CN115315257A - 用于抑制侵入性外科手术后的炎症和Src激酶活化的药物组合 - Google Patents

用于抑制侵入性外科手术后的炎症和Src激酶活化的药物组合 Download PDF

Info

Publication number
CN115315257A
CN115315257A CN202180018753.3A CN202180018753A CN115315257A CN 115315257 A CN115315257 A CN 115315257A CN 202180018753 A CN202180018753 A CN 202180018753A CN 115315257 A CN115315257 A CN 115315257A
Authority
CN
China
Prior art keywords
pharmaceutically acceptable
lidocaine
methylnaltrexone
acceptable salt
administered
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180018753.3A
Other languages
English (en)
Inventor
E·G·沃塔-韦利斯
A·博尔吉特
A·米提蒂利
M·文图里
E·多纳蒂
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sintetica SA
Original Assignee
Sintetica SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sintetica SA filed Critical Sintetica SA
Publication of CN115315257A publication Critical patent/CN115315257A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A61K31/167—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the nitrogen of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. lidocaine, paracetamol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/485—Morphinan derivatives, e.g. morphine, codeine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D489/00—Heterocyclic compounds containing 4aH-8, 9 c- Iminoethano-phenanthro [4, 5-b, c, d] furan ring systems, e.g. derivatives of [4, 5-epoxy]-morphinan of the formula:
    • C07D489/06—Heterocyclic compounds containing 4aH-8, 9 c- Iminoethano-phenanthro [4, 5-b, c, d] furan ring systems, e.g. derivatives of [4, 5-epoxy]-morphinan of the formula: with a hetero atom directly attached in position 14
    • C07D489/08—Oxygen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

