CN115350187B - 异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用 - Google Patents

异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN115350187B
CN115350187B CN202211046612.5A CN202211046612A CN115350187B CN 115350187 B CN115350187 B CN 115350187B CN 202211046612 A CN202211046612 A CN 202211046612A CN 115350187 B CN115350187 B CN 115350187B
Authority
CN
China
Prior art keywords
lung cancer
bone metastasis
ipratropium bromide
tumor cells
application
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202211046612.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115350187A (zh
Inventor
黎孟枫
蔡俊超
陶天予
刘蕾
梁嘉儿
吴珏珩
何伟玲
霍励耘
林湛文
陈梓烁
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sun Yat Sen University
Original Assignee
Sun Yat Sen University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sun Yat Sen University filed Critical Sun Yat Sen University
Priority to CN202211046612.5A priority Critical patent/CN115350187B/zh
Publication of CN115350187A publication Critical patent/CN115350187A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115350187B publication Critical patent/CN115350187B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/46—8-Azabicyclo [3.2.1] octane; Derivatives thereof, e.g. atropine, cocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用，具体公开了一种非诊断或治疗目的的抑制肿瘤细胞发生骨转移的方法。本发明提供的一种只需将肿瘤细胞与异丙托溴铵或其药学上可接受的盐接触就能有效抑制肿瘤细胞发生骨转移的方法，简单易操作，对肿瘤细胞骨转移具有较好的抑制效果。

