CN115813790B - 一种舒缓祛痘的洗发水 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及洗发水技术领域，尤其涉及IPC A61K8，更具体的涉及，一种舒缓祛痘的洗发水及其制备方法。本发明提供了一种舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，包括阴离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂、活性精油、植物提取物、维生素、甘草酸二钾、苯甲醇、脱氢醋酸、乙二胺四醋酸四钠、抗氧化剂、缓冲剂、水。本发明的洗发水在控油舒缓的同时，抑制糠秕马拉色菌和痤疮丙酸杆菌的过度繁殖，促进痘痘消除。

Description

一种舒缓祛痘的洗发水
技术领域
本发明涉及洗发水技术领域，尤其涉及IPCA61K8，更具体的涉及，一种舒缓祛痘的洗发水。
背景技术
在现代社会，一部分人工作的压力日益增大，经常性熬夜，导致内分泌失调，免疫力下降，导致头皮长痘。另一部分人追求个性与美丽，频繁性的对头发进行烫染，对毛囊产生较大的损伤。随着人们养生意识的增强，越来越多的人们追求对头发的保养，对头皮的保护。因此，越来越多功效性洗发水被研发出来。
现有专利CN201510762597.8公开了一种用于染发烫发后修复头皮受损及去屑抗敏的洗发水，主要添加了修复受损头皮的中草药，进行头皮修复，但未其修复的效果未有证明。
现有专利CN200410065248.2公开了一种染发护发洗发水，采用为了两性表面活性剂、非离子表面活性剂、丙烯酸共聚物等，对头发有较好的护理作用，但其护理效果还有待商榷。
目前，市场上的洗发水品种越来越多，但真正有效的洗发水还寥寥无几，且长期头皮问题会造成毛囊炎，进而导致头皮长痘，导致脱发等问题。因此，需要研发一种能头皮进行控油、舒缓、祛痘且温和无刺激的洗发水，对毛囊进行保护和护理，从而使头发更加柔顺，健康和有光泽，适用于头皮敏感长痘人群。
发明内容
为了解决现有技术中的问题，本发明第一方面提供了一种舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，包括阴离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、阳离子表面活性剂，非离子表面活性剂、活性精油、植物提取物、维生素、甘草酸二钾、苯甲醇、脱氢醋酸、乙二胺四醋酸四钠、抗氧化剂、缓冲剂、水。
所述一种舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，按重量份计，包括9～20份阴离子表面活性剂、2～6份两性离子表面活性剂、1～5份阳离子表面活性剂，0.5-2份非离子表面活性剂、0.3～0.7份活性精油、0.8～1.6份植物提取物、0.1～0.2份维生素、1～5份甘草酸二钾、0.05～0.3份苯甲醇、0.05～0.3份脱氢醋酸、0.05～0.3份乙二胺四醋酸四钠、0.3～0.7份抗氧化剂、0.1～0.5份缓冲剂、70～90份水。
优选的，所述阴离子表面活性剂包括椰油酰羟乙磺酸钠、椰油酰基甲基牛磺酸钠、椰油酰甘氨酸钠、月桂酰肌氨酸钠、十二烷基磺酸钠、肉豆蔻酰谷氨酸钠中的一种或多种；进一步优选的，为椰油酰羟乙磺酸钠、月桂酰肌氨酸钠。
在一些优选地方案中，所述阴离子表面活性剂包括椰油酰羟乙磺酸钠、椰油酰基甲基牛磺酸钠。
在一些优选地方案中，所述阴离子表面活性剂包括椰油酰羟乙磺酸钠、椰油酰甘氨酸钠。
优选的，所述椰油酰羟乙磺酸钠、月桂酰肌氨酸钠的重量比为(6～12)：(2～5)；进一步优选的，为(6～12)：(2～5)。
本发明中，通过添加(6～12)：(2～5)的椰油酰羟乙磺酸钠、月桂酰肌氨酸钠，提高了洗发水的发泡能力的同时，使洗发水能做到良好的控油效果，且不刺激头皮，还能与其他物质共同作用，抑制头皮上糠秕马色拉菌和痤疮丙酸杆菌过度繁殖。本发明人意外发现，在使用洗发水的过程中，(6～12)：(2～5)的椰油酰羟乙磺酸钠、月桂酰肌氨酸钠与其他表面活性剂共同作用，在机械力的揉搓中能有较好的发泡作用，去除头皮上的油脂，同时使洗发水中的活性物质和抗菌物质能与头皮充分接触，抑制糠秕马色拉菌和痤疮丙酸杆菌过度繁殖，使头皮处于一个健康的状态，预防脱发。同时，(6～12)：(2～5)的椰油酰羟乙磺酸钠、月桂酰肌氨酸钠，在具有较强的清洁能力的同时，能减少对皮肤的刺激性。
优选的，所述两性表面活性剂包括椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、烷基酰胺甜菜碱、十二烷基乙氧基磺基甜菜碱、十二烷基羟丙基磺基甜菜碱中的一种或多种；进一步优选的，为椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、烷基酰胺甜菜碱。
优选的，所述椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、烷基酰胺甜菜碱的重量比为(2～6)：(1～3)；进一步优选的，为(1～3)：1。
优选的，所述的烷基酰胺甜菜碱为椰油酰胺丙基甜菜碱。
优选的，所述阳离子表面活性剂包括聚季铵盐-7、聚季铵盐-39、十六烷基三甲基季铵溴化物、十八烷基二甲基苄基季铵氯化物中的一种或多种；进一步优选的，为季铵盐-7、聚季铵盐-39。
优选的，所述季铵盐-7、聚季铵盐-39的重量比为(0.5～3)：1；进一步优选的，为1：1。
优选的，所述非离子表面活性剂包括聚山梨醇酯。
