CN116239541B

CN116239541B - N-苯基-2-氧代喹唑啉类化合物及其应用

Info

Publication number: CN116239541B
Application number: CN202310525123.6A
Authority: CN
Inventors: 丁晓; 陈家隽; 刘小松; 孟庆元; 任峰; 王海龙
Original assignee: Insilicon Intelligent Technology Shanghai Co ltd
Current assignee: Insilicon Intelligent Technology Shanghai Co ltd
Priority date: 2023-05-11
Filing date: 2023-05-11
Publication date: 2023-07-21
Anticipated expiration: 2043-05-11
Also published as: CN116239541A

Abstract

本发明提供了一系列含N‑苯基‑2‑氧代喹唑啉类化合物，所述化合物被证明对MAT2A酶具有较好活性，因此可以用于预防和/或治疗由MTAP缺失导致的疾病、病症和病况。此外，该系列化合物制备方法简单，易于实施，因此具有一定的应用前景

Description

N-苯基-2-氧代喹唑啉类化合物及其应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及N-苯基-2-氧代喹唑啉类化合物及其在制备预防和/或治疗因MTAP缺失导致的疾病、病症和病况的药物中的用途。

背景技术

蛋氨酸腺苷转移酶(MAT)又称S-腺苷甲硫氨酸合成酶，是催化蛋氨酸和ATP合成S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)的细胞酶，被认为是蛋氨酸循环的限速步骤。在肝脏中，蛋氨酸循环有个额外的功能，主要是在高蛋氨酸或高蛋白饮食后，用以迅速清除血液中过高的蛋氨酸，最后通过同型半胱氨酸、半胱氨酸、胱硫醚、谷胱甘肽被转运到其它器官。MTAP(甲硫腺苷磷酸化酶)是一种广泛表达于正常组织的酶，催化MTA转化为腺嘌呤和5-甲硫核糖-1-磷酸。腺嘌呤被回收生成单磷酸腺苷，5-甲基硫核糖-1-磷酸转化为蛋氨酸和甲酸盐。由于这种补救途径，当嘌呤从头合成被阻断时，MTA可作为替代嘌呤的来源。

MAT酶主要有三个亚型，MAT1A、MAT2A与MAT2B。MAT1A主要存在于正常肝细胞中，而MAT2A则广泛分布于肝外细胞。这两个亚型在催化效率及调控方式上存在差异。MAT2B不具有催化合成SAM的能力，而是作为MAT2A的调节亚基，与MAT2A形成复合物后，调节MAT2A的催化活性。

MAT2A在包括红细胞、脑、胎儿肝脏、肾、胰腺组织在内的所有组织中均存在表达，但在成人肝脏组织中含量较少。人肝癌和结肠癌中MAT2A和MAT2B表达增加，人胃癌和他莫昔芬耐药性乳腺癌细胞中也报道了MAT2A表达增加。较高的MAT2A和MAT2B表达导致癌细胞生长、迁移和侵袭。总的来说，较低的MAT2A和MAT2B表达会导致细胞凋亡增加，细胞生长、迁移和转移减少。

一些MTAP缺失的癌细胞对MAT2A的抑制特别敏感。MTAP缺失不仅存在于组织培养细胞中，还存在于原发性白血病、胶质瘤、黑色素瘤、胰腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、膀胱癌、星形细胞瘤、骨肉瘤、头颈癌、粘液样软骨肉瘤、卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌、软组织肉瘤、非霍奇金淋巴瘤和间皮瘤。因此，开发有效的MAT2A抑制剂可改善因MTAP缺失导致癌症患者的生活质量。

发明内容

本发明提供如下式I所示的化合物，其互变异构体、立体异构体，或其药学上可接受的盐：

。

其中，R₁选自H、OH、NH₂、卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷基、-C_1-6烷基羟基、CN、3-10元含N杂环基、-N(C_1-6烷基)₂或-NHC_1-6烷基，所述3-10元含N杂环基任选被OH或NH₂取代；

