述非离子表面活性剂优选选自BASF的以
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1200UP销售的月桂基葡糖苷,或辛酰基/癸酰基葡糖苷(
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810UP),优选辛酰基/癸酰基葡糖苷(/>
Figure BDA0004003772160000113
810UP)。非离子表面活性剂的质量浓度可以占提取物总质量的0.5%至5%,有利地为0.5%至1%,甚至更有利地为1%。
提取物可以是液体或粉末形式。在本发明的一个实施方案中,植物提取物在麦芽糊精的存在下进行冷冻干燥,麦芽糊精的浓度为占最终提取物总质量的70%至90%质量,有利地为75%至85%质量,并且非常有利地为85%质量。
根据本发明的提取物可以是紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的纯化提取物。在这种情况下,紫云英苷(K)和/或米奎莲宁(Q)的纯化可以通过本领域技术人员已知的任何适合的技术进行。例如,该技术可以是色谱技术,选自薄层色谱或制备型高效液相色谱(HPLC)。有利的是,一种或两种分子的纯化通过制备型高效液相色谱(HPLC)进行,特别是反相的,甚至更有利的是在C18柱上进行。洗脱通过溶剂梯度(例如以5mL/分钟)进行,有利地在溶剂混合物的存在下,并且优选在甲酸(1%)和乙腈混合物的存在下。当提取物是粉末形式时,可以在水中再溶解以进行纯化。
因此,在本发明的特别有利的实施方案中,欧洲栗(Castanea sativa)叶的水提取物以水作为唯一溶剂获得,例如如实施例1中描述的,其每100mL提取物包含0.0005至0.3g紫云英苷(K),优选每100mL提取物包含0.0005至0.0080g紫云英苷(K),特别是每100mL提取物包含0.001至0.006g紫云英苷(K),以及每100mL提取物包含0.0010至0.800g米奎莲宁(Q),优选每100mL提取物包含0.0010至0.0200g米奎莲宁(Q);K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1。
因此,本发明有利地涉及富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castaneasativa)叶提取物,其包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,其量为0.001g/100mL提取物至1g/100mL提取物,优选0.01g/100mL提取物至0.1g/100mL提取物,特别是0.02g/100mL提取物至0.03g/100mL提取物。
因此,本发明有利地涉及富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castaneasativa)叶提取物,该提取物包含紫云英苷(K)为0.0005至0.3g/100mL提取物之间,优选0.0005至0.0080g/100mL提取物,以及米奎莲宁(Q)为0.0010至0.800g/100mL提取物,优选0.0010至0.0200g/100mL提取物;K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1。
在本发明的可选择的实施方案中,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)可以以商购可获得的粉末使用,例如从Sigma-Aldrich获得。在这种情况下,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)可以溶解在美容化妆成分中,其浓度为使得K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1。因此,在本发明的特别有利的实施方案中,紫云英苷(K)和/或米奎莲宁(Q)在组合物中作为纯产品提供。
紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)无论其制备方法如何,都可以通过添加溶剂或溶剂混合物(例如水、甘油或二醇)在物理和微生物上稳定,其比例不同,以适应这种稳定。有利地,甘油将单独存在或者与水或二醇组合,有利地比例为40-95%并且优选50-90%之间。类似地,二醇将有利地单独存在或者与水或甘油组合,有利地比例为40%至95%并且优选50%至90%。有利的是,溶剂混合物包含水和甘油,其质量比为10/90至40/60,优选20/80。
