CN115537313A - 一种全自动核酸提取扩增检测仪 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种全自动核酸提取扩增检测仪,针对现有的核酸检测仪器无法做到全自动,效率低下的问题,通过合理排布进样区、耗材存储区、试剂仓、机械臂、裂解区、洗脱区、提取区、扩增区及检测区,其中,进样区包括样本架、样本仓、拉架器及进样轨道,样本架用于放置待检测的样本,样本架排布于所述样本仓内,拉架器将样本架转移至进样轨道,实现进样区的不间断连续进样;机械臂根据预设程序移动,完成样本检测器件样本及试剂的吸取及注射。实现核酸样本的随到随检,即使不同项目也可进行不间断连续上样,节省时间,提高检测效率。
Description
技术领域
本发明属于核酸检测的技术领域,尤其涉及一种全自动核酸提取扩增检测仪。
背景技术
核酸检测是通过血液、其他体液或细胞对DNA进行检测的技术,其基本步骤为:
裂解:通过裂解试剂将细胞裂解,把核酸释放到缓冲液中;
提纯:通过磁吸、离心等方式将核酸缓冲液中的杂质去除,将核酸进行纯化;
扩增:通过试剂和温度控制将核酸进行复制和扩增,放大检测信号;
检测:用荧光等方式对核酸进行检测。
现有的上述各个步骤有单独的仪器来实现,仪器种类繁多、品牌繁杂,仪器匹配度低,步骤之间需要人工进行转运,操作复杂,耗时耗力,容易引入污染。
如专利公开号为CN108504542A的技术方案是:由核酸提取模块、样本存取机构、机械臂机构、硬件安装模块、医疗废弃物收纳箱、试剂存储机构、反应杯进样机构等组成。具体使用时,手动推入反应杯盒,推板将反应杯推入核酸提取模块,机械臂机构从样本存取机构取样至反应杯。反应结束后,核酸由机械机构提取至试剂存储机构中,拨杆把反应杯废弃物拨到垃圾箱内。机械结构再从试剂存储机构中将装有试剂的EP管提取至PCR模块进行扩增检测。缺点是样本通量小、效率低、机械臂机构稳定性较差。
发明内容
本发明的目的是提供一种全自动核酸提取扩增检测仪,提高核酸提取的效率及样本分析的自动化程度。
为解决上述问题,本发明的技术方案为:
一种全自动核酸提取扩增检测仪,包括:进样区、耗材存储区、试剂仓、机械臂、裂解区、洗脱区、提取区、扩增区及检测区;
所述进样区包括样本架、样本仓、拉架器及进样轨道,所述样本架用于放置待检测的样本,所述样本架排布于所述样本仓内,所述拉架器将所述样本架转移至所述进样轨道,实现进样区的不间断连续进样;
所述耗材存储区用于存储所述机械臂取样及注入试剂所用的TIP耗材;
所述试剂仓用于存储裂解试剂、扩增试剂;
所述裂解区用于放置反应皿,通过加热和振荡实现反应皿中样本的裂解,释放核酸,使核酸吸附在磁珠上;
所述洗脱区用于清洗吸附核酸的磁珠,洗脱杂质;并将核酸与磁珠分离;
所述提取区用于提取核酸;
所述扩增区用于通过温控实现核酸的扩增;
所述检测区用于通过荧光检测器对扩增后的核酸进行荧光检测;
其中,所述机械臂根据预设程序移动,吸取所述进样区的样本,注入至所述裂解区的反应皿中,在反应皿中注入从试剂仓中吸取的裂解试剂,与样本进行混合进行裂解反应,得到裂解后的液体;吸取经洗脱与提取后的核酸至所述扩增区,注入从试剂仓中吸取的扩增试剂,进行核酸的扩增反应,得到扩增后的核酸;吸取扩增后的核酸至所述检测区进行荧光检测。
根据本发明一实施例,所述试剂仓包括裂解试剂仓及PCR试剂仓;
所述裂解试剂仓用于存放裂解试剂;
所述PCR试剂仓用于存放扩增试剂,且设置制冷器,具有冷藏功能。
根据本发明一实施例,一个所述样本架容置多个待检测的样本,从而实现多个样本同时检测。
根据本发明一实施例,所述洗脱区设置磁吸装置、洗脱注射器;
所述磁吸装置用于吸附磁珠;
所述洗脱注射器用于洗脱区的注液及吸液;
当裂解完成后的液体转移至所述洗脱区的反应皿时,所述磁吸装置将液体中的磁珠吸附,所述洗脱注射器吸取反应皿中的废液;所述磁吸装置释放磁珠至反应皿,所述洗脱注射器注入清洗液至反应皿中进行磁珠清洗;所述磁吸装置将液体中的磁珠吸附,所述洗脱注射器吸取反应皿中的废液;所述磁吸装置释放磁珠至反应皿,所述洗脱注射器注入洗脱液至反应皿中,将核酸与磁珠分离。
根据本发明一实施例,所述洗脱注射器包括支架、注液针安装架、吸液针安装架及传动机构,所述注液针安装架、吸液针安装架及传动机构安装于所述支架上;
所述注液针安装架和/或吸液针安装架包含多个安装位,同时容置多个注液针和/或吸液针;
所述传动机构作用于所述注液针安装架及吸液针安装架,使得所述注液针或所述吸液针对所述洗脱区进行注液或吸液。
根据本发明一实施例的全自动核酸提取扩增检测仪,还包括反应皿耗材区、反应皿转运机构;
所述反应皿转运机构用于将反应皿从所述反应皿耗材区转移至所述裂解区,和/或将所述裂解区的反应皿转移至所述洗脱区,和/或将所述洗脱区的反应皿转移至所述提取区。
根据本发明一实施例,所述反应皿转运机构包括底座、竖向推送部及横向推拉部;
所述底座用于放置反应皿;
所述竖向推送部与所述底座机械连接,带动所述底座在Y轴方向上移动;
所述横向推拉部与所述底座机械连接,带动所述底座在X轴方向上移动。根据本发明一实施例的全自动核酸提取扩增检测仪,还包括废料存储区;
所述废料存储区用于存放使用过的TIP耗材;
当所述机械臂使用TIP耗材完成一次吸液-注液后,移动至所述废料存储区,自动分离所述TIP耗材。
本发明由于采用以上技术方案,使其与现有技术相比具有以下的优点和积极效果:
1)本发明一实施例中的全自动核酸提取扩增检测仪,针对现有的核酸检测仪器大多采用板式上样或单管检测,板式上样需要预封装样本和试剂,无法做到全自动;而单管检测只能依次上样,效率低下的问题,通过合理排布进样区、耗材存储区、试剂仓、机械臂、裂解区、洗脱区、提取区、扩增区及检测区,其中,进样区包括样本架、样本仓、拉架器及进样轨道,样本架用于放置待检测的样本,样本架排布于所述样本仓内,拉架器将样本架转移至进样轨道,实现进样区的不间断连续进样;机械臂根据预设程序移动,吸取进样区的样本,注入至裂解区的反应皿中,在反应皿中注入从试剂仓中吸取的裂解试剂,与样本进行混合进行裂解反应,得到裂解后的液体;吸取经洗脱与提取后的核酸至扩增区,注入从试剂仓中吸取的扩增试剂,进行核酸的扩增反应,得到扩增后的核酸;吸取扩增后的核酸至检测区进行荧光检测。实现核酸样本的随到随检,即使不同项目也可进行不间断连续上样,节省时间,提高检测效率。
2)本发明一实施例中的全自动核酸提取扩增检测仪,一个样本架容置多个待检测的样本,从而实现多个样本同时检测,可以是一个样本检测多个项目,可以是一个项目检测多个样本。
3)本发明一实施例中的全自动核酸提取扩增检测仪,洗脱区的磁吸装置可以实现对磁珠的自动吸附和释放,采用磁珠下吸法,可多次清洗,从而使核酸提取更彻底、稳定。
附图说明
图1为本发明一实施例中的全自动核酸提取扩增检测仪的结构示意图;
图2为本发明一实施例中的进样区结构示意图;
图3为本发明一实施例中的机械臂示意图;
图4为本发明一实施例中的洗脱注射器示意图;
图5为本发明一实施例中的反应皿转运机构示意图。
附图标记说明:
100:进样区;101:样本架;102:样本仓;103:拉架器;1031:X向电机;1032:拉架轨道;1033:Y向电机;104:进样轨道;1041:A轨;1042:B轨;200:耗材存储区;300:试剂仓;400:机械臂;401:取样头;500:裂解区;600:洗脱区;700:提取区;800:扩增区;900:检测区;1000:PCR试剂仓;1100:洗脱注射器;1101:支架;1102:注液针安装架;1103:吸液针安装架;1104:传动机构;1105:注液针;1106:吸液针;1200:反应皿耗材区;1300:反应皿转运机构;1301:底座;1302:竖向推送部;1303:横向推拉部;1400:废料存储区。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施例对本发明提出的一种全自动核酸提取扩增检测仪作进一步详细说明。根据下面说明和权利要求书,本发明的优点和特征将更清楚。
请参看图1,本实施例提供了一种全自动核酸提取扩增检测仪。该全自动核酸提取扩增检测仪包括:进样区100、耗材存储区200、试剂仓300、机械臂400、裂解区500、洗脱区600、提取区700、扩增区800及检测区900;
进样区100用于传递待检测的样本,实现不间断连续进样;
耗材存储区200用于存储所述机械臂取样及注入试剂所用的TIP耗材;
试剂仓300用于存储裂解试剂、扩增试剂;
裂解区500用于放置反应皿,通过加热和振荡实现反应皿中样本的裂解,释放核酸,使核酸吸附在磁珠上;
洗脱区600用于清洗吸附核酸的磁珠,洗脱杂质;并将核酸与磁珠分离;
提取区700用于提取核酸;
扩增区800用于通过温控实现核酸的扩增;
检测区900用于通过荧光检测器对扩增后的核酸进行荧光检测;
其中,机械臂400根据预设程序移动,吸取进样区100的样本,注入至裂解区500的反应皿中,在反应皿中注入从试剂仓300中吸取的裂解试剂,与样本进行混合进行裂解反应,得到裂解后的液体;吸取经洗脱与提取后的核酸至扩增区800,注入从试剂仓300中吸取的扩增试剂,进行核酸的扩增反应,得到扩增后的核酸;吸取扩增后的核酸至检测区900进行荧光检测。
具体的,请参看图2,进样区100包括样本架101、样本仓102、拉架器103及进样轨道104,其中,样本架101用于放置待检测的样本,该样本架101排布于样本仓102内,拉架器103将述样本架101转移至进样轨道104,实现进样区100的不间断连续进样。
本实施例通过上述进样区100,可实现核酸样本的随到随检,即使不同项目也可进行不间断连续上样,节省时间,提高检测效率。例如仪器正在进行一个批次的样本测试,这时新来一个批次的样本。用户无需等待上一批次的样本测试结束,而是可以直接申请测试,将样本放置于进样区开始测试。
用户申请测试之后,全自动核酸提取扩增检测仪的控制系统会首先根据上一批次样本的测试项目的程序和时间,以及新申请样本的项目的程序和时间进行计算,确定新申请样本的加样时间,保证样本间无冲突有序进行。
待裂解区500内有空位前(一般4min以内),进样区100内的拉架器103会通过其X向电机1031的运动将用户放在样本仓102的样本架101拉进拉架轨道1032,然后通过其Y向电机1033的皮带带动拉架器103沿着Y轴向运动到达进样轨道104,再通过进样轨道下方的电机推动样本架101到达指定的进样位,等待进样。
待裂解区500内有空位时,反应皿转运机构会将空的反应皿从反应皿耗材区1200转移到裂解区500内,然后机械臂400会向反应皿内注入试剂和样本。
而且,进样轨道104包括A轨1041和B轨1042两条轨道,若同一批次样本较多,则第一个样本架在A轨1041加样的同时,第二个样本架会被拉入B轨1042待加样,从而实现连续不间断加样。
本实施例通过以下方法实现样本架101在样本仓102中的定位:
将一组无源RFID标签粘贴在各个样本架101上,其中包括作为参考标签的样本架及待进样的样本架。在样本仓102中设置阅读天线及超高频RFID阅读器,该阅读器的工作频率可以是超高频800MHz~960MHz。
将RFID参考标签构成分布形式为N*N的矩阵,两个标签之间的距离在0到1m之间,待待进样的样本架携带动态定位标签在矩阵中,通过三对阅读器天线检测标签场强值,由超高频RFID阅读器读取天线数据并传输给进样控制端,进样控制端将所获得的标签场强值通过所设计的软件经过计算,即可实现基于RFID的精确定位。
上述定位过程是阅读器分别读出参考标签和待定位标签的场强值,并根据这些场强值,以参考标签和待定位标签场强值的相对大小关系为依据,对各个参考标签的可信度进行判断,判断完成之后,将最近邻位的标签选取出来,而后计算各最近邻位标签的权值,从而得到参考标签的估计值,实现了N*N矩阵中的动态标签定位。
进样控制端通过该定位方法获取待进样的进样架位置信息,将该位置信息传输至拉架器控制端,控制拉架器运行到该位置将该样本架拉出样本仓。
进一步地,一个样本架101容置多个待检测的样本,从而实现多个样本同时检测。例如,一个样本架101容置4个待检测的样本,可以实现一个样本检测4个项目,或是一个项目检测4个样本。
进一步地,试剂仓300包括裂解试剂仓及PCR试剂仓1000。其中,裂解试剂仓用于存放裂解试剂;PCR试剂仓1000用于存放扩增试剂,且设置制冷器,具有冷藏功能。
进一步地,请参看图3,机械臂400上安装取样头401,该取样头401自动安装或分离TIP耗材,通过TIP实现样本或试剂的吸取及注射。该机械臂400可在X轴、Y轴、Z轴三个方向上移动,实现核酸检测过程中定时定点的样本及试剂的自动吸取和注射。在实际应用中,可根据需要,设置两个机械臂400,进一步方便试剂的吸取及注射。
进一步地,裂解区500中设置加热器和振荡器,当反应皿中加入样本和裂解试剂后,可启动加热器和振荡器,使样本和裂解试剂充分混合,加速裂解。
进一步地,洗脱区600设置磁吸装置、洗脱注射器1100;磁吸装置用于吸附磁珠;洗脱注射器1100用于洗脱区的注液及吸液。
当裂解完成后的液体转移至洗脱区600的反应皿时,磁吸装置将液体中的磁珠吸附,洗脱注射器1100吸取反应皿中的废液;磁吸装置释放磁珠至反应皿,洗脱注射器1100注入清洗液至反应皿中进行磁珠清洗;磁吸装置将液体中的磁珠吸附,洗脱注射器1100吸取反应皿中的废液;磁吸装置释放磁珠至反应皿,洗脱注射器1100注入洗脱液至反应皿中,将核酸与磁珠分离。
通过上述磁吸装置及洗脱注射器1100可对吸附核酸的磁珠进行充分清洗,纯化核酸,从而使核酸提取更彻底、稳定。
请参看图4,洗脱注射器1100包括支架1101、注液针安装架1102、吸液针安装架1103及传动机构1104,注液针安装架1102、吸液针安装架1103及传动机构1104安装于支架1101上。注液针安装架1102和/或吸液针安装架1103包含多个安装位,同时容置多个注液针1105和/或吸液针1106。传动机构1104作用于注液针安装架1102及吸液针安装架1103,使得注液针1105或吸液针1106完成对洗脱区进行注液或吸液。
进一步地,该全自动核酸提取扩增检测仪还包括反应皿耗材区1200、反应皿转运机构1300。反应皿转运机构1300用于将反应皿从反应皿耗材区1200转移至裂解区500,和/或将裂解区500的反应皿转移至洗脱区600,和/或将洗脱区600的反应皿转移至提取区700。
请参看图5,反应皿转运机构1300包括底座1301、竖向推送部1302及横向推拉部1303。底座1301用于放置反应皿;竖向推送部1302与底座1301机械连接,带动底座1301在Y轴方向上移动。横向推拉部1303与底座1301机械连接,带动底座1301在X轴方向上移动。
在实际应用中,竖向推送部1302和横向推拉部1303可采用电机及皮带的组合实现。竖向推送部1302和横向推拉部1303的结构相似,只是传达的方向不同。
另外,该全自动核酸提取扩增检测仪还包括废料存储区1400,该废料存储区用于存放使用过的TIP耗材及反应皿耗材。当机械臂400使用TIP耗材完成一次吸液-注液后,移动至废料存储区1400,自动分离TIP耗材。当待检测的样本完成裂解-提纯-扩增-检测后,反应皿转运机构将结束检测的反应皿转移至废料存储区1400,丢弃。
下面简要介绍一下该全自动核酸提取扩增检测仪的工作过程:
1.操作人员在仪器启动前需要将样本放置在进样区内,将耗材放置在耗材存储区以及反应皿耗材区内,将试剂放置在裂解试剂仓及PCR试剂仓内。
2.拉架器将样本架从样本仓转移至进样轨道内,等待机械臂取样。反应皿转运机构将反应皿从反应皿耗材区转移至裂解区,等待机械臂放样。
3.机械臂从耗材存储模块取TIP,然后去裂解试剂仓内取裂解试剂R1并投放在裂解区的反应皿中,然后将使用过的TIP扔进废料存储区中;同样的进行裂解试剂R2\R3\R4的投放。然后机械臂去进样轨道取样本并投放在反应皿中,然后将使用过的TIP扔进废料存储区中。
4.反应皿在裂解模块中不断震荡混匀裂解。
5.裂解完成后反应皿转运机构将反应皿转运至洗脱区,洗脱区中的磁吸装置将磁珠吸附,洗脱注射器将废液吸取。吸取废液之后磁吸模块释放磁珠,洗脱注射器往反应皿中注入清洗液进行一次洗涤。洗脱区中的磁吸装置将磁珠吸附,洗脱注射器将废液吸取。吸取废液之后磁吸模块释放磁珠,洗脱注射器往反应皿中注入洗脱液,将核酸与磁珠分离。
6.洗脱完成之后反应皿转运机构将反应皿转运至提取区,机械臂将纯化后的核酸提取到扩增区。机械臂将扩增所需的试剂从试剂仓内转移至扩增区。然后进行核酸的扩增。
7.机械臂将扩增后的核酸转移到检测区进行荧光检测。
综上,该全自动核酸提取扩增检测仪,通过可不间断连续进样的进样区、耗材自动安装及分离的机械臂、自动推送反应皿的反应皿转运机构等,提高核酸提取的效率及样本检测的自动化程度。
上面结合附图对本发明的实施方式作了详细说明,但是本发明并不限于上述实施方式。即使对本发明作出各种变化,倘若这些变化属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内,则仍落入在本发明的保护范围之中。
Claims (8)
1.一种全自动核酸提取扩增检测仪,其特征在于,包括:进样区、耗材存储区、试剂仓、机械臂、裂解区、洗脱区、提取区、扩增区及检测区;
所述进样区包括样本架、样本仓、拉架器及进样轨道,所述样本架用于放置待检测的样本,所述样本架排布于所述样本仓内,所述拉架器将所述样本架转移至所述进样轨道,实现进样区的不间断连续进样;
所述耗材存储区用于存储所述机械臂取样及注入试剂所用的TIP耗材;
所述试剂仓用于存储裂解试剂、扩增试剂;
所述裂解区用于放置反应皿,通过加热和振荡实现反应皿中样本的裂解,释放核酸,使核酸吸附在磁珠上;
所述洗脱区用于清洗吸附核酸的磁珠,洗脱杂质;并将核酸与磁珠分离;
所述提取区用于提取核酸;
所述扩增区用于通过温控实现核酸的扩增;
所述检测区用于通过荧光检测器对扩增后的核酸进行荧光检测;
其中,所述机械臂根据预设程序移动,吸取所述进样区的样本,注入至所述裂解区的反应皿中,在反应皿中注入从试剂仓中吸取的裂解试剂,与样本进行混合进行裂解反应,得到裂解后的液体;吸取经洗脱与提取后的核酸至所述扩增区,注入从试剂仓中吸取的扩增试剂,进行核酸的扩增反应,得到扩增后的核酸;吸取扩增后的核酸至所述检测区进行荧光检测。
2.如权利要求1所述的全自动核酸提取扩增检测仪,其特征在于,所述试剂仓包括裂解试剂仓及PCR试剂仓;
所述裂解试剂仓用于存放裂解试剂;
所述PCR试剂仓用于存放扩增试剂,且设置制冷器,具有冷藏功能。
3.如权利要求1所述的全自动核酸提取扩增检测仪,其特征在于,一个所述样本架容置多个待检测的样本,从而实现多个样本同时检测。
4.如权利要求1所述的全自动核酸提取扩增检测仪,其特征在于,所述洗脱区设置磁吸装置、洗脱注射器;
所述磁吸装置用于吸附磁珠;
所述洗脱注射器用于洗脱区的注液及吸液;
当裂解完成后的液体转移至所述洗脱区的反应皿时,所述磁吸装置将液体中的磁珠吸附,所述洗脱注射器吸取反应皿中的废液;所述磁吸装置释放磁珠至反应皿,所述洗脱注射器注入清洗液至反应皿中进行磁珠清洗;所述磁吸装置将液体中的磁珠吸附,所述洗脱注射器吸取反应皿中的废液;所述磁吸装置释放磁珠至反应皿,所述洗脱注射器注入洗脱液至反应皿中,将核酸与磁珠分离。
5.如权利要求4所述的全自动核酸提取扩增检测仪,其特征在于,所述洗脱注射器包括支架、注液针安装架、吸液针安装架及传动机构,所述注液针安装架、吸液针安装架及传动机构安装于所述支架上;
所述注液针安装架和/或吸液针安装架包含多个安装位,同时容置多个注液针和/或吸液针;
所述传动机构作用于所述注液针安装架及吸液针安装架,使得所述注液针或所述吸液针对所述洗脱区进行注液或吸液。
6.如权利要求1所述的全自动核酸提取扩增检测仪,其特征在于,还包括反应皿耗材区、反应皿转运机构;
所述反应皿转运机构用于将反应皿从所述反应皿耗材区转移至所述裂解区,和/或将所述裂解区的反应皿转移至所述洗脱区,和/或将所述洗脱区的反应皿转移至所述提取区。
7.如权利要求6所述的全自动核酸提取扩增检测仪,其特征在于,所述反应皿转运机构包括底座、竖向推送部及横向推拉部;
所述底座用于放置反应皿;
所述竖向推送部与所述底座机械连接,带动所述底座在Y轴方向上移动;
所述横向推拉部与所述底座机械连接,带动所述底座在X轴方向上移动。
8.如权利要求1所述的全自动核酸提取扩增检测仪,其特征在于,还包括废料存储区;
所述废料存储区用于存放使用过的TIP耗材;
当所述机械臂使用TIP耗材完成一次吸液-注液后,移动至所述废料存储区,自动分离所述TIP耗材。
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CN202211377230.0A CN115537313A (zh) | 2022-11-04 | 2022-11-04 | 一种全自动核酸提取扩增检测仪 |
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- 2022-11-04 CN CN202211377230.0A patent/CN115537313A/zh active Pending
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CN117126727A (zh) * | 2023-09-18 | 2023-11-28 | 合肥达徽基因科技有限公司 | 一种全自动提取扩增杂交一体化工作站 |
CN117126727B (zh) * | 2023-09-18 | 2024-04-19 | 合肥达徽基因科技有限公司 | 一种全自动提取扩增杂交一体化工作站 |
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