R₂选自卤素或卤代C_1-6烷基；

R₃选自无取代，或任选被一个，两个或更多个Rs取代的如下基团：3-20元杂环基或-NH-C_6-20芳基；

Rs选自=O，卤素，卤代C_1-6烷基或C_1-6烷基。

在一些实施方案中，R₁选自OH，NH₂，任选被OH或NH₂取代的3-10元含N杂环基（例如N杂环丁基、N杂环戊基、N杂环己基），-N(C_1-3烷基)₂或-NHC_1-3烷基；

R₂选自卤素或卤代C_1-3烷基；

R₃选自无取代，或任选被一个，两个或更多个Rs取代的如下基团：3-12元杂环基或-NH-C_6-12芳基；

Rs选自=O，卤素，卤代C_1-3烷基或C_1-3烷基。

在一些实施方案中，R₃选自无取代，或任选被一个，两个或更多个Rs取代的3-12元含氮杂环基；在一些实施方案中，所述含氮杂环基中的N与羰基相连。

在一些具体的实施方案中，R₁选自OH，NH₂，二甲氨基或；

在一些具体的实施方案中，R₂选自Cl。

在一些具体的实施方案中，R₃选自如下基团：

。

在一些具体的实施方案中，所述化合物选自如下：

。

本发明还提供如上式I所示化合物的制备方法，包括如下步骤：

。

化合物Ia与化合物Ib反应得到式I所示化合物；

其中，R₁，R₂，R₃具有如上所述定义；

本发明还提供如上式I所示化合物，其互变异构体、立体异构体，或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗由MTAP缺失导致的疾病、病症和病况的药物中的用途。

根据本发明的实施方案，所述由MTAP缺失导致的疾病、病症和病况为MTAP缺失的肿瘤。

根据本发明的实施方案，所述MTAP缺失的肿瘤包括但不限于胶质瘤、间皮瘤、黑色素瘤、胃癌、食管癌、膀胱癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、星形细胞瘤、骨肉瘤、头颈癌、粘液性软骨肉瘤、卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌、软组织肉瘤或非霍奇金淋巴瘤。

本发明还提供一种药物组合物，其包括如上所述式I所示化合物，其互变异构体、立体异构体，或其药学上可接受的盐。

根据本发明的实施方案，所述药物组合物用于预防和/或治疗由MTAP缺失导致的疾病、病症和病况。

有益效果

本发明提供了一系列含N-苯基-2-氧代喹唑啉类化合物，所述化合物被证明对MAT2A酶具有较好活性，因此可以用于预防和/或治疗由MTAP缺失导致的疾病、病症和病况。此外，该系列化合物制备方法简单，易于实施，因此具有一定的应用前景。

术语定义和说明

除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当属于本申请说明书记载的范围内。

在本文中，术语“包括”、“包含”和/或“含有”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。

在本文中，术语“任选(的/地)”表示所述特征存在或不存在这两种情形，这意味着随后所描述的事件可以但不必然发生，因此包括该事件发生或不发生的两类情形。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着该烷基可以但不必然存在，因此包括被烷基取代的杂环基团和没有被烷基取代的杂环基团的情形。

本申请通式中“R₁，R₂，R₃”等的下标数字仅为标识不同的取代基，不代表R的个数。

本申请中部分取代基的“”处为连接位点。

在本文中，术语“卤素”表示氟、氯、溴和/或碘。

术语“C_1-6烷基”应理解为表示具有1、2、3、4、5、或6个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。所述烷基是例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基或1,2-二甲基丁基等或它们的异构体。特别地，所述基团具有1、2或3个碳原子（“C_1-3烷基”），例如甲基、乙基、正丙基或异丙基。

术语“3-10元含N杂环基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其含有1-3个选自N、O和S的杂原子且至少含有1个N原子，总成环原子数为3-10（如原子数为3、4、5、6、7、8、9、10等）。例如包括但不限于氮杂环丁烷或氮杂环戊烷。

