CN115777511A - 一种适用于工厂化培育大量蓝莓实生幼苗的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种适用于工厂化培育大量蓝莓实生幼苗的方法，该方法通过采集完全成熟的蓝莓种子进行如下操作：（1）筛选浸泡；（2）机械匀磨；（3）低温诱导；（4）变温培育。本方法适用于工厂化繁育大量蓝莓实生幼苗，操作简单，机械匀磨协同变温诱导可快速诱导蓝莓种子萌发，无需沙藏，不使用化学试剂诱导，具绿色环保、低本高效的优点，适合蓝莓杂交育种、实生选优等较大规模苗木抚育，是一种快速获得大量蓝莓实生幼苗的有效方法。
Description
技术领域
本发明属于植物学领域，具体涉及一种适用于工厂化培育大量蓝莓实生幼苗的方法。
背景技术
蓝莓为杜鹃花科（Ericacoye）越橘属（Vaccinium）多年生落叶或常绿灌木（尹德洁等，2013）。蓝莓果实富含花青素，果实颜色呈现淡蓝色、亮蓝色、暗蓝色等，成熟果实酸甜可口，具有美容养颜、抗癌、延缓衰老、保护眼睛等保健功效，有非常高的经济价值和开发前景（Hu 等, 2009；Siddiq等, 2017）。全世界蓝莓约有400多个种，蓝莓具有很高的种植效益和巨大的市场潜力，目前成为全球发展最快的果树树种（李亚东，2022）。我国拥有越橘属植物90个种，28个亚种、变种，遍布全国各地，主要生长于东北、西南和华南地区（钟心尧，2014；王小敏等，2021）。
根据我国不同产区的自然条件，选育出替代传统老品种的鲜食优良品种，特别是培育具有自主知识产权优良品种，实现老品种的更新换代和蓝莓生产的良种化是保障我国未来蓝莓产业健康发展的至关重要的环节（李亚东，2022）。
实生选优和杂交育种是培育蓝莓新品种的重要手段，而实生幼苗的繁育则是蓝莓种子是抚育杂交或实生后代的基础，但是目前报导的大多高丛和兔眼蓝莓都要经过沙藏或者使用赤霉素（GA3）处理种子，因品种不同处理时间30min-24h不等，处理浓度100-1000mg/L不等，但发芽率也5%-85%（刘有春，2018；杨春玉，2014）。蓝莓种子作为育种的重要材料，其特性是高丛还是兔眼类型，目前无法鉴定。又因种子的独特性，每一粒种子都可能是选育优良品种的基础材料，因此，没有条件进行GA3浓度和时间的试验。为了破除种皮对种子萌发的阻碍，经常用浓硫酸、高锰酸钾、次氯酸钠等化学试剂处理，但是蓝莓种子较小，化学试剂处理很容易伤及种子内部，且大量使用浓硫酸、GA3等化学试剂也不符合目前绿色环保的农业现代化发展宗旨。当今蓝莓新品种选育面临巨大挑战，实生幼苗培育的工作量较大，单批次播种量几万-几百万粒不等，因此研发一种适用于工厂化培育大量蓝莓实生幼苗的方法具有重要的实践意义。本发明操作简单，创新研发了机械匀磨协同变温培育快速诱导蓝莓种子萌发的方法，本发明不使用化学试剂诱导，具绿色环保、低本高效的优点，适合杂交育种、实生选优等较大规模苗木抚育，是一种快速获得大量蓝莓实生幼苗的有效方法。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺陷，提供适用于工厂化培育大量蓝莓实生幼苗的方法。
为了达到上述目的，本发明提供了一种适用于工厂化培育大量蓝莓实生幼苗的方法，其特征在于，所述蓝莓实生苗的培育方法包括如下步骤：
（1）筛选浸泡：将蓝莓种子过30目筛子，筛去杂质及不饱满的种子，然后用pH4.5-5.5，30-40℃的酸性纯水浸泡60 -120min。
（2）机械匀磨：准备细河沙，过20目筛子，去除大颗粒，加入pH4.5-5.5的酸性纯水，使河沙的含水量为15-20%，将步骤（1）的种子与河沙按照体积比1:1-1:2混匀，放在500-1000ml的锥形瓶中，置于摇床中，常温条件下，机械匀磨30-60min。
（3）低温诱导：将步骤（2）种子与沙子的混合物置于3℃冰箱中3-5d。
（4）变温培育：将步骤（3）中的蓝莓种子播种在穴盘中，置于智能温室中培养，培养条件为白天20-25℃，光照3000-5000lx，夜间，12-16℃，暗培养。
（5）肥水管理：播种后浇一次透水，覆薄膜保湿；种子露出2片真叶去掉薄膜，保持空气湿度55-65%；种子长出2片真叶，保持空气湿度30-40%，每7d浇一次1-3‰全营养复合肥，直到幼苗高5-10cm即可出苗圃。
其中步骤（1）中蓝莓种子来源于高丛、兔眼蓝莓品种果实或高丛与兔眼品种的杂交果实，自然阴干，含水量为10-15%。步骤（2）中锥形瓶中放入蓝莓种子与河沙的混合体积为200 -400m，摇床的转速为150-200 R/min。步骤（4）中播种基质为底部铺一层1.5-2.0cm厚的蛭石，颗粒大小5-8mm，中间为进口草炭：蛭石：椰糠混合基质，体积比为3:2:1，厚度为5cm，最上层为0.4-0.8mm的椰糠，蓝莓种子播在混合基质和椰糠之间，播种密度为500-1000粒/m2。
在部分实施例中，较为优选的，步骤（2）中种子大于20目（含20目）的与河沙按照体积比1:2混匀成400ml，放在1000ml的锥形瓶中，置于摇床中，常温条件下，150 R/min，机械匀磨60 min；种子小于20目的与河沙按照体积比1:1混匀成400ml，放在1000ml的锥形瓶中，置于摇床中，常温条件下，200 R/min，机械匀磨30 min。
在部分实施例中，较为优选的，步骤（4）中蓝莓种子播种在穴盘中，底部铺一层2.0cm厚的蛭石，蛭石颗粒大小8mm，中间为进口草炭：蛭石：椰糠混合基质，体积比为3:2:1，厚度为5cm，最上层为0.5mm的椰糠，蓝莓种子播在混合基质和椰糠之间，播种密度为800粒/m2置于智能温室中培养，培养条件为白天20-25℃，光照3000-5000lx，夜间，12-16℃，暗培养。
更为具体的，本发明获取培育蓝莓实生幼苗的方法针对蓝莓杂交育种、实生选优等工厂化较大规模培育蓝莓幼苗。具体包含如下操作（1）筛选浸泡：收集来源于高丛、兔眼蓝莓品种果实或高丛与兔眼品种的杂交果实，自然阴干，且含水量为10-15%的蓝莓种子，过30目筛子，筛去杂质及不饱满的种子，然后用pH4.5-5.5，30-40℃的酸性纯水浸泡60 -120min。（2）机械匀磨：准备细河沙，过20目筛子，去除大颗粒，加入pH4.5-5.5的酸性纯水，使河沙的含水量为15-20%，将步骤（1）的种子与河沙按照体积比1:1-1:2混匀，放在500-1000ml的锥形瓶中，置于摇床中，常温条件下，150-200 R/min，机械匀磨30-60min。（3）低温诱导：将步骤（2）种子与沙子的混合物置于3℃冰箱中3-5d。（4）变温培育：将步骤（3）中的蓝莓种子播种在穴盘中，穴盘底部铺一层1.5-2.0cm厚的蛭石，颗粒大小5-8mm，中间为进口草炭：蛭石：椰糠混合基质，体积比为3:2:1，厚度为5cm，最上层为0.4-0.8mm的椰糠，蓝莓种子播在混合基质和椰糠之间，播种密度为500-1000粒/m2，将播种后的穴盘置于智能温室中培养，培养条件为白天20-25℃，光照3000-5000lx，夜间，12-16℃，暗培养。（5）肥水管理：播种后浇一次透水，覆薄膜保湿；种子露出2片真叶去掉薄膜，保持空气湿度55-65%；种子长出2片真叶，保持空气湿度30-40%，每7d浇一次1-3‰全营养复合肥，直到幼苗高5-10cm即可出苗圃。
本发明诱导蓝莓种子10d即开始萌发，30d发芽率大于90%，60d实生苗成苗率大于95%。
本发明相比现有技术具有以下优点：
1、本发明创新研发了机械匀磨协同变温诱导快速诱导蓝莓种子萌发的方法，本发明不使用化学试剂诱导，具绿色环保、低本高效的优点
2、本发明种子筛选浸泡、机械匀磨、低温诱导、变温培育均可辅助机器操作，大大提高了工作效率，省时省力，适合杂交育种、实生选优等工厂化大规模实生幼苗的培育工作。
3、本发明通过机械匀磨种子与沙子体积比、摇床转速和时间这些关键因素的筛选，确认最佳体积比、匀磨转速和时间，高效地的破除了种皮对蓝莓种子发育的阻碍，缩短了蓝莓种子萌发的时间。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
试验材料
实施例1
种子与沙子体积比筛选
以蓝莓品种钱德勒（Chandler）自然授粉获得的种子为材料，种子与河沙按照一定体积比混匀，放在500ml的锥形瓶中，置于摇床中，常温条件下，180 R/min，机械匀磨30min，置于3℃冰箱中3d，放在光照培养箱中变温诱导萌发，30d时统计萌发率。
表1 种子与河沙体积比对种子萌发率和破损率的影响
由表1可知，河沙的体积占比增加，种子萌发率有升高的趋势，但是种子的破损率也相应增加，种子萌发需要的时间缩短，综合分析种子萌发率和破损率，优选1:1-1:2是最佳的种子与河沙的体积比。
实施例2
摇床转速和时间的筛选
以蓝莓品种钱德勒（Chandler）自然授粉获得的种子为材料，种子与河沙按照1:1体积比混匀，放在500ml的锥形瓶中，置于摇床中，常温条件下，机械匀磨30min，置于3℃冰箱中3d，放在光照培养箱中变温诱导萌发，30d时统计萌发率。
表2 摇床转速对种子萌发率和破损率的影响
由表2可知，摇床转速越高种子的破损率越高，当转速为200 R/min时，种子萌发率最高，综合分析种子萌发率、破损率，优选摇床转速150-200 R/min。
以蓝莓品种钱德勒（Chandler）自然授粉获得的种子为材料，种子与河沙按照1:1体积比混匀，放在500ml的锥形瓶中，置于摇床中，200 R/min常温条件下，机械匀磨不同时间，置于3℃冰箱中3d，放在光照培养箱中变温诱导萌发，30d时统计萌发率。
表3 匀磨时间对种子萌发率和破损率的影响
由表3可知，匀磨时间越长种子的破损率越高，30min时，种子萌发率最高，综合分析种子萌发率和破损率，优选匀磨时间为30-60min。
综合表2和表3的实验结果，匀磨时摇床的转速为150-200 R/min，时间为30-60min，是最佳的配置指数。
Claims (6)
1.一种适用于工厂化培育大量蓝莓实生幼苗的方法，其特征在于，所述蓝莓实生苗的培育方法包括如下步骤：
（1）筛选浸泡：将蓝莓种子过30目筛子，筛去杂质及不饱满的种子，然后用pH4.5-5.5，30-40℃的酸性纯水浸泡60 -120min。
（2）机械匀磨：准备细河沙，过20目筛子，去除大颗粒，加入pH4.5-5.5的酸性纯水，使河沙的含水量为15-20%，将步骤（1）的种子与河沙按照体积比1:1-1:2混匀，放在500-1000ml的锥形瓶中，置于摇床中，常温条件下，机械匀磨30-60min。
（3）低温诱导：将步骤（2）种子与沙子的混合物置于3℃冰箱中3-5d。
（4）变温培育：将步骤（3）中的蓝莓种子播种在穴盘中，置于智能温室中培养，培养条件为白天20-25℃，光照3000-5000lx，夜间，12-16℃，暗培养。
（5）肥水管理：播种后浇一次透水，覆薄膜保湿；种子露出2片真叶去掉薄膜，保持空气湿度55-65%；种子长出2片真叶，保持空气湿度30-40%，每7d浇一次1-3‰全营养复合肥，直到幼苗高5-10cm即可出苗圃。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中蓝莓种子来源于高丛、兔眼蓝莓品种自然收粉果实或高丛与兔眼品种的杂交果实，种子自然阴干，含水量为10-15%。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中锥形瓶中放入蓝莓种子与河沙的混合体积为200 -400ml。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中摇床的转速为150-200 R/min。
5.要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4）中播种基质为底部铺一层1.5-2.0cm厚的蛭石，颗粒大小5-8mm，中间为进口草炭：蛭石：椰糠混合基质，体积比为3:2:1，厚度为5cm，最上层为0.4-0.8mm的椰糠。
6.利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4）中蓝莓种子播在混合基质和椰糠之间，播种密度为500-1000粒/m2。
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