因此,在特别有利的实施方案中,根据本发明的组合物包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,优选为富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物形式,K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,以及溶剂或溶剂混合物,优选水和甘油的混合物。特别的是,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,更特别的是富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物,在组合物中以占组合物总质量的0.4%至0.6%质量存在。有利的是,包含水和甘油的溶剂混合物以有效用于物理和微生物稳定作用的量存在,特别是质量比为10/90至40/60,优选20/80。
根据本发明的组合可以以美容化妆或药物活性剂的形式使用,其掺入美容化妆或药物组合物中,并且还包含适合的美容化妆或药物赋形剂。
在这种情况下,在另一个实施方案中,根据本发明的组合优选溶于和/或稀释在溶剂中,特别是极性溶剂,例如水,有利地还包含甘油,如实施例5所述的产品。在另一个实施方案中,根据本发明的组合可以雾化至雾化载体例如麦芽糊精上,并且是粉末形式。
美容化妆组合物
本发明还涉及美容化妆组合物,其包含如上定义的根据本发明的组合物和美容化妆可接受的赋形剂。在美容化妆组合物中,如上定义的根据本发明的组合物特别包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,其K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9到1/3.1,用作美容化妆活性剂。
有利的是,美容化妆活性剂是如上定义的根据本发明的组合物,其包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,优选为富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castaneasativa)叶提取物形式,K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1,以及溶剂或溶剂混合物,优选水和甘油的混合物。特别的是,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,特别是富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物,以占在组合物总质量的0.4%至0.6%质量的量存在于美容化妆活性剂组合物中。有利的是,包含水和甘油的溶剂混合物以有效用于物理和微生物稳定作用的量存在,特别是质量比为10/90至40/60,优选20/80。
在本发明的一个实施方案中,根据本发明的美容化妆活性剂以占美容化妆组合物总质量的1×10%至10%,优选1×10%至5%并且甚至更优选1×10%至3%质量的浓度存在于美容化妆组合物中。有利的是,根据本发明的美容化妆活性剂以占美容化妆组合物总质量的0.1至3%质量,例如1至3%质量,特别是2%质量存在于美容化妆组合物中。
有利的是,与安慰剂对照相比,美容化妆活性剂的有效量抑制金黄色葡萄球菌的毒力因子,优选抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性至少20%,优选至少30%。
“可接受的”是指对皮肤无刺激性、不引起过敏反应并且是化学稳定的美容化妆赋形剂。
有利的是,紫云英苷(K)以占组合物总质量的1×10%至0.1%,优选1×10%至0.1%质量的浓度存在于美容化妆组合物中。甚至更有利的是,米奎莲宁(Q)以占组合物总质量的1×10%至2.3×10%,优选1×10%至2.3×10%质量的浓度存在于美容化妆组合物中。
根据本发明的组合物可以包含任何适合的溶剂、赋形剂、载体以及其它活性成分。
因此,赋形剂可以选自表面活性剂和/或乳化剂、防腐剂、缓冲剂、螯合剂、变性剂、遮光剂、pH调节剂、还原剂、稳定剂、增稠剂、胶凝剂、成膜聚合物、填充剂、消光剂、光泽剂、色素、染料、芳香剂及其混合物。CTFA(Cosmetic Ingredient Handbook,2016版)描述了适用于本发明的多种美容化妆赋形剂。
