CN115508509B - 一种大豆苗期耐低氮能力评价方法 - Google Patents

一种大豆苗期耐低氮能力评价方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，包括如下步骤：设计低氮处理和正常氮肥处理，盆栽种植大豆种质资源，处理24天；获取大豆苗期的第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值、株高、地上部鲜重、地上部干重、根干重、总重、根冠比，计算大豆种质资源的耐低氮系数LNTCm；对步骤2中各待测大豆种质资源的9个指标对应的耐低氮系数LNTCm进行主成分分析，获取每个主成分耐低氮能力综合指标的隶属函数值，根据其贡献率求出其权重，然后获取得到不同大豆种质资源耐低氮能力的综合评价值D值；鉴定筛选大豆种质资源的耐低氮能力，并根据耐低氮能力评价指标筛选出耐低氮能力强的种质资源。

Description

一种大豆苗期耐低氮能力评价方法
技术领域
本发明涉及一种大豆苗期耐低氮能力评价方法技术领域，尤其涉及一种大豆苗期耐低氮能力评价方法。
背景技术
大豆是我国传统的粮食油料兼用作物，种植面积排在水稻、玉米、小麦之后。2021年，全国大豆播种面积1.56亿亩、产量2095.7万吨。大豆为喜氮作物，在其生产发育过程中需要大量的氮素。每生产100kg大豆，约需要氮素7.2kg，相当于禾谷类作物的2-3倍。大豆根瘤具有共生固氮功能，可使氮气转化为氨态氮，从而被植株吸收和利用。共生固氮所产生的氮，可满足植株60％-70％的需求。但在大豆苗期，大豆根瘤数量还较少，发育不完全，共生固氮量也较少。因此，土地和化肥中的氮素才是大豆苗期重要氮素来源。
为了获得更高的产量与品质，土壤肥力高、农业发达区往往存在过多施氮现象。氮肥的过量使用，既可能导致大豆共生固氮效率降低，又可能导致土壤酸化。而土壤贫瘠区往往施氮量不够，致使植株又矮又细，叶片薄而小，叶色黄化或变成淡绿色等，单产水平也较低。总体来讲我国大豆生产中氮素利用率普遍偏低，仅为30％左右，远低于世界平均水平。近年，就氮肥过量施用区，国家推出减肥增效政策，对大豆而言减肥不减产更为重要。所以开展大豆种质资源耐低氮能力评价，筛选到耐低氮能力强的种质资源，是解决土壤缺氮及减肥增产的关键，对促进大豆产业的可持续性发展具有重要意义。
利用耐低氮能力强大豆种质资源是降低氮肥用量、有效利用肥料资源、减少环境污染、降低生产成本和提高大豆品质的最有效途径之一。远月丽等对大豆氮高效种质资源的筛选与鉴定中以78份大豆种质资源为材料，采用水培养法，最终以总干重、整株氮含量、整株总氮、总根长、根体积和根表面积6个指标作为大豆耐低氮指标。郝青南等通过选取不同原产地、具有代表性的大豆种质资源147个，进行水培养法对大豆耐低氮品种筛选，认为以总干重、生物量积累、地上氮积累量以及氮吸收量4个指标可以作为大豆苗期耐低氮评价指标。李小红等通过水培方法研究大豆苗期不同部位叶片SPAD值对不同氮素浓度培养液的响应来进行筛选大豆耐低氮种质，发现以真叶、第二复叶、顶一叶和顶二叶的SPAD值作为大豆苗期耐低氮种质筛选指标较好。
上述研究者均利用水培法在室内进行大豆资源的耐低氮能力鉴定，由于叶绿素含量与光照密切相关，室内环境与室外自然光照差距很大，所测叶绿素含量、干物质等不是自然环境下直观值。此外，上述研究者的鉴定指标不统一，不适宜进行大规模的耐低氮性鉴定。
因此，当前迫切需要构建一套科学、合理、符合生产实际需求的耐低氮大豆种质规模化评价体系，为耐低氮能力大豆材料规模化鉴定评价提供必要的实践依据。
发明内容
为了克服上述现有技术的缺点，本发明的主要目的在于提供一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，解决的技术问题是鉴定筛选大豆种质资源的耐低氮能力，并根据耐低氮能力评价指标筛选出耐低氮能力强的种质资源。将选到的耐低氮大豆种质资源作为亲本，应用于在低氮土壤下大豆新品种的遗传改良，从而加速耐低氮大豆新品种的改良进程。
为达到上述目的，本发明采用以下技术方案，一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，包括如下步骤：
对盆栽种植大豆种质资源进行低氮处理和正常氮肥处理，获取多个指标的低氮处理性状值和对照性状值；
根据低氮处理性状值和对照性状值的比值获得大豆种质资源的多个耐低氮系数LNTC；
分别对待测大豆种质资源的多个指标对应的耐低氮系数LNTC，进行主成分分析，获取多个由每个主成分耐低氮能力组成的耐低氮能力综合指标的隶属函数值与贡献率；
根据贡献率求出每个耐低氮能力综合指标的权重；
根据每个主成分耐低氮能力综合指标的各个权重与对应的隶属函数值的乘积获得各种质资源耐低氮能力的综合评价值，其中，综合评价值越大，大豆种质资源的耐低氮能力越强。
优选地，所述大豆种质资源的耐低氮系数LNTC具体为：
LNTCm＝低氮处理性状值/对照性状值，其中m为第几个指标。
其中，多个指标分别为第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值、株高、地上部鲜重、地上部干重、根干重、总干重、根冠比的数据值；
LNTCm越小表明第m性状对低氮处理越敏感，LNTCm越大表明第m性状对低氮处理不敏感，当某份种质资源的多个性状值耐低氮系数LNTC均大于设定值时，表明该份资源耐低氮能力强。
优选地，所述隶属函数值的计算公式：
u(Xj)＝(Xj-Xmin)/(Xmax-Xmin)              (1)
式中，j＝1，2，3，…，n，u(Xj)表示表示第j个综合指标的隶属函数值,Xj表示第j个综合指标的耐低氮系数，Xmax表示第j个综合指标耐低氮系数的最大值，Xmin表示第j个综合指标耐低氮系数的最小值；
Figure BDA0003849131540000031
式中，j＝1，2，3，…，n，wj表示第j个综合指标在所有综合指标中的重要程度即权重,pj为各大豆基因型第j个综合指标的贡献率；
Figure BDA0003849131540000032
式中，j＝1，2，3，…，n，D值为各种质资源耐低氮能力的综合评价值。
优选地，还包括将耐低氮能力综合评价值D值进行聚类分析，将耐低氮能力能接近的种质资源聚到一起进行后分类，按照耐低氮能力强耐、耐、中耐、不耐、极不耐进行分类。
优选地，采用SPSS22.0软件进行主成分分析，对第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值、株高、地上部鲜重、地上部干重、根干重、总干重、根冠比的耐低氮系数LNTC9个单项指标的原始数据进行降维处理，获得2～3个独立的耐低氮综合指标。
优选地，所述步骤二中，第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值用SPAD502仪测定，株高用直尺测定，地上部鲜重、地上部干重、根干重用万分之一天平称量。
优选地，所述步骤一中的种植要求为：盆栽试验，培养介质为灭菌的蛭石和珍珠岩，混合比例为2:1，将盆放在周转箱内，每个周转箱可放28个盆，盆的规格为9cm×9cm×10cm，周转箱规格为70cm×42cm×22cm,鉴定材料随机排列，设置低氮组和对照处理组，所述低氮组的氮浓度为0.75mM，所述对照处理组的氮浓度为7.5mM，每个处理3次重复，每次重复4盆，每盆留苗1株。
与现有技术相比较，本发明的有益效果为：
(1)近年对大豆种质缺氮胁迫的研究多以土培、沙培为主，本方法用灭菌的蛭石和珍珠岩为栽培介质进行低氮处理，既可以精确控制氮素的总量与形态配比，又避免了土壤中固有养分和固氮菌的干扰，可以精确地从遗传特性上评价种质耐低氮能力。
(2)此外还有研究者利用水培法在室内进行大豆资源的耐低氮性鉴定，由于叶绿素含量与光照密切相关，室内环境与室外自然光照差距很大，所测叶绿素含量不能充分体现低氮处理的响应值，本方法与水培相比更符合大豆实际种植环境，且能更大通量的对种质资源进行鉴定。
(3)对SPAD值、根干重等9个氮效率相关指标进行测量，通过各性状指标的相对值计算综合评价D值可精准评价种质资源的耐低氮性。
(4)以往研究大豆缺氮胁迫后对植株叶绿素的损伤，多以测量其绝对值的方式耗时耗力，本方法采用SPAD叶绿素含量测定仪及无人机多光谱相机进行测量，可直观反应植株受到胁迫后的叶绿素水平的变化，既保证了植株的无损又能够第一时间判断植株对缺氮的响应。
附图说明
图1是本发明中实施例中大豆苗期耐低氮的相关性分析；
图2是本发明中实施例中大豆苗期耐低氮能力综合评价指标D值得聚类图；
图3是本发明中流程图。
具体实施方式
下面结合附图和实施方式对本发明作进一步说明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备，除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
实施例1
参阅图-3，一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，包括如下步骤：
对盆栽种植大豆种质资源进行低氮处理和正常氮肥处理，获取多个指标的低氮处理性状值和对照性状值；
根据低氮处理性状值和对照性状值的比值获得大豆种质资源的多个耐低氮系数LNTC；
分别对待测大豆种质资源的多个指标对应的耐低氮系数LNTC，进行主成分分析，获取多个由每个主成分耐低氮能力组成的耐低氮能力综合指标的隶属函数值与贡献率；
根据贡献率求出每个耐低氮能力综合指标的权重；
根据每个主成分耐低氮能力综合指标的各个权重与对应的隶属函数值的乘积获得各种质资源耐低氮能力的综合评价值，其中，综合评价值越大，大豆种质资源的耐低氮能力越强。
作为本发明的进一步优化，对其中大豆种质资源的耐低氮系数LNTC具体为：
LNTCm＝低氮处理性状值/对照性状值，其中m为第几个指标。
其中，多个指标分别为第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值、株高、地上部鲜重、地上部干重、根干重、总干重、根冠比的数据值；
LNTCm越小表明第m性状对低氮处理越敏感，LNTCm越大表明第m性状对低氮处理不敏感，当某份种质资源的多个性状值耐低氮系数LNTC均大于设定值时，表明该份资源耐低氮能力强。
作为本发明的进一步优化，更为具体的还包括：
u(Xj)＝(Xj-Xmin)/(Xmax-Xmin)            (1)
式中，j＝1，2，3，…，n，u(Xj)表示表示第j个综合指标的隶属函数值，Xj表示第j个综合指标的耐低氮系数，Xmax表示第j个综合指标耐低氮系数的最大值，Xmin表示第j个综合指标耐低氮系数的最小值；
Figure BDA0003849131540000061
式中，j＝1，2，3，…，n，wj表示第j个综合指标在所有综合指标中的重要程度即权重,pj为各大豆基因型第j个综合指标的贡献率；
Figure BDA0003849131540000062
式中，j＝1，2，3，…，n，D值为各种质资源耐低氮能力的综合评价值。
作为本发明的进一步优化，需要进行分类，将耐低氮能力综合评价值D值进行聚类分析，将耐低氮能力能接近的种质资源聚到一起进行后分类，按照耐低氮能力强耐、耐、中耐、不耐、极不耐进行分类。
作为本发明的进一步优化，采用SPSS22.0软件进行主成分分析，对第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值、株高、地上部鲜重、地上部干重、根干重、总干重、根冠比的耐低氮系数(LNTC)9个单项指标的原始数据进行降维处理，获得2～3个独立的耐低氮综合指标。
作为本发明的进一步优化，在步骤二中，第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值用SPAD502仪测定，株高用直尺测定，地上部鲜重、地上部干重、根干重用万分之一天平称量。
作为本发明的进一步优化，本实施例中，步骤一中的种植要求为：盆栽试验，培养介质为灭菌的蛭石和珍珠岩，混合比例为2:1，将盆放在周转箱内，每个周转箱可放28个盆，盆的规格为9cm×9cm×10cm，周转箱规格为70cm×42cm×22cm。鉴定材料随机排列，设置低氮(氮浓度0.75mM)和对照处理(氮浓度7.5mM)，每个处理3次重复，每次重复4盆，每盆留苗1株。
实施例2
实施例1的基础上，对一种大豆苗期耐低氮能力评价方法的进行试验，具体实现步骤为：
1.材料与仪器设备
1.1参试大豆材料
收集保存的大豆种质资源300份，来源于黑龙江省126份、吉林省111份、辽宁省37份以及其他地区26份，品种编号依次为A001-A300。
表1参试大豆种质资源信息
Figure BDA0003849131540000071
Figure BDA0003849131540000081
1.2主要化学试剂
KCl，K2HPO4·3H2O，MgSO4·7H2O，EDTA铁钠盐，硼酸，MnSO4·H2O，CuSO4，ZnSO4·H2O，Na2MO4·2H2O，Ca(NO3)2·4H2O，KNO3，NH4NO3，CaCl2·2H2O，K2SO4。
1.3主要仪器设备
灭菌锅，电子天平，pH计，搅拌桶，SPAD502仪，烘箱。
2.方法
2.1试验设计
盆栽试验，培养介质为灭菌的蛭石和珍珠岩，混合比例为2:1。将盆放在水管联通的周转箱内，每个周转箱可放28个盆。周转箱规格为70cm×42cm×22cm，盆的规格为9cm×9cm×10cm。鉴定材料随机排列，3次重复，每次重复4盆，每盆留苗1株。
2.2鉴定材料种植
选取颗粒饱满、无损伤的大豆种子48粒，用次氯酸钠与盐酸反应产生的氯气进行种子消毒。消毒后，将种子直播于装有灭菌的蛭石和珍珠岩的盆中，每盆1穴播2粒，出苗后保苗1株。
2.3处理方法
共设置2组处理，分别为对照组(营养液氮浓度7.5mM)和低氮处理组(氮浓度0.75mM)。使用改良Hoagland缺氮营养液，配方如下：
KCl 152.828mg/L，K2HPO4·3H2O 456.638mg/L，MgSO4·7H2O 246.480mg/L，EDTA铁钠盐11.170mg/L，硼酸1.546mg/L，MnSO4·H2O 0.338mg/，CuSO4 0.125mg/L，ZnSO4·H2O0.576mg/L，Na2MO4·2H2O 0.102mg/L。使用时配置浓度为0.635g/L；对照组添加Ca(NO3)2·4H2O 0.472g/L，KNO3 0.253g/L，NH4NO3 0.040g/L作为氮源；处理组用量为Ca(NO3)2·4H2O 0.047g/L，KNO3 0.025g/L，NH4NO3 0.004g/L，并添加CaCl2·2H2O 0.265g/L，K2SO40.392g/L补充钙元素与钾元素。
2.4耐低氮性状测定的方法
第一节位复叶、第二节位复叶、第三节位复叶的叶绿素含量：采用SPAD502仪叶绿素含量测定。
株高测定：使用直尺测量从子叶节点至生长点的长度。
生物量测定：将植株在子叶痕处剪断分为地上部和根部，用万分之一天平称量地上部鲜重，然后分别装入纱网袋，烘箱110度杀青10分钟，然后60度烘干至衡重，用万分之一天平准确称量地上部分、根干重。
总干重＝地下部分干重+地上部分干重
根冠比＝地下部分干重/地上部分干重
2.5耐低氮能力评价
利用低氮处理下测得的第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值用SPAD502仪测定，株高用直尺测定，地上部鲜重、地上部干重、根干重、总干重、根冠比值除以对照处理下测得对应指标，计算大豆种质资源的多个测定指标的耐低氮系数LNTC。
对9个耐低氮系数LNTC通过DPS软件的主成分分析模块统计分析，利用公式(1)求出每个主成分耐低氮能力综合指标的隶属函数值与贡献率，贡献率含义是9个耐低氮系数评价结果定义为100％，但9个耐低氮系数由于存在相关关系，可利用关键，将有相关性指标综合到一起，成为综合指标，将9个指标简化为2-3个综合指标，然后综合指标就9个人耐低氮系数评价结果所占的百分比，即为这个综合指标的贡献率，再利用公式(2)根据其贡献率求出其权重，然后利用公式(3)得到不同大豆种质资源耐低氮能力的综合评价值D值，并对D值进行排序；D值越大，说明大豆种质资源的耐低但能力越强；
u(Xj)＝(Xj-Xmin)/(Xmax-Xmin)                      (1)
式中，j＝1，2，3，…，n，u(Xj)表示表示第j个综合指标的隶属函数值，Xj表示第j个综合指标的耐低氮系数，Xmax表示第j个综合指标耐低氮系数的最大值，Xmin表示第j个综合指标耐低氮系数的最小值
Figure BDA0003849131540000101
式中j＝1，2，3，…，n，wj表示第j个综合指标在所有综合指标中的重要程度即权重,pj为各大豆基因型第j个综合指标的贡献率；
Figure BDA0003849131540000102
式中，j＝1，2，3，…，n，D值为各种质资源耐低氮能力的综合评价值。
数据处理
运用Microsoft Excel 2007进行数据处理和作图，使用IBM SPSS 22.0软件进行主成分分析和聚类分析，评价各大豆种质资源苗期的耐低氮能力。
3.1低氮处理下大豆种质资源苗期的性状差异
对300份大豆种质资源进行盆栽试验，参试的大豆种质资源在两个供氮水平中差异明显，各指标均呈现显著变化。
大豆不同株系的苗期性状差异主要呈现为SPAD值降低，株高减小，地上部生物量减少，地下部生物量增加，根冠比变大。
通过分析耐低氮系数初步评价各大豆种质资源的耐低氮能力。结果表示(表2)，第一、第二、第三节位复叶SPAD值(SPADV1，SPADV2，SPADV3)、株高、地上部鲜重、地上部干重、地下部干重以及总干重8个指标的平均值在低氮处理条件下均低于正常氮情况下，表明低氮处理对大豆的生长发育存在影响。在正常氮和无氮处理条件下，大豆各项筛选指标都表现出一定的变异并且各筛选指标的变异幅度相差较大。
9个指标在两种氮处理下变异系数均大于10％，说明大豆不同基因型的耐低氮特性存在较大差异，300份种质在不同氮处理特性存在较大差异。
表2两种氮处理下大豆的苗期性状差异
Figure BDA0003849131540000111
3.2相关性分析
对所测定的9个指标进行相关性分析结果表明参阅图1,SPADV1与SPADV2、SPADV3呈极显著正相关，与株高(PH)、地上部鲜重(SFW)呈极显著负相关关系；SPADV2与SPADV3呈极显著正相关关系，与株高(PH)、地上部鲜重(SFW)、地上部干重(SDW)、根干重(RDW)、总干重(TDW)呈极显著负相关；SPADV3与根干重(RDW)、总干重(TDW)、根冠比(RSR)呈极显著负相关；株高(PH)和地上部鲜重(SFW)、地上部干重(SDW)、总干重TDW)呈极显著正相关，与根冠比(RSR)呈极显著负相关；地上部鲜重(SFW)与地上部干重(SDW)、根干重(RDW)、总干重(TDW)呈极显著正相关，与根冠比(RSR)呈极显著负相关；地上部干重(SDW)与根干重(RDW)、总干重(TDW)呈极显著正相关。以上表明这9个可作为筛选大豆耐低氮品种的指标，但多指标间相关性存在显著或极显著水平，所提供的耐低氮信息具有重叠性。
表3大豆种质资源苗期耐低氮系数的主成分分析
Figure BDA0003849131540000112
Figure BDA0003849131540000121
3.4苗期耐低氮能力综合评价指标D值
利用(公式1)求出每个主成分苗期耐低氮能力综合指标的隶属函数值，根据每个综合指标的贡献率求出其权重(公式2)，从而得到参试种质资源抗倒性的综合评价D值(公式3)，并对D值进行排序，D值越大，说明参试种质资源的苗期综合耐低氮能力越强(表4)。
由表4可知，300份大豆种质资源耐低氮能力存在显著差异，其中黑生101(编号218)的耐低氮能力最强，吉林小粒豆(编号192)耐低但能力最弱。
表4 300份种质资源耐低氮能力综合评价D值及排序
Figure BDA0003849131540000122
Figure BDA0003849131540000131
3.5苗期耐低氮能力综合评价D值的聚类分析
利用耐低氮综合评价值D对300份大豆种质资源进行聚类分析，将300份种质资源分为耐低氮能力强耐(Resistant)、耐(Relatively Resistant)、中耐(Middle)、不耐(MoreSenstive)、极不耐(Senstive)5个类群(图2)。由图2可知耐低氮能力为强耐的种质资源有12份，占比4.0％,有黑生101(编号218)、黑河29(编号2)、黑河27(编号3)等。耐低氮能力为耐的种质资源有100份，占比33.3％,有黑河25(编号1)、吉育67(编号5)、九农21(编号24)等。耐低氮能力为中耐的种质资源有79份，占比26.3％,有绥农14(编号10)、六十天还仓(编号11)、庆安黑豆(编号13)等。耐低氮能力为不耐的种质资源有105份，占比35.0％,有北丰11(编号4)、黑河4号(编号6)、克北1号(编号7)等。耐低氮能力为极不耐的种质资源有4份，占比1.3％,有吉小粒8号(编号185)、华力1号(编号188)、吉育508(编号191)等。表明本发明苗期耐低氮能力鉴定评价结果具有较好的可靠性，可为进一步的大田种植提供参考。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
以上实施例仅仅是对本发明的举例说明，并不构成对本发明的保护范围的限制，凡是与本发明相同或相似的设计均属于本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，其特征在于，包括如下步骤：
对盆栽种植大豆种质资源分别进行低氮处理和正常氮肥处理，获取多个指标的低氮处理性状值和对照性状值；其中，所述盆栽种植大豆的种植要求为：盆栽试验，培养介质为灭菌的蛭石和珍珠岩，混合比例为2:1；所述多个指标分别为第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值、株高、地上部鲜重、地上部干重、根干重、总干重、根冠比的数据值；
根据低氮处理性状值和对照性状值的比值获得大豆种质资源的多个耐低氮系数LNTC；
分别对待测大豆种质资源的多个指标对应的耐低氮系数LNTC进行主成分分析，获取多个由每个主成分耐低氮能力组成的耐低氮能力综合指标的隶属函数值与贡献率；
根据贡献率求出每个耐低氮能力综合指标的权重；
根据每个主成分耐低氮能力综合指标的各个权重与对应的隶属函数值的乘积获得各种质资源耐低氮能力的综合评价值D值，其中，综合评价值越大，大豆种质资源的耐低氮能力越强。
2.根据权利要求1所述一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，其特征在于，所述大豆种质资源的耐低氮系数LNTC具体为：
LNTCm＝低氮处理性状值/对照性状值，其中m为第几个指标；
其中，LNTCm越小表明第m性状对低氮处理越敏感，LNTCm越大表明第m性状对低氮处理不敏感，当某份种质资源的多个性状值耐低氮系数LNTC均大于设定值时，表明该份资源耐低氮能力强。
3.根据权利要求1所述一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，其特征在于，所述隶属函数值的计算公式：
u(Xj)＝(Xj-Xmin)/(Xmax-Xmin)    (1)
式中，j＝1，2，3，…，n，u(Xj)表示表示第j个综合指标的隶属函数值，Xj表示第j个综合指标的耐低氮系数，Xmax表示第j个综合指标耐低氮系数的最大值，Xmin表示第j个综合指标耐低氮系数的最小值；
Figure FDA0004110775590000011
式中，j＝1，2，3，…，n，wj表示第j个综合指标在所有综合指标中的重要程度即权重,pj为各大豆基因型第j个综合指标的贡献率；
Figure FDA0004110775590000012
式中，j＝1，2，3，…，n，D值为各种质资源耐低氮能力的综合评价值。
4.根据权利要求1所述一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，其特征在于，还包括将耐低氮能力的综合评价值D值进行聚类分析，将耐低氮能力能接近的种质资源聚到一起进行后分类，按照耐低氮能力强耐、耐、中耐、不耐、极不耐进行分类。
5.根据权利要求1所述一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，其特征在于，采用SPSS22.0软件进行主成分分析，对第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值、株高、地上部鲜重、地上部干重、根干重、总干重、根冠比的耐低氮系数LNTC9个单项指标的原始数据进行降维处理，获得2～3个独立的耐低氮综合指标。
6.根据权利要求2所述一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，其特征在于，所述第一节位复叶SPAD值、第二节位复叶SPAD值、第三节位复叶SPAD值用SPAD 502仪测定，株高用直尺测定，地上部鲜重、地上部干重、根干重用万分之一天平称量。
7.根据权利要求1所述一种大豆苗期耐低氮能力评价方法，其特征在于，所述盆栽种植大豆，将盆放在周转箱内，每个周转箱可放28个盆，盆的规格为9cm×9cm×10cm，周转箱规格为70cm×42cm×22cm,鉴定材料随机排列，设置低氮组和对照处理组，所述低氮组的氮浓度为0.75mM，所述对照处理组的氮浓度为7.5mM，每个处理3次重复，每次重复4盆，每盆留苗1株。
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