CN115160274B - 含过氧基团结构的倍半萜类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及含过氧基团结构的倍半萜类化合物，包括:式(1)所示结构的化合物，或其晶型、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物。本发明首次提出该化合物，并发现该化合物在农药等领域具有广泛应用。

Description

含过氧基团结构的倍半萜类化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于植物化学技术领域，尤其涉及含过氧基团结构的倍半萜类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
植物在长期进化中，为了提高自身竞争力，会向环境中释放一些物质，这些物质会对周围其他植物的生长造成影响，如抑制发芽及根系发育等等，这些物质就是化感物质。化感物质因没有残留或毒性作用，在杂草控制以及可持续发展农业上的应用已经成为备受关注的研究热点。
苣荬菜(Sonchus wightianus)为菊科(Compos itae)苦苣菜属(Sonchus)植物。苣荬菜几遍全球分布，生长在海拔300-2300米的山坡草地、林间草地、潮湿地或近水旁、村边或河边砾石滩等。苣荬菜以全草入药。有清热解毒，利溼排脓，凉血止血之功效。此外，苣荬菜还可以作为一种可食用植物，含有许多膳食纤维、B族维生素以及胡萝卜素,而且含有氨基酸的营养物质,能够促进胃液分泌帮助消化,而且还可以缓解便秘的症状,可以增强人体免疫力和体质,有利于人体健康。
迄今为止，国内外研究者已从苣荬菜植物中分离得到多种结构类型化合物，主要包括萜类(单萜等)、甾体类、苯丙素类以及脂肪酸类等。倍半萜类物质具有抗肿瘤、消炎等多种生物活性。
目前，未见有本发明化合物的相关报道，更未见有将本发明化合物用于制备农药、除草和抗植物病原真菌等农用活性的相关报道。
发明内容
鉴于现有技术所存在的问题，本发明提供含过氧基团结构的倍半萜类化合物及其制备方法和应用。可以用于制备包含该含过氧基团结构的倍半萜类化合物的药物组合物，该结构的化合物及其组合物具有很好的农药应用价值，可以用于除草和抗植物病原真菌，且安全性好，有利于环保。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
本发明提供含过氧基团结构的倍半萜类化合物，包括:式(1)所示结构的化合物，或其晶型、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物，
式(1)所示结构的化合物，在实施例中将其命名为Sonarveno l ide A。从苣荬菜中提取获得，具有很好的农药应用价值，可以用于除草和抗植物病原真菌，且效果显著。此外，由于该化合物来源于药食两用植物苣荬菜，证明其对人体相对安全，相比合成农药来说，该化合物在环境中易于降解，具有低毒低残留特性，通过减少现有化学农药除草剂和杀菌使用的次数和用量，有助于我国保护地的绿色发展和高附加值作物的可持续性栽培。
本发明提供上述含过氧基团结构的倍半萜类化合物的制备方法，以苣荬菜为原料，利用乙醇提取，得到乙醇浸膏；将乙醇浸膏采用硅胶柱色谱，用正己烷-丙酮为洗脱剂进行梯度洗脱得到馏分；将馏分采用硅胶柱色谱依次以正己烷-乙酸乙酯和石油醚-正己烷-乙酸乙酯洗脱，得到含过氧基团结构的倍半萜类化合物。