有利的是,赋形剂选自聚甘油、酯、纤维素聚合物和衍生物、羊毛脂衍生物、磷脂、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、基于蔗糖的稳定剂、维生素E及其衍生物、黄原胶、天然和合成蜡、植物油、甘油三酯、不可皂化物质、植物甾醇、硅酮、蛋白质水解物、甜菜碱、氨基氧化物、植物提取物、蔗糖酯、二氧化钛、甘氨酸和对羟基苯甲酸酯,并且更优选选自硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-21、乙二醇硬脂醚、鲸蜡醇、苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯,对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、丁二醇、辛酰基乙二醇、天然生育酚、甘油、二羟基鲸蜡基磷酸钠、异丙基羟基鲸蜡基醚、乙二醇硬脂酸酯、三异壬精、椰油酸辛酯、聚丙烯酰胺、异石蜡、月桂醇聚醚-7、卡波姆、丙二醇、己二醇、甘油、红没药醇、二甲硅酮、氢氧化钠、PEG 30-二聚羟基硬脂酸酯、辛酸/癸酸甘油三酯、鲸蜡基硬脂基辛酸酯、己二酸二丁酯、葡萄籽油、荷荷巴油、硫酸镁、EDTA、环甲基硅酮、黄原胶、柠檬酸、十二烷基硫酸钠、矿物蜡和油、异硬脂酸异硬脂酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇异硬脂酸酯、PEG 8、蜂蜡、氢化棕榈仁油甘油酯、羊毛脂油、芝麻油、乳酸鲸蜡酯、羊毛脂醇、蓖麻油、二氧化钛、乳糖、蔗糖、低密度聚乙烯、等渗盐水以及它们的混合物。
根据本发明的美容化妆组合物可以选自水溶液或油溶液、乳膏或水凝胶或油凝胶,特别是淋浴凝胶、乳、乳液、微乳液或纳米乳液,特别是水包油或油包水或多相或硅酮乳液、面膜、浆液、洗液、肥皂液、皮肤棒、软膏、泡沫、贴片、无水产品,优选液体、糊状物或固体,例如粉末、棒状物或条状物的形式。
美容化妆组合物还可以包含美容化妆或皮肤病学可接受的赋形剂,其选自表面活性剂、防腐剂、缓冲剂、膨胀剂、螯合剂、杀微生物剂、变性剂、遮光剂、pH调节剂、还原剂、稳定剂、乳化剂、增稠剂、胶凝剂、成膜聚合物、溶剂、填充剂、杀菌剂、气味吸收剂、吸油剂、调节剂、质地剂、光泽剂、色素、着色剂、芳香剂、化学或矿物防晒剂、微量元素、精油。本发明也包括这些物质的组合。
美容化妆或药物组合物还可以包含其它活性成分,用于治疗敏感、过敏、反应性、脆弱和/或虚弱的皮肤和/或粘膜的皮肤和/或粘膜,和/或影响增加和/或保护和/或维持皮肤和/或粘膜的有益共生菌群,从而与根据本发明的提取物产生互补或协同作用,所述其它活性成分例如选自
-透明质酸钠、普鲁兰和海藻酸钠的组合,特别是以含有丝氨酸、海藻糖、尿素和甘油的制剂销售,申请人称为PatcH2OTM
-用于敏感皮肤护理的其它美容化妆成分,例如申请WO2009/112590中所述的申请人以SymbiocellTM销售的夜香树(Cestrum latifolium)植物提取物,申请人以IrwinolTM销售的从野生芒果(Irvingia gabonensis)树果实中提取的油,以EperulinTM销售的镰形木荚苏木(Eperua falcata)根提取物,申请人以SkinasensylTM销售的肽N-乙酰基-L-酪氨酰基-L-脯氨酰基-L-苯丙氨酰基-L-苯丙氨酰胺(INCI:乙酰四肽15)。
美容化妆组合物还可以包含一种或多种对皮肤和/或粘膜微生物区系有活性和/或对皮肤屏障功能有活性的成分,特别是保湿和/或舒缓活性成分,包括Solabia公司以BioEcoliaTM销售的通过酶合成获得的低聚糖,或者α-葡萄糖低聚糖复合物,由该公司以EcoskinTM销售的车前草(Alisma plantago-aquatica)提取物,刺五加提取物(LipofructylTM Argan),神经酰胺混合物(SphingocerylTM VEG),波尔多提取物(BetapurTM),基于菊粉或果糖低聚糖的产品,双歧杆菌提取物或对抗油性皮肤的肾茶(Orthosiphon stamineus)提取物(MAT-XSTM Bright),申请人以MelhydranTM销售的具有保湿性的天然蜂蜜提取物,申请人以OligolinTM销售的亚麻提取物,申请人以RelipidiumTM销售的生物技术修饰的酵母提取物,申请人以InhipaseTM销售的葛根(Pueraria lobata)提取物,Mibelle以CM-Glucan ForteTM销售的衍生自面包酵母的β-葡聚糖衍生物,和/或Sederma以PacifeelTM销售的紫茉莉(Mirabilis jalapa)提取物,申请人以ScalposineTM销售的作为皮肤益生元的N-甲基甘氨酸,申请人以PhytosoothTM销售的从甘蓝(Brassicacampestris)籽油植物甾醇中提取的屏障功能修复剂,申请人以Hydrasensyl glucanTM销售的含有β-葡聚糖的保湿和舒缓剂,以Ultra Filling SphèresTM销售的包含透明质酸和魔芋多糖的保湿剂,申请人以InolixirTM销售的含有桦褐孔菌(Inonotus obliquus)的抗氧化、抗炎、抗发红剂,对抗污染影响的保护剂,特别是申请人以PurisoftTM销售的辣木(Moringaoleifera)籽提取物。