术语“3-20元杂环基”意指饱和的一价单环或双环烃环，其包含1-5个独立选自N、O和S的杂原子，优选“3-12元杂环基”。术语“3-12元杂环基”意指饱和的一价单环或双环烃环，其包含1-5个，优选1-3个选自N、O和S的杂原子。所述杂环基可以通过所述碳原子中的任一个氮原子（如果存在的话）与分子的其余部分连接。特别地，所述杂环基可以包括但不限于：4元环，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基；5元环，如四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基；或6元环，如四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基或三噻烷基；或7元环，如二氮杂环庚烷基。任选地，所述杂环基可以是苯并稠合的。所述杂环基可以是双环的，例如但不限于5,5元环，如六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基环，或者5,6元双环，如六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基环。含氮原子的环可以是部分不饱和的，即它可以包含一个或多个双键，例如但不限于2,5-二氢-1H-吡咯基、4H-[1,3,4]噻二嗪基、4,5-二氢噁唑基，或4H-[1,4]噻嗪基，或者，它可以是苯并稠合的，例如但不限于二氢异喹啉基。根据本发明，所述杂环基还可以是螺环基或者桥环基，例如为或/>。

术语“C_6-20芳基”应理解为表示具有6~20个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环，优选“C_6-14芳基”。术语“C_6-14芳基”应理解为优选表示具有6、7、8、9、10、11、12个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环（“C_6-14芳基”），特别是具有6个碳原子的环（“C₆芳基”），例如苯基；或联苯基，或者是具有9个碳原子的环（“C₉芳基”），例如茚满基或茚基，或者是具有10个碳原子的环（“C₁₀芳基”），例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基，或者是具有13个碳原子的环（“C₁₃芳基”），例如芴基，或者是具有14个碳原子的环（“C₁₄芳基”），例如蒽基。

术语“5-20元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5~20个环原子且包含1-5个独立选自N、O和S的杂原子，例如“5-12元杂芳基”。术语“5-12元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5、6、7、8、9、10、11、12个环原子，特别是5或6或9或10个碳原子，且其包含1-5个，优选1-3个独立选自N、O和S的杂原子，并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻-4H-吡唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。

术语“卤代C_1-6烷基”，“-C_1-6烷基羟基”，“C_1-6烷氧基”，“-N(C_1-6烷基)₂”及“-NHC_1-6烷基”中C_1-6烷基具有如上所述定义。

在本文中，“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中如未注明具体条件的实验方法，通常按照这类反应的常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。除非另外说明，否则液体的比为体积比。

以下实施例中所用的实验材料和试剂如无特别说明均可从市售渠道获得。

其中，化学式或英文字母缩写代表的试剂中文名称如下：

PyBOP：六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷；DBU：1.8-二氮杂二环[5.4.0]十一烷-7-烯。

实施例 1：7-(2-(3-(7-氯-4-(二甲基氨基)-2-氧代喹唑啉-1(2H)-基)苯氧基)乙酰基)-2-甲基-2,7-二氮杂螺[4.5]癸-1-酮

。

步骤1：0摄氏度下往2,4,7-三氯喹唑啉 (2.0 g, 8.57 mmol) 的四氢呋喃 (20.0mL) 溶液中滴加二甲胺的四氢呋喃溶液 (2.0 M，4.71 mL, 9.42 mmol)。室温搅拌2个小时。浓缩后，加入100毫升水和100毫升乙醚，过滤干燥得到固体化合物1-1 (1.2 g, 产率57%)。LCMS: 242.0 [M+H]⁺。

步骤2：将化合物1-1 (1.2 g, 4.96 mmol) 的乙酸 (30.0 mL) 溶液加热到100摄氏度反应12个小时。浓缩后加入50毫升乙酸乙酯，室温搅拌30分钟。过滤干燥得到固体化合物1-2 (810.0 mg, 产率72%)。LCMS: 224.1 [M+H]⁺。

步骤3：往的二氯甲烷 (15.0 mL) 溶液中加入/>、乙酸铜 />和/>。在一个大气压的氧气下室温搅拌16个小时。加入甲醇，过滤。浓缩滤液后用柱层析纯化得到化合物1-3 (190.0 mg, 产率32% )。LCMS: 330.1 [M+H]⁺。

步骤4：-78摄氏度下往的二氯甲烷 (10.0mL) 溶液中加入三溴化硼 (273.5 mg, 1.09 mmol)。室温下反应1个小时。-78摄氏度下加入异丙醇淬灭反应。浓缩后加入水，调节pH=7。过滤干燥得到固体产物。LCMS: 316.1 [M+H]⁺。

步骤5：0摄氏度下往1-氧代-2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯 (1.0 g,3.94 mmol) 的四氢呋喃 (20.0 mL) 溶液中加入氢化钠 (142 mg, 5.91 mmol)，反应1个小时。加入碘甲烷 (839 mg, 5.91 mmol)，室温下继续反应2个小时。加入水和乙酸乙酯，有机相水洗干燥，浓缩后柱层析纯化得到化合物1-5 (940 mg, 收率 89%)。LCMS: 213.2 [M+H-56]⁺。

步骤6：室温下将化合物1-5 (940 mg, 3.50 mmol) 的盐酸乙酸乙酯 (10 mL) 溶液搅拌2个小时。反应液浓缩后，加入二氯甲烷 (20mL)。在0摄氏度下，加入三乙胺 (1.77g, 17.54 mmol)和2-氯乙酰氯 (792 mg, 7.01 mmol)。室温下反应2个小时。加入水和二氯甲烷，有机相水洗干燥，浓缩后用柱层析纯化得到化合物1-6 (720 mg, 收率 84%)。LCMS:245.0 [M+H]⁺。

步骤8：往化合物1-6 (50 mg, 0.20 mmol) 的N,N-二甲基甲酰胺 (2.0 mL) 溶液加入化合物1-4 (51.0 mg, 0.16 mmol) 和碳酸铯 (200 mg, 0.61 mmol)。加热到50摄氏度反应6个小时。冷却后加入水，用乙酸乙酯萃取。有机相水洗干燥，浓缩后用制备HPLC纯化得到化合物1 (6.64 mg, 收率 11%)。LCMS: 524 [M+H]⁺。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ7.99 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.45 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.8 Hz, 1H),7.07 - 7.01 (m, 1H), 6.85 (m, 2H), 6.33 (s, 1H), 4.97 - 4.64 (m, 2H), 3.87(m, 1H), 3.47 (m, 2H), 3.26 (s, 6H), 3.06 - 2.73 (m, 2H), 2.66 (s, 3H), 2.60(m, 1H), 1.82 - 1.42 (m, 6H)。

实施例2：2-(3-(7-氯-4-(二甲基氨基)-2-氧代喹唑啉-1(2H)-基)苯氧基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)乙酰胺

。

采用3-(三氟甲基)苯胺和化合物1-4作原料，参考化合物1的方法合成化合物2。LCMS: 517.0 [M+H]⁺。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.06 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.81(m, 2H), 7.51 (s, 1H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.10 (m, 2H), 6.94(s, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.48 (s, 6H)。

实施例3：(R)-7-氯-1-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)-2-氧代乙氧基)苯基)-4-(3-羟基吡咯烷-1-基)喹唑啉-2(1H)-酮

。

步骤1：往7-氯-1-(3-甲氧基苯基)喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮 (500.0 mg, 1.0mmol) 的乙腈 (10.0 mL) 溶液中加入(R)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷(831.0 mg, 2.5 mmol)、PyBOP (1.3 g, 1.5 mmol) 和DBU (880.0 mg, 3.5 mmol)。室温下搅拌16个小时。把反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机相水洗干燥，浓缩后用柱层析纯化得到化合物3-1 (518.0 mg, 收率64%)。 LCMS: 486.3 [M+H]⁺。

步骤2：往化合物3-1的二氯甲烷 (5.0 mL) 溶液中加入三溴化硼 (1.6 mL, 3.2mmol)。室温下搅拌4个小时。把反应液冷却到0摄氏度，加入甲醇 (50.0 mL) 淬灭。浓缩后得到化合物3-2的粗产品 (160.0 mg)。LCMS: 358.1 [M+H]。