苣荬菜可以为苣荬菜干燥全草。正己烷-丙酮中，正己烷、丙酮的体积比为(15-3):1；正己烷-乙酸乙酯中，正己烷、乙酸乙酯的体积比为13:2；石油醚-正己烷-乙酸乙酯中，石油醚、正己烷、乙酸乙酯的体积比为5:3:1。
采用上述方案的有益效果是：采用上述方法有利于获得含过氧基团结构的倍半萜类化合物。
本发明提供一种农药，包括上述含过氧基团结构的倍半萜类化合物。
采用上述方案的有益效果是：本发明提供的上述农药除草和抗植物病原真菌效果好。
进一步，还可以包括辅料。所述辅料可以为药学上可接受的辅料。根据不同的剂型，农药中上述式(1)所示结构的化合物的含量可以为0.5-30wt％，其余可以为药学上可接受的辅料。
本发明所述药学上可接受的辅料，是指除活性成分以外包含在剂型中的物质。药学上可接受的辅料包括任意通常使用的农药用辅料，在液体制剂的情况下，可以为有机溶剂，例如丙酮、吐温水溶液(例如，可以为0.1％(V/V)吐温-80水溶液)等。
进一步，所述农药可以为液体制剂，上述含过氧基团结构的倍半萜类化合物在液体制剂中的质量浓度可以为0.5-5wt％。
进一步，所述农药为可湿性粉剂，上述含过氧基团结构的倍半萜类化合物在可湿性粉剂中的含量为15-30wt％。
采用上述方案的有益效果是：采用上述配比，有利于使化合物结构更加稳定，有利于保存和制备除草剂和杀菌剂，发挥其除草和抑制植物病原真菌的活性。
当农药为可湿性粉剂，例如，还可以包括白炭黑、十二烷基硫酸钠、CMC十二烷基硫酸钠、拉开粉、凹凸棒土，上述式(1)所示结构的化合物在可湿性粉剂中的含量可以为15-30wt％。
例如，可湿性粉剂可以包括：含过氧基团结构的倍半萜类化合物粉末15-25wt％，白炭黑15-25wt％，十二烷基硫酸钠2-8wt％，CMC十二烷基硫酸钠0.5-2wt％和拉开粉1-6wt％，凹凸棒土余量。
优选地，上述式(1)所示结构的化合物的粉末20wt％，白炭黑20wt％，十二烷基硫酸钠5wt％，CMC十二烷基硫酸钠1wt％和拉开粉3wt％，凹凸棒土余量。
本发明提供上述含过氧基团结构的倍半萜类化合物在制备农药中的应用。本发明提供的化合物可以与任何其它的活性试剂结合使用。如果使用的是一组化合物，则可将这些化合物同时、分别或有序地对受试对象进行给药。
所述农药可以为防治杂草(反枝苋、藜等)的农药或防治植物病原真菌(链格孢菌、稻瘟病菌、尖孢镰刀菌、球孢炭疽菌和马铃薯晚疫病菌等)的农药。
本发明提供上述含过氧基团结构的倍半萜类化合物在防治杂草和/或防治植物病原真菌中的应用。例如：可以用于制备防治杂草的除草剂或防治植物病原真菌的杀菌剂等。
上述含过氧基团结构的倍半萜类化合物可以在制备除草农药中进行应用，发明人在研究过程中意外的发现，其除草能力优秀。说明含过氧基团结构的倍半萜类化合物作为植物源除草剂在除草方向具有较好的应用前景。可以进一步制备成除草植物源农药用于除草防治。
上述含过氧基团结构的倍半萜类化合物可以在制备抗植物病原真菌农药中进行应用。可以进一步制备成抗植物病原真菌植物源农药用于病原真菌防治。
在应用的过程中，可以根据实际的使用要求，将含过氧基团结构的倍半萜类化合物制备成合适的剂型或添加一种或几种本领域常规的辅料以制成药物组合物进行应用。
试验结果表明，本发明化合物具有较好的除草和抗植物病原真菌作用，为农业上筛选和/或制备除草、抗植物病原真菌提供了一种新的选择。
附图说明
图1为式(1)所示化合物(即Sonarvenolide A)的1H NMR谱图。
图2为式(1)所示化合物(即Sonarvenolide A)的13C NMR谱图。
图3为式(1)所示化合物(即Sonarvenolide A)的核磁共振COSY光谱图。