Description

异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用
技术领域
本发明属医药技术领域，具体涉及异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用。
背景技术
肺癌的发病率及死亡率在全世界所有肿瘤中高居榜首。长期以来，肺癌患者的生存率极低，尤其是晚期肺癌患者，其五年生存率仅1％。在实际临床诊断中，70％左右的肺癌患者在诊断初期已处于晚期，发生远端器官转移，预后不良。肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因，是实体肿瘤恶性进展最重要的标志性事件，肿瘤转移的发生往往预示着患者预后较差。其中，骨是晚期肺癌最常见且症状最严重的转移器官，据统计，30％～40％的肺癌患者在诊断时就已经发现有骨转移。
骨转移患者通常出现严重的导致骨骼病变，被称为骨骼相关事件，包括骨痛、病理性骨折、高钙血症、脊髓压迫、骨内结构损伤等主要并发症。这些并发症的出现通常意味着患者总体生存率的降低，并与行动能力、社会功能丧失，生活质量下降和医疗费用大幅增加相关。并且由于肿瘤骨转移通常无法治愈或完全缓解，一般的治疗策略和目标是对症减轻和预防骨相关事件，从而改善患者生存质量。
目前临床上针对转移性骨肿瘤的治疗手段主要包括：药物治疗、放疗、手术治疗等。临床常规使用双膦酸盐或地诺单抗以缓解患者骨痛、高钙血症等症状，但多项临床实验结果均表明，此两种药物虽能在一定程度上能够缓解骨痛，改善骨的结构完整性，提高患者生存质量，但并不能有效抑制骨转移的进展，并且抗肿瘤的作用并不明显。并且，此两种药物的特异性均较差，通常伴随着强烈的副作用，如颌骨坏死等。近年来靶向治疗、免疫检查点疗法在转移性肺癌中取得了一定效果，但目前仍无特异性针对肺癌骨转移的分子靶向药物或免疫治疗方法，传统分子靶向药物或免疫治疗对于肺癌骨转移患者治疗效果并不理想。目前肺癌骨转移临床治疗手段仍受限很大，大部分患者采用姑息治疗，生存预后很差。因此深入了解NSCLC骨转移发生发展的具体机制，从而寻找新的治疗靶点或者治疗手段仍然是肺癌研究中急需解决的问题。
异丙托溴铵(C20H30BrNO3)是一种支气管扩张药。临床用于缓解慢性阻塞性肺病引起的支气管痉挛、喘息等症状，以及用于防治哮喘。其化学式如下图所示：
目前尚无该化合物可用于抑制肺癌骨转移或其他类似的功效。
发明内容
本发明第一方面的目的，在于提供一种非诊断或治疗目的的抑制肿瘤细胞发生骨转移的方法。
本发明第二方面的目的，在于提供靶向抑制TFF3二聚体结构形成的物质在制备治疗或预防肿瘤细胞发生骨转移的药物中的应用。
本发明第三方面的目的，在于提供异丙托溴铵或其药学上可接受的盐在制备TFF3二聚体形成的抑制剂中的应用。
本发明第四方面的目的，在于提供异丙托溴铵或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防肿瘤细胞发生骨转移的药物中的应用。
为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：
本发明的第一个方面，提供一种非诊断或治疗目的的抑制肿瘤细胞发生骨转移的方法，将肿瘤细胞与异丙托溴铵或其药学上可接受的盐接触。
优选地，所述抑制肿瘤细胞发生骨转移包括抑制TFF3二聚体的形成。
优选地，所述肿瘤选自乳腺癌、肺癌和肝癌中的至少一种。
优选地，所述肿瘤为肺癌。
优选地，所述肺癌包括非小细胞肺癌、小细胞肺癌。
优选地，所述非小细胞肺癌包括鳞状细胞癌(鳞癌)、腺癌、大细胞癌。
本发明的第二个方面，提供靶向抑制TFF3二聚体结构形成的物质在制备治疗或预防肿瘤细胞发生骨转移的药物中的应用。
优选地，所述肿瘤选自乳腺癌、肺癌和肝癌中的至少一种。
优选地，所述肿瘤为肺癌。
优选地，所述肺癌包括非小细胞肺癌、小细胞肺癌。
优选地，所述非小细胞肺癌包括鳞状细胞癌(鳞癌)、腺癌、大细胞癌。
本发明的第三个方面，提供异丙托溴铵或其药学上可接受的盐在制备TFF3二聚体形成的抑制剂中的应用。
优选地，所述异丙托溴铵或其药学上可接受的盐的浓度为0.5～30μM。
进一步优选地，所述异丙托溴铵或其药学上可接受的盐的浓度为0.5～25μM。
本发明的第四个方面，提供异丙托溴铵或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防肿瘤细胞发生骨转移的药物中的应用。
优选地，所述肿瘤选自乳腺癌、肺癌和肝癌中的至少一种。
优选地，所述肿瘤为肺癌。
优选地，所述肺癌包括非小细胞肺癌、小细胞肺癌。
优选地，所述非小细胞肺癌包括鳞状细胞癌(鳞癌)、腺癌、大细胞癌。
优选地，所述异丙托溴铵或其药学上可接受的盐通过抑制TFF3二聚体形成进而抑制肿瘤细胞发生骨转移。
优选地，所述异丙托溴铵或其药学上可接受的盐的浓度为0.5～30μM。
进一步优选地，所述异丙托溴铵或其药学上可接受的盐的浓度为0.5～25μM。
本发明的有益效果是：
本发明提供的一种只需将肿瘤细胞与异丙托溴铵或其药学上可接受的盐接触就能有效抑制肿瘤细胞发生骨转移的方法，简单易操作，对肿瘤细胞骨转移具有较好的抑制效果。
由于TFF3在细胞中主要以二聚体形式存在，本发明将TFF3二聚体的结构数据与FDA已批准上市的药物结构数据库进行模拟对接和筛选，得到潜在抑制TFF3形成二聚体的小分子药物：异丙托溴铵。该小分子药物已有前期研究成果，其药物动力学明确，可实现“老药新用”，从而缩短临床试验时间、降低研究成本，从而为临床肺癌骨转移治疗提供新的突破，为肺癌的治疗提供候选药物。
