CN115181662A - 一种用于磁珠法检测的密封式一体化装置及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置及其应用，所述一体化装置包括卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩，所述卡盒包括上盖、密封垫、一体化试剂存放管，所述一体化试剂存放管由数个试管的开口部依次固定连接在连接体上构成，检测试剂预先装入一体化试剂存放管的不同试管中，再覆盖密封垫和上盖，实现卡盒内的试剂密封；所述可伸缩的弹性密封罩下部与所述卡盒上部可拆卸式密封相连，所述移液器置于所述可伸缩的弹性密封罩内。本发明的密封式一体化装置能够预先填装试剂，机械自动操作检测程序，实现POCT检测，适用范围广，便于升级到微流控芯片检测，结构简单，与现有检测配套设施容易匹配，能快速推广普及应用。

Description

一种用于磁珠法检测的密封式一体化装置及其应用

技术领域

本发明属于生物核酸检测技术领域，具体为一种用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置及其应用。

背景技术

近年来，现场即时检测(Point of Care Testing)，POCT技术快速发展，在医学检验中所占比重也越来越大，POCT是将各种专业检测技术整合到一个非常小型的机器中，操作者可以是非专业检验人员，检测地点也不受限制，在生物检测、疾病病原检测、食品安全监测的快速及时方面有非常广泛的应用前景。

比如在疾病病原的检测方面，病原的检测方式主要有生化检测、免疫检测与分子检测。其中分子检测即直接检测病原的核酸，相比免疫检测而言检测窗口期提前，具有高灵敏度、高准确性的特点。例如在本次新冠病毒引发的肺炎疫情中，核酸检测技术更多的被大众所熟知，在确诊病例方面起到了重要作用。而目前的核酸检测方式主要是由专业的人员采集样本，随后运输至中心实验室进行集中检测，运送样本还需保持冷链运输，增大了送样难度与成本，也给检验中心带来了较大的压力，中心实验室要求将样本前处理、试剂配制与检测分析分布在不同的房间进行，防止污染，严格的要求使得很多基层医院无法建立PCR实验室，检测效率大大降低。

为了提高病原检测的效率，最佳方式就是建立POCT体系，这就需要一种能够实现全封闭实现临床样本的核酸提取与扩增检测的设备，摆脱对于PCR中心实验室的依赖，扩大核酸检测的适用范围。而这就需要将常规PCR实验室的操作步骤和试剂试管移液器等耗材高度集中在一起形成一个装置，通过自动化设备进行操作，然而目前鲜有这种配套的装置。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提出一种用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，包括卡盒与配套移液器，卡盒上采用可伸缩的弹性密封罩密封连接移液器，可以保证移液器针头在各个试管之间移动时，与外界是密封的，气体和液体都不会泄露到外界，本发明的装置通过与配套仪器配合使用，能够自动化无污染实现磁珠法核酸提取的样本裂解、磁吸、洗涤、洗脱等步骤，最后可以完成核酸的扩增检测。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，所述一体化装置包括卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩，所述卡盒包括上盖、密封垫、一体化试剂存放管，所述一体化试剂存放管由数个试管的开口部依次固定连接在连接体上构成，检测试剂预先装入一体化试剂存放管的不同试管中，再覆盖密封垫和上盖，实现卡盒内的试剂密封；所述上盖上对应每个试管的位置设置圆形开口；所述移液器由针头、移液管、过滤层组成；所述针头后端连接移液管，所述过滤层固定在所述移液管后端；所述可伸缩的弹性密封罩下部与所述卡盒上部可拆卸式密封相连，将所有圆形开口都覆盖在可伸缩的弹性密封罩中；所述移液器置于所述可伸缩的弹性密封罩内，其中所述移液管后部与所述可伸缩的弹性密封罩上部密封相连。

优选地，所述可伸缩的弹性密封罩由上接口、下接口、本体构成，所述本体为不透气不透水的弹性材料制成，包括硅胶或橡胶；所述移液器与所述可伸缩的弹性密封罩通过上接口密封相连；所述卡盒上部与所述可伸缩的弹性密封罩通过下接口相连；所述本体的形状包括平板式三角筒形、折叠式三角筒形、风琴式三角筒形。

进一步，所述一体化试剂存放管的连接体末端设置微流控芯片。

进一步，所述微流控芯片用于荧光采集的部分置于可伸缩的弹性密封罩密封覆盖的区域外。

进一步，所述一体化试剂存放管的数个试管排列为直线形、圆形或阵列形。

进一步，所述移液管后端与配套机器的适配器相连，连接方式包括螺纹、卡扣、紧配。

进一步，所述移液器还包括胶套，所述胶套包裹在针头外部，所述胶套顶端为圆弧形，与所述圆形开口对应且所述胶套顶端的直径大于所述圆形开口的直径。

进一步，所述密封垫为平板形状或对应每个试管开口的位置设置为凹陷的形状。

进一步，所述胶套和密封垫的材质为有弹性且能够被针头刺穿的材料，包括橡胶、硅胶。

进一步，所述一体化试剂存放管的试管依次为：磁珠管、裂解液管、洗涤液一管、洗涤液二管一、洗涤液二管二、洗脱液管、PCR扩增试剂管。

进一步，当所述微流控芯片未预埋PCR扩增试剂时，所述一体化试剂存放管的试管依次为：磁珠管、裂解液管、洗涤液一管、洗涤液二管一、洗涤液二管二、洗脱液管、PCR扩增试剂管；

进一步，当所述微流控芯片中预埋PCR扩增试剂时，所述一体化试剂存放管的试管依次为：磁珠管、裂解液管、洗涤液一管、洗涤液二管一、洗涤液二管二、洗脱液管。

进一步，所述卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩为一次性的。

进一步，所述卡盒的卡盖上，在对应裂解液管的圆形开口的位置设置分体盖，所述分体盖贯穿密封垫层。

本发明同时提供一种基于磁珠法核酸提取与扩增的检测方法，本方法预先在上述的一体化试剂存放管中加入相应试剂，然后将样本加入裂解液管中，密封安装好可伸缩的弹性密封罩和移液器，配合自动化操作设备进行检测，设定的操作步骤为：

S1、适配器配套机器为气泵，将适配器与移液器连接后，移动至裂解液管上方，所述移液器向下移动，针头继续向下，刺穿密封垫，进入裂解液管，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头移出裂解液管，密封垫回弹密封裂解液管；

S2、移动移液器至磁珠管上方，向下移动，针头进入磁珠管，气泵推气，带动移液器将其中的液体全都打入磁珠管；控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀；随后移液器向上提升，针头移出磁珠管；

S3、根据需要加热磁珠管，停止加热后，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟；

S4、向下移动移液器，针头进入磁珠管，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头移出磁珠管，移除磁力；

S5、移动移液器至裂解液管上方，向下移动，针头进入裂解液管，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入裂解液管；随后移液器向上提升，针头移出裂解液管；

S6、移动移液器至洗涤液一管上方，向下移动，针头进入洗涤液一管，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头移出洗涤液一管；

S7、移动移液器至磁珠管上方，向下移动，针头进入磁珠管，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头移出磁珠管，移除磁力；

S8、移动移液器至洗涤液一管上方，向下移动，针头进入洗涤液一管，气泵推气，带动移液器将其中的废液打入洗涤液一管，随后移液器向上提升，针头移出洗涤液一管；

S9、移动移液器至洗涤液二管一上方，向下移动，针头进入洗涤液二管一，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，随后移液器向上提升，针头移出洗涤液二管一；

S10、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管上方，向下移动，针头进入磁珠管，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头移出磁珠管，移除磁力；

b)当洗涤液二不含酒精时，移动移液器至磁珠管上方，向下移动，针头进入磁珠管，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，随后气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头移出磁珠管，保持磁力；

S11、移动移液器至洗涤液二管一上方，向下移动，针头进入洗涤液二管一，气泵推气，带动移液器将其中的废液打入洗涤液二管一，随后移液器向上提升，针头移出洗涤液二管一；

S12、移动移液器至洗涤液二管二上方，向下移动，针头进入洗涤液二管二，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头移出洗涤液二管二；

S13、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管上方，向下移动，针头进入磁珠管，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头移出磁珠管，移除磁力；

b)当洗涤液二不含酒精时，移动移液器至磁珠管上方，向下移动，针头进入磁珠管，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管，随后气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头移出磁珠管，移除磁力；

S14、移动移液器至洗涤液二管二上方，向下移动，针头进入洗涤液二管二，气泵推气，带动移液器将其中的废液流入洗涤液二管二，随后移液器向上提升，针头移出洗涤液二管二；

S15、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管上方，向下移动，针头进入磁珠管，加热磁珠管至70℃半分钟，随后移液器向上提升，针头移出磁珠管。

b)当洗涤液二不含酒精时，省略此步骤；

S16、移动移液器至洗脱液管上方，向下移动，针头进入洗脱液管，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头移出洗脱液管；

S17、移动移液器至磁珠管上方，向下移动，针头进入磁珠管，气泵推气，带动移液器将其中的洗脱液打入磁珠管，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，对磁珠管加热，加热的同时控制气泵抽推数次，加热结束后，在磁珠试管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将含有核酸的洗脱液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头移出磁珠管，移除磁力；

S18、a)当一体化试剂存放管设置PCR扩增试剂管时，移动移液器至PCR扩增试剂管上方，向下移动，针头进入PCR扩增试剂管，气泵推气，带动移液器将其中的带有核酸的洗脱液流入PCR扩增试剂管，控制气泵抽推数次，将液体混匀，随后移液器向上提升，针头移出PCR扩增试剂管；

b)当一体化试剂存放管的连接体末端设置微流控芯片，且微流控芯片中预埋PCR扩增试剂时，移动移液器至微流控芯片上方，向下移动，针头进入微流控芯片，气泵推气，带动移液器将其中的带有核酸的洗脱液进入微流控芯片；

c)当一体化试剂存放管的连接体末端设置微流控芯片，但是微流控芯片中没有预埋PCR扩增试剂时，移动移液器至PCR扩增试剂管上方，向下移动，针头进入PCR扩增试剂管，气泵推气，带动移液器将其中的带有核酸的洗脱液流入PCR扩增试剂管，控制气泵抽推数次，将液体混匀，随后移液器向上提升，针头移出PCR扩增试剂管，随后移动移液器至微流控芯片上方，向下移动，针头进入微流控芯片，气泵推气，带动移液器将其中的核酸扩增检测试剂与刚提取的核酸进入微流控芯片；

S19、根据需求设置温度循环程序，对PCR扩增试剂管或微流控芯片进行升降温与荧光信号采集，实现实时荧光核酸检测；

S20、反应结束后，将卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩整个一体化装置取出，废弃。

与现有技术相比，本发明提供的用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，具备以下有益效果：

1、能够预先填装试剂，机械自动操作检测程序，实现POCT检测：本发明的一体化试剂存放管，各个试剂管的顺序是严格按照手工操作步骤进行排列，与自动化操作设备的二维导轨移动高度配合，可以便捷快速的实现样本核酸的磁珠法提取与扩增检测，减少检测人员的手动操作工作，提高检测效率和准确率。本发明的卡盒，卡盖通过密封垫将一体化试剂存放管密封，利用针头移液器穿刺进行移液操作，并且利用可伸缩的弹性密封罩使整个检测过程中试剂均为封闭状态，不与外界环境接触，降低污染，扩大了核酸检测的适用场景，便于实现POCT核酸检测。

2、适用范围广，便于升级到微流控芯片检测：本发明的一体化试剂存放管，预留了微流控芯片的位置，便于后期设备及检测项目整体升级，本发明的卡盒及移液器，适用范围广，能够扩展到目前所有需要做核酸检测的项目上。

3、结构简单，与现有检测配套设施容易匹配：本发明的用于磁珠法核酸检测的密封一体化装置，结构简单，但是满足了核酸提取和扩增检测需要的各个环节密封互不污染的要求，各个试剂管的关键位置形状和结构与手工操作步骤的相同，因此与现有检测配套设施，比如加温、磁吸、荧光等设备都能匹配，能快速推广普及应用。

4、双层保护，密封性好：针对密封性要求特别高的样品，可以使用带有胶套的移液器，实现针头在各个试剂管之间移动时，有胶套和可伸缩的弹性密封罩两层保护，保证了检测过程的密封性和安全性。带有胶套的移液器在使用时，有三种状态：

a吸液：当移液器竖直从卡盒上盖1的圆形开口17向下插入时，胶套4会首先接触到圆孔的倒角边缘以及密封垫2的上表面，随后胶套4无法再继续下降，被胶套包裹的针头5会继续向下降，依次刺破胶套4和密封垫2，插入下方对应的试管中，打开气泵向外抽气，带动液体经针头5流入移液管6。由于在适配器8和移液管中液体之间有过滤层7，因此液体不会污染到固定的适配器以及后面的管路和气泵。

b上提：向上提起移液器，针头5会首先向上提起，但胶套4依然保持抵在上盖的圆形开口17上。针头5向上依次经过密封垫2和胶套4底部，最后完全缩入胶套4内部，随后整个移液器离开圆形开口17提到一定高度，密封垫的针孔会自动闭合，防止污染，同时，由于针头5外部包裹有胶套4，也可以防止针头5内部的液体在移液过程中滴出造成污染。

c移液：移动移液器至下一个试管上方，竖直向下插入，胶套4会首先接触到圆形开口17的倒角边缘以及密封垫2的上表面，随后胶套4无法再继续下降，被胶套包裹的针头5会继续向下降，依次刺破胶套4和密封垫2，插入试管中，气泵向内打气，推动移液管6中的液体注入试管中。

附图说明

图1为本发明的一体化装置的结构示意图；

图2为本发明卡盒的上盖、密封垫、一体化试剂存放管的结构示意图；

图3为本发明的移液器(含有胶套)的结构示意图；

图4为本发明卡盒上设置分体盖的示意图；

图5为本发明的密封垫形状结构示意图；

图6为本发明的一体化试剂存放管升级微流控芯片的示意图；

图7为本发明的卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩安装完毕的剖面结构示意图(带微流控芯片)。

图中：1、上盖；2、密封垫；3、一体化试剂存放管；4、胶套；5、针头；6、移液管；7、过滤层；8、；9、磁珠管；10、裂解液管；11、洗涤液一管；12、洗涤液二管一；13、洗涤液二管二；14、洗脱液管；15、PCR扩增试剂管；16、微流控芯片；17、圆形开口；18、凹陷；19、可伸缩的弹性密封罩；20、上接口；21、分体盖；22、下接口；23、本体

具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本申请方案，下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本申请保护的范围。

需要说明的是，本申请的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换，以便这里描述的本申请的实施例。此外，术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。

在本申请中，术语“上”、“下”、“左”、“右”、“前”、“后”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“中”、“竖直”、“水平”、“横向”、“纵向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系。这些术语主要是为了更好地描述本申请及其实施例，并非用于限定所指示的装置、元件或组成部分必须具有特定方位，或以特定方位进行构造和操作。

并且，上述部分术语除了可以用于表示方位或位置关系以外，还可能用于表示其他含义，例如术语“上”在某些情况下也可能用于表示某种依附关系或连接关系。对于本领域普通技术人员而言，可以根据具体情况理解这些术语在本申请中的具体含义。

此外，术语“安装”、“设置”、“设有”、“连接”、“相连”、“套接”应做广义理解。例如，可以是固定连接，可拆卸连接，或整体式构造；可以是机械连接，或电连接；可以是直接相连，或者是通过中间媒介间接相连，又或者是两个装置、元件或组成部分之间内部的连通。对于本领域普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本申请中的具体含义。

需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本申请。

实施例1：未设置微流控芯片

参阅图1-5，一种用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，所述一体化装置包括卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩19，所述卡盒包括上盖1、密封垫2、一体化试剂存放管3，所述一体化试剂存放管3由7个试管的开口部依次固定连接在连接体上构成，检测试剂预先装入一体化试剂存放管3的不同试管中，再覆盖密封垫2和上盖1，实现卡盒内的试剂密封；所述上盖1上对应每个试管的位置设置圆形开口17；所述移液器由针头5、移液管6、过滤层7组成；所述针头5后端连接移液管6，所述过滤层7固定在所述移液管6后端；所述可伸缩的弹性密封罩19下部与所述卡盒上部可拆卸式密封相连，将所有圆形开口17都覆盖在可伸缩的弹性密封罩19中；所述移液器置于所述可伸缩的弹性密封罩19内，其中所述移液管6后部与所述可伸缩的弹性密封罩19上部密封相连。

本实施例中，所述可伸缩的弹性密封罩19由上接口20、下接口22、本体23构成，所述本体23为不透气不透水的弹性材料制成，本实施例为橡胶；所述移液器与所述可伸缩的弹性密封罩19通过上接口20密封相连；所述卡盒上部与所述可伸缩的弹性密封罩19通过下接口22相连；所述本体23的形状为风琴式三角筒形。

本实施例中，所述一体化试剂存放管3的连接体末端未设置微流控芯片16，但在其他实施例中，可以设置微流控芯片16，如果设置微流控芯片16，则所述微流控芯片16用于荧光采集的部分置于可伸缩的弹性密封罩19密封覆盖的区域外。

本实施例中，所述一体化试剂存放管3的数个试管排列为直线形。

本实施例中，所述移液管6后端与配套机器的适配器8相连，连接方式包括螺纹。

本实施例中，所述移液器还包括胶套4，所述胶套4包裹在针头5外部，所述胶套4顶端为圆弧形，与所述圆形开口17对应且所述胶套4顶端的直径大于所述圆形开口17的直径。

本实施例中，所述密封垫2为对应每个试管开口的位置设置为凹陷18的形状。

本实施例中，所述胶套4和密封垫2的材质为橡胶，是有弹性且能够被针头刺穿的材料。

本实施例中，所述一体化试剂存放管3的试管依次为：磁珠管9、裂解液管10、洗涤液一管11、洗涤液二管一12、洗涤液二管二13、洗脱液管14、PCR扩增试剂管15。

本实施例中，所述卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩19为一次性的。

本实施例中，所述卡盒的卡盖1上，在对应裂解液管10的圆形开口17的位置设置分体盖21，所述分体盖21贯穿密封垫层。检测前可以打开分体盖加入待测样本，然后再把分体盖盖上保持密封，检测进行中时，移液器的针头穿刺过分体盖盖体，进入下方试管进行操作。

本实施例提供的基于磁珠法核酸提取与核酸扩增的检测方法，本方法预先在上述的一体化试剂存放管3中加入相应试剂，然后将样本加入裂解液管10中，密封安装好可伸缩的弹性密封罩19和移液器，配合自动化操作设备进行检测，设定的操作步骤为：

S1、适配器8配套机器为气泵，将适配器8与移液器连接后，移动至裂解液管10上方，所述移液器向下移动，胶套4抵在圆形开口17处，针头5继续向下，依次刺穿胶套4和密封垫2，进入裂解液管10，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出裂解液管10回收进入到胶套4中，密封垫2回弹密封裂解液管10；以下步骤中针头穿过胶套进入试剂管和移出试剂管进入胶套的方式都同S1；

S2、移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体全都打入磁珠管9；控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀；随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9；

S3、根据需要加热磁珠管，停止加热后，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟；

S4、向下移动移液器，针头5进入磁珠管9，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

S5、移动移液器至裂解液管10上方，向下移动，针头5进入裂解液管10，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入裂解液管10；随后移液器向上提升，针头5移出裂解液管10；

S6、移动移液器至洗涤液一管11上方，向下移动，针头5进入洗涤液一管11，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液一管11；

S7、移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

S8、移动移液器至洗涤液一管11上方，向下移动，针头5进入洗涤液一管11，气泵推气，带动移液器将其中的废液打入洗涤液一管11，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液一管11；

S9、移动移液器至洗涤液二管一12上方，向下移动，针头5进入洗涤液二管一12，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液二管一12；

S10、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

b)当洗涤液二不含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，随后气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，保持磁力；

S11、移动移液器至洗涤液二管一12上方，向下移动，针头5进入洗涤液二管一12，气泵推气，带动移液器将其中的废液打入洗涤液二管一12，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液二管一12；

S12、移动移液器至洗涤液二管二13上方，向下移动，针头5进入洗涤液二管二13，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液二管二13；

S13、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

b)当洗涤液二不含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，随后气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

S14、移动移液器至洗涤液二管二13上方，向下移动，针头5进入洗涤液二管二13，气泵推气，带动移液器将其中的废液流入洗涤液二管二13，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液二管二13；

S15、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，加热磁珠管9至70℃半分钟，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9。

b)当洗涤液二不含酒精时，省略此步骤；

S16、移动移液器至洗脱液管14上方，向下移动，针头5进入洗脱液管14，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出洗脱液管14；

S17、移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的洗脱液打入磁珠管9，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，对磁珠管9加热，加热的同时控制气泵抽推数次，加热结束后，在磁珠试管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将含有核酸的洗脱液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

S18、本实施例的一体化试剂存放管3设置PCR扩增试剂管15，移动移液器至PCR扩增试剂管15上方，向下移动，针头5进入PCR扩增试剂管15，气泵推气，带动移液器将其中的带有核酸的洗脱液流入PCR扩增试剂管15，控制气泵抽推数次，将液体混匀，随后移液器向上提升，针头5移出PCR扩增试剂管15；

S19、根据需求设置温度循环程序，对PCR扩增试剂管15进行升降温与荧光信号采集，实现实时荧光核酸检测；

S20、反应结束后，将卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩19整个一体化装置取出，扔到指定垃圾箱中。

实施例2设置了微流控芯片并且未预埋PCR扩增试剂

参阅图6，本实施例提供的一体化试剂存放管3的连接体末端设置微流控芯片16。

参阅图7，本实施例提供了一种用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，所述一体化装置包括卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩19，所述卡盒包括上盖1、密封垫2、一体化试剂存放管3，所述一体化试剂存放管3由7个试管的开口部依次固定连接在连接体上构成，检测试剂预先装入一体化试剂存放管3的不同试管中，再覆盖密封垫2和上盖1，实现卡盒内的试剂密封；所述上盖1上对应每个试管的位置设置圆形开口17；所述移液器由针头5、移液管6、过滤层7组成；所述针头5后端连接移液管6，所述过滤层7固定在所述移液管6后端；所述可伸缩的弹性密封罩19下部与所述卡盒上部可拆卸式密封相连，将所有圆形开口17都覆盖在可伸缩的弹性密封罩19中；所述移液器置于所述可伸缩的弹性密封罩19内，其中所述移液管6后部与所述可伸缩的弹性密封罩19上部密封相连。

本实施例中，所述可伸缩的弹性密封罩19由上接口20、下接口22、本体23构成，所述本体23为不透气不透水的橡胶构成；所述移液器与所述可伸缩的弹性密封罩19通过上接口20密封相连；所述卡盒上部与所述可伸缩的弹性密封罩19通过下接口22相连；所述本体23的形状为风琴式三角筒形。

本实施例中，所述一体化试剂存放管3的连接体末端设置微流控芯片16。

本实施例中，所述微流控芯片16用于荧光采集的部分置于可伸缩的弹性密封罩19密封覆盖的区域外。

本实施例中，所述一体化试剂存放管3的数个试管排列为直线形。

本实施例中，所述移液管6后端与配套机器的适配器8相连，连接方式为螺纹。

本实施例中，所述密封垫2为平板形状。

本实施例中，所述胶套4和密封垫2的材质为有弹性且能够被针头刺穿的橡胶。

本实施例中，所述一体化试剂存放管3的试管依次为：磁珠管9、裂解液管10、洗涤液一管11、洗涤液二管一12、洗涤液二管二13、洗脱液管14、PCR扩增试剂管15。

本实施例中，所述微流控芯片16未预埋PCR扩增试剂。

本实施例中，所述卡盒和移液器为一次性的。

本发明同时提供一种基于磁珠法核酸提取与核酸扩增的检测方法，本方法预先在上述的一体化试剂存放管3中加入相应试剂，然后将样本加入裂解液管10中，连接安装好可伸缩的弹性密封罩19和移液器，再将安装好移液器的可伸缩的弹性密封罩19下接口与卡盒下部密封相连，安装完毕后配合自动化操作设备进行检测，设定的操作步骤为：

S1、适配器8配套机器为气泵，将适配器8与移液器连接后，移动至裂解液管10上方，所述移液器向下移动，针头5继续向下，刺穿密封垫2，进入裂解液管10，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出裂解液管10)，密封垫2回弹密封裂解液管10；

S2、移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体全都打入磁珠管9；控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀；随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9；

S3、根据需要加热磁珠管，停止加热后，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟；

S4、向下移动移液器，针头5进入磁珠管9，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

S5、移动移液器至裂解液管10上方，向下移动，针头5进入裂解液管10，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入裂解液管10；随后移液器向上提升，针头5移出裂解液管10；

S6、移动移液器至洗涤液一管11上方，向下移动，针头5进入洗涤液一管11，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液一管11；

S7、移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

S8、移动移液器至洗涤液一管11上方，向下移动，针头5进入洗涤液一管11，气泵推气，带动移液器将其中的废液打入洗涤液一管11，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液一管11；

S9、移动移液器至洗涤液二管一12上方，向下移动，针头5进入洗涤液二管一12，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液二管一12；

S10、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

b)当洗涤液二不含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，随后气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，保持磁力；

S11、移动移液器至洗涤液二管一12上方，向下移动，针头5进入洗涤液二管一12，气泵推气，带动移液器将其中的废液打入洗涤液二管一12，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液二管一12；

S12、移动移液器至洗涤液二管二13上方，向下移动，针头5进入洗涤液二管二13，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液二管二13；

S13、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

b)当洗涤液二不含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管9，随后气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

S14、移动移液器至洗涤液二管二13上方，向下移动，针头5进入洗涤液二管二13，气泵推气，带动移液器将其中的废液流入洗涤液二管二13，随后移液器向上提升，针头5移出洗涤液二管二13；

S15、a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，加热磁珠管9至70℃半分钟，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9。

b)当洗涤液二不含酒精时，省略此步骤；

S16、移动移液器至洗脱液管14上方，向下移动，针头5进入洗脱液管14，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头5移出洗脱液管14；

S17、移动移液器至磁珠管9上方，向下移动，针头5进入磁珠管9，气泵推气，带动移液器将其中的洗脱液打入磁珠管9，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，对磁珠管9加热，加热的同时控制气泵抽推数次，加热结束后，在磁珠试管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将含有核酸的洗脱液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头5移出磁珠管9，移除磁力；

S18、移动移液器至PCR扩增试剂管15上方，向下移动，针头5进入PCR扩增试剂管15，气泵推气，带动移液器将其中的带有核酸的洗脱液流入PCR扩增试剂管15，控制气泵抽推数次，将液体混匀，随后移液器向上提升，针头5移出PCR扩增试剂管15；

S19、移动移液器至微流控芯片16上方，向下移动，针头5进入微流控芯片16入口，气泵推气，带动移液器将其中的核酸扩增试剂与提取的核酸的混合溶液流入微流控芯片16中。随后移液器向上提升，针头5移出微流控芯片16，根据需求设置温度循环程序，对微流控芯片16进行升降温循环扩增，并进行荧光信号采集，实现实时荧光核酸检测。

S20、反应结束后，将卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩19整个一体化装置取出，扔到指定垃圾箱中。

采用本发明的一体化装置，可以与配套的自动化检测设备相匹配，实现快速高效检测，且由于保证了在操作过程中全程密封，样本不会泄露，不会有污染，因此对于实验室没有要求，可以在普通实验室中进行操作，满足POCT的需求。

采用本发明的检测装置，在配套的自动化设备上操作，针对新冠病毒核酸检测，获得检测结果的时间在1小时以内，如果没有配套的自动化设备，也可以检测人员手持移液器，在卡盒上手动操作，也可以在1小时以内获得检测结果，而如果是在常规的PCR实验室进行检测，由于需要在不同实验室区域之间移转，在顺利的情况下，也需要2-3小时获得检测结果。因此，通过实践证明，本发明的用于磁珠法核酸提取与核酸扩增的密封式一体化装置能满足现场及时检测(POCT)的需求，具有较好的市场应用前景。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (15)

1.一种用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述一体化装置包括卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩(19)，所述卡盒包括上盖(1)、密封垫(2)、一体化试剂存放管(3)，所述一体化试剂存放管(3)由数个试管的开口部依次固定连接在连接体上构成，检测试剂预先装入一体化试剂存放管(3)的不同试管中，再覆盖密封垫(2)和上盖(1)，实现卡盒内的试剂密封；所述上盖(1)上对应每个试管的位置设置圆形开口(17)；所述移液器由针头(5)、移液管(6)、过滤层(7)组成；所述针头(5)后端连接移液管(6)，所述过滤层(7)固定在所述移液管(6)后端；所述可伸缩的弹性密封罩(19)下部与所述卡盒上部可拆卸式密封相连，将所有圆形开口(17)都覆盖在可伸缩的弹性密封罩(19)中；所述移液器置于所述可伸缩的弹性密封罩(19)内，其中所述移液管(6)后部与所述可伸缩的弹性密封罩(19)上部密封相连。

2.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述可伸缩的弹性密封罩(19)由上接口(20)、下接口(22)、本体(23)构成，所述本体(23)为不透气不透水的弹性材料制成，；所述移液器与所述可伸缩的弹性密封罩(19)通过上接口(20)密封相连；所述卡盒上部与所述可伸缩的弹性密封罩(19) 通过下接口(22)相连；所述本体(23)的形状包括平板式三角筒形、折叠式三角筒形、风琴式三角筒形。

3.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述一体化试剂存放管(3)的连接体末端设置微流控芯片(16)。

4.根据权利要求3所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述微流控芯片(16)用于荧光采集的部分置于可伸缩的弹性密封罩(19)密封覆盖的区域外。

5.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述一体化试剂存放管(3)的数个试管排列为直线形、圆形或阵列形。

6.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述移液管(6)后端与配套机器的适配器(8)相连，连接方式包括螺纹、卡扣、紧配。

7.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述移液器还包括胶套(4)，所述胶套(4)包裹在针头(5)外部，所述胶套(4)顶端为圆弧形，与所述圆形开口(17)对应且所述胶套(4)顶端的直径大于所述圆形开口(17)的直径。

8.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述密封垫(2)为平板形状或对应每个试管开口的位置设置为凹陷(18)的形状。

9.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述胶套(4)和密封垫(2)的材质为有弹性且能够被针头刺穿的材料，包括橡胶、硅胶。

10.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述一体化试剂存放管(3)的试管依次为：磁珠管(9)、裂解液管(10)、洗涤液一管(11)、洗涤液二管一(12)、洗涤液二管二(13)、洗脱液管(14)、PCR扩增试剂管(15)。

11.根据权利要求3所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，当所述微流控芯片(16)未预埋PCR扩增试剂时，所述一体化试剂存放管(3)的试管依次为：磁珠管(9)、裂解液管(10)、洗涤液一管(11)、洗涤液二管一(12)、洗涤液二管二(13)、洗脱液管(14)、PCR扩增试剂管(15)。

12.根据权利要求3所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，当所述微流控芯片(16)中预埋PCR扩增试剂时，所述一体化试剂存放管(3)的试管依次为：磁珠管(9)、裂解液管(10)、洗涤液一管(11)、洗涤液二管一(12)、洗涤液二管二(13)、洗脱液管(14)。

13.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩(19)为一次性的。

14.根据权利要求1所述用于磁珠法核酸检测的密封式一体化装置，其特征在于，所述卡盒的卡盖(1)上，在对应裂解液管(10)的圆形开口(17)的位置设置分体盖(21)，所述分体盖(21)贯穿密封垫层。

15.一种基于磁珠法核酸提取与扩增的检测方法，其特征在于，预先在权利要求1所述的一体化试剂存放管(3)中加入相应试剂，然后将样本加入裂解液管(10)中，密封安装好可伸缩的弹性密封罩(19)和移液器，配合自动化操作设备进行检测，设定的操作步骤为：

S1、适配器(8)配套机器为气泵，将适配器(8)与移液器连接后，移动至裂解液管(10)上方，所述移液器向下移动，针头(5)继续向下，刺穿密封垫(2)，进入裂解液管(10)，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头(5)移出裂解液管(10)，密封垫(2)回弹密封裂解液管(10)；

S2、移动移液器至磁珠管(9)上方，向下移动，针头(5)进入磁珠管(9)，气泵推气，带动移液器将其中的液体全都打入磁珠管(9)；控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀；随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)；

S3、根据需要加热磁珠管，停止加热后，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟；

S4、向下移动移液器，针头(5)进入磁珠管(9)，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)，移除磁力；

S5、移动移液器至裂解液管(10)上方，向下移动，针头(5)进入裂解液管(10)，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入裂解液管(10)；随后移液器向上提升，针头(5)移出裂解液管(10)；

S6、移动移液器至洗涤液一管(11)上方，向下移动，针头(5)进入洗涤液一管(11)，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头(5)移出洗涤液一管(11)；

S7、移动移液器至磁珠管(9)上方，向下移动，针头(5)进入磁珠管(9)，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管(9)，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)，移除磁力；

S8、移动移液器至洗涤液一管(11)上方，向下移动，针头(5)进入洗涤液一管(11)，气泵推气，带动移液器将其中的废液打入洗涤液一管(11)，随后移液器向上提升，针头(5)移出洗涤液一管(11)；

S9、移动移液器至洗涤液二管一(12)上方，向下移动，针头(5)进入洗涤液二管一(12)，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，随后移液器向上提升，针头(5)移出洗涤液二管一(12)；

S10、(a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管(9)上方，向下移动，针头(5)进入磁珠管(9)，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管(9)，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)，移除磁力；

(b)当洗涤液二不含酒精时，移动移液器至磁珠管(9)上方，向下移动，针头(5)进入磁珠管(9)，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管(9)，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，随后气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)，保持磁力；

S11、移动移液器至洗涤液二管一(12)上方，向下移动，针头(5)进入洗涤液二管一(12)，气泵推气，带动移液器将其中的废液打入洗涤液二管一(12)，随后移液器向上提升，针头(5)移出洗涤液二管一(12)；

S12、移动移液器至洗涤液二管二(13)上方，向下移动，针头(5)进入洗涤液二管二(13)，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头(5)移出洗涤液二管二(13)；

S13、(a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管(9)上方，向下移动，针头(5)进入磁珠管(9)，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管(9)，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，在磁珠管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)，移除磁力；

(b)当洗涤液二不含酒精时，移动移液器至磁珠管(9)上方，向下移动，针头(5)进入磁珠管(9)，气泵推气，带动移液器将其中的液体打入磁珠管(9)，随后气泵抽气，将废液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)，移除磁力；

S14、移动移液器至洗涤液二管二(13)上方，向下移动，针头(5)进入洗涤液二管二(13)，气泵推气，带动移液器将其中的废液流入洗涤液二管二(13)，随后移液器向上提升，针头(5)移出洗涤液二管二(13)；

S15、(a)当洗涤液二含酒精时，移动移液器至磁珠管(9)上方，向下移动，针头(5)进入磁珠管(9)，加热磁珠管(9)至70℃半分钟，随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)；

(b)当洗涤液二不含酒精时，省略此步骤；

S16、移动移液器至洗脱液管(14)上方，向下移动，针头(5)进入洗脱液管(14)，气泵抽气带动移液器吸取全部试剂，随后移液器向上提升，针头(5)移出洗脱液管(14)；

S17、移动移液器至磁珠管(9)上方，向下移动，针头(5)进入磁珠管(9)，气泵推气，带动移液器将其中的洗脱液打入磁珠管(9)，控制气泵抽推数次，将磁珠与液体混匀，对磁珠管(9)加热，加热的同时控制气泵抽推数次，加热结束后，在磁珠试管侧边靠近底部的位置进行磁吸1-5分钟，气泵抽气，将含有核酸的洗脱液吸入移液器中，随后移液器向上提升，针头(5)移出磁珠管(9)，移除磁力；

S18、(a)当一体化试剂存放管(3)设置PCR扩增试剂管(15)时，移动移液器至PCR扩增试剂管(15)上方，向下移动，针头(5)进入PCR扩增试剂管(15)，气泵推气，带动移液器将其中的带有核酸的洗脱液流入PCR扩增试剂管(15)，控制气泵抽推数次，将液体混匀，随后移液器向上提升，针头(5)移出PCR扩增试剂管(15)；

(b)当一体化试剂存放管(3)的的连接体末端设置微流控芯片(16)，且微流控芯片(16)中预埋PCR扩增试剂时，移动移液器至微流控芯片(16)上方，向下移动，针头(5)进入微流控芯片(16)，气泵推气，带动移液器将其中的带有核酸的洗脱液进入微流控芯片(16)；

(c)当一体化试剂存放管(3)的连接体末端设置微流控芯片(16)，但是微流控芯片(16)中没有预埋PCR扩增试剂时，移动移液器至PCR扩增试剂管(15)上方，向下移动，针头(5)进入PCR扩增试剂管(15)，气泵推气，带动移液器将其中的带有核酸的洗脱液流入PCR扩增试剂管(15)，控制气泵抽推数次，将液体混匀，随后移液器向上提升，针头(5)移出PCR扩增试剂管(15)，随后移动移液器至微流控芯片(16)上方，向下移动，针头(5)进入微流控芯片(16)，气泵推气，带动移液器将其中的核酸扩增检测试剂与刚提取的核酸进入微流控芯片(16)；

S19、根据需求设置温度循环程序，对PCR扩增试剂管(15)或微流控芯片(16)进行升降温与荧光信号采集，实现实时荧光核酸检测；

S20、反应结束后，将卡盒、移液器和可伸缩的弹性密封罩(19)整个一体化装置取出，废弃。

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