图4为式(1)所示化合物(即Sonarvenolide A)的核磁共振HSQC光谱图。
图5为式(1)所示化合物(即Sonarvenolide A)的核磁共振HMBC光谱图。
图6为式(1)所示化合物(即Sonarvenolide A)的NOESY信号图。
图7为式(1)所示化合物(即Sonarvenolide A)的HRESIMS质谱图。
具体实施方式
本发明涉及含过氧基团结构的倍半萜类化合物及其制备方法和应用。该化合物具有式(1)所示结构。
上述化合物的晶型、立体异构体、药学上可接受的盐、溶剂合物、前体药物、代谢产物等均在本发明保护范围内。
上述化合物的制备方法可以包括以下步骤：
(1)将苣荬菜干燥全草利用乙醇提取，得到乙醇浸膏；
(2)将乙醇浸膏采用硅胶柱色谱，以正己烷-丙酮为洗脱剂进行梯度洗脱得到馏分；
(3)将步骤(2)获得的馏分采用硅胶柱色谱，依次以正己烷-乙酸乙酯(正己烷、乙酸乙酯体积比为13:2)和石油醚-正己烷-乙酸乙酯(石油醚、正己烷、乙酸乙酯体积比为5:3:1)洗脱，得到含过氧基团结构的倍半萜类化合物。
具体的，上述化合物的制备方法可以包括以下步骤：
(1)取苣荬菜干燥全草，粉碎，用乙醇回流提取，合并提取液减压浓缩得乙醇浸膏；
(2)取步骤(1)所得乙醇浸膏，采用硅胶柱色谱，以正己烷-丙酮体为洗脱剂进行梯度洗脱，正己烷-丙酮中正己烷、丙酮体积比可以为(15:1)至(3:1)，收集洗脱液作为馏分，具体的，正己烷-丙酮中正己烷、丙酮体积比可以分别为15:1、8:1、5:1、3:1，分别得到四个组分FA-FD，FD为以正己烷、丙酮体积比为3:1的洗脱剂进行洗脱所获的洗脱液，经薄层色谱进行检测，显色，合并相同洗脱部位，将合并后的洗脱部位经减压浓缩至干，备用；
(3)将步骤(2)中FD组分再经硅胶柱色谱，正己烷-乙酸乙酯溶剂洗脱，正己烷-乙酸乙酯溶剂中正己烷、乙酸乙酯体积比为13:2，薄层色谱检测,显色，合并相同洗脱部位，得到三个馏分FDA-FDC，其中FDA馏分为第2-3个柱体积洗脱馏分，FDB馏分为第4-5个柱体积洗脱馏分，FDC馏分为第6个柱体积洗脱馏分；
(4)将步骤(3)中所得FDA馏分，石油醚-正己烷-乙酸乙酯溶剂洗脱，石油醚-正己烷-乙酸乙酯溶剂中石油醚、正己烷、乙酸乙酯的体积比为5：3：1，得到式(1)的化合物，即化合物Sonarvenolide A。
本发明首次提供该化合物，并发现该化合物在农药等领域具有广泛应用。
以下对本发明的内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明主题的保护范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明保护的范围。根据本发明的内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更，修改、替换或变更后的方案也在本发明保护范围内。
若无特殊说明，本发明所使用的原料、设备均为已知产品，可以通过购买市售产品获得。
实验材料：
药材：苣荬菜于2017年9月采自黑龙江省鸡西市，鉴定为菊科苦苣菜属植物苣荬菜(Sonchus wightianus DC.)的干燥全草。
试剂和填料：柱层析硅胶，200-300目(试剂级)，购于青岛海洋硅胶干燥剂厂；薄层层析硅胶GF254(化学纯)，购于青岛海洋硅胶干燥剂厂；GF254硅胶制备薄层，购于烟台江友硅胶开发有限公司；石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇等分析纯试剂，购于北京化工厂。商用除草剂醚苯磺隆购自阿拉丁试剂(上海)有限公司。马铃薯葡萄糖(PD)培养基购自阿拉丁试剂(上海)有限公司。多菌灵购自阿拉丁试剂(上海)有限公司。
