CN115932189A - 嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途和检测3-甲硫基丙醛的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种嗅觉受体在识别3‑甲硫基丙醛中的用途和检测3‑甲硫基丙醛的方法。嗅觉受体在识别3‑甲硫基丙醛中的用途，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244‑3、MOR256‑17和MOR180‑1；所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值，基于所述响应值，确定所述待测样品中是否含有3‑甲硫基丙醛，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244‑3、MOR256‑17和MOR180‑1。本发明的嗅觉受体可快速识别出3‑甲硫基丙醛，且可对酒水、水果或水果制品等产品中的3‑甲硫基丙醛进行检测，以确定上述产品的新鲜程度或所含水果种类。

Description

嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途和检测3-甲硫基丙醛的方法
技术领域
本发明涉及化学检测技术领域，具体地，本发明涉及一种嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途和检测3-甲硫基丙醛的方法，更具体地，本发明涉及一种嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途、3-甲硫基丙醛在激活嗅觉受体中的用途、检测3-甲硫基丙醛的方法，检测酒水、水果或水果制品新鲜程度的方法，检测食品中所含有的水果种类的方法，区分啤酒或红酒的方法和监测水果制品是否进行高温消毒处理的方法。
背景技术
嗅觉受体(ORs)，也称为气味受体，是在嗅觉神经元(OSN)的细胞膜中表达的化学感受器。被气味剂激活的嗅觉受体触发神经冲动，将有关气味的信息传递到大脑。这些受体是G蛋白偶联受体(GPCR)，位于嗅觉神经元树突尖端的细胞表面膜上。嗅觉受体形成一个多基因家族，人类有大约400个基因，小鼠有大约1200个基因。
3-甲硫基丙醛(methional，CAS号为3268-49-3)，俗称蛋黄醛，为一种无色或淡黄色的液体，其分子结构同时包含一个甲硫基和一个醛基，呈现出烤土豆、洋葱或薯片等气味特征。3-甲硫基丙醛广泛存在于水果、水果制品和酒类产品中。但是，目前尚未出现有关检测3-甲硫基丙醛的嗅觉受体的报道。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提供了一种嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途、3-甲硫基丙醛在激活嗅觉受体中的用途、检测3-甲硫基丙醛的方法，检测酒水、水果或水果制品新鲜程度的方法，检测食品中所含有的水果种类的方法，区分啤酒或红酒的方法和监测水果制品是否进行高温消毒处理的方法，本发明的嗅觉受体可快速识别出3-甲硫基丙醛，且可对酒水、水果或水果制品中的3-甲硫基丙醛进行检测，以检测酒水、水果或水果制品的新鲜程度或食品所含有的水果种类。
本发明是基于发明人的下列发现而完成的：
3-甲硫基丙醛广泛存在于水果、水果制品、燕麦粉、清酒、葡萄酒、啤酒和白酒等食品中。研究表明，榴莲、芒果等水果富含3-甲硫基丙醛，北京烤鸭中也能检测到-甲硫基丙醛。但在鲜榨的菠萝汁中很难检测到3-甲硫基丙醛，而在经过巴斯德消毒的商品化菠萝汁中是气味最强的物质之一。此外，新鲜的酒水(即为新酒)不含3-甲硫基丙醛，但储存一段时间后的酒水(即为老酒)中含有3-甲硫基丙醛，且储存时间越长含量越高。
基于此，发明人经过大量实验发现，采用MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1以及OR2C1四种嗅觉受体，均能对3-甲硫基丙醛进行检测，且具有检测灵敏度高等优点。具体地，发明人在人的嗅觉受体库和小鼠的嗅觉受体库中选择了部分嗅觉受体，然后采用不同浓度的3-甲硫基丙醛刺激表达不同嗅觉受体的细胞。结果发现，小鼠嗅觉受体MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1、以及人类嗅觉受体OR2C1可以被不同程度的激活，其中小鼠嗅觉受体MOR244-3和MOR256-17在30μM 3-甲硫基丙醛的刺激下即可产生显著响应。并且，发明人还采用分别含有MOR244-3和MOR256-17的细胞对不同的水果、水果制品和酒水中的3-甲硫基丙醛进行检测，其中，对鲜榨橙汁、鲜榨西柚汁和鲜榨芒果汁的检测结果与研究报道的结果一致。此外，发明人还采用分别含有MOR244-3和MOR256-17的细胞对未经过巴斯德消毒处理的菠萝汁和经过巴斯德消毒处理的菠萝汁进行了检测，结果发现，相较于新鲜的菠萝汁，巴斯德消毒处理后的菠萝汁的3-甲硫基丙醛显著提高，检测结果与研究报道的结果一致。因此，可采用嗅觉受体对水果制品(例如菠萝汁)的高温消毒情况进行检测。
在本发明的第一方面，本发明提出了一种嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途。根据本发明的实施例，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，用3-甲硫基丙醛分别刺激MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1后，MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1均可被激活，由此，可利用上述嗅觉受体有效地鉴定出3-甲硫基丙醛，为3-甲硫基丙醛的鉴定以及含有3-甲硫基丙醛的样品检测奠定基础。
在本发明的第二方面，本发明提出了一种3-甲硫基丙醛在激活嗅觉受体中的用途，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，用3-甲硫基丙醛分别刺激MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1后，MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1均可被激活，由此，可利用上述嗅觉受体有效地鉴定出3-甲硫基丙醛，为3-甲硫基丙醛的鉴定以及含有3-甲硫基丙醛的样品检测奠定基础。
在本发明的第三方面，本发明提出了一种检测3-甲硫基丙醛的方法。根据本发明的实施例，所述包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品中是否含有3-甲硫基丙醛；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，3-甲硫基丙醛可激活上述嗅觉受体，若待测样品中含有3-甲硫基丙醛，将待测样品与上述嗅觉受体接触，上述嗅觉受体被激活，得到嗅觉受体激活后的响应值，根据响应值可确定待测样品中是否含有3-甲硫基丙醛。
在本发明的第四方面，本发明提出了一种检测酒水、水果或水果制品新鲜程度的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品的新鲜程度；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，3-甲硫基丙醛可激活上述嗅觉受体，若待测样品中含有3-甲硫基丙醛，将待测样品与上述嗅觉受体接触，上述嗅觉受体被激活，可得到激活后的响应值，根据响应值可确定待测样品中含有3-甲硫基丙醛的情况，并通过不同待测样品中含有3-甲硫基丙醛的情况以确定其新鲜程度。
在本发明的第五方面，本发明提出了一种检测食品中所含有的水果种类的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品中所含有的水果种类；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1；所述待测样品中仅含有一种水果。发明人经过实验发现，含有不同水果的食品(例如经研磨得到的果浆、鲜榨果汁以及包含果汁的饮品等)中含有不同浓度的3-甲硫基丙醛，通过将待测样品与上述嗅觉受体接触，上述嗅觉受体被激活，可得到激活后的响应值，根据响应值可确定待测样品中含有3-甲硫基丙醛的情况，从而确定食品中水果的种类。
在本发明的第六方面，本发明提出了一种区分啤酒或红酒的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将多种待测产品与嗅觉受体接触，分别确定多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值，多种所述待测产品为啤酒和/或红酒；基于多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值，确定所述待测产品的种类；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，相较于红酒，啤酒中3-甲硫基丙醛的含量更高，通过将待测样品与上述嗅觉受体接触，待测样品中3-甲硫基丙醛会激活上述嗅觉受体，得到相应的响应值，根据响应值可确定待测样品中含有3-甲硫基丙醛的情况，并通过含有3-甲硫基丙醛的情况以确定多种待测样品是否为种类产品或确定多种待测样品中的种类。
在本发明的第七方面，本发明提出了一种监测水果制品是否进行高温消毒处理的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品是否进行高温消毒处理；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验，一些水果制品(例如菠萝制品)经过巴斯德消毒处理后，水果制品中的3-甲硫基丙醛会明显增多，将水果制品与上述嗅觉受体接触，若嗅觉受体被激活后可得到相应的响应值，通过将该响应值与或未经过高温消毒处理的水果制品的响应值比较，可判断该水果制品是否经过高温消毒处理，用于监测水果制品的高温消毒处理环节，以确保水果制品的加工情况。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1为本发明实施例1中4个嗅觉受体响应3-甲硫基丙醛的剂量曲线图；
图2为本发明实施例3中MOR244-3和MOR256-17对鲜榨橙汁和鲜榨芒果汁中3-甲硫基丙醛的相对响应强度；
图3为本发明实施例4中MOR244-3和MOR256-17对鲜榨橙汁、鲜榨西柚汁和鲜榨芒果汁中3-甲硫基丙醛的相对响应强度；
图4为本发明实施例5中MOR244-3和MOR256-17对鲜榨橙汁和3种橙汁饮品中3-甲硫基丙醛的相对响应强度；
图5为本发明实施例6中MOR244-3和MOR256-17对鲜榨芒果汁和浓缩还原芒果汁中3-甲硫基丙醛的相对响应强度；
图6为本发明实施例7中MOR244-3和MOR256-17对鲜榨菠萝汁和巴斯德消毒处理的加工菠萝汁中3-甲硫基丙醛的相对响应强度；
图7为本发明实施例8中MOR244-3和MOR256-17对纯生啤酒、黑啤和红酒中3-甲硫基丙醛的相对响应强度。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
为了更容易理解本发明，以下具体定义了某些技术和科学术语。除显而易见在本文件中的它处另有明确定义，否则本文中使用的所有其它技术和科学术语都具有本发明所属领域的一般技术人员通常理解的含义。
在本文中，术语“包含”或“包括”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。
在本文中，术语“任选地”、“任选的”或“任选”通常是指随后所述的事件或状况可以但未必发生，并且该描述包括其中发生该事件或状况的情况，以及其中未发生该事件或状况的情况。
本发明提出了一种嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途、3-甲硫基丙醛在激活嗅觉受体中的用途、检测3-甲硫基丙醛的方法，检测酒水、水果或水果制品新鲜程的方法，检测食品中所含有的水果种类的方法，区分啤酒或红酒的方法和监测水果制品是否进行高温消毒处理的方法，下面将分别对其进行详细描述。
用途
在本发明的第一方面，本发明提出了一种嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途。根据本发明的实施例，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，用3-甲硫基丙醛分别刺激MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1，上述四种嗅觉受体均可被激活，由此，可利用上述嗅觉受体有效地鉴定出3-甲硫基丙醛，为含有3-甲硫基丙醛样品的检测奠定基础。
需要说明的是，若3-甲硫基丙醛刺激嗅觉受体后，嗅觉受体被激活，即为“嗅觉受体可识别3-甲硫基丙醛”；若3-甲硫基丙醛刺激嗅觉受体后，嗅觉受体未被激活，即为“嗅觉受体不可识别3-甲硫基丙醛”。
根据本发明的实施例，所述识别或激活是通过嗅觉受体的活性变化体现的。
根据本发明的实施例，所述活性变化包括如下信号变化的至少之一：cAMP、IP3、钙离子、电流和pH。
根据本发明的实施例，所述识别是通过嗅觉受体下游的cAMP增加体现的。发明人经过实验发现，3-甲硫基丙醛刺激表达嗅觉受体的细胞，嗅觉受体被激活后，细胞内的cAMP浓度升高，通过检测cAMP浓度变化，即可确定嗅觉受体是否能够识别3-甲硫基丙醛。
在本发明的第二方面，本发明提出了一种3-甲硫基丙醛在激活嗅觉受体中的用途，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，用3-甲硫基丙醛刺激MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1后，上述四种嗅觉受体均可被激活，由此，利用上述嗅觉受体可有效地鉴定出3-甲硫基丙醛，为3-甲硫基丙醛的鉴定以及含有3-甲硫基丙醛的样品检测奠定基础。
根据本发明的实施例，所述激活是通过嗅觉受体下游的cAMP增加体现的。发明人经过实验发现，3-甲硫基丙醛刺激表达上述多种嗅觉受体的细胞，若嗅觉受体被激活后，细胞内的cAMP浓度升高，通过检测cAMP浓度变化，最终确定3-甲硫基丙醛能够激活上述四种嗅觉受体。
方法
在本发明的第三方面，本发明提出了一种检测3-甲硫基丙醛的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品中是否含有3-甲硫基丙醛；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，3-甲硫基丙醛可激活上述嗅觉受体，若待测样品中含有3-甲硫基丙醛，将待测样品与上述嗅觉受体接触，上述嗅觉受体可被激活，得到激活后的响应值，根据响应值可确定待测样品中是否含有3-甲硫基丙醛。
根据本发明的实施例，所述嗅觉受体存在响应值是所述待测样品中含有3-甲硫基丙醛的指示；或者，所述嗅觉受体不存在响应值是所述待测样品中不含有3-甲硫基丙醛的指示。
需要说明的是，“不含有3-甲硫基丙醛的指示”是指待测样品中完全不存在3-甲硫基丙醛；或者待测样品中存在少量的3-甲硫基丙醛，但不能被检测出来。
根据本发明的实施例，所述嗅觉受体选自MOR244-3和/或MOR256-17，所述嗅觉受体存在响应值是所述待测样品中含有3-甲硫基丙醛的指示或含有不低于30μM的3-甲硫基丙醛的指示；或者，所述嗅觉受体不存在响应值是所述待测样品中不含有3-甲硫基丙醛的指示或含有低于30μM的3-甲硫基丙醛的指示。
根据本发明的实施例，所述嗅觉受体选自MOR180-1和/或OR2C1，所述嗅觉受体存在响应值是所述待测样品中含有3-甲硫基丙醛的指示或含有不低于100μM的3-甲硫基丙醛的指示；或者，所述嗅觉受体不存在响应值是所述待测样品中不含有3-甲硫基丙醛的指示或含有低于100μM的3-甲硫基丙醛的指示。
根据本发明的实施例，所述方法进一步包括：基于标准曲线，确定所述待测样品中3-甲硫基丙醛的含量，所述标准曲线为预定量3-甲硫基丙醛与嗅觉受体响应值对应曲线。由此，可对待测样品中3-甲硫基丙醛的含量进行检测。
在本发明的第四方面，本发明提出了一种检测酒水、水果或水果制品新鲜程度的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品的新鲜程度；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，3-甲硫基丙醛可激活上述嗅觉受体，若待测样品中含有3-甲硫基丙醛，将待测样品与上述嗅觉受体接触，上述嗅觉受体可被激活，得到激活后的响应值，根据响应值可确定待测样品中含有3-甲硫基丙醛的情况，并通过不同待测样品中含有3-甲硫基丙醛的情况以确定其新鲜程度。
根据本发明的实施例，所述方法进一步包括：将对照样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值，所述对照样品为新鲜的酒水、水果或水果制品；所述待测样品的响应值与所述对照样品的响应值不存在显著性差异是所述待测样品新鲜的指示；或者，所述待测样品的响应值与所述对照样品的响应值存在显著性差异是所述待测样品不新鲜的指示。发明人经过将待检测的酒水、水果或水果制品中的3-甲硫基丙醛响应值(检测组)与已知的新鲜的酒水、水果或水果制品中的3-甲硫基丙醛响应值(对照组)进行比较，通过分析检测组和对照组的响应值的差异性，可快速对待测样品的新鲜程度进行检测。
在本发明的第五方面，本发明提出了一种检测食品中所含有的水果种类的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品中所含有的水果种类；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1；所述待测样品中仅含有一种水果。发明人经过实验发现，含有不同水果的食品(例如经研磨得到的果浆、鲜榨果汁以及包含果汁的饮品等)中含有不同浓度的3-甲硫基丙醛，通过将待测样品与上述嗅觉受体接触，上述嗅觉受体被激活，可得到激活后的响应值，根据响应值可确定待测样品中含有3-甲硫基丙醛的情况，从而确定食品中水果的种类。
根据本发明的实施例，所述方法进一步包括：将所述响应值与多种已知水果的响应值比较，确定所述待测样品中所含有的水果种类。发明人经过将待测样品的响应值和多种已知水果的响应值比较，找到与待测样品的响应值最接近的响应值所对应的水果，即为待测样品中含有的水果种类。
根据本发明的实施例，所述食品选择鲜榨果汁。
根据本发明的实施例，所述多种已知水果包括橙、西柚、芒果和菠萝。
在本发明的第六方面，本发明提出了一种区分啤酒或红酒的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将多种待测产品与嗅觉受体接触，分别确定多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值，多种所述待测产品为啤酒和/或红酒；基于多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值，确定所述待测产品的种类；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验发现，相较于红酒，啤酒中3-甲硫基丙醛的含量更高，通过将待测样品与上述嗅觉受体接触，待测样品中3-甲硫基丙醛会激活上述嗅觉受体，得到相应的响应值，根据响应值可确定待测样品中含有3-甲硫基丙醛的情况，并通过含有3-甲硫基丙醛的情况以确定多种待测样品是否为种类产品，或者进一步的确定多种待测样品中的种类。
根据本发明的实施例，多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值不存在显著性差异是多种所述待测产品为啤酒或红酒的指示。由此，可快速检测出多种待测样品是否为同一种酒类。
根据本发明的实施例，多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值不低于第一预设数值是多种所述待测产品为啤酒的指示；或者，多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值低于第一预设数值是多种所述待测产品为红酒的指示。由此，可进一步快速区分出待测样品为啤酒或红酒。
需要说明的是，第一预定数值是指经过实验得到的用于区分啤酒和红酒的响应值，其可根据不同的检测方法而确定，例如，通过对cAMP浓度的变化进行检测，可将第一预设数值设定为500。
根据本发明的实施例，多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值存在显著性差异，是所述待测产品为啤酒和红酒的指示。由此，可快速区分出待测样品中的啤酒或红酒。
根据本发明的实施例，多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值存在显著性差异，所述嗅觉受体的响应值不低于第一预设数值是所对应的待测产品为啤酒的指示，所述嗅觉受体的响应值低于第一预设数值是对应的待测产品为红酒的指示。由此，可进一步快速区分出待测样品中的啤酒或红酒。
在本发明的第七方面，本发明提出了一种监测水果制品是否进行高温消毒处理的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；基于所述响应值，确定所述待测样品是否进行高温消毒处理；其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1。发明人经过实验，一些水果制品(例如菠萝制品)经过高温消毒处理后，水果制品中的3-甲硫基丙醛会明显增多，将水果制品与上述嗅觉受体接触，若嗅觉受体被激活后可得到相应的响应值，通过将该响应值与或未经过高温消毒处理的水果制品的响应值比较，可判断该水果制品是否经过高温消毒处理，用于监测水果制品的消毒处理环节，以确保水果制品的加工情况。
根据本发明的实施例，多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值不低于第二预设数值是所述待测产品进行高温消毒处理的指示；或者，多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值低于第二预设数值是所述待测产品未进行高温消毒处理的指示。由此，可快速监测出水果制品是否进行了高温消毒处理，以确保水果制品的加工环节，提高水果制品质量安全。
需要说明的是，第二预定数值是指经过实验得到的用于区分进行了高温消毒处理的水果制品和未进行高温消毒处理的水果制品的响应值，其可根据不同的检测方法而确定，例如，通过对cAMP浓度的变化进行检测，可将第一预设数值设定为200。
根据本发明的实施例，所述待测产品为菠萝制品。
根据本发明的实施例，所述菠萝制品包括菠萝汁或菠萝罐头。
根据本发明的实施例，所述高温消毒处理选自巴斯德消毒处理。
根据本发明的实施例，所述巴斯德消毒处理在70～100℃条件下进行20～60min。
根据本发明的实施例，上述第三方面、第四方面、第五方面、第六方面和第七方面的方法还可以进一步包括如下技术特征的至少之一：
根据本发明的实施例，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：MOR244-3、MOR180-1和OR2C1。发明经过实验发现，上述嗅觉受体可特异性识别3-甲硫基丙醛。
根据本发明的实施例，所述嗅觉受体是表达所述嗅觉受体的细胞或转基因细胞提供的。
根据本发明的实施例，所述细胞或转基因细胞为真核细胞或原核细胞。
根据本发明的实施例，所述真核细胞包括从嗅觉基板分离的细胞群组中选出的细胞、HEK293细胞、CHO细胞、爪蟾卵母细胞、Hela细胞、COS细胞和酵母细胞中的至少之一。
根据本发明的实施例，所述原核细胞选自细菌。
根据本发明的实施例，所述响应值是通过检测所述嗅觉受体的活性变化获得。
根据本发明的实施例，所述活性变化是通过如下检测方法的至少之一确定的：荧光素酶检测法、分泌性碱性磷酸酶检测法、荧光蛋白检测法、荧光探针检测法、Ca2+浓度检测法、电流检测法、同位素标记法、抗体检测法和pH检测法。
示例性地，荧光素酶检测法的检测为，采用3-甲硫基丙醛或含有3-甲硫基丙醛的样品刺激含有嗅觉受体的细胞时，若嗅觉受体被激活，则细胞内cAMP浓度升高，cAMP结合CRE-luciferase的启动子区，并促使荧光素酶的转录和翻译，因此，通过检测荧光素酶的活性，即可表征嗅觉受体的响应情况，即可确定嗅觉受体是否可识别3-甲硫基丙醛。
根据本发明的实施例，所述响应值是通过检测所述细胞中cAMP浓度的变化获得的。
根据本发明的实施例，所述细胞中cAMP浓度的变化通过采用GloSensorTM cAMP检测试剂盒获得。GloSensor-20F cAMP基因构建物可预先表达一种荧光素酶变体，cAMP浓度升高可引起荧光素酶变体的构象变化，使得荧光素酶从无活性状态转变为活性状态，GloSensorTM cAMP检测试剂盒提供了荧光素酶变体的底物，该方法可实时测定cAMP的浓度变化，可快速、灵敏地检测待测样品中3-甲硫基丙醛的含量。
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1：嗅觉受体的筛选
本实施例中利用双荧光素酶法(Dual-GloTM Luciferase Assay System,Promega)测定嗅觉受体的活性。发明人从人和小鼠嗅觉受体库中选择了部分嗅觉受体，然后制备含有嗅觉受体、Golf、CRE-Luciferase以及pRL-SV40的基因构建物，并利用转染试剂Lipofectamine2000(Invitrogen)将基因构建物转染至HEK293T细胞中。培养24小时后，用培养基将3-甲硫基丙醛稀释至浓度为500μM，用稀释后的3-甲硫基丙醛刺激细胞，并孵育2-4小时。若嗅觉受体被激活后，细胞内cAMP浓度升高，cAMP将结合CRE-luciferase的启动子区，并促使荧光素酶的转录和翻译，通过检测荧光素酶的活性，即可表征嗅觉受体的响应情况，最终获得了3个产生响应的小鼠嗅觉受体MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1，以及一个产生响应的人类嗅觉受体OR2C1。
发明人还测定了不同浓度的3-甲硫基丙醛刺激分别含有上述4种嗅觉受体的细胞，并观察不同浓度下，4种嗅觉受体响应3-甲硫基丙醛的剂量曲线，结果如图1所示，其中，横轴为3-甲硫基丙醛浓度(M)的对数，纵轴为相对于空白对照(不加3-甲硫基丙醛)的响应变化倍数。结果发现，上述四种嗅觉受体中，MOR244-3和MOR256-17对3-甲硫基丙醛的响应最强，响应变化倍数分别可达约25倍或10倍，灵敏度均为30μM。
其中，MOR244-3的氨基酸序列序列如下所示：
MGALNQTRVTEFIFLGLTDNWVLEILFFVPFTVTYMLTLLGNFLIVVTIVFTPRLHNPMYFFLSNLSFIDICHSSVTVPKMLEGLLLERKTISFDNCIAQLFFLHLFACSEIFLLTIMAYDRYVAICIPLHYSNVMNMKVCVQLVFALWLGGTIHSLVQTFLTIRLPYCGPNIIDSYFCDVPPVIKLACTDTYLTGILIVSNSGTISLVCFLALVTSYTVILFSLRKKSAEGRRKALSTCSAHFMVVTLFFGPCIFLYTRPDSSFSIDKVVSVFYTVVTPLLNPLIYTLRNEEVKTAMKHLRQRRICS(SEQ ID NO:1)。
MOR256-17的氨基酸序列序列如下所示：
MEVDSNSSSGSFILMGVSDHPHLEIIFFAVILASYLLTLVGNLTIILLSRLDARLHTPMYFFLSNLSSLDLAFTTSSVPQMLKNLWGPDKTISYGGCVTQLYVFLWLGATECILLVVMAFDRYVAVCRPLHYMTVMNPRLCWGLAAISWLGGLGNSVIQSTFTLQLPFCGHRKVDNFLCEVPAMIKLACGDTSLNEAVLNGVCTFFTVVPVSVILVSYCFIAQAVMKIRSVEGRRKAFNTCVSHLVVVFLFYGSAIYGYLLPAKSSNQSQGKFISLFYSVVTPMVNPLIYTLRNKEVKGALGRLLGKGRGAS(SEQ ID NO:2)。
MOR180-1的氨基酸序列序列如下所示：
MDKENHSVVTEFVFMGITQDPQLQIIFFVVFLLVYLVNVIGNVGMIILIITDSQLHTPMYFFLCNLSFVDLGYSSAIAPRMLADFLTKHKVISFSSCATQFAFFVGFVDAECYVLAAMAYDRFVAICRPLHYSTLMSKKVCLVLMLGSYFAGLVSLVAHTSLTFSLSYCGSNIINHFFCEIPPLLALSCSDTYISEILLFSLCGFIEFSTILIIFISYAFILIAIIRIRSAEGRLKAFSTCGSHLTGVTLFYGTVMFMYLRPTSSYSLDQDKWASVFYTIIIPMLNPLIYSLRNKDVKAAFKKLIGKKPQ(SEQ ID NO:3)。
OR2C1的氨基酸序列序列如下所示：
MDGVNDSSLQGFVLMGISDHPQLEMIFFIAILFSYLLTLLGNSTIILLSRLEARLHTPMYFFLSNLSSLDLAFATSSVPQMLINLWGPGKTISYGGCITQLYVFLWLGATECILLVVMAFDRYVAVCRPLRYTAIMNPQLCWLLAVIACLGGLGNSVIQSTFTLQLPLCGHRRVEGFLCEVPAMIKLACGDTSLNQAVLNGVCTFFTAVPLSIIVISYCLIAQAVLKIRSAEGRRKAFNTCLSHLLVVFLFYGSASYGYLLPAKNSKQDQGKFISLFYSLVTPMVNPLIYTLRNMEVKGALRRLLGKGREVG(SEQ ID NO:4)。
实施例2：四种嗅觉受体对不同化合物的响应
本实施例中采用实施例1的方法检测MOR244-3、MOR256-17、MOR180-1和OR2C1对3种3-甲硫基丙醛的结构类似物(又称“气味分子”)的响应情况，3种3-甲硫基丙醛(methional)的结构类似物分别为3-甲硫基丙醇(methionol)、正戊醛(pentanal)和戊醇(pentanol)，具体检测结果如表1所示。其中，3-甲硫基丙醇中羟基替换了3-甲硫基丙醛的醛基；正戊醛中碳原子替换了3-甲硫基丙醛的硫原子；戊醇中羟基和碳原子同时替换了3-甲硫基丙醛的醛基和硫原子，表中“+++”表示响应变化倍数≥10，“++”表示响应变化倍数5<X<10(X为检测到的响应变化倍数)，“+”表示响应变化倍数≤5，“-”表示无响应。表1的结果显示，醛基和/或甲硫基的替换均会显著降低或者消除对4个嗅觉受体的激活效应。
表1：四种嗅觉受体对不同化合物的响应结果
MOR256-17 MOR244-3 MOR180-1 OR2C1
methional ++ +++ + +
methionol + - - -
pentanal - - - -
pentanol + - - -
实施例3：MOR244-3和MOR256-17对不同鲜榨果汁中3-甲硫基丙醛的检测
本实施例中的检测方法参见实施例1，区别仅在于，本实施例中采用一个荧光素酶变体代替了原有的双荧光素酶，并采用分别表达MOR244-3和MOR256-17嗅觉受体的细胞检测鲜榨橙汁和鲜榨芒果汁中3-甲硫基丙醛的存在情况，具体检测结果参见图2。结果显示在15分钟(min)左右达到峰值，且两种嗅觉受体均具有很强的信号。
向细胞中共转染pGloSensor-20F cAMP(Promega)构建物，细胞即可预先表达一种荧光素酶变体。嗅觉受体被激活后，cAMP浓度的升高可引起荧光素酶变体的构象变化，使得荧光素酶从无活性状态转变为活性状态，利用GloSensorTM cAMP检测试剂盒可实时快速地测定cAMP的浓度变化。因此，将利用表达嗅觉受体的细胞结合GloSensorTM cAMP检测法，可实现快速灵敏地检测食物(例如鲜榨果汁)中3-甲硫基丙醛的存在情况。
实施例4：MOR244-3和MOR256-17对不同鲜榨果汁中3-甲硫基丙醛的检测
本实施例中的检测方法参见实施例3，采用分别表达MOR244-3和MOR256-17嗅觉受体的细胞比较了橙子、西柚、芒果三种鲜榨果汁中3-甲硫基丙醛的含量，结果如图3所示。结果显示三种鲜榨果汁中3-甲硫基丙醛的含量为芒果>橙子>西柚，与报道的研究结果一直，且两种嗅觉受体的结果呈现出一致的趋势。
实施例5：MOR244-3和MOR256-17对四种橙味饮品中3-甲硫基丙醛的检测
本实施例中的检测方法参见实施例3，采用分别表达MOR244-3和MOR256-17嗅觉受体的细胞比较了四种橙味饮料中3-甲硫基丙醛的含量，四种橙味饮品分别为鲜榨橙汁、汇源浓缩还原橙汁、果粒橙和橙味美年达汽水，结果如图4所示。结果显示鲜榨橙汁与汇源浓缩还原橙汁中3-甲硫基丙醛的含量相当，果粒橙次之，橙味美年达汽水中几乎不含3-甲硫基丙醛，且两种嗅觉受体的结果呈现出一致的趋势。
实施例6：MOR244-3和MOR256-17对2种芒果饮品中3-甲硫基丙醛的检测
本实施例中的检测方法参见实施例3，采用分别表达MOR244-3和MOR256-17嗅觉受体的细胞比较了鲜榨芒果汁和浓缩还原芒果汁中3-甲硫基丙醛的含量，结果如图5所示。结果显示鲜榨芒果汁含量均较高，且两种嗅觉受体的结果呈现出一致的趋势。
实施例7：MOR244-3和MOR256-17对菠萝汁消毒处理工艺的监测
本实施例中的检测方法参见实施例3，采用分别表达MOR244-3和MOR256-17嗅觉受体的细胞比较了两种菠萝汁中3-甲硫基丙醛的含量，两种菠萝汁分别为鲜榨菠萝汁和将鲜榨菠萝汁经过巴斯德消毒处理(80℃条件下进行30min消毒)的加工菠萝汁，结果如图6所示。结果表明鲜榨菠萝汁3-甲硫基丙醛的含量增加，两种嗅觉受体的结果呈现出一致的趋势，符合报导的研究结果。
实施例8：MOR244-3和MOR256-17对3种酒水产品中3-甲硫基丙醛的检测
本实施例中的检测方法参见实施例3，采用分别表达MOR244-3和MOR256-17嗅觉受体的细胞比较了纯生啤酒、黑啤和红酒中3-甲硫基丙醛的含量，结果如图7所示。结果表明啤酒(纯生啤酒和黑啤)中3-甲硫基丙醛的含量较高，而红酒中的含量较低，且两种嗅觉受体的结果呈现出一致的趋势。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (10)

1.嗅觉受体在识别3-甲硫基丙醛中的用途，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：
MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1。
2.3-甲硫基丙醛在激活嗅觉受体中的用途，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：
MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述识别或激活是通过嗅觉受体的活性变化体现的；
所述活性变化包括如下信号变化的至少之一：
cAMP、IP3、钙离子、电流和pH。
4.一种检测3-甲硫基丙醛的方法，其特征在于，包括：
将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；
基于所述响应值，确定所述待测样品中是否含有3-甲硫基丙醛；
其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：
MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述嗅觉受体存在响应值是所述待测样品中含有3-甲硫基丙醛的指示；或者，所述嗅觉受体不存在响应值是所述待测样品中不含有3-甲硫基丙醛的指示；
所述方法进一步包括：
基于标准曲线，确定所述待测样品中3-甲硫基丙醛的含量，所述标准曲线为预定量3-甲硫基丙醛与嗅觉受体响应值的对应曲线。
6.一种检测酒水、水果或水果制品新鲜程度的方法，其特征在于，包括：
将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；
基于所述响应值，确定所述待测样品的新鲜程度；
其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：
MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1。
7.一种检测食品中所含有的水果种类的方法，其特征在于，包括：
将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；
基于所述响应值，确定所述待测样品中所含有的水果种类；
其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：
MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1；
所述待测样品中仅含有一种水果。
8.一种区分啤酒或红酒的方法，其特征在于，包括：
将多种待测产品与嗅觉受体接触，分别确定多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值，多种所述待测产品为啤酒和/或红酒；
基于多种所述待测产品所对应的嗅觉受体的响应值，确定所述待测产品的种类；
其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：
MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1。
9.一种监测水果制品是否进行高温消毒处理的方法，其特征在于，包括：
将待测样品与嗅觉受体接触，确定所述嗅觉受体的响应值；
基于所述响应值，确定所述待测样品是否进行高温消毒处理；
其中，所述嗅觉受体包括选自下列的至少之一：
MOR244-3、MOR256-17和MOR180-1。
10.根据权利要求4～9任一项所述的方法，其特征在于，所述嗅觉受体是表达所述嗅觉受体的细胞或转基因细胞提供的；或者，所述响应值是通过检测所述细胞中cAMP浓度的变化获得的；
所述细胞或转基因细胞为真核细胞或原核细胞；所述响应值是通过检测所述嗅觉受体的活性变化获得；
所述活性变化是通过如下检测方法的至少之一确定的：
荧光素酶检测法、分泌性碱性磷酸酶检测法、荧光蛋白检测法、荧光探针检测法、Ca2+浓度检测法、电流检测法、同位素标记法、抗体检测法和pH检测法。
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