CN115024445A - 一种发酵全价虾料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种发酵全价虾料及其制备方法，属于虾饲料技术领域。该发酵全价虾料由发酵底料经发酵剂固体发酵而得，发酵底料中含有面粉、豆粕、花生饼、鱼粉、磷脂油、磷酸二氢钙、胆碱、对虾预混料、赖氨酸、蛋氨酸、叶黄素和葡萄糖；发酵剂包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪肠球菌、酿酒酵母、复合酶制剂以及的益生菌生长因子。该发酵底料能满足发酵剂中益生菌生长代谢所需的营养需求，发酵后的虾料能满足虾生长所需的营养需求，能够提高虾进食量、促进虾消化吸收、维持虾肠道健康并增强虾免疫能力，并减少水体环境污染。

Description

一种发酵全价虾料及其制备方法
技术领域
本发明涉及虾饲料技术领域，具体而言，涉及一种发酵全价虾料及其制备方法。
背景技术
虾类养殖是以经济价值较高的虾类为对象，进行人工饲养生产的行业。养殖方式采用池塘养殖、港湾养殖和网箱养殖等，也有采用鱼、虾、贝等混养的方法养殖。养殖的品种，在海水虾类方面主要是对虾类的南美白对虾和斑节对虾，在中国南方也有的养殖龙虾。在淡水虾类方面，则有罗氏沼虾等。
饵料的质量直接关系到对虾生长发育、养殖成功率和生产效益。现有技术中常用的虾料在诱食、促进虾消化吸收、维持虾肠道健康以及增强虾免疫能力等方面还有待改善。
近年来发布了大量法规要求水产养殖业在生产过程中，应遵循绿色健康养殖的原则，确保食品安全。药品和抗生素会带来环境微生物的耐药性，导致增加耐药基因向人体转移的风险，引发一系列的食品安全。药品和抗生素的替代和绿色健康养殖是水产养殖业的趋势。益生菌具有促进养殖动物摄食、促进消化、调节养殖动物肠道微生态平衡、促进养殖动物健康等优点，逐渐被广泛应用于水产养殖业。
现有技术中，有的在投喂饲料的时候直接人工拌料，由于水产养殖的特殊性，益生菌大部分流失在水里，进入养殖动物体内的就非常少；有的对原料进行发酵，以降低原料中的抗营养因子。但发酵原料经制粒后，益生菌基本失活，有益的代谢产物也会因高温失去作用。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种发酵全价虾料，以解决上述技术问题。
本发明的目的之二在于提供一种上述发酵全价虾料的制备方法。
本申请可这样实现：
第一方面，本申请提供一种发酵全价虾料，其由发酵底料经发酵剂固体发酵而得，每1000g发酵底料中含有190-210g面粉、110-130g豆粕、40-60g花生饼、440-480g鱼粉、30-40g磷脂油、10-20g磷酸二氢钙、1-3g胆碱、10-12g对虾预混料、2-4g赖氨酸、1-3g蛋氨酸、1-3g叶黄素以及90-110g葡萄糖；
发酵剂包括9-11wt％的枯草芽孢杆菌、9-11wt％的地衣芽孢杆菌、19-21wt％的植物乳杆菌、19-21wt％的粪肠球菌、19-21wt％的酿酒酵母、9-11wt％的复合酶制剂以及5-10wt％的益生菌生长因子。
在可选的实施方式中，鱼粉包括190-210g日本进口鱼粉和250-270g国产鱼粉。
在可选的实施方式中，每1000g发酵底料中含有200-210g面粉、110-120g豆粕、40-50g花生饼、190-200g日本进口鱼粉、250-260g国产鱼粉、30-35g磷脂油、15-20g磷酸二氢钙、1-2g胆碱、11-12g对虾预混料、2-3g赖氨酸、1-2g蛋氨酸、1-2g叶黄素以及100-110g葡萄糖。
在可选的实施方式中，发酵剂包括10-11wt％的枯草芽孢杆菌、10-11wt％的地衣芽孢杆菌、19-20wt％的植物乳杆菌、19-20wt％的粪肠球菌、19-20wt％的酿酒酵母、9-10wt％的复合酶制剂以及9-10wt％的益生菌生长因子。
在可选的实施方式中，发酵剂的综合活菌数不低于1×109cfu/g。
在优选的实施方式中，枯草芽孢杆菌中的活菌数含量为0.5×109-1×109cfu/g、地衣芽孢杆菌的活菌数含量为0.5×109-1×109cfu/g、植物乳杆菌的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g、粪肠球菌的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g、酿酒酵母的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g。
在可选的实施方式中，复合酶制剂包括40-44wt％的蛋白酶、20-24wt％的淀粉酶、20-24wt％的纤维素酶、4-5wt％的木聚糖酶、4-5wt％的β-甘露聚糖酶、4-5wt％的β-葡聚糖酶和4-5wt％的α-半乳糖苷酶。
在可选的实施方式中，益生菌生长因子中包括质量比为9.5-10.5：9.5-10.5：9.5-10.5：1.5-2.5：0.35-0.45：0.55-0.6：0.25-0.3：1.5-2.5的酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰以及碳酸钙。
在优选的实施方式中，益生菌生长因子中包括质量比为10：10：10：2：0.4：0.58：0.29：2的酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰以及碳酸钙。
第二方面，本申请提供如前述实施方式任一项的发酵全价虾料的制备方法，以发酵剂对发酵底料进行固体发酵。
在可选的实施方式中，发酵剂的添加量为发酵底料的0.5-0.7wt％。