链格孢菌(Alternaria alternate)、稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、球孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)和马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)保存于山东省果树研究所，可由公众仅用于非商业目的重复本发明实施例所记载的内容。
实验仪器：Bruker-AVIIIHD-600核磁共振仪(瑞士Bruker)；Nicolet 5700红外光谱仪(美国Thermo公司)；Perkin-Elmer 341旋光测定仪(美国PerkinElmer)；BP211D十万分之一电子天平(瑞士Sartorius)；R-210旋转蒸发器(瑞士BUCHI)；DZG-6050型真空干燥箱(上海森信)。
实施例1制备本发明所述化合物
1、分离纯化：
(1)取苣荬菜干燥全草7.2kg，粉碎后，用乙醇回流提取4次，合并提取液，减压浓缩得到乙醇浸膏300g；
(2)取步骤(1)中所得乙醇浸膏，采用硅胶柱色谱(柱层析硅胶，200-300目(试剂级))，依次以正己烷-丙酮为洗脱剂进行梯度洗脱，正己烷-丙酮中正己烷、丙酮的体积比分别为15:1、8:1、5:1、3:1，经薄层色谱进行检测，显色，合并相同洗脱部分，得到4个组分，FA-FD。FA为正己烷、丙酮体积比为15:1洗脱获得的馏分，FB为正己烷、丙酮体积比为8:1洗脱获得的馏分，FC为正己烷、丙酮体积比为5:1洗脱获得的馏分，FD为正己烷、丙酮体积比为3:1洗脱获得的馏分,共4个组分。
(3)将步骤(2)中FD组分再经硅胶柱色谱(柱层析硅胶，200-300目(试剂级)，硅胶柱色谱的柱体积约为6L)，正己烷-乙酸乙酯溶剂洗脱，正己烷-乙酸乙酯溶剂中正己烷、乙酸乙酯的体积比为13:2，薄层色谱检测，10％硫酸乙醇显色剂显色，根据Rf值和显色颜色合并相同洗脱部分，得到3个馏分FDA-FDC，其中FDA馏分为第2-3个柱体积洗脱馏分，FDB馏分为第4-5个柱体积洗脱馏分，FDC馏分为第6个柱体积洗脱馏分。
(4)将步骤(3)中所得FDA馏分，石油醚-正己烷-乙酸乙酯溶剂洗脱,石油醚-正己烷-乙酸乙酯溶剂中石油醚、正己烷、乙酸乙酯的体积比为5：3：1，得到化合物将其命名为Sonarvenolide A(也可以称作化合物1)。
2、化合物的鉴定：
在分离得到化合物后，对其理化性质和分子结构进行了鉴定，化合物1为含过氧基团结构的倍半萜类化合物，其结构式如式(1)所示。
化合物1的谱图结果如图1至图7所示，其中，图1为化合物1的核磁氢谱，图2为化合物1的核磁碳谱，图3为化合物1的核磁二维氢氢相关图谱，图4为化合物1的核磁二维碳氢相关图谱，图5为化合物1的核磁二维碳氢远程相关图谱，图6为化合物1的核磁二维氢氢空间远程相关图谱，图7为化合物1的高分辨质谱图谱，具体理化性质和波谱数据如下：
Sonarvenolide A(1):黄色不定型固体；[α]25 D＝+19.6(c 0.2,MeOH)；IR(KBr)νmax3432,1776,1653,1384and 1028cm-1；HR-ESI-MS[M+NH4]+m/z 300.1805(calcd,C15H26NO5,300.1811).
核磁共振氢谱(1H-NMR)：Bruker-AVIII HD-600spectrometer测定，数据见表1。
核磁共振碳谱(13C-NMR)：Bruker-AVIII HD-600spectrometer测定，数据见表1。
表1 Sonarvenolide A的1H-NMR(600MHz)、13C-NMR(150MHz)核磁数据(测定溶剂：CDCl3；δ：ppm；J：Hz)
为了说明本发明的有益效果，本发明进一步提供以下实施例。
实施例2：对反枝苋和灰藜除草活性测定
(1)样品的配制：
待测化合物(即实施例1制备的Sonarvenolide A)及商用除草剂醚苯磺隆分别用丙酮溶解制备成浓度为1000μM的母液。用0.1％(V/V)吐温-80水溶液稀释待测化合物及醚苯磺隆，保证最终待测化合物中有机溶剂含量不超过1％(V/V)。
(2)生物活性测定：
将反枝苋和灰藜的种子在0.6％KMnO4溶液中灭菌15分钟。采用种子萌发测定实验方法，以24孔法评价化合物对反枝苋和灰藜的除草作用。每盘播种10粒种子，每盘代表一个重复。进行了三次实验。将板在25℃下孵育，统计种子发芽率，使用数显卡尺测量枝条和根部的长度。并用SPSS软件计算出药剂的IC50。
(3)生测结果：
表2 Sonarvenolide A对反枝苋和藜的除草活性(IC50,μM)
从表2的数据可以看出，Sonarvenolide A对反枝苋和藜都有不同程度的抑制活性。并且发明人意外的发现Sonarvenolide A对反枝苋发芽抑制活性优于现有商业除草剂醚苯磺隆。可以进一步制备成除草农药。
相对于商业除草剂醚苯磺隆，Sonarvenolide A来源于药食两用植物，在环境中易于降解，具有低毒低残留特性，对人类及其他非靶标生物安全、环境相容性好，符合绿色植保和可持续农业生产和发展的需要的优点。
实施例3：抗植物病原真菌活性测试
(1)样品的配置：
待测化合物(即实施例1制备的Sonarvenolide A)及商用杀菌剂多菌灵分别用有机溶剂丙酮溶解制备成浓度为104μg/mL的母液。用0.1％(V/V)吐温-80水溶液稀释待测化合物及商用杀菌剂多菌灵，保证最终待测化合物中有机溶剂含量不超过1％(V/V)。
(2)病原真菌的准备：
链格孢菌(Alternaria alternate)、稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、球孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)和马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)为主要病原菌来测试抗真菌活性。
(3)生物活性测定：
用马铃薯葡萄糖(PD)培养基用微量肉汤稀释法测定96孔板的抗真菌活性。简单地说，每个纯化的化合物从256μg/mL开始依次稀释到含有真菌病原体孢子悬浮液(1×106CFU)的96孔板的孔中，用微量肉汤稀释法测定抗真菌活性。简单地说，每个纯化的化合物从256μg/mL开始依次稀释到含有真菌病原体孢子悬浮液(1×106cfu)的96孔板中。以多菌灵为阳性对照。在28±0.5℃黑暗中培养3d后，以最低抑菌浓度(MIC)作为试验化合物在96孔板中的最低浓度下无微生物生长。在所调查的所有浓度下，对每种化合物进行三次重复测定。
(4)生测结果：
表3 Sonarvenolide A抗植物病原真菌活性(MIC,μg/mL)
A.a.,Alternaria alternate(链格孢菌)；P.o.,Pyricularia oryzae(稻瘟病菌)；F.o.,Fusarium oxysporum(尖孢镰刀菌)；C.g.,Colletotrichum gloeosporioides(胶孢炭疽菌)；P.i.,Phytophthora infestans(马铃薯晚疫病菌)
表3数据表明，化合物Sonarvenolide A对链格孢菌、稻瘟菌、尖孢镰刀菌、球孢炭疽菌和致病疫霉均表现出显著的抗真菌活性(MIC值为32-128μg/mL)。并且化合物Sonarvenolide A对马铃薯晚疫病菌的抗菌活性要优于多菌灵。
相对于商业杀菌剂多菌灵，Sonarvenolide A来源于药食两用植物，在环境中易于降解，具有低毒低残留特性，对人类及其他非靶标生物安全、环境相容性好，符合绿色植保和可持续农业生产和发展的需要的优点。
实施例4：可湿性粉剂
配方(重量比)：实施例1所得化合物的粉末20％，白炭黑20％，十二烷基硫酸钠5％，CMC十二烷基硫酸钠1％和拉开粉3％，凹凸棒土余量。
可湿性粉剂制备方法包括以下步骤：将上述原料按配比混合均匀，控制加工温度0-50℃，在气流粉碎机或其它高目粉碎机中，粉碎到150目以上，水分控制在6-8％(质量百分含量)，pH控制在7-7.5。即可制得20％式(1)所示化合物的可湿性粉剂。
Sonarvenolide A可湿性粉剂对反枝苋和灰藜除草活性测定
(1)样品的配制：
取适量的Sonarvenolide A可湿性粉剂，加入水，制备有效成分为1000μM的Sonarvenolide A水溶液母液。商用除草剂醚苯磺隆用丙酮溶解制备成浓度为1000μM的母液。活性测定时用适量水将Sonarvenolide A可湿性粉剂及商用除草剂醚苯磺隆稀释至所需浓度。
(2)生物活性测定：
将反枝苋和灰藜的种子在0.6％KMnO4溶液中灭菌15分钟。采用种子萌发测定实验方法，以24孔法评价化合物对反枝苋和灰藜的除草作用。每盘播种10粒种子，每盘代表一个重复。进行了三次实验。将板在25℃下孵育，统计种子发芽率，使用数显卡尺测量枝条和根部的长度。并用SPSS软件计算出药剂的IC50。
表4 Sonarvenolide A可湿性粉剂对反枝苋和藜的除草活性(IC50,μM)
从表4的数据可以看出，Sonarvenolide A可湿性粉剂对反枝苋和藜都有不同程度的抑制活性。并且发明人意外的发现Sonarvenolide A可湿性粉剂对反枝苋发芽抑制活性优于现有商业除草剂醚苯磺隆。可以进一步制备成除草农药。
相对于醚苯磺隆，Sonarvenolide A可湿性粉剂中的Sonarvenolide A来源于药食两用植物，在环境中易于降解，具有低毒低残留特性，对人类及其他非靶标生物安全、环境相容性好，符合绿色植保和可持续农业生产和发展的需要的优点。
Sonarvenolide A可湿性粉剂抗植物病原真菌活性测试
(1)样品的配置：
取适量的Sonarvenolide A可湿性粉剂，加入水，制备有效成分为104μg/mL的Sonarvenolide A水溶液母液。商用除草剂醚苯磺隆用丙酮溶解制备成浓度为104μg/mL的母液。活性测定时用适量水将Sonarvenolide A可湿性粉剂及商用除草剂醚苯磺隆稀释至所需浓度。
(2)病原真菌的准备：
链格孢菌(Alternaria alternate)、稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、球孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)和马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)为主要病原菌来测试抗真菌活性。
(3)生物活性测定：
用马铃薯葡萄糖(PD)培养基用微量肉汤稀释法测定96孔板的抗真菌活性。简单地说，每个纯化的化合物从256μg/mL开始依次稀释到含有真菌病原体孢子悬浮液(1×106CFU)的96孔板的孔中，用微量肉汤稀释法测定抗真菌活性。简单地说，每个纯化的化合物从256μg/mL开始依次稀释到含有真菌病原体孢子悬浮液(1×106cfu)的96孔板中。以多菌灵为阳性对照。在28±0.5℃黑暗中培养3d后，以最低抑菌浓度(MIC)作为试验化合物在96孔板中的最低浓度下无微生物生长。在所调查的所有浓度下，对每种化合物进行三次重复测定。
(4)生测结果：
表5 Sonarvenolide A可湿性粉剂抗植物病原真菌活性(MIC,μg/mL)
A.a.,Alternaria alternate(链格孢菌)；P.o.,Pyricularia oryzae(稻瘟病菌)；F.o.,Fusarium oxysporum(尖孢镰刀菌)；C.g.,Colletotrichum gloeosporioides(胶孢炭疽菌)；P.i.,Phytophthora infestans(马铃薯晚疫病菌)
表5数据表明，Sonarvenolide A可湿性粉剂对链格孢菌、稻瘟菌、尖孢镰刀菌、球孢炭疽菌和致病疫霉均表现出显著的抗真菌活性(MIC值为32-128μg/mL)。并且Sonarvenolide A可湿性粉剂对马铃薯晚疫病菌的抗菌活性要优于多菌灵。相对于商业杀菌剂多菌灵，Sonarvenolide A可湿性粉剂中的Sonarvenolide A来源于药食两用植物，在环境中易于降解，具有低毒低残留特性，对人类及其他非靶标生物安全、环境相容性好，符合绿色植保和可持续农业生产和发展的需要的优点。
本发明提供制剂的水中分散性、稀释液稳定性、冷热贮稳定性均符合商品农药制剂的要求。经验证具有很好的除草和抑制植物病原真菌能力。
综上所述，本发明提供含过氧基团结构的倍半萜类化合物及其提取分离方法，该化合物由于其独特的化学结构，并从常用中药苣荬菜中提取出来，实验结果表明其具有除草和抗植物病原真菌活性，因此作为植物源天然产物在农药领域具有广阔的应用前景。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.含过氧基团结构的倍半萜类化合物，其特征在于，包括:式（1）所示结构的化合物，式（1）。
2.权利要求1所述含过氧基团结构的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，以苣荬菜为原料，利用乙醇提取，得到乙醇浸膏；将乙醇浸膏采用硅胶柱色谱，用正己烷-丙酮为洗脱剂进行梯度洗脱得到馏分；馏分采用硅胶柱色谱依次以正己烷-乙酸乙酯和石油醚-正己烷-乙酸乙酯洗脱，得到含过氧基团结构的倍半萜类化合物。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，正己烷-丙酮中，正己烷-丙酮的体积比为（15-3）:1；正己烷-乙酸乙酯中，正己烷、乙酸乙酯的体积比为13:2；石油醚-正己烷-乙酸乙酯中，石油醚、正己烷、乙酸乙酯的体积比为5:3:1。
4.一种农药，其特征在于，包括权利要求1所述含过氧基团结构的倍半萜类化合物。
5.根据权利要求4所述农药，其特征在于，还包括辅料。
6.根据权利要求4或5所述农药，其特征在于，所述农药为液体制剂，含过氧基团结构的倍半萜类化合物在液体制剂中的质量浓度为0.5-5wt%。
7.根据权利要求4或5所述农药，其特征在于，所述农药为可湿性粉剂，含过氧基团结构的倍半萜类化合物在可湿性粉剂中的含量为15-30wt%。
8.根据权利要求7所述农药，其特征在于，包括：含过氧基团结构的倍半萜类化合物粉末15-25wt %，白炭黑15-25wt %，十二烷基硫酸钠2-8wt%，CMC十二烷基硫酸钠0.5-2wt %和拉开粉1-6wt %，凹凸棒土余量。
9.权利要求1所述含过氧基团结构的倍半萜类化合物在防治杂草和/或防治植物病原真菌中的应用。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101787007A (zh) * 2010-02-11 2010-07-28 中国科学院昆明植物研究所 二倍半萜化合物及其应用
CN104628680A (zh) * 2015-01-23 2015-05-20 中国人民解放军第二军医大学 一种具有抗菌活性的倍半萜内酯类化合物及其应用
CN109400444A (zh) * 2017-08-16 2019-03-01 兰州大学 抑制植物病源真菌的倍半萜类化合物及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101787007A (zh) * 2010-02-11 2010-07-28 中国科学院昆明植物研究所 二倍半萜化合物及其应用
CN104628680A (zh) * 2015-01-23 2015-05-20 中国人民解放军第二军医大学 一种具有抗菌活性的倍半萜内酯类化合物及其应用
CN109400444A (zh) * 2017-08-16 2019-03-01 兰州大学 抑制植物病源真菌的倍半萜类化合物及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Synthesis of the reported structure of herbolide I and its C-11 epimer from artemisin;Blay, Gonzalo等;《Journal of Organic Chemistry》;第58卷(第25期);7204-7208 *

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