优选的，所述聚山梨醇酯包括聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-80中的一种或多种；进一步优选的，为聚山梨醇酯-20。
优选的，所述聚山梨醇酯-20购自天津岱旭化工贸易有限公司，型号为T-20，HLB值为16.5。
优选的，所述离子表面活性剂和阴离子表面活性剂的重量比为(1～4)：(9～20)；进一步优选的，为(1～4)：30。
本发明中，通过添加重量比为(1～4)：30的非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂，在除油控油的同时温和不刺激，还能提高洗发水的稳定性。本发明人推测，通过添加重量比为(1～4)：30的非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂，非离子表面活性剂不发生电离，容易形成胶束，具有较强的降低表面张力的能力和较低的临界胶束浓度，温和易冲洗，与各种阴离子表面活性和两性离子表面活性剂有着良好的配伍性，在除油控油的同时不会对头皮产生不适感。与此同时，聚山梨醇酯-20表面活性高于洗发水中的一些有效作用成分，添加重量比为(1～4)：30的非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂，能竞争性地阻断界面并抑制有效作用成分吸附到气液界面，防止有效作用成分在洗发水制备过程、储存，运输过程中在界面处展开，从而减少有效物质吸附到容器上的损失，进一步增加洗发水中有效物质成分，抑制炎性因子的产生，提高洗发水的舒缓镇定作用。添加重量比为(1～4)：30的非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂，还能提高洗发水的稳定性。聚山梨醇酯-20能够通过疏水相互作用于有效作用物质上的疏水位置相互作用，从而防止疏水性的有效物质进一步的聚集展开，进而提高洗发水的稳定性。
优选的，所述活性精油包含迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、茶树(MELALEUCA ALTERNIFOLIA)精油、甜橙精油、柠檬精油、中国台湾桧木精油中的一种或多种；进一步优选的，为迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油。
优选的，所述迷迭香叶油、茶树精油的重量比为(1～5)：1；进一步优选的，为4：1。
优选的，按重量份计，所述植物提取物包括0.6～1.0份库拉索芦荟(ALOEBARBADENSIS)叶汁、0.1～0.3份荨麻(URTICA FISSA)提取物、0.1～0.3份甘草(GLYCYRRHIZA URALENSIS)提取物。
本发明中通过添加0.3～0.7份活性精油、0.8～1.6份植物提取物，1～5份甘草酸二钾，提高了洗发水的舒缓作用，同时提高了洗发水的抑菌祛痘功能，提高了洗发水的使用感受。本发明创造性发现，添加0.3～0.7份活性精油、0.8～1.6份植物提取物，1～5份甘草酸二钾，其中迷迭香叶油、茶树精油的重量比为(1～5)：1，库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁0.6～1.0份，荨麻(URTICA FISSA)提取物0.1～0.3份，甘草(GLYCYRRHIZA URALENSIS)提取物0.1～0.3份，各种物质共同作用，能够抑制IL-1β，IL-6等炎症因子，同时抑制TRPVlmRNA表达，达到一个舒缓的功效。另一方面，活性精油、植物提取物、甘草酸二钾和脱氢醋酸，接触头皮，缓慢渗入毛囊中，防止因油脂分泌过多导致糠秕马色拉菌和痤疮丙酸杆菌的过度繁殖，防止头皮长痘，伤害毛囊，导致脱发。本发明人发现，本配方下各种物质共同作用，表面活性离子达到清洁控油的同时，温和无刺激，在去除头皮表面和毛囊中的油脂后，洗发水中的有效物质作用于头皮表面和毛囊内部，在抑制细菌过程中，达到镇定舒缓的功效，同时，对单颗痘痘体积和红肿有明显的消除作用，达到一个祛痘的效果，具有优秀的使用感受和效果。
优选的，所述维生素为维生素原B5、维生素E，维生素B2，维生素A中的一种或多种；进一步优选的，为维生素原B5。
优选的，所述抗氧化剂为抗坏血酸、丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯中的一种或多种；进一步优选的，为抗坏血酸。
优选的，所述缓冲剂包括柠檬酸、酒石酸、磺酸、三乙醇胺中的一种或多种；进一步优选的，为柠檬酸。
本发明第二方面提供了一种舒缓祛痘的洗发水，包括以下步骤：
S1)常温下，向主混罐中加入水，加入两性离子表面活性剂，搅拌3～7min，再加入阳离子表面活性剂，搅拌成均一态，形成混合液1；
S2)将混合液1加热至70～85℃，再加入阴离子表面活性剂，恒温搅拌3～8min，形成混合液2；
S3)将混合液2降温至30～40℃，加入非离子表明活性剂活性精油、植物提取物，搅拌成均一态，形成混合液3；
S4)在混合液3中加入剩下原料，搅拌成均一态，出料，得到舒缓祛痘的洗发水。
有益效果
1、本发明中，通过添加(6～12)：(2～5)的椰油酰羟乙磺酸钠、月桂酰肌氨酸钠，提高了洗发水的发泡能力的同时，使洗发水能做到良好的控油效果，且不刺激头皮，还能与其他物质共同作用，抑制头皮上糠秕马色拉菌和痤疮丙酸杆菌过度繁殖。
2、本发明中，通过添加重量比为(1～4)：30的非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂，在除油控油的同时温和不刺激，还具有一定的舒缓效果，还能提高洗发水的稳定性。
3、本发明中通过添加0.3～0.7份活性精油、0.8～1.6份植物提取物，1～5份甘草酸二钾，提高了洗发水的镇定舒缓作用，同时提高了洗发水的抑菌祛痘功能，提高了洗发水的使用感受。
附图说明
图1为实施例1中制备得到的洗发水对SZ95细胞活力的影响图。
图2为为实施例1中制备得到的洗发水对SZ95细胞脂滴合成的影响图；**：与空白对照相比，p<0.01。
图3为实施例1中制备得到的洗发水对SZ95细胞脂滴合成的影响图示。
图4为实施例1中制备得到的洗发水对RAW264.7细胞存活率的影响图。
图5为实施例1中制备得到的洗发水对RAW264.7细胞IL-1β释放量的影响图；##：与阴性对照相比，p<0..01；**：与模型对照相比，p<0.01。
图6为实施例1中制备得到的洗发水对RAW264.7细胞存活率的影响图。
图7为实施例1中制备得到的洗发水对RAW264.7细胞IL-6释放量的影响图；##：与阴性对照相比，p<0..01；**：与模型对照相比，p<0.01。
图8为实施例1中制备得到的洗发水对HaCaT细胞存活率的影响图。
图9为实施例1中制备得到的洗发水对TRPV1的影响图；##：与阴性对照相比，p<0.01；*：与模型对照相比，p<0.05；**：与模型对照相比，p<0.01。
图10为实施例1中制备得到的洗发水使用前后的Primos单颗痘痘体积图；***表示p<0.001。
图11为使用实施例1中制备得到的洗发水7天Primos单颗痘痘改善的效果图。
图12为实施例1中制备得到的洗发水使用前后的单颗痘痘红度a*值图；***表示p<0.001。
图13为用实施例1中制备得到的洗发水7天单颗痘痘红度改善的效果图
图14为实施例1中制备得到的洗发水7天头皮痘痘改善状况，医生评估。
图15为受试者使用实施例1中制备得到的洗发水7天对洗发水各项指标的同意度。
具体实施方式
实施例1
本实施例第一方面提供了一种舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，按重量份计，为11份椰油酰羟乙磺酸钠、4份月桂酰肌氨酸钠、2份椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、1份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.5份聚季铵盐-7、0.5份聚季铵盐-39、1份聚山梨醇酯-20、0.4份迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、0.1份茶树(MELALEUCA ALTERNIFOLIA)精油、0.8份库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁、0.2份荨麻(URTICA FISSA)提取物、0.2份甘草(GLYCYRRHIZA URALENSIS)提取物、0.2份维生素原B5、2份甘草酸二钾、0.15份苯甲醇、0.15份脱氢醋酸、0.1份乙二胺四醋酸四钠、0.5份抗坏血酸、0.3份柠檬酸、80份水。
所述的椰油酰羟乙磺酸钠购自LUBRIZOL公司生产的CHEMBETAINE TM CASSURFACTANT。
所述的月桂酰肌氨酸钠购自SPECTRUM CHEMICALS公司生产的HYDROCORTISONEACETATE。
所述椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱购自AKZO NOBEL公司生产的ELFAN AT 84G。
所述的椰油酰胺丙基甜菜碱购自LUBRIZOL公司生产的CHEMBETAINE TM CSURFACTANT。
所述的聚季铵盐-7购自3V Sigma USA Inc公司生产的CONDITIONER P7NA。
所述的聚季铵盐-39购自LUBRIZOL公司生产的MERQUAT TM 3330PR POLYMER。
所述聚山梨醇酯-20购自LINCOLN FINE INGREDIENTS公司生产的LINSORB 20FGK。
所述的迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油购自THE ESSENTIAL OIL COMPANY公司生产的ROSEMARY OIL。
所述的茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油购自BJA公司生产的TEA TREE OIL。
所述的库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁购自CONCETRATED ALOECORPORATION公司生产的ALOE VERA GEL 10X CONCENTRATE DECOLORIZED,CG。
所述的荨麻(URTICAFISSA)提取物购自ACTIVE ORGANICS公司生产的OF NETTLE。
所述的甘草(GLYCYRRHIZA URALENSIS)提取物购自陕西万源生物科技有限公司。
所述的维生素原B5购自TRI-K INDUSTRIES,INC公司生产的DL OANTHENOL FCC/USP。
所述的甘草酸二钾购自VITAL-CHEM Zhuhai Co.,Ltd公司生产的DipotassiumGlycyrrhizinate。
所述的苯甲醇购自LINCOLN MANUFACTURING,公司生产的LINCOLNSERVE·BDHA。
所述的脱氢乙酸购自LINCOLN MANUFACTURING公司。
所述的乙二胺四醋酸四钠购自NORMAN,FOX&CO.公司。
所述的抗坏血酸购自AETNATRADING CORP.公司。
所述的柠檬酸购自NORMAN,FOX&CO.公司生产的CITRIC ACID ANHYDROUS USP/FCCK。
本实施例第二方面提供了一种舒缓祛痘的洗发水的制备方法，包括以下步骤：
S1)25℃下，向主混罐中加入水，加入椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、椰油酰胺丙基甜菜碱，搅拌5min，再加入聚季铵盐-7、聚季铵盐-39，搅拌成均一态，形成混合液1；
S2)将混合液1加热至75℃，再加入椰油酰羟乙磺酸钠、月桂酰肌氨酸钠，恒温搅拌5min，形成混合液2。
S3)将混合液2降温至35℃，加入聚山梨醇酯-20、迷迭香(ROSMARINUSOFFICINALIS)叶油、茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油、库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁、荨麻(URTICAFISSA)提取物、甘草(GLYCYRRHIZAURALENSIS)提取物，搅拌成均一态，形成混合液3。
S4)在混合液3中加入剩下原料，搅拌成均一态，出料，得到舒缓祛痘的洗发水。
实施例2
实施例2的具体实施方式同实施例1一样，不同之处在于，所述舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，按重量份计，为6份椰油酰羟乙磺酸钠、2份月桂酰肌氨酸钠、1份椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、0.5份椰油酰胺丙基甜菜碱、1.5份聚季铵盐-7、0.5份聚季铵盐-39、0.5份聚山梨醇酯-20、0.3份迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、0.3份茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油、0.6份库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁、0.1份荨麻(URTICAFISSA)提取物、0.3份甘草(GLYCYRRHIZAURALENSIS)提取物、0.1份维生素原B5、1份甘草酸二钾、0.1份苯甲醇、0.05份脱氢醋酸、0.15份乙二胺四醋酸四钠、0.3份抗坏血酸、0.1份柠檬酸、70份水。
实施例3
实施例3的具体实施方式同实施例1一样，不同之处在于，所述舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，按重量份计，为12份椰油酰羟乙磺酸钠、3份月桂酰肌氨酸钠、3份椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、1份椰油酰胺丙基甜菜碱、1份聚季铵盐-7、1.5份聚季铵盐-39、0.5份聚山梨醇酯-20、0.5份迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、0.2份茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油、1份库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁、0.3份荨麻(URTICAFISSA)提取物、0.2份甘草(GLYCYRRHIZAURALENSIS)提取物、0.15份维生素原B5、5份甘草酸二钾、0.3份苯甲醇、0.3份脱氢醋酸、0.15份乙二胺四醋酸四钠、0.7份抗坏血酸、0.5份柠檬酸、90份水。
对比例1
对比例1的具体实施方式同实施例1一样，不同之处在于，所述舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，按重量份计，为3份椰油酰羟乙磺酸钠、0.1份月桂酰肌氨酸钠、2份椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、1份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.5份聚季铵盐-7、0.5份聚季铵盐-39、1份聚山梨醇酯-20、0.4份迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、0.1份茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油、0.8份库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁、0.2份荨麻(URTICAFISSA)提取物、0.2份甘草(GLYCYRRHIZAURALENSIS)提取物、0.2份维生素原B5、2份甘草酸二钾、0.15份苯甲醇、0.15份脱氢醋酸、0.1份乙二胺四醋酸四钠、0.5份抗坏血酸、0.3份柠檬酸、80份水。
对比例2
对比例2的具体实施方式同实施例1一样，不同之处在于，所述舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，按重量份计，为10份椰油酰羟乙磺酸钠、3份月桂酰肌氨酸钠、2份椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、1份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.5份聚季铵盐-7、0.5份聚季铵盐-39、0.1份聚山梨醇酯-20、0.4份迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、0.1份茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油、0.8份库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁、0.2份荨麻(URTICAFISSA)提取物、0.2份甘草(GLYCYRRHIZA URALENSIS)提取物、0.2份维生素原B5、2份甘草酸二钾、0.15份苯甲醇、0.15份脱氢醋酸、0.1份乙二胺四醋酸四钠、0.5份抗坏血酸、0.3份柠檬酸、80份水。
对比例3
对比例3的具体实施方式同实施例1一样，不同之处在于，所述舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，按重量份计，为10份椰油酰羟乙磺酸钠、3份月桂酰肌氨酸钠、2份椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、1份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.1份聚季铵盐-7、0.01份聚季铵盐-39、0.1份聚山梨醇酯-20、0.4份迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、0.1份茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油、0.8份库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁、0.2份荨麻(URTICAFISSA)提取物、0.2份甘草(GLYCYRRHIZA URALENSIS)提取物、0.2份维生素原B5、2份甘草酸二钾、0.15份苯甲醇、0.15份脱氢醋酸、0.1份乙二胺四醋酸四钠、0.5份抗坏血酸、0.3份柠檬酸、80份水。
对比例4
对比例4的具体实施方式同实施例1一样，不同之处在于，所述舒缓祛痘的洗发水，其制备原料，按重量份计，为10份椰油酰羟乙磺酸钠、3份月桂酰肌氨酸钠、0.1份椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、0.2份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.5份聚季铵盐-7、0.5份聚季铵盐-39、1份聚山梨醇酯-20、0.4份迷迭香(ROSMARINUS OFFICINALIS)叶油、0.1份茶树(MELALEUCAALTERNIFOLIA)精油、0.8份库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶汁、0.2份荨麻(URTICAFISSA)提取物、0.2份甘草(GLYCYRRHIZA URALENSIS)提取物、0.2份维生素原B5、2份甘草酸二钾、0.15份苯甲醇、0.15份脱氢醋酸、0.1份乙二胺四醋酸四钠、0.5份抗坏血酸、0.3份柠檬酸、80份水。
性能测试
1、控油效果测试
a)细胞毒性试验(MTT法)
将实施例1中制备得到的洗发水作为样品经MEM培养基稀释至表1所示浓度，过滤除菌后备用。
表1
收集对数生长期SZ95细胞，按照细胞密度为5×103个/孔接种至96孔板，每孔含培养液100μL。在培养箱(37℃，5％CO2)中培养24h后，吸去培养基，用PBS缓冲液洗涤细胞两次，然后按照表1加入药物，每孔100μL，以未处理细胞作为阴性对照，以样品溶剂处理细胞作为溶剂对照，每组设置3个重复孔。加药后在培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养24h，然后进行MTT细胞毒性试验，490nm下读取吸光度OD值。计算细胞活力，空白孔中仅添加细胞培养液。
结果见表3，图1。
b)脂滴合成检测试验
收集对数生长期SZ95细胞，按照细胞密度为3.5×104个/孔接种至24孔板，在培养箱(37℃，5％CO2)中培养24h。试验设置空白对照组(BC)、阳性对照组(PC)及样品组，按照表2向各组细胞培养孔中加入药物，每组设置3个重复孔。
加药后在培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养，培养期间进行每天换液和给药，72h后用PBS清洗细胞1次，每孔加入500μLlμg/mL的油红O染液，避光染色15min(孵育箱37℃孵育)，PBS洗涤2次。在Ex：450nm-500nm，Em:515nm-560nm检测，200倍镜下拍照观察，计算视野下每个细胞的平均荧光强度(IOD)。
结果见表4，图2，图3。
表2
分组 加药条
空白对照组 样品溶剂
阳性对照组 50μmol/L异维A酸
样品组 0.00313％(v/v)
表3
表4
分组 相对IOD/细胞数平均值 SD(％)
BC 1.00 0.04
PC 0.41 0.01
样品组 0.60 0.05
在细胞毒性试验和脂滴合成检测试验中，样品在0.125％浓度下作用SZ95细胞后，能够降低细胞脂滴油红O染色荧光强度，且与阴性对照相比具有统计学差异(p<0.01)。该样品具有抑制SZ95细胞脂滴形成的能力，并通过抑制脂滴形成达到控油功效。
2、舒缓效果测试
1)1L-1β抑制效果
a)细胞毒性试验(CCK8法)
将实施例1中制备得到的洗发水作为样品经DMEM培养基稀释至表5所示浓度，过滤除菌后备用。
表5
表6
收集对数生长期RAW264.7细胞，按照细胞密度为2×104个/孔接种至96孔板，每孔含培养液100μL。在培养箱(37℃，5％CO2)中培养24h后，吸去培养基，用PBS缓冲液洗涤细胞两次，然后按照表5加入药物，每孔100μL，以未处理细胞作为阴性对照，以样品溶剂处理细胞作为溶剂对照，每组设置3个重复孔。加药后在培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养24h，然后进行CCK8细胞毒性试验，450nm下读取吸光度OD值。计算细胞存活率，空白孔中仅添加细胞培养液。
结果见表8，图4。
b)IL-1β含量测定试验
收集对数生长期RAW264.7细胞，按照细胞密度为2×105个/孔接种至24孔板。在培养箱(37℃，5％CO2)中培养24h后，试验设置阴性对照组/溶剂对照、模型对照组、阳性对照组及样品组，按照表7向各组细胞培养孔中加入药物，每组设置4个重复孔。
加药后在培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养2h，模型对照组、阳性对照组和样品组加入终浓度lμg/mL LPS共同孵育24h后，使用小鼠1L-1βELISA试剂盒进行培养液中1L-1β含量的检测。结果见表9，图5。
表7
表8
表9
与阴性对照组相比，模型对照组的IL-1β含量显著升高(p<0.01)，表明造模成功，该模型可用于评价样品的舒缓功效。在本试验中，样品在0.005％、0.010％、0.020％浓度下作用RAW264.7细胞后，能够降低细胞IL-1β释放量，且与模型对照相比具有统计学差异(p<0.01)。该样品(实施例1)具有抑制RAW264.7细胞IL-1β释放的能力，并通过抑制IL-1β释放达到舒缓功效。
2)1L-6抑制效果
a)细胞毒性试验(CCK8法)
将实施例1中制备得到的洗发水作为样品经DMEM培养基稀释至表10所示浓度，过滤除菌后备用。
表10
表11
/>
收集对数生长期RAW264.7细胞，按照细胞密度为2×104个/孔接种至96孔板，每孔含培养液100μL。在培养箱(37℃，5％CO2)中培养24h后，吸去培养基，用PBS缓冲液洗涤细胞两次，然后按照表10加入药物，每孔100μL，以未处理细胞作为阴性对照，以样品溶剂处理细胞作为溶剂对照，每组设置3个重复孔。加药后在培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养24h，然后进行CCK8细胞毒性试验，450nm下读取吸光度OD值。计算细胞存活率，空白孔中仅添加细胞培养液。
结果见表13，图6。
b)IL-6含量测定试验
收集对数生长期RAW264.7细胞，按照细胞密度为2×105个/孔接种至24孔板。在培养箱(37℃，5％CO2)中培养24h后，试验设置阴性对照组/溶剂对照、模型对照组、阳性对照组及样品组，按照表12向各组细胞培养孔中加入药物，每组设置4个重复孔。
加药后在培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养2h，模型对照组、阳性对照组和样品组加入终浓度lμg/mL LPS共同孵育24h后，将培养液稀释20倍，使用小鼠1L-6ELISA试剂盒进行培养液中1L-6含量的检测。结果见表14，图7。
表12
表13
/>
表14
与阴性对照组相比，模型对照组的IL-6含量显著升高(p<0.01)，表明造模成功，该模型可用于评价样品的舒缓功效。在本试验中，样品在0.010％、0.020％浓度下作用RAW264.7细胞后，能够降低细胞IL-1β释放量，且与模型对照相比具有统计学差异(p<0.01)。该样品(实施例1)具有抑制RAW264.7细胞IL-6释放的能力，并通过抑制IL-1β释放达到舒缓功效。
3)TRPV1mRNA抑制效果
a)细胞毒性试验(CCK8法)
将实施例1中制备得到的洗发水作为样品经DMEM培养基稀释至表15所示浓度，过滤除菌后备用。
表15
表16
收集对数生长期HaCaT细胞，按照细胞密度为104个/孔接种至96孔板，每孔含培养液100μL。在培养箱(37℃，5％CO2)中培养24h后，吸去培养基，用PBS缓冲液洗涤细胞两次，然后按照表15加入药物，每孔100μL，以未处理细胞作为阴性对照，以样品溶剂处理细胞作为溶剂对照，每组设置3个重复孔。加药后在培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养24h，然后进行CCK8细胞毒性试验，450nm下读取吸光度OD值。计算细胞存活率，空白孔中仅添加细胞培养液。
结果见表18，图8。
b)TRPV1表达能力测定试验
收集对数生长期HaCaT细胞，按照细胞密度为3×105个/孔接种至6孔板。在培养箱(37℃，5％CO2)中培养24h后，试验设置阴性对照组/溶剂对照、模型对照组、阳性对照组及样品组，按照表17向各组细胞培养孔中加入药物，每组设置4个重复孔。
加药后在培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养2h，模型对照组、阳性对照组和样品组加入终浓度lμmol/L CAP共同孵育24h后，去除培养液，用预温的PBS轻洗两次，去除清洗溶液。使用RNeas○R Mini Kit试剂盒提取RNA，之后使用One Step TBPrimeScriptTMRT-PCR Kit II进行real time-qPCR反应并测定Ct值，以β-肌动蛋白(β-actin)为内参基因，计算其他各组与阴性对照组/溶剂对照组相比，辣椒素受体(TRPVl)的相对表达量。
TRPVl相对表达倍数＝2-(Ct(TRPVl,样品组)-Ct(β-actin,样品组)-Ct(TRPVl,对照组)+Ct(β-actin,对照组))结果见表19，图9。
表17
表18
表19
/>
与阴性对照组相比，模型对照组的TRPVl相对表达倍数显著升高(p<0.01)，表明造模成功，该模型可用于评价样品的舒缓功效。在本试验中，样品在0.020％浓度下作用HaCaT细胞后，能够降低TRPVl相对表达倍数，且与模型对照相比具有统计学差异(p<0.01)。该样品(实施例1)具有抑制HaCaT细胞TRPVl表达的能力，并通过抑制TRPVl mRNA表达达到舒缓功效。
3、皮肤刺激性测试
将复苏好的表皮模型转移到无菌6孔板的第一排中(提前添加0.9ml培养液)。试验设置阴性对照组、阳性对照组和样品组，每组设置3个平行。根据分组，向各组模型表面加入25μL PBS/5％SDS/样品，每个模型给药间隔时间为lmin。给药结束后，将所有的6孔板转移到CO2培养箱中(37℃,5％CO2)进行孵育。
第一个表皮模型给药时间到30min时，取出6孔板，用装有无菌PBS的洗瓶清洗表皮模型，保持PBS稳速不间断的流出，充满培养小室后倒掉，重复15次。轻轻抖动培养小室减少表皮模型上残留的PBS，并用无菌棉签轻轻吸去水分。清洗结束后，将模型放入与标记对应的6孔板的第二排，并在每孔中加入0.9mL培养液。置于CO2培养箱中(37℃，5％CO2)中进行后孵育。后孵育总时长为42h。孵育24h后，更换培养液继续培养18h。
预备24孔板，并在每孔中加入300μLlmg/mL的MTT溶液。后孵育结束后，将表皮模型转移到预备好的24孔板中。将24孔板转移到CO2培养箱中(37℃，5％CO2)孵育3h±5min。
MTI孵育完成后，用镊子取出表皮模型，将底面残留的MTT溶液用吸水纸擦干，转移到新的24孔板中，并在培养小室中加入2mL异丙醇。用封口膜密封24孔板，4℃静置过夜。然后用200μL移液器枪头剌穿表皮模型，使异丙醇浸提液从表皮模型中流出到24孔板中。丢弃被剌穿的表皮模型，将每孔内的异丙醇浸提液吹打5次，使溶液充分混匀。从每孔中吸取2份200μL异丙醇浸提液，分别加入96孔板的对应孔中。以异丙醇作为吸光度检测时的空白对照。酶标仪570nm波长读取吸光度值，计算各组相对组织活力。
结果见表20。
表20
在本试验中，样品皮肤刺激性分类结果为非剌激性。该结果证明了样品(实施例1)温和(无剌激)的功效。
4、人体功效评价试验-祛痘
1)选择油性头皮、头皮易出油、易出粉刺或有毛囊炎，且头皮有痘痘；测试前两周未使用类似功效的头皮产品；一个月内没有对头发进行过染发、烫发、漂染及拉直等处理的中国健康男性/女性受试者33名(中途有一人因自身原因退出)，年龄范围为18-65岁。采用前后对照的方法，在使用测试产品(实施例1中制备得到的洗发水)前、连续使用测试产品7天分别拍摄受试者头皮照片。产品使用前后的评价结果通过统计学检验方法进行比较从而判断是否有统计学差异。
检测部位为：
(1)Primos单颗痘痘体积—头皮；通过皮肤快速光学成像系统PRIMOS lite对头皮的单颗痘痘体积在使用测试产品(实施例1中制备得到的洗发水)前、连续使用测试产品7天后的头皮进行拍摄。结果见表21，表22、图10、图11。
表21
表22
*统计方法：采用秩和检验方法进行分析，检验水准α＝0.05。
*显著性标注方法："n.s"表示无统计学差异，p≥0.05；p<0.05表示有显著性差异("*"表示0.01≤p<0.05；"**"表示0.001≤p<0.01；"***"表示p<0.001)。
结论：连续使用测试产品实施例1中制备得到的洗发水7天，受试者的Primos单颗痘痘体积与基础值相比有显著性下降(p<0.001)，下降率为50.82％。
(2)单颗痘痘红度a*值—头皮；通过皮肤镜图像分析管理系统PhotoMax PRO对头皮的单颗痘痘红度a*值在使用测试产品(实施例1中制备得到的洗发水)前、连续使用测试产品7天后的头皮进行拍摄。结果见表23、表24，图12、图13。
表23
表24
*统计方法：采用t检验方法进行分析，检验水准α＝0.05。
*显著性标注方法："n.s"表示无统计学差异，p≥0.05；p<0.05表示有显著性差异("*"表示0.01≤p<0.05；"**"表示0.001≤p<0.01；"***"表示p<0.001)。
结论：连续使用测试产品实施例1中制备得到的洗发水7天，受试者的单颗痘痘红度a*值与基础值相比有显著性下降(p<0.001)，下降率为23.49％。
(3)皮肤科医生临床评估—头皮；医生评估方式如表25。皮肤科医生临床评估结果如表26、图14。
表25
表26
结论：连续使用实施例1中制备得到的洗发液7天，37.50％的受试者头皮痘痘痊愈；56.25％的受试者头皮痘痘得到有效改善；6.25％的受试者头皮痘痘无改善。
综上所述，连续使用实施例1中制备得到的洗发液7天，受试者头皮痘痘改善有效率为93.75％。
(4)自我评估—全头。受试者自我评估标准为表27。自我评估的结果见表28，图15。
表27
表28
2)通过人体试用试验来观察样品对人体皮肤安全性，受试者回访时，仔细询问、检查并记录受试者在使用样品期间所发生的任何不良事件，包括不良事件的表现、发生时间、处理措施及转归，并对不良事件与所使用样品的关系做出判断。结果见表29.
表29
皮肤反应 分级 D7
无反应 0 32例
微弱红斑 1 0例
红斑、浸润、丘疹 2 0例
红斑、水肿、丘疹、水痐 3 0例
红斑、水肿、大痐 4 0例
结论：参考2015年版《化妆品安全技术规范》中规定的人体试用试验皮肤不良反应分级标准，32名受试者进行人体试用试验研究，未见任何皮肤不良反应。
3)依据QB/T2738-2012《日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》第7.3条。制备菌悬液：用PBS液将试验菌悬液做适当稀释，要求浓度为：取0.1mL滴于5.0mL对照样液(PBS)内，回收菌落数为1×104～9×104CFU/mL；根据要求，使用实施例1制备得到的洗发水，对糠秕马拉色菌和痤疮丙酸杆菌分别作用时间为5min，温度23℃±1℃，试验重复三次；将糠秕马拉色菌抑菌试验培养皿置于培养箱中28～30℃培养72h，痤疮丙酸杆菌试验培养皿置于培养箱中37℃厌氧条件下培养72h。阴性对照组为PBS、培养基无细菌生长。
结果见表30：实施例1制备得到的洗发水原液对糠秕马拉色菌的抑菌率；表31：实施例1制备得到的洗发水原液对痤疮丙酸杆菌的抑菌率。
表30
表31
结论：经3次重复试验，该样品作用5min对糖批马拉色菌和座疮丙酸杆菌的抑菌率≥50～90％,符合QB/T2738-2012《日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》7.3.6的要求，说明该样品具有抑菌(抑制糠秕马拉色菌和痊疮丙酸杆菌)作用。
5、稳定性测试
对实施例1～3，对比例1～4制备得到的洗发水进行冷藏一个月，取出摇晃1分钟后静置一天，再置于50℃一个月，取出摇晃1分钟，静置一天，观察实施例1～3，对比例1～3有无变化。结果见表32。
6、起泡性测试。
在20mL的量筒中加入1mL的洗发水(实施例1～3，对比例1～4)，再加入4mL的水，用玻璃棒进行匀速不停的搅拌，观察搅拌5min后泡沫的高度。实验结束，实施例1～3的制备得到洗发水的泡沫高度高于对比例1～4。
表32
分层现象
实施例1 无分层
实施例2 无分层
实施例3 无分层
对比例1 分层
对比例2 分层
对比例3 分层
对比例4 分层

Claims (2)

1.一种舒缓祛痘的洗发水，其特征在于，其制备原料，按重量份计，为11份椰油酰羟乙磺酸钠、4份月桂酰肌氨酸钠、2份椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、1份椰油酰胺丙基甜菜碱、0.5份聚季铵盐-7、0.5份聚季铵盐-39、1份聚山梨醇酯-20、0.4份迷迭香叶油、0.1份茶树精油、0.8份库拉索芦荟叶汁、0.2份荨麻提取物、0.2份甘草提取物、0.2份维生素原B5、2份甘草酸二钾、0.15份苯甲醇、0.15份脱氢醋酸、0.1份乙二胺四醋酸四钠、0.5份抗坏血酸、0.3份柠檬酸、80份水。
2.一种根据权利要求1所述的舒缓祛痘的洗发水的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1)常温下，向主混罐中加入水，加入两性离子表面活性剂，搅拌3～7min，再加入阳离子表面活性剂，搅拌成均一态，形成混合液1；
S2)将混合液1加热至70～85℃，再加入阴离子表面活性剂，恒温搅拌3～8min，形成混合液2；
S3)将混合液2降温至30～40℃，加入非离子表明活性剂、活性精油、植物提取物，搅拌成均一态，形成混合液3；
S4)在混合液3中加入剩下原料，搅拌成均一态，出料，得到舒缓祛痘的洗发水。
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