本发明的目的还涉及根据本发明的美容化妆组合物的非治疗性美容化妆用途,用于对敏感的健康皮肤和/或健康粘膜、过敏的健康皮肤和/或健康粘膜、脆弱的健康皮肤和/或健康粘膜、虚弱的健康皮肤和/或健康粘膜、干燥的健康皮肤和/或粘膜和/或有特应性倾向的健康皮肤进行美容化妆处理。
本发明还涉及根据本发明的美容化妆组合物作为舒缓剂和/或保湿剂的非治疗性美容化妆用途,特别是通过其保持和/或恢复皮肤和/或粘膜屏障以及限制不易察觉的水损失的特性。
本发明还涉及美容化妆护理方法,其特征在于,该方法包括将根据本发明的美容化妆组合物局部应用于健康皮肤和/或健康粘膜的至少一个区域,用于对敏感的健康皮肤和/或健康粘膜、过敏的健康皮肤和/或健康粘膜、脆弱和/或虚弱的健康皮肤和/或健康粘膜、干燥的健康皮肤和/或健康粘膜以及有特应性倾向的健康皮肤和/或健康粘膜进行美容化妆处理,和/或作为舒缓剂或保湿剂。
在本发明的有利的实施方案中,美容化妆护理方法包括将根据本发明的美容化妆组合物局部应用于身体和/或面部的全部或部分,优选选自腿、脚、腋窝、手、股、腹部、胸部、颈、手臂、躯干、背部、面部,包括前额、脸颊、鼻、颞部、T区(前额、鼻和下巴)和/或头皮,更有利的是腋窝、头皮和/或面部,非常有利的是面部,并且甚至更有利的是前额、脸颊、鼻、颞部、T区(前额、鼻和下巴)。
特别的是,本发明人已经证明紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,具有协同作用,其能够对健康皮肤有显著的保护作用,特别是舒缓敏感或过敏的健康皮肤、脆弱或虚弱的健康皮肤、干燥的健康皮肤和有特应性倾向的健康皮肤。根据本发明的组合特别能够增强皮肤,特别是健康皮肤的屏障功能。根据本发明的组合有助于皮肤更健康、更舒适。它有助于缓解皮肤不适。
在一个实施方案中,美容化妆组合物中紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合的量不提供治疗作用。
有利的是,本发明还涉及用于防止和/或减少金黄色葡萄球菌的毒力和/或健康皮肤和/或健康粘膜的不美观和/或不适表现的美容化妆处理方法,所述健康皮肤和/或粘膜为敏感的、和/或过敏的、和/或脆弱的、和/或虚弱的、和/或干燥的、和/或有特应性倾向的个体的健康皮肤和/或健康粘膜,该方法包括以下步骤:
a)在个体中确定健康的皮肤和/或粘膜区域,该区域需要防止和/或减少金黄色葡萄球菌毒力的不美观和/或不适表现,和/或需要防止和/或降低敏感性和/或脆弱性和/或干燥和/或特应性倾向,以及
b)在该健康皮肤和/或健康粘膜区域局部施用美容化妆组合物,该美容化妆组合物包含根据本发明的组合,其量有效防止和/或减少该皮肤和/或粘膜区域的金黄色葡萄球菌毒力的不美观和/或不适表现,和/或其量有效防止和/或降低其敏感性和/或脆弱性和/或干燥和/或特应性倾向,即该组合的含量占组合物的总重量的1×10%至10%重量,优选1×10%至5%重量,甚至更有利的是1×10%至3%重量,仍然更优选0.001%至0.1%重量。
药物或皮肤病学组合物
本发明还涉及药物和/或皮肤病学组合物,其包含如上定义的根据本发明的组合物以及药学和/或皮肤病学可接受的赋形剂。在药物和/或皮肤病学组合物中,如上定义的根据本发明的组合物特别包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,其K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1,其用作药物或皮肤病学活性成分。
有利的是,药物或皮肤病学活性成分是如上定义的根据本发明的组合物,其包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,优选为富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物,K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3,特别是1/2.5至1/3.3,最特别是1/2.8至1/3.2或1/2.9至1/3.1,以及溶剂或溶剂混合物,优选水和甘油的混合物。特别的是,紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,更特别是富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物,其以占组合物总质量的0.4%至0.6%质量存在于美容化妆活性剂组合物中。有利的是,包含水和甘油的溶剂混合物以有效用于物理和微生物稳定作用的量存在,特别的是重量比为10/90至40/60,优选20/80。
在本发明的一个实施方案中,根据本发明的药物和/或皮肤病学组合物包含根据本发明的药物和/或皮肤病学活性成分,其浓度为占组合物的总质量的1×10%至10%,优选1×10%至5%,并且甚至更优选1×10%至3%质量。有利的是,根据本发明的药物和/或皮肤病学活性成分以占药物和/或皮肤病学组合物总质量的0.1至3%质量,例如1至3%质量,特别是2%质量的浓度存在于药物和/或皮肤病学组合物中。
有利的是,紫云英苷(K)以占药物和/或皮肤病学组合物总质量的1×10%至0.1%,优选1×10%至0.1%质量的浓度存在于药物和/或皮肤病学组合物中。甚至更有利的是,米奎莲宁(Q)以占药物和/或皮肤病学组合物总质量的1×10%至2.3×10%,优选1×10%至2.3×10%的浓度存在于药物和/或皮肤病学组合物中。
包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合的药物和/或皮肤病学组合物有利地局部或口服施用,并且有利地局部应用于身体的全部或部分,有利地选自腿、脚、腋窝、手、股、腹部、胸部、颈、手臂、躯干、背部、面部,包括前额、脸颊、鼻、颞部、T区(前额、鼻和下巴)和/或头皮,更有利的是腋窝、头皮和/或面部,非常有利的是面部,并且甚至更有利的是前额、脸颊、鼻、颞部、T区(前额、鼻和下巴)。
药学和/或皮肤病学可接受的赋形剂可以选自表面活性剂和/或乳化剂、防腐剂、缓冲剂、螯合剂、变性剂、遮光剂、pH调节剂、还原剂、稳定剂、增稠剂、胶凝剂、成膜聚合物、填充剂、消光剂、光泽剂、色素、染料、芳香剂及其混合物。CTFA(Cosmetic IngredientHandbook,2016版)描述了适用于本发明的多种美容化妆赋形剂。本领域技术人员已知如何利用其常识来调整根据本发明的组合物的配方。
根据本发明的药物和/或皮肤病学组合物可以选自水溶液或油溶液、乳膏或水凝胶或油凝胶,特别是淋浴凝胶、乳、乳液、微乳液或纳米乳液,特别是水包油或油包水或多相或硅酮乳液、面膜、浆液、洗液、肥皂液、皮肤棒、软膏、泡沫、贴片、无水产品,优选液体、糊状物或固体,例如粉末、棒状物或条状物的形式。
本发明还涉及如上定义的根据本发明的药物和/或皮肤病学组合物,其用作抗炎剂、抗菌剂和/或用于治疗和/或预防与金黄色葡萄球菌相关的皮肤和/或粘膜感染,例如湿疹、脂溢性皮炎或特应性皮炎、痤疮以及由金黄色葡萄球菌引起的皮肤或粘膜炎症,和/或红斑,特别是婴儿的臀部红斑,和/或用于预防和/或治疗药物中,特别是与反应性和/或特应性皮肤相关的疾病的皮肤学预防和/或治疗药物。
因此,药物和/或皮肤病学组合物特别适合治疗与反应性皮肤和/或粘膜、不耐受和/或特应性皮肤和/或粘膜有关的疾病。
本发明还涉及如上定义的根据本发明的药物和/或皮肤病学组合物的用途,其用于制备抗炎剂、抗菌剂,和/或用于治疗和/或预防与金黄色葡萄球菌相关的皮肤和/或粘膜感染,例如湿疹、脂溢性皮炎或特应性皮炎、痤疮以及由金黄色葡萄球菌引起的皮肤或粘膜炎症,和/或红斑,特别是婴儿的臀部红斑,和/或用于预防和/或治疗药物中,特别是与反应性和/或特应性皮肤相关的疾病的皮肤学预防和/或治疗药物。
有利的是,紫云英苷(K)以占药物和/或皮肤病学组合物总质量的1×10%至0.1%,优选1×10%至0.1%质量的浓度存在于药物和/或皮肤病学组合物中。甚至更有利的是,米奎莲宁(Q)以占药物和/或皮肤病学组合物总质量的1×10%至2.3×10%,优选1×10%至2.3×10%的浓度存在于药物和/或皮肤病学组合物中。
本发明还涉及个体治疗和/或预防和/或减少与金黄色葡萄球菌毒力有关的病理学的发生的方法,特别是与金黄色葡萄球菌脂肪酶活性有关的病理学,例如炎症、细菌感染,和/或与金黄色葡萄球菌相关的皮肤感染,例如湿疹、脂溢性皮炎或特应性皮炎、痤疮,以及由金黄色葡萄球菌引起的皮肤或粘膜炎症,和/或红斑,特别是婴儿的臀部红斑,和/或用于预防和/或治疗药物,特别是与反应性和/或特应性皮肤相关的疾病的皮肤学预防和/或治疗药物,该方法包括给所述个体局部应用治疗有效量的如上定义的根据本发明的药物和/或皮肤病学组合物。
现在将借助于下面的实施例来说明本发明。通过阅读实施例的示例性描述,本发明的其它目的、特征和优点对于本领域技术人员是显而易见的。这些实施例都是为了说明而不旨在限制本发明。
实施例构成了本发明不可分割的部分,并且从整个描述(包括实施例)来看,相对于任何现有技术而言,任何新的特征在其功能和一般性方面都是本发明不可分割的部分。
因此,每个实施例都有通用范围。
另一方面,在实施例中,除非另有说明,否则温度以摄氏度表示,压力为大气压。
实施例
实施例1:根据本发明的欧洲栗(Castanea sativa)提取物的制备
在以下条件下制备根据本发明的提取物:
在80℃搅拌下,在1865.60g作为单一溶剂的渗透水中提取230g干燥和研磨的来自法国(Ardèche and Cher)的欧洲栗(Castanea sativa)叶1小时。将粗提取物离心,过滤(0.45μm)。从而获得液体形式的提取物。
所获得的提取物(干提取物=3.2%)包含以下化合物:
山萘酚-3-O-葡糖苷(=紫云英苷):0.0058g/100mL
槲皮素-3-O-葡糖苷酸(=米奎莲宁):0.0174g/100mL
对其它批次进行了分析,并且显示出化合物含量相似并且K/Q质量比为1/1.5至1/3.5。
根据实施例1的提取物在0%、1%和0.3%(w/v)测试其抑制以下金黄色葡萄球菌毒力因子的能力:
-抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成:提取物显示强的生物膜抑制性质。
-抑制来自金黄色葡萄球菌的透明质酸酶。
-抑制金黄色葡萄球菌将纤溶酶原活化为纤溶酶(实施例4中的方案)
除了抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性外,根据本发明实施例1的提取物对这三种因子具有非常好的抑制作用。
实施例2:证明根据本发明的米奎莲宁(Q)和紫云英苷(K)的组合对抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性的协同作用
材料和方法:
将金黄色葡萄球菌(Staphylococcus Aureus ATCC 35556)接种100万株细菌于培养液(TSB-F Biomérieux index 42614)中,并且在37℃测试分子的存在下或未添加测试分子(阴性对照)培养24小时。在培养结束时,通过在600nm测量细菌悬浮液的光密度来确定金黄色葡萄球菌的生长。通过离心(1000g,5分钟)回收培养液的上清液。然后将上清液用于评价金黄色葡萄球菌分泌的脂肪酶活性。通过将显色底物(Sigma 30058)添加到pH 8稳定的磷酸盐缓冲液中,测定脂肪酶活性。在40℃温育1小时后,通过荧光测量(600 nm处发射,520nm处激发)获得脂肪酶活性。结果以相对于对照(=无产物培养液)的抑制百分数表示,并且以平均值+/-标准差显示。
这些分子从Extrasynthese获得(紫云英苷为REF 1243S,米奎莲宁为REF 1315),并且以表1所示的重量与总体积的比例(培养液+测试分子)添加到培养液中。
结果:
显著性检验为t检验,p<0.01。
[表1]
Figure BDA0004003772160000221
0.02%w/v米奎莲宁(Q)和0.01%w/v紫云英苷(K) (K/Q质量比=1/2)显著抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性49%。这种抑制显著大于单独0.02%米奎莲宁(Q) (p<0.01)或单独0.01%紫云英苷(K) (p<0.05)产生的抑制。该组合具有协同作用。
实施例3:证明K/Q比例对抑制金黄色葡萄球菌脂肪酶活性的作用材料和方法:
将金黄色葡萄球菌(Staphylococcus Aureus ATCC 35556)接种100万株细菌于培养液(TSB-F Biomérieux index 42614)中,并且在37℃在测试分子的存在下培养24小时。在培养结束时,通过在600 nm测量细菌悬浮液的光密度来确定金黄色葡萄球菌的生长。通过离心(1000 g,5分钟)回收培养液的上清液。然后将上清液用于评价金黄色葡萄球菌分泌的脂肪酶活性。通过将显色底物(Sigma 30058)添加到pH 8稳定的磷酸盐缓冲液中,测定脂肪酶活性。在40℃温育1小时后,通过荧光测量(600 nm处发射,520 nm处激发)获得脂肪酶活性。结果以相对于对照(=无产物培养液)的抑制百分数表示,并且以平均值+/-标准差显示。
