CN115316426A

CN115316426A - 黄芩素在鲜鱼肉保鲜中的应用

Info

Publication number: CN115316426A
Application number: CN202210822645.8A
Authority: CN
Inventors: 杜红英; 徐泽如; 段天芳; 何林菁; 熊善柏
Original assignee: Huazhong Agricultural University
Current assignee: Huazhong Agricultural University
Priority date: 2022-07-12
Filing date: 2022-07-12
Publication date: 2022-11-11

Abstract

本发明公开了黄芩素在鲜鱼肉保鲜中的应用。利用黄芩素进行保鲜的方法为：将鲜鱼肉浸泡在黄岑素溶液中，浸泡5min‑10min后将鲜鱼肉取出沥干，接着去除鲜鱼肉表面的水面，抽真空后密封，于4±1℃下保存。黄岑素可用来作为新型的鲜鱼肉保鲜剂，具有安全无毒、环保、经济和保鲜效果好等优点，黄岑素在淡水鱼鱼类贮藏过程中很好地延缓了鱼类的腐败进程，延长了其保质期。

Description

黄芩素在鲜鱼肉保鲜中的应用

技术领域

本发明涉及水产品防腐保鲜技术领域，具体涉及黄芩素在新鲜淡水鱼肉保鲜中的应用。

背景技术

我国是淡水鱼类产品生产大国，2020年全国淡水养殖产量3179.26万吨，占淡水产品产量的93.20％，其中鱼类产量2815.54万吨，比上年增加100.53万吨、增长3.70％，而在淡水养殖鱼类中，草鱼产量最高，年产量589.88万吨，占淡水养殖产量的18.55％。而鱼类在捕获或宰杀致死后，在存放或加工过程中因体内所含酶类、体表所带微生物的作用而发生一系列生化反应，导致鱼体鲜度下降、品质变差，甚至腐败变质。

合成防腐剂被广泛用于鱼类存储，以延长保质期并保持质量和安全性。然而，由于合成添加剂对其健康有不利影响，近年来，它们尚未被消费者广泛接受。在这方面，具有广泛的抗氧化剂和抗菌性能的天然防腐剂已被广泛探索并作为海鲜加工中的安全替代品，其具有延长水产品保质期的作用。为有效抑制鱼类腐败，延长其保质期，筛选具有生物安全性、无毒副作用、不污染环境的保鲜剂已成为必然的趋势。

发明内容

基于上述现有技术，本发明提供了黄芩素在鲜鱼肉保鲜中的应用，黄岑素可用来作为新型的鲜鱼肉保鲜剂，具有安全无毒、环保、经济和保鲜效果好等优点。

实现本发明上述目的所采用的技术方案为：

黄芩素在鲜鱼肉保鲜中的应用。

进一步，利用黄芩素进行保鲜的方法为：

将鲜鱼肉浸泡在黄岑素溶液中，浸泡5min后将鲜鱼肉取出沥干，接着去除鲜鱼肉表面的水面，抽真空后密封，于4±1℃下保存。

进一步，所述的黄岑素溶液的浓度为0.0005-0.003g/ml。

进一步，所述的鲜鱼肉为草鱼肉。

与现有技术相比，本发明的有益效果和优点在于：

1、试验表明，浓度为0.0005g/ml、0.001g/ml和0.003g/ml的黄岑素浸泡鲜草鱼块后冷藏，在第16d时TVB-N值分别为8.25mg/100g、7.67mg/100g、6.83mg/100g，而之前已有文献报道：浓度为0.0005g/ml、0.001g/ml和0.003g/ml的EGCG浸泡鲜草鱼块后冷藏，在第15d时TVB-N值分别为19.86mg/100g、18.25mg/100g、16.79mg/100g；蓝莓叶多酚浸泡鲜草鱼块后冷藏，在第16d时TVB-N值为13.08mg/100g。由此表明，与已有的鲜鱼肉类保鲜剂EGCG和蓝莓叶多酚相比，黄岑素处理对于降低鱼片腐败变质过程中含氮挥发物生物产生具有更显著效果，由此表明，黄芩素的保鲜效果要好很多，延长了货架期。

2、黄岑素在淡水鱼鱼类贮藏过程中很好地延缓了鱼类的腐败进程，延长了其保质期。

附图说明

图1为不同多酚对脂肪氧合酶活性抑制的IC₅₀值。

图2为不同浓度的黄岑素对草鱼冷藏过程中POV的影响结果图。

图3为不同浓度的黄岑素对草鱼冷藏过程中硫代巴比妥酸的影响结果图。

图4为不同浓度的黄岑素对草鱼冷藏过程中TVB-N的影响结果图。

图5为不同浓度的黄岑素对草鱼冷藏过程中蛋白巯基值的影响结果图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行说明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1

