CN115634220A - 二甲双胍在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了二甲双胍在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用。本发明首次发现二甲双胍对电磁辐射致生殖损伤的保护作用，提供了二甲双胍在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用，具体为二甲双胍可改善微波辐射所致的大鼠血清激素紊乱，睾丸组织能量代谢酶LDH、SDH、α‑GLU含量减少，睾丸结构结构异常，氧化应激损伤和线粒体功能下降等，为预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤药物提供了新的手段。

Description

二甲双胍在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品 中的应用

技术领域

本发明涉及二甲双胍的新用途，尤其涉及二甲双胍在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用。

背景技术

随着电磁波技术的快速发展，在通信、医疗、军事等领域均被广泛应用，但其造成的健康危害也不能忽视。流行病学调查和实验研究显示，雄性生殖器官是微波辐射损伤的敏感靶器官之一，可引起男性性功能减退，精液质量下降，生殖器官结构和功能损伤，表现为精子数量减少、活动力下降、活力和运动参数下降、畸形精子率增加，血清睾酮含量下降，睾丸、精子组织结构和超微结构损伤等。近年来，对微波辐射致生殖器官损伤及其防护的研究在国内外受到普遍重视，但有效的防护药物尚缺乏。现有研究也大多集中于天然化合物（如CN106822224A）。虽然天然化合物毒副作用小，但应用于临床还需要很长一段路要走。因此，在已经应用于临床中治疗其他疾病的药物中寻找有效的抗电磁辐射药物，是开发不同形式辐射损伤防护的新策略。

二甲双胍是一种双胍类化合物，是目前使用最广泛的ΙΙ-型糖尿病的治疗药物。二甲双胍具有多种生物活性，现有研究已经证实，在抗衰老、抗氧化、抗电离辐射等方面有很好的效果。二甲双胍在电磁辐射损伤防护方面尚未见文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供二甲双胍在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用。

第一方面，本发明提供二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用。

上述的应用中，所述二甲双胍药学上可接受的盐为二甲双胍的无机酸盐或有机酸盐。作为实例，所述二甲双胍药学上可接受的盐为二甲双胍盐酸盐。

上述的应用中，所述二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物作为唯一活性成分。

上述的应用中，优选地，所述电磁辐射为微波辐射。

上述的应用中，所述电磁辐射致生殖损伤为电磁辐射致雄性生殖损伤。所述电磁辐射致生殖损伤包括睾丸结构损伤、精子质量损伤和生殖功能损伤中的至少一种。

第二方面，本发明提供包含二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物的组合物在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用。

上述的应用中，所述组合物还包含辅料和/或与二甲双胍可配伍的药物。

上述的应用中，所述电磁辐射为微波辐射。

上述的应用中，所述电磁辐射致生殖损伤为电磁辐射致雄性生殖损伤。所述电磁辐射致生殖损伤包括睾丸结构损伤、精子质量损伤和生殖功能损伤中的至少一种。

本发明中，预防和/或治疗微波辐射致生殖损伤体现在下述至少一方面：

A1）改善微波辐射所致的血清激素紊乱；

A2）改善微波辐射所致的精子活力下降；

A3）改善微波辐射所致的睾丸和附睾组织中能量代谢酶的含量减少；

A4）改善微波辐射所致的睾丸结构的异常；

A5）改善微波辐射所致的睾丸组织超微结构异常；

A6）改善微波辐射所致的氧化应激损伤；

A7）改善微波辐射所致的线粒体功能下降。

进一步地，所述改善微波辐射所致的血清激素紊乱中的激素为促卵泡雌激素（follicle-stimulating hormone, FSH）和/或抑制素B（inhibin B, INHB）；

所述改善微波辐射所致的睾丸及附睾中能量代谢酶的含量减少中的能量代谢酶为乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）、琥珀酸脱氢酶（succinatedehydrogensae, SDH）和α-葡萄糖苷酶（α Glucosidase, α-GLU）中的至少一种；

所述改善微波辐射所致的氧化应激损伤为改善还原性谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽（superoxide dismutase /L-Glutathioneboxidised, GSH/GSSG）比率下降、改善超氧化物歧化酶（superoxide dismutase , SOD）活性下降和改善丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量增多中的至少一种；

所述改善微波辐射所致的线粒体功能下降为改善线粒体复合体IV含量减少和改善ATP酶含量减少中的至少一种。

上述的应用中，所述产品为药物或药物制剂。

上述的应用中，所述药物含有有效剂量的二甲双胍或其药学上可以接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物。有效剂量为单位给药剂量形式(如一片药物中的含量)或治疗的患者的单位剂量（如单位体重剂量）。在本发明中，药物治疗的对象为人或哺乳动物类（如大鼠等）。在本发明中，对6-8周龄的雄性Wistar大鼠灌胃给药的有效剂量为10毫克每公斤，30毫克每公斤和90毫克每公斤，结果显示，90毫克每公斤的效果较好。

本发明中所述的产品可为药物，所述的药物的剂型不限，只要能够使活性成分有效达到体内的剂型都可以，包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂等。

第三方面，本发明提供一种预防和/或治疗电磁辐射致生殖器官损伤的产品，其含有二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物。

上述的产品中，所述电磁辐射为微波辐射。

本发明具有如下有益效果：

本发明首次发现二甲双胍对电磁辐射致生殖损伤的保护作用，提供了二甲双胍在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用，具体为可改善微波辐射所致的血清激素紊乱，改善微波辐射所致的能量代谢酶LDH、SDH、α-GLU含量减少，改善微波辐射所致的睾丸结构的异常，改善微波辐射所致的睾丸组织超微结构异常，改善微波辐射所致的氧化应激损伤，改善微波辐射所致的线粒体功能下降，为预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的药物的拓展了提供了新的思路。

附图说明

图1为二甲双胍可改善微波辐射所致的睾丸组织形态变化（光镜，标尺为100微米）。C组可见正常睾丸组织。R组显示，辐射后6小时生精上皮排列疏松，生精细胞排列紊乱，生精细胞坏死脱落；辐射后7天生精细胞空化，生精细胞排列紊乱；辐射后14d生精细胞空化程度减轻；辐射后28d生精细胞未见明显损伤。药物组损伤较R组减轻，但L组损伤恢复速度较M和H组慢，H组效果较好。

图2为二甲双胍改善微波辐所致的大鼠睾丸组织超微结构变化（透射电镜，标尺为500纳米）。图2A微波辐射后6小时各组超微结构变化。图2B为微波辐射后7天各组超微结构变化。C组可见正常睾丸组织精原细胞、精母细胞和精子细胞。R组可见精原细胞水肿空化，染色质异常凝集边移；精母细胞染色质异常凝集边移，细胞坏死；精子细胞水肿；线粒体肿胀空化。L组可见精原细胞染色质异常凝集边移，核膜破裂；精母细胞水肿，核膜破裂；精子细胞水肿，核膜破裂，线粒体肿胀空化。M组可见精原细胞水肿，染色质异常凝集边移，线粒体肿胀；精母细胞水肿，核膜模糊，线粒体肿胀；精子细胞正常。H组可见精原细胞水肿或正常；精母细胞和精子细胞正常。药物组损伤较R组减轻，H组损伤恢复速度较L和M组快。

具体实施方式

本发明实施例提供了二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用，优选地，所述电磁辐射为微波辐射。

根据本发明，所述二甲双胍药学上可接受的盐为二甲双胍的无机酸盐或有机酸盐，包括但不限于具体其药学上可接受的盐包括：盐酸盐、乙酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、延胡索酸盐、双羟萘酸盐、氯苯氧基乙酸盐、羟乙酸盐、门冬氨酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、对氯苯氧基异丁酸盐、甲酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、环己烷羧酸盐、三甲氧基苯甲酸盐、对甲苯磺酸盐、金刚烷羧酸盐、谷氨酸盐、吡咯琓酮羧酸盐、萘磺酸盐、1-葡糖磷酸、硝酸盐、亚硫酸盐、连二硫酸盐、乙酰水杨酸盐、磷酸盐，其中优选的盐形式是盐酸盐。

根据本发明，所述二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物可作为唯一活性成分。

本发明实施例还提供包含二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物的组合物在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用。所述组合物还包含辅料和/或与二甲双胍可配伍的药物，优选药学上可接受的辅料，所述与二甲双胍可配伍的药物包括辅助功能如协同放大作用、拮抗或缓解二甲双胍的副作用等的药物。

根据本发明，所述电磁辐射致生殖损伤包括睾丸结构损伤、精子质量损伤和生殖功能损伤中的至少一种。

根据本发明，所述产品为药物或药物制剂。

需要说明的是，本发明中二甲双胍对微波辐射致生殖损伤的保护作用不受微波辐射波段和平均功率密度的限制，下面实施例中仅以S波段（2~4GHz）微波辐射，平均功率密度30mW/cm²为例对二甲双胍在制备预防和/或治疗微波辐射致生殖损伤的产品中的应用进行详细说明，显然，其不构成对本发明的限制。

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

SPF级二级雄性Wistar大鼠100只，体重（200±20g，6-8周龄）购买于北京维通利华实验动物技术有限公司（中国，北京），在军事医学研究院实验动物中心饲养。所有大鼠保持在恒定的环境条件下，温度22±2℃，相对湿度60%，每天进行12小时的明暗循环。提供食品和蒸馏水。所有方案得到了动物护理和使用委员会的批准(伦理编号：IACUC-AMMS-2020-780)。

二甲双胍购自SIGMA公司，型号：D150959-5g。

下述实施例中的数据采用SPSS25.0统计学软件进行独立样本t-检验分析。P<0.05时被认为差异显著。*表示R组与C组相比P<0.05，**表示P<0.01；#表示L、M、H组与R组相比P<0.05，##表示P<0.01；▲表示M、H组与L相比P<0.05，▲▲表示P<0.01；◆表示H与M组相比P<0.05，◆◆表示P<0.01。

实施例1 动物分组、微波照射和二甲双胍给予

大鼠随机分为5组，每组20只，分组如下：（1）正常对照组（C组）；（2）辐射组（R组）；（3）辐射＋10毫克每公斤二甲双胍组（L组）；（4）辐射＋30毫克每公斤二甲双胍组（M组）；（5）辐射＋90毫克每公斤二甲双胍组（H组）。

采用S波段微波辐射源，平均功率密度为30毫瓦每平方厘米微波辐射100只Wistar雄性大鼠，辐射持续6周，5天/周，15分钟/天。二甲双胍于停止辐射前14天开始灌胃给与，连续给药21天。在暴露期间，除微波辐射外，对照组的大鼠与辐射组平行地进行同样处理，且灌胃时给予等体积生理盐水。照射结束后6小时（给药14天）、7天（停药后6小时）、14天（停药后7天）和28天（停药后14天）用1%戊巴比妥钠（0.5毫升/100克）经腹腔注射麻醉，剖杀动物，采血，取双侧睾丸及附睾，睾丸一侧冻存一侧固定，附睾一侧冻存一侧检测精子活力。

实施例2 二甲双胍可改善微波辐射所致的血清激素紊乱

外周血激素指标检测：各组大鼠（每组5只）分别于微波辐射后6小时、7天、14天和28天用1%戊巴比妥钠（0.5毫升/100克）经腹腔注射麻醉，经腹主静脉取血3毫升，制备血清。利用放射免疫分析法检测大鼠血清中FSH和INHB含量。

表1二甲双胍对微波辐射后FSH（mIU/mL)含量的影响

注：表1和表2中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01；#示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01；▲示M、H组与L相比P<0.05，▲▲示P<0.01；◆示H与M组相比P<0.05，◆◆示P<0.01。

表2二甲双胍对微波辐射后 INHB (pg/mL)含量的影响

注：表1和表2中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01；#示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01；▲示M、H组与L相比P<0.05，▲▲示P<0.01；◆示H与M组相比P<0.05，◆◆示P<0.01。

实验结果如表1，2所示。由表1可以看出，微波辐射后6小时、7天 R组FSH含量下降（P<0.01），辐射后14天、28天含量上升（P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时、7天M和H组FSH含量升高（P<0.05），辐射后14天L和H组FSH含量下降（P<0.05），辐射后28天L、M和H组FSH含量下降（P<0.01）；各给药组间相比，辐射后7d M和H组较L组效果显著（P<0.05），辐射后14天H组较M组效果显著（P<0.05）。由表2微波辐射后6小时、7d、14d和28d INHB含量下降（P<0.05或P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时、28天L、M和H组INHB含量上升（P<0.05或P<0.01），辐射后7天、14天H组INHB含量上升（P<0.05）；各给药组间相比，辐射后6小时、7d H组较L和M组效果显著（P<0.05或P<0.01），辐射后14天H较M组效果显著（P<0.05），辐射后28天M和H较L组效果显著（P<0.05）。结果表明微波辐射后FSH分泌紊乱，INHB浓度降低，二甲双胍可抑制两种激素的改变，且H组效果较好。因此，二甲双胍可改善微波辐射所致的血清激素紊乱。

实施例3 二甲双胍可改善微波辐射所致的精子活力下降

精子活动度检测：各组大鼠（每组5只）于微波辐射后6小时、7天、14天和28天麻醉，切除一侧附睾（另一侧冻存于-80°冰箱），在头部剪取绿豆大小组织放入装有37°0.8ml生理盐水的EP管中，充分剪碎组织约1分钟。用移液器吸取20μl精子悬液滴加于载玻片上，并采用IVOS II全自动精子分析仪（HamiltonThorne公司，美国）分析精子活动度。

表3 二甲双胍给药14 d（停止照射后6h）大鼠精子活力

表3-表5中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01；#示L、M、H组与R组相比P<0.05；##示P<0.01。

表4 二甲双胍停药后6 h（停止照射后7d）大鼠精子活力

表3-表5中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01；#示L、M、H组与R组相比P<0.05；##示P<0.01。

表5 二甲双胍停药后7d（停止照射后14d）大鼠精子活力

表3-表5中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01；#示L、M、H组与R组相比P<0.05；##示P<0.01。

实验结果如表3-5所示。精子活力是反应睾丸功能的重要指标之一，由表3-5可知，微波辐射后6小时、7天和14天 A+B级精子比例降低（P<0.05或P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时、7天各给药组和辐射后14天 L和H组A+B级精子比例升高（P<0.05或P<0.01）；各给药组之间无统计学差异。C级精子比例在微波辐射后四个时间点各组均无统计学差异。微波辐射后6小时、7天和14天 D级精子比例升高（P<0.05或P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时、7天给药组和辐射后14d H组D级精子比例降低（P<0.05或P<0.01）；各给药组之间无统计学差异。综上所述，结果表明微波辐射后精子活动度下降，二甲双胍可改善这种现象。因此，二甲双胍可改善微波辐射所致的精子活力下降。

实施例4 二甲双胍可改善微波辐射所致的LDH、SDH、α-GLU含量减少

LDH、SDH、α-GLU含量检测：取出冻存于-80°冰箱的辐射后6小时、7天、14天和28天的睾丸和附睾组织，称取适量组织。使用大鼠LDH、SDH、α-GLU ELISA试剂盒（江莱生物科技有限公司，上海，中国）检测大鼠睾丸组织中LDH、SDH和附睾组织中α-GLU的含量。

表6 二甲双胍对微波辐射后LDH（ng/g protein）含量的影响

表6-表8中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01； #示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01；▲示M、H组与L相比P<0.05，▲▲示P<0.01；◆示H与M组相比P<0.05，◆◆示P<0.01。

表7 二甲双胍对微波辐射后SDH（ng/g protein）含量的影响

表6-表8中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01； #示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01；▲示M、H组与L相比P<0.05，▲▲示P<0.01；◆示H与M组相比P<0.05，◆◆示P<0.01。

表8 二甲双胍对微波辐射后α-GLU（μg/g protein）含量的影响

表6-表8中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01； #示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01；▲示M、H组与L相比P<0.05，▲▲示P<0.01；◆示H与M组相比P<0.05，◆◆示P<0.01。

实验结果如表6-8所示。LDH、SDH和α-GLU是精子能量代谢的重要酶系，在精子获能过程中扮演重要的角色。如表6所示，微波辐射后6小时、7天、14天和28天LDH含量减少（P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时、7天、14天和28天各给药组LDH含量升高（P<0.05或P<0.01）；给药组间相比，辐射后6小时、14天和28天H组较L组效果显著（P<0.05或P<0.01），辐射后28d H组较M组效果显著（P<0.05）。如表7所示，微波辐射后6小时、7天、14天和28天SDH含量减少（P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时、7天、14天和28天各给药组SDH含量增多（P<0.05或P<0.01）；各给药组间相比，辐射后6小时H组较L组效果显著（P<0.05），辐射后7d M和H组较L组效果显著（P<0.05），辐射后14d M和H组较L组效果显著（P<0.05）。如表8所示，微波辐射后6小时和7dα-GLU 含量下降（P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时和7天M和H组α-GLU含量升高（P<0.05或P<0.01）；各给药组之间无明显差异。结果表明微波辐射后LDH、SDH、α-GLU含量减少，二甲双胍可使其含量升高，H组效果较好。因此，二甲双胍可改善微波辐射所致的LDH、SDH、α-GLU含量减少。

实施例5 二甲双胍可改善微波辐射所致的睾丸结构的异常

睾丸组织结构：各组大鼠（每组5只）分别于辐射后6小时、7天、14天和28天处死，取大鼠睾丸组织。一侧组织冷冻保存，另一侧组织放入10%中性缓冲福尔马林固定1周后，经脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋，切片，切片厚度为3微米。将切片放入60度温箱烤片48小时后，用苏木素和伊红染色。最后使用光学显微镜观察并采集图像（Leica,德国）。

实验结果如图1所示。微波辐射后睾丸组织基本病变特点主要表现为生精小管上皮排列疏松，生精细胞排列紊乱、空泡化，腔内精子减少或缺失，生精细胞变性、坏死和脱落，间质水肿等。给与二甲双胍后，睾丸组织结构损伤减轻，H组效果较好。辐射后28天睾丸组织结构有所恢复，但仍可见上皮组织疏松。图1展示了这一部分内容。因此，二甲双胍可改善微波辐射所致的睾丸结构的异常。

实施例6 二甲双胍可改善微波辐射所致的睾丸组织超微结构异常

睾丸组织超微结构：各组大鼠（每组5只）分别于辐射后6小时和7天处死，取约1mm³的新鲜睾丸组织用2.5%戊二醛液固定2小时，然后用1%饿酸固定2小时，再经过梯度乙醇脱水，丙酮过渡，包埋于EPON618中。将标本切成超薄切片，用醋酸铀和柠檬酸铅染色。干燥后，用透射电子显微镜(TEM)(H-7800，东京，日本)观察大鼠睾丸组织。通过TEM观察大鼠睾丸超微结构变化。实验选取辐射后6小时和7天，观察睾丸组织的超微结构。

实验结果如图2所示。我们观察到微波辐射后精原、精母、精子细胞肿胀空化，精原、精母细胞染色质凝集边移，线粒体肿胀空化，精原、精母细胞凋亡、坏死等。给予二甲双胍后损伤有所缓解，H组效果较好。图2A、B展示了这一部分内容。因此，二甲双胍可改善微波辐射所致的睾丸组织超微结构异常。

实施例7 二甲双胍可改善微波辐射所致的氧化应激损伤

氧化应激指标及线粒体相关酶检测：将辐射后6小时、7天、14天和28天的各组大鼠（每组5只）冻存在-80°的睾丸组织取出，称取适当组织放入裂解液中以准备测定氧化应激指标。使用商业试剂盒(G263，DOJINDO，Japan)（19160，MAK085，SIGMA，USA）测定GSH/GSSG比率、SOD活性和MDA含量。（1）通过检测加入DTNB后在412nm处的显色反应加上在谷胱甘肽还原酶作用下的循环体系选择性地对GSSG进行定量，GSH含量则可以通过总谷胱甘肽含量来得到。（2）采用基于黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应体系产生的超氧阴离子可还原WST-1生成formazan的方法检测SOD活性。（3）根据硫代巴比妥酸（TBA）的反应性，测定组织中MDA浓度。

表9 二甲双胍对微波辐射后GSH/GSSG比率的影响

表9-11中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01; #示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01。

表10 二甲双胍对微波辐射后SOD活性的影响（%)

表9-11中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01; #示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01。

表11 二甲双胍对微波辐射后MDA（nmol/ml）含量的影响

表9-11中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01; #示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01。

实验结果如表9-11所示。氧化应激是微波辐射致机体损伤的重要机制之一。由表9可以看出，微波辐射后6小时、7天、14天和28天GSH/GSSG比率下降（P<0.05或P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时、14天L组、辐射后7天、14天M组、辐射后6小时、7天、14天和28天GSH/GSSG比率升高（P<0.05）；各药物组之间无统计学差异。由表10可以看出，微波辐射后6小时、7天、14天和28天SOD活性下降（P<0.05）；给药组与辐射组相比,辐射后6小时、14天M和H组、辐射后7天L、M和H组、辐射后28天H组 SOD活性增强，（P<0.05或P<0.01）；各给药组之间无统计学差异。由表11可以看出，微波辐射后6小时、7天、14天和28天MDA含量增多（P<0.05或P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时M和H组及辐射后7天、14天和28天L、M和H组MDA含量下降（P<0.05或P<0.01）；各给药组之间无统计学差异。

8、二甲双胍可改善微波辐射所致的线粒体功能下降

线粒体相关酶检测：取出冻存于-80度冰箱的辐射后6小时、7天、14天和28天的组织，称取适量组织。使用大鼠线粒体复合物IV和ATP酶ELISA试剂盒（江莱生物科技有限公司，上海，中国）检测大鼠睾丸组织中线粒体复合物IV和ATP酶的含量。

表12二甲双胍对微波辐射后线粒体复合体IV（ng/g protein）含量的影响

表12-13中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01; #示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01；▲示M、H组与L相比P<0.05，▲▲示P<0.01；◆示H与M组相比P<0.05，◆◆示P<0.01。

表13二甲双胍对微波辐射后ATPase（ng/g protein）含量的影响

表12-13中，*示R组与C组相比P<0.05，**示P<0.01; #示L、M、H组与R组相比P<0.05，##示P<0.01；▲示M、H组与L相比P<0.05，▲▲示P<0.01；◆示H与M组相比P<0.05，◆◆示P<0.01。

实验结果如表12、13所示。线粒体是发生氧化反应的主要场所，活性氧增多可造成线粒体功能紊乱。线粒体内的相关酶可以反应线粒体功能和氧化应激损伤程度。由表12可以看出，微波辐射后6小时、7天、14天和28天线粒体复合体IV含量减少（P<0.05或P<0.01）；给药组与辐射组相比，辐射后6小时、7天、14天和28天给药组线粒体复合体IV含量增多（P<0.05或P<0.01）；给药组间无统计学差异。由表13可以看出，微波辐射后6小时、7天、14天和28天ATP酶含量减少（P<0.01）；给药组与辐射组相比, 辐射后6小时L和H组及辐射后7天、14天和28天L、M和H组ATP酶含量增多（P<0.05或P<0.01）；各给药组间相比，辐射后6小时H组较L组效果显著（P<0.05），辐射后7天和14天M和H组较L组效果显著（P<0.05），辐射后28天H组较L和M组效果显著（P<0.05）。结果表明，微波辐射可导致睾丸组织线粒体功能下降，二甲双胍可改善这种现象，H组效果较好。

以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。

Claims (10)

1.二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述二甲双胍药学上可接受的盐为二甲双胍盐酸盐。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物作为唯一活性成分。

4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述电磁辐射为微波辐射。

5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述电磁辐射致生殖损伤包括睾丸结构损伤、精子质量损伤和生殖功能损伤中的至少一种。

6.包含二甲双胍或其药学上可接受的盐、水合物、衍生物、前体化合物的组合物在制备预防和/或治疗电磁辐射致生殖损伤的产品中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述组合物还包含辅料和/或与二甲双胍可配伍的药物。

8.根据6或7所述的应用，其特征在于：所述电磁辐射为微波辐射。

9.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于：所述电磁辐射致生殖损伤包括睾丸结构损伤、精子质量损伤和生殖功能损伤中的至少一种。

10.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于：所述产品为药物或药物制剂。

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