结果:
[表2]
Figure BDA0004003772160000231
结果表明,对于米奎莲宁(Q)和紫云英苷(K)的相同的总剂量(=0.03%),1/3质量比(Q 0.0225%+K 0.0075%)显著优于1/2质量比(Q 0.02%+K0.01%)。因此,K/Q质量比为1/3比K/Q质量比为1/2具有更大的协同作用。
实施例4:根据本发明的组合抑制金黄色葡萄球菌将纤溶酶原活化为纤溶酶的作用。
在K/Q质量比=1/2的情况下,还测试了0.02%w/v米奎莲宁(Q)和0.01%w/v紫云英苷(K)的组合抑制金黄色葡萄球菌将纤溶酶原活化为纤溶酶,从而作用于屏障功能的能力。
简化方案:
纤溶酶原活化为纤溶酶抑制试验的简化方案:
将金黄色葡萄球菌(Staphylococcus Aureus ATCC 35556)接种100万株细菌于培养液(TSB-F Biomérieux index 42614)中,并且在37℃培养24小时。在培养结束时,通过在600 nm测量细菌悬浮液的光密度来确定金黄色葡萄球菌的生长。将细菌悬浮液在600 nm处的光密度调整为1.3,然后在1600 g离心10分钟。回收培养液上清液以评估纤溶酶原活化为纤溶酶的情况如下。
为此,将一定量的纤溶酶原(40 mU,Sigma P7999)与测试材料和纤溶酶显色底物(Bodipy-Casein Sigma E6638)一起添加至上清液中。
在37℃温育2小时(T2h)和3小时(T3h)后,通过荧光测量(538 nm处发射,488 nm处激发)定量纤溶酶对底物的水解。结果以相对于对照(=无产物培养液的上清液)的百分数表示,并且以平均值+/-标准差显示。
测试分子:
槲皮素-3-O-葡糖苷酸=米奎莲宁-供应商Extrasynthesis 1315批号22688-79-5
山萘酚-3-O-葡糖苷(=紫云英苷)-供应商Extrasynthesis 1243S批号480-10-4
结果:
[表3]
Figure BDA0004003772160000241
根据本发明的组合强烈抑制了金黄色葡萄球菌将纤溶酶原活化为纤溶酶。
实施例5:美容化妆剂形式的包含欧洲栗(Castanea sativa)提取物的根据本发明的组合物的实施例
根据本领域技术人员已知的方法制备包含以下化合物的组合物:(比例以%重量表示)。
[表4]
Figure BDA0004003772160000251
实施例6:干燥皮肤的双盲测试
本研究的目的是评估根据实施例5的提取物的作用,其以2%(w/w)配制在实施例7.1的保湿乳膏中。对22名皮肤干燥的成人女性和男性进行了体内研究。
T0对应于处理前的测量值
安慰剂乳膏对应于乳膏7.1,其中根据实施例5的提取物(=美容化妆剂)被水代替。
本研究采用双盲,用测试乳膏进行。通过皮肤科医生在用测试化合物处理前、处理14天、28天和56天后测量经皮水分损失(TEWL)和皮肤pH,定量对有特应性倾向的皮肤的作用。使用者还对处理14天和56天后产品对皮肤的益处进行了自我评估。
pH:在有特应性倾向的皮肤的瘙痒和非常干燥的区域测量到最高的pH。皮肤碱度的增加也与对皮肤感染的易感性增加有关(Chikakane和Takahashi,1995)。因此,保持或恢复酸性pH对于保持或恢复正常屏障功能至关重要。含有提取物的乳膏在治疗56天后,随着时间的推移,皮肤表面的pH降低,获得了0.26pH单位的显著酸化,而对于安慰剂乳膏,没有获得pH的显著变化。
不易察觉的水损失TEWL:含有根据实施例5的提取物的乳膏7.1(=美容化妆剂)随着时间的推移,使皮肤不易察觉的水损失(TEWL)显著降低,显著高于安慰剂乳膏观察到的降低。处理14天后,包含根据实施例5的提取物的乳膏7.1(=美容化妆剂)与T0相比,不易察觉的水损失减少了10%(p<0.1)。用乳膏7.1处理1个月和2个月后,观察到屏障功能显著改善:-21%(P<0.001vs T0,P<0.1vs安慰剂)和-27%(P<0.001vs T0,P<0.05vs安慰剂)。与安慰剂乳膏相比,使用包含2%美容化妆剂的7.1乳膏1个月和2个月后,不易察觉的水损失分别减少了1.7倍(p<0.1)和1.5倍(p<0.05)。
该体内试验证明了根据本发明的含有根据本发明的比例的两种分子的提取物改善有特应性倾向的皮肤的屏障功能的特性。
自我评估:
用包含2%美容化妆剂的乳膏处理14天后,大多数志愿者感受到皮肤状况改善:水化增加(82%,p<0.001)和更柔软(73%,p<0.01)。大多数乳膏安慰剂使用者没有显著感受到这种益处。处理56天后,使用根据本发明的7.1乳膏所感受到的益处保持不变,并且大多数志愿者报告他们的皮肤更柔软(73%,p<0.05)。
包含根据本发明的活性剂的乳膏7.1改善了表皮屏障功能(TEWL),有助于改善皮肤pH并且减少损伤,使用者报告皮肤更湿润、更柔软、更舒缓。
实施例7:美容化妆组合物
美容化妆活性剂为实施例5中的活性剂。
实施例7.1:用于有特异性倾向的干燥皮肤的身体乳膏
[表5]
Figure BDA0004003772160000261
Figure BDA0004003772160000271
根据本领域技术人员已知的常规方法,通过混合3相并且将组合物调节至pH 6.15制备乳膏。
实施例7.2:有特应性倾向的皮肤用润肤乳膏
[表6]
Figure BDA0004003772160000272
根据本领域技术人员已知的常规方法,通过混合4相并且将组合物调节至pH 4.9制备乳膏。
实施例7.3:泡沫
[表7]
Figure BDA0004003772160000281
根据本领域技术人员已知的常规方法,通过混合4相并且将组合物调节至pH 5制备乳膏。

Claims (11)

1.组合物,该组合物包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,其特征在于K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3。
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于所述组合物用于局部施用。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其特征在于紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合包含在植物提取物中,优选富含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的欧洲栗(Castanea sativa)叶提取物,其K/Q质量比为1/1.5至1/3.5,优选1/2至1/3.3。
4.根据权利要求3所述的组合物,其特征在于提取物通过在水中提取获得,优选温度为70℃至90℃,例如提取30分钟至2小时。
5.根据权利要求3至4中任一项所述的组合物,其特征在于提取物包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合,其量为0.001g/100mL提取物至1g/100mL提取物,优选0.01g/100mL提取物至0.1g/100mL提取物,特别是0.02g/100mL提取物至0.03g/100mL提取物。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物,其包含紫云英苷(K)和米奎莲宁(Q)的组合的含量为占组合物总质量的0.4%至0.6%。
7.美容化妆组合物,该美容化妆组合物包含权利要求1至6中任一项定义的组合物和美容化妆可接受的赋形剂。
8.根据权利要求7所述的美容化妆组合物的非治疗性美容化妆用途,用于防止和/或减少在健康皮肤和/或健康粘膜上金黄色葡萄球菌毒力的不适和/或不美观表现,和/或用于敏感的健康皮肤和/或粘膜、过敏的健康皮肤和/或粘膜、脆弱和/或虚弱的健康皮肤和/或粘膜、干燥的健康皮肤和/或粘膜,以及有特应性倾向的健康皮肤和/或粘膜的美容化妆处理,和/或作为舒缓剂或保湿剂。
9.美容化妆护理方法,其特征在于该方法包括在健康皮肤和/或健康粘膜的至少一个区域局部施用如权利要求7定义的美容化妆组合物,用于敏感的健康皮肤和/或健康粘膜、过敏的健康皮肤和/或健康粘膜、脆弱和/或虚弱的健康皮肤和/或健康粘膜、干燥的健康皮肤和/或健康粘膜,以及有特应性倾向的健康皮肤和/或健康粘膜的美容化妆处理,和/或作为舒缓剂或保湿剂。
10.药物和/或皮肤病学组合物,该组合物包含权利要求1至6中任一项定义的组合物和药学和/或皮肤病学上可接受的赋形剂。
11.根据权利要求10所述的药物和/或皮肤病学组合物,其用作抗炎剂、抗菌剂,和/或用于治疗和/或预防与金黄色葡萄球菌相关的皮肤和/或粘膜感染,例如湿疹、脂溢性皮炎或特应性皮炎、痤疮,和金黄色葡萄球菌引起的皮肤或粘膜炎症,和/或红斑,特别是婴儿的臀部红斑,和/或用于预防和/或治疗药物,特别是与反应性和/或特应性皮肤相关的疾病的皮肤学预防和/或治疗药物。
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