附图说明
图1为使用非变性聚丙烯酰胺凝胶检测肺癌细胞上清中TFF3表达水平结果图。
图2为异丙托溴铵对TFF3二聚体形成的影响结果图；图中，A为使用非变性聚丙烯酰胺凝胶检测异丙托溴铵对TFF3二聚体形成的作用的结果图，B为小鼠体内实验检测异丙托溴铵对肺癌骨转移的影响结果图，C为小鼠骨转移肿瘤细胞中TFF3表达量。
具体实施方式
下面将结合本申请实施例，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或制造厂商所建议条件实施。
实施例1TFF3在细胞中以二聚体形式存在
本发明人团队经过前期的大量研究发现，TFF3与肺癌骨转移相关，提示靶向TFF3具有抑制肺癌骨转移进展的潜能，进一步考察了TFF3在肿瘤细胞中的存在形式。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-Page)检测肿瘤细胞上清中TFF3存在形式，具体包括以下步骤：
以2×106密度将PC9亲本细胞(PC9-Parental，PC9-PR)、PC9骨转移(PC9-bonemetastasis，PC9-BM)细胞分别接种于100×20mm培养皿中；37℃5％CO2下培养至细胞贴壁后，弃培养基，用PBS洗涤两次，弃PBS；加入8mL无血清培养基(Opti-MEM，Gibco，Catalog:#31985070)继续培养；48小时后，收集细胞上清，并使用0.45μm过滤器过滤，以去除细胞上清液中的细胞碎片；收集滤液，转移入超滤管，使用10KDa超滤管(Catalog:UFC501096)进行超滤浓缩，4℃离心30分钟；即刻进行后续实验或保存于-40℃；配置非变性聚丙烯酰胺凝胶并进行电泳，与变性聚丙烯凝胶相比，非变性聚丙烯酰胺凝胶的配制和电泳缓冲液中不含有变性剂(SDS)，其余方法步骤与常规变性聚丙烯凝胶相同。
结果如图1所示，TFF3在肺癌细胞中主要以二聚体形式存在，并且相对于PC9亲本细胞，在PC9骨转移细胞中显著高表达，提示可通过抑制TFF3二聚体形成靶向作用TFF3，从而抑制肺癌骨转移的策略。
实施例2异丙托溴铵对TFF3二聚体形成的抑制作用
1.筛选抑制TFF3二聚体形成的小分子抑制剂
以TFF3为主要研究对象进行后续实验。为了筛选针对TFF3二聚体结构的小分子抑制剂，发明人利用计算机软件MOE2010.10进行初步筛选，从TargetMol生物活性分子库中筛选出与TFF3形成二聚体结构的关键位点：第七个半胱氨酸结合的小分子药物；通过进一步的筛选，最终筛选得到异丙托溴铵可作为抑制TFF3二聚体结构形成的小分子药物。
2.非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳验证异丙托溴铵对TFF3二聚体形成的抑制作用
为了进一步验证筛选得到的异丙托溴铵是否能抑制TFF3二聚体形成，发明人采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法进行实验，具体过程如下：
以2×106密度将PC9亲本细胞接种于100×20mm培养皿中；37℃5％CO2下培养至细胞贴壁后，弃培养基，用PBS洗涤两次，弃PBS；加入8mL无血清培养基(Opti-MEM，Gibco，Catalog:#31985070)，同时分别添加不同浓度的异丙托溴铵(终浓度分别为0.5μM、1μM、2μM、4μM)，以不添加异丙托溴铵作为对照组，每个浓度3个平行；继续培养48小时后，收集细胞上清，并使用0.45μm过滤器过滤，以去除细胞上清液中的细胞碎片；收集滤液，转移入超滤管，使用10KDa超滤管(Catalog:UFC501096)进行超滤浓缩，4℃离心30分钟；即刻进行后续实验或保存于-40℃；配置非变性聚丙烯酰胺凝胶并进行电泳(同实施例1)。
结果如图2中A所示，在PC9-BM细胞培养基中添加0.5μM、1μM、2μM、4μM异丙托溴铵(IBM)可显著抑制细胞上清中的TFF3二聚体形成。
实施例3小鼠体内实验检测异丙托溴铵对肺癌骨转移的影响
肿瘤细胞悬液的准备：消化并计数PC9-BM细胞，使用PBS溶液重悬细胞，使细胞浓度为5×105/100μL；
选择6～8周龄的balb/c-nu/nu小鼠，共10只，将小鼠平均随机分为两组，对照组和实验组；使用心室注射的方法将PC9-BM细胞接种至小鼠体内，每只小鼠注射100μL；将小鼠常规养殖7天后，对照组小鼠皮下注射100μL生理盐水，实验组皮下注射100μLIBM溶液，考虑皮下给药的药物吸收率较低，体内实验中使用较高浓度进行实验(25μM)的；后续每周给药两次，连续给药4周，并使用小动物活体成像连续观察肿瘤转移情况。
结果如图2中B所示，在小鼠体内实验中，与对照组(Vehicle)相比，异丙托溴铵处理组小鼠肿瘤骨转移能力显著被抑制。进一步提取相应分组的小鼠骨转移肿瘤细胞，对其中TFF3表达进行检测，发现使用IBM处理后，肿瘤细胞中以单体形式存在的TFF3显著增多(图2中C)，表明使用异丙托溴铵抑制TFF3二聚体形成，可作为抑制肺癌骨转移的新型治疗办法。
上面结合附图对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (3)

1.一种非诊断或非治疗目的的抑制肿瘤细胞发生骨转移的方法，其特征在于，将肿瘤细胞与异丙托溴铵或其药学上可接受的盐接触；所述异丙托溴铵或其药学上可接受的盐为唯一的活性成分；所述肿瘤为肺癌；所述抑制肿瘤细胞发生骨转移包括抑制TFF3二聚体的形成。
2.异丙托溴铵或其药学上可接受的盐作为唯一活性成分在制备治疗或预防肿瘤细胞发生骨转移的药物中的应用，所述异丙托溴铵或其药学上可接受的盐通过抑制TFF3二聚体形成进而抑制肿瘤细胞发生骨转移，所述肿瘤为肺癌。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述异丙托溴铵或其药学上可接受的盐的浓度为0.5~30μM。
CN202211046612.5A 2022-08-30 2022-08-30 异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用 Active CN115350187B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211046612.5A CN115350187B (zh) 2022-08-30 2022-08-30 异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211046612.5A CN115350187B (zh) 2022-08-30 2022-08-30 异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115350187A CN115350187A (zh) 2022-11-18
CN115350187B true CN115350187B (zh) 2023-08-29

Family

ID=84004018

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202211046612.5A Active CN115350187B (zh) 2022-08-30 2022-08-30 异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115350187B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1995388A (zh) * 2005-08-02 2007-07-11 维里德克斯有限责任公司 预测乳腺癌的骨复发
CN114729354A (zh) * 2018-12-25 2022-07-08 中国医学科学院基础医学研究所 炎性相关疾病防治的小rna药物及其组合

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT1819359E (pt) * 2004-12-09 2015-05-28 Janssen Biotech Inc Imunoconjugados anti-integrina, métodos para a sua produção e sua utilização
EP3737675A4 (en) * 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND THEIR USES

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1995388A (zh) * 2005-08-02 2007-07-11 维里德克斯有限责任公司 预测乳腺癌的骨复发
CN114729354A (zh) * 2018-12-25 2022-07-08 中国医学科学院基础医学研究所 炎性相关疾病防治的小rna药物及其组合

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Mengyi Zhang等.A novel small-molecule inhibitor of trefoil factor 3 (TFF3) potentiates MEK1/2 inhibition in lung adenocarcinoma.《Oncogenesis》.2019,第8卷(第11期),第1-16页摘要、讨论部分. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN115350187A (zh) 2022-11-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2013099338A5 (zh)
US6248368B1 (en) Use of magnesium based products for the treatment or prophylaxis of autoimmune diseases
CA2897335A1 (en) A method for treating tumor by using recombinant interferon with changed spatial configuration
CN114159446A (zh) 组织蛋白酶c抑制剂在治疗肿瘤转移中的应用
CN115350187B (zh) 异丙托溴铵在抑制肺癌骨转移中的应用
Nobin et al. Interferon treatment in patients with malignant carcinoids
CN114887063B (zh) Pacsin1在抑制瑞芬太尼诱发的痛觉过敏中的应用
Ozaki et al. Multidisciplinary treatment for resectable pancreatic cancer
CN109481686B (zh) 治疗伴有纤维化肝癌的组合物
WO2015192663A1 (zh) 重组灵芝免疫调节蛋白rLZ-8在治疗肺癌，喉癌和脑胶质瘤中的应用
Rose et al. Hypoxia following interscalene block
WO2022151335A2 (zh) 一种高压氧联合免疫药物用于肿瘤治疗的方法
RU2706786C1 (ru) Способ лечения неоперабельной аденокарциномы поджелудочной железы с метастазами в печень
CN113150067B (zh) Gsdme抑制剂及其在肿瘤化疗诱导的消化道损伤防治中的用途
CN115282151B (zh) 一种拉米替隆的应用
Ruckdeschel et al. Small cell anaplastic carcinoma of the lung: Changing concepts and emerging problems
Choi et al. EP1. 17-23 Omentopexy for Post-Pneumonectomy Bronchopleural Fistula in Patients with Non-Small Cell Lung Cancer After Salvage Radiotherapy
CN103751765A (zh) 重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）在制备治疗组织纤维化药物中的应用
CN117338793A (zh) 一种药物及其应用、用于肝癌患者的免疫联合治疗方法
Nan et al. Prognostic factors of pineal region tumors resected by the modified Poppen approach
CN102858363A (zh) Hb-egf组合物和其治疗与增强的尿道上皮渗透性相关的病症的应用
CN114042073A (zh) 非洛替尼在抑制胰腺癌细胞和肿瘤组织增殖中的应用
CN114113623A (zh) Cxcl12/cxcr4信号通路作为靶点在制备治疗或预防异位骨化的药物中的应用
CN117357629A (zh) 一种多肽在制备治疗银屑病中的用途
CN118021969A (zh) DNase1L3蛋白或过表达DNase1L3蛋白试剂在制备抑制肿瘤进展药物的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant