CN115427009A - 皮肤抗老化剂、用于皮肤抗老化的美容方法及用于使用于该方法的美容装置 - Google Patents
皮肤抗老化剂、用于皮肤抗老化的美容方法及用于使用于该方法的美容装置 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115427009A CN115427009A CN202180022669.9A CN202180022669A CN115427009A CN 115427009 A CN115427009 A CN 115427009A CN 202180022669 A CN202180022669 A CN 202180022669A CN 115427009 A CN115427009 A CN 115427009A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- skin
- cells
- stimulus
- cosmetic
- yap
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 89
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 title claims abstract description 74
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 title claims abstract description 50
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title claims abstract description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 94
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims abstract description 84
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 claims abstract description 65
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 claims abstract description 65
- 210000003518 stress fiber Anatomy 0.000 claims abstract description 54
- 230000030648 nucleus localization Effects 0.000 claims abstract description 45
- 229920000617 arabinoxylan Polymers 0.000 claims abstract description 18
- UGXQOOQUZRUVSS-ZZXKWVIFSA-N [5-[3,5-dihydroxy-2-(1,3,4-trihydroxy-5-oxopentan-2-yl)oxyoxan-4-yl]oxy-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl (e)-3-(4-hydroxyphenyl)prop-2-enoate Chemical compound OC1C(OC(CO)C(O)C(O)C=O)OCC(O)C1OC1C(O)C(O)C(COC(=O)\C=C\C=2C=CC(O)=CC=2)O1 UGXQOOQUZRUVSS-ZZXKWVIFSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 9
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 229
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 claims description 77
- 238000003825 pressing Methods 0.000 claims description 36
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 claims description 21
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 12
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 12
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 238000009223 counseling Methods 0.000 claims description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 3
- 150000004783 arabinoxylans Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract description 7
- 101000759453 Homo sapiens YY1-associated protein 1 Proteins 0.000 description 94
- 102100023267 YY1-associated protein 1 Human genes 0.000 description 94
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 55
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 17
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 12
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 11
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 11
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 10
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 10
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 10
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 9
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 9
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 8
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 6
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 5
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 5
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 5
- 239000002932 luster Substances 0.000 description 5
- 238000007665 sagging Methods 0.000 description 5
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 5
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 4
- 229920002595 Dielectric elastomer Polymers 0.000 description 4
- 238000001061 Dunnett's test Methods 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N Phalloidin Chemical compound N1C(=O)[C@@H]([C@@H](O)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C[C@@](C)(O)CO)NC(=O)[C@H](C2)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](O)CN3C(=O)[C@@H]1CSC1=C2C2=CC=CC=C2N1 KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N 0.000 description 4
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 4
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 4
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 3
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108010009711 Phalloidine Proteins 0.000 description 2
- 102100031873 Transcriptional coactivator YAP1 Human genes 0.000 description 2
- 108700038175 YAP-Signaling Proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- -1 and/or the like Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 210000000245 forearm Anatomy 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- UWJJYHHHVWZFEP-UHFFFAOYSA-N pentane-1,1-diol Chemical compound CCCCC(O)O UWJJYHHHVWZFEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 2'-(4-ethoxyphenyl)-5-(4-methylpiperazin-1-yl)-2,5'-bibenzimidazole Chemical compound C1=CC(OCC)=CC=C1C1=NC2=CC=C(C=3NC4=CC(=CC=C4N=3)N3CCN(C)CC3)C=C2N1 PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 235000005781 Avena Nutrition 0.000 description 1
- 241000209761 Avena Species 0.000 description 1
- 238000000116 DAPI staining Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002488 Hemicellulose Polymers 0.000 description 1
- 101000775102 Homo sapiens Transcriptional coactivator YAP1 Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 235000005205 Pinus Nutrition 0.000 description 1
- 241000218602 Pinus <genus> Species 0.000 description 1
- ISRUGXGCCGIOQO-UHFFFAOYSA-N Rhoden Chemical compound CNC(=O)OC1=CC=CC=C1OC(C)C ISRUGXGCCGIOQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710193680 Transcriptional coactivator YAP1 Proteins 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000003679 aging effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000032677 cell aging Effects 0.000 description 1
- 230000011382 collagen catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 229920001940 conductive polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000011263 electroactive material Substances 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000004299 exfoliation Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008269 hand cream Substances 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000007373 indentation Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000003632 microfilament Anatomy 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 239000012120 mounting media Substances 0.000 description 1
- 238000012758 nuclear staining Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000011814 protection agent Substances 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61H—PHYSICAL THERAPY APPARATUS, e.g. DEVICES FOR LOCATING OR STIMULATING REFLEX POINTS IN THE BODY; ARTIFICIAL RESPIRATION; MASSAGE; BATHING DEVICES FOR SPECIAL THERAPEUTIC OR HYGIENIC PURPOSES OR SPECIFIC PARTS OF THE BODY
- A61H23/00—Percussion or vibration massage, e.g. using supersonic vibration; Suction-vibration massage; Massage with moving diaphragms
- A61H23/02—Percussion or vibration massage, e.g. using supersonic vibration; Suction-vibration massage; Massage with moving diaphragms with electric or magnetic drive
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9794—Liliopsida [monocotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rehabilitation Therapy (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
本发明提供一种皮肤抗老化剂，其特征在于，包含阿拉伯糖基木聚糖作为有效成分，其使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加。此外，本发明提供包含向对象的皮肤应用包含阿拉伯糖基木聚糖作为有效成分的皮肤抗老化剂的工序的美容方法、和用于应用于该方法的美容装置。
Description
技术领域
本发明涉及皮肤抗老化剂、用于皮肤抗老化的美容方法、以及用于应用于该方法的美容装置。
背景技术
皮肤老化为包含年龄增长、激素、代谢等内部因素、和紫外线、干燥等外部因素在内各种因素介于其中的皮肤的变化。皮肤老化也有时可以由例如斑、皱纹、松弛、萎黄(しぼみ)等外观来判断，例如，也有时皮肤内部组织的结构、构成成分的变化这样的眼睛看不到的老化进行。这样的老化往往趁着没有发觉而进行因此难以采取预防措施。采取用于预防/改善皮肤老化的适当的对策是重要的。
这里，目前，存在各种美容方法。例如，专利文献1公开了引起角质物质的位移的电活性材料致动器。专利文献2公开了在使皮肤伸展了的状态下进行光照射的光照射美容器具。专利文献3公开了将使皮下脂肪细胞伸展的拉伸、与混配了脂肪蓄积抑制成分和/或脂肪细胞分化抑制成分的皮肤外用剂组合了的使皮下脂肪减少的瘦身方法。专利文献4公开了含有燕麦属植物的提取物、或松豆属植物的提取物的介由伸展刺激的胶原分解酶生成抑制剂。专利文献5公开了起因于伸展应力的皱纹改善剂或NF-κB活性抑制剂。在非专利文献1中，推荐了65～85Hz的机械刺激。此外，在与非专利文献1所记载的装置相关的专利文献6中，公开了以约65～约120Hz这样的频率刺激皮肤的末端执行器。
然而，在从皮肤表面给与刺激的情况下对作为表层部分的表皮首先施加刺激，因此具有对表皮造成破坏这样的问题。此外，在表皮紧下方也存在结构上非常特征性的基底膜(波动结构)，可以认为受到机械刺激的可能性高。实际上通过现有文献也报导了通过给与物理刺激从而表层大幅变化(非专利文献2)。因此，要求对包含表皮、基底膜的皮肤发挥令人满意的抗老化作用的皮肤抗老化剂、方法和装置。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特表2011-505897号公报
专利文献2：日本特开2009-28271号公报
专利文献3：日本特开2015-127315号公报
专利文献4：日本特开2011-162507号公报
专利文献5：日本特开2014-108924号公报
专利文献6：日本特表2018-501000号公报
非专利文献
非专利文献1：Caberlotto et al.PLoS One.2017Mar 1；12
非专利文献2：Naruse et al.PLoS One.2015Nov 3；10
非专利文献3：Furukawa et al.,2017,Cell Reports 20,1435-1447
非专利文献4：Cell Death and Disease(2014)5,e1519；doi:10.1038/cddis.2014.476
非专利文献5：Current Biology Vol 24 No 17m 8September 2014,Pages 2012-2017
非专利文献6：Nature Communications volume 8,Article number:15206(2017)
非专利文献7：Development 138,3907-3914(2011)doi:10.1242/dev.0709872017
非专利文献8：Cell Reports 19,1495-1502,May 23,2017
非专利文献9：Nature Communications volume 9,Article number:2961(2018)；DOI:10.1038/s41467-018-05388-x
非专利文献10：Nature Cell Biology volume 20,pages262-271(2018)
非专利文献11：Trends Cell Biol.2018Jul；28(7):560-573.doi:10.1016/j.tcb.2018.03.001
非专利文献12：Nature Communications volume 8,Article number:15206(2017；DOI:10.1038/ncomms15206
非专利文献13：Cancer Res；73(12)June 15,2013；DOI:10.1158/0008-5472.CAN-12-3793
非专利文献14：COHELISS(注册商标),The stretching program to restore theskin's firmness and luminosity,Silab社发行小册子(2019年6月发行)
发明内容
发明所要解决的课题
本发明的课题是提供皮肤抗老化剂、用于皮肤抗老化的美容方法和用于应用于该方法的美容装置。
用于解决课题的手段
本发明人等进行了深入研究，结果发现，在向皮肤给与含有阿拉伯糖基木聚糖的组合物的情况下、以特定的伸展率和频率向皮肤给与伸展等物理刺激的情况下，使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加，发挥皮肤抗老化作用，从而想到了本发明。
即，本申请提供以下发明：
[1]一种皮肤抗老化剂，其特征在于，包含阿拉伯糖基木聚糖作为有效成分，
其使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加。
[2]根据项目1所述的皮肤抗老化剂，上述阿拉伯糖基木聚糖来源于黑麦。
[3]根据项目1或2所述的皮肤抗老化剂，上述阿拉伯糖基木聚糖来源于コヒリス(商标)GR。
[4]一种美容方法，是使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加的用于皮肤抗老化的美容方法，其包含：
(a)向对象的皮肤应用项目1～3中任一项所述的皮肤抗老化剂。
[5]根据项目4所述的美容方法，上述美容方法进一步包含对上述皮肤应用微弱的物理刺激的工序，其中应用上述物理刺激的工序包含例如：
(b-1)将上述对象的皮肤伸展直到0.1％以上且50.0％以下的伸展率，其中，伸展率由下式算出，
[数1]
(式中，定点A和定点B为表皮或表皮粘接着的基质上的任意位置，其中穿过定点A和定点B的直线与伸展方向平行)；以及
(c-1)将上述对象的皮肤从伸展状态恢复；
以及/或
(b-2)将上述对象的皮肤进行1μm～1000μm推压；以及
(c-2)将上述对象的皮肤从推压状态恢复，
其中以60Hz以下的频率实施上述(b-1)和(c-1)、及/或上述(b-2)和(c-2)的循环。
[6]根据项目5所述的美容方法，其进行1组或多组将上述循环进行2～500个循环的组。
[7]根据项目4～6中任一项所述的美容方法，上述皮肤抗老化是，在将具有核定位YAP的细胞数相对于总角质形成细胞数的比例作为指标而测定的情况下，在向皮肤应用了上述美容方法后用伸展角质形成细胞测定的具有核定位YAP的细胞数的比例与应用上述美容方法前相比增加，其中，具有核定位YAP的细胞数的比例由下式算出。
[数2]
[8]根据项目4～6中任一项所述的美容方法，上述皮肤抗老化是，在将具有肌动蛋白应力纤维的细胞数相对于总角质形成细胞数的比例作为指标而测定的情况下，在向皮肤应用了上述美容方法后用伸展角质形成细胞测定的具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例增加，其中，具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例由下式算出。
[数3]
[9]一种美容装置，是用于应用于项目5或6所述的美容方法的美容装置，
上述装置具备：
产生物理刺激的刺激产生部；以及
向皮肤施与在刺激产生部产生的物理刺激的刺激施与部，
其中，上述装置为用于进行对皮肤应用微弱的物理刺激的工序的装置，其中该工序是以60Hz以下的频率进行循环，上述循环包含例如：
(i-1)将上述皮肤伸展直到0.1％以上且50.0％以下的伸展率；以及
(ii-1)将上述皮肤从伸展状态恢复；
以及/或
(i-2)将上述皮肤进行1μm～1000μm推压；以及
(ii-2)将上述皮肤从推压状态恢复，
其中，伸展率通过上述式1而算出。
[10]一种用于皮肤抗老化的美容方法，其包含：向对象的皮肤应用项目9所述的美容装置。
[11]根据项目4～8和10中任一项所述的美容方法，其用于增加皮肤中的透明质酸。
[12]一种辅助对象的美容行为的美容咨询方法，其包含：将项目1～3中任一项所述的皮肤抗老化剂、项目4～8和10中任一项所述的美容方法或项目9所述的美容装置提示给对象。
发明的效果
根据本发明，提供使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加，对表皮这样的浅层发挥令人满意的皮肤抗老化作用的皮肤抗老化剂、美容方法和用于使用于该方法的的美容装置。其结果，可期待斑、皱纹、松弛这样的皮肤老化的预防/改善。
附图说明
图1显示在实验1、3中进行的伸展刺激的设定。
图2a显示在实验1中向从44岁的供者获得的角质形成细胞的单层培养物不给与伸展刺激的状态和刚给与后的YAP(红)和肌动蛋白(绿)的定位。
图2b显示在实验1中向从各年龄的供者(0岁、18岁、64岁)获得的角质形成细胞的单层培养物不给与伸展刺激的状态和刚给与后的YAP(红)和肌动蛋白(绿)的定位。
图3显示在实验1中向从各年龄的供者(0岁、18岁、62岁)获得的角质形成细胞培养物不给与伸展刺激的状态和刚给与后的具有核定位YAP的细胞数的比例。图中，*表示通过双侧t检验(2个总体方差相等的情况)而具有显著性差异(p＜0.05％)。
图4显示在实验1中向从各年龄的供者(0岁、18岁、62岁)获得的角质形成细胞培养物不给与伸展刺激的状态和刚给与后的具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例。图中，*表示通过双侧t检验(2个总体方差相等的情况)而具有显著性差异(p＜0.05％)。
图5显示在实验1中向从各年龄的供者(0岁、68岁)获得的成纤维细胞的培养物不给与伸展刺激的状态和刚给与后的YAP(红)、肌动蛋白(绿)、和核(蓝)的定位。
图6显示在实验2中使用的装置和离体(ex vivo)皮肤试样。
图7显示在实验2、4、5中进行的伸展刺激的设定。
图8显示在实验2中向从44岁的供者获得的皮肤试样不给与按下刺激的状态和刚给与后的YAP(绿)和核(蓝)的定位。
图9显示在实验3中向从44岁的供者获得的角质形成细胞的单层培养物分别不给与伸展刺激的条件、给与1次伸展刺激的条件、给与2次伸展刺激的条件后，进行1周通常培养后的YAP和BrdU的定位。
图10显示在实验4中使用的装置和皮肤试样。
图11显示在实验4中向从44岁的供者获得的2个皮肤试样(试样#1和#2)不给与1次伸展刺激的状态和给与了的条件后，进行1周通常培养后的YAP(绿)、Ki67(红)和核(蓝)的定位。
图12显示在实验4中向从44岁的供者获得的2个皮肤试样(试样#1和#2)不给与2次伸展刺激的状态和给与了的条件后，进行1周通常培养后的YAP(绿)、Ki67(红)和核(蓝)的定位。
图13显示在实验5中向从44岁的供者获得的2个皮肤试样(试样#1和#2)不给与2次伸展刺激的状态和给与了的条件后，进行1周通常培养后的透明质酸(绿)、胶原(红)、核(蓝)。
图14显示本发明的装置的一例。
图15上显示在实验6中在从44岁的供者获得的单层培养物中添加0.3重量％和1.0重量％的コヒリス(商标)GR并刚给与1次伸展刺激后的YAP(红)和肌动蛋白(绿)的定位(上)。图15左下显示具有核定位YAP的细胞数的比例。图15右下显示具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例。图中，***表示通过双侧t检验(2个总体方差相等的情况)而具有显著性差异(p＜0.05％)。
图16a显示实验7中的由VapoMeter(バポメーター)和Corneometer(コルネオメーター)得到的测定结果。
图16b显示实验7中的由Cutometer(キュートメーター)得到的R0值。图16ab中，*表示通过dunnett检验而与第0天的值具有显著性差异(***：p＜0.005，**：p＜0.01，*：p＜0.05)。
图16c显示实验7中的主观评价的结果。图16c中，*表示通过wilcoxon符号秩检验而与第0天的值具有显著性差异(***：p＜0.005，**：p＜0.01，*：p＜0.05)。
图17左上显示实验8的设定。图17右上显示实验8的推压刺激的波形的一例(矩形波)。图17下显示实验8的推压刺激的条件(波形：波形(Shape of wave)，频率：频率(Frequency)/Hz，深度：位移(Displacement)/μm，期间：天(Day))。
图18显示在实验8中向从44岁的供者获得的2个皮肤试样(试样#1和#2)不给与推压刺激的条件(Cont)和给与了矩形波的推压刺激的条件(0.5Hz/100μm)下的第1天(d1)和第5天(d5)的Ki67(绿)和核(蓝)的定位。
图19显示在实验8中向从44岁的供者获得的皮肤试样不给与1次推压刺激的条件(Cont)和给与了的条件(矩形波：0.5Hz、5Hz、50Hz/100μm)下的第1天(左)和第5天(右)的整体的细胞数中的显示Ki67阳性的细胞数的比例。
图20上显示实验9的设定，下显示所采用的推压刺激的波形(矩形波)。
图21为实验9的结果，在各个图中，左显示给与推压刺激的情况下(apply)的第0天和第7天的结果，右显示不给与推压刺激的情况下(对照)的第0天和第7天的结果。图21a显示由Corneometer得到的测定结果。
图21b显示由VapoMeter得到的测定结果。
图21c显示由Cutometer得到的R0值。图21c中，*表示通过dunnett检验而与第0天的值具有显著性差异(*：p＜0.05)。
具体实施方式
目前，以与真皮相比深的层作为靶标的美容方法大量存在，可举出例如，以表情肌的强化、脂肪的分解促进、真皮纤维的强化为目标的美容方法等。此外，例如如专利文献1那样着眼于角质物质的美容法也存在，但是采用电刺激的美容法、给与高频率的刺激强的美容法多。然而，如果如上述那样从皮肤表面给与刺激，则具有对表皮造成破坏这样的问题。进一步，如专利文献4、5等所记载地那样伸展刺激对皮肤带来不良影响这样的认识也存在，实际上，在非专利文献2中报导了通过给与伸展刺激从而表层大幅变化。
这里，本发明人等着眼于皮肤表层部而进行了深入研究。其结果，发现了角质形成细胞中的YAP的行为、肌动蛋白纤维的结构与老化相关。例如，在向皮肤给与了伸展等物理刺激的情况下，对于老化角质形成细胞，具有核定位YAP的细胞、具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例显著减少了。进一步，本发明人等将YAP的行为、肌动蛋白纤维的结构作为皮肤老化的指标，探索了新的皮肤抗老化剂、用于皮肤抗老化的方法，结果还发现了如果向对象的皮肤给与含有阿拉伯糖基木聚糖的组合物，或向对象的皮肤给与特定的物理刺激，则对包含表皮的皮肤发挥令人满意的效果。更具体而言，即使是老化了的表皮，通过应用包含阿拉伯糖基木聚糖作为有效成分的皮肤抗老化剂，也暗示出作为结果抑制作为老化角质形成细胞的特征的具有核定位YAP和/或肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例的减少的效果。此外，即使是老化了的表皮，如果给与微弱的物理刺激，例如以特定的伸展率例如1Hz以下、10Hz以下这样的60Hz以下的频率进行的物理刺激，则暗示出作为结果而抑制作为老化角质形成细胞的特征的具有核定位YAP和/或肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例的减少的效果。进一步，也可知这样的物理刺激不仅表皮而且真皮中的透明质酸量也增加，证实了对皮肤老化的预防改善是有效的。
皮肤抗老化可以通过测定具有核定位YAP的角质形成细胞数相对于总角质形成细胞数的比例来确定。如实施例所记载地那样，核定位YAP的有无可以通过将细胞内的YAP染色，将位于核或细胞质的内源性YAP用显微镜观察，拍摄，使用图像处理解析软件将核内YAP与细胞质内YAP之比以荧光强度的程度进行数值化来确定。或者，也可以通过非专利文献6、非专利文献7所记载的方法来测定。具有核定位YAP的角质形成细胞数相对于总角质形成细胞数的比例通过上述式2而算出。例如，可以通过上述那样的方法计数确定为具有核定位YAP的细胞的数，将通过例如DAPI、Hoechst33342等核染色而核染色了的细胞作为总细胞数而计数，通过式2而算出。
在1实施方式中，YAP的核定位是指角质形成细胞中的内源性的YAP的总表达量的增减在实施前后限于2倍以下的范围，作为转录辅助因子(転写共役因子)而定位于核。这是因为由非专利文献3～5确认了，即使使YAP的抑制因子缺失，促进YAP的核定位，也不发生蛋白量水平的表达量的显著的增强(例如，在非专利文献5中YAP的蛋白量为平均2倍以下)。
所谓YAP，是Yes相关蛋白(Yes-associated protein)，是也有时被称为YAP1、YAP65等的约65kDa的蛋白质。报导了YAP作为转录调节因子起作用、参与细胞增殖、凋亡等、与干细胞(龛)的维持/确立、肿瘤、癌的发生相关等。YAP如果存在于细胞质则被分解，但如果移动到核内则活化而调节转录。也报导了这样的YAP的定位与细胞外基质的硬度、细胞密度、细胞增殖和自我复制等相关(非专利文献11～13)。
此外，已知作为YAP上游因子的肌动蛋白的细胞质中的应力纤维形成与YAP核定位相关并且积极地参与。因此，本发明的皮肤抗老化可以将角质形成细胞中的肌动蛋白应力纤维的有无作为指标来确定。例如，皮肤抗老化可以通过测定具有肌动蛋白应力纤维的角质形成细胞数相对于总角质形成细胞数的比例来确定。如实施例所记载地那样，肌动蛋白应力纤维的有无可以将肌动蛋白纤维通过交联了荧光化合物的鬼笔毒环肽(ファロイジン)进行染色，在包含即使1个存在于细胞质中、核周边的肌动蛋白应力纤维的情况下，作为具有肌动蛋白应力纤维而确定。或者，也可以通过非专利文献9、非专利文献10所记载的方法来测定。具有肌动蛋白应力纤维的角质形成细胞数相对于总角质形成细胞数的比例通过上述式3而算出。例如，可以通过上述那样的方法计数确定为具有肌动蛋白应力纤维的细胞的数，例如如上述那样通过DAPI染色而计数总细胞数，通过式3而算出。
在1实施方式中，具有肌动蛋白应力纤维的角质形成细胞是指不伴随肌动蛋白蛋白表达量的增强而形成了肌动蛋白应力纤维的角质形成细胞。这是因为如非专利文献8所记载地那样，即使YAP的有无、YAP的存在位置(核、细胞质等)不同，肌动蛋白蛋白量也没有变动。
因此，本发明的所谓皮肤抗老化，也有时是指例如，通过本发明的方法/装置抑制向皮肤试样给与了伸展刺激后的角质形成细胞中的具有核定位YAP或肌动蛋白应力纤维的细胞数相对于总角质形成细胞数的比例的降低。抑制可以为例如具有将显著性水平设为5％的统计学上的显著性差异(例如学生t检验)的上述比例的降低的抑制、和/或例如10％以上、20％以上、30％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、100％的抑制。
已知核定位YAP和肌动蛋白应力纤维对细胞增殖和自我复制间接或直接起作用(非专利文献11)。另一方面，明确了定位于核外或细胞质的YAP、在细胞质中分解的YAP、或肌动蛋白应力纤维的不形成参与由于细胞死亡、分化而从细胞群体被排除的机构(非专利文献12)。由皮肤的角质形成细胞和各种细胞种中的研究的认识，暗示出具有YAP不定位于核、不形成肌动蛋白应力纤维这样的现象的角质形成细胞为自身的增殖维持、自我复制能力低、老化或分化样的细胞(非专利文献13)。此外，在本申请实施例中，通过本发明的方法/装置，核定位YAP保持能力弱或肌动蛋白应力纤维形成能力弱的老化角质形成细胞的数显著减少了。因此，虽然不受理论束缚，但暗示出本发明的皮肤抗老化剂、方法/装置选择性地排除上述那样的老化角质形成细胞，促进核定位YAP保持能力弱或肌动蛋白应力纤维形成能力被保持了的“年轻”角质形成细胞的选择和之后的再活化、细胞增殖。即，通过向皮肤给与本发明的含有阿拉伯糖基木聚糖的组合物、或进一步给与物理刺激，从而在伸展了的角质形成细胞中，选择性地排除YAP不定位于核或不形成肌动蛋白应力纤维的角质形成细胞，选择性地留下YAP定位于核的角质形成细胞、具有肌动蛋白应力纤维的角质形成细胞，结果，可以认为可能使角质形成细胞增殖或自我复制。即，通过本发明的皮肤抗老化剂、方法/装置，选择性地排除老化角质形成细胞，并且选择增殖、自我复制的角质形成细胞，其结果，可以认为可能促进角质形成细胞的增殖、恢复。
这里，在测定具有核定位YAP或肌动蛋白应力纤维的细胞数时，优选向皮肤试样给与伸展刺激等物理刺激。测定皮肤老化度、皮肤抗老化作用时的物理刺激与在本发明的抗老化方法/装置中使用的物理刺激可以相同也可以不同，没有限定，只要实现对于测定皮肤老化度而言充分的刺激即可。例如，可以通过对生物体中的皮肤、采取后的皮肤、或培养角质形成细胞这样的皮肤试样，给与由拉伸、推压、敲打、揉搓、吸引这样的接触、和/或例如用超声波、空气压或水压那样的物质向皮肤给与冲击波使其位移这样的非接触引起的物理性刺激从而实现皮肤试样的伸展，给与物理刺激的方向也没有限定。
在一实施方案中，本发明提供一种皮肤抗老化剂，其特征在于，包含阿拉伯糖基木聚糖作为有效成分，
其使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加。
在本发明中能够使用的阿拉伯糖基木聚糖为半纤维素的一种，是已知肌肤的弹力改善、向肌肤赋予柔软度、恢复皮肤对物理应力的响应能力、改善松弛、皱纹等的成分(非专利文献14)。然而，关于阿拉伯糖基木聚糖使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加，是未知的，是本申请发明人等首次发现的。在本发明中能够使用的阿拉伯糖基木聚糖可以来源于黑麦(优选为黑麦种子)，例如，可以来源于由Silab社市售的黑麦种子的提取物(商品名：コヒリス(商标)GR、或coheliss(注册商标)(在本说明书中总称为“コヒリス”。))。
本发明的剂也可以为与除上述有效成分以外的成分例如赋形剂、载体和/或稀释剂等组合而成的组合物。组合物的组成、形态是任意的，只要根据有效成分、用途等条件来适当选择即可。该组合物可以根据其剂型而以与赋形剂、载体和/或稀释剂等和其它成分适当组合了的处方，使用常规方法来制造。
本发明的剂可以混配于化妆品等而使用于人和动物，或作为医药制剂而施与人和动物。此外，可以混配于各种饮食品、饲料而使人和动物摄入。
在将本发明应用于化妆品、药品、准药品等皮肤外用剂的情况下，其混配量可以根据它们的种类、目的、形态、利用方法等来适当确定。例如，在使用了コヒリス(商标)GR的情况下，在化妆料总量中，可以混配コヒリス(商标)GR 0.00001％～50％(v/v)(例如为0.1～10％，优选为1～4％(v/v))。
除了上述成分以外，进一步根据需要，在不损害本发明的效果的范围内，可以根据需要适当混配通常化妆品、药品、准药品等皮肤外用剂所使用的成分例如抗氧化剂、油分、紫外线防御剂、表面活性剂、增稠剂、醇类、粉末成分、色料、水性成分、水、各种皮肤营养剂等。
本发明的皮肤外用剂能够作为被应用于外皮的化妆料、准药品等、特别适合作为化妆料而应用，其剂型也只要可以应用于皮肤，就没有限定，可应用溶液系、增溶系、乳化系、粉末分散系、水-油二层系、水-油-粉末三层系、软膏、化妆水、凝胶、气雾剂等任意的剂型。
作为使用本发明的剂作为化妆品的情况下，可以作为化妆水、乳液、粉底、口红、唇膏、清洁霜、按摩霜、面膜、护手霜、洗手粉、洗澡液、爽身水、润体霜、浴用化妆品等形态而使用。
然而，本发明的剂和组合物能够采用的形态不限定于上述剂型、形态。
在其它方案中，本发明提供一种美容方法，是使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加的、用于皮肤抗老化的美容方法，其包含：
(a)向对象的皮肤应用包含阿拉伯糖基木聚糖作为有效成分的上述皮肤抗老化剂。
一实施方案中的本发明的美容方法提供除了上述工序(a)以外，进一步包含对皮肤应用微弱的物理刺激的工序的方法。此外，本发明提供能够应用于上述美容方法的、具备产生物理刺激的刺激产生部、和向皮肤施与在刺激产生部产生的物理刺激的刺激施与部的用于皮肤抗老化的装置。
例如，对皮肤应用微弱的物理刺激的工序可以为以60Hz以下的频率进行循环，上述循环包含(b-1)将皮肤伸展直到0.1％以上且50.0％以下的伸展率；和(c-1)从伸展状态恢复。
伸展率通过上述式1而算出。物理刺激可以以0.001％以上且80.0以下、0.01％以上且60.0％以下、0.1％以上且50.0％以下、优选0.1％以上且50.0％以下的伸展率进行。例如，可以采用0.1％以上且1.0％以下、0.1％以上且5.0％以下、0.1％以上且10.0％以下、0.1％以上且20.0％以下、0.1％以上且30.0％以下、1.0％以上且5.0％以下、1.0％以上且10.0％以下、1.0％以上且20.0％以下、1.0％以上且30.0％以下、1.0％以上且50.0％以下、10.0％以上且20.0％以下、10.0％以上且30.0％以下等任意的范围的伸展率。
伸展速度是指在1个循环中直到达到最大伸展率(％)为止的速度(％/s)。恢复速度是指从最大伸展率恢复到非伸展状态的速度(％/s)。伸展速度/恢复速度可以以0.010％/s～40％/s、0.05％/s～30％/s、0.10％/s～20％/s、0.2％/s～15％/s、0.3％/s～10％/s等任意的速度进行。伸展速度与恢复速度可以相同也可以不同。
例如，对皮肤应用微弱的物理刺激的工序可以为以60Hz以下的频率进行循环，上述循环包含(b-2)将上述对象的皮肤进行1μm～1000μm推压；和(c-2)使上述对象的皮肤从推压状态恢复。
所谓“将皮肤进行1μm～1000μm推压”，是指推压皮肤直到距皮肤的最表面1μm～1000μm的深度。推压的深度能够任意设定为距皮肤的最表面1μm～1000μm、10μm～1000μm、10μm～300μm、10μm～100μm等。
频率是指将从伸展或推压开始恢复直到非伸展或非推压状态的循环设为1个循环的情况下的每1秒的循环数。在1个循环中，可以包含维持伸展或推压状态一定时间和/或以非伸展或非推压状态休止一定时间。例如，在1个循环中，可以进一步包含：在(b-1)后并且(c-1)前，或在(b-2)后并且(c-2)前，将伸展或推压状态保持0秒～30分钟、1秒～20分钟、5秒～10分钟、或10秒～5分钟；和/或在(c-1)后并且下个循环的(b-1)前，或在(b-2)后并且(c-2)前，以非伸展或非推压状态休止0秒～30秒、0秒～20秒、0秒～10秒、1秒～10秒、1秒～20秒、1秒～10秒。频率可以为例如0.0000001Hz以上且10kHz以下、0.000001Hz以上且1kHz以下、0.00001Hz以上且100Hz以下、优选为0.0001Hz以上且60Hz以下、0.0001Hz以上且10Hz以下。例如，可以采用0.001Hz以上且60Hz以下、0.01Hz以上且60Hz以下、0.001Hz以上且10Hz以下、0.01Hz以上且10Hz以下、0.1Hz以上且60Hz以下、0.1Hz以上且10Hz以下、0.5Hz以上且60Hz以下、0.5Hz以上且50Hz以下、0.5Hz以上且10Hz以下、0.5Hz以上且5Hz以下、0.5Hz以上且1Hz以下、0.001Hz以上且0.01Hz以下、0.001Hz以上且0.1Hz以下、0.001Hz以上且1Hz以下、0.01Hz以上且1Hz以下、0.1Hz以上且1Hz以下、1Hz以上且60Hz以下、1Hz以上且10Hz以下、1Hz以上且5Hz以下等任意的范围的频率。
在市售的美颜器、按摩设备等中，有使用RF波这样的具有0.3～300MHz左右的频率的电磁波的、使用具有1MHz～7MHz左右的频率的超声波的物质等。与这些频率/频率相比，本发明的方法/装置采用的频率极其低。如果如以往的美颜器等那样对皮肤给与强频率则具有给皮肤带来发红、压痕、伤、疼痛感、炎症这样的不良影响的风险，但如果采用本发明那样的频率则上述风险低，能够进行非侵袭的物理刺激。这是因为本发明人等发现，如果伸展率、推压度、频率等过高则刺激过强，因此通过将这些值调节为适当值，从而温和地刺激皮肤，这是优选的。
此外，以往，对于在该领域中一般利用的利用电动机等机构的美容设备类，基于该电动机的机械机构，只能选择超过60Hz的频率是本领域技术人员的技术常识。在采用作为现有技术中的美容设备类的限度的“60Hz”以下的频率例如60Hz以下、10Hz以下、1Hz以下这样的本发明那样的频率时，要求制作特别的机械的必要性。进一步，对于这样的低频率，在发挥本发明的效果时也有“过弱”这样的固定概念，迄今为止几乎没有研究。然而，本发明人等尝试使用从以往的技术常识考虑非常低的频率而实际上向皮肤给与物理刺激，结果令人惊讶的是，即使是这样的低频率的温和的刺激也发挥良好的效果。
对于EMS设备等，虽然低中频的装置也被市售，但是它们特别是以在肌肉、皮下脂肪等的深层作用的方式设计的，对本申请发明那样的皮肤表层的影响是不明确的。此外，这样的装置即使频率低也有时在流过电流时伴有麻酥酥的刺激，与向皮肤给与温和的刺激的本申请发明不同。另一方面，本发明可以为通过不给与超声波、电流、磁场这样的能量，而直接向皮肤给与伸展或推压刺激这样的简便的方法进行的美容法。进一步，具有这样的频率的伸展或推压刺激为温和的刺激，并且如实施例所记载地那样在表皮细胞中和在真皮细胞中都发挥良好的效果。因此，如果使用本发明的方法/装置，则不对皮肤带来不良影响，而可期待短期对皮肤的表皮具有美容效果，长期对真皮具有美容效果。
物理刺激可以为由美颜器等器具、实验的装置、使用了人手、器具的按摩、面部的运动产生的物理刺激，也可以为通过接触或非接触而实现的物理刺激。在一方案中，可以使用具备产生物理刺激的刺激产生部、和通过接触或非接触而施与物理刺激的刺激施与部的设备，对皮肤施与机械地产生的物理刺激。物理刺激例如可以通过对皮肤进行拉伸、推压、敲打、揉搓、吸引这样的接触来实现，和/或例如可以通过用超声波、空气压那样的物质向皮肤给与冲击波从而使其位移这样的非接触来实现。作为面部的运动，可以进行使颊鼓起、睁眼睛等。作为按摩，可举出通过受施术的对象本身或美容成员等施术者进行的使用了手、滚轮等器具的按摩。然而，只要是本发明的物理刺激的范围内，就没有限定。
作为本发明的装置，可举出例如，具备与使用者的皮肤接触而施与本发明的物理刺激的皮肤接触部的美容装置。例如，可以为由把持部和皮肤伸展部或皮肤推压部构成的装置。例如，图14左所记载的装置以通过皮肤接触部与皮肤接触，从而将皮肤以特定的频率和伸展率进行伸展的方式设计。
此外，例如，本发明的装置具备电源、刺激产生部、和皮肤刺激部，电源产生电信号，刺激产生部将来自电源的电信号转换为物理性刺激而产生物理刺激，皮肤刺激部可以接收在刺激产生部产生的物理刺激而向使用者的皮肤给与物理刺激。
例如，图14左所示的装置具备把持部、电源、控制物理性刺激的控制部、刺激产生部、和包含皮肤刺激部和皮肤固定部的皮肤接触部。如以下方式设计：使用者拿着把持部而将皮肤接触部放在皮肤上，通过皮肤固定部而将皮肤固定，通过操作控制部从而来自电源的电信号被刺激产生部转换为物理性刺激，物理刺激传到皮肤刺激部，皮肤被固定于皮肤固定部同时通过皮肤刺激部而以特定的频率和伸展率被伸展。例如，刺激产生部可以为被电动机等驱动而将电信号转换为物理刺激的部分。此外，图14左所记载的皮肤刺激部为向皮肤给与伸展刺激的，例如，也可以为向皮肤给与推压刺激的。
或者，本发明的装置可以为具备电源、控制物理性刺激的控制部、刺激产生部、和包含由片状材料形成的皮肤接触面的皮肤接触部的美容装置。作为例子，在图14右显示这样的美容装置的皮肤接触部。片状材料可以为能够流过电流，并将来自电源的电信号转换为物理性刺激的材料。作为那样的片状材料，可举出介电弹性体致动器(DEA)、导电聚合物、IPMC、PVC凝胶、Mckinnen型等。
本发明的装置的电源可以为内部电源或外部电源，也可以为充电式。此外，本发明的装置例如可以使用被保存于手机、云等的数据，也可以通过无线被远程操作。
物理刺激可以为通过给与上述那样的通过接触或非接触进行的物理性刺激来实现皮肤的伸展或推压的刺激。物理刺激可以相对于皮肤表面沿平行方向、即横向给与，也可以相对于皮肤表面沿垂直方向、即纵向给与，或可以采用倾斜方向、扭转方向等任意的方向。
进行物理刺激的循环数没有限定。例如，可以进行2～500个循环、10～500个循环、20～400个循环、30～300个循环、40～200个循环、50～100个循环这样的任意数的循环。例如，如实施例所记载地那样，也有时进行27个循环是充分的。
进一步，可以将这些任意数的循环设为1组，将该组进行任意数的组例如1～100组、2～50组、或3～10组。
进行物理刺激的时间也没有限定。例如，可以设置或不设置休止时间而重复循环，进行5分钟～3小时、10分钟～2小时、30分钟～1小时这样的一定时间。
循环间或组间的时间间隔也没有限定。例如，伸展或推压刺激可以单独进行1组或多组，也可以将1个或多个组每天、2天、3天、4天、5天、6天、7天进行1次、1、2、3、4周进行1次等，连续或断续地定期或不定期地进行。
然而，只要达到对于发挥皮肤抗老化作用而言充分的刺激，就不限定于上述那样的频率、伸展率、循环数、频率。进行物理刺激的波形也可以任意设定为矩形波、正弦波、三角波、锯齿波等。
应用本发明的方法的对象可以为客观上或主观上确认了皮肤老化的对象，也可以为希望想要预防皮肤老化的对象。例如，可以为判断为透明质酸等皮肤构成成分不足的对象。在1实施方式中，可以为将角层细胞中的YAP的行为和/或肌动蛋白纤维的结构作为指标而判断为皮肤老化度高的对象。例如，在用伸展角质形成细胞测定的情况下，可以为判断为具有核定位YAP的细胞数相对于总角质形成细胞数的比例、和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞数相对于总角质形成细胞数的比例低的对象。或者，可以为担心皮肤的老化例如斑、皱纹、松弛、暗沉、毛孔的显眼、或光滑感、弹性、弹性感、光泽、弹力的降低等的对象。斑、皱纹、松弛、暗沉、毛孔的显眼、光滑感、弹性、弹性感、光泽、弹力等可以通过视觉判定、使用主观或客观评价、Cutometer的值等公知的指标来确定。
替代和/或补充地，皮肤抗老化作用也有时是指本发明涉及的真皮中的透明质酸量的增加。增加可以为例如具有将显著性水平设为5％的统计学上的显著性差异(例如学生t检验)的透明质酸的增加、和/或例如10％以上、20％以上、30％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、100％以上的增加。
替代和/或补充地，皮肤抗老化作用也有时是指本发明涉及的皮肤粘弹性、弹性、弹性感、光泽、光滑感、毛孔的不显眼、无暗沉这样的指标的增加。皮肤粘弹性、弹性、弹性感、光泽、光滑感等可以通过Cutometer、主观或客观指标来测定。增加可以为例如具有将显著性水平设为5％的统计学上的显著性差异(例如dunnett检验、wilcoxon符号秩检验)的增加、和/或例如10％以上、20％以上、30％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、100％以上的增加。
本发明对表皮这样的浅层发挥令人满意的作用，并且可以预防/改善皮肤老化。例如，可以改善角质形成细胞中的YAP的行为、肌动蛋白纤维的结构、特别是抑制在对皮肤应用包含阿拉伯糖基木聚糖作为有效成分的皮肤抗老化剂时、给与物理刺激时的具有核定位YAP、肌动蛋白应力纤维的细胞数相对于全部角质形成细胞的比例的减少或恢复然后的增加。进一步，也可以带来真皮中的透明质酸的增加、皮肤粘弹性、上述那样的主观或客观指标的增加。
此外，本发明也可以与其它处置并用。作为其它处置，可举出例如，光刺激、电刺激、机械刺激、采用人手的刺激这样的刺激的应用、抗老化剂的施与、化妆料的涂布等，但不限定于它们。抗老化剂可以为天然或化学合成的化合物，也可以为动植物的提取物，可以为单体或混合物、或水溶液等含在溶剂中的状态、化妆料等形态。此外，抗老化剂的施与途径可以任意选择，可举出例如经口施与、经皮施与、皮下施与、经粘膜施与、肌肉内施与等。
本发明可以以美容、医疗、压力缓解、放松等作为目的。在某实施方式中，本发明以美容作为目的，有不是医师、医疗从业者使用的情况。此外，本发明也提供包含将本发明提示给对象的、辅助对象的美容行为的美容咨询方法。
在本说明书中引用的全部文献的整体通过引用而援用到本说明书中。
实施例
接下来通过实施例而进一步详细地说明本发明。本发明的实施例仅以例示作为目的，不限定本发明的技术范围。本发明的技术范围仅受专利权利要求书的记载限定。将不超出本发明的宗旨作为条件，可以进行本发明的变更例如本发明的构成要件的补充、删除和置换。
实验1：由老化引起的角质形成细胞的体外(in vitro)的变化
试样：使用了由株式会社ケー·エー·シー购入的来源于年龄不同的供者(0岁、18岁、44岁、64岁)的单层培养角质形成细胞和成纤维细胞培养物。
伸展条件：使用Menicon Life Science社制的ShellPa，向上述角质形成细胞和成纤维细胞给与伸展刺激。伸展刺激以图1的下图中央所记载那样的10％的伸展率进行。循环如图1上图左所记载地那样，以0.33％/s的伸展速度将培养室沿一个方向拉伸，使细胞伸展直到10％的伸展率。然后，将伸展状态维持5分钟，以0.33％/s的恢复速度将细胞恢复到原来的非伸展状态。将其设为1个循环，经3小时进行合计27个循环。循环间的休止时间设为0～10秒。
观察方法：将非伸展刺激和伸展刺激后的细胞内YAP如以下那样通过荧光抗体染色法进行了观察。细胞中的YAP使用抗YAP抗体(Santa Cruz Biotechnology，YAP抗体(63.7)：sc-101199)，肌动蛋白纤维使用交联了荧光化合物的鬼笔毒环肽(ThermoFisherScientific，Alexa FluorTM 488Phalloidin：A12379)进行检测，通过共聚焦激光器显微镜(ZEISS，LSM700)进行观察和取得图像。此外，使用图像处理解析软件ImageJ将YAP的核与细胞质比以荧光强度的程度进行了数值化。算出核与细胞质的荧光强度比(核内YAP的荧光强度/细胞质内YAP的荧光强度)，将其值为1≥的值作为具有核内YAP的细胞而计数其细胞数。总细胞数使用DAPI(Vector Laboratories，VECTASHIELD Mounting Medium with DAPI：H-1200)染色，计数核染色的细胞的数，按照式2而算出具有核定位YAP的细胞数的比例。此外，将即使包含1个位于细胞质中、核周边的肌动蛋白应力纤维的细胞作为具有肌动蛋白应力纤维的细胞而计数，同样地计数总细胞数，按照式3而算出具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例。
结果：
将角质形成细胞的显微镜照片示于图2a、b中。由这些图可知，对于由低龄层的供者(0岁、18岁)获得的角质形成细胞，在伸展刺激的有无的任何条件下都几乎在全部细胞中YAP定位于核，但对于由中高年层的供者(44岁、64岁)获得的角质形成细胞，如果给与伸展刺激则具有核定位YAP的细胞数急剧减少了。图3显示角质形成细胞中的具有核定位YAP的细胞数的比例。对于低龄层，具有核定位YAP的细胞的数未观察到变化，但是对于高龄者的角质形成细胞，显著地减少了。然而，虽然锐减，但是具有核定位YAP的细胞数不变为零，而以一定的比例存在。在显示角质形成细胞中的具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例的图4中，对于低龄层，具有肌动蛋白应力纤维的细胞的数未观察到变化，对于高龄者的角质形成细胞，显著地减少，几乎未观察到。另一方面，对于成纤维细胞，如图5所示那样，在伸展刺激的有无的条件下YAP、肌动蛋白应力纤维未观察到变化，年龄差也基本上未观察到。
实验2：由老化引起的角质形成细胞的离体的变化
试样：使用了由Genoskin社获得的离体人腹部皮肤组织片(NativeSkin，12孔尺寸，直径约1cm)。组织片为38岁的。
伸展条件：制作出图6所示那样的塑料制的推压部。以推压部的底面被推压到试样的上表面的方式从试样的上部垂直地按下，以0.1％以下的伸展率伸展皮肤的方式调整。将这样的按下运动如图7所示那样以10％/s的速度进行，然后保持推压部而维持10秒伸展状态，以10％/s的速度抬起而恢复到原来的非伸展状态，直到下个按下运动为止休止10秒。将其设为1个循环，经30分钟进行90个循环。将该90个循环设为1组，在组间设置30分钟～1小时的休止时间而进行合计3组的按下运动(合计270个循环)。
观察方法：在伸展刺激的有无的条件下，将YAP和DAPI通过与实验1同样的方法进行了染色、观察、和取得图像。
结果：
在实验1中观察到的由老化引起的YAP的行为的变化在离体的试样中也同样地观察到。如在图8中观察地那样，在由中高年层的供者(38岁)获得的离体皮肤模型中也对于表皮内的角质形成细胞，如果给与伸展刺激则核定位YAP减少，大量观察到未被染色的部分。特别是在基底层附近，这样的变化显著。
实验3：由伸展刺激引起的角质形成细胞中的体外的效果
试样：使用了与实验1相同的中高年层的供者(44岁)的角质形成细胞的单层培养物。
伸展条件：给与与实验1相同的伸展刺激。即，给与在实验1中进行的27个循环的伸展刺激的组。然而，给与由27个循环构成的1组的伸展刺激3小时后经过了12～24小时后，向试样进一步给与相同的伸展刺激而进行合计2组。
观察方法：非伸展刺激和伸展刺激后的YAP与实验1同样地染色。此外，将作为增殖标志物的BrdU使用抗BrdU抗体(Abcam，Anti-BrdU抗体[BU1/75(ICR1)]：ab6326)通过荧光抗体法进行了染色。BrdU的处理进行6小时，在其7天后使用4％低聚甲醛在4℃下固定24小时。将固定了的试样使用共聚焦激光器显微镜(ZEISS，LSM700)进行观察和取得图像。
将结果示于图9中。对于第1次伸展刺激，与实验1同样地，在伸展刺激前后具有核定位YAP的细胞数具有大的变化。BrdU也与核定位YAP同样地通过伸展刺激而锐减了。另一方面，在从第1次伸展刺激起24小时后给与了第2次伸展刺激的情况下，核定位YAP和BrdU在非伸展刺激条件与2次伸展刺激条件之间未观察到大的变化或稍微增加了。暗示出核定位YAP与增殖细胞具有某种相关性，并且，暗示出与1次伸展刺激相比给与2次伸展刺激后的细胞的具有自我复制能力的细胞增加，恢复或维持与非伸展或低龄的角质形成细胞同样的细胞增殖能力。虽然不受理论束缚，但可以认为通过第1次伸展刺激，通过增殖维持、自我复制能力低的老化角质形成细胞的细胞死亡被促进，或剥落这样的某种机制，而选择性地排除老化角质形成细胞，选择性地留下增殖维持、自我复制能力高的显示核定位YAP的细胞从而可能促进角质形成细胞的增殖、恢复。
实验4：由伸展刺激引起的表皮中的离体的效果
试样：使用了由Genoskin社购入的中高年层的供者(42岁)的离体人腹部皮肤组织片(NativeSkin，6孔尺寸，直径约2～2.5cm)。
伸展条件：制作出图10所示那样的通过具有把持孔内的皮肤的两端的把持部，将把持部拉伸从而使皮肤伸展的伸展器具。将加入了上述组织片的孔水平设置，操作把持部而从两端使皮肤伸展，如图7所示那样以10％/s的速度进行成为10％的伸展率的伸展，以10％/s的恢复速度将试样恢复到原来的非伸展状态。将其设为1个循环，经30分钟进行合计90个循环。将该90个循环设为1组，在组间设置30分钟～1小时的休止时间而进行合计3组(合计270个循环)。给与3小时该3组的伸展刺激后经过了12～24小时后，向试样进一步连续2天进行2次相同3组的伸展刺激。
观察方法：在非伸展刺激第0天、刚伸展刺激后(同第0天)、将非伸展刺激、进行了伸展刺激处理的皮肤组织培养1周后，进行与实验1同样的YAP和DAPI处理，进一步将作为增殖标志物的Ki67使用抗Ki67抗体(Abcam，Anti-Ki67抗体[SP6]：ab16667)进行染色，通过与实验1同样的步骤进行了观察和取得图像。
图11显示非伸展刺激第0天和刚伸展刺激后(同第0天)的样子。具有YAP的基底层的表皮细胞减少，增殖标志物Ki67在刚拉伸后增加了。虽然不受理论束缚，但也可以认为可能通过伸展刺激而促进了细胞增殖和然后的细胞分化的过程。图12显示连续2天给与2次伸展刺激后培养了1周后的样子。在伸展前，不仅基底层而且在表皮细胞整体都观察到YAP。YAP通常在基底层大量被观察到，但对于培养了1周的皮肤，在全部层被观察到。虽然不受理论束缚，但也可以认为可能对于非伸展的皮肤组织，通过细胞老化例如表皮内的各层中的细胞增殖、细胞分化发生某种异常，YAP的分布变化。然而，2次伸展刺激后YAP的表达分布被维持在基底层。虽然不受理论束缚，但可以认为可能通过物理刺激，表皮中的细胞增殖、细胞分化的体内稳态被活化、维持了，结果，YAP的分布在1周的培养后也维持初始的新鲜的皮肤组织的通常状态。