步骤3：0摄氏度下往4,4-二氟哌啶 (500.0 mg, 4.1 mmol) 的二氯甲烷 (20 mL)溶液中加入三乙胺 (835.4 mg, 8.3 mmol) 和2-氯乙酰氯 (559.4 mg, 5.0 mmol)。室温搅拌16个小时。把反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取。有机相水洗干燥，浓缩后用硅胶柱层析纯化得到化合物3-3(438 mg, 收率 53%)。LCMS: 198.1 [M+H]⁺。

步骤4：向化合物3-2 (80.0 mg, 0.2 mmol) 的N,N-二甲基甲酰胺 (2.0 mL) 溶液中加入化合物3-3 (53.0 mg, 0.3 mmol) 和碳酸铯 (182 mg, 0.6 mmol)。加热到50摄氏度反应6个小时。冷却后加入水，用乙酸乙酯萃取。有机相水洗干燥，浓缩后用制备HPLC纯化得到化合物3 (9.0 mg, 收率 7%)。LCMS: 519.2 [M+H]⁺。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ7.92 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.52 - 7.48 (m, 1H), 7.08 (m, 2H), 6.93 (s, 1H),6.85 (s, 1H), 6.55 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.66 (s, 1H), 4.31-4.24(m, 1H), 4.12 (m, 1H), 4.05 - 4.00 (m, 2H), 3.72 (m, 4H), 2.22 - 2.09 (m,2H), 2.08-1.98 (m, 4H)。

实施例4：1-(3-(2-(3-氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-2-氧代乙氧基)苯基)-7-氯-4-((R)-3-羟基吡咯烷- 1-基）喹唑啉-2(1H)-酮

。

步骤1：0摄氏度下往3-氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷 (500.0 mg, 4.4 mmol) 的二氯甲烷 (20 mL)溶液中加入三乙胺 (894.2 mg, 8.8 mmol) 和2-氯乙酰氯 (598.8 mg,5.3 mmol)。室温搅拌16个小时。把反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取。有机相水洗干燥，浓缩后用硅胶柱层析纯化得到化合物4-1 (400 mg, 收率 47%)。LCMS: 190.1 [M+H]⁺。

步骤2：向化合物3-2 (80.0 mg, 0.2 mmol) 的N,N-二甲基甲酰胺 (2.0 mL) 溶液中加入化合物4-1 (51.0 mg, 0.3 mmol) 和碳酸铯 (182 mg, 0.6 mmol)。加热到50摄氏度反应6个小时。冷却后加入水，用乙酸乙酯萃取。有机相水洗干燥，浓缩后用制备HPLC纯化得到化合物4 (4.0 mg, 收率 3%)。LCMS: 511.2 [M+H]⁺。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ7.92 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.08 (m, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.85 (s,1H), 6.55 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.68 (m, 2H), 4.60 (m, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.25(m, 1H), 4.13 (m, 1H), 4.06 - 3.96 (m, 2H), 3.72 - 3.61 (m, 5H), 2.17- 1.91(m, 6H)。

实施例5：(R)-2-(3-(7-氯-4-(3-羟基吡咯烷- 1-基)-2-氧代喹唑啉-1(2H)-基)苯氧基)-N-苯基乙酰胺

。

采用苯胺作原料，用化合物4相似的方法得到化合物5。LCMS: 491.3 [M+H]⁺。¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.11 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 7.7 Hz, 2H), 7.54 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.32 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.18 (m,2H), 7.08 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.92 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.40(d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.42 (m, 1H), 3.94 (m, 2H),3.66 (m, 1H), 2.03-1.98 (m, 2H)。

实施例6：(R)-2-(3-(7-氯-4-(3-羟基吡咯烷-1-基)-2-氧代喹唑啉-1(2H)-基)苯氧基)- N-甲基乙酰胺

。

采用2-氯-N-甲基乙酰胺作原料，用化合物4相似的方法得到化合物6。LCMS:429.0 [M+H]⁺。¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.15 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 4.7 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 8.8, 1.9 Hz, 1H), 7.11- 7.09 (m, 1H), 6.90 (m, 2H), 6.37 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.13 (brs, 1H), 4.50(s, 2H), 4.40 (m, 1H), 4.06 - 3.84 (m, 2H), 3.65 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.05- 1.96 (m, 2H)。

实施例7：生物学实施例

酶反应过程：

(1) 配制 1× Assay buffer 。

(2) 化合物浓度梯度的配制：受试化合物测试浓度为起始1 μ M，3倍稀释，10个浓度，复孔测试。在384孔板中梯度稀释成100倍终浓度的10个不同浓度的溶液。然后用Echo550转移250 nL到384反应板中备用。阴性对照孔和阳性对照孔中分别加250 nL的100%DMSO。

(3) 用1× Assay buffer配制1.67倍终浓度的MAT2A酶溶液。

(4) 在化合物孔和阳性对照孔分别加15μL的1.67倍终浓度的MAT2A酶溶液；在阴性对照孔中加15 μL的1×Assay buffer。

(5) 1000rpm离心60秒，振荡混匀后孵育15分钟。

(6) 用1× Assay buffer 配制25倍终浓度的底物混合溶液。

(7) 加入10 μL的2.5 倍终浓度的底物混合溶液，起始反应。

(8) 将384孔板1000rpm离心60秒振荡混匀后孵育150分钟。

(9) 加入50μLBiomol终止反应，1000 rpm离心60秒后孵育15分钟。读取 OD620，处理数据。

数据分析：

计算公式

% Inhibition =(OD620_max−OD620_sample)/(OD620_max−OD620_min)×100

其中：OD620 _sample 是样品孔吸光值；OD620 _min：阴性对照孔吸光值，代表没有MAT2A酶活孔的读数；OD620 _max：阳性对照孔吸光值，代表没有化合物抑制孔的读数。

拟合量效曲线

以浓度的log值作为X轴，百分比抑制率为Y轴，采用分析软件 GraphPad Prism 5的 log(inhibitor) vs. response-Variable slope 拟合量效曲线，从而得出各个化合物对酶活性的IC₅₀值。

化合物1-6的活性数据如下表1所示：

表1

化合物	IC₅₀(nM)
		1	7.2
2	17.6
		3	14.3
4	11.9
		5	7.5
6	>1000

以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.式I所示的化合物，其立体异构体，或其药学上可接受的盐：其中，R₁选自被OH或NH₂取代的N杂环丁基、被OH或NH₂取代的N杂环戊基、被OH或NH₂取代的N杂环己基，-N(C_1-3烷基)₂或-NHC_1-3烷基；

R₂选自卤素；

Rs选自=O，卤素，卤代C_1-3烷基或C_1-3烷基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其立体异构体，或其药学上可接受的盐，其特征在于，R₃选自无取代，或任选被一个，两个或更多个Rs取代的3-12元含氮杂环基；所述含氮杂环基中的N与羰基相连。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其立体异构体，或其药学上可接受的盐，其特征在于，R₁选自二甲氨基或；

R₂选自Cl；

R₃选自如下基团：。

4.如下所示的化合物，其立体异构体，或其药学上可接受的盐：

。

5.权利要求1-4任一项所述化合物，其立体异构体，或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗由MTAP缺失导致的疾病、病症或病况的药物中的用途。

6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述由MTAP缺失导致的疾病、病症或病况为MTAP缺失的肿瘤。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述MTAP缺失的肿瘤选自：胶质瘤、间皮瘤、黑色素瘤、胃癌、食管癌、膀胱癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、星形细胞瘤、骨肉瘤、头颈癌、粘液性软骨肉瘤、卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌、软组织肉瘤或非霍奇金淋巴瘤。

8.一种药物组合物，其包括权利要求1-4任一项所述化合物，其立体异构体，或其药学上可接受的盐。

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物用于预防和/或治疗由MTAP缺失导致的疾病、病症或病况。