CN116076443B - 一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置、方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于植物保护领域，提供了一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置、方法及应用。该稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置包括托盘和培养杯，托盘上设有多个用于固定培养杯的固定孔，培养杯包括杯体和杯盖，杯盖上设有透气孔。本发明提供的稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置的培养杯和托盘可以多套叠放、节省空间、每个培养杯中单头虫独立饲养，减少因供试昆虫本身或群集造成的误差，提高生物测定结果的精确度。
Description
技术领域
本发明属于植物保护领域，具体涉及一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置、方法及应用。
背景技术
稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)又名刮青虫、白叶虫、苞叶虫等，属鳞翅目(Lepidoptera)螟蛾科(Pyralidae)，是水稻上重要的迁飞性害虫，广泛分布在我国各稻区，是我国长江流域以及南方稻区常发性害虫。稻纵卷叶螟的主要寄主植物包括水稻、小麦、玉米、甘蔗和大麦等农作物及一些杂草。其幼虫是造成危害的主要虫态，通过啃食寄主植物叶片的表皮和叶肉组织，造成田间枯白，对粮食安全构成严重威胁。稻纵卷叶螟具有世代重叠、为害周期长等特点，适宜条件下易在同一地区连年爆发，对农业生产造成严重损失。
由于稻纵卷叶螟危害的严重性，科研工作者展开了一系列研究，目的在于摸清其种群适合度、生长规律等特性，阐明生理生化等因素对该虫种群生长的影响，以期在该虫的防治方面做出重要突破。生物测定手段能够客观反应供试昆虫的生存状态，然而现有技术没有专门针对稻纵卷叶螟的生物测定方法。针对其他昆虫的生物测定方法，如蚜虫、叶螨等，由于昆虫种类不同、生长特性不同，而不适合直接用于稻纵卷叶螟的生物测定。
因此，本发明提供一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置、方法及应用，该方法具有操作简单、数据准确等优点，具有良好的应用前景。
发明内容
为了解决现有技术中没有专门针对稻纵卷叶螟的生物测定手段的问题，本发明提供了一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置。
该稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置包括托盘和培养杯，所述托盘上设有多个用于固定所述培养杯的固定孔，所述培养杯包括杯体和杯盖，所述杯盖上设有透气孔。
进一步地，所述透气孔的数量为4-6个，所述透气孔为直径小于等于2毫米大于等于0.5毫米的圆孔。
进一步地，所述托盘为长度为35厘米，宽度为30厘米的长方形，所述固定孔的个数为30个；
所述固定孔和所述杯体为锥台，所述固定孔的内径和所述杯体底部外径一致，所述杯体的顶端外径为5厘米，底端外径为3.1厘米，高度为3厘米。
本发明的一个目的是提供一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法。
该稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法包括以下步骤：
S1：在所述稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置的多个所述杯体内部底端平铺厚度0.3-0.7厘米，质量分数为1％的琼脂，待凝固后备用；
S2：将待测试叶片放入所述培养杯，所述待测试叶片为大小一致的离体叶片；
S3：在所述培养杯中接入稻纵卷叶螟幼虫，所述稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置置于恒温培养箱中，
S4：在24、48、72、96h后检查所述稻纵卷叶螟幼虫的死亡情况，统计死亡率，计算存活幼虫体重增长量和生长速率。
进一步地，所述死亡率为不同处理后稻纵卷叶螟幼虫的死亡率，其计算方法为(最终死亡虫数/总样本量)×100％；
所述体重增长量的计算方法为终体重减去初始体重的值；
所述生长速率的计算方法为((终体重-初始体重)/时间)×100％。
进一步地，每个所述培养杯中接入的所述稻纵卷叶螟幼虫的数量为1头；
所述稻纵卷叶螟幼虫选自初孵幼虫或任一龄期第一天的幼虫。
进一步地，所述待测试叶片包括对照组和实验组，所述对照组为正常生长的离体植物叶片，所述实验组为经过杀虫剂、杀菌剂、微生物制剂和/或植物生长调节剂处理过的离体植物叶片。
进一步地，所述恒温培养箱中所述稻纵卷叶螟幼虫的培养过程中环境温度为27℃±2℃，相对湿度为70％±5％，光周期为14L：10D，光照强度为2000Lux。
本发明的一个目的是提供一种如上任一项所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法在植物保护领域的应用。
本发明提供的稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置采用独立培养杯和托盘、琼脂保湿、单头虫独立饲养，节省空间，操作便捷，减少因供试昆虫本身或群集造成的误差，提高生物测定结果的精确度。本发明提供的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法操作简单、数据准确等优点，填补了没有专门针对稻纵卷叶螟的生物测定手段的空白，有利于植物保护领域摸清其种群适合度、生长规律等生长特性指标，及生理生化等因子对该虫的影响，在该虫的防治方面做出重要突破。
附图说明
图1为本发明提供的培养杯；
图2为本发明提供的托盘；
图3为本发明提供的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法流程图。
标记说明：
100-培养杯、11-透气孔、12-杯盖、13-杯体、200-托盘、21-固定孔。
具体实施方式
为了使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。
本发明提供了一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置，参阅说明书图1和图2，该纵卷叶螟幼虫生物测定装置包括托盘200和培养杯100。
托盘200设有多个用于固定培养杯100的固定孔21，托盘200为长度为35厘米，宽度为30厘米的长方形，固定孔21的个数为30个。优选地，托盘200材质为塑料，可重复利用。
本发明提供的稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置的培养杯和托盘可以多套叠放、节省空间、每个培养杯中单头虫独立饲养，减少因供试昆虫本身或群集造成的误差，提高生物测定结果的精确度。
培养杯100包括杯体13和杯盖12，杯盖上设有透气孔11。透气孔11的数量为4-6个，透气孔11为直径小于等于2毫米大于等于0.5毫米的圆孔。杯体13和固定孔21为锥台，固定孔21的内径和杯体13底部外径一致。杯体13的顶端外径为5厘米，底端外径为3.1厘米，高度为3厘米，容量为30毫升。透气孔11的设置保证了培养杯100中温度、湿度条件和外界环境保持一致。培养杯100用透明材质制成，优选透明塑料便于观测内部情况。
本发明提供一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法，在稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法中使用稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置对稻纵卷叶螟幼虫进行培养和观测。
参阅说明书图3，稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法包括以下步骤：
S1：在稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置的多个所述杯体内部底端平铺厚度0.3-0.7厘米，质量分数为1％的琼脂，待凝固后备用，优选地，平铺琼脂的厚度为0.5厘米；
S2：将待测试叶片放入所述培养杯，所述待测试叶片为大小一致的离体叶片；
S3：在所述培养杯中接入稻纵卷叶螟幼虫，所述稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置置于恒温培养箱中；
S4：在24、48、72、96h后检查所述稻纵卷叶螟幼虫的死亡情况，统计死亡率，计算存活幼虫体重增长量和生长速率。
本发明提供的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法中采用琼脂保湿，可保持离体叶片在6天内具有较好的新鲜度。待测试叶片为稻纵卷叶螟幼虫的常见寄主，如水稻、小麦、玉米等，水稻、小麦叶片用剪刀剪成大小一致的长条形，玉米叶片较宽大，采用打孔器获取大小一致的圆形叶盘。
进一步地，死亡率的计算方法为(最终死亡虫数/总样本量)×100％；
体重增长的计算方法为终体重减去初始体重的值；
生长速率的计算方法为((终体重-初始体重)/时间)×100％。
进一步地，每个培养杯中接入的稻纵卷叶螟幼虫的数量为1头；
稻纵卷叶螟幼虫选自初孵幼虫或任一龄期第一天的幼虫。稻纵卷叶螟幼虫为实验室饲养多代的敏感种群。
每个培养杯中接入1头稻纵卷叶螟幼虫，减少因供试昆虫本身或群集造成的误差，提高生物测定结果的精确度。
进一步地，待测试叶片包括对照组和实验组，对照组为正常生长的离体植物叶片，实验组为经过杀虫剂、杀菌剂、微生物制剂和/或植物生长调节剂处理过的离体植物叶片。处理方法包括拌种、植株喷雾或经害虫取食诱导抗虫性的植株或浸泡离体叶片。
进一步地，恒温培养箱中所述稻纵卷叶螟幼虫的培养过程中环境温度为27℃±2℃，相对湿度为70％±5％，光周期为14L：10D，光照强度为2000Lux。
本发明还提供以上任一项所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法在植物保护领域的应用。
本发明所涉及的稻纵卷叶螟幼虫死亡率的标准是用软毛笔轻轻触碰后虫体不动的即为死亡。
实施例1
研究对象为实验室内连续饲养多代的稻纵卷叶螟敏感种群，供试药剂为杜邦倍内威，供试植物分别为水稻、小麦和玉米。本实施例侧重研究杜邦倍内威对低龄(1龄、2龄和3龄)稻纵卷叶螟幼虫的死亡率的影响，杜邦倍内威的使用浓度根据说明书进行配置。
用剪刀将生长情况一致的各组植物叶片沿叶基部剪下，用清水洗涤，控干水分；然后用剪刀将水稻和小麦叶片剪成长度约3cm的叶条，将玉米叶片平铺于桌面，用打孔器将玉米叶片打成直径为3cm的叶碟；将对照组叶条和小叶碟浸入清水中15s，将实验组叶条和叶碟浸入杜邦倍内威药液中15s，晾干后，用镊子分别夹取对照组或者实验组水稻或小麦叶条2根或玉米小叶碟1片，放入含有1％琼脂层的培养杯中。每个培养杯中分别接入1头初孵幼虫，或2龄第一天幼虫，或3龄第一天幼虫，不同龄期不同寄主植物叶片组的幼虫样本量为30。用培养杯杯盖封口，将9个托盘成套叠放，置于条件为温度27℃±2℃，相对湿度70％±5％，光周期14L：10D，光照强度2000Lux的人工气候箱中饲养。在24、48、72、96h后检查稻纵卷叶螟幼虫的死亡情况，统计死亡率，计算存活幼虫体重增长量和生长速率。对照组稻纵卷叶螟的死亡率应不高于10％，实验重复3次。
Claims (8)
1.一种稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：在稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置的多个培养杯的杯体内部底端平铺厚度约为0.5厘米，质量分数为1％的琼脂，待凝固后备用；
S2：将待测试叶片放入所述培养杯，所述待测试叶片为大小一致的离体叶片；
S3：在所述培养杯中接入稻纵卷叶螟幼虫，所述稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置置于恒温培养箱中；
S4：在24、48、72、96h后检查所述稻纵卷叶螟幼虫的死亡情况，统计死亡率，计算存活幼虫体重增长量和生长速率，
所述稻纵卷叶螟幼虫生物测定装置包括托盘和所述培养杯，所述托盘上设有多个用于固定所述培养杯的固定孔，所述培养杯包括所述杯体和杯盖，所述杯盖上设有透气孔。
2.如权利要求1所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法，其特征在于，
所述死亡率的计算方法为(最终死亡虫数/总样本量)×100％；
所述体重增长量的计算方法为终体重减去初始体重的值；
所述生长速率的计算方法为((终体重-初始体重)/时间)×100％。
3.如权利要求1所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法，其特征在于，
每个所述培养杯中接入的所述稻纵卷叶螟幼虫的数量为1头；
所述稻纵卷叶螟幼虫选自初孵幼虫或任一龄期第一天的幼虫。
4.如权利要求1所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法，其特征在于，所述待测试叶片包括对照组和实验组，所述对照组为正常生长的离体植物叶片，所述实验组为经过杀虫剂、杀菌剂、微生物制剂和/或植物生长调节剂处理过的离体植物叶片。
5.如权利要求1所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法，其特征在于，所述恒温培养箱中所述稻纵卷叶螟幼虫的培养过程中环境温度为27℃±2℃，相对湿度为70％±5％，光周期为14L：10D，光照强度为2000Lux。
6.如权利要求1所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法，其特征在于，
所述透气孔的数量为4-6个，所述透气孔为直径小于等于2毫米大于等于0.5毫米的圆孔。
7.如权利要求1所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法，其特征在于，
所述托盘为长度为35厘米，宽度为30厘米的长方形，所述固定孔的个数为30个；
所述固定孔和所述杯体为锥台，所述固定孔的内径和所述杯体底部外径一致，所述杯体的顶端外径为5厘米，底端外径为3.1厘米，高度为3厘米。
8.权利要求1-7任一项所述的稻纵卷叶螟幼虫生物测定方法在植物保护领域的应用。
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