抑制p‑Src酪氨酸激酶活化的化合物的组合，其在治疗创伤性外科介入导致的炎症以及外科切除癌症组织后癌细胞的增殖或转移中具有特别的用途。

Description

用于抑制侵入性外科手术后的炎症和Src激酶活化的药物 组合
发明领域
本发明涉及抑制p-Src酪氨酸激酶的活化和炎症的化合物的组合，特别是在用于癌症和其它医学问题的侵入性外科手术后。在特别优选的方面，本发明涉及利多卡因和甲基纳曲酮及其药学上可接受的盐的组合，其用于预防和治疗侵入性外科手术后的炎症、癌症增殖和癌症转移。
背景
Src家族激酶(SFK)的成员是涉及多个信号传导途径的非受体酪氨酸激酶。催化的SH3和SH2结构域通过内在不规则“独特(Unique)”结构域(其在SFK成员中显示强的序列分歧度)附接至膜锚定SH4结构域。在过去二十年间，结构和生物化学研究已经开始揭开该独特结构域在SFK活性的调节中的关键作用。
Src是在调节细胞至基质(cell-to-matrix)的附着、迁移和结合稳定性中起关键作用的非受体蛋白酪氨酸激酶(Frame,2004 J.Cell Sci.117(Pt 7),989-998)。因此，Src活性的精确调节对于正常细胞生长至关重要。Src的失活状态是通过靠近Src的C端的磷酸化酪氨酸(在哺乳动物Src中的Tyr530；在鸡Src中的Tyr527)来获得，由其SH2结构域识别，同时SH3结构域与位于SH2与激酶结构域之间的连接区的聚脯氨酸基序相互作用；这些分子内相互作用限制进入激酶结构域(Xu等人,1997 Nature 385,595-602)。Tyr530处的去磷酸化后是Tyr419处的自磷酸化，其导致该激酶的完全活化。
针对Src通过PKA(cAMP依赖蛋白激酶)在Ser17处的磷酸化，已假定其在蛋白质-蛋白质相互作用或细胞定位中的潜在作用。例如，已观察到用PDGF治疗3T3纤维母细胞会导致Src从质膜到胞质液的转位，其伴随Ser17通过PKA的磷酸化增强(Walker等人,1993J.Biol.Chem.268,19552-19558)。此观察表明该磷酸化可能会干扰用于将Src锚定至脂质双层的静电相互作用。在Rap1的cAMP活化、细胞外信号调节激酶的抑制和细胞生长的抑制中也需要Src在Ser17处的PKA磷酸化，尽管此磷酸化介导这些过程的机制是未知的(Obara等人,2004 J.Cell Sci.117,6085-6094)。还参见Amata等人(Frontiers inGenetics June 2014；Volume 5,Article 181,1)。
外周μ-阿片样受体拮抗剂甲基纳曲酮已经自2008年起被美国食品药品管理局和欧洲药品管理局批准，其在正接受姑息护理的重症患者中当其对泻剂疗法的响应仍不足时用来治疗阿片样物质诱导的便秘，以及最近在具有慢性疼痛的患者中用来治疗阿片样物质诱导的便秘。因为甲基纳曲酮的血脑屏障通过受限，可将其给予正接受阿片样物质治疗的癌症患者而不会影响镇痛作用。
在2008年，Singleton等人(Mol Cancer Ther 2008；7(6).June 2008)报道了甲基纳曲酮与5-FU和贝伐单抗对抑制血管内皮生长因子(VEGF)发挥协同作用，VEGF诱导人肺微血管内皮细胞增殖和迁移，其是癌症相关血管生成中的两个关键部分。他们还观察到用甲基纳曲酮而非纳曲酮治疗人内皮细胞增加了受体蛋白酪氨酸磷酸酶的活性，其独立于μ阿片样受体的表现。同样这些研究人员随后公开了数个专利申请，其提出应用甲基纳曲酮抑制细胞增殖和迁移，特别是与血管生成相关的内皮细胞增殖和迁移。参见Moss等人的WO2007/121447。
在2016年，Janku等人(Annals of Oncology 27:2032-2038,2016)从两个随机安慰剂对照登记试验探究在重症患者中的合并数据并且检测患有癌症的患者，以鉴别在常规临床剂量下给予甲基纳曲酮在试验期间是否会影响生存率。他们得出结论，甲基纳曲酮的治疗与整体生存率增加有关，这支持了临床前的假说，即μ阿片样受体可以在癌症进展中起作用，而且用甲基纳曲酮靶向μ阿片样受体在癌症治疗上有必要进一步研究。
根据Vaughn Williams分类法，利多卡因(2-二乙基氨基乙酰基-2’,6’-二甲基苯胺)(C14H22N2O)是酰胺类局部麻醉剂和1b类抗心律失常剂。1b类抗心律失常剂在动作电位第0期期间与开放的钠离子通道结合，因此当动作电位达到峰值时会阻挡许多通道。利多卡因经批准的适应症包括通过浸润、阻断或局部应用而用于局部、神经轴、区域或周边麻醉的需求，或者危及生命的心室性心律失常的预防或治疗。它也已广泛用于慢性和神经性疼痛的管理，以及最近以静脉内输注的形式用于术后镇痛和外科恢复的管理。利多卡因具有潜在的效用来作为强效的抗炎剂，尽管迄今为止精心设计的研究仍不足以证实其在大多数临床环境中的用途，以及利多卡因尚未批准用于此特定适应症。Weinberg等人,World JAnesthesiol.Jul 27,2015；4(2):17-29。
由于涉及Src酪氨酸蛋白激酶和细胞间附着分子-1的炎性过程在肿瘤生长和转移中是重要的，Piegeler等人(Anesthesiology.2012 September；117(3):548-559)假设酰胺连接的局部麻醉剂例如利多卡因、氯普鲁卡因和罗派卡因可能抑制涉及腺癌细胞的迁移的炎性Src-信号传导。为了评估利多卡因对NCI-H838肺癌细胞Src信号传导的作用，Piegeler等人以递增浓度的利多卡因(1nM、1μM、10μM、100μM)来处理细胞20分钟，并且通过Westernblot分析Src磷酸化。尽管在将细胞与利多卡因温育20分钟后会观察到Src磷酸化在酪氨酸419处有剂量依赖性的减少，但是该减少并未达到统计学显著性(Kruskal-Wallis检验，p＝0.146)。然而，将细胞与TNF-α和10μM(p＝0.012)的利多卡因共温育后会在TNF-α诱导的Src磷酸化上观察到73％的显著减少。
迄今为止关于Src-激酶磷酸化的抑制剂的成果对进一步的研究产生了有希望的途径，但尚无实际的临床数据或治疗。所需的是用于预防Src激酶活化的改善的方法和组合物。
也需要在由Src信号传导介导的多种医学病症中具有潜在用途的方法和组合物，包括涉及癌症血管生成和癌症转移的炎症、细胞增殖和细胞迁移。
发明概述
出乎意料地发现利多卡因和甲基纳曲酮具有协同作用以抑制Src蛋白激酶的活化和炎性信号传导，因此支持了该组合在由Src蛋白激酶活化和炎症介导的多种病症中的用途。因此，在第一主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中治疗由侵入性外科手术引起的炎症的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
该方法也特别可用于癌症手术后预防癌症的增殖或扩散。因此，在第二主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中在外科介入以除去癌症肿瘤后抑制癌细胞的增殖和转移的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
该协同组合特别可用于侵入性外科手术后抑制炎症或Src蛋白激酶的活化。因此，在第三主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中在侵入性外科手术后抑制Src酪氨酸蛋白激酶在Tyr419处磷酸化的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
在第四主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中在侵入性外科手术后抑制Src酪氨酸蛋白激酶磷酸化介导的细胞信号传导的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
在第五主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中在侵入性外科手术后治疗Src酪氨酸蛋白激酶磷酸化介导的疾病的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
本发明还涉及利多卡因和甲基纳曲酮以单位剂量的形式的协同组合。因此，在第六主要实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐；和(c)一种或多种药学上可接受的载体。
本发明的另外的优势部分地阐述于随后的说明中，并且在某种程度上从该说明中将是显而易见的，或者可以通过实施本发明而了解。本发明的优势可以通过在所附权利要求中特别指出的要素和组合来实现和获得。应当理解前述通用描述和下面的详细描述均是示例性和解释性的并且不限制本发明，如所要求的。
附图简述
并入并且构成本说明书的部分的附图说明本发明的多个实施方案，以及连同说明一起用来解释本发明的原理。
图1描绘了在KPC-105小鼠细胞系中20ng/mL小鼠TNF-α(图1A)和在胰腺癌细胞中20ng/mL人TNF-α(图1B)导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，如实施例1所描述。
图2描绘了在人胰腺癌细胞系中以多种浓度的利多卡因温育30分钟后导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，如实施例2所描述。
图3描绘了在KPC-105小鼠细胞系中以多种浓度的利多卡因温育30分钟后导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，如实施例3所描述。
图4A和4B描绘了在不同时间点10μM利多卡因处理KPC-105细胞导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，使用25μg/泳道(NP40裂解物)10％SDS PAGE，如实施例4所描述。
图5描绘了10μM利多卡因处理KPC-105细胞和甲基纳曲酮处理细胞导致的Src蛋白活化的SDS page条带图，使用15μg/泳道(NP40裂解物)10％SDS PAGE，如实施例5所描述。
图6描绘了100nM甲基纳曲酮处理KPC-105细胞导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，使用10μg/泳道(NP40裂解物)10％SDS PAGE，如实施例6所描述。
图7描绘了10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮处理KPC-105细胞导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，使用10μg/泳道(NP40裂解物)10％SDS PAGE，如实施例7所描述。
图8描绘了10μM利多卡因、100nM甲基纳曲酮和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮处理KPC-105细胞导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，使用7.5μg/泳道(RIPA裂解物)10％SDS PAGE，如实施例8所描述。
图9描绘了10μM利多卡因、100nM甲基纳曲酮和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮处理KPC-105细胞导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，使用7.5μg/泳道(RIPA裂解物)10％SDS PAGE，如实施例9所描述。
