CN115136958B - 一种麦蛾植物源引诱剂及防控麦蛾的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种麦蛾植物源引诱剂及防控麦蛾的方法。本发明的麦蛾引诱剂中壬醛与癸醛的质量比为2:1,可将麦蛾引诱至杀虫装置内。本发明的麦蛾引诱剂具有对人畜无害、对天敌昆虫安全、不破坏生态系统的优点,可替代化学农药应用在粮仓中,达到诱杀麦蛾的目的,因此具有良好的应用前景。

Description

一种麦蛾植物源引诱剂及防控麦蛾的方法
技术领域
本发明属于昆虫引诱剂技术领域,具体涉及一种麦蛾植物源引诱剂及防控麦蛾的方法。
背景技术
麦蛾Sitotroga cerealella(Olivier,1989)是世界性储粮害虫,属鳞翅目麦蛾科(Lepidoptera:Gelehciidae),同时也是中国三大贮粮害虫(玉米象、谷蠹、麦蛾)之一。有研究表明,在局部地区仅麦蛾为害造成的农户储粮量损失即可占总损失的40%以上,该虫造成较严重危害时,稻谷、麦粒的质量损失甚至可达50%~70%(Yang et al 2012;张书昂等2001)。因此防治储粮害虫,减少储粮损失就显得尤为重要。目前防治储粮害虫的主要手段仍旧以化学防治为主,化学防治会带来3R问题(严晓平等2004)。而物理防治往往具备成本过高,对环境要求过高等限制因素,普通农户储粮无法承担(李捷和冯丽芳2007)。麦蛾的人工合成性信息素为反-11-十六碳二烯醇醋酸酯,可引诱雄虫,但麦蛾雄虫在一个世代中可以进行多次交配,因此即使利用性信息素进行大规模诱杀,只要剩余一定雄虫存活就能够将种群的繁殖率维持在与未进行诱杀的种群相似的水平(Sower and Witmer 1977);另外,因性信息素的稳定性不够好也会影响对雄虫的诱杀效果。因此,寻求一种安全、无毒、有效的绿色防虫方法已迫在眉睫。
植物挥发物是植物在环境温度下蒸发并将信息传递给其他生物的混合物。至今已鉴定出数百种被证明会影响昆虫的行为,并且在虫害治理中起到引诱剂或驱避剂的作用,影响害虫的生长发育、蜕皮、交配行为和成虫羽化(杜家纬2001;Shivanandappa andRajashekar 2014)。一些挥发性物质在调节和控制昆虫对寄主的定向、识别和取食方面也起着重要作用。储藏的粮粒和其提取物可作为储粮害虫的引诱源,除了对成虫具有非特异性引诱作用外,对幼虫也具有一定引诱作用,并能够与信息素协同作用,但直接使用粮粒作为引诱源过于浪费,因此使用其挥发物制作引诱源成为了一种合适的替代方式。
昆虫可感知寄主挥发物的混合物来定位寄主,在昆虫识别单一挥发物成分与挥发物混合物时,与单一挥发物成分相比,昆虫对适当的挥发物混合物的行为反应更加强烈,挥发混合物成分之间的协同效应会增加寄主对昆虫的吸引力,挥发物化学信号对昆虫的取食和繁殖行为非常重要,寄主挥发物在寄主植物的定位上起着关键作用(Bruce and Pickett2011;Visser1986;Hansson 2011)。
发明内容
本发明的目的是提供壬醛、癸醛在防控麦蛾中的应用,以及以壬醛和癸醛为活性成分的麦蛾植物源引诱剂及利用其防控麦蛾的方法,本发明为进一步防治麦蛾提供思路,减缓农药的不合理使用而引起的3R问题。
本发明的第一个目的是提供壬醛在防控麦蛾中的应用,以壬醛为引诱活性成分。
优选,所述的应用,将壬醛与适宜的溶剂配制成浓度为0.1μg/μL的壬醛溶液使用。
优选,所述的溶剂为液体石蜡。
本发明的第二个目的是提供癸醛在防控麦蛾中的应用,以癸醛为引诱活性成分。
优选,所述的应用,将癸醛与适宜的溶剂配制成浓度为1μg/μL的癸醛溶液使用。
一种防控麦蛾的方法,其包括如下步骤:利用麦蛾引诱剂或引诱麦蛾的纳米胶囊将麦蛾引诱至杀虫装置,并利用杀虫装置杀死麦蛾;所述的麦蛾引诱剂,含有壬醛、癸醛以及适宜的溶剂和/或载体,其中壬醛与癸醛的质量比为2:1;所述的引诱麦蛾的纳米胶囊为包载上述的麦蛾引诱剂的纳米胶囊。如,将空白硅胶塞在麦蛾引诱剂内浸泡24h,得到诱芯;诱芯粘在黄色粘虫板上,进行麦蛾引诱。
优选,所述的杀虫装置为粘虫板。
本发明具有如下有益效果:
本发明提供的麦蛾引诱剂,对麦蛾雌雄虫均有良好的引诱效果,在模拟粮仓环境下对麦蛾的24h引诱率可达26.17%,使用纳米胶囊包载,持效期可达28天。
本发明的麦蛾引诱剂,是从小麦和玉米谷粒中提取获得有效成分,并进一步筛选,以壬醛和癸醛为活性成分,液体石蜡作为溶剂混合制备成引诱剂,配合粘虫板使用,诱虫率较性诱剂高且效果佳,尤其是质量比为2:1的壬醛:癸醛、活性成分浓度1μg/μL(壬醛和癸醛的总浓度)的混合物诱杀麦蛾效果最佳,混合物可显著提高对麦蛾的引诱能力,具有协同增效作用;另外壬醛和癸醛制备成本低,来源广泛,易于商品化推广。
附图说明
图1为玉米谷粒挥发物样品的GC-MS总离子图,图中编号6为壬醛,编号10为癸醛;
图2为小麦谷粒挥发物样品的GC-MS总离子图,图中编号3为壬醛,编号6为癸醛;
图3为麦蛾对不同浓度梯度化合物单体的EAG反应绝对值,图A为麦蛾对不同浓度梯度壬醛的EAG反应绝对值;图B为麦蛾对不同浓度梯度癸醛的EAG反应绝对值;图中数值均为均值±标准误,不同字母表示不同谷物上产卵量经One-way ANOVA分析差异显著(P<0.05);
图4为麦蛾对壬醛和癸醛的趋势行为反应,图中数值均为百分比均值±标准误,ns表示无显著差异,***表示P<0.001,**表示P<0.01(卡方检验);
图5为麦蛾室内引诱测试装置;
图6为不同浓度壬醛和癸醛对麦蛾的引诱效果;图A为0.1μg/μL壬醛对麦蛾的引诱率,图B为1μg/μL壬醛对麦蛾的引诱率,图C为10μg/μL壬醛对麦蛾的引诱率,图D为0.1μg/μL癸醛对麦蛾的引诱率,图E为1μg/μL癸醛对麦蛾的引诱率,图F为10μg/μL癸醛对麦蛾的引诱率;图中数值均为均值±标准误,*表示P<0.05,**表示P<0.01,***表示P<0.001,ns表示无显著差异(t检验);
图7为壬醛和癸醛的混合物对麦蛾的引诱效果,图A为0.1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1对麦蛾的引诱率,图B为0.1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=5:1对麦蛾的引诱率,图C为1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1对麦蛾的引诱率,图D为0.1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=5:1对麦蛾的引诱率;图中数值均为均值±标准误,**表示P<0.010,***表示P<0.001,ns表示无显著差异(t检验);
图8为有效单体与有效混剂对麦蛾的引诱效果,图A为1μg/μL癸醛与混剂3(1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1)对麦蛾的引诱率,图B为0.1μg/μL壬醛与混剂3(1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1)对麦蛾的引诱率,图C为1μg/μL癸醛与混剂2(0.1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=5:1)对麦蛾的引诱率,图D为0.1μg/μL壬醛与混剂2(0.1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=5:1)对麦蛾的引诱率;图中数值均为均值±标准误,*表示P<0.05,**表示P<0.01,***表示P<0.001,ns表示无显著差异(t检验);
图9为两种混合物对麦蛾的引诱效果,MIX2为0.1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=5:1的混合物,MIX3为1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1的混合物;图中数值均为均值±标准误,**表示P<0.01,ns表示无显著差异(t检验);
图10为混合物与壬醛引诱麦蛾效果,MIX3为1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1的混合物,Nonanal为浓度为1μg/μL的壬醛;横向为将混合物组中混合物引诱装置上的麦蛾数与混合物组中对照引诱装置上的麦蛾数进行比较,壬醛组中壬醛引诱装置上的麦蛾数与壬醛组中对照引诱装置上的麦蛾数进行比较,纵向为将混合物组中混合物引诱麦蛾数与壬醛组中壬醛引诱麦蛾数进行比较;图中数值均为均值±标准误,ns表示无显著差异,*表示P<0.05,**表示P<0.01(t检验);
图11为包载混合物的纳米胶囊对麦蛾的引诱效果,MSN为包载有混合物(1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1)的纳米胶囊,CK为包载有液体石蜡的纳米胶囊对照;图中数值均为均值±标准误,ns表示无显著差异,*表示P<0.05,**表示P<0.01,***表示P<0.001(t检验)。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
下面结合实施例对本发明提供的麦蛾引诱剂进行详细的说明。
实施例1:麦与玉米谷物挥发物的分析与鉴定
1、材料与方法
1.1供试谷物
实验所用谷物(小麦、玉米、高粱、水稻)在清理掉杂质后保存于-20℃冰箱,实验前取出,使用烘箱烘干后待用。
1.2仪器设备
气质联用分析仪(日本岛津公司)。
1.3实验方法
样品制备:取冷冻于-20℃保存的30g样品,加入到顶空萃取瓶中,在常温下平衡10min后,在65℃恒温水浴中保温萃取90min后,取出萃取头,迅速插入到气相色谱-质谱联用仪进样口中,在250℃(玉米)、260℃(小麦)不分流模式下解析5min。
GC-MS测定条件:玉米-色谱柱为SH-Rsi-5sil-MS毛细管柱(30m×0.25mm,25μm),柱初始温度为50℃,在这个温度下保持3min;再以15℃/min的升温速率,升温至110℃,然后以3℃/min的升温速率,升温至170℃,再以25℃/min的升温速率升温至250℃后在此温度恒定保持7min。进样方式采用无分流进样。载气为氦气,氦气流量为1mL/min,进样口温度为250℃。小麦-色谱柱为SH-Rsi-5sil-MS毛细管柱(30m×0.25mm,25μm),柱初始温度为60℃,在这个温度下保持4min;再以5℃/min的升温速率,升温至180℃后在此温度恒定保持5min;然后以20℃/min的升温速率为升至240℃,在此温度下恒定保持5min。进样方式采用采用无分流进样。载气为氦气,氦气流量为1mL/min,进样口温度为260℃。
质谱条件:玉米-接口温度为280℃;电离方式EI;电子能量70eV;扫描范围(M/Z)50~550amu,采集方式为全扫描模式。小麦-接口温度为280℃;电离方式EI;电子能量70eV;扫描范围(M/Z)50~550amu,采集方式为全扫描模式。
最后利用计算机检索与NIST标准质谱库和WeiLy标准质谱库匹配定性样品中各未知挥发性成分。
为探究小麦与玉米挥发物中的共性物质,采用顶空固相微萃取与气质联用技术分别检测麦蛾寄主谷物玉米与小麦的挥发性化合物,每个处理设置3个重复。首先利用GC-MS分别测定了两种寄主谷物中的挥发物组分并筛选出组分中共有的化合物,最后保留与质谱库匹配相似度较高的化合物(≥90)(在此过程中排除硅化物成分,为实验用玻璃制品所带杂质)。结果表明:玉米与小麦谷物挥发物各鉴定出29种化合物(图1、图2);虽然玉米和小麦间挥发物具体组分有明显差异,但组成类别大致相同:在8类化合物中皆以烷烃和酯类化合物居多,壬醛、癸醛为两种挥发物中共有的化合物。
实施例2:麦蛾对挥发物单组分的EAG反应
1、材料与方法
1.1供试昆虫
实验所用麦蛾为农户储粮抓取室内同样条件饲养多代的麦蛾,于圆底透明玻璃瓶内饲养(高10cm,半径4cm),在瓶内装约2cm厚干净麦粒,置于温度28±1℃,相对湿度75±5%,光周期L:D=14:10人工气候箱饲养。挑选含有蛹的麦粒于指形管中单独饲养,逐日检查,取羽化24h内处女雌蛾备用。
1.2仪器设备及主要试剂
1.2.1仪器设备
触角电位仪由5部分组成,即信号采集系统(IDAC-4;
Figure GDA0004012877630000053
);刺激气流控制器(CS-55;
Figure GDA0004012877630000051
Buchenbach,Baden-Württemberg,The Netherlands);EAGPro数据记录及分析软件
Figure GDA0004012877630000052
湿微操作台,MP-15磁性吸附底座,两个X-Y-Z向可调操作臂。SZM系列体视显微镜(舜宇仪器有限公司)。
1.2.2主要试剂
96%正壬醛(上海麦克林生化科技有限公司,批号:C12089335)、97%癸醛(上海源叶生物科技有限公司,批号:B18J11D116242)、液体石蜡(国药集团化学试剂有限公司,批号:20211203),用溶剂将每种挥发性化合物配制成10μg/μL的溶液,并将其稀释成1μg/μL、0.1μg/μL溶液,待用。
EAG使用的导电液为0.85%氯化钠、氯化钾、氯化钙组成的Ringer's液(上海源叶生物科技有限公司)。
1.3实验方法
用充满导电液的毛细管作为电极,电极内通入银丝并连接信号。将试虫整根触角用解剖刀沿基部切下,之后将触角两端连接在充满导电液的毛细管内。在实验前将10μL的等量溶液移到洁净滤纸条上(Whatman,3mm×40mm),用洁净的镊子将味源滤纸片送入黄色吸头(Axygen,200μL),用液体石蜡处理的滤纸条作为对照。含有味源的吸头尖端连接在一个玻璃管(长130mm,直径12mm)的侧孔中,该玻璃管的气流端口方向离触角相距约1cm。刺激是通过空气刺激控制器产生连续加湿气流,刺激时间为0.5s,两次刺激时间间隔30s以上,以保证触角的活性完全恢复,待基线平稳后开始测定。一根触角由不同浓度同一种挥发物的溶液由低浓度到高浓度进行刺激,一根触角刺激出的电位为一组有效结果,最后取15组具有相同趋势的有效结果进行统计分析。
多数昆虫对于外界环境中挥发性化学物质的感受依赖于其灵敏的嗅觉,而触角电位技术(Electro antenna graphy,EAG)是研究昆虫对寄主挥发物和昆虫信息素识别感受的有效手段。使用0.1μg/μL、1μg/μL、10μg/μL三个浓度的壬醛、癸醛刺激麦蛾触角。结果显示(图3),刺激浓度为10、1、0.1μg/μL时,麦蛾触角对壬醛(图3A)、癸醛(图3B)的EAG反应均显著高于对照组(液体石蜡)(10μg/μL:壬醛:0.20±0.04mV,CK:0.067±0.012mV,P=0.013;癸醛:0.25±0.04mV,CK:0.060±0.011mV,P=0.003)(1μg/μL:壬醛:0.21±0.04mV,P=0.010;癸醛:0.27±0.05mV,P=0.001)(0.1μg/μL:壬醛:0.19±0.03mV,P=0.022;癸醛:0.20±0.03mV,P=0.043)。因此在3种刺激浓度下癸醛与壬醛均能引起麦蛾触角的反应。
实施例3:麦蛾对挥发物单组分的趋势行为反应
1、材料与方法
1.1供试昆虫
同实施例1,取羽化24h内处女雌蛾,备用。
1.2仪器设备及主要试剂
1.2.1仪器设备
Y型管,内径40mm,主臂长150mm,两臂长130mm,两臂夹角60°;250mL气体干燥塔;500mL多孔洗瓶;15mL冲击式吸收瓶;Y型导管,管长50mm,直径5mm;LZB-3WB玻璃转子流量计(常州双环热工仪表有限公司);ACO-001空气泵(森森集团股份有限公司)。
1.2.2主要试剂
96%正壬醛、97%癸醛、液体石蜡(上海源叶生物科技有限公司),用溶剂将每种挥发性化合物配制成10μg/μL的溶液,待用。
1.3实验方法
采用Y型嗅觉仪监测麦蛾对癸醛、壬醛(10μg/μL)和CK(液体石蜡)的行为选择偏好反应。Y型嗅觉仪包括内径为4cm,主臂长15cm,两臂长13cm,两臂夹角为60°的Y型管、空气泵、活性炭过滤装置、蒸馏水加湿装置、Y型导管、玻璃转子流量计和味源瓶。以上装置用医用硅胶软管进行连接,实验时Y型管放置在只有单一光源照射的暗箱中进行。移液枪吸取20μL测试样品滴在小滤纸条上(Whatman,20mm×20mm),将其放入连接在一个侧臂的味源瓶中央,并以液体石蜡作为对照放入连接在另一个侧臂上的味源瓶中。Y型嗅觉仪生物测定在恒温且空气无异味的实验室内进行,实验室内温度为28±1℃。测试前,先打开空气泵,使空气从活性炭过滤后进入蒸馏水湿润,然后通过Y型导管分流再通过玻璃转子流量仪控制气体流速,然后通过带有物质的味源瓶,最后使携带有气味的气体进入Y型嗅觉仪两臂,两个流量仪的气流速度均调节为1L/min,并先通气15~30min使气体充满Y型管。待通气结束,将待测虫子放入主臂口,主臂口上封有封口膜来防止虫子逃出。将虫放入主臂后,观察并记录10min麦蛾对两种物质的选择,将麦蛾进入一臂5cm以上且停留1min以上视为对这侧气味源做出选择;如果虫子在放入主臂10min内没有做出选择,则记为无效数据。为消除Y型管臂位置对麦蛾选择行为的影响,每实验5头虫,调转Y型管两臂方向。每次测试完毕使用洗涤剂与95%乙醇清洗生测装置,以消除不同处理间残留气味的影响。每个处理测20头虫子,重复三次,用过的虫子不再重复使用。
统计结果表明(图4):当两种物质的选择浓度均为10μg/μL时,正趋向壬醛、癸醛的麦蛾数均显著高于对照(液体石蜡)(壬醛:P<0.0001,癸醛:P<0.01)。由此可初步推断:当选择浓度为10μg/μL时,壬醛与癸醛对麦蛾均具有诱集作用。
实施例4:挥发物单体、混合物对麦蛾的室内引诱效果
1 材料与方法
1.1 供试昆虫
同实施例1,取羽化24h内处女雌雄蛾,备用。
1.2仪器设备及主要试剂
1.2.1仪器设备
室内引诱测试装置包括塑料直身瓶(500mL,定制);pvc透明管(直径30mm)。
1.2.2主要试剂
96%正壬醛、97%癸醛、液体石蜡(上海源叶生物科技有限公司),用溶剂将每种挥发性化合物配制成10μg/μL的溶液,并将其稀释成1μg/μL、0.1μg/μL溶液待用。
1.3实验方法
1.3.1不同浓度挥发物单体对麦蛾的室内引诱效果
室内引诱测试装置,由三个透明直身瓶组成,使用透明pvc管连接(图5),装置一侧放置一个装有800μL不同浓度壬醛/癸醛(10、1、0.1μg/μL)的离心管(1.5mL),管口塞有适量脱脂棉使溶液刚好浸透,另一侧放置有装有相同体积液体石蜡的离心管作为对照。将10对羽化24h内处女雌雄蛾置入装置中间的空瓶,在实验时于6h、18h、24h三个时间点统计处理区和对照区引诱的麦蛾数量。实验设置10重复。
如图6所示,首先监测浓度为0.1μg/μL的壬醛对麦蛾引诱的情况;结果表明(图6A):6h和24h时壬醛引诱麦蛾数显著高于对照组(液体石蜡)(引诱率:6h,处理组=28.90%(5.78±0.91只),对照组=13.90%(2.78±0.40只),P=0.012;24h,处理组=38.90%(7.78±0.86只),对照组=28.00%(5.00±0.55只),P=0.015)。但在18h时壬醛引诱麦蛾与对照相比未达到显著差异水平(引诱率:处理组=31.10%(6.22±0.85只),对照组=28.35%(5.67±0.67只);P=0.613)。因此,0.1μg/μL的壬醛对麦蛾具有一定引诱活性。
监测1μg/μL壬醛对麦蛾的引诱情况。结果显示(图6B):6h时壬醛引诱麦蛾数显著低于对照(引诱率:处理组=10.00%(2.00±0.39只),对照组=17.50%(3.50±0.48只);P=0.026)。在18h和24h时,处理区与对照区的麦蛾数目均逐步升高,壬醛引诱麦蛾数与对照组无显著差异(引诱率:18h,处理组=15.00%(3.00±0.33只),对照组=18.50(3.70±0.45只),P=0.226;24h,处理组=17.00%(3.40±0.45只),对照组=21.50%(4.30±0.45只),P=0.175)。根据上述结果推测,1μg/μL的壬醛对麦蛾不具有引诱性。
最后监测10μg/μL壬醛对麦蛾的引诱情况,结果表明(图6C):6h时壬醛引诱麦蛾数显著高于对照组(液体石蜡)(引诱率:处理组=31.00%(6.20±1.02只),对照组:17.00%(3.40±0.67只);P=0.034)。但在之后的18h、24h两个时间点,壬醛引诱的麦蛾数与对照相比均未达到显著差异水平((引诱率:18h,处理组=20.50%(4.10±0.77只),对照组=22.00%(4.40±0.67只),P=0.772;24h,处理组=25.00%(5.00±0.59只),对照组=27.00%(5.40±0.58只),P=0.637)。结果表明,10μg/μL的壬醛对麦蛾不具有持续的引诱活性。同时,因此0.1μg/μL的壬醛为3个浓度中对麦蛾最具引诱效果的浓度。
监测0.1μg/μL的癸醛对麦蛾的引诱情况。结果显示(图6D):癸醛在6h时引诱的麦蛾数显著低于对照组(液体石蜡)(引诱率:处理组=13.00%(2.60±0.60只),对照组=34.00%(6.80±0.79只);P=0.034)。在18h和24h时癸醛引诱的麦蛾数与对照相比未达到显著差异水平(引诱率:18h,处理组=29.00%(5.80±0.65只),对照组=27.00%(5.40±0.64只),P=0.664;24h,处理组=28.00%(5.60±0.69只),对照组=36.50%(7.30±0.73只),P=0.193)。结果表明0.1μg/μL的癸醛对麦蛾不具有引诱作用。
接下来监测1μg/μL的癸醛对麦蛾的引诱情况,经统计(图6E),6h、18h和24h时癸醛引诱麦蛾数均显著高于对照(引诱率:6h,处理组=30.00%(6.00±0.87只),对照组=15.70%(3.14±0.34只),P=0.010;18h,处理组=30.00%(6.00±1.02只),对照组=16.40%(3.28±0.36只),P=0.028;24h,处理组=35%(7.00±0.58只),对照组=17.90%(3.57±0.43只),P<0.0001)。由此可知,1μg/μL的癸醛对麦蛾具有引诱活性。
监测10μg/μL的癸醛对麦蛾的引诱情况。结果表明(图6F):癸醛在6h时引诱的麦蛾数显著高于对照(引诱率:处理组=37.00%(7.40±0.62只);对照组=11.30%(3.00±0.71只);P<0.0001),在18h、24h癸醛引诱的麦蛾数与对照相比未达到显著差异水平(引诱率:18h,处理组=29.50%(5.90±0.60),对照组=26.00%(5.2±0.68只),P=0.452;24h,处理组=31.00%(6.20±0.57只),对照组=36.50%(7.30±0.73只),P=0.355)。因此,浓度为10μg/μL的癸醛对麦蛾不具有显著引诱效果。总的结果表明:0.1μg/μL壬醛与1μg/μL癸醛对麦蛾具有显著引诱效果,接下来使用1μg/μL的癸醛与0.1μg/μL的壬醛进行混配实验,确定混合物对麦蛾的引诱作用。
1.3.2有效成分混剂对麦蛾的室内引诱效果
室内引诱测试装置,由三个透明直身瓶组成,使用透明pvc管连接(图5),混合物按壬醛和癸醛在玉米(2:1)、小麦(5:1)谷粒挥发物中大致比例配比,装置一侧放置一个装有800μL混合物的离心管(1.5mL),离心管口塞有适量脱脂棉使溶液刚好可以浸透,另一侧放置有装有相同体积液体石蜡的离心管作为对照。将10对羽化24h内处女雌雄蛾置入装置中间的空瓶,在实验时于6h、18h、24h三个时间点统计处理区和对照区引诱的麦蛾数量,实验设置10重复。
监测混剂1(0.1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1)(混剂中两种不同溶液的比例为体积比,以下均采用相同方式表示)对麦蛾的引诱情况。结果显示(图7A):6h时混剂1引诱的麦蛾数显著高于对照(引诱率:处理组=31.00%(6.20±1.04只),对照组=13.50%(2.70±1.34只);P=0.009)。18h和24h时混剂1引诱的麦蛾数与对照相比无显著差异(引诱率:18h,处理组=35.1%(7.20±0.87只),对照组=30.00%(6.00±0.60只),P=0.146;24h:处理组=35.50%(7.10±0.98只),对照组=29.50%(5.90±0.48只),P=0.293)。因此,混剂1对麦蛾不具有显著引诱效果。
监测混剂2(0.1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=5:1)引诱麦蛾的情况,经统计(图7B),混剂2在6h、18h和24h时引诱的麦蛾数显著高于对照组(引诱率:6h,处理组=51.00%(10.20±1.48只),对照组=6.50%(1.30±0.26只),P<0.0001;18h,处理组=42.00%(8.40±0.86只),对照组=13.00%(2.60±0.34只),P<0.0001;24h,处理组=42.00%(8.40±0.54只),对照组=17.00%(3.40±0.37只),P<0.0001)。混剂2对麦蛾具有显著引诱效果。
前期实验结果表明,1μg/μL的壬醛对麦蛾无引诱作用,为明确无效单体能否增强有效单体对麦蛾的引诱效果,将1μg/μL的壬醛与1μg/μL的癸醛进行混配实验。监测混剂3(1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1)对麦蛾的引诱情况,结果显示(图7C):在6h、18h和24h时混剂3引诱的麦蛾数与对照相比均达到显著差异水平(引诱率:6h,处理组=35.00%(7.00±0.77只),对照组=13.50%(2.70±0.63只),P<0.0001;18h,处理组=43%(8.60±0.86只),对照组=15%(3.00±0.61只),P<0.0001;24h,处理组=38.5%(7.70±0.65只),对照组=21.50%(4.30±0.68只),P=0.002)。混剂3对麦蛾具有显著引诱效果。
监测混剂4(1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=5:1)对麦蛾的引诱情况。经统计(图7D),6h、18h和24h时混剂4引诱麦蛾数目与对照相比均未达到显著差异水平(引诱率:6h,处理组=17.00%(3.40±1.05只),对照组=8.00%(1.60±0.34只),P=0.004;18h,处理组=22.00%(4.40±0.92只),对照组=15.50%(3.10±0.53只),P=0.055;24h,处理组=22.00%(4.40±0.83只),对照组=20.50%(4.10±0.48只),P=0.122)。因此,混剂4对麦蛾无显著引诱活性。总的结果表明,混剂2与混剂3对麦蛾具有引诱活性。
1.3.3挥发物单组分与混合物对麦蛾的室内引诱效果
室内引诱测试装置,由三个透明直身瓶组成,使用透明pvc管连接(图5),装置一侧放置一个装有800μL待测溶液的离心管(1.5mL),离心管口塞有适量脱脂棉使溶液刚好可以浸透,另一侧放置有装有相同体积另一种待测溶液的离心管作为对照。将10对羽化24h内处女雌雄蛾置入装置中间的空瓶,在实验时于6h、18h、24h三个时间点统计处理区和对照区引诱的麦蛾数量,实验设置10重复。
为进一步明确单体与混合物对麦蛾的引诱效果差异,明确无效单体能否增强有效单体的引诱效果。首先监测癸醛与混合物对麦蛾的引诱效果。经统计(图8A、C):混剂2和混剂3在6h、18h和24h时引诱麦蛾数均显著高于癸醛引诱的麦蛾数(引诱率(图8C):6h,混剂2=25.50%(5.10±0.86只),癸醛=12.00%(2.40±0.52只),P=0.015;18h,混剂2=41.50%(8.30±1.14只),癸醛=23.00%(4.60±0.62只),P=0.013;24h,混剂2=44.50%(8.90±0.92只),癸醛=23.00%(4.60±0.45只),P=0.001)(引诱率(图8A):6h,混剂3=21.00%(4.20±0.57只),癸醛=10.50%(2.10±0.28只),P=0.006;18h,混剂3=28.00%(5.60±0.64只),癸醛=13.50%(2.70±0.45只),P=0.002;24h,混剂3=36.00%(7.20±0.57只),癸醛=17.50%(3.50±0.45只),P<0.0001),此实验结果表明,混剂2、3对麦蛾的引诱效果均高于癸醛(1μg/μL)。同时前期实验结果表明,1μg/μL壬醛对麦蛾无引诱效果,1μg/μL壬醛与具有引诱效果的癸醛(1μg/μL)混配(混剂3)后对麦蛾显示出持续显著引诱效果(图8A)。因此,壬醛增加了癸醛(1μg/μL)对麦蛾的引诱效果。
其次监测壬醛与混合物对麦蛾的引诱效果。结果表明(图8B、D):6h和18h时混剂3引诱的麦蛾数与壬醛相比无显著差异(引诱率:6h,混剂3=23.50%(4.70±0.68只),壬醛=14.50%(2.90±0.81只),P=0.107;18h,混剂3=31.00%(6.20±0.69只),壬醛=23.50%(4.70±0.70只),P=0.146),但在24h时混剂3引诱的麦蛾数显著高于壬醛(引诱率:混剂3=41.00%(8.20±0.92只),壬醛=23.00%(4.60±0.76只);P=0.007)。在6h和24h时混剂2引诱的麦蛾数与壬醛无显著差异(引诱率:6h,混剂2=18.50%(3.70±0.76只),壬醛=15.00%(3.00±0.77只),P=0.053;24h,混剂2=32.50%(6.50±0.99只),壬醛=28.50%(5.70±0.63只),P=0.505)。但在18h时,混剂2引诱的麦蛾数显著低于壬醛(引诱率:混剂2=21.00%(4.20±0.69只),壬醛=31.00%(6.20±0.59只);P=0.042)。结果表明混剂3对麦蛾的引诱效果高于壬醛。
为明确混合物中混剂3是否引诱效果最佳,监测混剂2与混剂3对麦蛾的引诱效果。结果显示(图9):混剂3在6h、18h、24h引诱的麦蛾数均显著高于混剂2(引诱率:6h,混剂3=25.00%(5.00±0.79只),混剂2=10.00%(2.00±0.50只),P=0.006;18h,混剂3=30.00%(6.00±0.47只),混剂2=20.00%(4.00±0.54只),P=0.012;24h,混剂3=36.50%(7.30±0.72只),混剂2=22.50%(4.50±0.89只),P=0.024)。此结果证明混剂3对麦蛾的引诱力高于混剂2。上述结果表明,在混合物中混剂3(1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1)引诱效果最佳,对麦蛾的引诱效率可达43%;在单体中为壬醛(0.1μg/μL)引诱效果最佳,对麦蛾的引诱效果可达38.9%,且混剂3对麦蛾的引诱效果优于壬醛单体(0.1μg/μL)。
实施例5:模拟粮仓引诱效果测定
1 材料与方法
1.1 供试昆虫
同实施例1,取羽化24h内处女雌雄蛾,备用。
1.2仪器设备及主要试剂
1.2.1仪器设备
模拟粮仓装置包括纸箱(530mm×290mm×370mm,57L);小麦粒1kg。
1.2.2主要试剂
96%正壬醛、97%癸醛、液体石蜡(上海源叶生物科技有限公司),用溶剂将每种挥发性化合物配制成10μg/μL的溶液,并将其稀释成1μg/μL、0.1μg/μL溶液,取浓度为1μg/μL的壬醛溶液和癸醛溶液配置成壬醛和癸醛体积比为2:1的混剂3,待用。
1.3实验方法
模拟粮仓装置为装有1kg干净麦粒的纸箱(57L)。引诱装置为粘有1诱芯的方形黄板(粘虫板,12.5cm×12.5cm),诱芯已使用待测溶液或对照(液体石蜡)浸泡12h。将模拟粮仓装置放在温度恒定为28±1℃,无异味的房间内,使用5cm长的棉线将两个引诱装置分别挂在装置内两端,取100对羽化24h内麦蛾雌雄虫从装置中间释放。24h后取出引诱装置,计数每个黄板上的麦蛾数,实验设置三个重复。
前期实验通过引诱装置已筛选出对麦蛾具有引诱效果的混合物与单体,为进一步确定在模拟粮仓环境下已筛选出物质对麦蛾是否有显著引诱效果,本实验采用模拟粮仓装置分别检测0.1μg/μL壬醛和混剂3(1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1)对麦蛾的引诱效果。统计结果表明(图10):混剂3对麦蛾的引诱效果显著高于壬醛(引诱率:混剂3=26.17%(52.33±1.76只),对照2=14.00%(28.00±3.79只),P=0.004;壬醛=16.00%(32.00±2.65只),对照2=9.65%(19.33±1.67只),P=0.015)。因此,在模拟粮仓装置中混剂3与壬醛对麦蛾均有显著诱集作用。同时,混剂3引诱麦蛾数与壬醛相比差异水平显著(P=0.003)(图10)。由此可知,混剂3为效果最佳的引诱剂,24h内麦蛾引诱率可达26.17%。
实施例6:包载有效混合物的纳米胶囊对麦蛾的室内引诱效果及持效期
1 材料与方法
1.1 供试昆虫
同实施例1,取羽化24h内处女雌雄蛾,备用。
1.2仪器设备及主要试剂
1.2.1仪器设备
室内引诱测试装置包括塑料直身瓶(500mL,定制);pvc透明管(直径30mm)。
1.2.2主要试剂
96%正壬醛、97%癸醛、液体石蜡(上海源叶生物科技有限公司),用溶剂将每种挥发性化合物配制成10μg/μL的溶液,并将其稀释成1μg/μL溶液待用。
1.3实验方法
室内引诱测试装置,由三个透明直身瓶组成,使用透明pvc管连接(图5),壬醛和癸醛均以石蜡为溶剂配置浓度为1μg/μL壬醛和癸醛。以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为模板,通过溶胶-凝胶法制备了介孔二氧化硅(MSN),恒温摇床振荡法的载药,配制混合物(1μg/μL壬醛:1μg/μL癸醛=2:1)纳米胶囊,于装置一侧瓶内放置产卵纸和10mL离心管,离心管内装有混合物纳米胶囊;装置另一侧瓶内放置装有相同质量的空白(石蜡)纳米胶囊的离心管作为对照。将10对羽化24h内雌雄蛾放置入装置中间的空瓶,24h后观察处理区和对照区引诱的麦蛾数量以及装置内麦蛾的死亡数量,根据引诱效果每7天检测一次观察至无引诱性,实验设置5个重复。
如图11所示,经统计,1d时,该MSN(混合物)引诱麦蛾率为46.00%(9.20±1.36只)显著高于对照组15.00%(3.00±0.62只,P=0.003)。
7d时,MSN(混合物)引诱麦蛾率为41.00%(8.20±0.37只)与对照组25.00%(5.00±0.32只,P<0.001)相比达到显著差异水平。
14d时,MSN(混合物)引诱麦蛾率为42.00%(8.40±0.51只)与对照13.00%(2.60±0.68只,P<0.001)相比达到显著差异水平。
21d时,MSN(混合物)引诱麦蛾率为38.00%(7.60±0.51只)与对照12.00%(2.40±0.51只,P<0.001)相比达到显著差异水平。
28d时,MSN(混合物)引诱麦蛾率为34.00%(6.80±0.58只)与对照13.00%(2.60±1.08只,P=0.009)相比达到显著差异水平。
35d时,MSN(混合物)引诱的麦蛾数31.00%(6.20±0.58只)与对照22.00%(4.40±0.93只,P=0.139)相比未达到显著差异水平。
MSN(混合物)引诱麦蛾在35d时与空白对照相比无显著性差异,不具备引诱效果,因此包载有混合物的MSN持效期为28天。

Claims (7)

1.壬醛在防控麦蛾中的应用,其特征在于,壬醛为引诱活性成分。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,将壬醛与适宜的溶剂配制成浓度为0.1μg/μL的壬醛溶液使用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述的溶剂为液体石蜡。
4.癸醛在防控麦蛾中的应用,其特征在于,癸醛为引诱活性成分。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,将癸醛与适宜的溶剂配制成浓度为1μg/μL的癸醛溶液使用。
6.一种防控麦蛾的方法,其特征在于,包括如下步骤:利用麦蛾引诱剂或引诱麦蛾的纳米胶囊将麦蛾引诱至杀虫装置,并利用杀虫装置杀死麦蛾;所述的麦蛾引诱剂,含有壬醛、癸醛以及适宜的溶剂和/或载体,其中壬醛与癸醛的质量比为2:1;所述的引诱麦蛾的纳米胶囊为包载上述的麦蛾引诱剂的纳米胶囊。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的杀虫装置为粘虫板。
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