在可选的实施方式中，发酵体系中还含有添加量为发酵底料的30-33wt％的水。
在可选的实施方式中，发酵是于30-35℃的条件下进行5-7天。
本申请的有益效果包括：
本申请的发酵底料较现有技术中的虾料而言，发酵底料具有较为合适的碳氮比，不仅可满足虾日常所需的能量、蛋白、碳水化合物和脂类，而且还能够满足发酵菌种发酵产生代谢产物所需的各种物质。通过在发酵剂中使用益生菌生长因子，有利于在发酵过程中发酵菌种的生长和代谢。复合发酵菌种与复合酶配合发酵，进一步增强发酵全价虾料在诱食、促进消化吸收、维持肠道健康、增强免疫等各方面的功能效果。
本申请通过所用菌株间的相互协同作用，能够使产品的各种参数在合适的范围，最重要的是能够有效的抑制霉菌引发的霉变，保证产品的有效期和稳定的品质。
本申请所用的复合酶能够预分解大分子蛋白，提高发酵饲料中的酸溶蛋白含量，单无法单独添加到发酵饲料中；复合益生菌和复合酶间有复杂的相互协同作用，能够进一步的提高酸溶蛋白含量，使得产品更佳。
通过在30-35℃以及水的添加量为30-33wt％的条件下进行固体发酵，可确保虾料成品呈稳定的颗粒状，避免其在饲喂过程中在水中散掉中，造成营养物质流失于虾生存环境的水中，导致虾能够从虾料中获取的营养量大大降低，此外，还可降低虾料散于水中后对水体环境带来不利影响。
也即，本申请所提供的发酵全价虾料具有较长的保质期，且在水中不易分散，适口性较佳，能够有效提高虾的采食量、促进虾的消化吸收、维持虾肠道健康以及增强虾的免疫能力，并减少水体环境污染。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本申请提供的发酵全价虾料及其制备方法进行具体说明。
本申请提出一种发酵全价虾料，其由发酵底料经发酵剂固体发酵而得，每1000g发酵底料中含有190-210g面粉、110-130g豆粕、40-60g花生饼、440-480g鱼粉、30-40g磷脂油、10-20g磷酸二氢钙、1-3g胆碱、10-12g对虾预混料、2-4g赖氨酸、1-3g蛋氨酸、1-3g叶黄素以及90-110g葡萄糖；
发酵剂包括9-11wt％的枯草芽孢杆菌、9-11wt％的地衣芽孢杆菌、19-21wt％的植物乳杆菌、19-21wt％的粪肠球菌、19-21wt％的酿酒酵母、9-11wt％的复合酶制剂以及5-10wt％的益生菌生长因子。
其中，面粉的含量可以为190g、195g、200g、205g或210g等，也可以为190-210g范围内的其它任意值。
豆粕的含量可以为110g、115g、120g、125g或130g等，也可以为110-130g范围内的其它任意值。
花生饼的含量可以为40g、45g、50g、55g或60g等，也可以为40-60g范围内的其它任意值。
鱼粉的含量可以为440g、445g、450g、455g、460g、465g、470g、475g或480g等，也可以为440-480g范围内的其它任意值。
磷脂油的含量可以为30g、32g、35g、38g或40g等，也可以为30-40g范围内的其它任意值。
磷酸二氢钙的含量可以为10g、12g、15g、18g或20g等，也可以为10-20g范围内的其它任意值。
胆碱的含量可以为1g、1.5g、2g、2.5g或3g等，也可以为1-3g范围内的其它任意值。
对虾预混料的含量可以为10g、10.5g、11g、11.5g或12g等，也可以为10-12g范围内的其它任意值。
赖氨酸的含量可以为2g、2.5g、3g、3.5g或4g等，也可以为2-4g范围内的其它任意值。
蛋氨酸和叶黄素的含量均独立地可以为1g、1.5g、2g、2.5g或3g等，也可以独立地为1-3g范围内的其它任意值。
葡萄糖的含量可以为90g、90.5g、100g、105.5g或110g等，也可以为90-110g范围内的其它任意值。
在一些优选的实施方式中，鱼粉包括190-210g日本进口鱼粉和250-270g国产鱼粉。前者鱼粉蛋白质含量较高，后者成本较低，通过将日本进口鱼粉和国产鱼粉配合共同作为鱼粉原料，可在成本较低的条件下确保鱼粉具有较为合适的蛋白质含量。
在较佳的实施方式中，每1000g发酵底料中含有200-210g面粉、110-120g豆粕、40-50g花生饼、190-200g日本进口鱼粉、250-260g国产鱼粉、30-35g磷脂油、15-20g磷酸二氢钙、1-2g胆碱、11-12g对虾预混料、2-3g赖氨酸、1-2g蛋氨酸、1-2g叶黄素以及100-110g葡萄糖。
上述面粉、豆粕、花生饼(花生油榨取副产品)和鱼粉主要用于提供蛋白质和碳水化合物，磷脂油用于提供脂类，磷酸二氢钙、胆碱、赖氨酸、蛋氨酸及叶黄素主要用于提供多维多矿及氨基酸类营养，葡萄糖主要作为碳源。
需说明的是，本申请中面粉作为慢性碳源和粘接剂，葡萄糖作为速效碳源，二者配合下，有利于发酵菌种在发酵前期具有较强的适应性和发酵能力。
承上，本申请的发酵底料较现有技术中的虾料而言，使发酵底料具有较为合适的碳氮比，不仅可满足虾日常所需的能量、蛋白、碳水化合物和脂类，而且还能够满足发酵菌种发酵产生代谢产物所需的各种物质，如发酵底料中在允许的范围内提高淀粉的比例和加入葡萄糖能够适当提高碳氮比，利于益生菌生长和代谢产物的积累。
枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和复合酶制剂的含量均可以独立地占发酵剂总量的9wt％、9.5wt％、10wt％、10.5wt％或11wt％g等，也可以独立地占发酵剂总量的9-11wt％范围内的其它任意值。
植物乳杆菌、粪肠球菌和酿酒酵母的含量均可以独立地占发酵剂总量的19wt％、19.5wt％、20wt％、20.5wt％或21wt％g等，也可以独立地占发酵剂总量的19-21wt％范围内的其它任意值。
益生菌生长因子的含量可以占发酵剂总量的5wt％、5.5wt％、6wt％、6.5wt％、7wt％、7.5wt％、8wt％、8.5wt％、9wt％、9.5wt％或10wt％g等，也可以独立地占发酵剂总量的5-10wt％范围内的其它任意值。
在一些优选的实施方式中，发酵剂包括10-11wt％的枯草芽孢杆菌、10-11wt％的地衣芽孢杆菌、19-20wt％的植物乳杆菌、19-20wt％的粪肠球菌、19-20wt％的酿酒酵母、9-10wt％的复合酶制剂以及9-10wt％的益生菌生长因子。
在一些可选的实施方式中，发酵剂的综合活菌数不低于1×109cfu/g。
在优选的实施方式中，枯草芽孢杆菌中的活菌数含量为0.5×109-1×109cfu/g、地衣芽孢杆菌的活菌数含量为0.5×109-1×109cfu/g、植物乳杆菌的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g、粪肠球菌的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g、酿酒酵母的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g。
本申请通过将多种发酵菌种经过合理的配比，能够很好的增加诱食性代谢产物提高适口性。并且，合理的发酵菌种种类和比例，能够很好地调节养殖动物肠道微生态环境，维持肠道健康。
上述所使用的芽孢杆菌能够分泌消化酶，将饲料中的大分子蛋白降解成小分子蛋白，通过对饲料的预消化，能够提高对虾的消化和吸收，减轻肝胰脏和肠道的负担。在发酵过程中，芽孢杆菌能够消耗发酵袋中氧气，较好地为植物乳杆菌和酿酒酵母提供厌氧环境，利于乳酸菌和酵母菌代谢产物的积累(但若芽孢杆菌比例过高，会快速消耗营养物质，抑制乳酸菌和酵母菌的生长)。
植物乳杆菌能够产生乳酸和其他芳香物质，增加产品的风味，提高诱食性，也能够调节肠道微生态环境，抑制肠道有害菌如弧菌的生长。同时，植物乳杆菌还可降低发酵过程中的pH，从而抑制发酵过程中杂菌的生长，避免发酵过程中的霉变(若植物乳杆菌过多，则会使pH过低，影响其他益生菌的生产和代谢产物的累计，并且，过低的pH反而会影响适口性和引起肠道损伤)。
粪肠球菌能够定植肠道，可在肠道上皮细胞上形成生物膜，保护肠上皮细胞免受有害物质侵袭，具有保护屏障功效。此外，粪肠球菌可产生抑菌物质如细菌素，对肠道有害菌类有很好的抑制效果。
酿酒酵母能够代谢醇类和酯类物质，提高产品的诱食性。其细胞中的β-1,3-葡聚糖和甘露寡糖能够提高虾的非特异性免疫能力。
可参考地，复合酶制剂包括40-44wt％的蛋白酶、20-24wt％的淀粉酶、20-24wt％的纤维素酶、4-5wt％的木聚糖酶、4-5wt％的β-甘露聚糖酶、4-5wt％的β-葡聚糖酶和4-5wt％的α-半乳糖苷酶。
其中，蛋白酶的含量可以占复合酶制剂总量的40wt％、40.5wt％、41wt％、41.5wt％、42wt％、42.5wt％、43wt％、43.5wt％或44wt％等，也可以为40-44wt％范围内的其它任意值。
淀粉酶和纤维素酶的含量均可以分别独立地占复合酶制剂总量的20wt％、20.5wt％、21wt％、21.5wt％、22wt％、22.5wt％、23wt％、23.5wt％或24wt％等，也可以独立地占复合酶制剂总量的20-24wt％范围内的其它任意值。
木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶和α-半乳糖苷酶的含量均可以分别独立地占复合酶制剂总量的4wt％、4.2wt％、4.5wt％、4.8wt％或5wt％等，也可以独立地占复合酶制剂总量的4-5wt％范围内的其它任意值。
通过在发酵剂中添加上述复合酶，能够预消化饲料中的大分子物质，使发酵菌种在发酵过程中缩短延滞期的时间，为发酵菌种生产代谢提供有利的环境。经本申请提供的菌酶配合发酵方案可提高发酵的成功率以及产品的效果。
可参考地，益生菌生长因子中可包括质量比为9.5-10.5：9.5-10.5：9.5-10.5：1.5-2.5：0.35-0.45：0.55-0.6：0.25-0.3：1.5-2.5的酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰以及碳酸钙。
在一些具体的实施方式中，益生菌生长因子中包括质量比为10：10：10：2：0.4：0.58：0.29：2的酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰以及碳酸钙。
通过在发酵剂中使用益生菌生长因子，有利于在发酵过程中发酵菌种的生长和代谢。
承上，本申请提供的发酵全价虾料既能满足虾生长所需的营养需求，也能满足益生菌生长代谢所需的营养需求；复合发酵菌种与复合酶配合发酵，进一步增强发酵全价虾料在诱食、促进消化吸收、维持肠道健康、增强免疫等各方面的功能效果。
相应地，本申请还提供了上述发酵全价虾料的制备方法，包括：以上述发酵剂对发酵底料进行固体发酵。
可参考地，发酵是于30-35℃的条件下进行5-7天。
通过采用固体发酵，可确保虾料成品呈稳定的颗粒状，避免其在饲喂过程中在水中溶解，造成营养物质流失于虾生存环境的水中，导致虾能够从虾料中获取的营养量大大降低，此外，还可降低虾料散于水中后对水体环境带来不利影响。
本申请中，发酵剂的添加量可以为发酵底料的0.5-0.7wt％，如0.5wt％、0.55wt％、0.6wt％、0.65wt％或0.7wt％等，也可以为0.5-0.7wt％范围内的其它任意值。