1、选择待筛选的天然多酚物质；

选取棕矢车菊素、栀子苷、原花青素、杨梅素、甜菊苷、鼠李糖、山奈酚、芹菜素、牛蒡子苷、芒果苷、绿原酸、黄豆黄素、黄芩素、根皮素、葛根素、高良姜素、甘草酸、甘草苷、二氢杨梅素、4-氨基肉桂酸等20种具有抗氧化剂和抗菌性能的天然多酚物质作为候选多酚进行筛选；

1、筛选实验

酶活测定：13.75mL0.2M硼酸盐缓冲液与1mL脂肪氧合酶溶液(0.4mg/mL)和250μL亚油酸钠母液混合，混匀后在水浴中反应，水浴温度为37℃，反应2min时测一次波长234nm处的OD值，继续反应4min时再测一次，观察2次OD值的变化，进行3次平行实验，以波长234nm处的吸光值每分钟增加0.001个单位定义为一个酶活单位。

酶活单位计算公式

A＝1000×[OD_4min-OD_2min]/2

式中：A为酶活性单位；OD_4min为反应4min的OD值，OD_2min为反应2min的OD值。

多酚抑制酶活性测定：在15mL反应体系中，加入1mL脂肪氧合酶溶液(0.4mg/mL)和250μL亚油酸钠底物，再加入0.2mL浓度为1mg/mL的多酚溶液全部混匀后用0.2M硼酸盐缓冲液(pH＝9)补足至15mL，将反应体系在温度为37℃的恒温水浴中反应2min，在紫外可见分光光度计上测定波长234nm处的吸光值，再继续反应2min后再次测定波长234nm处的吸光度，多酚类物质对的抑制率按照下式进行计算：

抑制率＝[(A₀-A₁)/A₀]×100％

式中：A₀为无抑制剂时的酶活力；A₁为加抑制剂时的酶活力；

重复上述操作，多酚溶液加入的体积分别为0.4、0.6、0.8、1.0mL，测量不同浓度的多酚对脂肪氧合酶的抑制率；

3、对比候选多酚的，确定目标多酚

计算20种多酚的IC₅₀值，其结果如图1所示，通过比较各多酚的IC₅₀值，发现棕矢车菊素、山奈酚和黄芩素的IC₅₀值相对较低，但是综合多酚的市场价格，确定目标多酚为黄岑素。

试验一、黄岑素对鲜草鱼肉的保鲜效果试验

试验方法：

1、草鱼预处理：

将鲜活草鱼敲击头部致死后，除去鳞片、头部、内脏和脊骨，对背脊肉进行去皮，洗净后再去除红肉，将剩下的草鱼肉切割成6cm×2cm×1cm的草鱼块，将草鱼块分别用0.05％，0.10％和0.30％(w/v)的黄岑素溶液浸泡5min，取出后在室温下沥干10min，滤纸沾去鱼块表面多余水分，分别装入自封袋(9cm×12cm)，排出多余空气冷藏，对照组(CONT)为蒸馏水同样浸泡沥干处理的草鱼块，所有草鱼块样品均保藏在4±1℃恒温箱中；

2、过氧化值测定：

取1.00g草鱼块于50mL离心管，分别加入10mL氯仿-甲醇(7:3，v:v)溶液液和3ml氯化钠溶液，3000r/min下均质1min后，充分振荡，再在4000r/min下离心10min，取5mL下层溶液并用0.45μm有机滤膜过滤，滤液加入5mL氯仿-甲醇(7:3，v:v)溶液混合，分别加入25μL3.94mol/L硫氰酸铵溶液和25μL氯化亚铁溶液，摇匀后静置5min，得到样品溶液，在500nm处测得样品溶液吸光值。以氯仿-甲醇溶液为空白溶液，结果以每千克粗脂质中过氧化物含量(mmol/kg脂质)表示，计算公式如下：

式中：POV为过氧化值(mmol/kg)；As为样品溶液在500nm处的吸光值；Ab为空白溶液在500nm处的吸光值；m为称取鱼肉质量(g)；55.84为铁元素的摩尔质量(g/mol)；

3、硫代巴比妥酸值测定：

称取2g搅碎的草鱼肉放入50mL离心管，加入16mL5％(w/v)TCA溶液和100μL丁基羟基甲苯(BHT)，高速均质30s，将均质液10000×g下离心5min后取上清液，取5mL过滤后的上清液与1mL 0.01mol/L的TBA水溶液混合，得到混合液，将混合液在沸水浴中加热40min，冷却至室温后，将所得的反应液在532nm处测其吸光值。TBA值为吸光值乘以10.2，该值为采用1，1，3，3-四乙氧基丙烷，丙二醛的前体物所做的标准曲线所得，相当于每千克鱼肉所含丙二醛相似物的毫克数；

4、挥发性盐基氮含量测定：

取3.00g草鱼块于50mL离心管，加入30mL蒸馏水，在3000r/min下均质1min后，充分振荡，再在4000r/min离心10min，取上清液进行分析，使用全自动定氮仪进行挥发性盐基氮含量测定；

5、蛋白巯基值测定：

称量2.00g草鱼块于离心管中，加入20mL 50mmol/L磷酸缓冲液(pH＝7.2，含0.6mol/L NaCl)，混合后在8000r/min下均质30s，均质液于4℃静置3h后在10000r/min下离心10min，取上清液为待测蛋白溶液，蛋白浓度用BCA试剂盒进行测定。

取0.50mL适当稀释后的蛋白溶液与4.50mL 20mmol/LTris-盐酸缓冲溶液(pH＝6.8，含8mol/L尿素，2％SDS，10mmol/L EDTA)进行混合，再加入0.50mL 0.1％Ellman试剂(2-硝基苯甲酸用pH＝6.8的Tris-HCl缓冲溶液溶解)，于40℃下水浴25min，流水冷却至室温，得到待测样品，测待测样品在412nm处的吸光值。蛋白巯基含量用摩尔吸光系数为13600L·mol-1·cm-1进行计算，结果用每毫克蛋白所含巯基的微克数表示(μg/mg蛋白)；

6、色度测定

室温下用测色色差仪对鱼块进行白度测定，每块草鱼块正反各测三次，按以下公式计算：

式中：W为白度值；L*为亮度值；a*为红绿值；b*为蓝黄值；

试验结果：

1、过氧化值测定结果：

不同浓度的黄岑素对草鱼冷藏过程中POV值的影响如图2所示，由图2可知，经过不同浓度的黄芩素浸泡后，鲜草鱼块在冷藏过程中，其过氧化值先增大后减小，特别是使用浓度为0.3％(w/v)的黄芩素溶液浸泡后，在冷藏16天过程中，其过氧化值较其他浓度更低。

2、硫代巴比妥酸值测定结果：

不同浓度的黄岑素对草鱼冷藏过程中硫代巴比妥酸值的影响如图3所示，由图3可知，经过不同浓度的黄芩素浸泡后，鲜草鱼块在冷藏过程中，硫代巴比妥酸值在第12天内一直在升高，而后基本上不再升高，可以控制在0.9mg MDA/kg以内。

3、挥发性盐基氮含量测定结果：

不同浓度的黄岑素对草鱼冷藏过程中TVB-N值的影响如图4所示，由图4可知，经过浓度为0.05％，0.10％和0.30％(w/v)的黄岑素溶液浸泡后，鲜草鱼块在冷藏16天后，TVB-N值分别为8.25mg/100g、7.67mg/100g、6.83mg/100g，远远低于国家标准限值20mg/100g。

4、蛋白巯基值测定结果：

不同浓度的黄岑素对草鱼冷藏过程中蛋白巯基值的影响如图5所示，由图5可知，经过不同浓度的黄芩素浸泡后，鲜草鱼块在冷藏过程中，蛋白巯基值在不断地降低，在冷藏16天后，浓度为0.3％(w/v)的黄芩素处理组降低尤为明显。

5、色度测定结果：

色度测定结果如下表1所示：

表1黄岑素对草鱼冷藏过程中色度的影响

由上表1可知，经过不同浓度的黄芩素浸泡后，鲜草鱼块在冷藏过程中，鲜草鱼块的白度值基本上保持不变。

Claims

1.黄芩素在鲜鱼肉保鲜中的应用。

2.根据权利要求1所述的黄芩素的应用，其特征在于利用黄芩素进行保鲜的方法为：

将鲜鱼肉浸泡在黄岑素溶液中，浸泡5min-10min后将鲜鱼肉取出沥干，接着去除鲜鱼肉表面的水面，抽真空后密封，于4±1℃下保存。

3.根据权利要求2所述的黄芩素的应用，其特征在于：所述的黄岑素溶液浓度为0.0005-0.003g/ml。

4.根据权利要求1所述的黄芩素的应用，其特征在于：所述的鲜鱼肉为淡水鱼肉。