实验5：由伸展刺激引起的真皮中的离体的效果
试样和伸展条件：使用了与实验4相同的由Genoskin社购入的中高年层的供者(44岁)的离体人腹部皮肤组织片(NativeSkin，6孔尺寸，直径约2～2.5cm)。连续2天进行2次作为与实验4相同伸展的3组伸展刺激。
观察方法：观察了伸展刺激前、伸展刺激后培养了1周后的DAPI、透明质酸(HOKUDO，Biotin-HABP：BC41)、胶原(Merck Millipore，Anti-human COL1N-terminalantibody：MAB1912)。DAPI与实验1同样地，透明质酸、胶原通过荧光抗体法进行染色，通过共聚焦激光器显微镜(ZEISS，LSM700)进行观察和取得图像。
将结果示于图13中。在给与了伸展刺激的情况下，真皮中的透明质酸增加了。显示出通过伸展刺激不仅促进表皮细胞的增殖，而且对真皮也带来令人满意的影响。
实验6：由コヒリス(商标)GR施与引起的角质形成细胞中的体外的效果
试样：使用与实验1相同的中高年层的供者(44岁)的角质形成细胞的单层培养物，在伸展刺激开始的1天前利用将コヒリス(商标)GR(水(84.50％)、戊二醇(10.00％)、黑麦种子提取物(5.50％))以0.3体积％和1.0体积％的浓度溶解于角质形成细胞专用培养基(Epilife，Thermo Fisher Scientific，HuMedia-KG增殖添加剂组，クラボウ)而得的培养液，将正常人角质形成细胞培养1天。对照使用将(水(90.00％)、戊二醇(10.00％))以0.3体积％和1.0体积％的浓度溶解于角质形成细胞专用培养基而得的培养液，将正常人角质形成细胞同样地培养。
伸展条件：给与了与实验1相同的伸展刺激。即，给与了在实验1中进行的27个循环的伸展刺激的组。
观察方法：将非伸展刺激和伸展刺激后的细胞内YAP通过与实验1同样的方法进行染色、观察，算出具有核定位YAP的细胞数的比例和具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例。
结果：
将结果示于图15中。如在实验1中所示那样，对于由中高年的供者(44岁)获得的角质形成细胞，如果给与伸展刺激则具有核定位YAP的细胞数的比例和具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例急剧减少，但通过添加コヒリス(商标)GR，从而任何比例都与伸展刺激前同等程度，在1％施与的情况下具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例与伸展刺激前相比高。
实验7：由伸展刺激引起的体内(in vivo)的效果
被检者：选定健康的30～50多岁的女性17名。
伸展条件：使用了图14左所记载的伸展装置。该装置以如下方式设计：由图14左的箭头所示的皮肤接触部与皮肤接触，皮肤固定部固定皮肤同时将皮肤伸展部的相对于皮肤的垂直方向压入量在最大约5mm的范围适当设定从而使水平方向的伸展率成为0.1～20％，将皮肤以1.2Hz的频率进行伸展。被检者通过在半边脸应用该装置从而进行10天每天给与30分钟伸展刺激的操作。
测定方法：在实验开始后第3天和第10天进行了施与了伸展刺激(处理过)和不施与伸展刺激(对照)的每半边脸的皮肤状态的测定。皮肤状态的计测通过将经皮水分蒸发量(TEWL)通过Delfin Technologies社的VapoMeter进行测定，将皮肤水分量通过Courage+Khazaka社的Corneometer(CM825)进行测定，将皮肤粘弹性通过Courage+Khazaka社的Cutometer(SEM575)进行测定来进行。所得的数据通过dunnett检验而将第0天的值与各自进行比较从而进行了统计处理(***：p＜0.005，**：p＜0.01，*：p＜0.05)。
进一步，被检者将给与伸展刺激前和10天后的颊的印象按下述所示的评价项目以5阶段评价记入从而进行了主观评价。
[表1]
主观评价的结果是，通过wilcoxon符号秩检验而进行了统计处理(***：p＜0.005，**：p＜0.01，*：p＜0.05)。
结果：将结果示于图16a～c中。如图16a所示那样TEWL和皮肤水分量都没有由伸展刺激引起的变化，但如图16b所示那样可知采用Cutometer的测定中R0值显著增加，皮肤粘弹性改善。该倾向在R2值和R7值中也观察到。此外，如图16c所示那样可知关于外表和触感，被检者都真实感到皮肤状态被改善了。
实验8：由推压刺激引起的离体的效果
试样：使用了与实验4相同的由Genoskin社购入的中高年层的供者(44岁)的离体人腹部皮肤组织片(NativeSkin，6孔尺寸，直径约2～2.5cm)。
推压条件：使用了介电弹性体致动器(住友理工株式会社制：SRHP074-001)。关于该介电弹性体致动器，如图17左上所记载地那样将该介电弹性体致动器施于上述皮肤组织片，反复进行收缩和扩张，从而在图17下部所记载的条件下将各种波形的0～100μm的推压刺激以0.5Hz、5Hz、或50Hz的频率给与1天或5天。
观察方法：将推压刺激前、推压刺激后的DAPI、Ki67通过与实验4同样的方法进行了观察。
结果：
将结果示于图18、19中。在未给与推压刺激的情况下(Cont：静默(silent))与第1天相比第5天的Ki67的数减少了，但在给与了推压刺激的情况下(0.5Hz/100μm：方波(square))，第5天的表皮细胞的Ki67的减少被抑制，显示出通过推压刺激而抑制表皮细胞的增殖抑制。此外推压刺激为0.5Hz左右的低频率时与5Hz、50Hz的情况相比显示高效果。需要说明的是，图18、19的结果显示矩形波的情况(方波)，但在正弦波(sin)的情况下也获得了同样的结果。
实验9：由推压刺激引起的体内的效果
被检者：选定健康的30～50多岁的女性17名。
伸展条件：使用了图20所记载的推压装置、介电弹性体致动器(住友理工株式会社制：SRHP074-001)。该装置以如下方式设计：通过用图20上所示的装置的皮肤接触部以10gf的力将皮肤压入，从而以5Hz的频率以100μm的深度向皮肤给与图20下所示的矩形波的推压刺激。如图20所示那样，在被检者的前臂内侧部应用该装置而进行5天每天给与30分钟推压刺激的操作。
测定方法：在实验开始前和第7天进行了施与了推压刺激和未施与推压刺激的前臂内侧部的皮肤状态的测定。关于皮肤状态的计测，将经皮水分蒸发量(TEWL)通过DelfinTechnologies社的VapoMeter进行测定，将皮肤水分量通过Courage+Khazaka社的Corneometer(CM825)进行测定，将皮肤粘弹性通过Courage+Khazaka社的Cutometer(SEM575)进行测定来进行。
结果：将结果示于图21a～c中。TEWL和皮肤水分量都没有由推压刺激引起的变化，但Cutometer的结果是，如果未给与推压刺激则在第7天R0值显著减少了但通过给与推压刺激从而其减少被抑制，观察到粘弹性的改善。
暗示出对于实施了本申请发明的皮肤，由伸展刺激引起的老化细胞的选择性排除以及具有核定位YAP、肌动蛋白应力纤维的角质形成细胞的选择性保持。此外，也获得了暗示这些被选择的具有核定位YAP、肌动蛋白应力纤维的角质形成细胞的细胞增殖的结果。进一步不仅角质形成细胞存在的表皮，而且真皮中的透明质酸的量也增加了。即暗示出，如果使用本发明，则对包含不仅表皮而且真皮这样的部分的皮肤发挥抗老化作用。实际上如果在体内将本发明应用于人则皮肤的粘弹性、弹性、光泽、暗沉、光滑感这样的外表和触感改善了。
Claims (12)
1.一种皮肤抗老化剂，其特征在于，包含阿拉伯糖基木聚糖作为有效成分，
其使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加。
2.根据权利要求1所述的皮肤抗老化剂，所述阿拉伯糖基木聚糖来源于黑麦。
3.根据权利要求1或2所述的皮肤抗老化剂，所述阿拉伯糖基木聚糖来源于コヒリス(商标)GR。
4.一种美容方法，是使在皮肤中通过物理刺激而减少的具有核定位YAP的细胞和/或具有肌动蛋白应力纤维的细胞增加的、用于皮肤抗老化的美容方法，其包含：
(a)向对象的皮肤应用权利要求1～3中任一项所述的皮肤抗老化剂。
5.根据权利要求4所述的美容方法，所述美容方法进一步包含对所述皮肤应用微弱的物理刺激的工序，其中应用所述物理刺激的工序包含例如：
(b-1)将所述对象的皮肤伸展直到0.1％以上且50.0％以下的伸展率，其中，伸展率由下式算出，
[数1]
式中，定点A和定点B为表皮或表皮粘接着的基质上的任意位置，其中穿过定点A和定点B的直线与伸展方向平行；以及
(c-1)将所述对象的皮肤从伸展状态恢复；
以及/或
(b-2)将所述对象的皮肤进行1μm～1000μm推压；以及
(c-2)将所述对象的皮肤从推压状态恢复，
其中以60Hz以下的频率实施所述(b-1)和(c-1)、及/或所述(b-2)和(c-2)的循环。
6.根据权利要求5所述的美容方法，其进行1组或多组将所述循环进行2～500个循环的组。
7.根据权利要求4～6中任一项所述的美容方法，所述皮肤抗老化是，在将具有核定位YAP的细胞数相对于总角质形成细胞数的比例作为指标而测定的情况下，在对皮肤应用了所述美容方法后用伸展角质形成细胞测定的具有核定位YAP的细胞数的比例与应用所述美容方法前相比增加，其中，具有核定位YAP的细胞数的比例由下式算出，
[数2]
8.根据权利要求4～6中任一项所述的美容方法，所述皮肤抗老化是，在将具有肌动蛋白应力纤维的细胞数相对于总角质形成细胞数的比例作为指标而测定的情况下，在对皮肤应用了所述美容方法后用伸展角质形成细胞测定的具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例增加，其中，具有肌动蛋白应力纤维的细胞数的比例由下式算出，
[数3]
9.一种美容装置，是用于应用于权利要求5或6所述的美容方法的美容装置，
所述装置具备：
产生物理刺激的刺激产生部；以及
向皮肤施与在刺激产生部产生的物理刺激的刺激施与部，
其中，所述装置为用于进行对皮肤应用微弱的物理刺激的工序的装置，其中该工序是以60Hz以下的频率进行循环，所述循环包含例如：
(i-1)将所述皮肤伸展直到0.1％以上且50.0％以下的伸展率；以及
(ii-1)将所述皮肤从伸展状态恢复；
以及/或
(i-2)将所述皮肤进行1μm～1000μm推压；以及
(ii-2)将所述皮肤从推压状态恢复，
其中，伸展率通过所述式1而算出。
10.一种用于皮肤抗老化的美容方法，其包含：向对象的皮肤应用权利要求9所述的美容装置。
11.根据权利要求4～8和10中任一项所述的美容方法，其用于增加皮肤中的透明质酸。
12.一种辅助对象的美容行为的美容咨询方法，其包含：将权利要求1～3中任一项所述的皮肤抗老化剂、权利要求4～8和10中任一项所述的美容方法或权利要求9所述的美容装置提示给对象。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2020075020 | 2020-04-20 | ||
| JP2020-075020 | 2020-04-20 | ||
| PCT/JP2021/015926 WO2021215411A1 (ja) | 2020-04-20 | 2021-04-19 | 皮膚抗老化剤，皮膚抗老化のための美容方法およびその方法に使用するための美容装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115427009A true CN115427009A (zh) | 2022-12-02 |
Family
ID=78269422
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202180022669.9A Pending CN115427009A (zh) | 2020-04-20 | 2021-04-19 | 皮肤抗老化剂、用于皮肤抗老化的美容方法及用于使用于该方法的美容装置 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPWO2021215411A1 (zh) |
| CN (1) | CN115427009A (zh) |
| WO (1) | WO2021215411A1 (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101484213A (zh) * | 2006-05-05 | 2009-07-15 | 莱雅公司 | 紧致剂或紧致设备与糖类化合物的组合 |
| US20140301960A1 (en) * | 2012-11-14 | 2014-10-09 | Coty Germany Gmbh | Cosmetic composition for increasing hyaluronic acid synthesis in skin and its use for repairing wrinkles |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2026882A2 (fr) * | 2006-05-05 | 2009-02-25 | L'Oréal | Association d'un agent ou dispositif tenseur et d'un compose saccharidique |
-
2021
- 2021-04-19 CN CN202180022669.9A patent/CN115427009A/zh active Pending
- 2021-04-19 JP JP2022517041A patent/JPWO2021215411A1/ja active Pending
- 2021-04-19 WO PCT/JP2021/015926 patent/WO2021215411A1/ja active Application Filing
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101484213A (zh) * | 2006-05-05 | 2009-07-15 | 莱雅公司 | 紧致剂或紧致设备与糖类化合物的组合 |
| US20140301960A1 (en) * | 2012-11-14 | 2014-10-09 | Coty Germany Gmbh | Cosmetic composition for increasing hyaluronic acid synthesis in skin and its use for repairing wrinkles |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| YUKINA: "スキンケアの常識を超える！『美容機器×化粧品』によるReFaの表情美メソッド", Retrieved from the Internet <URL:https://maquia.hpplus.jp/blog/yukina_maquia/34597/> * |
| 青山結: "肌のハリとタルミの最新研究， ストレスファイバーに働きかけて重力に対抗:コヒリス(COHELISS)", FRAGRANCE JOURNAL, vol. 36, no. 11, pages 62 - 63 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2021215411A1 (ja) | 2021-10-28 |
| JPWO2021215411A1 (zh) | 2021-10-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10555896B2 (en) | Skin penetration enhancing method and its penetration enhancer | |
| Lai-Cheong et al. | Structure and function of skin, hair and nails | |
| EP2510980B1 (en) | A method for the dermocosmetic treatment of skin by application of NGF-containing compositions | |
| CN104666236A (zh) | 一种保湿护肤面膜 | |
| US20080153839A1 (en) | Use of anisic acid for promoting desquamation | |
| CN104352418A (zh) | 一种抗衰老精华液 | |
| JP2024037928A (ja) | 光老化及び／又は真皮色素沈着を予防及び／又は改善するための方法，装置，および抗光老化及び／又は真皮色素沈着抑制剤，抗光老化及び／又は真皮色素沈着抑制剤のスクリーニング方法，抗光老化及び／又は真皮色素沈着抑制美容処置の評価方法，並びに光老化及び／又は真皮色素沈着度の評価方法 | |
| CN110051614A (zh) | 一种抗皱嫩肤精华 | |
| Tansathien et al. | Development of sponge microspicule cream as a transdermal delivery system for protein and growth factors from deer antler velvet extract | |
| Maddin et al. | The Biological Effects of a Pulsed Electrostatic Field with Specific Reference to Hair Electrotrichogenesis | |
| WO2021167097A1 (ja) | 立毛筋細胞の賦活化による老化改善方法 | |
| JP7526167B2 (ja) | 皮膚抗老化のための方法および装置 | |
| WO2019057511A2 (en) | ELECTRICAL METHOD OF DELIVERING HYALURONIC ACID THROUGH THE SKIN | |
| CN115427009A (zh) | 皮肤抗老化剂、用于皮肤抗老化的美容方法及用于使用于该方法的美容装置 | |
| WO2021215409A1 (ja) | 光老化及び／又は真皮色素沈着を予防及び／又は改善する剤，それを用いた美容方法，及びその方法に適用するための美容装置 | |
| Kurniawati et al. | Different Effect Of Iontoporesis And Massage With The Addition Of Vitamin C Serum On Elasticity Women's Face Skin | |
| JP7325234B2 (ja) | 皮膚老化度の評価方法 | |
| Zheng et al. | An androgenetic alopecia remedy based on marine collagen peptide-incorporated dissolving microneedles | |
| de Oliveira et al. | Stretch treatment: research focused on aesthetic biomedicine | |
| WO2023022011A1 (ja) | 美容方法 | |
| Han et al. | The Efficacy Study of Trinity Permeation Synergism on Anti-Aging | |
| RU2640188C1 (ru) | Средство для биологического омоложения | |
| CN110522668A (zh) | 一种微电流抗菌面膜及其制作方法 | |
| Svolacchia et al. | Off-label use of a medium-high molecular weight, isotonic and sterile hyaluronic acid in aesthetic medicine: cases report | |
| JP2024113172A (ja) | 美容方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |