CN115515961A

CN115515961A - 用于诊断的新化合物

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Publication number: CN115515961A
Application number: CN202180033627.5A
Authority: CN
Inventors: J·莫丽特
Original assignee: AC Immune SA
Current assignee: AC Immune SA
Priority date: 2020-05-07
Filing date: 2021-05-07
Publication date: 2022-12-23
Also published as: MX2022013880A; WO2021224489A1; EP4146653A1; US20230174536A1; JP2023525081A; CA3175602A1; BR112022021774A2; KR20230008183A; AU2021267006A1; IL297965A

Abstract

本发明涉及新的式(I)化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其可用于α‑突触核蛋白聚集体的成像和确定其量。此外，所述化合物可以用于诊断与α‑突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常(例如帕金森病)，确定对所述疾病、病症或异常的易感性，预测所述疾病、病症或异常的预后，监测患有所述疾病、病症或异常的患者的疾病进展，监测所述疾病、病症或异常的进展，以及预测患有所述疾病、病症或异常的患者对其治疗的响应性。

Description

用于诊断的新化合物

发明领域

本发明涉及新的式(I)的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其可用于使α-突触核蛋白聚集体成像和确定其量。此外，所述化合物可以用于诊断与α-突触核蛋白(α-突触核蛋白、A-突触核蛋白、a突触核蛋白、A-syn、α-syn、aSyn、α-syn) 聚集体相关的疾病、病症或异常，包括但不限于路易体和/或路易神经突(例如帕金森病)，确定对所述疾病、病症或异常的易感性，预测所述疾病、病症或异常的预后，监测患有所述疾病、病症或异常的患者的疾病发展，监测所述疾病的进展，以及预测患有此类疾病、病症或异常的患者对其治疗的响应性。本发明还涉及制备所述化合物及其前体的方法、包含所述化合物的诊断组合物、使用所述化合物的方法、包含所述化合物的试剂盒及其用途。

发明背景

许多衰老疾病建立在淀粉样物质或淀粉样蛋白的细胞外或细胞内沉积物的基础上或者与之相关，这些沉积物促进疾病的发病机理以及疾病的进展。形成细胞外聚集体的最好表征的淀粉样蛋白是β淀粉样蛋白(Abeta或Aβ)。

主要形成胞内聚集体的淀粉样蛋白样蛋白包括但不限于Tau、α-突触核蛋白和亨廷丁(huntingtin)(HTT)。涉及α-突触核蛋白聚集体的疾病通常被列为突触核蛋白病(synucleinopathy)(或α-突触核蛋白病)，并且这些包括但不限于帕金森病(PD)。主要具有神经元聚集体的突触核蛋白病包括但不限于帕金森病(散发性、具有SNCA突变(编码α-突触核蛋白的基因)或SNCA基因重复或三重复的家族性、具有SNCA以外的基因突变的家族性、单纯性自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、SNCA重复携带者、路易体痴呆(LBD)、路易体痴呆(DLB)(“单纯性”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(PDD)、弥漫性路易体病(DLBD)、阿尔茨海默病、散发性阿尔茨海默病、具有APP突变的家族性阿尔茨海默病、具有PS-1、PS-2或其他突变的家族性阿尔茨海默病、家族性英国痴呆、阿尔茨海默病的路易体变体和唐氏综合征中的正常衰老。具有α-突触核蛋白的神经元和神经胶质聚集体的突触核蛋白病包括但不限于多系统萎缩症 (MSA)(Shy-Drager综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)。可能具有α-突触核蛋白免疫响应性病变的其他疾病是但不限于创伤性脑损伤、慢性损伤性脑病、拳击员痴呆、tau病变(皮克病、额颞叶痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性和C1型尼曼-皮克二氏病、与17号染色体相关的伴有帕金森综合征的额颞叶痴呆)、运动神经元病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化(散发性、家族性和关岛的ALS-痴呆综合征)、神经轴性营养不良、伴有1型脑铁积累的神经变性(哈-斯二氏综合征)、朊病毒病、克雅氏病、运动失调性毛细血管扩张症、特发性口面运动障碍、亚急性硬化性全脑炎、 Gerstmann-Straussler-Scheinker综合征、包涵体肌炎、戈谢病以及其他溶酶体贮积症(包括Kufor-Rakeb综合征和Sanfilippo综合征)和眼速动期(REM) 睡眠行为障碍(Jellinger，Mov Disord 2003，18增刊6，S2-12；Galvin等人 JAMA Neurology 2001，58(2)，186-190；Kovari等人，ActaNeuropathol.2007， 114(3)，295-8；Saito等人，J Neuropathol Exp Neurol，2004，63(4)，323-328； McKee等人，Brain，2013，136(Pt 1)，43-64；Puschmann等人，ParkinsonismRelat Disord 2012，18S1，S24-S27；Usenovic等人，J Neurosci.2012，32(12)， 4240-4246；Winder-Rhodes等人，Mov Disord.2012，27(2)，312-315；Ferman 等人，J IntNeuropsychol Soc.2002，8(7)，907-914；Smith等人，J Pathol. 2014；232：509-521，Lippa等人，Ann Neurol.1999年3月；45(3)：353-7；Schmitz 等人，Mol Neurobiol.2018年8月22日；Charles等人，Neurosci Lett.2000年 7月28日；289(1)：29-32；Wilhelmsen等人，ArchNeurol.2004年3月； 61(3)：398-406；Yamaguchi等人，J Neuropathol Exp Neurol.2004，第80届年会，第63卷；Askanas等人，J Neuropathol Exp Neurol.2000年7月； 59(7)：592-8)。

α-突触核蛋白是140个氨基酸的天然未折叠蛋白(Iwai等，Biochemistry 1995，34(32)，10139-10145)。α-突触核蛋白的序列可以分为三个主要结构域： 1)包含残基1-60的N-末端区域，其包含具有高度保守的六聚体的11-mer两亲性不完全重复残基(KTKEGV)。该区域参与调节α-突触核蛋白与膜的结合及其内化；2)疏水性非β淀粉样蛋白组分(NAC)结构域跨越残基61-95，这对于α-突触核蛋白原纤维化至关重要；3)跨越残基96-140的C-末端区域，其是强酸性的并富含脯氨酸，并且没有明显的结构癖好。已显示α-突触核蛋白经历多个翻译后修饰，包括截短、磷酸化、泛素化、氧化和/或转谷氨酰胺酶共价交联(Fujiwara等人，Nat Cell Biol 2002，4(2)；160-164；Hasegawa等人，J Biol Chem 2002，277(50)，49071-49076；Li等人，Proc Natl Acad Sci U S A 2005，102(6)，2162-2167；Oueslati等人，ProgBrain Res 2010，183，115-145； Schmid等人，J Biol Chem 2009，284(19)，13128-13142)。有趣的是，这些修饰中的大多数涉及C-末端区域内的残基。

已经在Tyr-125、-133和-136以及Ser-129上的羧基末端区域中检测到多个磷酸化位点(Negro等人，FASEB J 2002，16(2)，210-212)。Tyr-125残基可以被两个Src家族蛋白酪氨酸激酶c-Src和Fyn磷酸化(Ellis等人，J Biol Chem 2001，276(6)，3879-3884；Nakamura等人，Biochem Biophys Res Commun 2001，280(4)，1085-1092)。Src家族激酶的磷酸化不会抑制或增强α-突触核蛋白聚合的趋势。已经证明，α-突触核蛋白是体外蛋白酪氨酸激酶p72^syk(Syk) 的杰出基质；一旦被Syk或具有相似特异性的酪氨酸激酶进行广泛Tyr-磷酸化，它就失去了形成低聚物的能力，这表明这些酪氨酸激酶具有推定的抗神经变性作用(Negro等人，FASEB J 2002，16(2)，210-212)。α-突触核蛋白可以被蛋白激酶CKI和CKIISer-磷酸化(Okochi等，J Biol Chem 2000，275(1)， 390-397)。残基Ser-129也可以被G蛋白偶联的受体蛋白激酶磷酸化(Pronin 等，J Biol Chem 2000，275(34)，26515-26522)。在包括路易体的突触核蛋白病损伤中，Ser-129处的α-突触核蛋白的广泛和选择性磷酸化是明显的(Fujiwara 等人，Nat Cell Biol 2002，4(2)；160-164)。羧基末端中的其它翻译后修饰，包括Ser-129上的糖基化(McLean等人，Neurosci Lett 2002，323(3)，219-223) 和Tyr-125、-133和-136上的硝化(Takahashi等，Brain Res 2002，938(1-2)， 73-80)，可以影响α-突触核蛋白的聚集。已有报道，通过蛋白水解的羧基末端区域的截短在各种神经变性疾病中的α-突触核蛋白原纤维形成中起作用 (Rochet等人，Biochemistry 2000，39(35)，10619-10626)。已经在高度纯化的路易体中检测到全长以及部分截短的和不溶的α-突触核蛋白聚集体 (Crowther等，FEBS Lett 1998，436(3)，309-312)。

异常蛋白质聚集似乎是衰老大脑和多种神经退行性疾病的常见特征(Trojanowski等人，1998，Cell Death Differ.1998，5(10)，832-837，Koo等人， Proc NatlAcad Sci.1999，96(18)，9989-9990，Hu等人，Chin.Sci.Bull.2001，46， 1-3)；尽管在疾病过程中的明确作用仍有待确定。在体外模型中，α-突触核蛋白(或其某些截短形式)容易组装成细丝，其类似于从患有Lewy小体(LB)痴呆和家族性PD的患者的脑中分离的细丝(Crowther等人，FEBS Lett 1998，436 (3)，309-312)。α-突触核蛋白及其突变形式(A53T和A30P)具有无规则卷曲构象，在低浓度的水溶液中不形成显著的二级结构；然而，在较高浓度下，它们倾向于自聚集，产生淀粉样原纤维(Wood等，J Biol Chem 1999，274(28)，19509-19512)。已有结果表明，PD-连接的突变体和野生型蛋白质的聚集行为存在许多差异。单体α-突触核蛋白在体外通过亚稳态的低聚体(即原纤丝) 状态聚集形成稳定的原纤维(Volles等人，Biochemistry 2002，41(14)，4595- 4602)。

帕金森病(PD)是最常见的神经退行性运动障碍。PD主要是特发性疾病，尽管在至少5％的PD患者中，病理与一种或几种特定基因中的突变有关。已经描述了α-突触核蛋白基因中的几种点突变(A30P、E46K、H50Q、G51D、 A53T)，其引起具有常染色体显性遗传的家族性PD。此外，已经在发生PD 的患者中描述了α-突触核蛋白基因的重复和三重复，强调了α-突触核蛋白在 PD发病机理中的作用(Lesage等人，Hum.Mol.Genet.，2009，18，R48-59)。PD的发病机制仍然是难以表达的。然而，越来越多的证据表明α-突触核蛋白的致病性折叠的作用，其导致淀粉样原纤维的形成。实际上，PD的标志是主要在于黑质神经元中存在称为路易体和神经突的胞内α-突触核蛋白聚集体结构，以及黑质和其他部位中多巴胺能神经元的死亡。α-突触核蛋白是天然未折叠的突触前蛋白，其可以错误折叠并聚集成与PD的发病机制相关的较大的寡聚体和纤维形式。近期研究已经暗示α-突触核蛋白的小的可溶性寡聚化和原纤维形式为最具神经毒性的种类(Lashuel等人，J.Mol.Biol.，2002，322， 1089-102)。然而，α-突触核蛋白在神经元细胞毒性中的确切作用仍有待阐明(综述：Cookson，Annu.Rev.Biochem.，2005，74，29-52)。

除了帕金森病之外，聚集的α-突触核蛋白积聚到路易体中是所有路易体疾病的特征，包括帕金森病伴痴呆(PDD)和路易体痴呆(DLB)(Capouch等人， Neurol Ther.2018，7，249-263)。在DLB中，Lewy小体弥散分布在整个脑皮质中，并且除了Lewy小体和神经突之外，还发现更多的线和点状结构(Lewy 点)对Ser-129处磷酸化的α-syn呈免疫阳性(Outeiro等人，Mol Neurodegener. 2019，14，5)。在多系统萎缩症(MSA)中也发现了α-突触核蛋白聚集体。MSA 是一种罕见且散发的神经退行性病症，其表现为快速进行性自主和运动功能障碍，以及可变的认知衰退。这些疾病包括Shy-Drager综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩。根据主要的运动表型的不同，该疾病可以在临床上再分类入帕金森病(MSA-P)或小脑(MSA-C)变体(Fanciulli等人，N Engl J Med 2015；372，249-63)。其特征在于α-突触核蛋白在少突胶质细胞的细胞质中聚集，形成神经胶质胞质包涵体(GCI)。主要由原纤维形式的α-突触核蛋白组成的GCI是MSA的神经病理学标志，并且在整个新皮质、海马体、脑干、脊髓和背根神经节中发现(Galvin等人，Arch Neurol.2001，58,186-90)。GCI 被认为是MSA发病机制中的中心参与者。已经在纹状体黑质和橄榄体脑桥小脑区域中报道了GCI负荷与神经元损失程度之间的相关性(Stefanova等人， Neuropathol Appl Neurobiol.2016，42，20-32)。此外，在各种少突胶质细胞- 特异性启动子下在少突胶质细胞中过表达人α-突触核蛋白的转基因小鼠中已经显示出GCI与神经元损失的诱导之间的因果关系。病理生理级联中的关键事件被认为是错误折叠的α-突触核蛋白的许可模板化(“朊病毒样”传播)。

帕金森病的诊断在很大程度上是临床的，并且取决于存在一组特定的症状和体征(初始核心特征是运动迟缓、强直、静止性震颤和姿势不稳定)、不存在不典型特征、缓慢进展的过程和对症状药物疗法的反应，主要限于多巴胺替代疗法。准确的诊断需要复杂的临床技能，并且在一定程度上具有主观性和误差，因为几种其他退行性和非退行性疾病可以模拟PD症状(多系统萎缩症(MSA)、进行性核上性麻痹(PSP)、AD、特发性震颤、肌张力障碍性震颤)， (Guideline No.113：Diagnosis and pharmacological management ofParkinson’s disease，2010年1月.SIGN)。病理学的最终确认只能通过死亡后神经病理学分析来进行。

PD患者的计算机型断层摄影术(CT)和常规磁共振成像(MRI)脑扫描通常表现正常。然而，这些技术可以用于排除可能是帕金森病的次要原因的其它疾病，如基底神经节肿瘤、血管病变和脑积水。据报道，MRI的特定技术(扩散MRI)可用于区分典型和非典型帕金森病，尽管其确切的诊断价值仍在研究中。可以用不同的PET和SPECT放射性示踪剂测定基底神经节中的多巴胺能功能。示例是用于SPECT的碘氟烷(¹²³I)(商品名DaTSCAN)和碘噻吩(Dopascan)或者用于PET的氟脱氧葡萄糖(¹⁸F)(¹⁸F-FDG)和二氢丁苯那嗪(¹¹C) (¹¹C-DTBZ)。基底神经节中多巴胺能活性降低的模式可以帮助诊断PD，特别是具有症状的阶段(Brooks，J.Nucl.Med.，2010，51，596-609；Redmond， Neuroscientist，2002，8，457-88；Wood，Nat.Rev.Neurol.，2014，10，305)。

正在研发策略，以便将近期了解帕金森病的潜在原因的最新进展应用于开发生化生物标志物(Schapira Curr Opin Neurol 2013；26(4)：395-400)。已经在不同体液(脑脊液(CSF)、血浆、唾液)中研究的此类生物标志物包括α- 突触核蛋白水平，还包括DJ-1、τ和Aβ以及神经细丝蛋白、白介素、骨桥蛋白和伪君子素(hypocrontin)(Schapira Curr OpinNeurol 2013；26(4)：395- 400)，但到目前为止，这些生物标志物中没有一种单独或组合可用于决定性诊断试验。据我们所知，尽管帕金森病研究和药物开发迫切需要，但是目前尚无批准的α-突触核蛋白诊断试剂上市或可用于临床(Eberling等人，J ParkinsonsDis.2013；3(4)：565-7)。

对脑中α-突触核蛋白沉积进行成像的能力将是α-突触核蛋白病研究(包括帕金森病研究、诊断和药物开发)的巨大成就。聚集的α-突触核蛋白在脑中的积累被认为是PD的关键病理标志，并且可以在症状出现之前许多年开始。因此，α-突触核蛋白是药物开发的优先靶标，不仅考虑到其可能对神经变性的贡献，而且因为它可以提供治疗同时仍然处于无症状或前驱阶段的疾病的可能性。α-突触核蛋白病理学情况的体内成像可用作生物标志物，以(i)在早期潜在地检测疾病的存在，(ii)评估疾病进展和(iii)用作药物开发的药效学工具。当今，从试验群体的最佳选择开始，考虑开发α-突触核蛋白PET成像剂是准确诊断突触核蛋白病以及支持靶向α-突触核蛋白的治疗剂的临床开发的关键 (Eberling，Dave andFrasier，J.Parkinson’s Disease，3，565-567(2013))。尽管在鉴定α-突触核蛋白PET配体方面付出了巨大努力，但到目前为止，仅鉴定了以合理高的亲和力与人造α-突触核蛋白原纤维结合的化合物，但它们中没有一个在人临床试验中得到证实。由于许多原因，它们不是最佳的：在患病脑中存在的α-突触核蛋白的病理性聚集体上观察到低亲和力或没有结合，报道了α-突触核蛋白相对于其他聚集蛋白的低选择性或没有选择性，并且它们用作脑穿透剂PET试剂的物理化学性质不合适(Eberling等人，J Parkinsons Dis.2013；3(4)：565-7；Neal等人，Mol Imaging Biol.2013；15：585-595；Bagchi 等人，PLoS One 2013；8(2)：e55031；Yu等人，Bioorganic and Medicinal chemistry 2012；20：4625-4634；Zhang等人，Appl Sci(Basel)2014；4(1)：66-78； Chu等人，J Med Chem，2015，58(15)：6002-17)。

因此，显然需要找到具有高α-突触核蛋白选择性的分子探针，其识别并结合病理性α-突触核蛋白。为了减少由非特异性脱靶结合引起的背景信号干扰并降低给药要求，α-突触核蛋白成像化合物应以高亲和力和选择性与其靶标结合。对于与神经系统疾病如帕金森病相关的α-突触核蛋白聚集体的成像，成像化合物需要穿透血脑屏障并进入脑的相关区域。为了靶向胞内淀粉样内含物如α-突触核蛋白，细胞渗透性是成像化合物的另一个要求。为了避免可能导致不想要的副作用的风险增加的化合物的不必要的积累的另一个先决条件是从脑(或其他靶向器官)快速洗出化合物。

WO2011/128455涉及适用于治疗与淀粉样蛋白或淀粉样蛋白类蛋白有关的病症的特定化合物。US2012/0302755涉及用于检测神经功能障碍的某些成像，剂。在WO2012/037928中讨论了用于诊断嗅上皮上的神经变性疾病的其它化合物。

WO2010/063701涉及用于确定帕金森氏病的存在或易感性的方法中的某种体内成像剂，其中所述体内成像剂包含用体内成像部分标记的α-突触核蛋白结合剂，其中体内成像剂以结合亲和力与α-突触核蛋白结合。

US2014/0142089涉及预防或治疗退行性脑疾病的方法，该方法包括给予有需要的个体有效量的药物组合物，所述药物组合物包含特定化合物、其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、水合物及其组合。

WO 2009/155017描述了芳基或杂芳基取代的氮杂苯并噁唑衍生物，据称可用作正电子发射断层摄影术(PET)成像中的示踪剂，用于在体内研究脑中的淀粉样蛋白沉积物，以便诊断阿尔茨海默病。

WO 2016/033445涉及用于成像亨廷顿蛋白的特定化合物。

WO2017/153601和WO 2019/234243涉及用于诊断a-突触核蛋白聚集体的双环化合物。

令人惊讶地发现，一类新的式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物能够结合α-突触核蛋白。因此，当用合适的放射性同位素放射性标记本发明的化合物时，所述化合物有资格作为PET示踪剂，用于PD和其他α-突触核蛋白病中的病理性α-syn聚集体的成像。

发明概述

本发明的一个目的在于提供可以用于诊断与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常，包括但不限于路易体和/或路易神经突(例如帕金森病)，预测所述疾病、病症或异常的预后，以及监测所述疾病、病症或异常的进展的化合物。特别地，所述化合物应适合于确定所述疾病、病症或异常的易感性，监测疾病、障碍或异常的进展，或预测患有所述疾病、病症或异常的患者对用某种药物治疗的响应性。

此外，存在对可以用作α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的成像剂的化合物的需求。特别地，本发明的一个目的在于提供适合于用于α-突触核蛋白病的正电子发射断层摄影术成像的诊断组合物中的化合物，例如，其中用¹⁸F或其他标记部分可检测地标记所述化合物。

本发明人惊奇地发现，这些目的可以通过如下文所述的式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物来实现。

式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物对哺乳动物(例如人)组织中的α-突触核蛋白聚集体显示出有效的结合亲和力。此外，式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、 (IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物相对于与神经变性相关的其他蛋白质聚集体显示出对α-syn的有效选择性，使得能够将PD与具有共同临床和病理特征的其他蛋白质病区分开。由于它们独特的设计特征，这些化合物展示出例如适当的亲脂性和分子量、脑摄取和药代动力学、细胞渗透性、溶解度和自发荧光这样的特性，以便成为用于体内、离体和体外检测和定量α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的成功成像探针。

本发明公开了如本文公开的式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的新化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)具有增强的结合特性。本发明的化合物可以被标记(例如被放射性标记)，使得它们可以用于体外、离体和体内成像以检测α-突触核蛋白聚集体，包括但不限于路易体和/或路易神经突。本发明提供了用于离体使用式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))、或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物或其药物组合物检测α-突触核蛋白聚集体、包括但不限于路易体和/或路易神经突的方法。本发明提供了式 (I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其用作诊断成像剂，特别是用于帕金森病和/或其他突触核蛋白病的症状发生前或前驱症状检测，例如使用正电子发射断层摄影术(PET)。本发明的化合物可以用作监测病理学情况的局部解剖和暂时性进展的生物标志物，导致临床诊断研究设计和结果的改善。本发明还提供了诊断组合物，其包含式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H)) 的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物和至少一种药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂或佐剂。

将本发明概括在如下方案中：

本发明涉及式(I)的化合物：

或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中

为芳基或杂芳基，其定向地选自如下：

R⁰为H或C₁-C₄烷基；

R¹为-CN；或卤素；或C₁-C₄烷基；或C₁-C₄烷氧基；或-N(C₁-C₄烷基)₂；或-NH(C₁-C₄烷基)；或H；或

R¹为-NH-C₃-C₆环烷基、C₃-C₆环烷基或杂环基，其各自任选地被至少一个卤素取代；

R²为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R²选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2b独立地选自F、-OH、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、-NH₂、-CN或 C₁-C₄烷氧基；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；且

＊为键合的位置。

在另一个方面，本发明还涉及具有下式的化合物

或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

在另一个方面，本发明还涉及具有下式的化合物

在一个方面，式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、 (III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物用于α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的成像，其中所述化合物优选用于α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的正电子发射断层摄影术成像。

在另一个方面，本发明涉及一种对个体中与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常进行成像的方法，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突，该方法包含下列步骤：

(a)向个体施用式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；

(b)使化合物与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合；并且

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 结合的化合物。

(a)向个体施用式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；并且

(b)使所述个体的脑成像。

在另一个方面，本发明涉及一种对个体组织中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)进行正电子发射断层摄影术(PET)成像的方法，该方法包含下列步骤：

(b)使所述化合物穿透入所述个体的组织中；并且

(c)采集所述个体的所述组织的正电子发射断层摄影(PET)图像；其中所述组织是中枢神经系统(vNS)的组织、眼或脑的组织，优选地其中所述组织是脑组织。

在另一个方面，本发明涉及一种检测个体中与α-突触核蛋白聚集体相关的神经系统疾病、病症或异常的方法，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突，该方法包含下列步骤：

(c)测量所述化合物的放射性信号，所述化合物与所述α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合。

在另一个方面，本发明涉及一种用于检测和/或定量个体组织中的α-突触核蛋白聚集体的方法，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突，该方法包含下列步骤：

(a)使式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物与所述个体组织接触；

(c)使用正电子发射断层摄影术检测和/或定量与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突。

在另一方面，本发明涉及一种对个体的脑进行诊断成像的方法，该方法包含下列步骤：

(b)使用正电子发射断层摄影术获得所述个体的脑的图像。

本发明还涉及一种采集用于诊断与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的数据的方法，其也在本文中公开，其中该方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或身体区域与式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、 (IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物接触；

(b)使化合物与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合；

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 结合的化合物；并且

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或特定身体部位或身体区域中的α- 突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性。

本发明还涉及一种采集数据以确定与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的易感性的方法，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突，该方法包含下列步骤：

在另一个方面，本发明涉及一种采集用于预测与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的预后的数据的方法，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突，其中该方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品、特定身体部位或身体区域与式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、 (IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物接触；

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 结合的化合物；

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或特定身体部位或身体区域中的α- 突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性；并且

(e)任选地重复步骤(a)至(c)和任选的步骤(d)(如果存在的话)至少一次。

在另一个方面，本发明涉及一种采集用于监测患者中与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的进展的数据的方法，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突，该方法包含下列步骤：

在另一个方面，本发明涉及一种采集数据以预测患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的患者对与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的治疗的响应性的方法，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突，该方法包含下列步骤：

本发明还涉及诊断或药物组合物，其包含式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物和至少一种药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂或佐剂。

在另一个方面，本发明还涉及式(IV-F)的化合物

R³选自

R⁴为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R⁴选自

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；和

＊为键合的位置。

在另一个方面，本发明还涉及式(IV-H)的化合物

R⁵选自

R⁶为芳基或5-或6-元杂芳基，其中R⁶选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H、X或F；

R^2b独立地选自X、F、-OH、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、-NH₂、-CN 或C₁-C₄烷氧基，其中C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基任选地包含一个或多个X；

R^2c、R^2c’独立地选自X、H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自X、H、F或-OH；

R^2e选自X、H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；

＊为键合的位置；

氟为¹⁹F；

X为溴、氯或碘；且

其中R⁶包含至少一个X。

在另一个方面，本发明还涉及用于制备式(III-F)的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法，该方法包括使式(IV-F)的化合物与¹⁸F-氟化剂反应，使得离去基团(LG)被¹⁸F替代。

本发明还涉及用于制备式(III-H)的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法，该方法包含使式(IV-H)的化合物与氚化剂反应，使得X被³H替代。

在另一个方面，本发明还涉及式(IV-J)的化合物，

或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中

R⁷选自

R⁸选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

p为0、1或2；

R^z选自H、C₁-C₄烷基或卤代C₁-C₄烷基；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；

氟为¹⁹F；且

＊为键合的位置。

在另一个方面，本发明还涉及用于制备式(III-H)的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法，包含使式(IV-J)的化合物与³H放射性标记试剂反应。

本发明还涉及式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、 (III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物作为体外分析参比物或体外筛选工具的用途。

本发明还涉及用于检测和/或诊断与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的测试试剂盒，其中该测试试剂盒包含至少一种式(I)或其亚式(例如 (IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

本发明还涉及用于制备放射性药物制剂的试剂盒，其中该试剂盒包含密封小瓶，其包含至少一种式(IV-F)或(IV-H)或(IV-J)的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

下文中，式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物称作本发明的化合物。式(IV-F)、(IV-H) 和(IV-J)的化合物称作本发明化合物的前体。

本发明还由下列方案定义：

A1.式(I)的化合物

及其所有可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，

其中

R¹为如下被氟取代的吡咯烷

R²为包含一个或两个N原子的5-元或6-元杂芳基，其中所述杂芳基任选地被甲基取代，且

＊为键合的位置。

A2.方案A1的式(I)的化合物，其中

R¹为如下被¹⁸F取代的吡咯烷

A3.方案A1的式(I)的化合物，其中

R¹为如下被¹⁹F取代的吡咯烷

且

式(I)的化合物在至少一个可利用的位置被³H(氚)可检测地标记。

A4.方案A1-A3任一项的化合物，其为

A5.方案A1-A4任一项的化合物，用于使α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)成像，其中所述化合物优选用于α-突触核蛋白聚集体的正电子发射断层摄影术成像，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突。

A6.方案A1-A4任一项的化合物，用于诊断与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常或其易感性，其中所述病症任选地选自帕金森病(包括散发性、具有α-突触核蛋白突变的家族性、具有α-突触核蛋白以外的突变的家族性、单纯性自主神经功能衰竭或路易体吞咽困难)、路易体痴呆(LBD)、路易体痴呆(DLB)(包括“单纯性”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(PDD)、弥漫性路易体病(DLBD)、散发性阿尔茨海默病、具有APP突变的家族性阿尔茨海默病、具有PS-1、PS-2或其他突变的家族性阿尔茨海默病、家族性英国痴呆、阿尔茨海默病的路易体变体、唐氏综合征、多系统萎缩症(包括Shy-Drager综合征、纹状体黑质变性或橄榄体脑桥小脑萎缩)、创伤性脑损伤、慢性损伤性脑病、拳击员痴呆、tau蛋白病(包括皮克病、额颞叶痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、C1型尼曼-皮克二氏病、与17号染色体相关的伴有帕金森综合征的额颞叶痴呆)、克雅氏病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩性侧索硬化(包括散发性、家族性或关岛的ALS- 痴呆综合征)、神经轴性营养不良、伴有1型脑铁积累的神经变性(包括哈-斯二氏综合征)、朊病毒疾病、运动失调性毛细血管扩张症、特发性口面运动障碍、亚急性硬化性全脑炎、Gerstmann-Straussler-Scheatz综合征、包涵体肌炎、戈谢病、克拉伯病以及其他溶酶体贮积症(包括Kufor-Rakeb综合征和Sanfilippo综合征)和眼速动期(REM)睡眠行为障碍，优选帕金森病。

A7.一种采集用于诊断样品或患者中与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的数据的方法，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突，该方法包含：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或身体区域与如方案A1-A4中任一项所定义的化合物接触；

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物，所述α-突触核蛋白聚集体包括路易体和/或路易神经突；并且

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性。

A8.诊断组合物，包含方案A1-A4任一项的化合物和药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂或佐剂。

A9.式(II-F)的化合物

其中

R³为如下被离去基团(LG)取代的吡咯烷

R⁴为包含一个或两个N原子的5-元或6-元杂芳基，其中所述杂芳基任选地被甲基取代，且

＊为键合的位置。

A10.方案A9的式(II-F)的化合物，其中LG选自卤素、C_1-4烷基磺酸酯和C_6-10芳基磺酸酯。

A11.方案A9或A10的式(II-F)的化合物，其为

A12.式(II-H)的化合物

其中

R⁵为如下被氟取代的吡咯烷

R⁶为包含一个或两个N的5-元或6-元杂芳基，其中所述杂芳基任选地被甲基取代和/或杂芳基任选地被一个或多个X取代，

X为卤素或H，条件是至少一个X为卤素，且

＊为键合的位置。

A13.方案A12的式(II-H)的化合物，其为

A14.制备方案A2的化合物的方法，包含使方案A9-A11任一项的化合物与¹⁸F-氟化剂反应，使得LG被¹⁸F替代。

A15.方案14的方法，其中¹⁸F-氟化剂选自K¹⁸F、H¹⁸F、Cs¹⁸F、Na¹⁸F 和[¹⁸F]氟化四丁基铵。

A16.方案A1-A4任一项的化合物作为体外分析参比物或体外筛选工具的用途。

A17.用于检测和/或诊断与α-突触核蛋白聚集体相关的病症或异常的测试试剂盒，其中该测试试剂盒包含至少一种如方案A1-A4中任一项所定义的化合物。

A18.用于制备放射性药物制剂的试剂盒，其中该试剂盒包含密封小瓶，其包含至少一种如方案A9-A11中任一项所定义的化合物。

本发明还由下列方案定义：

B1.式(I)的化合物

或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，

其中

R¹为如下被氟取代的吡咯烷

R²为包含一个或两个N原子的5-元或6-元杂芳基，其中杂芳基任选地被甲基取代，且

＊为键合的位置。

B2.方案B1的式(I)的化合物，其中该化合物为可检测标记的化合物。

B3.方案B2的式(I)的化合物，其中所述可检测标记的化合物包含可检测的标记，其选自放射性同位素，优选²H、³H或¹⁸F。

B4.方案B3的式(I)的化合物，其中

R¹为如下被¹⁸F取代的吡咯烷

B5.方案B3的式(I)的化合物，其中

R¹为如下被¹⁹F取代的吡咯烷

且

式(I)的化合物在至少一个可利用的位置上被³H(氚)可检测地标记。

B6.方案B1-B5任一项的化合物，其为

其中T是指³H(氚)，且F是指¹⁹F。

B7.方案B1-B6任一项的化合物，用于使α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)成像，其中所述化合物优选用于α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的正电子发射体层摄影术成像。

B8.用于方案B7的用途的化合物，其中该用途是用于脑成像。

B9.用于方案B1-B6任一项的用途的化合物，用于诊断。

B10.用于方案B9的用途的化合物，用于诊断与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常或对其的易感性，其中所述疾病、病症或异常任选地选自帕金森病(包括散发性、具有α-突触核蛋白突变的家族性、具有α-突触核蛋白以外的突变的家族性、单纯性自主神经功能衰竭或路易体吞咽困难)、路易体痴呆(LBD)、路易体痴呆(DLB)(包括“单纯性”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(PDD)、弥漫性路易体病(DLBD)、散发性阿尔茨海默病、具有APP突变的家族性阿尔茨海默病、具有PS-1、PS-2 或其他突变的家族性阿尔茨海默病、家族性英国痴呆、阿尔茨海默病的路易体变体、唐氏综合征、多系统萎缩症(包括Shy-Drager综合征、纹状体黑质变性或橄榄体脑桥小脑萎缩)、创伤性脑损伤、慢性损伤性脑病、拳击员痴呆、 tau蛋白病(包括皮克病、额颞叶痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、 C1型尼曼-皮克二氏病、与17号染色体相关的伴有帕金森综合征的额颞叶痴呆)、克雅氏病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩性侧索硬化(包括散发性、家族性或关岛的ALS-痴呆综合征)、神经轴性营养不良、伴有1型脑铁积累的神经变性(包括哈-斯二氏综合征)、朊病毒疾病、运动失调性毛细血管扩张症、特发性口面运动障碍、亚急性硬化性全脑炎、Gerstmann-Straussler-Scheatz 综合征、包涵体肌炎、戈谢病、克拉伯病以及其他溶酶体贮积症(包括 Kufor-Rakeb综合征和Sanfilippo综合征)和眼速动期(REM)睡眠行为障碍。

B11.用于方案B10的用途的化合物，其中所述疾病为帕金森病。

B12.用于方案B7-B11任一项的用途的化合物，其中该用途是用于人。

B13.诊断患者中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常或对其的易感性的方法，其中该方法包含：

a)向所述患者施用诊断有效量的如方案B1-B6中任一项所定义的化合物；

b)允许所述化合物分布入关注的组织；并且

c)使关注的组织成像，其中与正常对照结合水平相比所述化合物与关注的组织的结合增加表明，所述患者患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常或处于发生它们的风险中。

B14.采集用于诊断患者中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的数据的方法，该方法包含：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或受体区域接触如方案B1-B6中任一项所定义的化合物；

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突；并且

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和所述样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性。

B15.采集用于诊断与患者中α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的数据的方法，包含：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体的样品或特定身体部位或受体区域接触如方案B1-B6中任一项所定义的化合物；

(b)允许所述化合物结合所述α-突触核蛋白聚集体；

(c)检测与所述α-突触核蛋白聚集体结合的化合物；并且

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的存在或不存在和所述样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体的存在或不存在之间建立相关性。

B16，测定组织和/或体液中α-突触核蛋白聚集体的量的方法，包含：

(a)提供研究中有代表性的组织和/或体液样品；

(b)用如方案B1-B6中任一项所定义的化合物测试样品中存在α-突触核蛋白聚集体；

(c)测定与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量；并且

(d)计算组织和/或体液中α-突触核蛋白聚集体的量。

B17.采集用于测定患者中对与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的易感性的数据的方法，包含检测如方案B1-B6中任一项所定义的化合物与样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体的特异性结合，该方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体的样品或特定身体部位或身体区域接触如方案B1-B6中所定义的化合物；

(b)允许所述化合物结合α-突触核蛋白聚集体，形成化合物/α-突触核蛋白聚集体复合物；

(c)检测所述化合物/α-突触核蛋白聚集体复合物的形成；

(d)任选地在所述化合物/α-突触核蛋白聚集体复合物的存在或不存在和所述样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体的存在或不存在之间建立相关性；并且

(e)任选地比较所述化合物/α-突触核蛋白聚集体的量与正常对照值。

B18.采集用于监测患有与α-突触核蛋白聚集体相关的已经用药物治疗的残留疾病、病症或异常的数据的方法，其中该方法包含：

(c)检测所述化合物/α-突触核蛋白聚集体复合物的形成；

B19.采集用于预测患有与α-突触核蛋白聚集体相关的正在用药物治疗的疾病、病症或异常的患者的响应性的数据的方法，包含：

(c)检测所述化合物/α-突触核蛋白聚集体复合物的形成；

B20.诊断组合物，包含方案B1-B6任一项的化合物和药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂或佐剂。

B21.式(II-F)的化合物

或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，

其中

R³为如下被离去基团(LG)取代的吡咯烷

R⁴为包含一个或两个N原子的5-元或6-元杂芳基，其中杂芳基任选地被甲基取代，且

＊为键合的位置。

B22.方案B21的式(II-F)的化合物，其中LG选自卤素、C_1-4烷基磺酸酯和C_6-10芳基磺酸酯。

B23.方案B21或B22的式(II-F)的化合物，其为

B24.式(II-H)的化合物

R⁵为如下被氟取代的吡咯烷

R⁶为包含一个或两个N的5-元或6-元杂芳基，其中杂芳基任选地被甲基取代和/或杂芳基任选地被一个或多个X取代，

X为卤素或H，条件是至少一个X为卤素，且

＊为键合的位置。

B25.方案B24的式(II-H)的化合物，其为

B26.制备方案B2、B3或B4的化合物的方法，包含使方案B21-B23任一项的化合物与¹⁸F-氟化剂反应，使得LG被¹⁸F替代。

B27.方案B26的方法，其中¹⁸F-氟化剂选自K¹⁸F、H¹⁸F、Cs¹⁸F、Na¹⁸F 和[¹⁸F]氟化四丁基铵。

B28.制备方案B2、B3或B5的化合物的方法，包含使方案B24或B25 任一项的化合物与³H放射性标记试剂反应。

B29.方案B1-B6任一项的化合物作为体外分析参比物或体外筛选工具的用途。

B30.用于检测和/或诊断与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的测试试剂盒，其中该测试试剂盒包含至少一种如方案B1-B6中任一项所定义的化合物。

B31.用于制备放射性药物制剂的试剂盒，其中该试剂盒包含含有如方案 B21-B25中任一项所定义的至少一种化合物的密封小瓶。

在这些方案A和B内，“杂环基”可指如上文所定义的碳环基，其中至少一个碳原子已被例如选自N、O或S的杂原子或含杂原子(例如N、O和/或 S)的部分替代。杂环基可以是不饱和的或饱和的。它涵盖杂烷基和杂芳基。杂环基也可以是稠合的、以桥接方式连接的或以螺方式连接的，例如6-元双环、 7-元双环、8-元双环、6-元螺环、7-元螺环或8-元螺环。实例包括氮杂环丁烷、吡咯烷、吡咯、四氢呋喃。呋喃、硫杂环戊烷、噻吩、咪唑烷、吡唑烷、咪唑、吡唑、噁唑烷、异噁唑烷、噁唑、异噁唑、噻唑烷、异噻唑烷、噻唑、异噻唑、二氧杂环戊烷、二硫杂环戊烷、三唑、呋咱、噁二唑、噻二唑、二噻唑、四唑、哌啶、噁烷、噻烷、吡啶、吡喃、噻喃、哌嗪、二嗪(包括吡嗪和嘧啶)、吗啉、噁嗪、硫代吗啉、噻嗪、二噁烷、二噁英、二噻烷、二噻英(dithiine)、三嗪、三噁烷、四嗪、氮杂环庚烷、吖庚因、氧杂环庚烷、噁庚因、硫杂环庚烷、噻庚因、3-氮杂双环[3.1.0]己烷、氮杂螺[3.3]庚烷、二氮杂螺[3.3]庚烷、氮杂双环[3.2.1]辛烷和二氮杂双环[3.2.1]辛烷。优选的杂环基的实例包括氮杂环丁烷、吗啉、哌嗪、吡咯烷、四氢呋喃、哌啶、氮杂螺[3.3] 庚烷等。可能的杂芳基的实例包括吡啶、吡唑等。

关于这些方案A和B，可以应用以下优选的定义。

优选地，R²为

更优选地，R²为

甚至更优选地，R²为

在上述实施方案的每一个中，R²可以任选地被甲基取代。

F优选为¹⁹F或¹⁸F，更优选¹⁸F。

在方案A和B的一个实施方案中，式(I)的化合物为可检测标记的化合物

其中

可检测标记为放射性同位素，

R¹为如下被氟取代的吡咯烷

＊为键合的位置。

优选地，可检测标记为放射性同位素，其选自¹⁸F^、2H和³H，最优选¹⁸F 和³H。

在方案A和B的一个实施方案中，式(I)的化合物为式(I-F)的可检测标记的化合物

R¹为如下被¹⁸F取代的吡咯烷

＊为键合的位置。

在方案A和B的一个实施方案中，式(I)的化合物为式(I-H)的可检测标记的化合物

其在至少一个可利用的位置上被²H或³H(氚)、优选³H可检测地标记，

R¹为如下被氟取代的吡咯烷

R²为包含一个或两个N原子的5-元或6-元杂芳基，其中所述杂芳基任选地被甲基取代，

氟为¹⁹F，且

＊为键合的位置。

优选地，式(I-H)的可检测标记的化合物为式(I-Ha)的化合物

其中

R¹为如下被氟取代的吡咯烷

R²为包含一个或两个N原子的5-元或6-元杂芳基，其中杂芳基任选地被甲基取代，和/或杂芳基任选地被至少一个T取代，T为³H(氚)，

n为0-3，

条件是式(I-Ha)的化合物包含至少一个T，其中T为³H(氚)，

氟为¹⁹F，且＊为键合的位置。

优选地，式(I-Ha)的可检测标记的化合物包含一个或两个T。

优选地，n为1。

在另一个实施方案中，式(I-H)的化合物R²为6-元杂芳基，其包含一个N 原子，其中杂芳基被一个或多个T取代。优选地，R2为

更优选地，R⁶为

在方案A和B的一个优选的实施方案中，式(I)的化合物为

或可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中

R¹为如下被氟取代的吡咯烷

R²为包含一个或两个N原子的6元杂芳基，其中所述杂芳基任选地被甲基取代，且

＊为键合的位置。

优选地，R²为6元杂芳基，其包含一个N原子。更优选地，R²为

在上述R²的实施方案的每一个中，6元杂芳基可以任选地被甲基取代。

定义

出于解释本说明书的目的，除非另有说明，否则以下定义将适用，并且在适当时，以单数使用的术语也将包括复数，反之亦然。

“烷基”是指由碳和氢原子组成的饱和直链或支链有机部分。烷基典型地不含任何饱和度，并且通常通过单键与分子的其余部分连接。合适的烷基的实例具有1至6个碳原子，优选1至4个碳原子。术语“C₁-C₄烷基”应相应地解释。“C₁-C₄烷基”的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、1-甲基乙基、正丁基、叔丁基和异丁基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基和异丁基。

″C₁-C₄烷氧基″是指具有式-ORa的基团，其中Ra是如上述一般定义的 C₁-C₄烷基基团。C₁-C₄烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基和异丁氧基。

″卤素C₁-C₄烷基″或″卤代C₁-C₄烷基″是指如上述所定义的C₁-C₄烷基基团，其被一个或多个如下所定义的卤素基团取代。″卤代C₁-C₄烷基″的实例包括但不限于三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、三氯甲基、2，2，2-三氟乙基、1，3- 二溴丙-2-基、3-溴-2-氟丙基和1，4，4-三氟丁-2-基。

″C₃-C₆环烷基″是指仅由碳和氢原子组成的具有3至6个碳原子的稳定的单环饱和烃基。C₃-C₆环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

“杂环基”是指包含1或2个例如选自N、O或S的杂原子的稳定的4-至 6-元非芳族单环基团。杂环基可以是不饱和的或饱和的。杂环基可以通过碳原子或杂原子键合。实例包括但不限于氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯啉基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吗啉基或全氢氮杂卓基。优选的杂环基的实例包括但不限于氮杂环丁烷基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基或哌啶基。

″芳基″是指由碳和氢原子组成的碳环型芳族有机部分(例如含有1或2个环)，其优选具有5至12个碳原子，优选6至12个碳原子，更优选6至10 个碳原子，还更优选5至10个碳原子，甚至更优选5或6个碳原子。实例包括但不限于苯基、联苯基和萘基。

″杂芳基″是指如上定义的芳基，其中至少一个碳原子已被例如选自N、O 或S的杂原子或含杂原子(例如N、O和/或S)的部分替代。典型地，杂芳基是 5-至8-元环系，优选5-至6元环系，其中至少一个碳原子被例如选自N、O 或S的杂原子替代。可能的杂芳基的实例包括但不限于呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、四唑基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基或吡啶基。其优选实例包括吡啶、吡唑等，更优选吡啶。

″Hal″或″卤素″或″卤代″是指F、Cl、Br和I。在诊断和药物应用方面，特别优选F(例如¹⁹F和¹⁸F)。

如本文所用的术语“离去基团”(LG)是任何离去基团，并且意指可以被另一个原子或原子团替代的原子或原子团。例如在Synthesis(1982)，p.85-125，表2，Carey和Sundberg，Organische Synthese，(1995)，279-281页，表5.8；或 Netscher，RecentRes.Dev.Org.Chem.，2003，7，71-83，方案1、2、10和15 等)。(Coenen，Fluorine-18LabelingMethods：Features and Possibilities of Basic Reactions，(2006)：Schubiger P.A.，Friebe M.，Lehmann L.，(eds)， PET-Chemistry-The Driving Force in MolecularImaging.Springer，Berlin Heidelberg，pp.15-50，明确地：第25页方案4，第28页方案5，第30页表4，第 33页图7)中给出实例。优选地，″离去基团″(LG)选自卤素、C_1-4烷基磺酸酯和C_6-10芳基磺酸酯，其中C_6-10芳基可以任选地被-CH₃或-NO₂取代。

除非另有说明，否则术语“本发明的化合物”是指式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体(包括非对映异构体混合物和单独的非对映异构体、对映异构体混合物和单一对映异构体、构象异构体的混合物和单一构象异构体)、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。应当理解，每次提及如本文所定义的式(I)的化合物也涵盖其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、 (IIIc)、(III-F)、(III-H))。

本发明的化合物及其具有一个或多个光学活性碳的前体可以以外消旋体和外消旋混合物、立体异构体(包括非对映异构体混合物和单独的非对映异构体、对映异构体混合物和单一对映异构体、构象异构体的混合物和单一构象异构体)、互变异构体、阻转异构体和旋转异构体的形式存在。所有异构体形式都包括在本发明中。本说明书中描述的含有烯属双键的化合物包括E和Z 几何异构体。

本发明还包括所有盐形式、多晶型物、水合物和溶剂化物(例如乙醇化物)。

将″药学上可接受的盐″定义为所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸盐或碱盐来修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性基团如胺的无机或有机酸盐；酸性基团如羧酸的碱金属盐或有机盐等。药学上可接受的盐包括例如由无毒无机或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。例如，这样的常规无毒盐包括衍生自无机酸的那些，所述无机酸例如但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等；和由有机酸制备的盐，所述有机酸例如但不限于乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙磺酸等。本发明化合物的药学上可接受的盐及其前体可以通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，此类盐可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量量的适当碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备。有机溶剂包括但不限于非水性介质，例如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。合适的盐的清单可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Company，Easton，PA，1990，p.1445中找到，其公开内容通过引用并入本文。

将″药学上可接受的″定义为在合理的医学判断范围内，适合用于与人类和动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的利益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。

本发明的化合物还可以前药的形式提供，即在体内代谢为活性代谢物的化合物。

本发明中的患者或个体典型地为动物，特别是哺乳动物，更特别是人。

α-突触核蛋白聚集体是α-突触核蛋白单体的富含β-折叠的多聚组装体，其可以形成可溶性寡聚体或可溶性/不溶性初原纤维或成熟原纤维，其聚结成细胞内沉积物，其被检测为帕金森病和其他突触核蛋白病中的一系列路易病变。组成路易病理学情况的α-突触核蛋白聚集体可以被检测为具有以下形态：路易小体、路易神经突、早熟路易小体或苍白小体、具有弥漫性、颗粒状、点状或多形性模式的核周沉积物。此外，α-突触核蛋白聚集体是在少突胶质细胞(也称作神经胶质细胞质内含物)和神经元体细胞、轴突和核(称为神经元细胞质内含物)中检测到的细胞内纤维状内含物的主要成分，其是多系统萎缩症的组织学标志。路易病变中的α-突触核蛋白聚集体通常显示出翻译后修饰如磷酸化、泛素化、硝化和截短的显著增加。

路易体是在帕金森病(PD)、路易体痴呆和其他突触核蛋白病中在神经细胞内发育的蛋白质的异常聚集体。路易体表现为置换其他细胞成分的球形团块。在形态学上，路易体可以分类为脑干或皮质型。典型的脑干路易体是嗜酸性细胞质包涵体，其由被5-10-nm宽的辐射原纤维的晕包围的致密核心组成，其主要结构成分为α-突触核蛋白；皮质路易体的不同之处在于缺乏晕圈。路易体的存在是帕金森病的标志。

路易神经突是患病神经元中的异常神经元过程，含有颗粒物质、与路易体中发现的那些类似的异常α-突触核蛋白(α-syn)丝、点状、静脉曲张结构和轴突球状体。与路易体一样，路易神经突是α-突触核蛋白病如路易体痴呆、帕金森病和多系统萎缩症的特征。

术语“疾病”、“病症”或“异常”在本文中可互换使用。

式(I)的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物可以结合α-突触核蛋白聚集体。式(I) 的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物之间的键合类型尚未得到阐明，并且本发明覆盖任意键合类型。措词″与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物″、″化合物/(α- 突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物″、化合物 /α-突触核蛋白聚集体复合物″、″化合物/蛋白质聚集体复合物″等在本文中可以互换使用。并且被视为不限于任何特定类型的键合。

除非另有说明，否则“定义”部分中给出的优选定义适用于下面描述的所有实施方案。本文描述了本发明的各种实施方案，应当认识到，每个实施方案中指定的特征可以与其他指定的特征组合以提供本发明另外的实施方案。

附图简述

图1：[3H]-实施例-1/实施例-1[³H-1]在来自不同α-突触核蛋白病的组织上的靶标结合。银颗粒在路易体和路易神经突上的积累，如下部图所示。在相同切片上用α-syn-pS129抗体进行免疫荧光染色，如上部图所示，以便共标记α-syn聚集体。PD，帕金森病；PDD，帕金森病伴痴呆；MSA，多系统萎缩症；DLB，路易体痴呆；LBV，阿尔茨海默病的路易体变体。比例尺，20μm。

图2：通过放射自显影评估实施例-1[³H-1]对人PDD脑组织的结合亲和力。A)放射自显影图像，B)用α-syn-pS129抗体的免疫荧光染色，C)实施例-1[³H-1]的特异性结合，(R.U.：相对单位)。比例尺，2mm。‘-’，总结合；‘+’，自封闭，非特异性结合。

图3：通过放射自显影评估实施例-1[³H-1]对来自家族性PD病例(G51D 错义突变)的人脑组织的结合亲和力。A)放射自显影图像，B)用α-Syn-pS129 抗体的免疫荧光染色，C)实施例-1[³H-1]的特异性结合，(R.U.：相对单位)。比例尺，5mm。‘-’，总结合；‘+’，自封闭，非特异性结合。

图4：通过放射自显影评估实施例-1[³H-1]的结合特异性和与参比物α-syn结合剂([3H]-α-syn-ref)的头对头比较。A)放射自显影图像，B)用α-SYN-pS129抗体的免疫荧光染色。比例尺，2mm。PDD，帕金森病伴痴呆； PD_SNCA，α-突触核蛋白[SNCA]基因G51D错义突变；NDC，非痴呆对照。‘-’，总结合；‘+’，自封闭，非特异性(NS)结合。

图5：通过显微放射结合法测试[3H]-实施例1在来自PD脑的α-syn聚集体上的饱和结合以及与[3H]-α-syn-Ref的头对头比较。该图显示了特异性结合 (R.U.：相对单位)。

图6：实施例-1[³H-1]与a-syn-Ref对特发性PD脑来源的α-syn聚集体的竞争性结合。将实施例-1[³H-1]的竞争百分比值相对于非放射性标记的α-syn-Ref(左)或实施例1(右)化合物的浓度增加作图。显示了两个技术重复的平均值。

图7：实施例1的化合物对AD脑来源的匀化物用非放射性标记的实施例1 的化合物置换参比物Aβ化合物([3H]-Abeta-Ref)时的Ki值的评估。将 [³H]-Aβ-Ref结合的竞争百分比值相对于实施例1的非放射性标记的化合物的浓度增加作图。显示了两个技术重复的平均值。

图8：实施例-1[³H-1]对含有病理性Tau聚集体的AD组织的靶标结合的评估。A)对标记Tau聚集体的相同组织用MCI抗体进行免疫荧光染色，B) 与参比的Tau配体([3H]-Tau-ref)相比，使用实施例-1[³H-1]在Tau缠结上没有银颗粒的积累。

图9：实施例-1[³H-1]对含有病理性TDP-43聚集体的额颞叶变性(FTLD) TDP C型组织的靶标结合的评估。在相同的组织标记TDP-43聚集体上用磷酸-TDP-43抗体进行免疫荧光染色(上部图)。在使用实施例-1[³H-1]的TDP-43 聚集体上没有银颗粒积累(下部图)。比例尺，20μm。

图10：使用实施例1-[¹⁸F-1]]在整个猴脑中进行iv NHP PK。

图11：通过放射自显影评估实施例1[3H-1]对不同α-突触核蛋白病和非痴呆对照(NDC)病例的结合特异性。A)放射自显影图像；B)用α-syn-pS129抗体对患病供体的免疫荧光染色。比例尺，5mm。PDD，帕金森病伴痴呆；MSA，多系统萎缩症；LBV，阿尔茨海默病的路易体变体，NDC，非痴呆对照。‘总’，总结合；‘NSB’，非特异性结合。

图12：[³H]-实施例-4/实施例-4[³H-4]在PD组织上的靶标结合。银颗粒在路易体和路易神经突上的积累，如下部图所示。在相同切片上用α-syn-pS129 抗体进行免疫荧光染色，如上部图所示，以便共标记α-syn聚集体。比例尺， 20μm。

图13：通过放射自显影实施例-4[³H-4]对不同α-突触核蛋白病和非痴呆对照病例的结合特异性评估。A)放射自显影图像；B)用α-syn-pS129抗体对患病供体的免疫荧光染色。比例尺，2mm。SNCA，α-突触核蛋白[SNCA]基因 G51D错义突变；PD，帕金森病；MSA，多系统萎缩症；NDC，非痴呆对照。‘总’，总结合；‘NSB’，非特异性结合。

图14：通过显微放射性结合在PD脑来源的α-syn聚集体上的[³H]-实施例 4的饱和结合。该图显示了特异性结合(每mm²的每分钟计数)。显示了四个独立实验的平均值(平均值±SD)。

图15：在AD脑来源的匀化物上用非放射性标记的实施例4的化合物置换参比的Aβ化合物([³H]-Abeta-Ref)时实施例4的化合物的Ki值的评估。将 [³H]-Aβ-Ref结合的竞争百分比值相对于实施例4的非放射性标记的化合物的浓度增加作图。显示了具有两个技术重复的两个独立实验的平均值(平均值±SD)。

图16：通过显微放射自显影进行实施例-4[³H-4]在含有病理性Tau聚集体的AD组织上的靶标结合的评估。与参比Tau配体([³H]-Tau-ref)相比，使用实施例-4[³H-1]的Tau缠结上未观察到银颗粒累积。

发明详述

本发明的化合物及其前体描述如下。应当理解，也涵盖了下列定义的所有可能的组合。

本发明涉及式(I)的化合物，

为芳基或杂芳基，其定向地选自如下：

R⁰为H或C₁-C₄烷基；

R¹为-CN；或卤素；或C₁-C₄烷基；或C₁-C₄烷氧基；或-N(C₁-C₄烷基)₂；或-NH(C₁-C₄烷基)；或H，或

R²为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R²选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；且

＊为键合的位置。

在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物，其具有式(IIa)或 (IIb)

在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物，其具有式(IIIa)、(IIIb) 或(IIIc)，

R⁰为H或C₁-C₄烷基。优选地，R⁰为H或CH₃，更优选地，R⁰为H。

在一个实施方案中，R¹为H、-CN、卤素、C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基、 N(C₁-C₄烷基)₂或-NH(C₁-C₄烷基)。优选地，R¹为-CN、卤素、C₁-C₄烷基、 C₁-C₄烷氧基、N(C₁-C₄烷基)₂或-NH(C₁-C₄烷基)。更优选地，R¹为-CN、F、 C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基或-N(C₁-C₃烷基)₂。甚至更优选地，R¹为-CN、 -CH(CH₃)₂、-OCH₃、-OCH(CH₃)₂、-N(CH₃)₂或-NH-CH(CH₃)₂。

在一个实施方案中，R¹为-NH-C₃-C₆环烷基、C₃-C₆环烷基或杂环基，其各自任选地被至少一个卤素取代。优选地，R¹选自如下：

其中R^1’独立地为卤素；且s＝0、1、2或3。

更优选地，R¹选自如下：

甚至更优选地，R¹选自

在一个优选的实施方案中，F优选为¹⁹F或¹⁸F，更优选¹⁸F。

在一个实施方案中，R²选自如下：

其中

R^2a、R2^a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；且

＊为键合的位置。

优选地，R²选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-v₄烷基；

p为0、1或2；且

＊为键合的位置。

优选地，R²选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基；

p为0、1或2；且

＊为键合的位置。

更优选地，R²选自如下：

其中R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基；

p为0、1或2；且

＊为键合的位置。

甚至更优选地，R2选自：

其中＊为键合的位置。

在另一个实施方案中，本发明提供了亚式(IIa)或(IIb)的任意一个的化合物，

或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中R⁰为甲基或H；R¹为CH₃或H；优选地， R¹为CH₃；且R²包含至少一个氟且优选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基；

p为0、1或2；且

＊为键合的位置。

最优选地，R²选自

其中R^2a、R^2a’、R^2b、R^2e、R^2c、R^2c’、R^z和p如上文所定义；且其中R^2a、 R^2a’、R^2b、R^2c、R^2c’和R^2e的至少一个为F。F优选为¹⁹F或¹⁸F，更优选¹⁸F。

在另一个实施方案中，本发明提供了亚式(IIIa)、(IIIb)或(IIIc)的任意一个的化合物，

其中R⁰为甲基或H，优选地，R⁰为H；

R¹选自-CN、卤素、C₁-C₄烷基；或C₁-C₄烷氧基、-N(C₁-C₄烷基)₂、 -NH(C₁-C₄烷基)、H；或

优选地，R¹选自如下：

F优选为¹⁹F或¹⁸F，更优选¹⁸F；且

R²优选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基；

p为0、1或2；且

＊为键合的位置。

在另一个实施方案中，本发明涉及式(IIIa)的化合物：

R⁰为甲基或H，优选地，R⁰为H；

R¹为-NH-C₃-C₆环烷基、C₃-C₆环烷基或杂环基，其各自任选地被至少一个卤素取代，优选地，R¹选自如下：

R¹优选地如下被氟取代：

更优选地，R¹为

优选地，R¹为

R²优选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基；

p为0、1或2；且

＊为键合的位置。

优选地，R²选自如下：

其中R^2a、R^2a’、R^2b、R^2c、R^2c’、R^2d、R^2e、R^z和p如上文所定义。

更优选地，R²选自如下：

优选地，R²为

更优选地，R²为

甚至更优选地，R²为

在上述实施方案的每一个中，R²可以任选地被一个或多个如上文所公开的取代基取代。F优选为¹⁹F或¹⁸F，更优选¹⁸F。

在另一个实施方案中，本发明涉及式(IIIb)的化合物：

R⁰为甲基或H，优选地，R⁰为H；

R¹优选地如下被氟取代：

更优选地，R¹为

优选地，R¹为

R²优选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基；

p为0、1或2；且

＊为键合的位置。

优选地，R²选自如下：

更优选地，R²选自如下：

优选地，R²为

更优选地，R²为

甚至更优选地，R²为

在另一个实施方案中，本发明涉及式(IIIc)的化合物：

R⁰为甲基或H，优选地，R⁰为H；

R¹优选地如下被氟取代：

更优选地，R¹为

优选地，R¹为

R²优选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基；

p为0、1或2；且

＊为键合的位置。

优选地，R²选自如下：

更优选地，R²选自如下：

优选地，R²为

更优选地，R²为

甚至更优选地，R²为

在另一个实施方案中，本发明提供了式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、 (IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中优选的化合物为：

更优选地，优选化合物的立体异构体为

在一个实施方案中，本发明提供了式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中式(I)的化合物为可检测标记的化合物。

本发明的一个实施方案提供了式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、 (IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中该化合物为可检测标记的化合物，其中可检测标记为放射性同位素，且其中式(I)的化合物包含至少一种放射性同位素。

优选地，可检测标记为放射性同位素，其选自¹⁸F、²H和³H，最优选¹⁸F 或³H。

在一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物，优选亚式(IIIa)的化合物，或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中该化合物为式(III-F)的可检测标记的化合物

R¹如下被¹⁸F取代：

R²为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R²选自

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2b独立地选自F、-OH、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、-NH₂、-CN或C₁-C₄烷氧基；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价吮许时，

为单键和双键的组合；且

＊为键合的位置。

优选地，R²选自

其中R^2a、R^2a’、R^2b、R^2c、R^2c’、R^2d、R^2e和p如上文所定义，且R^z选自 H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基。

更优选地，R²选自如下：

更优选地，R²选自如下：

其中R^2a、R^2a’、R^2b、R^2c、R^2c’、R^2e、R^z和p如上文所定义。

优选地，式(III-F)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含至少一个¹⁸F。优选地，R²(例如R^2a、 R^2a’、R^2b、R^2c、R^2c’、R^z和R^2e)的取代基任选地可以为¹⁸F。更优选地，式(III-F) 的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含一个或两个¹⁸F。甚至更优选地，一个¹⁸F。

优选的化合物选自：

或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

最优选的化合物为

或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

在一个实施方案中，本发明提供了式(I)的化合物，优选亚式(IIIa)的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中该化合物为式(III-H)的可检测标记的化合物

其在至少一个可利用的位置上被²H(氘“D”)或³H(氚“T”)、优选³H可检测地标记，

其中

R¹为-NH-C₃-C₆环烷基、C₃-C₆环烷基或杂环基，其各自任选地被至少一个卤素取代；R¹优选自

R²为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R²选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H、T或F；

R^2b独立地选自T、F、-OH、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、-NH₂、-CN、 CT₃或C₁-C₄烷氧基；

R^2c、R^2c’独立地选自T、H、F、OH、OCH₃、CT₃或CH₃；

R^2d选自T、H、F或-OH；

R^2e选自T、H、OH、CH₃、CT₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，则

为单键和双键的组合；

氟为¹⁹F；

其中C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基任选地包含一个或多个T，且

＊为键合的位置。

优选地，式(III-H)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含一个、两个或三个T。优选地，式 (III-Ha)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含一个T。更优选地，式(III-Ha)的可检测标记的化合物包含两个T。甚至更优选地，式(III-Ha)的可检测标记的化合物包含三个T。

优选地，式(III-H)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物为式(III-Ha)的化合物

其中

R¹优选自：

R²为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R²选自如下且其中R²任选地被至少一个T取代。

和

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H、T或F；

R^2b独立地选自T、F、-OH、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、-NH₂、-CN、 CT₃或C₁-C₄烷氧基，其中C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基任选地包含一个或多个T；

R^2c、R^2c’独立地选自T、H、F、OH、OCH、CT₃或CH₃；

R^2d选自T、H、F或-OH；

R^2e选自T、H、OH、CH₃、CT₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合，

T为³H(氚)；

n为0-3；

条件是式(I-Ha)的化合物包含至少一个T；

氟为¹⁹F；且

＊为键合的位置。

优选地，式(III-Ha)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含一个、两个或三个T。优选n为1。

优选地，式(III-Ha)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含一个T。更优选地，式(III-Ha)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含两个T。甚至更优选地，式(III-Ha)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含三个T。

在另一个实施方案中，本发明提供了如上文所公开的式(III-H)或(111-Ha)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中R2为芳基或5-元或6-元杂芳基，其选自

其中R^2a、R^2a’、R^2b、R^2c、R^2c’、R²d、R^2e和p如上文所定义，R^z选自T、 H、C₁-C₄烷基、CT₃或卤代C₁-C₄烷基；其中C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基任选地包含一个或多个T。

优选地，R²选自如下：

更优选地，R²选自如下：

优选地，R²为

其中R^z包含至少一个T。

更优选地，R²is

式(III-H)或(III-Ha)的优选的可检测标记的化合物、其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物为

其中T是指³H(氚)。优选F是指¹⁹F。

在一个优选的实施方案中，本发明提供了式(III-H)或(III-Ha)的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中³H氚(“T”)可以被²H氘(“D”)替代。

优选地，式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物的可检测标记的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含可检测标记，优选地，所述可检测标记为放射性同位素，特别地选自¹⁸F、²H和³H。

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物及其前体可以被可检测地标记。对标记的类型没有特别限制，而是取决于所选择的检测方法。可能的标记的实例包括同位素，例如放射性核素、正电子发射体和γ发射体。关于包括放射性同位素、正电子发射体或γ发射体的可检测标记的本发明化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物及其前体，应当理解放射性同位素、正电子发射体或γ发射体以与相应的放射性同位素、正电子发射体或γ发射体的天然量不同的量存在。此外，所使用的量应允许通过所选择的检测方法对其进行检测。

合适的同位素如放射性核素、正电子发射体和γ发射体的实例包括²H、³H、¹⁸F、¹¹C、¹³N和¹⁵O，优选²H、³H、¹¹C、¹³N、¹⁵O和¹⁸F，更优选²H、³H和¹⁸F，甚至更优选³H和¹⁸F。

¹⁸F-标记的化合物特别适用于成像应用，例如PET。包括具有天然¹⁹F同位素的相应化合物也是特别感兴趣的，因为它们可以在它们的¹⁸F-类似物制造、质量控制、释放和临床使用期间用作分析标准和参比物。

此外，用同位素如氘(即²H)取代可以提供某些诊断和治疗优势，这是由于通过减少例如脱氟、增加体内半衰期或减少剂量需求而获得更大的代谢稳定性，同时保持或改善原始化合物功效。

本发明化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物及其前体的同位素变化形式通常可以通过常规方法制备，例如通过示例性方法或通过下文实施例和制备实施例中所述的制备方法，使用合适试剂的适当同位素变化形式来进行，其可商购获得或通过已知的合成技术制备。

可以通过有机合成领域中常用的方法使本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物及其前体中包括放射性核素、正电子发射体和γ发射体。典型地，当制备本发明的期望的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物及其前体时，可以通过使用相应标记的原料引入它们。引入可检测标记的示例性方法描述在例如US2012/0302755中。

对可检测标记与本发明的化合物及其前体结合的位置没有特别限定。

例如，放射性核素、正电子发射体和γ发射体可以连接在相应的非发射原子也可以连接的任何位置。例如，¹⁸F可以连接在适于连接F的任何位置。这同样适用于其他放射性核素、正电子发射体和γ发射体。由于易于合成，优选在 R¹处连接¹⁸F。³H可以连接在任何可利用的位置。优选其与吡啶环连接。如果²H用作可检测标记，则它可以在任何可利用的位置连接。优选其与吡啶环连接。

在另一个实施方案中，本发明还涉及式(IV-F)的化合物，即式(III-F)的化合物的前体，

其中

R³如下被离去基团(LG)取代：

R⁴为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R⁴选自与如上文所公开的式(III-F) 的化合物的R²相同的清单。

优选地，离去基团(LG)为卤素、C_1-4烷基磺酸酯、C₁-C₄烷基铵、硝基或 C_6-10芳基磺酸酯，其中C_6-10芳基可以任选地被-CH₃或-NO₂取代。更优选地，离去基团(LG)为溴、氯、碘、C_1-4烷基磺酸酯或C_6-10芳基磺酸酯，其中C_6-10芳基可以任选地被-CH₃或-NO₂取代。甚至更优选地，离去基团(LG)为甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或硝基苯磺酸酯。甚至更优选地，离去基团(LG)为甲磺酸酯或硝基苯磺酸酯。优选地，离去基团(LG)为甲磺酸酯。

优选地，R⁴为

更优选地，R⁴为

甚至更优选地，R⁴为

优选地，R⁴任选地被¹⁸F取代。

优选的化合物为：

在另一个实施方案中，本发明还涉及式(IV-H)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，即式(III-H)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的前体，

其中

R⁵选自与如上文公开的式(III-H)的化合物的R¹相同的清单，并且优选自

R⁶为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R⁶选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H、X或F；

R^2b独立地选自X、F、-OH、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、-NH₂、-CN或 C₁-C₄烷氧基，其中C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基任选地包含一个或多个X；

R^2c、R^2c’独立地选自X、H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自X、H、F或-OH；

R^2e选自X、H、OH、CH₃或F；

z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；

＊为键合的位置。

氟为¹⁹F；

X为溴、氯或碘；且

其中R⁶包含至少一个X。

在另一个实施方案中，式(IV-H)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物中，R⁶优选为任选地被一个或多个X取代的芳基或6-元杂芳基，其选自：

其中R^2a、R^2a’、R^2b、R^2c、R^2c’、R^2d、R^2e和p如上文所定义；当化合价允许时，

为单键和双键的组合；氟为¹⁹F；且＊为键合的位置。

优选地，R⁶为

更优选地，R⁶为

甚至更优选地，式(IV-H)的化合物为：

其中X选自溴、氯和碘。

优选地，X为溴。

优选的化合物为：

或其可检测标记的化合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

在另一个实施方案中，本发明还涉及式(IV-J)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其为式(III-H)的化合物的前体或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物

其中

R⁷选自与如上文所公开的式(III-H)化合物的R¹相同的清单，且优选自

R⁸选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

p为0、1或2；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基，

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；

氟为¹⁹F；且

＊为键合的位置。

优选地，R^z为H。

在式(IV-J)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的另一个实施方案中，R⁸优选自

其中R^2a、R^2a’、R^2b和p如上文所定义；

更优选地，R⁸选自：

优选的化合物为：

可检测标记的化合物的合成方法

本发明还涉及用于制备式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法且特别是包含可检测标记的式(III-F)或(III-H)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法。

在一个实施方案中，本发明涉及制备式(III-F)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法，该方法通过用放射性同位素¹⁸F对式(IV-F)的化合物进行放射性标记来进行，

¹⁸F-氟化剂

其中R¹、R²、R³和R⁴如本文所定义。

用于¹⁸F-氟化的合适的溶剂包含DMF、DMSO、乙腈、DMA或其混合物，优选乙腈或DMSO。

用于¹⁸F-氟化的合适的试剂选自K¹⁸F、Rb¹⁸F、Cs¹⁸F、Na¹⁸F、¹⁸F的四(C_1-6烷基)铵盐、kryptofix[222]¹⁸F和氟化四丁基铵[¹⁸F]。

在一个实施方案中，本发明涉及制备式(III-H)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法，该方法通过用放射性同位素³H对式(IV-H)的化合物进行放射性标记来进行，

³H放射性标记试剂

其中R¹、R²、R⁵和R⁶如本文所定义，且

T为³H(氚)，

n为0-3，优选地，n为1或2，更优选地，n为1；

条件是式(III-Ha)的化合物包含至少一个T，

氟为¹⁹F，

X为溴、氯、碘或H，优选地，X为溴。

³H放射性标记试剂可以为氚气体。该方法可以在催化剂例如钯/碳(Pd/C)、溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)和碱例如N，N-二异丙基乙胺(DIEA)存在下进行。

在一个优选的实施方案中，F(氟)为¹⁹F。

在一个实施方案中，本发明涉及用于制备式(III-H)的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的方法，通过用CT₃放射性标记试剂对式(IV-J)的化合物进行放射性标记来进行，其中T为³H。

CT₃放射性标记试剂可以为ICT₃(含有³H的碘甲烷衍生物)。该方法可以在溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)和碱例如碳酸铯或氢化钠存在下进行。

诊断组合物

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物特别适合于使α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)成像。在α-突触核蛋白聚集体方面，所述化合物特别适合于结合不同类型的α-突触核蛋白聚集体，包括但不限于路易体和/或路易神经突。成像可以在哺乳动物、优选在人中进行。成像优选体外成像、离体成像或体内成像。更优选地，成像为体内成像；甚至更优选地，成像优选脑成像。成像还可以为眼/视网膜成像。本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物特别适合用于诊断。

可以对哺乳动物、优选人进行诊断。所进行诊断的关注的组织可以为脑、中枢神经系统组织、眼组织(例如视网膜组织)或其他组织或体液，例如脑脊髓液 (CSF)。所述组织优选为脑组织。

由于其设计和结合特征，本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物适用于与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症和异常的诊断。本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物特别适合于α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的正电子发射断层摄影术。通常将牵涉α- 突触核蛋白聚集体的疾病列为突触核蛋白病(或α-突触核蛋白病)。本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物适用于诊断疾病、病症或异常，包括但不限于帕金森病(散发性、具有α-突触核蛋白突变的家族性或具有α-突触核蛋白以外的突变的家族性、单纯性自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、SNCA重复携带者、路易体痴呆(“单纯性”路易体痴呆)、阿尔茨海默病、散发性阿尔茨海默病、具有APP突变的家族性阿尔茨海默病、具有PS-1、PS-2或其他突变的家族性阿尔茨海默病、家族性英国痴呆、阿尔茨海默病的路易体变体和唐氏综合征中的正常衰老。具有神经元和神经胶质的α突触核蛋白聚集体的突触核蛋白病包括但不限于多系统萎缩症(MSA)(Shy-Drager综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)。可能具有α-突触核蛋白免疫反应性病变的其他疾病包括外伤性脑损伤、慢性创伤性脑病、tau病变(皮克病、额颞叶痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性和 C1型尼曼-皮克二氏病)、运动神经元病、肌萎缩侧索硬化(散发性、家族性和关岛的ALS-痴呆综合征)、神经轴性营养不良、1型脑铁蓄积性神经变性(哈-斯二氏综合征)、朊病毒疾病、运动失调性毛细血管扩张症、特发性口面运动障碍、亚急性硬化性全脑炎、戈谢病以及其他溶酶体贮积症(包括Kufor-Rakeb综合征和Sanfilippo综合征)和快速眼动(REM)睡眠行为障碍(Jellinger，MovDisord 2003，18增刊6，S2-12；Galvin等人JAMA Neurology 2001，58(2)，186-190； Kovari等人，Acta Neuropathol.2007，114(3)，295-8；Saito等人，J Neuropathol ExpNeurol.2004，63(4)，323-328；McKee等人，Brain，2013，136(Pt 1)，43-64； Puschmann等人，Parkinsonism Relat Disord 2012，18S1，S24-S27；Usenovic等人，J Neurosci.2012，32(12)，4240-4246；Winder-Rhodes等人，Mov Disord.2012， 27(2)，312-315；Ferman等人，J Int Neuropsychol Soc.2002，8(7)，907-914)。优选地，本发明的化合物适用于诊断帕金森病、多系统萎缩症、路易体痴呆、帕金森病痴呆、SNCA重复携带者或阿尔茨海默病，更优选帕金森病(PD)。

在个体中诊断与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常(例如帕金森病或其易感性)的方法中，该方法包含下列步骤：

a)向个体施用诊断有效量的本发明化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；

b)允许本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物分布入关注的组织(例如脑或其他组织或体液，例如脑脊髓液(CSF))；并且

c)使关注的组织成像，其中与正常对照结合水平相比，本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物与关注的组织的结合增加表明个体患有与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常或处于发生与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的风险中，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突。

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物可以用于使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的患者的任何样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)成像。这些化合物能够通过血脑屏障。因此，它们特别适合于使脑或外周器官如肠中以及体液如脑脊髓液(CSF)中的α-突触核蛋白聚集体、包括但不限于路易体和/或路易神经突成像。

在诊断应用中，本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，优选式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物优选以诊断组合物的形式施用，所述诊断组合物包含本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。在本发明中将″诊断组合物″定义为包含一种或多种本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的组合物，其形式适合于施用于患者，例如哺乳动物，例如人，并且适合用于诊断所述特定疾病、病症或异常。优选地，诊断组合物还包含生理学可接受的赋形剂、稀释剂或佐剂。施用优选如下所定义的进行。更优选地，通过注射作为水溶液的组合物进行。这类组合物可以任选地包含另外的成分，例如缓冲剂；药学上可接受的增溶剂(例如环糊精或表面活性剂，例如普流尼克、吐温或磷脂)；和药学上可接受的稳定剂或抗氧化剂(例如抗坏血酸、龙胆酸或对氨基苯甲酸)。本发明化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的剂量可以根据所施用的具体化合物、患者体重和本领域熟练临床医师显而易见的其他变量的不同而改变。

尽管可能的情况是本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物可以单独施用，但优选根据标准药学实践将它们配制成诊断组合物。因此，本发明还提供了诊断组合物，其包含诊断有效量的本发明化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物以及任选的至少一种药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂或佐剂。

药学上可接受的赋形剂为制药领域众所周知的，并且描述于例如 Remington′sPharmaceutical Sciences，第15版，Mack Publishing Co.，New Jersey(1975)中。可以根据预期的施用途径和标准药学实践来选择药用赋形剂。赋形剂在对其受者无害的意义上必须是可接受的。

可以在本发明的诊断组合物的制剂中使用的药学上有用的赋形剂、载体、佐剂和稀释剂可以包括例如溶剂，例如一元醇(例如乙醇、异丙醇)和多元醇(例如二醇)和食用油(诸如大豆油、椰子油、橄榄油、红花油、棉籽油)，油酯如油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、粘合剂、佐剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂、崩解剂、助流剂、润滑剂、缓冲剂、乳化剂、润湿剂、助悬剂、甜味剂、着色剂、矫味剂、包衣衣料、防腐剂、抗氧化剂、加工剂、药物递送调节剂和增强剂，例如磷酸钙、硬脂酸镁、滑石粉、单糖、二糖、淀粉、明胶、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、右旋糖、羟丙基-β-环糊精、聚乙烯吡咯烷酮、低熔点蜡和离子交换树脂。

本发明的化合物，优选式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)， (III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的施用(递送)途径包括但不限于以下中的一种或多种：静脉内、胃肠内、脊柱内、腹膜内、肌内、口服(例如片剂、胶囊或可摄取溶液)、局部、粘膜(例如用于吸入的鼻腔喷雾剂或气雾剂)、鼻部、胃肠外(例如通过可注射形式)、子宫内、眼内、真皮内、颅内、气管内、阴道内、脑室内、大脑内、皮下、眼部(包括玻璃体内或前房内)、透皮、直肠、口含、硬膜外和舌下。优选地，本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的施用(递送)途径为静脉内。

例如，所述化合物可以以片剂、胶囊、卵形物(ovule)、酏剂、溶液或混悬液的形式口服施用，其可以含有矫味剂或着色剂，用于即刻释放、延迟释放、改进释放、持续释放、脉动释放或受控释放应用。

片剂可以包含赋形剂如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙和甘氨酸，崩解剂如淀粉(优选玉米、马铃薯或木薯淀粉)、羟基乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠和某些复合硅酸盐，以及造粒粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、蔗糖、明胶和阿拉伯胶。另外，可以包括润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸、山嵛酸甘油酯和滑石份。相似类型的固体组合物也可用作明胶胶囊中的填充剂。在这方面，优选的赋形剂包括淀粉、纤维素、奶糖(乳糖)或高分子量聚乙二醇。用于水性混悬液和/或在酏剂中，可以将活性剂与各种甜味剂或矫味剂、着色剂或染料，与乳化剂和/或助悬剂以及与稀释剂如水、乙醇、丙二醇和甘油及其组合组合。

优选地，在诊断应用中，本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物通过胃肠外施用。如果本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物通过胃肠外施用，则这类施用的实例包括如下的一种或多种：静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内或皮下施用所述化合物；和/或通过使用输注技术。对于肠胃外施用，所述化合物最好以无菌水溶液的形式使用，其可以包含其他物质，例如足够的盐或葡萄糖以使溶液与血液等渗。如果必要，水溶液应适当缓冲(优选pH为3-9)。在无菌条件下制备合适的肠胃外制剂可通过本领域技术人员众所周知的标准制药技术容易地完成。

如所示的，本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物可以鼻内或通过吸入施用，并且方便地以干粉吸入器或气溶胶喷雾剂的形式从加压容器、泵、喷雾器或喷雾器递送，其中使用合适的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氢氟烷烃如1，1，1，2-四氟乙烷(HFA134AT)或1,1，1,2，3，3，3-七氟丙烷(HFA 227EA)、二氧化碳或其他合适的气体。在加压气雾剂的情况下，剂量单位可以通过提供递送计量量的阀来确定。加压容器、泵、喷雾器或喷雾器可以包含活性化合物的溶液或混悬液，例如使用乙醇和推进剂的混合物作为溶剂，其可以另外包含润滑剂，例如三油酸山梨坦。用于吸入器或吹入器的胶囊和药筒(例如由明胶制成)可以配制成包含化合物和合适的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物。

或者，本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物可以以栓剂或阴道栓剂的形式施用，或者其可以以凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、霜剂、软膏或扑粉的形式局部施用。本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物也可以通过皮肤或透皮施用，例如通过使用皮肤贴剂。

它们也可以通过肺或直肠途径施用。它们也可以通过眼部途径施用。对于眼科使用，可以将化合物配制成在等渗的、经调节pH的无菌盐水中的微粉化混悬液，或优选地，配制成在等渗的、经调节pH的无菌盐水中的溶液，任选地与防腐剂如苯扎氯铵组合。或者，可以将它们配制成软膏，例如凡士林膏。

对于局部施用于皮肤，可以将本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物配制成合适的软膏，其包含悬浮或溶解在例如与以下一种或多种的混合物中的活性化合物：矿物油、凡士林油、白凡士林、丙二醇、乳化蜡和水。或者，可以将它们配制成合适的洗剂或霜剂，悬浮或溶解在例如以下一种或多种的混合物中：矿物油、硬脂山梨坦、聚乙二醇、液体石蜡、聚山梨醇酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苄醇和水。

典型地，临床医师将确定最适合于个体的实际剂量。用于任何特定个体的具体剂量水平和给药频率可以变化，并且将取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时长、年龄、体重、一般健康状况、性别、膳食、施用方式和时间、排泄速率、药物组合、特定病症的严重程度和正在进行诊断的个体。

本发明的诊断组合物可以以本领域技术人员本身已知的方式生产，例如在Remington′s Pharmaceutical Sciences，第15版，Mack Publishing Co.，New Jersey(1975)中所述。

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物用作体外分析参比物或体外筛选工具。它们也用于体内诊断方法。

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物还可以以混合物的形式提供，该混合物包含本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物和至少一种化合物，其选自非本发明化合物的成像剂、药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂或佐剂。非本发明化合物的成像剂优选以诊断有效量存在。更优选地，非本发明的化合物的成像剂为Aβ或Tau成像剂。

患者中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常或与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的易感性的诊断可以通过检测本发明化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物与样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的特异性结合来实现，包括下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或身体区域接触本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)，

(b)允许本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)，形成化合物/(α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体或路易神经突)复合物(下文的″化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物″，缩写为″化合物/蛋白质聚集体复合物″)，

(c)检测化合物/蛋白质聚集体复合物的形成，

(d)任选地使化合物/蛋白质聚集体复合物的存在或不存在与样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性；并且

(e)任选地比较化合物/蛋白质聚集体复合物的量与正常对照值，其中与正常对照值相比化合物/蛋白质聚集体复合物的量增加可以表明患者患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常或处于发生它们的风险中。

可以通过合适的方法使本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物与疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或身体区域接触。在体外方法中，可以简单地混合本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物和液体样品。在体内测试中，典型地可以将本发明的化合物或可检测标记的化合物、其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物通过任何合适的方式施用于患者。这些施用途径包括但不限于以下中的一种或多种：口服(例如作为片剂、胶囊或作为可摄取溶液)、局部、粘膜(例如作为用于吸入的鼻喷雾剂或气雾剂)、鼻部、肠胃外(例如通过可注射形式)、胃肠、脊柱内、腹膜内、肌内、静脉内、子宫内、眼内、皮内、颅内、气管内、阴道内、脑室内、脑内、皮下、眼部(包括玻璃体内或前房内)、透皮、直肠、口含、硬膜外和舌下。在一些情况下，可以优选肠胃外施用。

在样品或特定身体部位或身体区域已经与本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物接触后，使所述化合物与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合。结合所需的时间期限将取决于测试的类型(例如，体外或体内)，并且可以由本领域技术人员通过常规实验确定。

随后可以通过任何适当的方法检测已经与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物。所选择的具体方法将取决于所选择的可检测标记。可能的方法的实例包括但不限于荧光成像技术或核成像技术，例如正电子发射断层摄影术(PET)、单光子发射型计算机体层摄影术(SPECT)、磁共振成像(MRI)和对比增强磁共振成像(MRI)。这些已经被描述并且使得淀粉样生物标志物能够可视化。荧光成像技术和/或核成像技术可以用于监测和/或可视化样品或特定身体部位或身体区域内可检测标记的化合物的分布。

然后任选地将化合物/蛋白质聚集体复合物的存在或不存在与样品或特定身体部位或区域中α-突触核蛋白聚集体的存在或不存在之间建立相关性，所述α- 突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突。最终，可以将化合物/ 蛋白质聚集体复合物的量与在健康个体的样品或特定身体部位或身体区域中测定的正常对照值进行比较，其中与正常对照值相比，化合物/蛋白质聚集体复合物的量的增加可以表明患者患有与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常或处于发生与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的风险中，所述α- 突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突。

本发明还涉及测定组织和/或体液中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的量的方法。该方法包含下列步骤：

(a)提供代表所研究的组织和/或体液的样品；

(b)用本发明的化合物测试样品中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在；

(c)测定与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 结合的化合物的量；并且

(d)计算组织和/或体液中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/ 或路易神经突)的量。

可以用本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物测试样品中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在，通过使样品与本发明的化合物接触，使本发明的化合物与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合以形成化合物/蛋白质聚集体复合物，并且如上所述检测化合物/蛋白质聚集体复合物的形成来进行。

监测患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的患者中的最小残留疾病、病症或异常，所述患者已经用具有本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的药物治疗，可以通过下列步骤实现：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或身体区域接触本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；

(b)使所述化合物结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)，形成化合物/蛋白质聚集体复合物；

(c)检测所述化合物/蛋白质聚集体复合物的形成；

(d)任选地使所述化合物/蛋白质聚集体复合物的存在或不存在与样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性；并且

(e)任选地比较所述化合物/蛋白质聚集体复合物的量与正常对照值，其中所述聚集体的量比正常对照值增加可以表明患者仍然患有最小残留疾病、病症或异常。

上面已经解释了如何进行步骤(a)至(e)。

在用于监测微小残留疾病、病症或异常的方法中，该方法可以在步骤(a)之前进一步包含步骤(i)至(vi)：

(i)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 的样品或特定身体部位或身体区域接触本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，所述化合物特异性地结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)；

(ii)使化合物与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合，形成化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物；

(iii)检测所述化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物的形成；

(iv)使所述化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物的存在或不存在与样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性；

(v)任选地比较所述化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和 /或路易神经突))复合物的量与正常对照值；并且

(vi)用药物治疗患者。

任选地，所述方法在步骤(d)或步骤(e)之后还可以包含步骤(A)：

(A)比较步骤(iv)中测定的所述化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物的量与步骤(d)中测定的所述化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物的量。

为了随时间监测微小残留疾病、病症或异常，监测微小残留疾病、病症或异常的方法的步骤(a)至(c)和任选的步骤(d)和(e)可以重复一次或多次。

在用于监测微小残留疾病、病症或异常的方法中，所述化合物/蛋白质聚集体复合物的量可以任选地在治疗期间的各个时间点进行比较，例如，在治疗开始之前和之后或在治疗开始之后的各个时间点。所述化合物/蛋白质聚集体复合物的量的变化、尤其是减少可以指示残留疾病、病症或异常正在减少。

预测患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常并用药物治疗的患者的响应性可以通过下列步骤实现：

(b)允许所述化合物结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)，形成化合物/蛋白质聚集体复合物；

(c)检测所述化合物/蛋白质聚集体复合物的形成；

(e)任选地比较所述化合物/蛋白质聚集体复合物的量与正常对照值。

上面已经解释了如何进行步骤(a)至(e)。

在预测响应性的方法中，该方法在步骤(a)之前还可以包含步骤(i)至(vi)：

(iii)检测所述化合物/α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)复合物的形成；

(iv)使所述化合物/α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)复合物的存在或不存在与样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性；

(v)任选地比较所述化合物//(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))的量与正常对照值；并且

(vi)用药物治疗患者。

(A)比较步骤(iv)中测定的化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物的量与步骤(d)中测定的化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物的量。

为了确定随时间的响应性，预测响应性的方法的步骤(a)至(c)和任选的步骤 (d)和(e)可以重复一次或多次。

在用于预测反应性的方法中，可以任选地在治疗期间的各个时间点比较化合物/蛋白质聚集体复合物的量，例如，在治疗开始之前和之后或在治疗开始之后的各个时间点。所述化合物/蛋白质聚集体复合物的量的变化、特别是减少可以表明患者对相应的治疗具有高响应潜力。

任选地，诊断组合物可以在手术操作(例如深部脑刺激(DBS))和非侵入性脑刺激(例如重复经颅磁刺激(rTMS))之前、期间和之后使用，用于在此类操作之前、期间和之后可视化α-突触核蛋白聚集体。手术技术(包括DBS)在目前最佳使用的医学疗法的基础上改善PD的晚期症状。在过去20年中，RTMS已被密切检查为PD的可能治疗(Ying-hui Chou等人JAMA Neurol.2015年4月1日； 72(4)：432-440)。

在本发明的另一个实施方案中，诊断组合物可以用于采集用于监测患有与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的患者中的残留疾病、病症或异常的数据的方法中，所述患者患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和 /或路易神经突)相关的疾病、病症或异常，该患者已经用手术操作或非侵入性脑刺激程序操作治疗，其中所述方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或身体区域接触本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，所述化合物特异性地结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)；

(b)使化合物与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合，形成化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物；

(c)检测所述化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突))复合物的形成；

(d)任选地使所述化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/ 或路易神经突))复合物的存在或不存在与样品或特定身体部位或身体区域中α- 突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性；并且

(e)任选地比较所述化合物/(α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和 /或路易神经突))复合物的量与正常对照值。

应当理解，如本文所述的术语“监测微小残留疾病”涉及监测疾病的演变。例如，监测患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 相关的疾病、病症或异常的患者中疾病、病症或异常的演变。

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物或其前体也可以掺入用于检测α-突触核蛋白蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的测试试剂盒中。测试试剂盒典型地包含容纳一种或多种本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物或其前体的容器，以及使用所述化合物用于结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)以形成化合物/蛋白质聚集体复合物和检测所述化合物/蛋白质聚集体复合物的形成的说明书，使得所述化合物/蛋白质聚集体复合物的存在或不存在与所述α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性。

术语“测试试剂盒”通常是指本领域已知的任何诊断试剂盒。更具体地，后一术语是指如Zrein等人在Clin.Diagn.Lab.Immunol.，1998，5，45-49中所示的诊断试剂盒。

可检测标记的本发明化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物，优选用¹⁸F标记的式(III-F)化合物的剂量将根据待施用的确切化合物、患者的体重、样品的大小和类型以及对于本领域技术人员显而易见的其他变量的不同而变化。通常，该剂量可以优选在0.001μg/kg-10 μg/kg，优选0.01μg/kg-1.0μg/kg的范围内。放射性剂量可以为例如100-600 MBq，更优选150-450MBq。

在另一个实施方案中，本发明提供了使样品或特定身体部位或特定身体区域、特别是脑中或取自患者脑中的样品中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常成像的方法，该方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或身体区域接触式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、 (IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；

(c)用成像系统使所述样品、特定身体部位或身体区域成像。

在另一个实施方案中，本发明提供了测定样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的量的方法，该方法包含下列步骤：

(d)测定与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 结合的化合物的量；并且

(e)任选地计算样品、特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体 (包括但不限于路易体和/或路易神经突)的量。

在另一个实施方案中，本发明提供了诊断与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的方法，该方法包含下列步骤：

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 结合的化合物；和

(d)在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/ 或路易神经突)相关的疾病、病症或异常之间建立相关性。

在另一个实施方案中，本发明提供了采集用于诊断与α-突触核蛋白聚集体 (包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的数据的方法，该方法包含下列步骤：

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突) 结合的化合物；且

(d)任选地，在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性。

在另一个实施方案中，本发明提供了采集用于测定与α-突触核蛋白聚集体 (包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的易感性的数据的方法，该方法包含下列步骤：

如果与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量高于健康/参考个体的正常对照值，则这表明患者患有与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常或处于发生与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的风险中。特别地，如果与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量高于在没有显示神经变性疾病的临床证据的人中预期的量，则可以推定患者具有与α-突触核蛋白聚集体或突触核蛋白病相关的疾病、病症或异常的易感性。

在另一个实施方案中，本发明提供了采集用于预后与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的数据的方法，其中该方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品、特定身体部位或身体区域与接触式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、 (IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性；并且

所述疾病、病症或异常的进展和/或恢复的前景(例如，概率、持续时间和/ 或程度)可以由医疗从业者基于与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的存在或不存在、与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量等来估计。如果需要，可以随时间重复步骤(a)至(c)和任选的步骤(d)(如果存在的话)，以监测疾病、病症或异常的进展，从而允许更可靠的估计。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种采集用于监测患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的患者的疾病进展的数据的方法，该方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品、特定身体部位或身体区域与接触式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、 (IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或，其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；

典型地，所述患者正在或已经经历与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的治疗，或者正在/已经经历突触核蛋白病的治疗。特别地，治疗可以涉及施用适合于治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的药物。

在另一个实施方案中，本发明提供了采集用于监测与患者中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的进展的数据的方法，该方法包含下列步骤：

典型地，所述患者正在或已经经历与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的治疗，或者正在或已经经历突触核蛋白病的治疗。特别地，治疗可以涉及施用适合于治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的药物。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种采集用于预测患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的患者对与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的治疗的响应性的方法，该方法包含下列步骤：

典型地，患者正在或已经经历与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的治疗，或者正在或已经经历突触核蛋白病的治疗。特别地，治疗可以涉及施用适合于治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的药物。

如果与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量随时间减少，则可以推定患者对治疗有响应。如果与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量基本上恒定或随时间增加，则可以推定患者对治疗无响应。

或者，可以通过确定与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量来估计响应性。可以将与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量与对照值如正常对照值、临床前对照值或临床对照值进行比较。或者，对照值可以指已知对某种治疗有反应的个体的对照值，或者对照值可以指已知对某种治疗无反应的个体的对照值。关于响应性的结果可以是对某种疗法“有响应的”、对某种疗法“无响应的”或对某种疗法“响应未确定的”。对于各个患者，对治疗的响应可能是不同的。

在另一个实施方案中，本发明提供了如本文所定义的方法，其中任选地使与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性的步骤包含：

-测定与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的量；

-使与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的量与样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的量建立相关性；并且

-任选地比较样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的量与健康对照个体中的正常对照值。

对照值可以为例如正常对照值、临床前对照值和/或临床对照值。

“健康对照个体”或“健康志愿者(HV)个体”是未显示神经退行性疾病的临床证据的人。如本文在“生物测定描述和相应结果”段落的第15节“人体首次(FIH) 研究”中所定义的选择人。

如果在任何上述总结的方法中，与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物的量高于正常对照值，则可以预期患者患有或可能患有与α-突触核蛋白聚集体或突触核蛋白病相关的疾病、病症或异常。

本发明的任何化合物可以用于上文概述的方法中。优选地，如本文所公开的可检测标记的本发明化合物用于上文概述的方法中。

特定身体部位或身体区域优选地是哺乳动物的，更优选地是人的，包括疑似包含α-突触核蛋白聚集体的患者的全身或部分身体区域或身体部位。

样品可以选自疑似包含α-突触核蛋白聚集体的组织或体液，样品从患者获得。优选地，所述组织选自脑组织。体液的实例包括脑脊液(CSF)或血液。样品可以从哺乳动物，更优选人获得。优选地，样品是来自患者的体外样品。

在体内方法中，通过向患者施用有效量的本发明化合物，可以使特定身体部位或身体区域与本发明化合物接触。本发明化合物的有效量是合适的量，其允许使用所选择的分析技术确定特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在。

使化合物与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的步骤包括允许本发明的化合物与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合足够的时间。结合所需的时间量将取决于测试的类型(例如，体外或体内)，并且可以由本领域技术人员通过常规实验确定。在体内方法中，时间量将取决于化合物到达疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的特定身体部位或身体区域所需的时间。时间量不应过长以避免本发明化合物的清除(washout)和/或代谢。

对检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的方法没有特别限制，而是取决于可检测标记、样品类型、特定身体部位或身体区域以及该方法是体外还是体内方法等。可能的检测方法包括但不限于荧光成像技术或核成像技术，例如正电子发射断层摄影术(PET)、单光子发射型计算机体层摄影(SPECT)、磁共振成像(MRI)和对比增强磁共振成像(MRI)。荧光成像技术和/或核成像技术可以用于监测和/或可视化本发明化合物在样品或体内的分布。成像系统照此提供如存在于测试样品、测试的特定身体部位或测试的身体区域中的结合的可检测标记(例如放射性同位素，特别是正电子发射体或γ发射体)的图像。优选地，通过成像装置如PET或SPECT扫描仪检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物。

与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的量可以通过可以通过视觉或定量分析来确定，例如使用PET扫描图像。

在任何上述方法中，步骤(a)至(c)和任选的步骤(d)(如果存在)可以重复至少一次。步骤的重复在采集用于预后的数据的方法、采集用于监测疾病进展的数据的方法、采集用于监测进展的数据的方法和采集用于预测响应性的数据的方法中特别有用。在这些方法中，随时间监测患者并在经过一定时间期限后重复上述步骤可能是有利的。重复上述步骤之前的时间间隔可以由临床医师根据与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)或突触核蛋白病相关的疾病、病症或异常的严重程度的不同来确定。

在另一个方面，本发明涉及使个体中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常成像的方法，该方法包含下列步骤：

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体结合的化合物，包括但不限于路易体和/ 或路易神经突。

(b)使个体的脑成像。

当所述化合物结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)时，应使个体的脑成像。然后在个体的脑中使结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的化合物成像。

在另一个方面，本发明涉及对个体组织中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)进行正电子发射断层摄影术(PET)成像的方法，该方法包含下列步骤：

(b)使所述化合物穿透入个体的组织；并且

(c)采集个体组织的正电子发射断层摄影术(PET)图像；

其中所述组织为中枢神经系统(CNS)组织、眼或脑组织的组织，优选其中所述组织为脑组织。

当所述化合物穿透入组织且该化合物结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)时，应进行PET成像。

在另一个方面，本发明涉及检测与个体的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的神经系统疾病、病症或异常的方法，该方法包含下列步骤：

(c)测定所述化合物的放射性信号，所述化合物与α-突触核蛋白聚集体 (包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合。

当包含至少一个放射性标记的原子(例如³H、²H或¹⁸F)的本发明可检测标记的化合物结合α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)时，观察到如本文提及的放射性信号。

在另一个方面，本发明涉及用于检测和/或定量个体组织中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的方法(例如体内或体外方法)，该方法包含下列步骤：

(a)向个体使所述组织接触式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；

(c)使用正电子发射断层摄影术检测和/或定量与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物。

在另一个方面，本发明涉及个体脑的诊断成像的方法，该方法包含下列步骤：

(b)使用正电子发射断层摄影术获得个体的脑图像。

在本发明的方法中，式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物典型地以可检测量施用，即可以用于检测相应方法中的化合物的装置可以检测的量。对该量没有特别限制，但取决于式(I)的化合物、可检测标记的类型、相应分析方法的灵敏度和相应装置。该量可以由本领域技术人员适当选择。

放射性药物制剂

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，优选式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、 (IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物还可以用于制备放射性药物制剂的试剂盒。由于放射性衰变，所以放射性药物通常在使用前即刻制备。该试剂盒典型地包含本发明化合物的前体或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，以及与所述前体反应的试剂，以便将放射性标记引入本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。本发明化合物的前体或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物可以例如为具有式(IV-F)、(IV-H)或(IV-J)的化合物。所述试剂可以为引入放射性标记例如¹⁸F或³H的试剂。

药物组合物

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物可以用于治疗、预防或缓解与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常。

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，优选式(I)的化合物适合于治疗、预防或缓解与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常。将牵涉α-突触核蛋白聚集体的疾病通常列为突触核蛋白病(或α-突触核蛋白病)。本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物适合于治疗、预防或缓解疾病、病症或异常，包括但不限于帕金森病(散发性、具有α-突触核蛋白突变的家族性或具有α-突触核蛋白以外的突变的家族性、单纯性自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、SNCA重复携带者、路易体痴呆(“单纯性”路易体痴呆)、阿尔茨海默病、散发性阿尔茨海默病、具有APP突变的家族性阿尔茨海默病、具有PS-1、 PS-2或其他突变的家族性阿尔茨海默病、家族性英国痴呆、阿尔茨海默病的路易体变体和唐氏综合征中的正常衰老。具有神经元和神经胶质的α突触核蛋白聚集体的突触核蛋白病包括但不限于多系统萎缩症(MSA)(Shy-Drager综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)。可能具有α-突触核蛋白免疫响应性病变的其他疾病包括创伤性脑损伤、慢性损伤性脑病、tau病变(皮克病、额颞叶痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性和C1型尼曼-皮克二氏病)、运动神经元病、肌萎缩性侧索硬化(散发性、家族性和关岛的ALS-痴呆综合征)、神经轴性营养不良、伴有1型脑铁积累的神经变性(哈-斯二氏综合征)、朊病毒病、运动失调性毛细血管扩张症、特发性口面运动障碍、亚急性硬化性全脑炎、戈谢病以及其他溶酶体贮积症(包括Kufor-Rakeb综合征和Sanfilippo综合征)和眼速动期(REM)睡眠行为障碍。(Jellinger，Mov Disord2003，18增刊6，S2-12； Galvin等人JAMA Neurology 2001，58(2)，186-190；Kovari等人，Acta Neuropathol.2007，114(3)，295-8；Saito等人，J Neuropathol Exp Neurol.2004，63(4)，323-328；McKee等人，Brain，2013，136(Pt 1)，43-64；Puschmann等人，Parkinsonism Relat Disord 2012，18S1，S24-S27；Usenovic等人，J Neurosci. 2012，32(12)，4240-4246；Winder-Rhodes等人，Mov Disord.2012，27(2)，312-315； Ferman等人，JInt Neuropsychol Soc.2002，8(7)，907-914)。优选地，本发明的化合物适合于治疗、预防或缓解帕金森病(PD)。

在药物应用中，优选以包含本发明化合物的药物组合物的形式施用本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。在本发明中将″药物组合物″定义为包含本发明的一种或多种化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的组合物，以适合于施用于患者，例如哺乳动物，例如人，且适合于治疗、缓解或预防所述的具体疾病、病症或异常的形式施用。优选地，药物组合物还包含生理学上可接受的载体、稀释剂、佐剂或赋形剂。本发明化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的剂量可以根据所施用的具体化合物、患者体重和本领域临床熟练医师显而易见的其他变量的不同而改变。

尽管可以单独地施用本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，但是优选根据标准制药实践将其配制成药物组合物。因此，本发明还提供了药物组合物，其包含治疗有效量的式(I)的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物以及任选的至少一种药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂或佐剂。

药学上可接受的赋形剂为制药领域众所周知的，并且，例如，描述在 Remington′sPharmaceutical Sciences，第15版，Mack Publishing Co.，New Jersey(1975)中。可以根据预期的施用途径和标准制药实践选择药用赋形剂。赋形剂必须是在对其受者无害的意义上是可接受的。

可以用于配制本发明的药物组合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物的药学上有用的赋形剂可以包含，例如载体、溶媒、稀释剂、溶剂如一元醇如乙醇、异丙醇和多元醇如二醇和食用油如大豆油、椰子油、橄榄油、红花油、棉籽油、油性酯如油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、粘合剂、佐剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂、崩解剂、助流剂、润滑剂、缓冲剂、乳化剂、润湿剂、助悬剂、甜味剂、着色剂、香味剂、包衣衣料、防腐剂、抗氧化剂、加工助剂、药物递送改良剂和增强剂，例如磷酸钙、硬脂酸镁、滑石粉、单糖、二糖、淀粉、明胶、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、右旋糖、羟丙基-β-环糊精、聚乙烯吡咯烷酮、低熔点蜡和离子交换树脂。

本发明的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物及其前体可以通过如下方案中所示的一般方法之一合成。这些方法仅为示例性目的给出，而不应视为限制。

缩写	含义
		DMFDMA	N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛
SNAr	亲核芳香取代
		CsF	氟化铯
DMSO	二甲亚砜
		NBS	N-溴琥珀酰亚胺
LG	离去基团
		WFI	注射用水
HPLC	高效液相色谱法
		SPE	固相萃取

用于制备本发明化合物和前体的一般合成方案：

方案1

可以使商购的肼与适合的酮缩合，得到相应的腙。使用DMF/DMA使粗腙进行环化，得到中间体A。可以使用适合的亲核试剂在适合的溶剂和碱中进行 SNAr，得到中间体B。或者，可以施加热条件，不使用金属催化剂。使用适合的条件脱保护可以得到中间体C。最终，可以使用钯催化的酰胺化或Ullmann 反应使中间体C进一步官能化，得到式(I)或其亚式(例如(IIa)、(IIb)、(IIIa)、 (IIIb)、(IIIc)、(III-F)、(III-H))的化合物。在本实例中，原料包含R⁰为H。上述一般方案适用于其中R⁰为C₁-C₄烷基的原料。

方案1A

一种可替代方法(方案1A)包含使中间体A脱保护，然后与合适的亲核试剂进行SNAr反应，该反应优选在DMSO中在CsF存在下进行。中间体C和D 可以进一步官能化，优选使用铜(I)(Ullmann反应)在碱和溶剂的存在下，得到式 (IIIa)和中间体E。最终，可以将LG引入中间体E中，得到式(IV-F)。在本实例中，原料包含R⁰为H。上述一般方案适用于其中R⁰为C₁-C₄烷基的原料。

方案1B

按照与一般方案1或1A中所述相同的优选条件，在方案1B中描述了一般方法。

可以通过在合适的溶剂中在加热下用羟基吡咯烷处理中间体A来获得¹⁸F- 前体。R⁴基团可以通过钯催化的酰胺化或Ullmann反应引入。最终，可以使用标准条件将醇中间体E修饰为离去基团，得到式(IV-F)的化合物。

³H-前体可以通过钯催化的酰胺化或Ullmann反应将合适的R⁴基团引入中间体C中而获得。最终，在合适的溶剂中使用例如NBS来卤化吡啶，可以得到式(IV-H)的化合物。

¹⁸F-标记的本发明化合物的一般合成

可以通过使如下所述的前体化合物与¹⁸F-氟化剂反应，使得前体化合物中包含的LG被¹⁸F替代，从而制备¹⁸F标记的具有式(I)的化合物。

可以用于¹⁸F-氟化的试剂、溶剂和条件是本领域技术人员众所周知的(L.Cai，S.Lu，V.Pike，Eur.J.Org.Chem 2008，2853-2873；J.Fluorine Chem.，27 (1985)：177-191；Coenen，Fluorine-18Labeling Methods：Features and Possibilities 0f BasicReactions，(2006)，：Schubiger P.A.，Friebe M.，Lehmann L.， (eds)，PET-Chemistry-The Driving Force in Molecular Imaging.Springer， Berlin Heidelberg，pp.15-50)。优选地，用于¹⁸F-氟化的溶剂为DMF、DMSO、乙腈、DMA或其混合物，优选地，所述溶剂为乙腈或DMSO。

可以使用任意适合的¹⁸F-氟化剂。典型实例包括H¹⁸F、碱金属或碱土金属¹⁸F-氟化物(例如K¹⁸F、Rb¹⁸F、Cs¹⁸F和Na¹⁸F)。任选地，¹⁸F-氟化剂可以与螯合剂联用，例如穴状配体(例如：4，7，13，16，21，24-六氧杂-1，10-二氮杂双环[8.8.8]- 二十六烷-

)或冠醚(例如：18-冠-6)。或者，¹⁸F-氟化剂可以为¹⁸F的四烷基铵盐或四烷基鏻盐；例如¹⁸F的四(C_1-6烷基)铵盐或¹⁸F的四(C_1-6烷基)鏻盐。优选地，¹⁸F-氟化剂为K¹⁸F、H¹⁸F、Cs¹⁸F、Na¹⁸F、¹⁸F的四(C_1-6烷基)铵盐、 kryptofix[222]¹⁸F或氟化四丁基铵[¹⁸F]。

尽管以上关于¹⁸F作为放射性标记显示了反应，但是可以按照类似的方法引入其他放射性标记。

通过以下实施例举例说明本发明，然而，这些实施例不应被解释为限制。

实施例

所有试剂和溶剂均从商业来源获得，无需进一步纯化即可使用。在Bruker DRX-400MHz NMR光谱仪、Bruker AV-400MHz NMR光谱仪或SpinSolve 80MHz NMR光谱仪上在氘代溶剂中记录质子(¹H)光谱。在Advion CMS质谱仪或具有光电二极管阵列检测器的UPLCH-Class Plus和来自Waters的QDA质谱仪上记录质谱(MS)。使用硅胶(Fluka：硅胶60，0.063-0.2mm)和如具体实施例中所示的合适溶剂进行色谱法。使用Biotage Isolera One快速纯化系统，应用 HP-SIL或KP-NH SNAP柱(Biotage)和具体实施例中所示的溶剂梯度进行快速纯化。薄层色谱法(TLC)在具有UV检测的硅胶板上进行。

制备实施例1

步骤A：

将2-溴-5-肼基吡啶(3.21g，17.07mmol)和2，4-二氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.40g，17.07mmol)在乙醇(150mL)中的混悬液回流3h，通过TLC监测。减压浓缩粗产物，用二氯甲烷和水稀释。分离各层，用二氯甲烷将水层萃取2次。用Na₂SO₄干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。通过快速色谱法(二氧化硅，50g 柱，60-80％乙酸乙酯的庚烷溶液)纯化粗产物，得到(E)-4-(2-(6-溴吡啶-3-基)肼亚基)-2-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，为棕色固体(4.97g，79％).¹H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ＝9.22(s，1H)，8.41(s，1H)，7.89(d，1H)，7.40(d，1H)，7.11(dd，1H)， 4.57(s，1H)，4.30(s，2H)，1.45(s，9H).MS：369.06[M+H]⁺

步骤B：

将来自步骤A的化合物(3.9g，10.56mmol)在1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(80mL)中在50℃搅拌3h 15min。将该反应混合物浓缩至～10mL，加入乙醇。过滤固体，用少量乙醇洗涤，得到2-(6-溴吡啶-3-基)-4-氧代-4，6-二氢吡咯并[3，4-c] 吡唑-5(2H)-甲酸叔丁酯，为浅棕色粉末(2.30g，57％).¹H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ＝9.20(s，1H)，9.00(d，1H)，8.28(dd，1H)，7.89(d，1H)，4.84(s，2H)，1.53(s，9H).MS：324.83[M-tBu⁺H]⁺

制备实施例1A-1H

按照如制备实施例1中所述的方法，使用1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺或 N，N-二甲基乙酰胺二甲基乙缩醛和适合的腙制备下列制备实施例。

制备实施例A

将制备实施例1(1000mg，2.64mmol)在4M HCl的二噁烷溶液(37mL)中在室温搅拌1h 45min。减压蒸发溶剂，将固体溶于二氯甲烷。加入饱和NaHCO₃溶液，用二氯甲烷将水相萃取2次。过滤合并的有机层，得到2-(6-溴吡啶-3- 基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮，为浅褐色固体。(682mg，93％).¹H NMR(80MHz，DMSO-d6)δ8.96(d，2H)，8.37-8.14(m，2H)，7.83(d，IH)，4.39 (s，2H).MS：280.95[M+H]⁺

制各实施例A1-A6

按照如制备实施例A中所述的方法制备下列制备实施例。

制备实施例2

在氩气气氛中在烧瓶中，将乙酸钯(II)(41.4mg，0.185mmol)和xantphos (320mg，0.554mmol)混合在1，4-二噁烷(18mL)中，用预热块在100℃加热几秒钟，形成pd-xantphos复合物。加入(R)-3-氟吡咯烷盐酸盐(348mg，2.77mmol)、碳酸铯(1804mg，5.54mmol)和制备实施例1(700mg，1.846mmol)。给烧瓶脱气，充氩气3次，将该反应混合物在120℃加热30min。在室温冷却该反应混合物，将残余物溶于乙酸乙酯和水。分离各相，将水相萃取2次。合并有机层，用Na₂SO₄干燥，蒸发。通过快速色谱法纯化产物(二氧化硅，二氧化硅25g柱，0-60％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液)，得到(R)-2-(6-(3-氟吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)-4-氧代-4，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-5(2H)-甲酸叔丁酯，为白色固体(200.5mg，28％).

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝8.92(s，1H)，8.60(d，1H)，8.01(dd，1H)，6.67(d，1H)，5.46(d，1H)，4.80(s，2H)，3.86-3.57(m，2H)，3.54-3.44(m，2H)， 2.36-2.12(m，2H)，1.53(s，9H).

MS：388.15[M+H]⁺

制备实施例3-3D

按照如制备实施例2中所述的Pd-偶联方法，使用下表1a中所示的卤代原料和适合的胺制备下列制备实施例。

表1a：

制备实施例4

在微波小瓶中，将制备实施例1(250mg，0.659mmol)和(S)-吡咯烷-3-醇(172 mg，1.978mmol)混合在乙醇(10mL)中。在150℃用微波将小瓶照射30分钟。再加入(S)-吡咯烷-3-醇(172mg，1.978mmol)，将该反应混合物在150℃再照射45分钟1次。过滤该反应混合物，用乙醇洗涤，得到(S)-2-(6-(3-羟基吡咯烷-1- 基)吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮，为白色固体(83.5mg，44.4 ％).¹H NMR(80MHz，DMSO-d6)δ＝8.60(s，1H)，8.51(d，1H)，8.07(s，1H)，7.92 (dd，1H)，6.56(d，1H)，4.97(d，1H)，4.34(s，3H)，3.69-3.37(m，4H)，2.24-1.80 (m，2H).MS：286.05[M+H]⁺

制各实施例5

将制备实施例2(160mg，0.413mmol)在4M HCl的二噁烷溶液(10mL)中在RT搅拌3h30。减压蒸发溶剂，将固体溶于二氯甲烷。加入饱和NaHCO₃溶液，用二氯甲烷将水相萃取2次。用Na₂SO₄干燥合并的有机层，过滤，浓缩至干，得到(R)-2-(6-(3-氟吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)- 酮，为白色固体(101.5mg，86％).¹H NMR(80MHz，DMSO-d6)δ＝8.62(s，1H)， 8.55(d，1H)，7.96(dd，1H)，6.63(d，1H)，5.75(s，1H)，4.34(s，2H)，3.92-3.37(m， 4H)，2.45-1.78(m，2H).MS：287.80[M+H]⁺

可选的制备实施例5

在氩气气氛中在小瓶中，将制备实施例A(400mg，0.1.433mmol)、(R)-3- 氟吡咯烷盐酸盐(720mg，5.73mmol)和氟化铯(1306mg，8.60mmol)混合在干 DMSO(4mL)中。用氩气吹扫该反应混合物，在120℃搅拌6h 30min。冷却该反应混合物，倾入冷水(用冰浴预冷却)。过滤得到的溶液，用水冲洗固体。1mL 异丙醇用于在玻璃釉料中直接研磨固体，干燥固体，得到产物，为浅褐色固体(287 mg，0.998mmol，70％).¹H NMR(80MHz，DMSO-d6)δ8.63(s，1H)，8.55(d，1H)， 8.15-7.79(m，2H)，6.64(d，1H)，5.46(d，IH)，4.34(s，2H)，3.96-3.40(m，4H)，2.28-1.56(m，2H).MS：288.11[M+H]⁺

可选的制备实施例4-4K

按照如可选的制备实施例5中所述的SNAr方法，使用下表1b中所示的适合的胺制备下列制备实施例。

表1b：

制备实施例6-6D

按照制备实施例5的脱保护方法，制备下列制备实施例。

表2：

制备实施例7

在氩气气氛下在小瓶中将乙酸钯(II)(13.14mg，0.059mmol)和xantphos(50.8mg，0.088mmol)混合物1，4-二噁烷(3mL)中，用氩气脱气，在100℃在预热块中加热几秒钟，形成pd-xantphos复合物。然后加入制备实施例4(83.5mg， 0.293mmol)、3-碘吡啶(66.0mg，0.322mmol)和碳酸铯(286mg，0.878mmol)，将混合物用氩气脱气，在100℃加热45min。过滤该反应混合物，用乙酸乙酯洗涤。回收滤液，蒸发得到产物，为黄色树胶状固体(134.5mg，0，371mmol，定量).

¹H NMR(80MHz，DMSO-d6)δ＝9.04(d，1H)，8.83(s，1H)，8.57(d，1H)， 8.43-8.13(m，2H)，7.96(dd，1H)，7.44(dd，1H)，6.58(d，1H)，5.08(s，2H)，4.99(d， 1H)，4.42(d，1H)，3.64-3.40(m，4H)，2.17-1.75(m，2H).MS：363.08[M+H]⁺

制备实施例8

按照如制备实施例7中所述的Pd-偶联法，使用下表3中所示的酰胺原料和适当卤代杂芳基制备下列制备实施例。

表3：

制备实施例9

步骤A

在氩气气氛中，向2-(6-溴吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮(0.5g，1.79mol)在二噁烷(20ml)中的溶液中加入在H₂O(0.2ml)中的4，4，5，5-四甲基，-2-(丙-1-烯-2-基)-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(0.451g，2.7mmol)、[(dppf)PdCl2] (146mg，0.179mmol)和Cs₂CO₃(1.16g，3.58mmol)。将该混合物在80℃加热2h。冷却该混合物，高度真空蒸发溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯，过滤固体。用水洗涤过滤残余物，干燥，得到产物0.450g.MS：241.1[M+H]⁺

步骤B

向2-(6-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮(1g， 4.16mmol)在MeOH(75mL)中的溶液中加入Pd/C(100mg，5％)。将该混合物在室温在H₂(15psi)气氛中搅拌12小时。完成时，过滤反应浆液，浓缩滤液，得到2-(6-(丙-2-基)吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮(0.85g).MS：243.2[M+H]⁺

制备实施例10

按照如可选的制备实施例9中所述的方法，使用下表3b中所示的适合的硼酸酯制备下列制备实施例。

表3b：

制备实施例11

在RT将在0.4mL DMF中的2-丙醇(50μL，0.7176mmol)加入到氢化钠(36 mg/60％在矿物油中的溶液，0.9mmol)在2mL DMF中的混悬液中。将该混合物搅拌30分钟，然后在60℃加入到搅拌的2-(6-溴吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c] 吡唑-4(2H)-酮(100mg，0.358mmol)在2mL DMF中的溶液中。将该反应混合物在60℃加热20小时。冷却至RT后，加入水和乙酸乙酯，分离各层。用乙酸乙酯萃取水层，合并有机层，用MgSO₄干燥，过滤，减压浓缩，得到2-(6-异丙氧基吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮(0.16g，35％)：MS：259.2 [M+H]⁺

制备实施例12

在氮气气氛中在密封试管中，加入(R)-2-(6-(3-氟吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)-5，6- 二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮(120mg，0.417mmol)、2-溴-5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲氧基)吡啶(253mg，0.835mmol)、碘化亚铜(I)(16mg，0.0835mmol) 和碳酸钾(115mg，0.835mmol)，用氮气吹扫该系统。加入1，4-二噁烷(6mL)和 N，N’-二甲基乙二胺(0.017mL，0.167mmol)，将该混合物在100℃搅拌4h。减压浓缩该反应混合物，将残余物溶于10ml水，用DCM/MeOH(9∶1，50ml x2) 萃取。用NaSO₄(5g)干燥合并的有机层，过滤，浓缩，得到80mg淡黄色固体粗产物。通过碱性硅胶(100-200目)柱色谱法，使用二氯甲烷/甲醇梯度(100/0-＞ 98/2)纯化粗产物，得到期望的产物，为淡黄色固体(50mg，23％产率)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.86(s，1H)，8.60(d，1H)，8.42-8.33(m，1H)，8.18(dd， 1H)，8.01(dd，1H)，7.58(dd，1H)，6.66(d，1H)，5.54(s，1H)，5.28(s，2H)，5.05(s， 2H)，3.85-3.54(m，5H)，3.54-3.42(m，1H)，2.39-2.08(m，2H)，0.90(dd，2H)、 -0.01(s，9H).MS：511.3[M+H]⁺

制备实施例13-31

按照如制备实施例12中所述的Cu-偶联方法，使用下表3c中所示的酰胺原料和适当的卤代杂芳基制备下列制备实施例。

表3c：

实施例1-4

按照如制备实施例7中所述的Pd-偶联方法，使用下表4中所示的酰胺原料和适当的卤代杂芳基制备下列化合物。

表4：

备选实施例1

在氩气气氛中在烧瓶中，混合制备实施例5(285mg，0.992mmol)、3-溴吡啶(0.191mL，1.984mmol)、碳酸钾(274mg，1.984mmol)和碘化亚铜(I)(37.8mg， 0.198mmol)，用氩气吹扫该系统。加入二噁烷(12mL)和N1，N2-二甲基乙-1，2- 二胺(0.042mL，0.397mmol)，将该混合物在110℃搅拌4h。减压浓缩粗产物，溶于20mL水。加入氨水(16.30mL，114mmol)，直至该溶液呈碱性(pH 12)。用 DCM/MeOH溶液(9∶1)将水层萃取2次。用Na₂SO₄干燥合并的有机层，过滤，浓缩至干。将固体混悬于DCM，在40℃搅拌15分钟。冷却该混合物，过滤，得到产物，为白色固体(234.3mg，65％).¹H NMR(80MHz，DMSO-d6)δ9.03(d，1H)，8.86(s，1H)，8.60(d，1H)，8.42-8.15(m，2H)，8.01(dd，1H)，7.45(dd，1H)， 6.67(d，1H)，5.41(d，1H)，5.09(s，2H)，4.00-3.37(m，4H)，2.28-1.48(m，2H).MS：365.12[M+H]⁺

实施例5-138

按照如制备实施例7或备选实施例1中所述的方法，或使用下表4a中所示的酰胺原料和适当的卤代杂芳基制备下列实施例。或者，可以应用Pd₂(dba)₃、 BINAP和Cs₂CO₃条件。

表4a：

实施例139

在微波照射下将2-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮(0.08g，0.286mmol)、2，6-二氟吡嗪(0.199g，1.72mmol)和CsF(0.348g，2.293mmol)在DMSO(4mL)中的混悬液在130℃加热30分钟。然后冷却该反应混合物，倾入冰冷水(3mL)。过滤得到的浆液，用水(5mL)冲洗固体。通过硅胶(100-200目)柱色谱法使用2-5％MeOH的DCM溶液纯化残余物，得到期望的产物(32mg，29％).¹H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.65-9.59(m，1H)，8.96 (s，IH)，8.60-8.55(m，1H)，8.38(dd，IH)，7.97(dd，1H)，6.59(d，1H)，5.03(s，2H)， 3.46-3.41(m，4H)，2.01-1.93(m，4H).MS：366.1[M+H]⁺

实施例140-161

按照如实施例54中所述的方法，使用下表4b中所示的酰胺原料和适合的酰胺和氟-杂芳基制备下列实施例。

表4b：

实施例162

将(R)-2-(6-(3-氟吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)-5-(5-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基) 甲氧基)吡啶-2-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮(50mg，0.098mmol)溶于DCM(1，5mL)，在搅拌下在冰浴中冷却至0℃。向该溶液中加入4M HCI的1，4- 二噁烷溶液(0.2mL)，在RT持续搅拌4h。反应完成后，减压除去溶剂，用饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH8-9。使化合物沉淀，通过过滤取出固体。用戊烷 (3mL)洗涤，再用高度真空干燥30min，得到期望的化合物，为淡黄色固体(10 mg，27％).¹H NMR(500MHz，CF3COOD)δ8.85(s，1H)，8.72(d，1H)，8.57(dd， 1H)，8.52-8.32(m，2H)，7.90(d，1H)，7.46(s，1H)，5.86-5.62(m，1H)，5.53(s， 2H)，4.52-4.01(m，4H)，2.87(s，1H)，2.75-2.44(m，1H).MS：381.1[M+H]⁺

实施例163-181

按照如实施例162中所示的脱保护方法，使用下表4c中所示的O-保护的原料制备下列实施例。

表4c：

前体1

在氩气气氛中在烧瓶中，将制备实施例7(135mg，0.373mmol)溶于二氯甲烷。加入三乙胺(1.038ml，7.45mmol)，将该反应混合物搅拌5分钟。然后将甲磺酰氯(0.290ml，3.73mmol)滴入该反应混合物。将该混合物在室温搅拌20min。加入甲磺酰氯(0.290ml，3.73mmol)，将该反应混合物搅拌25min。用1N NaOH 水溶液使该反应混合物淬灭，然后用二氯甲烷萃取3次。用Na₂SO₄干燥合并的有机层，过滤，浓缩至干。通过快速色谱法纯化产物(二氧化硅，二氧化硅12g 柱；0-10％甲醇的二氯甲烷溶液)，得到(S)-甲磺酸1-(5-(4-氧代-5-(吡啶-3- 基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-2(4H)-基)吡啶-2-基)吡咯烷-3-基酯，为白色固体 (17.4mg，11％).¹H NMR(80MHz，DMSO-d6)δ＝9.03(d，1H)，8.87(s，1H)，8.61 (d，1H)，8.44-8.15(m，2H)，8.03(dd，1H)，7.45(q，1H)，6.68(d，1H)，5.45(s，1H)， 5.09(s，2H)，3.67(d，4H)，3.27(s，3H)，2.41-2.08(m，2H).MS：441.08[M+H]⁺

备选方法

在氩气气氛中在冷却至0℃的小瓶中，将(S)-2-(6-(3-羟基吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)-5-(吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)-酮(100mg，0.276mmol)和 4-二甲基氨基吡啶(337mg，2.76mmol)混合在吡啶(17mL)中。加入甲磺酰氯 (0.108mL，1.380mmol)，用氩气吹扫将该混合物。将该反应混合物温热至RT，搅拌2h，此后在0℃加入4-二甲基氨基吡啶(169mg，1.380mmol)和甲磺酰氯 (0.054mL，0.690mmol)。40min后，将0.1NNaOH水溶液(20mL)加入到该混合物中，以将其碱化。将该溶液倾入冷水，过滤。用水洗涤，直至水的pH为7。高度真空干燥固体30min，得到化合物，为橙色固体(86mg，71％).¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.03(d，1H)，8.87(s，1H)，8.61(d，1H)，8.35(d，1H)，8.26(d， 1H)，8.02(dd，1H)，7.45(dd，1H)，6.68(d，1H)，5.44(s，1H)，5.08(s，2H)，3.86- 3.42(m，4H)，3.27(s，3H)，2.40-2.24(m，2H).MS：441.1[M+H]⁺

前体2

将N-溴琥珀酰亚胺(22mg，0.126mmol)加入到制备实施例8(43mg，0.097 mmol)在二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液中。在室温搅拌1h后，然后用水和乙酸乙酯稀释该反应混合物。分离各层，用乙酸乙酯将水层萃取2次。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物在乙腈中研磨，通过过滤采集固体。然后通过快速色谱法纯化粗固体(二氧化硅，二氧化硅12g柱；2-5％甲醇的二氯甲烷溶液)。减压浓缩级分，将残余物在乙腈中研磨，通过过滤采集固体，得到(R)-2-(5-溴-6-(3-氟吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)-5-(5-溴吡啶-3-基)-5，6-二氢吡咯并[3，4-c]吡唑-4(2H)＝酮，为浅褐色固体(16mg，32％)。

¹H-NMRδ8.88(d，1H)，8.83-8.70(m，1H)，8.51-8.32(m，2H)，8.22-7.83 (m，2H)，5.75-4.77(m，3H)，4.32-3.72(m，4H)，0.98-0.67(m，2H).MS：523.10 [M+H]⁺

前体3

在RT在N₂气氛中向制备实施例7(70mg，0.193mmol)在DCM(3.5mL)中的溶液中加入三乙胺(0.08mL，0.5797mmol)。将该反应混合物冷却至0℃，然后逐步加入对甲苯磺酰氯(73mg，0.3865mmol)，历时10min期限，随后加入 DMAP(23mg，0.193mmol)。然后将该反应混合物温热至RT，搅拌12h，通过 TLC监测反应进展。反应完成后，在RT用饱和NaHCO₃水溶液(5ml)稀释该混合物，用5％MeOH的DCM溶液萃取2次(2x20ml)。用Na₂SO₄干燥合并的有机层。减压蒸馏出溶剂，得到淡黄色固体。通过碱性硅胶(100-200目)柱色谱法，经用DCM/MeOH梯度(100/0-＞98/2)洗脱纯化粗化合物，得到期望的化合物，为黄白色固体(20mg，20％)。¹HNMR(400MHz，DMSO-D6)δ9.03(d，IH)， 8.86(d，1H)，8.58(dd，1H)，8.35(dd，1H)，8.32-8.18(m，1H)，7.99(ddd，1H)， 7.69-7.54(m，2H)，7.44(td，3H)，6.62(dd，1H)，5.25-5.01(m，3H)，3.76-3.39 (m，4H)，2.39(d，3H)，2.36-2.01(m，2H).MS：[M+H]⁺517.3

前体4

在氩气气氛中在烧瓶中，将制备实施例7(700mg，1.93mmol)和4-DMAP (236mg，1.93mmol)混悬于9.4ml吡啶，冷却至0℃。加入4-硝基苯磺酰氯(2.14 g，9.66mmol)，将该混悬液在室温搅拌4h。在0℃加入4-DMAP(118mg，0.97 mmol)和4-硝基苯磺酰氯(1.07g，4.83mmol)。将该反应混合物搅拌过夜。在0℃再加4-DMAP(118mg，0.97mmol)和4-硝基苯磺酰氯(1.07g，4.83mmol)，将该反应混合物在室温搅拌1天。加入40ml 1M NaOH，将得到的混合物以6000ppm 离心5min。滗析离心小瓶，用40mL水将剩余的固体洗涤4次。在每个洗涤步骤后通过离心/滗析除去水。将剩余的固体混悬于水，转入烧瓶，蒸发，得到期望的产物，为浅褐色固体(871mg，83％).¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝9.04 (s，1H)，8.85(s，1H)，8.68-7.90(m，8H)，7.46(bs，1H)，6.63(d，1H)，5.42(s，1H)， 5.09(s，2H)，3.86-3.39(m，4H)，2.36-2.05(m，2H).MS：[M+H]⁺547.97

放射性配体合成

实施例-1[³H-1]

在氚反应容器中将前体2(0.5mg)溶于二甲基甲酰胺(DMF)(0.3mL)和N，N- 二异丙基乙胺(DIEA)(5μL)。加入10％Pd/C(0.5mg)，在-200℃用氚气给容器加压至0.5atm。将该溶液在室温搅拌1h，冷却至-200℃，除去过量气体。用4 x 1mL CH₃OH冲洗反应烧瓶，使每次的CH₃OH冲洗液通过硅藻土层。真空除去合并的甲醇。通过HPLC纯化该物质。除去流动相，将产物再溶于无水乙醇。 (5mCi，放射化学纯度＞99％，比活性为43.6Ci/mmol的、)。T是指氚(³H)。 MS(ESI)：m/z＝369(100％)[M+H^]+

实施例1-[¹⁸F-1]

干燥步骤：在典型方法中，将运输小瓶中的[¹⁸F]氟化物(从商业回旋加速器设施获得的目标水)转移到离子交换柱上并捕获在离子交换柱上。然后将其用碳酸钾和Kryptofix222的溶液洗脱到

模块的反应容器(RV1)中。首先通过在真空和氦气流气氛中在95℃下加热4min来蒸发溶液。将乙腈(1mL) 加入到RV1中，在相同条件下在真空和氦气流气氛中持续蒸发2min。在第二次加入乙腈(1mL)后，在真空和氦气流气氛在在95℃下进行最终蒸发2min。然后将反应器冷却至60℃。

放射性标记：将前体1(1mg)在无水二甲亚砜(0.7mL)中的溶液加入到反应容器中，将该反应混合物在100℃下加热10min。将反应器冷却至40℃，用 HPLC流动相(1.8mL)稀释，将内容物转入回路加载小瓶(RV2)中。将反应器用注射用水(2.5mL)冲洗，将冲洗液转移到RV2中。将RV2的内容物转移到HPLC 注射器回路中进行纯化。

HPLC纯化：使用半制备型Phenomenex Synergi C18柱(5μm，250x 10 mm)通过HPLC进行纯化，用乙腈/乙酸铵溶液(20mM)(35/65，v/v)的混合物以 4mL/min的流速洗脱。将产物级分采集在烧瓶1中，该烧瓶1包含20mL在 WFI中的抗坏血酸钠(5mg/mL)。将稀释的产物混合物通过C18固相萃取柱，用10mL抗坏血酸钠(5mg/mL)的WFI溶液冲洗柱子。用1.0mL 200标准强度 USP级乙醇将放射性标记的产物从SPE柱体洗脱到制剂烧瓶中，所述制剂烧瓶预装有10mL制剂碱(抗坏血酸钠(4.67mg/mL)的盐水溶液)。用4.0mL制剂碱冲洗柱，将冲洗液与制剂烧瓶的内容物混合。将所得溶液通过灭菌的0.2μm膜过滤器进入无菌的、过滤器连通的小瓶(最终产物小瓶，FPV)，其预填充有15mL 生理盐水(27％衰减校正产率)。

实施例-4[³H-4]

将实施例4(1.0mg)加入到氚反应容器中，随后加入碳酸铯(1.0mg)，然后加入DMF(0.1mL)，最终加入碘甲烷[3H](100mCi)。密封容器，将该溶液在室温搅拌18h。将该反应混合物转入较大烧瓶。用4x2mL甲醇冲洗该反应容器。真空除去合并的甲醇。粗产率：38mCi。通过硅胶柱纯化该物质。真空除去流动相，将产物再溶于0.05％TFA的水/乙腈溶液。再通过半制备型反相HPLC 纯化该物质。真空除去流动相，将产物再溶于无水乙醇，(4，8mCi，纯度＞99％)。通过MS测定比活性为79,98Ci/mmol。

MS(ESI)：m/z＝374(100％)[M+H]⁺

生物学测定描述和相应的结果

1.人帕金森病(PD)脑来源的α-突触核蛋白(α-syn)聚集体的制备

该方法改编自Spillantini等人，1998中描述的方案。将来自PD供体的冷冻组织块在冰上解冻，并使用玻璃杜恩斯匀浆器匀浆。然后使用预冷的70.1转子 (Beckman，342184)，将匀浆在超速离心机(Beckman，XL100K)中在4℃下以 11,000x g(12,700RPM)离心20分钟。将沉淀重悬于提取缓冲液[10mM Tris-HCl pH 7.4，10％蔗糖，0.85mM NaCl，1％蛋白酶抑制剂(Calbiochem 539131)，1mM EGTA，1％磷酸酶抑制剂(Sigma P5726和P0044)]中，并在4℃下以15，000×g(14，800rpm，70.1Ti转子)离心20分钟。弃去沉淀，在室温下将十二烷基肌氨酸钠(20％储备溶液，Sigma L7414)加入上清液中至终浓度为 1％，保持1小时。然后将该溶液在4℃下以100,000×g(38,000rpm，70.1Ti 转子)离心1小时。将含有富集的α-syn聚集体的沉淀重悬于PBS中并储存在 -80℃直至使用。

2.用于测定结合亲和力的显微放射性结合竞争测定

将PD脑来源的α-syn聚集体点样到微阵列载玻片上。将载玻片与20nM的氚化参比配体[³H]-a-syn-Ref(如WO2017/153601中所述)和1mM或50pM-2μM 范围内的递增浓度的本发明的实施例化合物(非放射性标记的)一起孵育。孵育后，洗涤载玻片并暴露于磷光体存储屏(GE Healthcare，BAS-IP TR 2025)。曝光后，用激光成像系统(Typhoon FLA 7000)扫描磷光体存储屏幕，以读出来自上述放射结合实验的信号。使用ImageJ软件包进行信号的定量。用过量的非放射性标记的参比配体(1mM)测定非特异性信号，并通过从总信号中减去非特异性信号来计算特异性结合。竞争计算为百分比，其中0％定义为在溶媒存在下的特异性结合，100％定义为在过量的非放射性标记的参考配体存在下获得的值。所有测量均进行至少两次技术重复。通过使用单位点特异性结合模型应用非线性回归曲线拟合，在GraphPad Prism7中计算K_i值。

评估实施例化合物与[3H]放射性标记的参比配体竞争结合PD患者脑来源的α-syn聚集体的效力。测试的实施例化合物的微放射性结合竞争测定的结果在表5中显示为：在1μM和Ki值下的竞争％。所有测量均在相同的PD脑来源的α-syn聚集体上进行。本文报道的化合物1的Ki值为两次独立实验的平均值。

表5：

表5：通过对人PD脑来源的α-syn聚集体的显微放射性结合竞争测定评估结合亲和力。左，在1μM的实施例化合物1和2存在下，与氚化参比配体的竞争百分比(％)。右，显示了实施例化合物1的Ki值。如表5中所示，本发明的实施例化合物1和2显示出与PD脑来源的α-syn聚集体的良好结合。

3.实施例-1[³H-1]在α-突触核蛋白病和AD组织中的靶标结合评估

3A：通过高分辨率显微放射自显影术

该方案修改自Marquie等人，2015。将切片与60nM的氚化的实施例化合物 1(实施例-1[3H-1])或参比([3H]-Tau-Refat 60nM)在室温(RT)下孵育1小时。然后如下洗涤切片：在冰冷的50mM Tris-HCl pH 7.4缓冲液中洗涤一次，每次1 分钟，在70％冰冷的乙醇中洗涤两次，每次1分钟，在冰冷的50mM Tris-HCl pH 7.4缓冲液中洗涤一次，最终在冰冷的蒸馏水中简单冲洗。随后将切片干燥，然后在防光载玻片储存箱中暴露于Ilford NuclearEmulsion Type K5(Agar Scientific，AGP9281)。5天后，通过将切片连续浸入以下溶液中使其显影： 1.)Ilford Phenisol显影剂(在H₂O中1∶5稀释，Agar Scientific，AGP9106)，2.) IlfoStop溶液(在H₂O中1∶20稀释，Agar Scientific，AGP9104)，3.)Ilford Hypam 定影剂(在H₂O中1∶5稀释Agar Scientific，AGP9183)，且最终用H_zO冲洗。

当显示时，还在相同切片上进行免疫染色。为了图像采集，使用ProLong Gold抗褪色试剂(Invitrogen P36930)固定切片并在具有20x物镜的 Panoramic150载玻片扫描仪(3DHiStech)上成像，分别捕获亮视野和荧光图像。

3B.通过使用抗体的切片染色

使用对氨基酸129处的α-突触核蛋白处的磷酸化丝氨酸具有特异性的市售抗体(α-syn-pS129，家兔单克隆，Abcam 51253)或小鼠构象依赖性抗Tau抗体 (MC1，由PeterDavies，Northwell，US友情提供)或对氨基酸409/410处的 TDP-43磷酸化丝氨酸具有特异性的市售抗体(抗PTDP-43pS409/410，Biolegend 829901)对脑切片进行免疫染色。将切片在4℃下用4％甲醛(Sigma，252549)固定15分钟，并在RT用1×PBS(Dulbecco磷酸盐缓冲盐水，Sigma D1408)洗涤3 次，每次5分钟。接下来，将切片在封闭缓冲液(PBS，10％NGS，0.25％Triton X-100)中在室温下饱和并透化1小时，并在4℃下与对应于α-syn-pS129或MC1 的一抗(在PBS中，5％NGS，0.25％Triton X-100)一起孵育过夜。第二天，将切片用1xPBS洗涤3次，持续5分钟，然后与AlexaFluor647标记的山羊抗家兔 (Abcam，ab150079)或山羊抗小鼠(115-605-166，Jackson ImmunoResearch)二抗在室温下孵育45分钟。与二抗孵育后，将切片在PBS中洗涤三次，然后进一步处理。对于图像采集，使用ProLong Gold抗褪色试剂(Invitrogen P36930)安装切片，并用Panoramic150载玻片扫描仪(3DHIstech；Hungary)成像。

结果：对来自不同α-突触核蛋白病的病例的冷冻人脑切片进行实施例-1 [³H-1]的高分辨率显微放射自显影。在PD和其他α-突触核蛋白病(包括多系统萎缩症(MSA)、路易体痴呆(DLB)、阿尔茨海默病的路易体变体(LBV)和PDD) 中，检测到来自实施例-1[³H-1]的强放射自显影信号(图1下部)，并与来自α-syn-pS129抗体的免疫荧光信号共定位(图1上部)，这表明在路易体和路易神经突以及非常小尺寸的α-syn聚集体上的强靶标结合。

4.通过放射自显影术对来自PD、PDD和非痴呆对照(NDC)供体的脑切片中的实施例-1[³H-1]的特异性结合的评估

将来自一例家族性PD病例(α-突触核蛋白[SNCA]基因G51D错义突变)(标记为SNCA(G51D))、一例PDD病例和两例非痴呆对照(NDC)病例的冷冻人脑切片首先在4℃下用4％多聚甲醛(Sigma，252549)短暂固定15分钟，并在RT用 PBS(Dulbecco磷酸盐缓冲盐水，Sigma)洗涤3次，每次5分钟。然后在用于实验之前，将所有载玻片在50mM Tris-HCl pH 7.4缓冲液中平衡20分钟。在RT 将每个脑切片与固定浓度(10nM)的氚化的实施例化合物1(实施例-1[³H-1])或参比α-syn配体([3H]-α-syn-ref)或1.25nM-80nM范围内的递增浓度的实施例-1[³H-1]的氚化化合物在Tris-HCl缓冲液中一起孵育2小时(总结合，‘-’)。为了测定非特异性(NS)结合，将实施例-1[³H-1]或[3H]-a-syn-Ref与1μM非放射性标记的化合物(分别为实施例或a-syn-Ref，自阻断，‘+’)混合。洗涤载玻片并置于成像盒中的磷光体成像屏幕(GEHealthcare，BAS-IP TR 2025)下。使用激光成像系统(Typhoon，FLA 7000)扫描成像屏幕并使用ImageJ软件包分析所得图像。通过从总信号中减去非特异性信号来确定特异性结合。K_d值通过使用单位点特异性结合模型应用非线性回归曲线拟合，在GraphPad Prism7中计算。

结果：实施例-1[³H-1]在不同的α-突触核蛋白病组织中显示剂量依赖性放射自显影信号，包括PDD(图2A)和遗传性PD病例(图3A)。在这两种病例下，可替换的信号与α-syn病理的定位良好地相关联，如通过用α-syn-pS129抗体染色所确定的，表明化合物与PDD和PD组织的特异性结合(图2B和3B)。通过定量特异性信号，在11-13nM下计算解离常数(K_d)(图2C/表6和图3C/表6)，表明对病理性α-突触核蛋白聚集体的良好结合亲和力。

表6：

表6：通过放射自显影实施例-1[³H-1]对来自特发性PD病例(PDD)和家族性PD病例(G51D错义突变)的人脑组织的结合亲和力的评估。通过使用 GraphPad Prism7中的单点特异性结合模型应用非线性回归曲线拟合来计算解离常数(K_d)和结合位点占有率(B_maax)。R²是决定系数。

另外，当与参考α-syn配体相比时，实施例-1[³H-1]在来自不同α-突触核蛋白病病例的组织上显示出改善的总体结合和优异的特异性结合，以及在非患病组织(NDC)中显示出极弱的结合(图4A和图4B)。

5.通过显微放射结合法的PD脑来源的α-syn聚集体的饱和结合研究

将PD脑来源的α-syn聚集体点样到微阵列载玻片上。将载玻片与实施例 -1[³H-1]或[3H]-α-syn-ref(浓度在300pM-150nM的范围内增加)孵育后，洗涤载玻片并暴露于磷光体存储屏(GE Healthcare，BAS-IP TR 2025)。曝光后，用激光成像系统(Typhoon FLA7000)扫描磷光体存储屏幕，以读出来自上述放射结合实验的信号。使用ImageJ软件包进行信号的定量。用过量的非放射性标记的参比配体(分别为2μM的实施例1或a-syn-ref)测定非特异性信号，并通过从总信号中减去非特异性信号来计算特异性结合。通过使用单位点特异性结合模型应用非线性回归曲线拟合，在GraphPad Prism7中计算K_d值。

结果：通过显微放射性结合在PD组织匀化物的饱和结合研究中评估实施例-1[³H-1]，并与参比α-syn结合剂进行头对头比较。如图5所示，实施例-1[³H-1] 在PD脑来源的α-syn聚集体上显示出高且改善的结合位点占据率。

6.通过显微放射结合在PD脑来源的α-syn聚集体上用α-syn-Ref置换实施例-1[³H-1]的评估

将PD脑来源的α-syn聚集体点样到微阵列载玻片上。将载玻片与20nM的实施例-1[³H-1]和浓度在50pM-2μM范围内递增的α-syn-Ref或实施例1的化合物(非放射性标记的)一起孵育。孵育后，洗涤载玻片并暴露于磷光体存储屏(GE Healthcare，BAS-IP TR 2025)。曝光后，用激光成像系统(Typhoon FLA 7000) 扫描磷光体存储屏幕，以读出来自上述放射结合实验的信号。使用ImageJ软件包进行信号的定量。用过量的非放射性标记的实施例化合物1(2μM)测定非特异性信号，并通过从总信号中减去非特异性信号来计算特异性结合。竞争计算为百分比，其中0％定义为在溶媒存在下的特异性结合，100％定义为在过量的非放射性标记的参比配体存在下获得的值。所有测量均进行至少两次技术重复。

结果：评估实施例-1[³H-1]是否可以被非放射性标记的α-syn-Ref化合物替代。α-syn-Ref化合物仅在来自特发性PD病例的脑来源的α-syn聚集体上与实施例-1[³H-1]部分竞争(图6)，这表明与α-syn-Ref化合物相比，实施例化合物1 结合病理性α-syn聚集体的不同的或部分重叠的结合袋。

7.用于测定实施例化合物1对AD脑匀化物的抑制剂常数(Ki)的放射性结合竞争测定

人阿尔茨海默病(AD)脑匀化物的制备：

该方法改自Bagchi等人，2013中所述的方案。将来自AD供体的冷冻组织块在冰上解冻，并在4℃下使用玻璃杜恩斯匀浆器在补充有蛋白酶抑制剂 (Complete；Roche11697498001)的高盐缓冲液(50mM Tris-HCl pH 7.5，0.75M NaCl，5mM EDTA)中匀浆。使用预冷的70.1转子(Beckman，342184)，将匀化物在超速离心机(Beckman，XL100K)中在4℃下以100,000×g(38,000rpm)离心 1小时。将沉淀重悬于补充有1％Triton X-100的高盐缓冲液中，并在4℃下使用玻璃杜恩斯匀浆器匀浆。将匀化物在4℃下以100,000×g(38,000rpm，70.1 转子)再次离心1小时。将沉淀重悬于补充有1％Triton X-100和1M蔗糖的高盐缓冲液中，并使用玻璃杜恩斯匀浆器在4℃匀浆。将匀化物在4℃下以100，000×g (38,000rpm，70.1转子)离心1小时。将含有不溶性级分的所得沉淀重悬于PBS 中，等分试样并储存在-80℃直至使用。

将固定浓度的AD不溶性级分与10nM的氚化参比Aβ配体([³H]-Aβ-ref)和浓度范围为400pM-2μM的非放射性标记的实施例化合物1在RT孵育2小时。然后将样品在GF/C滤板(PerkinElmer)中真空过滤以捕获具有结合的放射性配体的聚集体，并用50mM Tris pH7.5洗涤五次。然后干燥GF/C滤膜，并在每个孔中加入闪烁液(UltimateGold，PerkinElmer)。在MicroBeta2闪烁计数器 (PerkinElmer)上分析过滤器。用过量的非放射性标记的参比配体(2mM)测定非特异性信号，并通过从总信号中减去非特异性信号来计算特异性结合。竞争计算为百分比，其中0％定义为在溶媒存在下的特异性结合，100％定义为在过量的非放射性标记的参考配体存在下获得的值。通过使用单位点特异性结合模型应用非线性回归曲线拟合，在GraphPad Prism7中计算Ki值。至少重复两次进行测量。

结果：如图7和表7中所示，在330nm下测定实施例化合物1在AD脑来源的匀化物中的Ki值。基于实施例-1[³H-1]对PD脑组织的结合亲和力(通过放射自显影)和在PD脑匀化物中的结合亲和力(通过显微放射结合)，实施例化合物1显示出对α-syn优于存在于人AD脑匀化物中的Aβ病理性聚集体的良好选择性。另外，与用作阳性对照的参比Tau结合剂相比，实施例-1[³H-1]对AD脑组织中的Tau聚集体不显示特异性靶标结合(图8)，这表明与Tau病理性聚集体相比具有良好选择性。此外，实施例-1[³H-1]显示出与存在于额颞叶变性TdP(FTLD-TdP)C型脑组织中的TAR DNA结合蛋白43(TDP-43)聚集体非常弱的至无结合(图9)，表明与TDP-43病理性聚集体相比具有良好的选择性。总之，这些数据表明了实施例化合物1的选择性。

表7：

表7：实施例化合物1对AD脑来源的匀化物用非放射性标记的实施例化合物1置换[3H]-Abeta-Ref的Ki值测定。通过使用GraphPad Prism7中的单位点特异性结合模型，应用非线性回归曲线拟合来计算K_i和R²值。

8.健康猴子中的PK研究

使用1ml乙醇和14ml抗坏血酸盐/盐水(抗坏血酸盐溶液以9.3mg/ml的浓度制备)，用¹⁸F-标记的实施例-1[¹⁸F-1](6.5mCi)静脉内(iv)注射非人灵长类动物 (NHP)。使用Siemens Focus 220进行猴PET扫描。在注射放射性剂量之前立即开始PET采集。在头部聚焦的情况下，作为120分钟的动态扫描生成图像。实施例-1[¹⁸F-1]具有2.0SUVmax全脑的快速摄取(注射后3.5min)。此外，实施例 -1[¹⁸F-1]具有14min的峰到半峰的快速清除(图10)。该数据证明了实施例-1[¹⁸F-1] 在非人灵长类动物中的PK曲线适合于其在人体中用作脑PET剂。

9.通过放射自显影术对来自PD、PDD、MSA、LBV和非痴呆对照(NDC) 供体的脑切片中的实施例-1[3H-1]的特异性结合进行评估

首先将来自一个PD病例、两个PDD病例、两个MSA病例、一个LBV病例和三个非痴呆对照(NDC)病例的冷冻人脑切片在4℃下用4％多聚甲醛(Sigma，252549)短暂固定15分钟，并在RT用PBS(Dulbecco磷酸盐缓冲盐水， Sigma)洗涤3次，每次5分钟。然后在用于实验之前，将所有载玻片在50mM Tris-HCl pH 7.4缓冲液中平衡20分钟。将每个脑切片与Tris-HCl缓冲液中的固定浓度(10nM)的氚化实施例化合物1(实施例-1[³H-1])在RT温育2小时(总结合，“总”)。为了确定非特异性结合(NSB)，将实施例-1[³H-1]与5mM非放射性标记的化合物实施例1混合。洗涤载玻片，然后在实时放射自显影系统 (Beaquant Instrument，AI4R)中曝光并扫描。

结果：实施例-1[³H-1]显示在各种α-突触核蛋白病组织中的靶标结合，包括两个MSA、一个LBV和两个PDD病例(图11A)。可置换的信号与α-syn病理的定位和负载具有良好相关，如通过用α-syn-pS129抗体染色所确定的(图11B)，表明化合物的特异性结合。此外，与信号弱的多个非痴呆对照病例相比，患病供体中的放射自显影信号表现得更强。

10.用于测定结合亲和力的显微放射性结合竞争测定

将PD脑来源的α-syn聚集体点样到微阵列载玻片上。将载玻片与6nM或 20nM的实施例-1[³H-1]和在1μM和100nM的实施例化合物(非放射性标记的) 一起孵育。在一些情况下，进一步评估非放射性标记的实施例化合物的不同浓度范围，从0.05nM-2μM变化。孵育后，洗涤载玻片并通过实时放射自显影系统(Beaquant，AI4R)扫描。通过使用Beamage图像分析软件(AI4R)进行信号的定量。用过量的非放射性标记的实施例-1(2μM)测定非特异性信号。并且通过从总信号中减去非特异性信号来计算特异性结合。竞争计算为百分比，其中0％定义为在溶媒存在下的特异性结合，100％定义为在过量的非放射性标记的实施例 -1存在下获得的值。通过使用单位点特异性结合模型应用非线性回归曲线拟合，在GraphPadPrism7中计算Ki值。所有测量均进行至少两次技术重复。对于在多于一个实验中测试的化合物，报告了独立实验中重复的平均值或Ki值。

结果：评估实施例化合物与实施例-1[³H-1]配体竞争结合PD患者脑来源的α-syn聚集体的效力。测试的实施例化合物的显微放射性结合竞争测定的结果在表8中显示为：在1μM和100nM下的竞争％。表8还显示了K_i值。

表8

表8：通过显微放射结合竞争测定对人PD脑来源的α-syn聚集体的结合亲和力评估。在1μM和100nM的实施例化合物2到181存在下相对于氚化实施例-1[³H-1]配体的竞争百分比(％)。还显示了所选实施例化合物的Ki值。＊，使用来自三个不同供体的PD脑来源的匀浆的独立实验中Ki值的平均值。＊＊使用来自两个不同供体的PD脑来源的匀化物的独立实验中Ki值的平均值。如表8 所示，本发明的实施例化合物2-181显示出与PD脑来源的α-syn聚集体的有效结合。

11.实施例-4[³H-4]在α-突触核蛋白病中的靶标结合评估

11A：通过高分辨显微放射自显影术

该方案改自Marquie等人，2015。将切片与实施例化合物4(实施例-4[³H-4]) 或参比Tau配体([³H]-Tau-Ref，20nM)在RT孵育1小时。然后如下洗涤切片：在冰冷的50mM Tris-HCl pH 7.4缓冲液中洗涤一次，每次1分钟，在70％冰冷的乙醇中洗涤两次，每次1分钟，在冰冷的50mM Tris-HCl pH 7.4缓冲液中洗涤一次，最后在冰冷的蒸馏水中简单冲洗。随后将切片干燥，然后在遮光载玻片储存箱中暴露于Ilford Nuclear Emulsion Type K5(AgarScientific， AGP9281)。5天后，通过将切片连续浸入以下溶液中使其显影：1.)IlfordPhenisol 显影剂(在H₂O中1∶5稀释，Agar Scientific，AGP 9106)，2.)IlfoStop溶液(在H₂O中1∶20稀释，Agar Scientific，AGP 9104)，3.)Ilford Hypam定影剂(在 H₂O中1∶5稀释，Agar Scientific，AGP 9183)，最后用H₂O冲洗。

当显示时，还在相同切片上进行免疫染色。对于图像采集，使用ProLong Gold抗褪色试剂(Invitrogen P36930)固定切片，并在具有20x物镜的 Panoramic150载玻片扫描仪(3DHistech)上成像，分别捕获亮视野和荧光图像。

11B.通过使用抗体染色切片

使用对氨基酸129处的磷酸化丝氨酸α-突触核蛋白(α-syn-pS129，家兔单克隆，Abcam 51253)具有特异性的市售抗体对脑切片进行免疫染色。将切片在4℃下用4％甲醛(Sigma，252549)固定15分钟，并在室温下用1×PBS(Dulbecco磷酸盐缓冲盐水，SigmaD1408)洗涤3次，每次5分钟。接下来，将切片在封闭缓冲液(PBS，10％NGS，0.25％Triton X-100)中在RT饱和并透化1小时，并在 4℃下与对应于α-syn-pS129的一抗一起孵育过夜。第二天，将切片用1X PBS 洗涤3次，每次5分钟，然后与AlexaFluor647标记的山羊抗人IgG二抗孵育。将家兔(Abcam，ab150079)抗体在室温下孵育45分钟。与二抗孵育后，将切片在PBS中洗涤三次，然后进一步处理。对于图像采集，使用ProLong Gold抗褪色试剂(InvitrogenP36930)固定切片，并用Panoramic150载玻片扫描仪 (3DHistech；Hungary)成像。

结果：用实施例-4[³H-4]对来自PD供体的冷冻人脑切片进行高分辨显微放射自显影术。以累积银颗粒的形式检测到来自实施例-4[³H-4]的强放射自显影信号(图12下部)，并与来自α-syn-pS129抗体的免疫荧光信号共定位(图12上部)，表明在PD组织中路易体和路易神经突以及非常小尺寸的α-syn聚集体上的强靶标结合。

12.通过放射自显影术对来自PD、MSA和非痴呆对照(NDC)供体的脑切片中实施例-4[³H-4]的特异性结合进行评估

首先将来自一例家族性PD病例(α-突触核蛋白[SNCA]基因G51D错义突变)(标记为SNCA)、一例特发性PD病例、一例MSA病例和两例非痴呆对照(NDC) 病例的冷冻人脑切片在4℃下用4％多聚甲醛(Sigma，252549)短暂固定15分钟，并在室温下用PBS(Dulbecco磷酸盐缓冲盐水，Sigma)洗涤3次，每次5分钟。然后在用于实验之前，将所有载玻片在50mM Tris-HCl pH 7.4缓冲液中平衡20 分钟。将每个脑切片与在Tris-HCl缓冲液中的固定浓度(10nM)的氚化的实施例化合物4(实施例-4[³H-4])在室温下孵育2小时(总结合，‘总’)。为了测定非特异性结合，将实施例-4[³H-4]与5mM非放射性标记的化合物(实施例4，‘NSB’)混合。洗涤载玻片，然后在实时放射自显影系统(Beaquant Instrument，ai4R) 中曝光并扫描。

结果：实施例-4[³H-4]在各种α-突触核蛋白病组织(包括MSA病例、家族性 PD病例和特发性PD病例)中显示出特异性结合(图13A)。与非痴呆对照相比，患病供体中的放射自显影信号表现得更强，证实了靶标结合并且与病理性α-突触核蛋白负荷的分布具有很好的相关性(图13B)。另外，实施例-4[³H-4]在所检查的各种α-突触核蛋白病病例中显示出可替换的信号，并且在多个非患病对照病例中显示出非常弱的信号。

13.用显微放射结合法对PD脑来源的α-syn聚集体的饱和结合研究

将PD脑来源的α-syn聚集体点样到微阵列载玻片上。将载玻片与 1.56nM-80nM范围内的递增浓度的实施例-4[³H-4]一起孵育。孵育后，通过实时放射自显影系统(BeaquantInstrument，AI4R)扫描载玻片。通过使用Beamage 图像分析软件(ai4R)进行信号的定量。用过量的非放射性标记的参比配体(实施例-4，2μM)测定非特异性信号，并通过从总信号中减去非特异性信号来计算特异性结合。通过使用单位点特异性结合模型应用非线性回归曲线拟合，在 GraphPad Prism7中计算K_d值。

结果：通过显微放射结合在PD组织匀化物的饱和结合研究中评估实施例-4 [³H-4](图14)。在21nM下计算解离常数(K_d)(图14/表9)，表明对病理性α-突触核蛋白聚集体的良好结合亲和力。

表9：

实施例-4[<sup>3</sup>H-4]	PD匀化物
		Kd	21nM
R<sup>2</sup>	0.86

表9：通过显微放射结合对实施例-4[³H-4]对人PD脑组织匀化物的结合亲和力的评估。通过使用GraphPad Prism7中的单点特异性结合模型，应用非线性回归曲线拟合来计算解离常数(Kd)和结合位点占有率(B_max)。R²是决定系数。

14.用于测定实施例化合物4对AD脑匀化物的抑制剂常数(K_i)的放射性结合竞争测定

根据实施例7中公开的方法(参见上文)制备人阿尔茨海默病(AD)脑匀化物。

将固定浓度的AD不溶性级分与10nM的氚化参比Aβ配体([³H]-Aβ-Ref)和浓度范围为400pM-2μM的非放射性标记的实施例化合物1在RT孵育2小时。然后将样品在GF/C滤板(PerkinElmer)中真空过滤以捕获具有结合的放射性配体的聚集体，并用50mM Tris pH7.5洗涤5次。然后将GF/C过滤器干燥并将闪烁液(UltimateGold，PerkinElmer)在每个孔中加入。在MicroBeta2闪烁计数器(PerkinElmer)上分析过滤器。用过量的非放射性标记的参比配体(2μM)测定非特异性信号，并通过从总信号中减去非特异性信号来计算特异性结合。竞争计算为百分比，其中0％定义为在溶媒存在下的特异性结合，100％定义为在过量的非放射性标记的参比配体存在下获得的值。通过使用单点特异性结合模型应用非线性回归曲线拟合，在GraphPad Prism7中计算Ki值。在具有两次技术重复的两个独立实验中进行测量。

结果：如图15和表10中所示，测定实施例化合物4在297nM在AD脑来源的匀化物中的Ki值。基于通过显微放射结合的实施例-4[³H-4]在PD脑匀化物中的结合亲和力，如具有21nM值的实施例13(上述)中报道的，以及通过放射自显影术的a-突触核蛋白病脑组织中的特异性结合，实施例化合物4显示出相比对人脑匀化物中存在的Aβ病理性聚集体而言具有对a-syn的良好选择性。另外，与用作阳性对照的参考Tau结合剂相比，实施例-4[³H-4]在AD脑组织中的 Tau聚集体上不显示特异性靶标结合(图16)，表明具有相比Tau病理性聚集体的良好选择性。总之，这些数据表明实施例化合物4对α-syn聚集体具有期望的选择性。

表10：

表10：在AD脑来源的匀化物上用非放射性标记的实施例化合物4置换 [3H]-Aβ-Ref而进行的实施例化合物4的Ki值测定。通过使用GraphPad Prism7 的单点特异性结合模型，应用非线性回归曲线拟合来计算Ki和R2值。

15.人体中的首次(FIH)研究

进行评估¹⁸F-实施例1作为潜在的PET放射性配体的1期研究，用于与健康志愿者相比，在具有疑似α-突触核蛋白病理学情况的患者的脑中成像α-突触核蛋白沉积物。本研究目的在于表征具有疑似特发性帕金森病(PD)和健康志愿者(HV)个体中的个体¹⁸F-实施例1的安全性以及成像和药代动力学特性。可以招募总计至多10名受试者(至多5名HV受试者和至多5名患有特发性PD的受试者的目标)。

全部个体的选择标准：

·个体能够提供书面知情同意书，其必须在进行任何评估之前获得。

·女性个体必须不具有生育潜力，或者如果她们具有生育潜力，则同意使用避孕而不捐赠卵子。根据研究者的判断，没有无生育潜力的记录的个体可以接受妊娠测试。

·具有生育潜力的男性个体必须承诺使用2种避孕方法，其中1种是男性个体在研究期间和研究完成后90天的屏障方法。

·男性个体在研究期间和研究完成后90天不得捐赠精子。

·对于接受动脉插管的受试者，手的充分循环用于安全放置动脉管线(如通过Allen测试确定)和凝血(凝血酶原时间[PT]和部分促凝血活酶时间[PTT])。

·如果个体服用安非他酮，则个体必须同意在DaTscan成像(如果进行)之前保持该药物至少12小时。

HV个体的额外的纳入标准：

·年龄≥21岁的男性和女性。

·健康，在筛选时和在向诊所报告示踪剂成像访视时在身体检查中没有临床相关发现。

·无α-突触核蛋白病(包括PD)或与痴呆相关的其他早发性神经系统疾病的家族史。

·无临床上显著的神经和/或精神障碍的个人病史。

·在作为筛选的一部分或在先前获得的DaTscan上(在签署同意书前6个月内)进行的多巴胺主动转运蛋白(DaT)扫描上无多巴胺转运蛋白缺陷的证据。

·具有蒙特利尔认知评估(MoCA)评分≥26。

·如由主管(PI)判断的无认知障碍。

具有α-突触核蛋白病的受试者的额外的选择标准：

·年龄≥40岁的男性和女性。

·被诊断患有以下任一种的个体：

о特发性PD

о具有遗传危险因素的PD(富含亮氨酸的重复单位激酶2[LRRK2]突变除外)

·与α-突触核蛋白病的诊断一致的脑磁共振成像(MRI)，没有解释个体神经症状的局灶性疾病的证据。

·作为筛选的一部分或在先前获得的DaTscan上进行的DaTscan上的多巴胺转运蛋白缺陷的证据。

·用于α-突触核蛋白病的症状治服用的药物必须在筛选访视前维持稳定的剂量方案至少30天。

·能够耐受躺在扫描仪中至多约180分钟而没有足以在PET扫描上引起显著运动伪差的过度头部或下颚震颤或运动障碍。

在招募后，受试者接受1次静脉内注射¹⁸F-实施例1不超过10mCi。目测和定量评估¹⁸F-实施例1在人类个体中的脑摄取和药代动力学，并获得安全性数据。将疑似特发性PD病例的¹⁸F-实施例1的PET信号与HV进行横截面比较。

16：制剂

¹⁸F捕获和洗脱：将[¹⁸F]-氟化物转移到离子交换柱上并捕获在离子交换柱上。然后将其用碳酸钾(1.6mg)和Kryptofix 222(10mg)的乙腈水溶液洗脱到反应容器(RV1)中。首先通过在真空和氦气流下在95℃下加热4min来蒸发溶液。然后将乙腈(1mL)加入到RV1中，并在相同条件下在真空和氦气流下继续蒸发2 min。在第二次加入乙腈(1mL)后，在真空和氦气流下在95℃下进行最终蒸发 2min。最后，将反应器冷却至60℃。

放射性标记反应：将前体(1.0mg)在无水二甲亚砜中的溶液加入到反应容器中，并将反应混合物在100℃下加热10分钟。将反应器冷却至40℃，用HPLC 流动相(1.8mL)稀释，并将内容物转移至回路加载小瓶(RV2)。将反应器用注射用水(2.5mL)冲洗并将冲洗液转移到RV2中。将RV2的内容物转移到HPLC注射器回路中进行纯化。

纯化和药物产品配制：使用半制备型Agilent Eclipse XDB C18柱(5μm，250x9.4mm)通过HPLC进行纯化，并用甲醇/乙酸铵溶液(20mM，50/50，v/v) 的混合物以4mL/min的流速洗脱。将产物级分采集在烧瓶中，该烧瓶含有在注射用水(WFI)中的20mL抗坏血酸钠(5mg/mL)。将稀释的产物混合物通过C18 固相萃取柱，并用10mL抗坏血酸钠(5mg/mL)的WFI溶液冲洗柱。用1.0mL 200 标准强度USP级乙醇将放射性标记的产物从SPE柱体洗脱到配制烧瓶中，所述制剂烧瓶预装有10mL在盐水中的抗坏血酸钠(10mg/mL)。用4.0mL抗坏血酸钠的盐水(10mg/mL)溶液冲洗柱体，并将冲洗液与配制烧瓶的内容物混合。将所得溶液通过灭菌的0.2μm膜过滤器进入预填充有15mL生理盐水的无菌过滤连通小瓶(最终产物小瓶，FPV)中。

研究放射性标记产品随时间的稳定性，并验证其在合成结束后保持在规格内8小时。

批次配方数量如表11中所示：

前体	1mg<sup>a</sup>
		[18F]氟化物	＜4Ci
生理盐水	50mL
		乙醇	1mL
抗坏血酸钠	500mg

^a在加工中除去

为本研究开发的放射性标记产品的最终制剂具有30mL的体积，目的是基于最终剂型中10mL的注射体积而达到以下含量，如表12中所示：

放射性的量	载体	生理盐水	抗坏血酸钠	乙醇
					≤10mCi	≤10μg	≤9.67ml	≤46.7mg	≤0.33ml

Claims

1.式(I)的化合物

其中

为芳基或杂芳基，其定向地选自如下：

R⁰为H或C₁-C₄烷基；

R²为芳基或5-元或6-元杂芳基，其中R²选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2b独立地选自F、OH、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、NH₂、CN或C₁-C₄烷氧基；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；和

＊为键合的位置。

2.权利要求1的化合物，具有式(IIa)或(IIb)，

3.权利要求1的化合物，具有式(IIIa)、(IIIb)或(IIIc)，

4.权利要求1或3的化合物，其中R¹为-NH-C₃-C₆环烷基、C₃-C₆环烷基或杂环基，其各自任选地被至少一个卤素取代，优选地，R¹选自如下：

5.权利要求1的式(I)的化合物，其中该化合物选自以下化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物：

6.上述权利要求任一项的式(I)的化合物，其中该化合物为可检测标记的化合物。

7.权利要求6的式(I)的化合物，其中所述可检测标记的化合物包含选自放射性同位素，优选²H、³H或¹⁸F的可检测标记。

8.权利要求6或7的式(I)的化合物，其中R¹为

9.权利要求6或7的式(I)的化合物，其中R¹为

其中F是指¹⁹F；且式(I)的化合物在至少一个可利用位置被³H(氚)可检测地标记。

10.权利要求6-9任一项的化合物，其中所述可检测标记的化合物为

其中T是指³H(氚)，且F是指¹⁹F；

或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

11.权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，用于使α-突触核蛋白聚集体成像，所述聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突。

12.权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，用于α-突触核蛋白聚集体的正电子发射断层摄影术成像，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体和/或路易神经突。

13.用于权利要求11或12的用途的化合物，其中该用途用于体外成像、离体成像或体内成像，优选地，该用途用于体内成像，更优选地，该用途用于脑成像。

14.权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，用于诊断。

15.用于权利要求14的用途的化合物，其中所述诊断为对与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常或其易感性的诊断，其中所述疾病、病症或异常任选地选自帕金森病(散发性、具有α-突触核蛋白突变的家族性、具有α-突触核蛋白以外的突变的家族性、单纯性自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、SNCA重复携带者、路易体痴呆(LBD)、路易体痴呆(DLB)(“单纯性”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(PDD)、弥漫性路易体病(DLBD)、阿尔茨海默病、散发性阿尔茨海默病、具有APP突变的家族性阿尔茨海默病、具有PS-1、PS-2或其他突变的家族性阿尔茨海默病、家族性英国痴呆、阿尔茨海默病的路易体变体、唐氏综合征、多系统萎缩症(MSA)(Shy-Drager综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)、创伤性脑损伤、慢性损伤性脑病、拳击员痴呆、tau病变(包括皮克病、额颞叶痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性和C1型尼曼-皮克二氏病、与17号染色体相关的伴有帕金森综合征的额颞叶痴呆)、克雅氏病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩性侧索硬化(散发性、家族性和关岛的ALS-痴呆综合征)、神经轴性营养不良、伴有1型脑铁积累的神经变性(包括哈-斯二氏综合征)、朊病毒病、运动失调性毛细血管扩张症、特发性口面运动障碍、亚急性硬化性全脑炎、Gerstmann-Straussler-Scheinker综合征、包涵体肌炎、戈谢病、克拉伯病以及其他溶酶体贮积症(包括Kufor-Rakeb综合征和Sanfilippo综合征)和眼速动期(REM)睡眠行为障碍。

16.用于权利要求15的用途的化合物，其中所述疾病为帕金森病。

17.用于权利要求15的用途的化合物，其中所述疾病为多系统萎缩症。

18.用于权利要求15的用途的化合物，其中所述疾病为路易体痴呆。

19.用于权利要求15的用途的化合物，其中所述疾病为帕金森病痴呆。

20.用于权利要求15的用途的化合物，其中所述疾病为SNCA重复携带者。

21.用于权利要求15的用途的化合物，其中所述疾病为阿尔茨海默病。

22.用于权利要求11-21任一项的用途的化合物，其中所述用途用于人。

23.诊断组合物，包含权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物和至少一种药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂或佐剂。

24.使个体中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常成像的方法，该方法包含下列步骤：

(a)向个体施用权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；或权利要求23的诊断组合物；

(b)允许所述化合物结合α-突触核蛋白聚集体，包括但不限于路易体和/或路易神经突；并且

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物。

25.使个体中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常成像的方法，该方法包含下列步骤：

(a)向个体施用权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；或权利要求23的诊断组合物；并且

(b)使个体的脑成像。

26.权利要求24或25的使个体中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常成像的方法，该方法包含下列步骤：

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物；并且

(d)生成代表与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的位置和/或量的图像。

27.对个体组织中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)进行正电子发射断层摄影术(PET)成像的方法，该方法包含下列步骤：

(b)允许所述化合物穿透入所述个体组织；并且

(c)采集所述个体组织的正电子发射断层摄影术(PET)图像；

其中所述组织为中枢神经系统(CNS)组织、眼或脑组织，优选地，其中所述组织为脑组织。

28.检测个体中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的神经系统疾病、病症或异常的方法，该方法包含下列步骤：

(c)测定与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的放射性信号。

29.用于检测和/或定量个体组织中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的方法，该方法包含下列步骤：

(a)向个体使所述组织接触权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；或权利要求23的诊断组合物；

30.对个体的脑进行诊断成像的方法，该方法包含下列步骤：

(b)使用正电子发射断层摄影术得到所述个体的脑的图像。

31.采集用于诊断与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的数据的方法，该方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品或特定身体部位或身体区域接触权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；或权利要求23的诊断组合物；

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或身体特定部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性。

32.采集用于确定与α，突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的易感性的数据的方法，该方法包含下列步骤：

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性。

33.采集用于预测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的预后的数据的方法，其中该方法包含下列步骤：

(a)使疑似包含α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的样品、特定身体部位或身体区域接触权利要求6-10任一项的化合物或其立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物；或权利要求23的诊断组合物；

(c)检测与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物；

(d)任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性；和

34.采集用于监测患者中与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的数据的方法，该方法包含下列步骤：

35.采集用于预测患有与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的患者对与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)相关的疾病、病症或异常的治疗的响应性的数据的方法，该方法包含下列步骤：

36.权利要求31-35任一项的方法，其中所述任选地在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的存在或不存在和样品或特定身体部位或身体区域中的α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的存在或不存在之间建立相关性的步骤包含：

-在与α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)结合的化合物的量和样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的量之间建立相关性；并且

-任选地将样品或特定身体部位或身体区域中α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体和/或路易神经突)的量与健康对照个体中的正常对照值进行比较。

37.式(IV-F)的化合物

R³选自

R⁴为芳基或5-或6-元杂芳基，其中R⁴选自：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

R^2c、R^2c’独立地选自H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自H、F或-OH；

R^2e选自H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；且

＊为键合的位置。

38.权利要求37的式(IV-F)的化合物，其中LG选自溴、氯、碘、C_1-4烷基磺酸酯和C_6-10芳基磺酸酯，其中C_6-10芳基可以任选地被-CH₃或-NO₂取代。

39.权利要求37或38的式(IV-F)的化合物，其为

或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，其中LG为甲磺酸酯或硝基苯磺酸酯。

40.式(IV-H)的化合物

R⁵选自

R⁶为芳基或5-或6-元杂芳基，其中R⁶选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H、X或F；

R^2b独立地选自X、F、-OH、C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基、-NH₂、-CN或C₁-C₄烷氧基，且其中C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷基或C₁-C₄烷氧基任选地包含一个或多个X；

R^2c、R^2c’独立地选自X、H、F、OH、OCH₃或CH₃；

R^2d选自X、H、F或-OH；

R^2e选自X、H、OH、CH₃或F；

Z独立地为N、NH、N(C₁-C₄烷基)、N(卤代C₁-C₄烷基)、O或S；

Z¹独立地为N、NH、O或S；

p为0、1或2；

m为0或1；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；

＊为键合的位置；

氟为¹⁹F；

X为溴、氯或碘；且

其中R⁶包含至少一个X。

41.权利要求40的式(IV-H)的化合物，其为：

或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

42.式(IV-J)的化合物

R⁷选自

R⁸选自如下：

其中

R^2a、R^2a’独立地选自H或F；

p为0、1或2；

R^z选自H、C₁-C₄烷基和卤代C₁-C₄烷基；

当化合价允许时，

为单键和双键的组合；

氟为¹⁹F；且

＊为键合的位置。

43.权利要求42的式(IV-J)的化合物，其为：

或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

44.制备权利要求6、7或8所述的化合物的方法，包含使权利要求37-39任一项的化合物与¹⁸F-氟化剂反应，使得LG被¹⁸F替代。

45.权利要求44的方法，其中¹⁸F-氟化剂选自K¹⁸F、Rb¹⁸F、Cs¹⁸F、Na¹⁸F、Rb¹⁸F、Kryptofix[222]K¹⁸F、¹⁸F的四(C_1-6烷基)铵盐和[¹⁸F]氟化四丁基铵。

46.制备权利要求6、7或8所述的化合物的方法，包含使权利要求40或41的化合物与³H放射性标记试剂反应。

47.制备权利要求6、7或8所述的化合物的方法，包含使权利要求39或40的化合物与CT₃放射性标记试剂反应，其中T为³H。

48.权利要求1-10任一项的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物作为体外分析参比物或体外筛选工具的用途。

49.用于检测和/或诊断与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的试剂盒，其中该试剂盒包含至少一种如权利要求1-10中任一项所定义的化合物或其可检测标记的化合物、立体异构体、外消旋混合物、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。

50.用于制备放射性药物制剂的试剂盒，其中该试剂盒包含含有如权利要求37-43中任一项所定义的至少一种化合物的密封小瓶。