CN115515561A - 预防或早期治疗病原性感染的脂质体组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用作药物的脂质体组合物。具体地，本发明涉及用于预防或早期治疗病原性感染的脂质体组合物。更具体地，该脂质体组合物用于预防或早期治疗呼吸道中的病原性感染，优选地通过鼻腔或肺部给药。

Description

预防或早期治疗病原性感染的脂质体组合物
技术领域
本发明涉及用作药物的脂质体组合物。具体地，本发明涉及用于预防或早期治疗病原性感染的脂质体组合物。更具体地，该脂质体组合物是用于预防或早期治疗呼吸道中的病原性感染，优选地通过鼻腔或肺部给药。
背景技术
先天免疫系统被设计为在遇到新出现的病原体的瞬间采取行动。通过加强气道的先天免疫反应，可以实现对气道病原体感染的快速防御。这与气道免疫力受损/降低的个体特别相关。与适应性免疫反应不同，先天免疫的激活将广泛防御许多病原体，并且不会受到病原体中突变的损害。
通过加强气道中的这种免疫反应，特别是在气道免疫降低的高风险组中，可以挽救生命。一个特别的实例是引起CoVid-19疾病的冠状病毒SARS-CoV-2。冠状病毒使用几种方法来逃避甚至损害先天免疫系统，导致感染和随后低效率的适应性免疫1。因此，通过加强先天第一道防线来预防这种免疫逃避是至关重要的。SARS-CoV-2显示出与SARS-CoV-1极大的相似性。SARS-CoV-1感染的研究清楚地表明了先天免疫的重要性。事实上，即使完全没有T和B细胞，动物也能够控制感染。这种控制需要先天免疫的存在，有能力产生各种细胞因子，特别是I型干扰素2,3。与此相一致，其他研究表明，只涉及先天免疫刺激的预防性和暴露后策略都能够预防动物模型中的感染1。宿主抵抗病毒感染的一个关键成分是Toll样受体-3(TLR-3)，它被病毒的dsRNA激活，并触发I型干扰素的产生4。有趣的是，用TLR3激动剂通过呼吸道治疗小鼠降低了五种不同流感株的气道感染引起的肺病毒滴度5，6。在SARS小鼠模型中，基于小鼠适应的SARS冠状病毒高毒力株，TLR3激动剂的配方产生了令人印象深刻的抗病毒活性。这种被称为安普利近(Ampligen)的配方最近已进入人体临床试验用于静脉给药11。在人类中，TLR3激动剂的第I/II期试验给药也能防御呼吸道感染鼻病毒和流感病毒7。因此，TLR3刺激是一种非常有前景的加强先天抗病毒免疫的策略。
用于呼吸道防御病原体的另一个关键成分是C型凝集素受体Mincle，其与先天防御例如分枝杆菌和链球菌有关。本发明人进一步表明，mincle激动剂和TLR3的联用协同地增加了诱导1型干扰素依赖性CD8 T细胞反应的能力。
本发明背后的总体假设是，使用本发明的脂质体组合物进行预防性鼻内或肺部治疗将会激活先天免疫系统，包括粘膜免疫反应，并导致对病原性感染(例如SARS-CoV-2感染)以及其他呼吸道病原体的短期防御。这种治疗可以在流行病期间对高风险人群反复施用，并显著影响发病率并抑制(例如SARS-CoV-2的)传播。此外，这种治疗不会因病原体的任何突变而受到损害，因为它是非特异性的。
国立血清研究所(Statens Serum Institute)基于
Figure BDA0003888808070000021
(阳离子佐剂配方)技术开发了几种疫苗佐剂/先天免疫激活剂，其中一种是目前正在人体试验的
Figure BDA0003888808070000022
09b。目前正在对其作为肌肉内或腹腔内施用的佐剂进行试验，目的是诱导T和B细胞介导的针对疫苗抗原的适应性免疫反应(临床试验正在进行中：NCT03412786；NCT03715985，NCT03926728)。
Figure BDA0003888808070000023
09b包含先天免疫刺激剂MMG(与先天受体Mincle结合)和诱导I型干扰素的TLR3激动剂聚I:C。作为一种肠外佐剂，
Figure BDA0003888808070000024
09b产生强烈的先天免疫激活，但没有严重副作用8。
Figure BDA0003888808070000025
家族的另一个成员是
Figure BDA0003888808070000026
04，其通过释放IFN-γ诱导Th1活化。
本发明聚焦于向气道给药脂质体组合物，例如
Figure BDA0003888808070000027
04或
Figure BDA0003888808070000028
09b，目的是激活气道先天免疫细胞以防御气道的病原体感染。
发明内容
用脂质体组合物，如
Figure BDA00038888080700000210
04或
Figure BDA0003888808070000029
09b，进行鼻内治疗，激活先天免疫系统，包括粘膜免疫反应，并短期防御呼吸道病原体的感染。这种治疗可以在流行病期间例如对高风险人群反复施用，并显著影响发病率和病原体的传播。
因此，本发明的一个目的涉及一种脂质体组合物，其包含阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)和至少一种免疫调节剂，作为药物用于受试者。
本发明的另一方面涉及一种脂质体组合物，其包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)和至少一种免疫调节剂，用于预防或治疗受试者呼吸道的病原性感染。
脂质体组合物还可包括免疫调节剂，优选聚(I:C)，更优选STING激动剂，例如cAMP、cGMP、c-di-AMP或c-di-GMP。
病原性感染可为由病毒引起的呼吸道的病毒感染，该病毒可选自但不限于细小核糖核酸病毒、鼻病毒、冠状病毒、例如MERS-冠状病毒、SARS-冠状病毒、例如SARS-CoV-2、流感病毒、人副流感病毒、人呼吸道合胞病毒、腺病毒、肠病毒和偏肺病毒。
在本发明的另一种实施方式中，该病原性感染是由细菌引起的上呼吸道的细菌感染，该细菌可选自但不限于肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、化脓性链球菌(Streptococcus pyrogenes)、流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza)、卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis)和分枝杆菌，例如结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)、非洲分枝杆菌(M.africanum)、卡氏分枝杆菌(M.canetti)、田鼠分枝杆菌(M.microti.)、伯克霍尔德氏菌(Burkholderia Sp.)。
由呼吸系统的病毒和细菌引起的病原性感染在年老和体弱患者以及患有慢性或先天呼吸系统功能障碍(例如但不限于哮喘、囊性纤维化或慢性阻塞性肺疾病(COPD))的患者中尤其严重。
因此，与健康受试者相比，那些将会特别从本发明受益的受试者，可能患有慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、囊性纤维化或导致呼吸功能受损的其他疾病。
本发明的另一方面是提供一种鼻腔给药装置，其包括本发明所公开的脂质体组合物。
附图简要说明
图1表明使用脂质体组合物
Figure BDA0003888808070000031
09b(包括DDA、MMG和聚(I:C))的鼻内治疗，其可激活先天免疫系统，并短期防御呼吸道病原体的感染。这种治疗可以在流行病期间对高风险人群反复施用，并显著降低发病率和病原体的传播。
图2表明在+/-
Figure BDA0003888808070000041
09b治疗的小鼠肺中，先天免疫细胞的流入和IFN-α/β的分泌。
图3表明在+/-
Figure BDA0003888808070000042
09b治疗的小鼠肺中，所选择的促炎和1型干扰素标志物的基因表达水平。
图4表明在未治疗的小鼠或接受两次或四次
Figure BDA0003888808070000043
09b治疗的小鼠的肺中，所选择的促炎和1型干扰素标志物的基因表达水平。
图5表明在+/-
Figure BDA0003888808070000044
09b治疗和随后感染流感病毒中小鼠的体重和存活率随时间的发展。
图6表明图5中的小鼠血液中IgG抗体的发展。
图7表明+/-
Figure BDA0003888808070000045
04和STING激动剂单独或联用后小鼠的存活时间、病毒载量和体重随时间的发展。
图8表明+/-
Figure BDA0003888808070000046
09b和STING激动剂单独或联用后小鼠的存活时间、病毒载量和体重随时间的发展。
图9表明+/-
Figure BDA0003888808070000047
04、
Figure BDA0003888808070000048
09b和STING激动剂单独或联用后小鼠鼻内病毒复制的发展。
图10表明以SARS-CoV-2、+/-
Figure BDA0003888808070000049
09B或Mock对照感染的仓鼠中体重的发展。
以下将对本发明作更详细地描述。
具体实施方式
定义
在进一步详细讨论本发明之前，将首先定义以下术语和约定：
受试者
术语“受试者”包括所有年龄段的人、其他灵长类动物(例如食蟹猴、恒河猴)；一般哺乳动物，包括商业相关哺乳动物，如牛、猪、马、绵羊、山羊、猫和/或狗；和/或鸟。优选的受试者是人。
术语“受试者”还包括群体中的健康受试者，特别是暴露于病原体和需要防御感染的健康受试者，例如健康的个人。
呼吸系统的病毒和细菌引起的病原性感染在年老和体弱患者以及慢性或先天呼吸系统功能障碍(如哮喘、囊性纤维化或慢性阻塞性肺疾病(COPD))患者中尤其严重。
肺癌患者也可接受本发明的脂质体组合物。还有吸烟者，过去有吸烟史的或正在使用香烟或其他烟类产品的吸烟者中的一种或两种。
上述受试者易受上呼吸道感染，因此给药本发明公开的组合物可以潜在地预防即将出现的常见感冒症状或疾病，从而预防它们的潜在疾病和症状的加重。
给药/施用
本发明上下文中的术语“给药/施用”指通过各种方式给药，通过在输送系统中全身给药(例如注射)、通过局部给药、皮内给药、(鼻)内给药、舌下或肺部给药。
本发明的脂质体组合物通常通过(鼻)内局部给药来施用，范围是从每天一次、至每周一次或两次、至每两周一次、至每月一次或二次。
当经鼻或鼻内给药时，术语“经鼻施用”、“鼻腔给药”或“鼻内给药”可互换使用，是指脂质体组合物被输送到受试者的鼻粘膜，使得脂质体组合物的内容物直接被吸收到鼻组织或上呼吸道中。
本发明的脂质体组合物也可以通过肺部给药来施用。术语“肺部”是指通过受试者的鼻或口给药，将脂质体组合物输送到肺泡肺组织，在那里被机体吸收。肺部给药可直接吸入脂质体组合物，例如粉末，或吸入含有该组合物的气雾剂。本文所设想的本发明的脂质体组合物可通过鼻和肺联合给药来施用，其中一部分脂质体组合物被输送到鼻粘膜，一部分被输送到肺泡肺组织。
感染
在本发明的上下文中，术语“感染”是指由病原体(例如病毒或细菌)引起的呼吸道(例如上呼吸道或下呼吸道)中的感染。
病毒感染可以是人类冠状病毒感染或流感病毒感染。其他病毒感染可以由细小核糖核酸病毒(例如鼻病毒)、人副流感病毒、人呼吸道合胞病毒、腺病毒、肠病毒或偏肺病毒引起。
呼吸道的细菌感染可由细菌引起，所述细菌选自肺炎衣原体(Chlamydiapneumoniae)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、化脓性链球菌(Streptococcuspyrogenes)、流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza)、卡他莫拉菌(Moraxellacatarrhalis)和分枝杆菌，例如结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)、非洲分枝杆菌(M.africanum)、卡氏分枝杆菌(M.canetti)、田鼠分枝杆菌(M.microti.)、伯克霍尔德氏菌(Burkholderia Sp.)。
病原感染、病症或疾病的“预防”是指在统计样本中，相对于未经治疗的受试者，该脂质体组合物减少了治疗的受试者中感染、病症或疾病的发生，或相对于未经治疗的对照受试者，延迟了感染、病症或疾病的一个或多个症状的发生或降低其严重程度。
DDA
促进细胞介导的免疫反应的一种特别有效的佐剂是季铵化合物，例如阳离子表面活性剂二甲基双十八烷基铵(DDA)。DDA是一种合成的两亲性化合物，包括一个亲水的带正电的二甲基氨头部基团和两个长的疏水烷基链。在水性环境中，DDA分子自组装，形成与天然磷脂制成的脂质体相似的囊状双层。
因此，DDA是一种合成表面活性剂，由一个亲水性阳离子季铵头部基团和两个疏水饱和C18烷基链组成。由于其表面活性剂性质，DDA分子在水性介质中分散时自组装成脂质体样结构。
本发明的脂质体组合物包括阳离子脂质DDA作为各种盐，最优选的是二甲基双十八烷基溴化铵或氯化铵(DDA-B或DDA-C)或其硫酸盐、磷酸盐或醋酸盐(DDA-X)，或二甲基双十八碳烯基溴化铵或氯化铵(DODA-B或DODA-C)或其硫酸盐、磷酸盐或醋酸盐化合物(DODA-X)。最优选地，本发明的脂质体组合物包括二甲基双十八烷基溴化铵。DDA的CAS号为3700-67-2.
然而，本发明的脂质体组合物还可以包括其他阳离子脂质。
MMG
单分枝酰基甘油(MMG)是一种糖脂，它通过引入脂质体膜，稳定与阳离子表面活性剂DDA形成的脂质体。
通过将糖脂，例如MMG和可选的其他糖脂，引入脂质体膜中来稳定阳离子脂质体。
糖脂例如MMG本身具有免疫刺激特性，可以与季铵化合物(DDA)协同作用，增强免疫反应。
被称为MMG-1的合成类似物包括亲水性甘油头部基团和脂质酸，脂质酸显示通过酯键连接的两个疏水饱和C14/C15烷基尾部。此外，还存在MMG类似物阵列，它们在烷基链长度(MMG-2；C16/C17，MMG-3；C10/C11，和MMG-4；C6/C7)或者在头部基团(MMG-5；2S)和脂质尾部(MMG-6)的立体化学方面不同。
MMG优选地是通过合成制得的糖脂MMG-1。优选的MMG类似物的化学结构为3-羟基-2-十四烷基-十八烷酸-2,3-二羟基丙酯，优选地为(2R)-2,3-二羟基丙基-3-羟基-2-十四烷基十八烷酸非对映体。
聚(I:C)
根据本发明的术语“聚(I:C)”或“聚I:C”包括给药时未通过氢键或共价键结合的单链聚肌苷酸(聚I)和单链聚胞苷酸(聚C)，以及双链的或复合的聚I/聚C。给药到潮湿粘膜表面后，非复合的聚I和聚C可以形成复合的聚(I:C)，从而启动先天免疫系统，提供对病毒感染的抵御。
优选地，聚(I:C)是一种通过合成制得的双链RNA类似物，包括聚肌苷酸链与聚胞苷酸链的退火或其类似物。聚(A:U)(聚腺苷酸-聚尿苷酸)可用作替代的类似物。
聚(I:C)的分子量取决于聚合物的长度。聚I:C钾盐的分子量规格为10-750kDa，优选范围为100-750kDa。聚I:C的CAS号为24939-03-5。
环二核苷酸
本发明的术语“环状二核苷酸”描述了一组化合物，包括c-di-GMP、c-di-AMP、3’,3’-环状-GMP-AMP(3’,3’cGAMP)和2’,3’-环状-GMP-AMP(2’,3’cGAMP)，它们作为强有力的免疫刺激分子或免疫调节剂发挥作用。第二信使c-di-GMP，结构为含有两个由核糖和磷酸根连接的鸟嘌呤碱基的循环，已被证明可以激活“干扰素基因刺激物”(STING)，即STING激动剂，导致IFN-I分泌增加。
附加佐剂
在本文中，术语“佐剂”是指能进一步增强免疫反应的化合物或混合物。佐剂可以作为缓慢释放抗原的组织库，以及作为非特异性增强免疫反应的淋巴系统激活剂，即免疫调节剂。
免疫调节剂是指任何增加免疫反应效果或者协同作用以获得免疫反应的成分。这种增效作用可以通过模式识别受体(PRR)非特异性地或特异性地完成，包括但不限于C型凝集素受体(CLR)、RIG样受体(RLR)、核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)蛋白和Toll样受体(TLR)。
脂质体的免疫原性可以通过为所谓模式识别受体(PRR)加入免疫刺激配体(又称免疫调节剂)来增强，所谓模式识别受体(PRR)识别病原体上被称为病原体相关分子模式(PAMP)的保守分子结构。PAMP调控先天免疫反应的能力，以及随之而来的适应性反应，可以有利地用于预防或治疗呼吸道的病原性感染。
所谓的模式识别受体(PRRs)包括C型凝集素受体、RIG样受体、核苷酸结合寡聚结构域(NOD)蛋白，以及不断增长的Toll样受体(TLR)家族。PAMP因病原体而异，包括诸如索因子(TDM)、鞭毛蛋白、脂多糖(LPS)、肽聚糖和一些核酸变体，如双链核糖核酸(dsRNA)等分子。多年来，许多受PAMPS启发的免疫调节剂已被开发出来。其中包括海藻糖二山嵛酸酯(TDB)、合成的单分枝酰基甘油(MMG)、单磷酸脂质A(MPL)、聚肌苷酸:聚胞苷酸(聚(I:C))。脂质体与这些PAMP/免疫调节剂的联用是一种有吸引力的方法，以开发一种预防或治疗早期病原性感染的方法，其中PAMP/免疫调节剂刺激抗原呈递细胞，从而增强免疫反应。
其他佐剂包括但不限于Quil A、QS21、氢氧化铝、弗氏不完全佐剂、单磷酸脂质A(MPL)、海藻糖二霉菌酸酯(TDM)、胞壁酰二肽(MDP)。“IC31”、皂素、表面活性物质，如溶血卵磷脂、多元醇、聚阴离子、肽、油或烃类乳剂、钥孔傶血兰蛋白、二硝基酚，或其组合。优选地，所述佐剂是药学上可接受的。
脂质体
术语“脂质体”或“脂质体成分”是对由包裹水室的脂质双层组成的囊泡的广义定义。成膜脂质是两亲性的，因此包含极性和非极性区域。极性区通常由一个磷酸基团、一个酸性基团和/或叔或季铵盐组成，在生理pH值下可以有一个净负(阴离子)、中性或正(阳离子)的表面电荷，这取决于脂质头部基团的组成。优选将pH值调整到生理pH值，如通过在Tris或组氨酸缓冲液中分散调整到pH值5.0-8.0，最优选地调整到pH值6.5-7.5。非极性区通常由一个或多个含有至少8个碳和/或胆固醇的脂肪酸链组成。构成囊状双层膜的脂质的组织方式是：非极性碳氢化合物“尾部”朝向双层的中心，而极性“头部”分别朝向水相内部和外部。
因此，“脂质体(liposome)”或“脂质体(liposomal)”被定义为由围绕水性核的一个或多个脂质双层组成的封闭囊泡结构。每个脂质双层由两个脂质单层组成，每个单层都有一个疏水“尾部”区和一个亲水极性“头部”区。在脂质双层中，脂质单层的疏水“尾部”朝向双层的内部，而亲水“头部”朝向双层的外部。脂质体具有多种物理化学性质，如大小、脂质组成、表面电荷、流动性以及双层膜的数量。根据脂质双层的数量，脂质体可分为单层囊泡(UV)或小单层囊泡(SUV)，其包含单脂质双层或多层囊泡(MLV)，该囊泡包含两个或多个同心双层，每个同心双层与另一个之间被一个水层隔开。水溶性化合物被截留在脂质体的水相/核心内，与之相对的亲脂化合物则截留在脂质双层膜的核心/中心内。
术语“阳离子脂质”或“阳离子脂质体”旨在包括任何两亲性脂质，包括天然和合成脂质和脂质类似物，其具有疏水性和极性头部部分，在生理上可接受的pH下具有净正电荷，并且可以在水中形成双层囊泡或胶束。
作为附加佐剂的其他阳离子脂质
可加入本发明的脂质体组合物中作为附加佐剂的附加阳离子脂质化合物是1,2-二油酰基-3-三甲基铵丙烷(DOTAP)、1,2-二肉豆蔻酰基-3-三甲基铵丙烷、1,2-二棕榈酰基-3-三甲基铵丙烷、1,2-二硬脂酰-3-三甲基铵丙烷、二油酰基-3-二甲基铵丙烷(DODAP)、N-[1-(2,3-二油氧基)丙基]-N,N,N-三甲基铵(DOTMA)、十八碳烯酰氧基(乙基-2-十七碳烯基-3-羟基乙基)咪唑啉(DOTIM)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-乙基磷酸胆碱(DOEPC)和3-十四烷基氨基-叔丁基-N-十四烷基丙脒(二C14-脒)。
脂肪酸链是指烷基或酰基的有支链或无支链的饱和或不饱和烃链。
术语药学上可接受是指不干扰活性成分的有效性或生物活性并且对宿主或患者无毒的物质。
通过将糖脂，例如MMG和可选的其他糖脂引入脂质体膜中来稳定阳离子脂质体。引入是指将分子的疏水区和亲水区嵌入膜、胶束、脂质体或双层的相应疏水区和亲水区或部分(moiety)的过程。在脂质体中加入糖脂的过程可以是“薄膜法”、“反相蒸发法”、“有机溶液注入法”、“双乳液法”、“高剪切混合法”、“微流控法”以及将来的、目前未知的具有将糖脂引入脂质体膜的相同效果的方法。在本发明的背景章节中提到了目前已知的方法。
糖脂被定义成包含通过糖苷键与疏水部分例如长链脂肪酸、酰基甘油、鞘氨醇(sphingoid)、神经酰胺或异戊二烯磷酸酯结合的一个或多个单糖或甘油残基的任何化合物。本发明的附加的糖脂可以是合成来源的、植物来源的或微生物来源的，例如来自分枝杆菌。
除了MMG外，用于本发明作为附加佐剂的一类糖脂是酰化(或烷基化)的糖苷，其包括与一个、两个或甚至三个脂肪酸酯化的一个或两个糖残基。脂肪酸可以是直链，包括饱和脂肪酸例如肉豆蔻酸C14:0、十五烷酸C:15、棕榈酸C16:0、十七烷酸C17:0、十八烷酸C18:0、十九烷酸C:19、二十烷酸C:20、二十一烷酸C21:0、二十二烷酸C:22，以及不饱和脂肪酸例如油酸C18:1n-9、亚油酸18:2n-6；或复杂的支链脂肪酸例如分枝菌酸、甲氧基分枝菌酸、酮基分枝菌酸、环氧基分枝菌酸和棒状杆菌分支菌酸(corynomycolic acid)。糖残基可以是简单的单糖，例如葡萄糖和果糖；或者包括两个共价键接的单糖的二糖，例如由葡萄糖和果糖组成的蔗糖，以及其中两个葡萄糖单元通过糖苷键连接的海藻糖。用于本发明的一类糖脂是从分枝杆菌中分离出来的细胞壁糖脂，其包括与一个、两个或三个正十六烷酸C16:0、油酸C18:1n-9、亚油酸18:2n-6或复杂的羟基支链脂肪酸即在60至90个碳原子长度范围的分枝菌酸残基酯化的二糖。用于本发明的其他细菌糖脂具有较短的脂肪酸链，例如从棒状杆菌(Corynobacterium)、诺卡氏菌(Nocardia)中分离的棒状杆菌分支菌酸(22-36个碳)或者诺卡氏分枝菌酸(44-60个碳)。优选的分枝杆菌糖脂是常称作索因子的α，α’-海藻糖6，6’-二霉菌酸酯(TDM)，它是分枝杆菌细胞壁的最重要的免疫调节组分之一。在特别优选的实施方式中，糖脂包括与两个二十二烷脂肪酸(山萮酸)酯化的二糖α,α’-海藻糖，例如作为TDM的纯合成类似物的α,α′-海藻糖6,6′-二山萮酸酯(TDB)。另外优选的分支杆菌糖脂是单分枝酰基甘油，或优选地合成类似物3-羟基-2-十四烷基-十八烷酸-2,3-二羟基丙酯或具有较短或较长的酰基骨架的密切相关的化合物。
可用于本发明的其他类型的糖脂包括但不限于：基于甘油的糖脂：这些脂质包括与甘油的羟基经糖苷键连接的单糖或寡糖部分，所述甘油可用一个或两个脂肪酸酰化(或者烷基化)。此外，这些糖脂可以是不带电荷的且因此通常被称为中性甘油糖脂，或者可包含硫酸根或磷酸根。本发明的这种类型的优选糖脂为单分枝酰基甘油(MMG)(Andersen等2009a，Andersen等2009b)或其合成类似物，如3-羟基-2-十四烷基-十八烷酸-2,3-二羟基丙酯或具有较短或较长的酰基骨架的密切相关的化合物(Andersen等2009b，Nordly等2011)。
基于神经酰胺的附加糖脂：根据碳水化物部分的结构，鞘糖脂(glycosphingolipid)被分为含有未取代的糖基的中性鞘糖脂和含有带酸性的羧基、硫酸根或磷酸根的糖基的酸性鞘糖脂。
脂多糖(LPS)可用作附加佐剂。这些复杂的化合物是革兰氏阴性细菌细胞壁中发现的内毒素抗原(S-脂多糖)。脂质部分(脂质A)通过糖苷键与多糖形成复合物。脂质A包括在氨基葡萄糖I的1位和氨基葡萄糖II的4位具有2个磷酸酯基团的b-1,6-氨基葡萄糖基-氨基葡萄糖(b-1,6-glucosaminyl-glucosamine)主链。氨基葡萄糖II的3位与长链多糖形成酸不稳定的糖苷键。用羟基化的脂肪酸如羟基肉豆蔻酸酯(键合两个酯且键合两个酰胺)和常规的脂肪酸(月桂酸酯)来取代其他基团(在埃希氏菌中)。本发明特别优选的脂多糖是脂质A的单磷酰基衍生物(MPL)，其是无毒的且具有优良的佐剂性能。
甾醇类的糖苷可用作附加佐剂。此家族包括与一甾醇分子的羟基键合的一碳水化合物单元。确定甾醇部分包括多种甾醇：胆固醇、菜油甾醇、豆甾醇、谷甾醇、菜籽甾醇和二氢谷甾醇。糖部分包括葡萄糖、木糖和甚至阿拉伯糖。
脂肪酸或脂肪醇的糖苷可用作附加佐剂。许多简单的糖脂发现于细菌、酵母和低等有机体(海绵)中。这些化合物包括与脂肪醇或羟基脂肪酸的一个羟基键合或者与脂肪酸的一个羧基键合(酯键)的糖基部分(一个或几个单元)。这些化合物通常具有令人感兴趣的物理或生物学性质。它们中的一些由于它们的洗涤剂性能被工业化生产(烷基糖苷)。
此外，大分子例如寡核苷酸、肽或蛋白质抗原可以被包载在本发明的组合物的单层和多层脂质体的水相内。
物质的复合包括但不限于非共价结合，例如大分子与相同或相反带电的脂质体的静电相互作用、疏水引力。
大分子可用作附加佐剂。大分子被定义成由连接到一起的许多较小的结构单元组成的非常大的分子，例如蛋白质；非常大和复杂的分子，例如DNA和RNA也被定义成大分子。该术语适用于四种常规的生物聚合物(核酸、蛋白质、碳水化合物和脂质)，以及具有大的分子量的非聚合分子。本发明的大分子的使用包括但不限于寡核苷酸、肽、蛋白质、碳水化合物及脂质。
本发明公开了脂质体的脂质组分例如阳离子型表面活性剂(例如DDA)和糖脂(例如TDB)的均匀混合，在水化之前和在可能用于随后与其他大分子的复合的水化之后进行。脂质组分与其他大分子(例如寡核苷酸)的混合也可以在水合前完成，且在进行复合时具有高剪切混合。阳离子脂质与特别是带负电荷的大分子(例如寡核苷酸)之间的复合物通常是热力学上不稳定的，导致随着时间的推移形成较大的聚集物、宽的尺寸分布和结构不均匀性。高度带电的聚电解质与相反电荷的脂质体的结合增强了膜本身的不稳定性。电荷中和伴随的外部表面积的减少导致在双层正常方向中的侧向压力的梯度。这产生了一个弯矩，其反过来引起脂质体的不稳定性。
应当注意，在本发明的某一方面上下文中描述的实施方式和特征也适用于本发明的其他方面。
本发明的一个方面涉及一种脂质体组合物，其包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)和至少一种免疫调节剂，作为药物用于受试者。
本发明的另一方面涉及一种脂质体组合物，其包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)和至少一种免疫调节剂，用于预防或治疗受试者呼吸道的病原性感染。
本发明的一种实施方式涉及一种用于预防病原性感染的脂质体组合物，其中病原性感染选自病毒感染或细菌感染。
病原性感染可以是呼吸道中的感染，例如上呼吸道或下呼吸道。
因此，在本发明的又一种实施方式中，该病原性感染可为由病毒引起的呼吸道的病毒感染，该病毒选自细小核糖核酸病毒、鼻病毒、冠状病毒(例如MERS冠状病毒)、SARS冠状病毒，例如SARS-CoV-2、流感病毒、人副流感病毒、人呼吸道合胞病毒、腺病毒、肠道病毒和偏肺病毒。
在本发明的另一种实施方式中，该病毒感染是由细菌引起的呼吸道的细菌感染，该细菌选自肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)、肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)、化脓性链球菌(Streptococcus pyrogenes)、流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenza)、卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis)和分枝杆菌，如结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)、非洲分枝杆菌(M.africanum)、卡氏分枝杆菌(M.canetti)、田鼠分枝杆菌(M.microti.)和伯克霍尔德氏菌(Burkholderia Sp.)。
本发明的一种实施方式涉及如本文所公开使用的脂质体组合物，其进一步包括至少一种糖脂，例如单分枝酰基甘油类似物(MMG)。
免疫调节剂可选自能够发出信号抑制病毒复制的免疫调节剂、或能够发出信号激活或募集消除病原体的促炎细胞(例如粒细胞、巨噬细胞和NK细胞)的免疫调节剂。
该免疫调节剂选自STING激动剂，例如环状-GMP-AMP(cGAMP)、cAMP、c-di-AMP、cGMP和c-di-GMP；TLR2激动剂，例如酵母聚糖；TLR3激动剂，例如双链核糖核酸(dsRNA)，例如聚肌苷酸：聚胞苷酸(聚(I:C))；TLR 4激动剂，例如MPL-A；TLR5激动剂，例如鞭毛蛋白；TLR7/8激动剂，例如雷西莫特(resiquimod)、咪喹莫特(imiquimod)、嘎德莫特(gardiquimod)；还包括脂化类似物、C型凝集素受体，例如索因子(TDM)或合成类似物TDB、核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)受体激动剂，例如MDP。优选地，该免疫调节剂为聚肌苷酸：聚胞苷酸(聚(I:C))，更优选合成的双链聚(I:C)RNA类似物。
在本发明的一种实施方式中，免疫调节剂优选地为STING激动剂，其选自cGAMP、cAMP、cGMP、c-di-AMP和c-di-GMP，更优选c-di-GMP。
在本发明的另一种实施方式中，脂质体组合物的单分枝酰基甘油(MMG)优选地为类似物3-羟基-2-十四烷基-十八烷酸-2,3-二羟基丙酯。
在本发明的又一实施方式中，脂质体组合物的DDA优选地为二甲基双十八烷基溴化铵。
本发明的另一种实施方式涉及本文所公开的脂质体组合物，其包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)和单分枝酰基甘油(MMG)。本发明的一种优选实施方式涉及本文所公开的脂质体组合物，其包括1-3mg/ml DDA和0.1-1.0mg/ml MMG-1。该脂质体组合物优选地包括2.5mg/ml DDA和0.5mg/ml MMG-1。
本发明的另一种实施方式涉及一种脂质体组合物，其包括0.1-1.0mg/ml聚(I:C)、优选0.5mg/ml聚(I:C)(对应
Figure BDA0003888808070000141
09的含量)，尤其优选0.125mg/ml聚(I:C)(对应于
Figure BDA0003888808070000142
09b的含量)。
本发明的另一种实施方式涉及本文所公开的脂质体组合物，其中该脂质体组合物包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)、单分枝酰基甘油(MMG)和至少一种附加免疫调节剂。
本发明的另一种实施方式涉及本文所公开的脂质体组合物，其中该脂质体组合物包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)、单分枝酰基甘油(MMG)、聚(I:C)和至少一种附加免疫调节剂。
本发明的又一种实施方式涉及本文所公开的脂质体组合物，其中该脂质体组合物包括免疫调节剂c-di-GMP。
本发明的另一种实施方式涉及本文所公开的脂质体组合物，其中该脂质体组合体包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)、单分枝酰基甘油(MMG)和c-di-GMP。
本发明的又一种实施方式涉及本文所公开的脂质体组合物，其中该脂质体组合体包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)、单分枝酰基甘油(MMG)、聚(I:C)和c-di-GMP。
在另一种实施方式中，该脂质体组合物进一步包括STING激动剂，优选c-di-GMP；浓度为0.025-2.5g/ml，例如浓度0.05-2.0mg/ml，例如浓度0.05-1.5mg/ml，例如浓度0.05-1.0mg/ml，例如浓度0.025-0.5mg/ml、优选浓度0.05-0.2mg/ml，例如0.1-0.2mg/ml。
在又一种实施方式中，该脂质体组合物包括2.5mg/ml DDA、0.5mg/ml MMG-1和0.1mg/ml c-di-GMP。
在本发明的另一种实施方式中，本文所公开的脂质体组合物可通过全身给药、鼻腔给药和/或肺部给药来施用。该脂质体组合物也可同时通过全身给药和鼻腔给药来施用。
在又一种实施方式中，该脂质体组合物可在暴露于病原体后通过鼻腔和/或肺部给药来施用，以治疗呼吸道的早期感染。
在本发明的又一种实施方式中，该脂质体组合物通过鼻腔或肺部给药来施用，以预防呼吸道的感染。该脂质体组合物也可同时通过鼻腔和肺部给药来施用。在又一种实施方式中，该脂质体组合物每周施用一至七次，例如每周施用两次、三次、四次、五次或六次。
因此，与健康受试者相比，可特别受益于本发明的受试者可能患有慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、囊性纤维化或导致呼吸功能受损的其他疾病。患有肺癌的受试者也可接受本发明的脂质体组合物。在某些实施方式中，受试者可以是吸烟者，其具有过去吸烟史或正在使用香烟或其他烟类产品的一种或两种。这些受试者易受上呼吸道感染，因此施用公开的组合物可能会预防即将出现的常见感冒症状或疾病，从而预防其潜在疾病和症状的加重。
在本发明的一种实施方式中，受试者选自所有年龄段的人、其他灵长类动物(如食蟹猴、恒河猴)；一般哺乳动物，包括商业相关哺乳动物，如牛、猪、马、绵羊、山羊、猫和狗，以及鸟。最优选地，受试者是人。
在本发明的另一种实施方式中，受试者是气道免疫力受损/降低的受试者。
在本发明的另一种实施方式中，受试者患有选自慢性阻塞性肺疾病、哮喘、囊性纤维化、肺癌和糖尿病的疾病。此外，受试者可具有吸烟史或可以是当前的吸烟者。
在另一种实施方式中，受试者是群体中的健康受试者或者暴露于病原体并需要预防感染的健康受试者，例如健康个人。
本发明的另一方面涉及一种包含该脂质体组合物的用于经鼻腔或肺部给药的装置。
本发明的尤其优选的脂质体组合物为
Figure BDA0003888808070000161
04、
Figure BDA0003888808070000162
09和
Figure BDA0003888808070000163
09b。
Figure BDA0003888808070000164
04是一种双组分阳离子脂质体佐剂系统，由丹麦国立血清研究所开发，包括带有糖脂及免疫调节剂的阳离子DDA脂质体，引入脂质体膜的双层中的单分枝酰基甘油(MMG)。
Figure BDA0003888808070000165
09b是由丹麦国立血清研究所开发的一种三组分阳离子脂质体佐剂系统，包括带有糖脂和免疫调节剂的阳离子DDA脂质体、引入脂质体膜的双层中的单分枝酰基甘油(MMG)以及结合在脂质体表面的免疫调节剂聚I:C。
Figure BDA0003888808070000166
04、
Figure BDA0003888808070000167
09和
Figure BDA0003888808070000168
09b的内容物：
Figure BDA0003888808070000169
04：2500/500μg/mL DDA:MMG-1分散于10mM Tris+4％甘油中，调节至pH7.0。
Figure BDA00038888080700001610
09：2500/500/500μg/mL DDA:MMG-1:聚(I:C)分散于10mM Tris+4％甘油中，调节至pH 7.0。
Figure BDA00038888080700001611
09b：2500/500/125ug/mL DDA:MMG-1:聚(I:C)分散于10mM Tris+4％甘油中，调节至pH 7.0。
本申请中引用的所有专利和非专利参考文献在此全部引入作为参考。
现在将在以下非限制性的实施例中进一步详细描述本发明。
实施例
这些实施例旨在说明本发明。
在以下实施例中，
Figure BDA00038888080700001612
04和
Figure BDA00038888080700001613
09b是用作本发明的示例性脂质体组合物。
Figure BDA00038888080700001614
04是由丹麦国立血清研究所开发的一种双组分阳离子脂质体佐剂系统，包括带有糖脂和免疫调节剂的阳离子DDA脂质体和引入脂质体膜的双层中的单分枝酰基甘油(MMG)。
Figure BDA00038888080700001615
04 2500/500的强度为每毫升2500μg DDA和每毫升500μg MMG，分散在10mMTris+4％甘油中，调节至pH7.0。
Figure BDA00038888080700001616
09b是由丹麦国立血清研究所开发的一种三组分阳离子脂质体佐剂系统，包括带有糖脂和免疫调节剂的阳离子DDA脂质体、引入脂质体膜的双层中的单分枝酰基甘油(MMG)以及结合在脂质体表面的免疫调节剂聚I:C。
Figure BDA0003888808070000171
09b 2500/500/125的强度为每毫升2500μg DDA、每毫升500μgMMG和每毫升125μg聚I:C，分散在10mM Tris+4％甘油中，调节至pH7.0。
实施例1-先天免疫细胞的流入
CB6F1小鼠用
Figure BDA0003888808070000172
09b经鼻治疗两次，间隔72小时。24小时后，研究终止，分离灌注的肺部，并进行流式细胞术分析，以确定先天免疫细胞的流入(图2A)。鼻内给药
Figure BDA0003888808070000173
09b促进了单核细胞(MHC II+、CD11b+、Ly6C+)、
Figure BDA0003888808070000179
(MHC II+、F4/80+)、DC(MHCⅡ+、CD11 c+)、中性粒细胞(Ly6G+)和NK(NK1.1+)细胞流入肺部的增加。进行电化学发光(MSD)分析以测定肺部细胞上清液中的IFN-I。在
Figure BDA0003888808070000174
09b治疗后，IFN-α(图2B)和IFN-β(图2C)均升高。
实施例2–促炎和1型干扰素标志物
CB6F1小鼠用
Figure BDA0003888808070000175
09b经鼻(i.n.)治疗两次，间隔72小时，或者治疗四次，间隔24小时。24小时后，研究终止，分离灌注的肺部，并使用Qiagen RT2 Profiler PCR Array对促炎和1型干扰素标志物进行QPCR分析，以测定治疗后上调的基因。数据显示与1型干扰素和促炎反应二者相关的上调的基因，包括表面活化标志物：CD69、CD86、Tap1、H2-BI、H2-DI和H2-KI；分泌的信号标志物：CCL2、CCL4、CCL5、Timp1和CXCL10；干扰素-I相关模式识别受体：Adar、RIG-I、MDA-5、TLR3、TLR7和TLR9；IFN-I调控基因：stat1、stat2、irf9、isg15、socs1、eif2ak2和isg20；病毒翻译和复制的抑制：ifit1、ifit2、ifit3、mx1和mx2；干扰素-I产物：irf7、ifi204和pmI(图3+4A-F)。这些数据表明，
Figure BDA0003888808070000176
09b诱导了防御病毒所需的先天免疫反应。
实施例3–流感感染后的体重和存活率
CB6F1小鼠用
Figure BDA0003888808070000177
09b经鼻治疗两次，间隔3天。小鼠在首次免疫4天和10天后接受流感感染。对体重(图5A)和存活率(图5B)进行7天监测。空白组中4/6只小鼠、前一周治疗的
Figure BDA0003888808070000178
09b组中仅1/6只小鼠达到仁慈终点体重，不得不去掉。在研究期间，在挑战前一天用
Figure BDA0003888808070000181
09b治疗的小鼠均未达到仁慈终点。此研究表明，治疗效果至少持续一周。
实施例4–HA特异性抗体
实施例3中的小鼠在终止实验的当天进行抽血，以研究先天保护是否导致适应性免疫降低。使用ELISA测定流感HA特异性抗体(图6)。
数据表明，尽管症状减轻，但
Figure BDA0003888808070000182
09b治疗并不影响感染驱动的获得性免疫的诱导，因为
Figure BDA0003888808070000183
109b治疗组中感染后的抗体水平与未治疗组相比，即便不是更高，也能与之持平。
实施例5–
Figure BDA0003888808070000184
04与STING激动剂联用
将
Figure BDA0003888808070000185
04(2500/500μg/mL DDA/MMG-1)与浓度为100μg/mL的STING(干扰素基因刺激剂)激动剂c-di-GMP联用进行验证。该激动剂可以控制宿主防御基因，包括促炎细胞因子和趋化因子，以及I型干扰素(IFN)的转录。小鼠用单独c-di-GMP、单独
Figure BDA0003888808070000186
04或
Figure BDA0003888808070000187
04+c-di-GMP治疗四次，每次间隔24小时，并在首次免疫5天后接受流感感染。对存活率(图7A)、病毒载量(图7B)和体重(图7C-F)进行14天监测。空白组的所有小鼠(图7A，C)、c-di-GMP组的6/8小鼠(图7A，D)和
Figure BDA0003888808070000188
04组的4/8小鼠(图7A，E)，以及
Figure BDA0003888808070000189
04+C-di-GMP组仅3/8小鼠达到仁慈终点体重，不得不去掉。此研究表明，
Figure BDA00038888080700001810
04和c-di-GMP在治疗效果上具有协同作用，通过联用产生了更佳的效果。这也反映在减少病毒载量的能力上(图7B)。
实施例6–
Figure BDA00038888080700001811
09b与STING激动剂联用
将
Figure BDA00038888080700001812
09b(2500/500/125μg/mL DDA/MMG-1/聚IC)与浓度为100μg/mL的STING(干扰素基因刺激剂)激动剂c-di-GMP联用进行验证。该激动剂可以控制宿主防御基因，包括促炎细胞因子和趋化因子，以及I型干扰素(IFN)的转录。小鼠用单独c-di-GMP、单独
Figure BDA00038888080700001814
09b或
Figure BDA00038888080700001813
09 b+c-di-GMP治疗两次，间隔3天，并在首次免疫5天后接受高剂量流感感染。对存活率(图8A)、病毒载量(图8B)和体重(图8C-F)进行了14天监测。空白组的所有小鼠(图8A，C)、c-di-GMP组的7/8小鼠(图8A，D)和
Figure BDA0003888808070000191
09b组的6/8小鼠(见图8A，E)，以及
Figure BDA0003888808070000192
08b+C-di-GMP组的仅5/8小鼠达到仁慈终点体重，不得不去掉。此研究表明，
Figure BDA0003888808070000193
09b和c-di-GMP在治疗效果上具有协同作用，通过联用产生了更佳的效果。这也反映在减少病毒载量的能力上(图8B)。
实施例7–
Figure BDA0003888808070000194
04、
Figure BDA0003888808070000195
09和STING激动剂的联用
将
Figure BDA0003888808070000197
04(2500/500μg/mL DDA/MMG-1)和
Figure BDA0003888808070000196
09b(2500/500/125μg/mLDDA/MMG-1/聚IC)与浓度100μg/mL的STING激动剂c-di-GMP联用进行验证，以研究其阻断鼻内病毒复制的能力。小鼠用c-di-GMP、
Figure BDA00038888080700001911
04、
Figure BDA0003888808070000198
09b、
Figure BDA0003888808070000199
04+c-di-GMP、
Figure BDA00038888080700001910
09b+c-di-GMP治疗两次，间隔3天，并在首次免疫5天后接受高剂量流感感染。在挑战两天后分析鼻内的病毒载量(通过相对流感mRNA表达来测量，图9A)和CT值(图9B；CT值等于找到RNA所需的总周期数，每个阳性试验都有自己的CT值；如果在37至40个周期内没有发现RNA，则试验为阴性)。此研究表明，c-di-GMP有助于减少病毒在鼻内的复制，通过与
Figure BDA00038888080700001912
04和
Figure BDA00038888080700001913
09b联用可进一步促进这种复制，因此，这种联用可通过防止病毒在鼻内的增殖而在治疗功效上发挥协同作业。这与含有c-di-GMP的佐剂在感染前招募更多的活化NK细胞(图9C)、炎性单核细胞(图9D)和中性粒细胞(图9E)的能力有关。只有
Figure BDA00038888080700001914
09b+c-di-GMP显著增加了巨噬细胞(图9F)和树突状细胞(图9G)的水平。
实施例10–
Figure BDA00038888080700001915
09b和SARS-CoV-2
将叙利亚金黄仓鼠(Syrian Gold Hamster)用
Figure BDA00038888080700001916
09b经鼻治疗两次，间隔3天。在第一次免疫5天后，地鼠接受SARS-CoV-2感染(1.9x105TCID50)。对体重监测7天，作为健康状况的指标。未接受
Figure BDA00038888080700001917
09b治疗的仓鼠体重下降幅度明显大于
Figure BDA00038888080700001918
109b治疗组，并且在第7天没有恢复体重，这就是
Figure BDA00038888080700001919
09治疗组的情况(图10)。
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11.Virology.2009 Dec 20；395(2):210–222.

Claims (34)

1.一种脂质体组合物，包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)和至少一种免疫调节剂，作为药物用于受试者。
2.一种脂质体组合物，包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)和至少一种免疫调节剂，用于预防或治疗受试者中呼吸道的病原性感染。
3.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)和单分枝酰基甘油(MMG)。
4.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括或包含1-3mg/ml DDA和0.1-1.0mg/ml MMG。
5.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括2.5mg/ml DDA和0.5mg/ml MMG。
6.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)、单分枝酰基甘油(MMG)和至少一种其他免疫调节剂。
7.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述免疫调节剂是聚肌苷酸:聚胞苷酸(聚(I:C))，优选合成的双链聚(I:C)RNA类似物。
8.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，进一步包括或包含0.05-1.0mg/ml聚(I:C)，优选0.1-0.5mg/ml聚(I:C)，例如0.5mg/ml聚(I:C)。
9.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，包括0.125mg/ml聚(I:C)。
10.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)、单分枝酰基甘油(MMG)、聚(I:C)和至少一种其他免疫调节剂。
11.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述免疫调节剂选自STING激动剂，例如cGAMP、cAMP、c-di-AMP、cGMP和c-di-GMP；TLR2激动剂，例如酵母聚糖；TLR3激动剂，例如双链核糖核酸(dsRNA)，例如聚肌苷酸：聚胞苷酸(聚(I:C))；TLR4激动剂，例如MPL-A；TLR5激动剂，例如鞭毛蛋白；TLR7/8激动剂，例如雷西莫特、咪喹莫特、嘎德莫特；还包括脂化类似物、C型凝集素受体，例如索因子(TDM)或合成的类似物TDB、核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)受体激动剂，如MDP。
12.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括免疫调节剂c-di-GMP，优选浓度为0.05-0.2mg/ml，尤其优选0.1mg/ml。
13.根据权利要求12所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)、单分枝酰基甘油(MMG)和c-di-GMP。
14.根据权利要求12所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括阳离子脂质二甲基双十八烷基铵(DDA)、单分枝酰基甘油(MMG)、聚(I:C)和c-di-GMP。
15.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述病原性感染选自病毒感染和细菌感染。
16.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述病原性感染是呼吸道中的感染，例如上呼吸道或下呼吸道。
17.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述病原性感染是由病毒引起的呼吸道的病毒感染，所述病毒选自细小核糖核酸病毒、鼻病毒、冠状病毒、例如MERS冠状病毒、SARS冠状病毒、例如SARS-CoV-2、流感病毒、人副流感病毒、人呼吸道合胞病毒、腺病毒、肠病毒和偏肺病毒。
18.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述病原性感染是由细菌引起的呼吸道的细菌感染，所述细菌选自肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、化脓性链球菌(Streptococcus pyrogenes)、流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza)、卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis)和分枝杆菌，例如结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)、非洲分枝杆菌(M.africanum)、卡氏分枝杆菌(M.canetti)、田鼠分枝杆菌(M.microti.)、伯克霍尔德氏菌(BurkholderiaSp.)。
19.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述免疫调节剂选自能够发出信号以抑制病毒复制的免疫调节剂，或者能够发出信号以激活或招募消除病原体的促炎细胞，例如粒细胞、巨噬细胞和NK细胞的免疫调节剂。
20.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中单分枝酰基甘油(MMG)是类似物3-羟基-2-十四烷基-十八烷酸-2,3-二羟基丙酯。
21.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中DDA是二甲基双十八烷基溴化铵。
22.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其不包括抗原。
23.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物包括至少一种其他佐剂或免疫调节剂。
24.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物通过全身给药、鼻腔给药和/或肺部给药来施用。
25.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物同时通过全身给药和鼻腔给药来施用。
26.根据前述权利要求中任一权利要求所述使用的脂质体组合物，其中在暴露于病原体后通过鼻腔和/或肺部给药来施用所述脂质体组合物，以治疗呼吸道的早期感染。
27.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中通过鼻腔和/或肺部给药来施用所述脂质体组合物，以预防呼吸道的感染。
28.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述脂质体组合物每周施用两次或三次。
29.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述受试者选自所有年龄段的人、其他灵长类动物(例如食蟹猴、恒河猴)；一般哺乳动物，包括商业相关哺乳动物，例如牛、猪、马、绵羊、山羊、猫和狗，以及鸟。
30.根据前述权利要求中任一项所述的供使用的脂质体组合物，其中所述受试者是人。
31.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述受试者是气道免疫受损/降低的个体。
32.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述受试者患有选自慢性阻塞性肺疾病、哮喘、囊性纤维化、肺癌和糖尿病的疾病。
33.根据前述权利要求中任一项所述使用的脂质体组合物，其中所述受试者具有吸烟史或是当前吸烟者。
34.一种鼻腔给药装置，包括如前述权利要求中任一项所述的脂质体组合物。
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