需说明的是，若发酵剂的添加量过多，会造成浪费，增加成本；若发酵剂的添加量过少，菌种量少，使得无法发酵或发酵效果差。
此外，本申请的发酵体系中还含有添加量为发酵底料的30-33wt％(如30wt％、30.5wt％、31wt％、31.5wt％、32wt％、32.5wt％或33wt％等)的水。
若水的添加量低于30wt％，不利于发酵菌种的生长和代谢，甚至会导致菌种无法生长；若水的添加量高于33wt％会使颗粒状的虾料溶解，并且在制备过程中容易结团，储存后容易结块。
通过按上述发酵条件进行发酵，一方面可使各发酵菌种在发酵过程中能够维持平衡，使得菌量和产物均最大化，另一方面可使得发酵所得的全价虾料能够对虾有效起到诱食、促进消化吸收、维持肠道健康以及增强免疫等效果。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种发酵全价虾料，其由发酵底料经发酵剂发酵而得。
每1000g发酵底料中含有208g面粉、120g豆粕、45g花生饼、195g日本进口鱼粉、255g国产鱼粉、32.5g磷脂油、17.5g磷酸二氢钙、1.5g胆碱、11.5g对虾预混料、2.5g赖氨酸、1.5g蛋氨酸、2g叶黄素以及108g葡萄糖。
发酵剂包括10wt％的枯草芽孢杆菌、10wt％的地衣芽孢杆菌、20wt％的植物乳杆菌、20wt％的粪肠球菌、20wt％的酿酒酵母、10wt％的复合酶制剂以及10wt％的益生菌生长因子。
其中，枯草芽孢杆菌中的活菌数含量为1×109cfu/g、地衣芽孢杆菌的活菌数含量为1×109cfu/g、植物乳杆菌的活菌数含量为1.5×109cfu/g、粪肠球菌的活菌数含量为1.5×109cfu/g、酿酒酵母的活菌数含量为1.5×109cfu/g。
复合酶制剂包括42wt％的蛋白酶、20wt％的淀粉酶、20wt％的纤维素酶、4.5wt％的木聚糖酶、4.5wt％的β-甘露聚糖酶、4.5wt％的β-葡聚糖酶和4.5wt％的α-半乳糖苷酶。
益生菌生长因子中包括质量比为10：10：10：2：0.4：0.58：0.29：2的酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰以及碳酸钙。
发酵是于30-35℃的条件下固体发酵6天，发酵剂的添加量为发酵底料的0.6wt％；发酵体系中还含有添加量为发酵底料的30wt％的水。
实施例2
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
每1000g发酵底料中含有200g面粉、120g豆粕、50g花生饼、190g日本进口鱼粉、260g国产鱼粉、32g磷脂油、20g磷酸二氢钙、1g胆碱、12g对虾预混料、2g赖氨酸、2g蛋氨酸、1g叶黄素以及110g葡萄糖。
实施例3
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
每1000g发酵底料中含有210g面粉、115g豆粕、42g花生饼、200g日本进口鱼粉、260g国产鱼粉、35g磷脂油、15g磷酸二氢钙、2g胆碱、11g对虾预混料、3g赖氨酸、1g蛋氨酸、2g叶黄素以及104g葡萄糖。
实施例4
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
每1000g发酵底料中含有210g面粉、130g豆粕、40g花生饼、210g日本进口鱼粉、250g国产鱼粉、40g磷脂油、10g磷酸二氢钙、3g胆碱、10g对虾预混料、2g赖氨酸、2g蛋氨酸、3g叶黄素以及90g葡萄糖。
实施例5
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
每1000g发酵底料中含有190g面粉、110g豆粕、60g花生饼、190g日本进口鱼粉、270g国产鱼粉、30g磷脂油、20g磷酸二氢钙、1g胆碱、11g对虾预混料、4g赖氨酸、3g蛋氨酸、1g叶黄素以及110g葡萄糖。
实施例6
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
发酵剂包括11wt％的枯草芽孢杆菌、11wt％的地衣芽孢杆菌、20wt％的植物乳杆菌、19wt％的粪肠球菌、19wt％的酿酒酵母、10wt％的复合酶制剂以及10wt％的益生菌生长因子。
实施例7
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
发酵剂包括11wt％的枯草芽孢杆菌、11wt％的地衣芽孢杆菌、19.5wt％的植物乳杆菌、20wt％的粪肠球菌、19.5wt％的酿酒酵母、9.5wt％的复合酶制剂以及9.5wt％的益生菌生长因子。
实施例8
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
发酵剂包括11wt％的枯草芽孢杆菌、11wt％的地衣芽孢杆菌、20wt％的植物乳杆菌、21wt％的粪肠球菌、21wt％的酿酒酵母、11wt％的复合酶制剂以及5wt％的益生菌生长因子。
实施例9
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
发酵剂包括9wt％的枯草芽孢杆菌、9wt％的地衣芽孢杆菌、21wt％的植物乳杆菌、21wt％的粪肠球菌、21wt％的酿酒酵母、9wt％的复合酶制剂以及10wt％的益生菌生长因子。
实施例10
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
枯草芽孢杆菌中的活菌数含量为0.5×109cfu/g、地衣芽孢杆菌的活菌数含量为0.5×109cfu/g、植物乳杆菌的活菌数含量为1×109cfu/g、粪肠球菌的活菌数含量为1×109cfu/g、酿酒酵母的活菌数含量为1×109cfu/g。
实施例11
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
枯草芽孢杆菌中的活菌数含量为0.75×109cfu/g、地衣芽孢杆菌的活菌数含量为0.75×109cfu/g、植物乳杆菌的活菌数含量为2×109cfu/g、粪肠球菌的活菌数含量为2×109cfu/g、酿酒酵母的活菌数含量为2×109cfu/g。
实施例12
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
复合酶制剂包括40wt％的蛋白酶、22wt％的淀粉酶、22wt％的纤维素酶、4wt％的木聚糖酶、4wt％的β-甘露聚糖酶、4wt％的β-葡聚糖酶和4wt％的α-半乳糖苷酶。
实施例13
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
复合酶制剂包括44wt％的蛋白酶、20wt％的淀粉酶、20wt％的纤维素酶、4wt％的木聚糖酶、4wt％的β-甘露聚糖酶、4wt％的β-葡聚糖酶和4wt％的α-半乳糖苷酶。
实施例14
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
益生菌生长因子中包括质量比为9.5：10.5：9.5：2.5：0.35：0.6：0.25：2.5的酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰以及碳酸钙。
实施例15
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
益生菌生长因子中包括质量比为10.5：9.5：10.5：1.5：0.45：0.55：0.3：1.5的酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰以及碳酸钙。
实施例16
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
发酵是于30-35℃的条件下固体发酵5天，发酵剂的添加量为发酵底料的0.5wt％；发酵体系中还含有添加量为发酵底料的32wt％的水。
实施例17
本实施例与实施例1的区别在于(其余条件相同)：
发酵是于30-35℃的条件下固体发酵7天，发酵剂的添加量为发酵底料的0.7wt％；发酵体系中还含有添加量为发酵底料的33wt％的水。
试验例1
发酵菌种之间相互作用效果的研究
根据表1中的发酵菌种添加比例复配成发酵剂，按发酵剂添加量为发酵底料的0.5wt％，添加水量为发酵底料的30wt％，发酵温度为30-35℃对实施例1提供的发酵底料进行发酵(其余未公开的条件也参照实施例1)，每组3个重复。
表1发酵剂中益生菌添加的比例
Figure BDA0003736595610000141
对上述6个组别制得的发酵全价虾料进行以下方面的检测：
①感官指标：发酵香味、胀气程度、是否霉变；
②pH值：称取30g发酵全价虾料，碾碎后加入70mL纯水，充分搅拌30min后，用pH计测量pH值。
③酸溶蛋白：按《GB/T 22492-2008》中附录B中的方法进行测定；
④益生菌活菌数：称取10g发酵饲料，加入90ml生理盐水溶解，摇匀，采用稀释涂布法进行活菌计数。
其结果如下：
①感观结果如表2所示。
表2感官结果
Figure BDA0003736595610000142
Figure BDA0003736595610000151
由表2可以看出：
组别1：没加任何菌株，第3d开始发霉；
组别2：只有枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的芽孢杆菌类益生菌，无发酵香味，且略带臭味，7d后开始发霉；
组别3：只有植物乳杆菌和粪肠球菌的乳酸类益生菌，有轻微的酸香味，发酵速度慢；
组别4：只有酿酒酵母，有轻微的酒香微，发酵速度慢；
组别5：复合菌株间等量配比，发酵加快，发酵酸香味浓郁；
组别6：复合菌株间加大乳酸类和酵母类的比重，发酵速度快，香味更加浓郁。
②pH值变化结果如表3所示。
表3pH值变化结果
Figure BDA0003736595610000152
由表3可以看出：
组别1：pH变化不大；
组别2：pH变化不大；
组别3：pH急剧下降；
组别5：pH下降，维持在5左右；
组别6：pH下降，维持在5左右。
③酸溶蛋白结果如表4所示。
表4酸溶蛋白结果
Figure BDA0003736595610000161
由表4可以看出：
组别1：酸溶蛋白含量基本不变化；
组别2：酸溶蛋白含量缓慢上升，第15d达21.67％；
组别3：酸溶蛋白含量缓慢上升，第15d达18.12％；
组别4：酸溶蛋白含量基本不变化；
组别5：酸溶蛋白快速提高，第15d达28.32％；
组别6：酸溶蛋白快速提高，第15d达32.08％。
④益生菌活菌数结果如表5所示。
表5益生菌活菌数结果
Figure BDA0003736595610000162
由表5可以看出：
组别1：无益生菌；
组别2：只有芽孢杆菌类益生菌，发酵15d时活菌数在1.7×108CFU/g；
组别3：只有乳酸类益生菌，发酵15d时活菌数在1.0×108CFU/g；
组别4：只有酵母类益生菌，发酵15d时活菌数在6.0×107CFU/g；
组别5：具有芽孢、乳酸、酵母，三大类益生菌，发酵15d时活菌数在4.5×108CFU/g；
组别6：具有芽孢、乳酸、酵母，三大类益生菌，发酵15d时活菌数在6.5×108CFU/g。
承上，由上述表2至表5的数据可以得知：
(1)不添加益生菌株，缺少乳酸或者酵母菌则会发生霉变，使得发酵失败；
(2)只添加单一益生菌株，发酵速度缓慢，且产品中活菌数低；而复合发酵则各类的益生菌株比较平衡，发酵过程中相互协同，提高产品中的活菌数；
(3)单一乳酸菌发酵则产品pH过低，对虾肠道会产生一定的影响。单一芽孢或者酵母则pH过高，无法抑制杂菌，易引起霉变。复合菌株发酵能够使得pH维持在4.9-5.3之间，是一个比较合适的范围，并且也能够抑制杂菌和霉菌，延长产品的保质期；
(4)单一菌株发酵，酸溶蛋白含量提升能力弱，复合菌株发酵能够显著提高酸溶蛋白含量，从而提高虾对饲料的消化吸收能力。
也即，菌株间的复配与比例产生的效果并不是简单的1+1＝2的叠加。菌株间的相互协同作用，能够使产品的各种参数在一个合适的范围，最重要的是能够有效的抑制霉菌引发的霉变，保证产品的有效期和稳定的品质。
试验例2
发酵菌种与复合酶之间相互作用效果的研究
根据表6中的发酵菌种与复合酶的比例进行复配，按发酵剂添加量为发酵底料的0.5wt％，添加水量为发酵底料的30wt％，发酵温度为30-35℃对实施例1提供的发酵底料进行发酵(其余未公开的条件也参照实施例1)，每组3个重复。
表6发酵菌种与复合酶的比例
Figure BDA0003736595610000171
Figure BDA0003736595610000181
对上述4个组别制得的发酵全价虾料进行以下方面的检测：
①感官指标：发酵香味、胀气程度、是否霉变；
③酸溶蛋白：按《GB/T 22492-2008》中附录B中的方法进行测定；其结果如下：
①感观结果如表7所示。
表7感官结果
Figure BDA0003736595610000182
由表7可以看出：
组别7：霉变；
组别8：发酵成功；
组别9：霉变；
组别10：发酵成功。
③酸溶蛋白结果如表8所示。
表8酸溶蛋白结果
Figure BDA0003736595610000183
Figure BDA0003736595610000191
由表8可以看出：
组别7：酸溶蛋白无变化；
组别8：酸溶蛋白上升；
组别9：酸溶蛋白上升，之后无变化；
组别10：酸溶蛋白上升，第15d达37.88％，显著高于其余各组。
承上，由上述表7至表8的数据可以得知：
(1)复合酶能够预分解大分子蛋白，提高发酵饲料中的酸溶蛋白含量，单无法单独添加到发酵饲料中；
(2)复合益生菌和复合酶间有复杂的相互协同作用，能够进一步的提高酸溶蛋白含量，使得产品更佳。
也即，若需提高产品的酸溶蛋白，可以少量添加复合酶，菌酶协同发酵，使产品品质更佳。
试验例3
发酵全价虾料对虾的生长影响的研究
试验方案：采用实施例1制备得到的发酵全价饲料，分别按10％、20％和30％的添加量添加于常用的普通虾饲料(全价饲料)中，记为实验组A、实验组B和实验组C，设置对照组，即普通虾饲料(全价饲料)，合计4个组，每组3个平行，共12个养殖桶，每个桶200尾虾，共2400尾。
实验动物为凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)，购买于福建省漳州市南靖某养殖场，分别暂养于直径1m，桶高1m养殖圆桶的室内循环水养殖系统中，平均体重为(4.17±0.15)g。
日常管理：暂养7d后，每个养殖桶随机放入200尾虾。实验对虾每天投喂3次(07：00、13：00、19：00)，投喂量为对虾体重的3％(随着养殖时间而增加)。养殖实验进行30d，每隔2d换一次水，换水量为1/3，水温为26-29℃，pH(8.1±0.2)，连续充气，每天检查对虾摄食及存活情况，及时取出死亡对虾。
实验指标与数据处理
测量各组对虾平均初始体重和试验结束时的平均体重，计算各组对虾体重增长率；统计各组对虾的饲料投喂量，计算各组对虾的饲料系数。
其中，成活率(％)＝成活尾数/总尾数×100％；
体重增长率(％)＝[终末平均体重(g)-初始平均体重(g)]/初始平均体重(g)×100％；
饲料系数＝摄食量(g)/[终末体重(g)-开始体重(g)]。
其结果如表9所示。
表9试验结果
对照组 实验组A 实验组B 实验组C
成活率/％ 71.16±5.40<sup>b</sup> 80.00±5.00<sup>a</sup> 81.00±4.60<sup>a</sup> 82.33±5.20<sup>a</sup>
初始平均体重/g 4.18±0.53 4.17±0.48 4.18±0.23 4.17±0.34
终末平均体重/g 11.15±0.43<sup>c</sup> 13.85±0.56<sup>b</sup> 16.67±0.21<sup>a</sup> 16.87±0.86<sup>a</sup>
体重增长率/g 166.74±15.23<sup>c</sup> 232.13±26.78<sup>b</sup> 298.81±30.77<sup>a</sup> 304.56±28.99<sup>a</sup>
饲料系数 1.36±0.05<sup>c</sup> 1.22±0.05<sup>b</sup> 1.15±0.05<sup>a</sup> 1.12±0.05<sup>a</sup>
上述成活率以3个平行组的均值计。
其中，对照组的3个平行组对应的成活尾数依次为130尾、150尾和147尾，对应的成活率为65％、75％和73.5％，均值为71.16％。试验组A的3个平行组对应的成活尾数依次为150尾、160尾和170尾，对应的成活率为75％、80％和85％，均值为80％。试验组B的3个平行组对应的成活尾数依次为160尾、154尾和172尾，对应的成活率为80％、77％和86％，均值为81％。试验组C的3个平行组对应的成活尾数依次为153尾、168尾和173尾，对应的成活率为76.5％、84％和86.5％，均值为82.33％。
由表9可以看出：本申请提供发酵全价虾料能够显著提升对虾体重增长率和降低饲料系数，其中实验组C的数据最好，对虾的生长性能提升最优。
试验例4
发酵温度对全价虾料固体发酵效果的影响
采用试验例1中最佳配比的发酵剂，按发酵剂添加量为发酵底料的0.5wt％，添加水量为发酵底料的30wt％，探究不同温度对全价虾料固体发酵效果的影响。
固体发酵温度梯度分别为：20℃、25℃、30℃、35℃、38℃。
对上述5个温度梯度制得的发酵全价虾料进行以下方面的检测：
①感官指标；②pH值；③酸溶蛋白；④益生菌活菌数；检测方法同试验例1。
其结果如下：
①感观结果如表10所示。
表10感官结果
Figure BDA0003736595610000211
从表中可以看出：
(1)发酵温度20℃时，发酵速度慢，第7天才开始产生发酵香味和胀气。
(2)发酵温度25℃时，发酵速度较慢，第5天才开始产生发酵香味和胀气。
(3)发酵温度30℃时，发酵速度适宜，第3天就有发酵香味和胀气。
(4)发酵温度35℃时，发酵速度适宜，第3天就有发酵香味和胀气。
(5)发酵温度38℃时，发酵速度适宜，第3天就胀气，但是发酵香味不浓郁。
上述结果显示：较为适宜的发酵温度为30℃-35℃，发酵速度快，香味浓郁。温度过低，发酵速度慢，发酵周期长；温度过高，无浓郁的发酵香味。
②pH值结果如表11所示。
表11pH结果
Figure BDA0003736595610000221
从表中可以看出：
(1)发酵温度20℃时，pH下降得缓慢，第15天的pH为5.78。
(2)发酵温度25℃时，pH下降得较为缓慢，第15天的pH为5.31。
(3)发酵温度30℃时，pH快速下降，第15天的pH为5.11。
(4)发酵温度35℃时，pH快速下降，第15天的pH为5.04。
(5)发酵温度38℃时，pH下降缓慢，第15天的pH为6.02。
上述结果显示：较为适宜的发酵温度为30℃-35℃，pH下降速度快。温度过低，发酵速度慢，乳酸菌生长代谢缓慢，pH下降缓慢；温度过高，pH下降缓慢。
③酸溶蛋白结果如表12所示。
表12酸溶蛋白结果
Figure BDA0003736595610000231
从表中可以看出：
(1)发酵温度20℃时，酸溶蛋白上升缓慢，第15天的酸溶蛋白含量为23.68％。
(2)发酵温度25℃时，酸溶蛋白上升缓慢，第15天的酸溶蛋白含量为27.33％。
(3)发酵温度30℃时，酸溶蛋白上升快速，第15天的酸溶蛋白含量为36.22％。
(4)发酵温度35℃时，酸溶蛋白上升快速，第15天的酸溶蛋白含量为35.86％。
(5)发酵温度38℃时，酸溶蛋白在第3天时上升快速，之后缓慢增加，第15天时酸溶蛋白含量为28.32％。
上述结果显示：发酵温度为30℃-35℃时，酸溶蛋白含量比其他温度高。温度过低和过高都不利于酸溶蛋白的积累。
④益生菌活菌数结果如表13所示。
表13益生菌活菌数结果
Figure BDA0003736595610000232
Figure BDA0003736595610000241
从表中可以看出：
(1)发酵温度20℃时，益生菌株生长缓慢。
(2)发酵温度25℃时，益生菌株生长稍微加快，第7-10天达到峰值，之后缓慢下降。
(3)发酵温度30℃时，第3天开始就大量生长，第7天达到最高值，之后缓慢下降。
(4)发酵温度35℃时，第3天开始就大量生长，第5天达到最高值，之后缓慢下降。
(5)发酵温度38℃时，第3天就达到峰值，之后乳酸和酵母活菌数快速下降，芽孢杆菌类的菌株数量远远大于乳酸菌和酵母菌，导致三大类的菌株不平衡，不利于乳酸、酒精和其他代谢产物的积累。
上述结果显示：发酵温度30℃-35℃时，益生菌生长速度适宜，三大类的益生菌的生物量较为平衡，利于乳酸、酒精和其他芳香类的代谢产物积累，增加了发酵饲料中的香味；同时芽孢杆菌产生的各种酶，提高了酸溶蛋白的含量。温度过低，益生菌株生长缓慢，代谢产物积累慢。温度过高，芽孢杆菌大量生长，消耗大量营养物质，抑制了乳酸和酵母的生长，同时乳酸和酵母不适应这么高的温度，生物量大量下降，导致乳酸和酵母的代谢产物无法积累，这也是只胀气没有香味的原因。
承上，由表10-13的结果综合可知：发酵温度控制在30℃-35℃，能够有合理的发酵速度，发酵过程中益生菌间较为平衡，也适合益生菌代谢产物的积累。温度过低，则发酵速度慢，温度过高则芽孢杆菌成为优势菌株，乳酸菌和酵母菌不适应高温，导致生物量低，代谢产物也无法生产和积累。
试验例5
添加水分对全价虾料固体发酵效果的影响
采用试验例1中最佳配比的发酵剂，按发酵剂添加量为发酵底料的0.5wt％，发酵温度为30℃，探究不同添加水分对全价虾料固体发酵效果的影响。
添加水分梯度分别为：25％、30％、35％。
对上述3个添加水分梯度制得的发酵全价虾料进行以下方面的检测：
①感官指标；②pH值；③酸溶蛋白；④益生菌活菌数；检测方法同试验例1。
其结果如下：
①感观结果如表14所示。
表14感官结果
Figure BDA0003736595610000251
从表可以看出：
(1)添加水分25％，发酵速度较慢。
(2)添加水分30％，发酵速度正常
(3)添加水分35％，发酵速度加快，但是容易结团，饲料颗粒随着时间的推移表面慢慢溶解。
②pH值结果如表15所示。
表15pH结果
Figure BDA0003736595610000261
从表可以看出：
(1)添加水分25％，pH下降缓慢。
(2)添加水分30％，pH下降正常。
(3)添加水分35％，pH下降快速。
③酸溶蛋白结果如表16所示：
表16酸溶蛋白结果
Figure BDA0003736595610000262
从表可以看出：
(1)添加水分25％，酸溶蛋白含量小，第15天为26.56％。
(2)添加水分30％，第15天为33.02％。
(3)添加水分35％，酸溶蛋白含量高，第15天为36.41。
④益生菌活菌数结果如表17所示。
表17益生菌活菌数结果
Figure BDA0003736595610000263
Figure BDA0003736595610000271
从表可以看出：
(1)添加水分25％，益生菌生长缓慢，活菌数低。
(2)添加水分30％，活菌数低于添加水分35％
(3)添加水分35％，益生菌生长快速，活菌数最高。
承上，由表14-17的结果综合可知：添加水分25％，发酵慢，不利于益生菌的生长，代谢产物的产生和积累。添加水分35％，虽然发酵速度快，更利于益生菌的生长和代谢产物的生产、积累，但是过高的水分会使饲料颗粒结团和表面溶解，不利于后期的保存和使用。因此添加水分为30％，较为合适。
综上，本申请所提供的发酵全价虾料具有较长的保质期，且在水分不易分散，口感较佳，能够有效提高虾的采食量、促进虾的消化吸收、维持虾肠道健康以及增强虾的免疫能力，并减少水体环境污染。
以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种发酵全价虾料，其特征在于，所述发酵全价虾料由发酵底料经固体发酵剂发酵而得，每1000g所述发酵底料中含有190-210g面粉、110-130g豆粕、40-60g花生饼、440-480g鱼粉、30-40g磷脂油、10-20g磷酸二氢钙、1-3g胆碱、10-12g对虾预混料、2-4g赖氨酸、1-3g蛋氨酸、1-3g叶黄素以及90-110g葡萄糖；
所述发酵剂包括9-11wt％的枯草芽孢杆菌、9-11wt％的地衣芽孢杆菌、19-21wt％的植物乳杆菌、19-21wt％的粪肠球菌、19-21wt％的酿酒酵母、9-11wt％的复合酶制剂以及5-10wt％的益生菌生长因子；
优选地，所述鱼粉包括190-210g日本进口鱼粉和250-270g国产鱼粉。
2.根据权利要求1所述的发酵全价虾料，其特征在于，每1000g所述发酵底料中含有200-210g所述面粉、110-120g所述豆粕、40-50g所述花生饼、190-200g所述日本进口鱼粉、250-260g所述国产鱼粉、30-35g所述磷脂油、15-20g所述磷酸二氢钙、1-2g所述胆碱、11-12g所述对虾预混料、2-3g所述赖氨酸、1-2g所述蛋氨酸、1-2g所述叶黄素以及100-110g所述葡萄糖。
3.根据权利要求1所述的发酵全价虾料，其特征在于，所述发酵剂包括10-11wt％的所述枯草芽孢杆菌、10-11wt％的所述地衣芽孢杆菌、19-20wt％的所述植物乳杆菌、19-20wt％的所述粪肠球菌、19-20wt％的所述酿酒酵母、9-10wt％的所述复合酶制剂以及9-10wt％的所述益生菌生长因子。
4.根据权利要求1所述的发酵全价虾料，其特征在于，所述发酵剂的综合活菌数不低于1×109cfu/g；
优选地，所述枯草芽孢杆菌中的活菌数含量为0.5×109-1×109cfu/g、所述地衣芽孢杆菌的活菌数含量为0.5×109-1×109cfu/g、所述植物乳杆菌的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g、所述粪肠球菌的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g、所述酿酒酵母的活菌数含量为1×109-2×109cfu/g。
5.根据权利要求1所述的发酵全价虾料，其特征在于，所述复合酶制剂包括40-44wt％的蛋白酶、20-24wt％的淀粉酶、20-24wt％的纤维素酶、4-5wt％的木聚糖酶、4-5wt％的β-甘露聚糖酶、4-5wt％的β-葡聚糖酶和4-5wt％的α-半乳糖苷酶。
6.根据权利要求1所述的发酵全价虾料，其特征在于，所述益生菌生长因子中包括质量比为9.5-10.5：9.5-10.5：9.5-10.5：1.5-2.5：0.35-0.45：0.55-0.6：0.25-0.3：1.5-2.5的酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、柠檬酸二铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰以及碳酸钙；
优选地，所述益生菌生长因子中包括质量比为10：10：10：2：0.4：0.58：0.29：2的所述酵母提取物、所述蛋白胨、所述葡萄糖、所述柠檬酸二铵、所述磷酸氢二钾、所述硫酸镁、所述硫酸锰以及所述碳酸钙。
7.如权利要求1-6任一项所述的发酵全价虾料的制备方法，其特征在于，以所述发酵剂对所述发酵底料进行固体发酵。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述发酵剂的添加量为发酵底料的0.5-0.7wt％。
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，发酵体系中还含有添加量为发酵底料的30-33wt％的水。
10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，发酵是于30-35℃的条件下进行5-7天。
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