图10描绘了10μM利多卡因、100nM甲基纳曲酮和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮处理人胰腺癌细胞在1小时后导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，使用30μg/泳道(RIPA裂解物)10％SDS PAGE，如实施例10所描述。
图11描绘了10μM利多卡因、100nM甲基纳曲酮和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮处理人胰腺癌细胞在1小时后导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，使用30μg/泳道(RIPA裂解物)10％SDS PAGE，如实施例11所描述。
图12描绘了10μM利多卡因、100nM甲基纳曲酮和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮处理人胰腺癌细胞在多个时间点后导致的Src-蛋白活化的SDS page条带图，使用15μg/泳道(RIPA裂解物)10％SDS PAGE，如实施例12所描述。
图13描绘了利多卡因、甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的未激发或经LPS激发的小鼠的肺和脾的苏木精和伊红(H&E)染色和病理评分，其在0(无表现)至4+(强均匀表现)的浮动评分进行病理评级，如实施例13所描述。
图14描绘了对于(A)白介素1α(IL-1α)(A)、干扰素-γ(IFNγ)(B)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(C)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)(D)、白介素10(IL-10)(E)、白介素6(IL-6)(F)和白介素17A(IL-17A)(G)的LPS-诱导的血清炎性细胞因子分布，测量对照组和用利多卡因、甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的LPS激发的小鼠的血清，使用LEGENDplexTM小鼠炎症组(BioLegend,USA)试剂盒，然后进行流式细胞术，如实施例13所描述。
图15描绘了在用利多卡因、甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的未激发或LPS-激发的小鼠的肺和脾中，使用抗小鼠F4/80抗体免疫组织化学(IHC)染色后肺(A)和脾(B)中巨噬细胞的状态和评分，在0(无表现)至4+(强均匀表现)的浮动评分进行病理评级，如实施例13所描述。
图16描绘了在用利多卡因、甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的未激发或LPS-激发的小鼠的肺和脾中，使用抗小鼠NK1.1抗体IHC染色后肺(A)和脾(B)中自然杀手(NK)细胞的状态和评分，在0(无表现)至4+(强均匀表现)的浮动评分进行病理评级，如实施例13所描述。
图17描绘了在用利多卡因、甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的未激发或LPS-激发的小鼠的肺和脾中，使用抗小鼠CD19抗体IHC染色后肺(A)和脾(B)中B细胞的状态和评分，在0(无表现)至4+(强均匀表现)的浮动评分进行病理评级，如实施例13所描述。
图18描绘了在用利多卡因、甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的未激发或LPS-激发的小鼠的肺和脾中，使用抗小鼠CD3抗体IHC染色后肺(A)和脾(B)中T细胞的状态和评分，在0(无表现)至4+(强均匀表现)的浮动评分进行病理评级，如实施例13所描述。
图19描绘了在用利多卡因、甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的未激发或LPS-激发的小鼠的肺和脾中，使用抗小鼠CD4抗体IHC染色后肺(A)和脾(B)中CD4+T细胞的状态，在0(无表现)至4+(强均匀表现)的浮动评分进行病理评级，如实施例13所描述。
图20描绘了在用利多卡因、甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的未激发或LPS-激发的小鼠的肺和脾中，使用抗小鼠CD8抗体IHC染色后肺(A)和脾(B)中CD8+T细胞的状态，在0(无表现)至4+(强均匀表现)的浮动评分进行病理评级，如实施例13所描述。
详细描述
定义与术语的使用
如本说明书和随后的权利要求所使用的，单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数指代物，除非上下文另有明确规定。
如本说明书和随后的权利要求所使用的，用语“包括”和该用语的变化例如“包含”和“含有”是指“包括但不限于”并且不旨在排除例如其它添加物、组分、整体或步骤。当要素被描述为包括复数个组分、步骤或条件时，应理解的是该要素也可以被描述为包含该复数个的任何组合，或“由该复数个组分、步骤或条件或其组合构成”，或“基本上由该复数个组分、步骤或条件或其组合构成”。
“治疗有效量”是指为了支持或影响代谢过程或者为了治疗或预防疾病而给个体施用时，足以引起此类治疗或预防疾病或者支持或影响代谢过程的量。
当通过指定范围的下限与该范围的上限分开、或指定特别数值来给定范围时，应理解的是可以通过选择性组合任何下限变量、上限变量和特别数值来定义在数学上可行的范围。以类似的方式，当范围被定义为从一个端点跨度到另一个端点时，该范围应理解为也包括介于该两端点间并且不含两端点的跨度。
当提及“药物治疗”或“治疗方法”时，应理解该治疗可以通过使用任何可接受的剂型的任何适合的施用途径来完成，并且该药物可以作为游离碱、盐或酯或其它前药部分来施用。
当在本文中使用时，术语“约”将补偿制药工业所允许和此工业中产品固有的变异性，例如制备变化和时间诱导的产品降解、盐的选择以及分子溶剂化物和水合度导致的产品强度差异。
在本发明的上下文内，只要涉及本文所述的任何疾病病症，术语“治疗”是指减少症状或病症的发生，或者减缓或减轻与此类病症相关的至少一种症状，或者减慢或反转此类病症的进展，或者管理或影响此类病症下的代谢过程。在本发明的含义内，该术语也表示阻止、延迟发作(即疾病的临床表现前的期间)和/或降低疾病发展或恶化的风险。
与本发明的组合物连接使用的短语“可接受的”是指此类组合物的分子实体和其它成分，其在生理上可耐受并且当施用于个体(例如哺乳动物，例如人)时通常不会产生不良反应。
当在本文中给定百分比时，应理解的是该百分比是重量百分比，并且除非另有相反的叙述或从上下文情境显而易见的，否则比例是基于重量的。
当表示化合物时并未指出其是以游离碱还是盐存在时，应理解其包括游离碱和盐形式两者。以类似的方式，当给定化合物的重量、剂量或比例的范围时，应理解其包括基于游离碱和盐的重量计算的范围，除非提及特别的盐，在此情况下该范围应指提及盐的重量。因此，当提及100mg利多卡因，或者100mg利多卡因或其药学上可接受的盐时，该公开应理解为包括100mg的利多卡因(作为游离碱)、100mg的利多卡因盐酸盐(基于游离碱的重量)、或者100mg的利多卡因盐酸盐(基于该盐的重量，有别于其它盐)。而当提及100mg利多卡因盐酸盐时，该公开应理解为仅包括100mg的利多卡因盐酸盐，基于该盐的重量。
在本发明的任何实施方案中，甲基纳曲酮的优选的盐是甲基纳曲酮氢溴酸盐。在本发明的任何实施方案中，利多卡因的优选的盐是利多卡因盐酸盐。
在任何需要分析或测试以理解本文所述的给定特性或特征时，应理解的是该分析或测试是根据美国食品药品管理局(“FDA”)的适用指南、指南草案、法规和专论、以及美国药典(“USP”)来执行，该药典适用于美国的药品并于2020年1月1日起生效，除非另有指定。
主要实施方案
本发明是以主要实施方案和子实施方案来描述，应理解的是：可以组合主要实施方案以定义其它主要实施方案；可以组合子实施方案以定义另外的子实施方案；并且子实施方案和子实施方案的组合可以与所有主要实施方案组合来定义本发明的其它实施方案。组合实施方案和子实施方案的能力仅受数学上或物理上不可行性限制。
在第一主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中治疗由侵入性外科手术引起的炎症的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
在第二主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中外科介入以除去癌症肿瘤后抑制癌细胞的增殖和转移的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
在第三主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中在侵入性外科手术后抑制Src酪氨酸蛋白激酶在Tyr419处磷酸化的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
在第四主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中在侵入性外科手术后抑制Src酪氨酸蛋白激酶磷酸化介导的细胞信号传导的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
在第五主要实施方案中，本发明提供了在需要的人中在侵入性外科手术后治疗Src酪氨酸蛋白激酶磷酸化介导的疾病的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用：(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
在第六主要实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含(a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；(b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐；以及(c)一种或多种药学上可接受的载体。
子实施方案的讨论
多种技术可用于进行本发明的方法。例如，本发明可以在手术前、手术期间和/或手术后通过连续静脉内输注来实施。
因此，在多种子实施方案中本发明提供了：
·在手术前以连续输注施用组合物；
·在手术期间以连续输注施用组合物；
·在手术后以连续输注施用组合物，优选持续至少24或48小时。
·以上的任何组合。
更优选的是，组合物将在手术前、手术期间和手术后施用，其在本文中定义为“围手术(perioperative)”期间。
为了本发明的目的，除非有能力排除缓慢推注，否则连续静脉内输注应理解为允许缓慢推注，尽管在优选的实施方案中术语将以其传统意义使用。
心脏并发症的监控也是重要的。因此，在优选的实施方案中，患者优选在这些期间的任何或所有时期被遥测式监控。在手术期间进行遥测式监控是最为便利的，但在可能的情况下，应在所有阶段进行遥测式监控。
当在手术前通过输注施用组合物时，输注优选在任何位置发生持续30分钟至12小时或30分钟至6小时。手术前的输注应尽可能发生于接近手术并且优选应不晚于手术前2小时或30分钟结束。
当在手术后通过输注施用组合物时，输注优选发生至少6小时并且可以持续至多72小时，但优选持续约48或24小时。手术后的输注应尽可能发生于接近手术并且优选应不晚于手术后2小时或甚至30分钟开始。在优选的实施方案中，在患者历经手术前、围手术和手术后进行时，连续输注将连续不停。
施用的利多卡因的量可以以每日为基础表示。因此，通常，利多卡因的剂量以每日为基础的范围为10至3000mg、100至2500mg或200至2000mg。在可选择的实施方案中，量的范围为：10-100mg、10-50mg、50-100mg、100-200mg、100-150mg、150-200mg、200-300mg、200-250mg、250-300mg、300-400mg、300-350mg、350-400mg、400-500mg、400-450mg、450-500mg、500-600mg、500-550mg、550-600mg、600-700mg、600-650mg、650-700mg、700-800mg、700-750mg、750-800mg、800-900mg、800-850mg、850-900mg、900-100mg、900-950mg、950-1000mg、1000-1100mg、1100-1200mg、1200-1300mg、1300-1400mg、1400-1500mg、1500-1600mg、1600-1700mg、1700-1800mg、1800-2000mg、2000-2200mg、2200-2400mg、2400-2600mg、2500或2800mg或2800-3000mg，优选包括端点。
在特别优选的实施方案组中，利多卡因的剂量以每日为基础是850-3000mg、950-2500mg或1000-2000mg，优选包括端点。
施用的利多卡因的量也可以表示为每单位体重的速率。因此，利多卡因优选以0.5-50mg/kg/天、1-40mg/kg/天或5-30mg/kg/天的速率连续输注来施用。其它可选择的包括0.5-2mg/kg/天、2-5mg/kg/天、5-10mg/kg/天、10-15mg/kg/天、15-20mg/kg/天、20-25mg/kg/天、25-30mg/kg/天、30-35mg/kg/天、35-40mg/kg/天、40-45mg/kg/天。
特别优选的施用速率是10-45mg/kg/天、15-35mg/kg/天和20-30mg/kg/天。剂量将始终小于产生大于5mg/L的血清浓度的量以防止不希望的并发症，例如头晕。
施用的甲基纳曲酮的量也可以以每日为基础表示。因此，通常，甲基纳曲酮的剂量以每日为基础的范围为0.2至175mg、0.5mg至100mg、2至20mg或5至15mg。在可选择的实施方案中，量的范围为：0.5-10mg、0.5-5mg、5-10mg、10-20mg、10-15mg、15-20mg、20-30mg、20-25mg、25-30mg、30-40mg、30-35mg、35-40mg、40-50mg、40-45mg、45-50mg、50-60mg、50-55mg、55-60mg、60-70mg、70-80mg、80-90mg、90-100mg或100-175mg，优选包括端点。
特别优选的静脉内输注速率为15至150mg/天、20至120mg/天和25至100mg/天，优选包括端点。
以每单位体重的速率表示，甲基纳曲酮优选以0.02至2.5mg/kg/天、0.05至1mg/kg/天、0.1至0.5mg/kg/天或约0.3mg/kg/天的速率连续静脉内输注施用。在可选择的实施方案中，量的范围为：0.02-0.05mg/kg/天、0.05-0.1mg/kg/天、0.1-0.5mg/kg/天、0.5-1mg/kg/天、1-1.5mg/kg/天、1.5-2mg/kg/天或2-2.5mg/kg/天，优选包括端点。
特别优选的甲基纳曲酮的静脉内输注速率为0.2-2mg/kg/天、0.25-1.75mg/kg/天和0.30-1.5mg/kg/天，优选包括端点。甲基纳曲酮血浆浓度将始终保持低于1400ng/mL，以防止不希望的心血管并发症。
关于本文所给定的用来表示利多卡因和甲基纳曲酮的所有速率，不论施用组合物多天、一整天或其部分时段，均可应用前述施用速率。然而，当输注药物的期间小于一整天时，通常将会采用更高速率以顺应输注整个剂量所需的更短时间。
在本发明的组合物中甲基纳曲酮与利多卡因的比例或根据本发明施用的比例，优选1:5至1:350或1:20至1:200。在可选择的实施方案中，重量比范围为：1:5-1:25、1:5-1:15、1:15-1:25、1:25-1:45、1:25-1:35、1:35-1:45、1:45-1:65、1:45-1:55、1:55-1:65、1:65-1:85、1:65-1:75、1:75-1:85、1:85-1:105、1:85-1:95、1:95-1:105、1:05-1:25、1:05-1:15或1:15-1:25，优选包括端点。
利多卡因与甲基纳曲酮的特别优选的重量比范围为：1:10-1:125；1:20-1:100；和1:30-1:75。
在手术前期间、实际手术期间和/或手术后期间施用的利多卡因盐酸盐与甲基纳曲酮氢溴酸盐的优选的总量，以及在任何组合制剂中它们的比例为：
·比例为1:5至1:350的0.5-100mg的甲基纳曲酮氢溴酸盐和10-3000mg的利多卡因盐酸盐。
·比例为1:20至1:200的0.5-100mg的甲基纳曲酮氢溴酸盐和10-3000mg的利多卡因盐酸盐。
·比例为1:5至1:350的2-20mg的甲基纳曲酮氢溴酸盐和100-2500mg的利多卡因盐酸盐。
·比例为1:20至1:200的2-20mg的甲基纳曲酮氢溴酸盐和100-2500mg的利多卡因盐酸盐。
·比例为1:5至1:350的0.02-2.5mg/kg/天的甲基纳曲酮氢溴酸盐和0.5-50mg/kg/天的利多卡因盐酸盐。
·比例为1:20至1:200的0.02-2.5mg/kg/天的甲基纳曲酮氢溴酸盐和0.5-50mg/kg/天的利多卡因盐酸盐。
·比例为1:5至1:350的0.1-0.5mg/kg/天的甲基纳曲酮氢溴酸盐和5-30mg/kg/天的利多卡因盐酸盐。
·比例为1:20至1:200的0.1-0.5mg/kg/天的甲基纳曲酮氢溴酸盐和5-30mg/kg/天的利多卡因盐酸盐。
再次，在手术后期间的治疗优选持续24或48小时，并且在此期间的任何时期的施用优选伴随遥测式监控。
本发明特别可用于经历侵入性外科手术的患者。为了本发明的目的，侵入性外科手术是指皮肤或粘膜与结缔组织被穿透或被切入的手术程序，并且包括切除癌组织的程序、器官移植、髋和膝置换等。本发明包括小型和大型手术介入两者。大型手术通常是进行更广泛的切除的任何侵入性手术程序，例如进入体腔、除去器官或组织，或者改变正常解剖结构。通常，如果间质屏障(胸膜腔、腹膜、脑膜)被打开，则应视为大型手术。大型手术通常不通过腹腔镜术进行。因此，本发明的方法特别合适于非腹腔镜手术。
本发明在肿瘤切除中具有特别应用，特别是在胰、肾、肝、肺、结肠直肠、乳房和膀胱的肿瘤切除中。因此，例如本发明的方法可以用于治疗患有以下疾病的患者：外分泌性胰腺癌包括腺癌(导管性和腺泡性)、导管内乳头状粘液性肿瘤、腺泡细胞癌、腺样鳞状细胞癌、胶样癌、巨细胞肿瘤、肝样癌、粘液性囊泡肿瘤、胰母细胞瘤、浆液性囊腺瘤、印戒细胞癌、实体假乳头状肿瘤、鳞状细胞癌和未分化癌。该方法也可以用于治疗内分泌性胰腺癌，包括胰神经内分泌肿瘤(功能性或非功能性)或胰岛细胞肿瘤。功能性神经内分泌肿瘤包括：胰岛素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、生长抑素瘤、VIPoma和PPoma。该方法也可以用于治疗肾肿瘤，例如嫌色肾细胞癌、透明细胞肾细胞癌、肾母细胞瘤(Wilms肿瘤)、乳头状肾细胞癌、原发性肾ASPSCR1-TFE3肿瘤或肾细胞癌。可选择的是，该方法可以用于治疗肝肿瘤，例如肝母细胞瘤或肝细胞瘤。在另一个实施方案中，该方法可以用于治疗肺肿瘤，例如非小细胞癌或小细胞癌。
可根据本发明治疗的结肠直肠癌包括结肠腺癌和直肠腺癌，其占所有结肠直肠癌病例的95％，但也包括原发性结肠直肠淋巴癌、胃肠间质肿瘤、平滑肌肉瘤、类癌肿瘤和黑色素瘤。可根据本发明治疗的乳癌包括侵入性乳癌、非侵入性乳癌、导管原位癌(DCIS)、侵入性导管癌、侵入性小叶癌、原位小叶癌、非典型小叶增生、炎性乳癌、乳房肉瘤、化生癌、雌激素受体阳性乳癌、三阴性乳癌和乳房乳头瘤。可根据本发明治疗的膀胱癌包括泌尿上皮癌、鳞状细胞癌、腺癌和小细胞癌。不论癌症类型，通过本发明治疗的癌症肿瘤特别优选为依赖于血管生成过程或Src信号传导的癌症肿瘤。在外科手术中除去的肿瘤的大小可以不同，但在多种实施方案中，除去大于5g、20g、50g或甚至100g的组织。
患者也可能进行化学治疗。因此，在一个实施方案中，患者已接受或当前正接受抗癌剂。在另一个优选的实施方案中，在没有并用的阿片样物质的情况下进行该方法。
组合物优选以无菌的液体或粉末的形式存在，所述粉末重构后用于可注射施用。组合物优选作为可注射静脉内输注施用，其可如前述包括缓慢推注。组合物优选是单位剂量或多剂量无菌液体或用于可注射施用的粉末的形式。
用于可注射施用的制剂包括无菌水性或非水性溶液剂、混悬剂和乳剂。尽管配制利多卡因和甲基纳曲酮极可能不需要溶剂，但使用溶剂时适合的非水性溶剂的实例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)和可注射有机酯例如油酸乙酯。水性载体的实例包括水、盐水和缓冲介质、酒精性/水性溶液以及乳液或混悬液。可注射载体的实例包括氯化钠溶液、林格氏(Ringer)右旋糖、右旋糖和氯化钠、乳酸林格氏液以及非挥发性油。静脉内载体包括流体和营养补充剂、电解质补充剂(例如基于林格氏右旋糖的那些)等。防腐剂及其它添加剂例如其它抗菌剂、抗氧化剂、螯合剂、惰性气体等也可被包含或省略。
无菌可注射溶液剂可以通过以下制备：根据所需，将在适当溶剂中的所需量的药物组合物掺入上文列举成分之一或组合，然后进行无菌过滤。通常，分散液通过将药物组合物掺入无菌载体制备，所述无菌载体包含基础分散介质以及上文列举成分中所需的其它成分。
特别有利的是将可注射组合物配制为单位剂型以便于施用和剂量均匀性。本文所用的“单位剂型”是指适合以单位剂量用于待治疗个体的物理离散单位；每个单位含有经计算与所需药物载体结合来产生所需治疗作用的预定量的药物组合物。本公开的剂量单位形式的规格是与药物组合物的特性和待实现的特别治疗作用相关的。
最后，尽管本发明已经表述为在单一组合物中含有甲基纳曲酮和利多卡因，但应理解的是二者可以分开施用，具有相同的治疗作用。
实施例
在下列实施例中，在数值(例如量、温度等)方面已力求精确，但仍应容许有些误差和偏差。为了提供本领域技术人员有关如何作出和评估本文要求方法的完整公开和描述而列出下列实施例，并且其旨在纯粹作为本发明的示例，并且不旨在对本发明人所认为的发明范围作出限制。
在实施例中提及时，GeneTex是指在Irvine California的GeneTexBiotechnology公司。Cell Signaling Technology是指在Danvers Massachusetts的CellSignaling Technology,Inc.。Invitrogen是指由Thermo Fisher Scientific公司所销售的一系列品牌产品，其总部位于Carlsbad,California。
实施例1
实施例1评估TNF-α处理的KPC-105小鼠和人胰腺癌细胞系中在多个时间点下p-Src的活化。
试验条件：
在第1天，培养KPC-105小鼠和人胰腺癌细胞系直到在6孔板中获得每孔300,000个细胞。在第2天，将每个细胞系用20ng/mL的小鼠或人TNF-α处理2小时。然后收集细胞并且用磷酸盐缓冲盐水洗涤，并且储存在-80℃。然后用100μL的具有蛋白酶和磷酸酶缓冲剂的放射免疫沉淀测定缓冲液裂解细胞。
然后在以下条件下使用Bradford测定法进行蛋白质估算：
·在p-Src蛋白阻断后用6M胍盐酸盐将Western Blot剥离以探测总Src蛋白。
·15孔的10％SDS-PAGE阻断：5％牛血清白蛋白用于p-Src blot P-Src-Tyr416(GeneTex GTX81151)Rb:1:1000在5％牛血清白蛋白中，过夜。
·总Src(Cell Signaling Technology 2108S)Rb mAb 1:1000，过夜，在5％乳中。
·GAPDH(Invitrogen#AM4300)：1:5000在5％乳中，过夜。
·洗涤：4×，每次用1×TBST进行5分钟。
·针对p-Src蛋白使用50％femto来显影，针对总Src和GAPDH蛋白使用自制的ECL来显影。
结果：
如图1所报告，在KPC-105小鼠细胞系和人胰腺癌细胞系二者中，用TNF-α(20ng/mL)处理期间暴露45分钟后，Src蛋白具有最大活化。
实施例2
实施例2评估增加剂量的利多卡因在温育30分钟的人胰腺癌细胞中抑制p-Src的能力。
试验条件：
在第1天，培养胰腺癌细胞系直到在6孔板中获得每孔300,000个细胞。在第2天，用0、0.5、1、5、10、15、30、50和100μM的利多卡因处理细胞30分钟。然后收集板并且用磷酸盐缓冲盐水洗涤，并且储存在-80℃。随后用100μL的具有蛋白酶和磷酸酶缓冲剂的放射免疫沉淀测定缓冲液裂解细胞。
在以下条件下使用Bradford测定法完成蛋白质估算：
·在磷酸化Src蛋白阻断后用6M胍盐酸盐将Western Blot剥离以探测总Src蛋白。
·10孔的10％SDS-PAGE阻断：5％牛血清白蛋白用于p-Src blot。
·P-Src-Tyr416(GeneTex GTX81151)Rb:1:1000在5％牛血清白蛋白中，过夜。
·总Src(Cell Signaling Technology 2108S)Rb mAb 1:1000，过夜，在5％乳中。
·GAPDH(Invitrogen#AM4300)：1:5000在5％乳中，过夜。
·洗涤：4×，每次用1×TBST进行5分钟。
·针对p-Src蛋白使用50％femto来显影，针对总Src和GAPDH蛋白使用自制的ECL底物来显影。
结果：
如图2所报告的，在人胰腺癌细胞中，以10μM和15μM的剂量开始，处理30分钟后，利多卡因降低了p-Src蛋白的水平。
实施例3
实施例3评估了增加利多卡因剂量温育30分钟小鼠KPC-105细胞中抑制p-Src的能力。
试验条件：
在第1天，培养小鼠KPC-105细胞直到在6孔板中获得每孔300,000个细胞。在第2天，用0、0.5、1、5、10、15、30、50和100μM的利多卡因处理细胞30分钟。然后收集板并且用磷酸盐缓冲盐水洗涤，并且储存在-80℃。随后用100μL的具有蛋白酶和磷酸酶缓冲剂的放射免疫沉淀测定缓冲液裂解细胞。
在以下条件下使用Bradford测定法完成蛋白质估算：
·在p-Src蛋白阻断后用6M胍盐酸盐将Western Blot剥离以探测总Src蛋白。
·10孔的10％SDS-PAGE阻断：5％牛血清白蛋白用于p-Src blot。
·P-Src-Tyr416(GeneTex GTX81151)Rb:1:1000在5％牛血清白蛋白中，过夜。
·总Src(Cell Signaling Technology 2108S)Rb mAb 1:1000，过夜，在5％乳中。
·GAPDH(Invitrogen#AM4300)：1:5000在5％乳中，过夜。
·洗涤：4×，每次用1×TBST进行5分钟。
·针对p-Src蛋白使用50％femto来显影，并且针对总Src和GAPDH蛋白使用自制的ECL底物来显影。
结果：
如图3所报告的，在KPC105细胞中，以10μM的剂量开始，处理30分钟后，利多卡因降低了p-Src蛋白的水平。
实施例4
实施例4评估了在用10μM利多卡因处理的小鼠KPC-105细胞中在不同时间点的内源性Src和p-Src。如图4A和4B所示，总Src在任何时间点均不被利多卡因的暴露影响。针对p-Src，利多卡因在15分钟后并且至多6小时后减弱了Src磷酸化，在15和30分钟时观察到了最大作用。
实施例5
实施例5评估在用10μM利多卡因处理的小鼠KPC-105细胞至不同时间点时，以及增加剂量的甲基纳曲酮温育1小时育后，细胞中内源性Src和p-Src。使用15μg/泳道(NP40裂解物)10％SDS PAGE历经6小时期间(利多卡因)和1小时期间(甲基纳曲酮)产生Western Blot条带图。如图5A和5B所报告的，总Src不被利多卡因或甲基纳曲酮影响。相对地，利多卡因在30分钟、1小时、2小时和6小时时减弱了Src磷酸化，条带图在每个时间点并不一致。甲基纳曲酮在50nM以上的浓度1小时温育后减弱Src磷酸化。
实施例6
在我们先前在实施例5中使用甲基纳曲酮的试验后，我们决定装载更少蛋白并且用甲基纳曲酮温育细胞超过1小时，并且评估在不同时间点下用100nM甲基纳曲酮处理的KPC-105细胞中的内源性Src和p-Src。
试验条件：
·P-Src-Tyr416(GeneTex#GTX81151)Rb:1:1000在5％牛血清白蛋白中，o/n在4℃
·10μg/泳道(NP40裂解物)10％SDS-PAGE
·总Src(CST#2108S)Rb mAb 1:1000在5％牛血清白蛋白中，o/n在4℃
结果：
如图6所报告的，在KPC-105细胞中，从2小时开始，100nM甲基纳曲酮减弱Src的磷酸化，在2、4和6小时观察到最大作用。
实施例7
实施例7评估在KPC-105细胞中，用10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮的组合处理在不同时间点的内源性Src和磷酸化-SRC(phospho-SRC)。
试验条件：
·P-Src-Tyr416(GeneTex#GTX81151)Rb:1:1000在5％牛血清白蛋白中，在室温3小时
·10μg/泳道(NP40裂解物)10％SDS PAGE
·总Src(CST#2108S)Rb mAb 1:1000在5％牛血清白蛋白中，在室温3小时
结果：
图7报告了10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮的组合从15分钟开始持续至6小时减弱了KPC-105细胞中Src的磷酸化。
实施例8
实施例8评估了在KPC-105细胞中，分别用10μM利多卡因(L)、100nM甲基纳曲酮(M)或者10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮的组合(L+M)处理，在不同时间点的内源性Src和磷酸化-Src。
试验条件：
·P-Src-Tyr416(GeneTex#GTX81151)1:2000在5％牛血清白蛋白中，o/n在4℃
·总Src(CST#2108S)1:3000在5％牛血清白蛋白中，o/n在4℃
·粘着斑蛋白(ProteinTech)1:4000在5％乳中，o/n在4℃
结果：
如图8所示，利多卡因在1小时的暴露后减少了总Src，并且在1小时的暴露后减弱了Src的磷酸化。甲基纳曲酮在1小时的暴露后减少了总Src，并且在1小时的暴露后减弱了Src的磷酸化。利多卡因+甲基纳曲酮在30分钟的暴露(比单独的更快)后减少了总Src，并且在30分钟、1小时、2小时和6小时的暴露后减弱了Src的磷酸化。在6小时，与单独的利多卡因、单独的甲基纳曲酮或者未处理的对照相比，利多卡因+甲基纳曲酮的组合显著有效。
实施例9
实施例9评估了在KPC-105细胞中，分别用10μM利多卡因(L)、100nM甲基纳曲酮(M)和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮的组合(L+M)处理，在不同时间点的内源性Src和p-Src，使用与实施例8不同的装载蛋白。
试验条件：
·P-Src-Tyr416(GeneTex#GTX81151)1:2000在5％牛血清白蛋白中，o/n在4℃
·总Src(CST#2108S)1:3000在5％牛血清白蛋白中，o/n在4℃
结果：
如图9所报告的，获得了与实施例8实际上相同的结果。
实施例10
实施例10评估了在人胰腺癌细胞系(AsPc 1)中，1小时的10μM利多卡因(L)、100nM甲基纳曲酮(M)和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮的组合(L+M)对总Src和p-Src表达的作用。
试验条件：
·P-Src-Tyr416(GeneTex#GTX81151)1:2000在5％牛血清蛋白中，在室温，4小时
·Total Src(CST#2108S)1:3000在5％牛血清蛋白中，在室温，4小时
结果：
如图10所示，在AsPc1人胰腺癌细胞中，利多卡因和甲基纳曲酮分别和组合1小时后减弱p-Src的活性。在Src标准化后初步结果显示甲基纳曲酮的暴露没有增加Src。
实施例11
实施例11评估了在人胰腺癌细胞系(MiaPaCa 2)中，1小时的10μM利多卡因(L)、100nM甲基纳曲酮(M)和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮的组合(L+M)对总Src和p-Src表达的作用。试验条件与实施例10相同。如图11所示，在MiaPaCa 2人胰腺癌细胞中，两种药物分别和组合1小时后减弱了p-Src。
实施例12
实施例12评估了在人胰腺癌细胞系(Panc1)中，10μM利多卡因(L)、100nM甲基纳曲酮(M)和10μM利多卡因+100nM甲基纳曲酮的组合(L+M)在多个时间点至多6小时对总Src和p-Src表达的作用，在新鲜介质中。试验条件与实施例10相同。如图12所报告的，单独的利多卡因显示对减弱p-Src的效果不一致。单独的甲基纳曲酮最初在30分钟和1小时减弱p-Src。相对地，利多卡因+甲基纳曲酮的组合自30分钟起持续一致地减弱p-Src。
实施例13
全身炎症的脂多醣(LPS)模型已被报告为用于探究急性炎症新疗法的影响的最可接受的模型之一。LPS是来自革兰氏阴性菌的普遍存在的内毒素并且已知在人和动物中诱导促炎性疾病。我们研究了单独的利多卡因或甲基纳曲酮或者利多卡因与甲基纳曲酮的组合在LPS诱导的炎症模型中的作用，在免疫活性C57BL/6小鼠中进行。
试验细节：
C57BL/6J小鼠(6-8周)购自Charles River Laboratories(USA)，并且在使用前适应至少1周。所有小鼠饲养在无病原体的设施中。小鼠接受LPS达24小时。24小时后，小鼠用单独的利多卡因或单独的甲基纳曲酮或者两者的组合治疗，如表1所示。
表1
体内治疗计划
组 LPS 利多卡因 甲基纳曲酮
第1组 - - -
第2组 - + -
第3组 - - +
第4组 - + +
第5组 + - -
第6组 + + -
第7组 + - +
第8组 + + +
在本研究结束时，采集血液和组织样本以供进一步的研究。使用血清来测定促炎性细胞因子，使用LEGENDplexTM小鼠炎症组(BioLegend,USA)试剂盒，然后进行流式细胞术。肺和脾组织样本用于苏木精和伊红(H&E)染色和针对免疫细胞进行免疫组织化学分析，所述免疫细胞包括巨噬细胞和自然杀伤(NK)细胞、B细胞、T细胞及其子集。针对组织病理学和免疫组织化学(IHC)，组织样本通过从石蜡块切割4-μm切片来制备。IHC染色通过先前所述的方法来进行。影像使用亮视野显微镜(Nikon Microscope)来捕获。两名独立的研究员评估了H&E和所有免疫组织化学染色。针对浮动评分，每一名研究员评估了组织并且给出了0(无表现)至4+(强均匀表现)的评分，如先前所述。该数据通过使用Graph Pad Prism软件以平均数±SD或平均数±SEM来表示。
结果和讨论：
1.利多卡因和甲基纳曲酮的组合治疗降低了肺和脾中LPS诱导的病理异常。
急性肺损伤是重大疾病，其可导致死亡(40-60％)。在肺泡上皮细胞损伤和肺水肿后，中性粒细胞浸润被报告为由肺部炎症引起的主要病理变化。因此，为了测定单独的利多卡因、单独的甲基纳曲酮或者利多卡因与甲基纳曲酮的组合在炎症中的治疗功效，将C57BL/6小鼠用LPS激发，然后用药物(单独或组合)治疗，如表1所述。在本研究结束时，将小鼠处死，并且将来自肺与脾的组织切片用于组织病理检查。在经LPS激发的盐水或单独的利多卡因或单独的甲基纳曲酮治疗组中，H&E染色显示血管周围性水肿以及在血液与淋巴管内混合细胞浸润的积聚(图13A)。然而，在用利多卡因与甲基纳曲酮共同治疗的LPS激发的小鼠肺中，H&E染色显示轻微的组织病理变化(图13A)。
肺炎症通过免疫浸润来紧密调节，具有较多免疫滤液的器官代表显著更严重的炎症。脾的功能是清除衰老的红细胞、维持血液储备以及在免疫系统中发挥重要的作用。因此，我们研究了单独的利多卡因或甲基纳曲酮或者两药物的组合在脾病理生理学上的治疗功效，使用如表1所示的LPS诱导的炎症小鼠模型。在用盐水或单独的利多卡因或单独的甲基纳曲酮治疗的LPS激发的小鼠中，组织学检查显示在红髓中红细胞数量增加，伴随着轻度水肿；然而用利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的小鼠显示在脾中轻微的病理变化(图13B)。总结来说，利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗降低了肺和脾中LPS诱导的病理异常。
2.利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗降低了LPS诱导的促炎性血清细胞因子。
革兰氏阴性菌感染是急性肺损伤的主要原因，LPS是革兰氏阴性菌细胞壁的主要组分，在释放炎性介质上是主要刺激物。因此，我们测量了单独的利多卡因、单独的甲基纳曲酮或者利多卡因与甲基纳曲酮的组合对LPS诱导的血清炎性细胞因子分布的作用。在对照组和用表1所述药物治疗的LPS激发的小鼠的血清中测量小鼠炎性细胞因子，使用LEGENDplexTM小鼠炎症组(BioLegend,USA)试剂盒，接着按照生产商的说明进行流式细胞术。在用单独的利多卡因、单独的甲基纳曲酮或者利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的小鼠中，白介素1α(IL-1α)和干扰素γ(IFNγ)的水平不显著变化(图14A和14B)。然而，在用LPS激发的并且用利多卡因与甲基纳曲酮共同治疗的小鼠中，发现血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白介素10(IL-10)、白介素6(IL-6)和白介素17A(IL-17A)的水平降低(图14C-G)。IL-1、IL-6、IL-17A、MCP-1和TNFα是与炎性信号传导有关的促炎性细胞因子。总结来说，这些发现表示利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗具有抑制炎性信号传导的潜力。
3.利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗减少了肺和脾中LPS诱导的巨噬细胞和自然杀伤(NK)细胞。
先天性和适应性免疫系统均在炎症中起重要作用。在先天性免疫系统的多个成员中，巨噬细胞对调节炎症最为重要。据报道LPS对巨噬细胞起辅助作用，导致由促炎性细胞因子(例如TNF-α和IL-6)的早期生成所定义的炎性级联。此外，已知LPS通过toll-样受体4(TLR4)刺激单核细胞/巨噬细胞，导致增强炎症介质生成的一系列信号传导事件的活化。由于在用利多卡因与甲基纳曲酮共同治疗的小鼠中LPS诱导的血清TNF-α和IL-6的水平下调，我们通过使用抗小鼠F4/80抗体的IHC染色测定了在肺和脾切片中巨噬细胞的状态。IHC结果显示，在单独用利多卡因或甲基纳曲酮治疗的LPS激发的小鼠肺和脾切片中F4/80阳性区部分减少(图15A和15B)。然而，在LPS激发的小鼠中，利多卡因或甲基纳曲酮的组合治疗抑制了肺和脾中的F4/80阳性区(图15A和15B)。NK细胞是先天性免疫的独特介质，其涉及细胞毒活性和促炎性细胞因子的分泌。为了彻底剖析不同淋巴细胞群对LPS诱导的宿主响应的影响，我们测定了单独的利多卡因、单独的甲基纳曲酮或者两种活性剂/药物的组合的肺和脾中NK细胞的浸润。我们通过使用抗小鼠NK1.1抗体的IHC染色测定了在肺和脾切片中NK细胞的状态。结果显示，在用利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的LPS激发的小鼠肺和脾中NK1.1阳性区减少(图16A和16B)。这些IHC结果一起表明，利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗能够影响巨噬细胞和NK细胞介导的炎性信号传导。
4.利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗减少了肺和脾中LPS诱导的B细胞。
TLR在对病原体的免疫应答中起到至关重要的作用，其通过在先天性免疫细胞中转导信号以响应于微生物产物，包括LPS。除了其在巨噬细胞上的表达外，TLR也在有助于抗体介导的免疫应答的B细胞上表达。因此，为了理解单独的利多卡因或单独的甲基纳曲酮或利多卡因与甲基纳曲酮的组合对肺和脾中B细胞的作用，我们进行了使用抗小鼠CD19抗体的IHC染色。IHC结果显示，在用利多卡因与甲基纳曲酮共同治疗的LPS激发的小鼠的肺和脾切片中，CD19阳性区部分增加(图17A和17B)。总结来说，这些结果表明利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗在LPS诱导的炎症中增加了B细胞群。
5.利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗增加了肺和脾中LPS诱导的T细胞及子集。
如同B细胞，T细胞是适应性免疫系统的另一个成员。随着炎症过程的进展，促炎性细胞因子的生成在T细胞和子集中诱导出低响应性。为了理解单独的利多卡因或单独的甲基纳曲酮或两药物的组合在LPS激发的小鼠的肺和脾中对T细胞、CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的浸润的影响，我们分别使用抗小鼠CD3抗体、抗小鼠CD4抗体和抗小鼠CD8抗体来进行肺和脾切片的IHC染色。IHC结果显示，在用利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗的小鼠的肺和脾切片中CD3、CD4和CD8阳性区增加(图18-20)。T细胞抑制导致免疫失能。据报道LPS可以快速并且剂量依赖性地抑制外周血单核细胞(PBMC)中白介素-2(IL-2)的生成和T细胞的增殖。总结来说，这些结果表明利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗可能具有改善T细胞在LPS诱导的炎症中的功能的潜力。
结论：
总结来说，该结果表明单独的利多卡因或单独的甲基纳曲酮可以部分减轻小鼠模型中LPS诱导的炎症，利多卡因与甲基纳曲酮的组合治疗可以有潜力地用于治疗炎性状态。
实施例14
本实施例提出用于预防和管理由高侵入性外科手术所引起的炎症和疼痛(即术后镇痛)的方案。本方案包括癌症手术，实施例15给出了特别针对癌症的不同方案。本方案以表2所述的静脉内输注速率，9种潜在剂量范围组合之一，表3所述的利多卡因与甲基纳曲酮的重量比进行，总共27种剂量范围和比例的组合。基于对患者心血管系统的风险，特别是引起心律失常的风险，利多卡因和甲基纳曲酮的施用剂量将始终低于每个单独成分的最大耐受剂量，并且针对甲基纳曲酮是低于诱导腹泻的剂量或治疗阿片样物质诱导的便秘的剂量。甲基纳曲酮血浆浓度将始终保持在低于1400ng/mL，以防止不希望的心血管并发症。以类似的方式，利多卡因血浆浓度将始终保持在低于5mg/L，以避免并发症，例如头晕。
表2
每日输注速率
Figure BDA0003829880780000171
*速率基于完整盐的重量
表3
利多卡因与甲基纳曲酮的比例
选择A 选择B 选择C
重量比，甲基纳曲酮:利多卡因 1:10-1:125 1:20-1:100 1:30-1:75
*比例基于完整盐的重量
外科手术(非腹腔镜)：
·胸部、骨科和腹部手术
·痔切除术和囊肿切除术
·髋或膝置换手术、腹股沟疝气修复
·肿瘤切除术，特别是乳房和胰的肿瘤
·骨肉瘤(肢体保留手术、截肢或旋转矫形术)
临床改善：
·在停止治疗后的24小时、48小时、72小时或1周疼痛减少
·在停止治疗后的24小时、48小时、72小时或1周炎性生物标志物改善
·在急性期(治疗后0-24小时)或延迟期(治疗后24-120小时)或两者期间手术后阿片样物质的使用减少
·至自给自足活动时间
·手术后发病率改善
·手术后存活长度改善
给药方案(用于住院或门诊设定)：
·围手术期输注在手术前约15分钟至2小时开始，并且持续到手术后约24或48小时(优选在遥测式监控下)
实施例15
本实施例提出用于预防和管理癌细胞的迁移(即转移)的方案，其发生在除去癌症肿瘤的侵入性外科手术期间和之后。该方案以与实施例14和表2中所述相同的静脉内输注速率、与实施例14和表3中所述相同的利多卡因与甲基纳曲酮的重量和摩尔比来实施，总共27种剂量范围和比例的组合。基于对患者心血管系统的风险，特别是引起心律失常的风险，利多卡因和甲基纳曲酮的施用剂量将始终低于每个单独成分的最大耐受剂量，并且针对甲基纳曲酮是低于诱导腹泻的剂量或治疗阿片样物质诱导的便秘的剂量。特别是甲基纳曲酮血浆浓度将保持低于1400ng/mL，并且利多卡因的血浆浓度将始终保持低于5mg/L。
外科手术(非腹腔镜)：
·胸部、骨科和腹部手术
·肿瘤切除术，特别是乳房和胰的肿瘤
·骨肉瘤(肢体保留手术、截肢或旋转矫形术)
临床改善：
·在停止治疗后24小时、48小时、72小时或1周疼痛减少
·在停止治疗后24小时、48小时、72小时或1周炎性生物标志物改善
·在急性期(治疗后0-24小时)或延迟期(治疗后24-120小时)或两者期间手术后阿片样物质的使用减少
·手术后发病率改善
·手术后存活长度改善
给药方案(用于住院或门诊设定)：
·围手术期输注在手术前约15分钟至2小时开始，并且持续到手术后约24或48小时(优选在遥测式监控下)
********
本申请通篇参照了多种公开文件。这些公开文件的公开内容以全文引用方式并入本文，以便更全面地描述本发明所属领域的技术状态。对于本领域技术人员而言，显而易见的是在不脱离本发明的范围或精神的情况下，可以对本发明作多种修饰和变化。考虑本说明书和本文公开的发明实践后，对于本领域技术人员而言本发明的其它实施方案是显而易见的。本说明书和实施例仅被视为示例性的，而本发明的真实范围和精神由随后的权利要求表示。

Claims (33)

1.在需要的人中治疗由侵入性外科手术引起的炎症的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用药学上可接受的组合物，该组合物包含：
a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和
b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
2.在需要的人中在侵入性外科手术以除去癌症肿瘤后抑制癌细胞的增殖或转移的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用药学上可接受的组合物，该组合物包含：
a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和
b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
3.在需要的人中在侵入性外科手术后抑制Src酪氨酸蛋白激酶在Tyr419处磷酸化的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用药学上可接受的组合物，该组合物包含：
a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和
b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
4.在需要的人中在侵入性外科手术后抑制Src酪氨酸蛋白激酶磷酸化介导的细胞信号传导的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用药学上可接受的组合物，该组合物包含：
a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和
b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
5.在需要的人中在侵入性外科手术后治疗Src酪氨酸蛋白激酶磷酸化介导的疾病的方法，该方法包括以静脉内输注给人施用药学上可接受的组合物，该组合物包含：
a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；和
b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐。
6.权利要求1的方法，其中手术是非腹腔镜肿瘤切除术，优选乳房、胰或骨肉瘤。
7.权利要求1的方法，其中患者经历手术后存活长度的改善或手术后发病率的降低。
8.权利要求2的方法，其中手术是非腹腔镜手术，其选自：
a)胸部、骨科和腹部手术；
b)痔切除术和囊肿切除术；
c)髋置换手术、膝置换手术和腹股沟疝气修复；以及
d)肿瘤切除术，优选乳房、胰或骨肉瘤。
9.权利要求2的方法，其中患者经历：
a)治疗后24小时、48小时、72小时或1周的疼痛减少；
b)在急性期(治疗后0-24小时)或延迟期(治疗后24-120小时)期间，手术后阿片样物质使用减少；
c)至自给自足活动所需的时间减少；或
d)术后发病率降低。
10.权利要求1至9中任一项的方法，其包括：
a)在手术前以连续输注施用组合物；
b)在手术期间以连续输注施用组合物；
c)在手术后以连续输注施用组合物；或
d)(a)-(c)的任何组合。
11.权利要求1至9中任一项的方法，其包括在围手术期施用组合物。
12.权利要求11的方法，其中利多卡因或其药学上可接受的盐以利多卡因盐酸盐施用。
13.权利要求11的方法，其中利多卡因或其药学上可接受的盐以每日量10至3000mg施用。
14.权利要求11的方法，其中甲基纳曲酮以甲基纳曲酮氢溴酸盐施用。
15.权利要求11的方法，其中甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐以每日量0.2至175mg施用。
16.权利要求11的方法，其中利多卡因或其药学上可接受的盐以每日量10至3000mg施用，并且甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐以每日量0.2至175mg施用。
17.权利要求11的方法，其中利多卡因或其药学上可接受的盐以10至45mg/kg/天的速率施用，并且甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐以0.2至2mg/kg/天的速率施用。
18.权利要求11的方法，其中利多卡因或其药学上可接受的盐以15至35mg/kg/天的速率施用，并且甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐以0.25至1.75mg/kg/天的速率施用。
19.权利要求11的方法，其中利多卡因或其药学上可接受的盐以20至30mg/kg/天的速率施用，并且甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐以0.35至1.5mg/kg/天的速率施用。
20.权利要求16的方法，其中甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐与利多卡因或其药学上可接受的盐以1:10至1:125的重量比施用。
21.权利要求17的方法，其中甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐与利多卡因或其药学上可接受的盐以1:10至1:125的重量比施用。
22.权利要求18的方法，其中甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐与利多卡因或其药学上可接受的盐以1:10至1:125的重量比施用。
23.权利要求19的方法，其中甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐与利多卡因或其药学上可接受的盐以1:10至1:125的重量比施用。
24.权利要求11的方法，其中患者患有依赖血管生成过程的癌症肿瘤。
25.权利要求11的方法，其中患者患有胰、肾、肝、肺、结肠、直肠、乳房、膀胱或骨的肿瘤。
26.前述权利要求中任一项的方法，其中甲基纳曲酮的剂量增加血浆甲基纳曲酮浓度至不超过1400ng/mL，并且利多卡因的剂量增加血浆利多卡因浓度至不超过5mg/L。
27.无菌液体或粉末形式的静脉内药物组合物，其包含：
a)治疗有效量的利多卡因或其药学上可接受的盐；
b)治疗有效量的甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐；和
c)一种或多种药学上可接受的载体。
28.权利要求27的组合物，其是用于静脉内施用的单位剂量或多剂量无菌液体或粉末的形式。
29.权利要求27的组合物，其中利多卡因是利多卡因盐酸盐的形式。
30.权利要求27的组合物，其中甲基纳曲酮以甲基纳曲酮氢溴酸盐存在。
31.权利要求27的组合物，其中甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐与利多卡因或其药学上可接受的盐以1:10至1:125的重量比存在。
32.权利要求27的组合物，其中甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐与利多卡因或其药学上可接受的盐以1:20至1:100的重量比存在。
33.权利要求27的组合物，其中甲基纳曲酮或其药学上可接受的盐与利多卡因或其药学上可接受的盐以1:30至1:75的重量比存在。
CN202180018753.3A 2020-03-06 2021-03-03 用于抑制侵入性外科手术后的炎症和Src激酶活化的药物组合 Pending CN115315257A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202062985962P 2020-03-06 2020-03-06
US62/985,962 2020-03-06
PCT/US2021/020674 WO2021178541A1 (en) 2020-03-06 2021-03-03 Drug combinations for inhibiting inflammation and src kinase activation following invasive surgical procedures

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115315257A true CN115315257A (zh) 2022-11-08

Family

ID=77614156

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180018753.3A Pending CN115315257A (zh) 2020-03-06 2021-03-03 用于抑制侵入性外科手术后的炎症和Src激酶活化的药物组合

Country Status (16)

Country Link
US (1) US20230158015A1 (zh)
EP (1) EP4171535A1 (zh)
JP (1) JP2023516090A (zh)
KR (1) KR20220150371A (zh)
CN (1) CN115315257A (zh)
AR (1) AR121523A1 (zh)
AU (1) AU2021232593A1 (zh)
BR (1) BR112022017872A2 (zh)
CA (1) CA3170998A1 (zh)
CL (1) CL2022002424A1 (zh)
CO (1) CO2022012609A2 (zh)
IL (1) IL295824A (zh)
MX (1) MX2022010995A (zh)
TW (1) TW202139983A (zh)
WO (1) WO2021178541A1 (zh)
ZA (1) ZA202209901B (zh)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004054511A2 (en) * 2002-12-13 2004-07-01 The Regents Of The University Of California Analgesic combination comprising nalbuphine
WO2004091593A2 (en) * 2003-04-14 2004-10-28 Pain Therapeutics, Inc. Methods for the treatment of pain comprising opioid antagonists
US8524731B2 (en) * 2005-03-07 2013-09-03 The University Of Chicago Use of opioid antagonists to attenuate endothelial cell proliferation and migration
CA3002137A1 (en) * 2014-10-17 2016-04-21 Salix Pharmaceuticals, Inc. Use of methylnaltrexone to attenuate tumor progression

Also Published As

Publication number Publication date
CL2022002424A1 (es) 2023-05-05
IL295824A (en) 2022-10-01
CA3170998A1 (en) 2021-09-10
AU2021232593A1 (en) 2022-10-13
EP4171535A1 (en) 2023-05-03
BR112022017872A2 (pt) 2022-11-01
WO2021178541A1 (en) 2021-09-10
MX2022010995A (es) 2023-02-27
KR20220150371A (ko) 2022-11-10
JP2023516090A (ja) 2023-04-17
TW202139983A (zh) 2021-11-01
AR121523A1 (es) 2022-06-08
US20230158015A1 (en) 2023-05-25
CO2022012609A2 (es) 2022-09-09
ZA202209901B (en) 2023-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Aamir et al. Wnt signaling mediates TLR pathway and promote unrestrained adipogenesis and metaflammation: therapeutic targets for obesity and type 2 diabetes
Rosenne et al. In vivo suppression of NK cell cytotoxicity by stress and surgery: glucocorticoids have a minor role compared to catecholamines and prostaglandins
White et al. HF diets increase hypothalamic PTP1B and induce leptin resistance through both leptin-dependent and-independent mechanisms
Hu et al. Sodium tanshinone IIA sulfonate ameliorates ischemia-induced myocardial inflammation and lipid accumulation in Beagle dogs through NLRP3 inflammasome
US7652038B2 (en) Methods of reducing angiogenesis
Leifheit-Nestler et al. Importance of leptin signaling and signal transducer and activator of transcription-3 activation in mediating the cardiac hypertrophy associated with obesity
EA036757B1 (ru) Фармацевтические композиции для комбинированной терапии
US11857529B2 (en) Methods for treating melanoma
NOUROK Familial pheochromocytoma and thyroid carcinoma
Staels Metformin and pioglitazone: Effectively treating insulin resistance
Antic et al. Multiple mechanisms involved in obesity-induced hypertension
Yang et al. CD74 knockout attenuates alcohol intake-induced cardiac dysfunction through AMPK-Skp2-mediated regulation of autophagy
Liu et al. Coix seed oil ameliorates cancer cachexia by counteracting muscle loss and fat lipolysis
Wang et al. IL-1Ra selectively protects intestinal crypt epithelial cells, but not tumor cells, from chemotoxicity via p53-mediated upregulation of p21WAF1 and p27KIP1
Tan et al. Prorenin/renin receptor blockade promotes a healthy fat distribution in obese mice
Liao et al. 2-Methoxyestradiol protects against lung ischemia/reperfusion injury by upregulating annexin A1 protein expression
Song et al. Epac‐2 ameliorates spontaneous colitis in Il‐10−/− mice by protecting the intestinal barrier and suppressing NF‐κB/MAPK signalling
CN115315257A (zh) 用于抑制侵入性外科手术后的炎症和Src激酶活化的药物组合
Lin et al. Inhibition of MyD88 attenuates angiotensin II-induced hypertensive kidney disease via regulating renal inflammation
Wang et al. FSH Is Responsible for Androgen Deprivation Therapy–Associated Atherosclerosis in Mice by Exaggerating Endothelial Inflammation and Monocyte Adhesion
US20170209544A1 (en) A peptide therapy to counteract insulin resistance and type 2 diabetes
KR102115557B1 (ko) 폐 섬유증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2004009081A1 (es) Uso de la neomicina en la preparacion de medicamentos utiles en el tratamiento de enfermedades mediadas por la hiperactivacion de proteinas cinasas activadas por mitogenos (mapk) y por factores de transcripcion
McLaughlin Patricia J. McLaughlin, Jarrett D. Cain, Michelle B. Titunick, Ian S. Zagon
White et al. Articles in PresS. Am J Physiol Endocrinol Metab (November 18, 2008). doi: 10.1152/ajpendo. 90513.2008

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination