CN115025088A - 十氢萘吡啶酮生物碱及其药物组合物的应用 - Google Patents

十氢萘吡啶酮生物碱及其药物组合物的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种具有式(1)结构的十氢萘吡啶酮生物碱或其药学上可接受的盐以及它们形成的药物组合物在制备NF‑κB信号通路抑制剂药物中的应用。应用该十氢萘吡啶酮生物碱可有效抑制NF‑κB信号通路，通过在分子水平、细胞水平、动物水平发挥抑制作用以及对NF‑κB信号通路相关蛋白表达的影响等多种作用机制，获得显著的体内外抗肿瘤活性。同时活性成分由天然微生物发酵产物分离而得，安全有效，可发挥预防和治疗肿瘤的多重功效，药物组合物剂型灵活多样，均拓宽了其应用场景。
Figure DDA0003649276640000011

Description

十氢萘吡啶酮生物碱及其药物组合物的应用
技术领域
本发明涉及一种十氢萘吡啶酮生物碱及其药物组合物的应用，尤其涉及一种十氢萘吡啶酮生物碱及其药物组合物在制备NF-κB信号通路抑制剂药物中的应用。
背景技术
癌症是人类健康的重大威胁之一，在治疗癌症过程中，药物的介入十分重要。传统的抗肿瘤药物一般为化学药物，在发挥抗肿瘤作用的同时还存在多种副作用，严重损害患者的健康。近年来，从内生真菌代谢产物中分离获得活性抗癌成分，如从内生真菌烟曲霉Aspergillus fumigatus CY018中分离获得的喹唑啉生物碱chaetominine可通过干扰PI3K/Akt/Nrf2信号传导强烈地逆转耐药性，抑制K562细胞生长，IC50值为35nM，而对人外周血单核细胞的生长无抑制作用；从内生真菌黄柄曲霉Aspergillus flavipes中分离得到的细胞松弛素asperchalasine A能够选择性的抑制肿瘤细胞周期蛋白Cyclin A、CDK2和CDK6的表达，对正常细胞没有影响，为一种新型的细胞选择性周期调节剂。
NF-κB信号通路广泛参与多种生物学效应，包括细胞增殖、细胞凋亡、炎症反应、免疫应答及肿瘤发生发展等重要的生理病理过程，是高等生物细胞中最重要的信号通路之一，其在细胞中的活动受到严格的调控。许多疾病的发生都和该通路异常有关。研究表明，通过调节相关基因的表达，NF-κB信号通路能促进细胞生存，抑制细胞凋亡；能阻止细胞程序性坏死；能使许多肿瘤细胞获得耐药性。在许多肿瘤中，NF-κB信号通路活性均发生异常，包括实体的和血液的恶性肿瘤，如多发性骨髓瘤，其通过调节多种下游基因的表达，涉及到细胞增殖、细胞凋亡、炎症反应、免疫应答及肿瘤形成，从而影响肿瘤发生发展的六大特点，即增殖信号的自我刺激、对生长抑制信号的不敏感、逃避凋亡、无限增殖能力、诱导血管生成和诱导细胞迁移与侵袭。通过基因工程手段，在多种肿瘤模型的小鼠均显示出NF-κB信号通路在炎症相关的癌症中有着重要的作用。因此，开发该通路的抑制剂有利于肿瘤治疗。
目前，硼替佐米是唯一一个靶向NF-κB信号通路的药物，用于多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤。但在临床应用中发现，硼替佐米溶解性和稳定性较差，尤其见光易分解，且对热、氧极为敏感，并不适合制成液体制剂。此外，硼替佐米生物利用度较低，在化疗过程中穿透能力较差，并且会产生严重的毒副作用，对正常组织毒性较大，易出现耐药性，这些问题均限制了硼替佐米作为NF-κB信号通路靶向药物的疗效及应用。
发明内容
发明目的：针对现有NF-κB信号通路靶向药物存在的药效有限、副作用强等不足，本发明旨在提供一种具有优异的体内外抗肿瘤活性的十氢萘吡啶酮生物碱及其药物组合物在制备NF-κB信号通路抑制剂药物中的应用。
技术方案：作为本发明涉及的第一方面，具有式(1)结构的十氢萘吡啶酮生物碱或其药学上可接受的盐应用于制备NF-κB信号通路抑制剂药物，
Figure BDA0003649276620000021
进一步地，上述应用涉及将具有式(1)结构的十氢萘吡啶酮生物碱或其药学上可接受的盐制备为治疗和/或预防与NF-κB信号通路异常激活相关的炎症疾病的药物。
更进一步地，上述应用涉及将具有式(1)结构的十氢萘吡啶酮生物碱或其药学上可接受的盐制备为治疗和/或预防肿瘤的药物；具体地，将有式(1)结构的十氢萘吡啶酮生物碱或其药学上可接受的盐制备为治疗和/或预防基底细胞癌、髓母细胞瘤、横纹肌肉瘤、痣样基底细胞癌综合征、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、转移性前列腺癌、胰腺癌、软骨肉瘤、骨肉瘤、黑色素瘤、神经胶质瘤、乳腺癌、卵巢癌、食道癌、胃癌、结肠癌、胆管癌、肝癌、膀胱癌、血管瘤、慢性髓细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤的药物。
其中，作为药物的活性成分之一，上述十氢萘吡啶酮生物碱的制备方法包含以下步骤：
(1)将柄花茜草植物内生真菌Bipolaris victoriae S27(GenBankNo.MN856279.1)经大米固体培养基发酵，以乙酸乙酯提取得浸膏；
(2)分离纯化步骤(1)制得的浸膏，即得上述十氢萘吡啶酮生物碱。
具体地，上述制备方法的具体操作如下：
将菌株Bipolaris victoriae S27在PDA培养基中活化生长，待菌丝长满平板后，将其切成小块，无菌条件下接种到含大米培养基发酵(例如：28℃发酵28天)；菌株大米发酵物用乙酸乙酯浸提4次，提取液经减压浓缩得总浸膏；总浸膏经硅胶柱层析，用石油醚/丙酮(20:1、2:1和1:1)梯度洗脱，得到5个亚组分(Fr.1–Fr.5)；Fr.3经RP-18硅胶柱层析，用甲醇/水(20％–100％)梯度洗脱得4个亚组分(Fr.3-1–Fr.3-4)；Fr.3-3经Sephadex LH-20柱层析，用氯仿/甲醇(1:1)等度洗脱，得4个亚组分(Fr.3-3-1–Fr.3-3-4)；Fr.3-3-2经半制备HPLC得十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)。
本发明对柄花茜草植物内生真菌Bipolaris victoriae S27代谢产物进行研究，利用多种分离纯化手段，包括硅胶柱层析，RP-18和Sephadex LH-20凝胶柱层析，从中获得了十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)。随后，利用结肠癌细胞HCT116和HT29及其裸鼠移植瘤模型评价十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)体内外抗肿瘤活性，结果显示该生物碱具有体内外抗肿瘤活性；利用荧光素酶双报告基因系统和Western Blot实验，在HEK293T、HCT116和HT29细胞中评价该十氢萘吡啶酮生物碱对NF-κB信号通路的影响，结果显示该十氢萘吡啶酮生物碱具有抑制该通路的活性，为一类新型的NF-κB信号通路抑制剂；最后，利用AOM/DSS诱导的结直肠炎癌模型评价十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)体内抗肿瘤活性，结果显示该生物碱具有体内抗结直肠炎癌活性。以上结果表明，十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)在治疗、预防与NF-κB信号通路异常激活相关的炎症疾病和癌症的药物中具有重要的应用。
作为药物的活性成分之二，其药学上可接受的盐为十氢萘吡啶酮生物碱与酸或碱形成的盐。
具体地，酸为无机酸或有机酸，其中无机酸为盐酸、硝酸、硫酸、磷酸或氢溴酸；有机酸为马来酸、富马酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、甲磺酸、对苯甲磺酸、己二酸、棕榈酸或单宁酸。碱为锂、钠、钾、钙、镁的碱或者赖氨酸。
作为本发明涉及的第二方面，上述十氢萘吡啶酮生物碱和/或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体形成的药物组合物应用于制备NF-κB信号通路抑制剂药物。
其中，含有活性成分的重量比为0.1％～99.5％，最优选的重量比为0.5％～95％。药学上可接受的载体选自淀粉、蔗糖、纤维素衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钠、季铵化合物、十六烷醇、高岭土、皂黏土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、聚乙二醇、香味剂、甜味剂中的一种或多种。上药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规方法制备得到。例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。
具体地，上述药物组合物的药物剂型包括片剂、胶囊、口服液、针剂、注射用冻干剂或粉针剂等。应用中可通过口服、鼻吸入、直肠或肠胃外给药的方式施用于需要这种药物的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊等，制成液体制剂如水或油悬浮剂或其他液体制剂如糖浆、酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、水或油性悬浮剂等。施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所适用疾病的类型及严重程度等作适应性调整，其日剂量可以是0.01～15mg/kg体重，优选0.1～10mg/kg体重，可以一次或多次施用。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下显著优点：
(1)应用该十氢萘吡啶酮生物碱可有效抑制NF-κB信号通路，具有显著的体内外抗肿瘤活性；其中分子水平及细胞水平抑制IC50值均小于5μM，动物水平可显著抑制肿瘤体积及重量，此外还可以抑制NF-κB信号通路相关蛋白的表达，通过多种机制发挥强效抑制作用；
(2)应用中可发挥预防和治疗肿瘤的多重功效，有效预防炎症向癌症转化，拓宽了其适应症；
(3)应用的活性成分由天然微生物发酵产物分离而得，无有害物质残留、安全有效，并且可制备的药物组合物剂型灵活多样，拓宽了其应用场景。
附图说明
图1为本发明的十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的制备流程图；
图2为十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的体外抗肿瘤活性；
图3为十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的体内抗肿瘤活性；
图4为十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的NF-κB信号通路抑制活性；
图5为十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响；
图6为十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)对AOM/DSS诱导的结直肠炎癌抑制活性。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的技术方案作进一步说明。
实施例1：十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的制备
Bipolaris victoriae S27在PDA培养基中28℃生长7天，待菌丝长满平板后切成小块，无菌条件下接种到30瓶含有大米培养基的1L锥形瓶中(180g大米，220mL自来水，121℃高压灭菌30min)，28℃静置发酵30天。
菌株Bipolaris victoriae S27的大米发酵物用乙酸乙酯浸提4次(10L×3次)，提取液经减压浓缩得总浸膏(45g)。总浸膏经硅胶柱层析，用石油醚/丙酮(20:1、2:1和1:1)梯度洗脱，得到5个馏分(Fr.1–Fr.5)。Fr.3(27g)经RP-18硅胶柱层析，用甲醇/水(20％–100％)梯度洗脱得4个馏分(Fr.3-1–Fr.3-4)。Fr.3-3(14g)经Sephadex LH-20柱层析，用氯仿/甲醇(1:1)等度洗脱，得4个馏分(Fr.3-3-1–Fr.3-3-4)。Fr.3-3-2(5g)用YMC-Pack ODS-A C18 column(10×250mm,5μm)半制备高效液相色谱分离得到十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)(1223mg)。
实施例2：利用SRB比色法评价十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)对结肠癌细胞HCT116和HT29的细胞毒活性
实验原理：磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B，SRB)是一种粉红色阴离子染料，在水中易溶解，细胞内组成蛋白质的碱性氨基酸在酸性条件下可以特异性的与该离子结合，并在540nm波长下产生吸收峰，其吸光度值与活细胞数量成线性正相关，可以用于定量检测活细胞数量。
实验方法：以含10％胎牛血清的RPMI 1640培养基将HCT116或HT29细胞制成细胞悬液，按每孔3000或5000个细胞接种于96孔板中。24h后，每孔加入不同浓度的十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)，使其终浓度分别为40μM、20μM、10μM、5μM、2μM和1μM，每个浓度设置3个复孔。十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)作用24h或48h后，每孔加入50％醋酸溶液25μL，室温固定1h，再清洗晾干。每孔加入0.4％SRB染色液100μL，在室温染色30min。之后，弃去染液并用1％醋酸溶液清洗3遍，烘干，每孔加入100μL的10mM Tris溶解，于540nm处测定其吸光值，计算抑制率及IC50值。
实验结果见图2，随着作用时间和浓度的增加，HCT116和HT29细胞的存活率显著降低，(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)对HCT116细胞的IC50分别为2.80±0.041μM(24h)和1.15±0.18μM(48h)，对HT29细胞的IC50分别为0.61±0.18μM(24h)和0.43±0.07μM(48h)。
实施例3：利用结肠癌细胞HCT116或HT29裸鼠移植瘤模型评价十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)在体内的抗肿瘤活性
将HCT116或HT29细胞用无血清RPMI1640培养基配置成浓度1×105个/mL细胞悬浮液，将其接种于BABL/c裸鼠左侧腋窝皮下，生长7天后，形成荷瘤小鼠模型。取接种生长良好的荷瘤小鼠，随机分组，通过腹腔注射(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)(15、10和5mg/kg)和5-氟尿嘧啶(10mg/kg，阳性对照)，每两天给药一次，给药14天后处死小鼠，剥瘤称重，统计处理。
实验结果见图3，其中3a和3b为荷瘤体积变化折线图，3c和3d为荷瘤重量，图3e和3f为荷瘤剥离后照片。结果表明，经(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)治疗后，与对照组相比，裸鼠的荷瘤体积减小且荷瘤重量明显降低，说明(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)为一类新型强天然抗肿瘤药物。
实施例4：利用荧光素酶双报告基因法检测十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)对NF-κB信号通路的抑制活性
采用萤光素酶双报告基因法检测化合物对NF-κB信号通路活性的影响。取状态良好的HEK293T细胞铺于24孔板中，贴壁后，使用Lipofectamine 2000(Invitrogen)转染5×κB-luciferase和pTK-Renilla，继续培养18h，后加入不同浓度的十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)或MG231(阳性药)，作用6h，再以10ng/mL TNF-α刺激6h，移除上清，细胞在室温下振荡裂解(Passsive lysis buffer，Promega)15min，离心收集上清，用Dual Luciferase Reporter Assay System(Promega)测定双荧光素酶活力。
结果如图4，结果表明十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)能较好抑制TNF-α诱导的NF-κB信号通路的激活，IC50为3.55μM，与阳性药MG231活性相当(IC50＝3.71μM)，是一类新型NF-κB信号通路天然抑制剂。
实施例5：利用Western Blot实验检测十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)对TNF-α诱导后细胞中NF-κB信号通路相关蛋白IκBα、P-IκBα、P-p65和p65表达的影响
选取生长状态良好的HCT116或HT29细胞。经药物作用后的细胞用高速冷冻离心机4600rpm离心5min，收集细胞；用RIPA buffer冰上裂解20min后，4℃，12000rpm离心15min，取上清。用Bradford蛋白浓度测定试剂盒测定样品蛋白浓度并定量，按4:1比例加入5*Loading buffer，100℃加热10min。使用Bio-Rad电泳系统，样品经SDS-PAGE电泳分离后，分离胶湿法转印迹于PVDF膜上，用含5％的脱脂奶粉的TBST封闭2h后，与相应抗体室温孵育2h或4℃孵育过夜；用TBST洗膜后(3次×10min)，与相应二抗在室下温孵育2h，TBST洗膜(3次×10min)。最后将ECL发光液A液和B液1:1混匀，均匀覆盖转印膜蛋白面上，避光反应2min，在凝胶成像系统中曝光成像，用Image J分析条带灰度值。
结果如图5，在HCT116细胞中，NHAP能够抑制IκBα降解以及IκBα和p65的磷酸化；在HT29细胞中，NHAP能够显著抑制IκBα降解和磷酸化。
实施例6：利用AOM/DSS诱导的结直肠炎癌细胞模型评价十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)在体内的抗肿瘤活性
雌性BALB/c小鼠腹腔单次注射AOM(10mg/kg)，给予正常饮水一周后，改为含2％DSS饮用水一周，再更换为正常饮水两周，此为1个循环，共循环3次。第三个循环周期开始时给予NHAP(10mg/kg和5mg/kg)干预治疗，腹腔注射，每两天给药一次，给药21天后，处死小鼠，剥离结直肠，暴露肿瘤，统计处理。
实验结果见图6。其中6a为小鼠一般状态情况，6b为结直肠组织载瘤照片，6c为结直肠厚度，6d为结直肠长度，6e为肿瘤数量，6f为结直肠载瘤部位长度。结果表明经(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)治疗后，与模型组相比，小鼠肠结肠黏膜表明较为光滑，肿瘤结节仅肉眼可见，并未成串生长，且肠厚壁厚薄、载肿瘤数以及载瘤肠子长度均明显减少，表明(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)能抑制AOM/DSS诱导的结肠炎癌转化。
综上所述，本发明的(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)为从柄花茜草(Rubiapodantha D.)物内生真菌Bipolaris victoriae S27中分离得到的十氢萘吡啶酮生物碱，具有较好的体内外抗肿瘤和NF-κB信号通路抑制活性。本发明能作为制备抗肿瘤药物制剂和前体药物的应用，具有制备成本低、毒性小、抗肿瘤效果好等优点。
实施例7：硫酸盐(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的制备
在十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)中加入4％的硫酸乙醇溶液，pH＝4，过滤，干燥，制成硫酸盐(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)。
实施例8：盐酸盐(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的制备
在十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)中加入4％的盐酸溶液，pH＝4，过滤，干燥，制成盐酸盐(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)。
实施例9：酒石酸盐(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的制备
在十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)中加入4％的酒石酸溶液，pH＝4，过滤，干燥，制成酒石酸盐(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)。
实施例10：柠檬酸盐(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)的制备
在十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)中加入4％的柠檬酸溶液，pH＝4，过滤，干燥，制成柠檬酸盐(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)。
实施例11：(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)片剂的制备
片剂：十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)或实施例7-10所得的盐10mg，乳糖180mg，淀粉55mg，硬脂酸镁5mg。
制备方法：将十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)或实施例7-10所得的盐、乳糖和淀粉混和，用水均匀湿润、把湿润后的混合物过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重250mg，化合物含量为10mg。
实施例12：(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)注射剂的制备
注射剂：十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)或实施例7-10所得的盐2mg，氯化钠10mg。
制备方法：将十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)或实施例7-10所得的盐和氯化钠溶解于适量的注射用水中，过滤所得溶液，在无菌条件下装入安瓿瓶中。
实施例13：(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)冻干制剂的制备
注射用冻干剂：十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)或实施例7-10所得的盐10mg，碳酸氢钠2mg，甘露醇252mg。
制备方法：将碳酸氢钠、甘露醇，加注射用水溶解，加活性碳吸附30min除热原，过滤除去活性碳，在滤液中加入十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)或实施例7-10所得的盐，超声处理使溶解，用1N盐酸调节pH为5.0—7.0，微孔滤膜滤过，加注射用水，分装，冷冻干燥，上塞，轧盖，即得。
实施例14：(+)-N-hydroxyapiosporamide(1)胶囊剂的制备
胶囊剂：十氢萘吡啶酮生物碱(+)-N-hydroxyapiosporamide或实施例7-10所得的盐10mg，乳糖187mg，硬脂酸镁3mg。
制备方法：将化合物或其盐与助溶剂混和，过筛，均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊，每个胶囊重200mg，活性成分含量为10mg。

Claims (10)

1.一种具有式(1)结构的十氢萘吡啶酮生物碱或其药学上可接受的盐在制备NF-κB信号通路抑制剂药物中的应用，
Figure FDA0003649276610000011
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述NF-κB信号通路抑制剂药物为治疗和/或预防与NF-κB信号通路异常激活相关的炎症疾病的药物。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述NF-κB信号通路抑制剂药物为治疗和/或预防肿瘤的药物。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为基底细胞癌、髓母细胞瘤、横纹肌肉瘤、痣样基底细胞癌综合征、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、转移性前列腺癌、胰腺癌、软骨肉瘤、骨肉瘤、黑色素瘤、神经胶质瘤、乳腺癌、卵巢癌、食道癌、胃癌、结肠癌、胆管癌、肝癌、膀胱癌、血管瘤、慢性髓细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。
5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述十氢萘吡啶酮生物碱的制备方法包含以下步骤：
(1)将柄花茜草植物内生真菌Bipolaris victoriae S27经大米固体培养基发酵，以乙酸乙酯提取得浸膏；
(2)分离纯化步骤(1)制得的浸膏，即得所述十氢萘吡啶酮生物碱。
6.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述药学上可接受的盐为十氢萘吡啶酮生物碱与酸或碱形成的盐。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述酸为无机酸或有机酸，其中无机酸为盐酸、硝酸、硫酸、磷酸或氢溴酸；有机酸为马来酸、富马酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、甲磺酸、对苯甲磺酸、己二酸、棕榈酸或单宁酸。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述碱为锂、钠、钾、钙、镁的碱或者赖氨酸。
9.一种含有式(1)结构的十氢萘吡啶酮生物碱和/或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的药物组合物在制备NF-κB信号通路抑制剂药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药学上可接受的载体选自淀粉、蔗糖、纤维素衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钠、季铵化合物、十六烷醇、高岭土、皂黏土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、聚乙二醇、香味剂、甜味剂中的一种或多种。
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