CN115006402A - 替格瑞洛作为抗肿瘤化疗药的增效剂或耐药逆转剂的应用 - Google Patents

替格瑞洛作为抗肿瘤化疗药的增效剂或耐药逆转剂的应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于医药技术领域，涉及替格瑞洛作为PI3K激酶抑制剂，以及作为抗肿瘤化疗药物的增效剂或耐药逆转剂的应用，还涉及包含替格瑞洛的抗肿瘤药物组合物。替格瑞洛可有效抑制PI3K激酶的四个亚型激酶活性，其IC50值在2μM‑6μM之间，并且替格瑞洛可明显抑制PI3K下游mTORC1和mTORC2信号通路关键蛋白的磷酸化。替格瑞洛可以提高某些抗肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的杀伤性，也能增加耐药肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，逆转肿瘤多药耐药；替格瑞洛可降低化疗药物的使用剂量，从而减少化疗药物的毒副作用。替格瑞洛的最小有效剂量为50mg/kg。本发明的抗肿瘤药物组合物包含抗肿瘤化疗药物和替格瑞洛，所述抗肿瘤化疗药物与替格瑞洛的质量比为：1：1.25‑1：200。

Description

替格瑞洛作为抗肿瘤化疗药的增效剂或耐药逆转剂的应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及替格瑞洛作为PI3K激酶抑制剂，以及作为抗肿瘤化疗药物的增效剂或耐药逆转剂的应用，还涉及包含替格瑞洛的抗肿瘤药物组合物。
背景技术
恶性肿瘤是威胁人类健康的重大疾病，目前临床使用的治疗药物多为化学治疗药物。化疗药物是指通过抑制肿瘤细胞的增殖、浸润、转移等，直至最终杀灭肿瘤细胞的一类药物。由于化疗药物的选择性不强，在杀灭肿瘤细胞的同时也会不可避免地损伤人体正常的细胞，从而出现药物的不良反应。
另外恶性肿瘤细胞对化疗药物产生多药耐药性是肿瘤化疗最主要的障碍之一。肿瘤多药耐药是指肿瘤细胞在接受化疗过程中，一旦对某种化疗药物产生耐药性，便同时对其他结构上无关、作用机制各异的药物均产生交叉耐药的广谱耐药现象。肿瘤多药耐药的产生是一个多机制联合作用的结果，包括ABC转运子超家族成员的异常增多，耐药基因的异常表达，细胞因子的辅助调节，药物作用靶点下调等。其中，PI3K信号通路的过度激活是肿瘤细胞耐药的主要原因之一。肿瘤患者的死亡，在不同程度上受到耐药的影响，因此，克服肿瘤细胞的化疗多药耐药性，提高抗肿瘤药物的疗效，进而提高肿瘤患者生存率，已成为肿瘤治疗中亟待解决的问题。
替格瑞洛化学名称为(1S,2S,3R,5S)-3-[7-[[(1R,2S)-2-(3,4-二氟苯基)环丙基]氨基]-5-丙硫基三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基)-1,2-环戊二醇，英文名为ticagrelor，CAS登录号为274693-27-5，分子量为522.568，分子式为C23H28F2N6O4S，结构如式I所示。
Figure BDA0003736103330000011
替格瑞洛是急性冠状动脉综合征及经皮冠状动脉介入治疗后需长期服用的一线治疗药物，该药物通过可逆性与血小板表面P2Y12受体结合从而发挥抗血小板聚集作用。替格瑞洛作为PI3K酶抑制剂以及替格瑞洛作为抗肿瘤化学治疗药物的增效剂或耐药逆转剂的应用国内外均未见有报道。
发明内容
为了克服现有技术的缺陷，本发明的第一个目的是提供抗血小板药物替格瑞洛作为PI3K酶抑制剂的应用。
替格瑞洛可有效抑制PI3K激酶的四个亚型激酶活性，其IC50值在2μM-6μM之间，并且替格瑞洛可明显抑制PI3K下游mTORC1和mTORC2信号通路关键蛋白的磷酸化。
本发明的第二个目的是提供抗血小板药物替格瑞洛作为抗肿瘤化疗药物的增效剂或耐药逆转剂的应用。
替格瑞洛可以提高某些抗肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的杀伤性，也能增加耐药肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，逆转肿瘤多药耐药；替格瑞洛可降低化疗药物的使用剂量，从而减少化疗药物的毒副作用。
所述的抗肿瘤化疗药物的浓度为0.0025-20μM，增效剂的浓度为1.25-10μM。
所述抗肿瘤化疗药物与增效剂的浓度比为：1：0.5-1：4000。
所述抗肿瘤化疗药物为阿霉素、依托泊苷、拓扑替康、长春瑞滨中的任意一种或者多种。
当抗肿瘤化疗药物为阿霉素时，阿霉素为0.125-20μM，替格瑞洛为1.25-10μM；阿霉素与替格瑞洛的浓度比为：1：0.5-1：10；
优选地，阿霉素为2.5-10μM，替格瑞洛为1.25-5μM，阿霉素与替格瑞洛的浓度比为：2：1。
当抗肿瘤化疗药物为依托泊苷时，依托泊苷为1.25-10μM，替格瑞洛为1.25-10μM，依托泊苷与替格瑞洛的浓度比为1：1。
当抗肿瘤化疗药物为拓扑替康时，拓扑替康为0.0025-0.02μM，替格瑞洛为1.25-10μM，拓扑替康与替格瑞洛的浓度比为1：500。
当抗肿瘤化疗药物为长春瑞滨时，长春瑞滨为0.25-2μM，替格瑞洛为1.25-10μM，长春瑞滨与替格瑞洛的浓度比为1：5。
所述替格瑞洛包括替格瑞洛或其在药学上可接受的盐类、溶剂化物或可水解酯类，如盐酸替格瑞洛、氢溴酸替格瑞洛、马来酸替格瑞洛等。
所述的肿瘤为乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肺癌、白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、甲状腺癌、鼻咽癌、脑膜癌、垂体瘤、口腔癌、颅咽管瘤、丘脑和脑干肿瘤、血管源性肿瘤、颅内转移瘤、肝癌、胃癌、食管癌、大肠癌、直肠癌、结肠癌、胰腺癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、骨癌、恶性黑色素瘤、神经胶质瘤、皮肤癌中的任意一种或多种。
所述耐药肿瘤细胞是指对化疗药物耐药的肿瘤以及经过化疗药物治疗后复发的肿瘤中的任意一种或多种。
进一步地，替格瑞洛的最小有效剂量为50mg/kg；优选的有效剂量范围为50mg/kg-100mg/kg。
本发明的第三个目的是提供替格瑞洛在制备提高抗肿瘤化疗药物疗效，降低抗肿瘤化疗药物毒性药物中的应用。
本发明的第四个目的是提供一种药物组合物，包含抗肿瘤化疗药物和增效剂，其中所述增效剂为替格瑞洛。
所述抗肿瘤化疗药物与增效剂的质量比为：1：1.25-1：200；
所述的替格瑞洛包括替格瑞洛在药学上可接受的盐类、溶剂化物或可水解酯类，如盐酸替格瑞洛、氢溴酸替格瑞洛、马来酸替格瑞洛等。
所述抗肿瘤化疗药物为阿霉素、依托泊苷、拓扑替康、长春瑞滨的任意一种或者多种。
进一步地，当所述的药物组合物为阿霉素与替格瑞洛的组合时，阿霉素与替格瑞洛的质量比为：1：25-1：200，优选为1：50-1:200；
当所述的药物组合物为依托泊苷与替格瑞洛的组合时，依托泊苷与替格瑞洛的质量比为：1：1.25-1：2.5，优选为：1：2.5；
当所述的药物组合物为拓扑替康与替格瑞洛的组合时，拓扑替康与替格瑞洛的质量比为：1：16.67-1：33.33，优选为：1:33.33；
当所述的药物组合物为长春瑞滨与替格瑞洛的组合时，长春瑞滨与替格瑞洛的质量比为：1：2.5-1：5，优选为：1：5。
本发明还提供了所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
所述的肿瘤为乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肺癌、白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、甲状腺癌、鼻咽癌、脑膜癌、垂体瘤、口腔癌、颅咽管瘤、丘脑和脑干肿瘤、血管源性肿瘤、颅内转移瘤、、肝癌、胃癌、食管癌、大肠癌、直肠癌、结肠癌、胰腺癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、骨癌、恶性黑色素瘤、神经胶质瘤、皮肤癌中的任意一种或多种。
与现有技术相比，本发明所具备的有益效果如下：
本发明中临床常用的抗血小板药物替格瑞洛可作为抗肿瘤化疗药物的增效剂或耐药逆转剂。本发明首次证明替格瑞洛能够抑制PI3K激酶活性，是一个新颖的PI3K酶抑制剂；通过抑制PI3K激酶活性可以提高肿瘤细胞对部分化疗药物的敏感性，从而起到增效剂的作用。替格瑞洛可提高人乳腺癌细胞及乳腺癌阿霉素耐药细胞对阿霉素的敏感性，能提高人肺癌细胞对依托泊苷的敏感性，能提高人卵巢癌细胞对拓扑替康的敏感性，能提高人白血病细胞对长春瑞滨的敏感性；而几乎不能提高环磷酰胺和甲氨蝶呤的敏感性或是提高不明显。
体内实验也证明，替格瑞洛能增加化疗药物的体内抗肿瘤活性，降低化疗药物的使用剂量，从而减少化疗药物的毒副作用。肿瘤患者普遍存在高凝状态，替格瑞洛一方面可抑制血小板聚集，一方面可提高化疗药物的抗肿瘤活性，为肿瘤患者特别是化疗后复发的患者提供了新的治疗方案，具有疗效显著，毒副作用小，费用适中，用药方便等优点。
附图说明：
图1为实施例9中替格瑞洛与阿霉素联用抑制PI3K信号通路和多药耐药蛋白的结果图。
具体实施方式：
下面结合附图，用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。
实施例1：替格瑞洛增加肿瘤细胞对部分化疗药物的敏感性
1.细胞株及化合物：人乳腺癌MCF-7细胞、人肺癌A549细胞、人卵巢癌SKOV3细胞、人白血病HL-60均购自中科院上海细胞库；细胞置于37℃、5％CO2的培养箱中常规培养，培养液为含10％小牛血清、pH值7.4的RPMI1640。替格瑞洛(Ticagrelor，购自上海蓝木化工有限公司)。
2.实验方法：取对数生长期的肿瘤细胞，经计数后用培养液制成4×104/ml细胞悬液(100μl/孔)接种于96孔板。培养24小时，待细胞贴壁后吸除原培养液，单独用药组每孔分别加入不同浓度的替格瑞洛(0、1.25、2.5、5、10μM)、不同浓度的阿霉素(0，0.125、0.25、0.5、1.0μM)、不同浓度的依托泊苷(0、1.25、2.5、5、10μM)、不同浓度的拓扑替康(0，2.5、5、10、20nM)、不同浓度的长春瑞滨(0，0.25、0.5、1、2μM)、不同浓度的环磷酰胺(0、7.5、15、30、60μM)，和不同浓度的甲氨蝶呤(0、0.625、1.25、2.5、5μM)；联合用药组分别加入对应浓度的替格瑞洛+阿霉素、替格瑞洛+依托泊苷、替格瑞洛+拓扑替康、替格瑞洛+长春瑞滨、替格瑞洛+环磷酰胺、替格瑞洛+甲氨蝶呤；将每组细胞培养48h后，每孔加入20μl MTS(Promega,Madison,USA)，再培养1-2h后，酶标仪检测490nm吸光度值，计算替格瑞洛分别与不同化疗药物联合用药时对肿瘤细胞增殖抑制的联合指数(CI)，评价两药联合是否具有协同作用。
3.实验结果：不同浓度的替格瑞洛分别与阿霉素、依托泊苷、拓扑替康、长春瑞滨联合用药，其CI值均小于1，表明两药可协同抑制乳腺癌细胞、乳腺癌阿霉素耐药细胞、肺癌细胞、卵巢癌细胞和白血病细胞的增殖(表1和表2)。但是替格瑞洛分别与环磷酰胺和甲氨蝶呤合用，其CI值约等于1，表明两药协同效果不佳(表3)。
表1.实施例1和2中替格瑞洛与阿霉素联用对人乳腺癌MCF-7细胞和人乳腺癌阿霉素耐药MCF-7/Adr细胞增殖抑制的协同指数结果
Figure BDA0003736103330000051
表2.实施例1中替格瑞洛与依托泊苷、拓扑替康、长春瑞滨分别联用对人肺癌A549细胞、人卵巢癌SKOV3细胞和人白血病HL-60细胞增殖抑制的协同指数结果
Figure BDA0003736103330000052
表3.实施例1中替格瑞洛与环磷酰胺、甲氨蝶呤分别联用对人乳腺癌MCF-7细胞和人肺癌A549细胞增殖抑制的协同指数结果
Figure BDA0003736103330000053
实施例2：替格瑞洛增加人乳腺癌阿霉素耐药细胞MCF-7/Adr对阿霉素的敏感性，结果表明替格瑞洛可逆转乳腺癌阿霉素耐药。
1.细胞株：人乳腺癌MCF-7/Adr细胞购自中科院上海细胞库。细胞置于37℃、5％CO2的培养箱中常规培养，加入适量浓度的阿霉素以巩固耐药，培养液为含10％小牛血清、pH值7.4的RPMI1640。
2.实验方法：取对数生长期的MCF-7/Adr细胞，经计数后用培养液制成4×104/ml细胞悬液(100μl/孔)接种于96孔板。培养24小时，待细胞贴壁后吸除原培养液，单独用药组每孔分别加入不同浓度的替格瑞洛(0、1.25、2.5、5、10μM)和不同浓度的阿霉素(0，2.5、5、10、20μM)，联合用药组分别加入对应浓度的替格瑞洛+阿霉素，每组设3个复孔。将每组细胞培养48h后，每孔加入20μl MTS(Promega,Madison,USA)，再培养1-2h后，酶标仪检测490nm吸光度值，计算替格瑞洛与阿霉素联合用药时的联合指数(CI)，评价两药联合是否具有协同作用。
3.实验结果：不同浓度的替格瑞洛可以显著增加乳腺癌阿霉素耐药细胞对阿霉素的敏感性(表1)；其中，当2.5μM阿霉素与1.25μM替格瑞洛联合应用时，两药协同作用最强，CI值为0.240，表明替格瑞洛能够有效逆转乳腺癌阿霉素耐药。
实施例3：替格瑞洛阿霉素组合物对乳腺肿瘤的抑制活性
1.实验方法：3-4周龄雌性BALB/c裸小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验当天，用Matrigel胶(BD Biosciences)与人乳腺癌MCF-7细胞(5×106)按1:1混合后皮下注射至裸鼠右肩部，待肿瘤长到100-200mm3时，替格瑞洛组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛，阿霉素单独给药组腹腔注射0.5mg/kg阿霉素(隔天注射1次)，两药联合使用组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛和腹腔注射0.5mg/kg阿霉素(隔两天注射1次)，溶剂对照组分别灌胃和注射等量溶剂，连续21天；实验结束当天小鼠称重记录，脱颈处死小鼠并取肿瘤组织称重。
2.实验结果：与溶剂对照组相比，阿霉素单用对乳腺肿瘤具有一定的抑制作用，替格瑞洛单用对乳腺肿瘤没有明显的抑制作用，但替格瑞洛和阿霉素两药联合使用可以更加显著地抑制乳腺肿瘤的生长，表明替格瑞洛在体内具有增加阿霉素抗肿瘤活性的作用。另外，与对照组相比，阿霉素单独给药组小鼠体重明显下降，替格瑞洛单独给药组小鼠体重没有明显变化；替格瑞洛与阿霉素联合用药组小鼠比阿霉素单独给药组小鼠的体重有所升高。以上结果说明替格瑞洛能够增加阿霉素的体内抗肿瘤活性，另外，替格瑞洛在发挥增敏阿霉素抗肿瘤作用的同时，降低了阿霉素对小鼠的毒性(表4)。
表4.实施例3中替格瑞洛与阿霉素单用或联用对乳腺肿瘤生长的抑制活性结果
Figure BDA0003736103330000061
***p<0.001，*p<0.05与溶剂对照组比较；ΔΔΔp<0.001与阿霉素组比较。
实施例4：替格瑞洛阿霉素组合物对乳腺阿霉素耐药肿瘤的抑制活性
1.实验方法：3-4周龄雌性BALB/c裸小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验当天，用Matrigel胶(BD Biosciences)与人乳腺癌阿霉素耐药MCF-7/Adr细胞(6×106)按1:1混合后皮下注射至裸鼠右肩部，待肿瘤长到100-200mm3时，替格瑞洛组灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛，阿霉素单独给药组分别腹腔注射2mg/kg阿霉素(隔两天注射1次)，两药联合使用组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛和腹腔注射2mg/kg阿霉素(隔两天注射1次)，溶剂对照组分别灌胃和注射等量溶剂，连续21天；实验结束当天小鼠称重记录，脱颈处死小鼠并取肿瘤组织称重。
2.实验结果：与溶剂对照组相比，阿霉素或替格瑞洛单用对乳腺癌阿霉素耐药肿瘤没有明显的抑制作用，但替格瑞洛和阿霉素两药联合使用可以显著抑制阿霉素耐药乳腺癌的生长，表明替格瑞洛在体内具有逆转乳腺癌阿霉素耐药的作用。另外，与对照组相比，阿霉素单独给药组小鼠体重明显下降，替格瑞洛单独给药组小鼠体重没有明显变化；替格瑞洛与阿霉素联合用药组小鼠比阿霉素单独给药组小鼠的体重有所升高。以上结果说明替格瑞洛能够显著逆转乳腺癌阿霉素耐药，替格瑞洛与阿霉素联用可防止乳腺癌阿霉素治疗后的复发；另外，替格瑞洛在发挥增敏阿霉素抗肿瘤作用的同时，降低了阿霉素对小鼠的毒性(表5)。
表5.替格瑞洛与阿霉素单用或联用对阿霉素耐药乳腺肿瘤生长的抑制活性结果
Figure BDA0003736103330000071
ΔΔΔp<0.001与阿霉素组比较。
实施例5：替格瑞洛依托泊苷组合物对肺肿瘤的抑制活性
1.实验方法：3-4周龄雌性BALB/c裸小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验当天，用Matrigel胶(BD Biosciences)与人肺癌A549细胞(4×106)按1:1混合后皮下注射至裸鼠右肩部，待肿瘤长到100-200mm3时，替格瑞洛组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛，依托泊苷单独给药组灌胃给予40mg/kg依托泊苷，两药联合使用组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛和40mg/kg依托泊苷，溶剂对照组分别灌胃等量溶剂，连续28天；实验结束当天小鼠称重记录，脱颈处死小鼠并取肿瘤组织称重。
2.实验结果：与溶剂对照组相比，替格瑞洛单用对肺肿瘤没有明显的抑制作用，依托泊苷单用对肺肿瘤具有一定的抑制作用，但替格瑞洛和依托泊苷两药联合使用可以更加显著地抑制肺肿瘤的生长，表明替格瑞洛在体内具有增加依托泊苷抗肿瘤活性的作用。另外，与对照组相比，依托泊苷单独给药组小鼠体重明显下降，替格瑞洛单独给药组小鼠体重没有明显变化；替格瑞洛与依托泊苷联合用药组小鼠比依托泊苷单独给药组小鼠的体重有所升高。以上结果说明替格瑞洛能够增加依托泊苷的体内抗肿瘤活性，另外，替格瑞洛在发挥增敏依托泊苷抗肿瘤作用的同时，降低了依托泊苷对小鼠的毒性(表6)。
表6.替格瑞洛与依托泊苷单用或联用对肺肿瘤生长的抑制活性结果
Figure BDA0003736103330000081
***p<0.001，*p<0.05与溶剂对照组比较；ΔΔΔp<0.001与依托泊苷组比较。
实施例6：替格瑞洛拓扑替康组合物对卵巢癌的抑制活性
1.实验方法：3-4周龄雌性BALB/c裸小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验当天，将人卵巢癌细胞计数后(8×106)注射至裸鼠右肩部，待肿瘤长到100-200mm3时，替格瑞洛组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛，拓扑替康组单独给药组灌胃给予3mg/kg拓扑替康，两药联合使用组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛和3mg/kg拓扑替康，溶剂对照组分别灌胃等量溶剂，连续21天；实验结束当天小鼠称重记录，脱颈处死小鼠并取肿瘤组织称重。
2.实验结果：与溶剂对照组相比，替格瑞洛单用对卵巢肿瘤没有明显的抑制作用，拓扑替康单用对卵巢肿瘤具有一定的抑制作用，但替格瑞洛和拓扑替康两药联合使用可以更加显著地抑制肿瘤的生长，表明替格瑞洛在体内具有增加拓扑替康抗肿瘤活性的作用。另外，与对照组相比，拓扑替康单独给药组小鼠体重明显下降，替格瑞洛单独给药组小鼠体重没有明显变化；替格瑞洛与拓扑替康联合用药组小鼠比拓扑替康单独给药组小鼠的体重有所升高。以上结果说明替格瑞洛能够增加拓扑替康的体内抗肿瘤活性，另外，替格瑞洛在发挥增敏拓扑替康抗肿瘤作用的同时，降低了拓扑替康对小鼠的毒性(表7)。
表7.实施例6中替格瑞洛与拓扑替康单用或联用对卵巢肿瘤生长的抑制活性结果
Figure BDA0003736103330000091
**p<0.01与溶剂对照组比较；ΔΔΔp<0.001与拓扑替康组比较。
实施例7：替格瑞洛长春瑞滨组合物对白血病的抑制活性
1.实验方法：3-4周龄雌性BALB/c裸小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验当天，用Matrigel胶(BD Biosciences)与人白血病HL-60细胞(6×106)按1:1混合后注射至裸鼠右肩部，待肿瘤长到100-200mm3时，替格瑞洛组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛，长春瑞滨组单独给药组灌胃给予20mg/kg长春瑞滨，两药联合使用组分别灌胃给予50、100mg/kg替格瑞洛和20mg/kg长春瑞滨，溶剂对照组分别灌胃等量溶剂，连续28天；实验结束当天小鼠称重记录，脱颈处死小鼠并取肿瘤组织称重。
2.实验结果：与溶剂对照组相比，替格瑞洛单用对白血病肿瘤没有明显的抑制作用，长春瑞滨单用对白血病肿瘤具有一定的抑制作用，但替格瑞洛和长春瑞滨两药联合使用可以更加显著地抑制肿瘤的生长，表明替格瑞洛在体内具有增加长春瑞滨抗白血病活性的作用。另外，与对照组相比，长春瑞滨单独给药组小鼠体重明显下降，替格瑞洛单独给药组小鼠体重没有明显变化；替格瑞洛与长春瑞滨联合用药组小鼠比长春瑞滨单独给药组小鼠的体重有所升高。以上结果说明替格瑞洛能够增加长春瑞滨的体内抗肿瘤活性，另外，替格瑞洛在发挥增敏长春瑞滨抗肿瘤作用的同时，降低了长春瑞滨对小鼠的毒性(表8)。
表8.实施例7中替格瑞洛与长春瑞滨单用或联用对人白血病裸鼠移植瘤生长的抑制活性结果
Figure BDA0003736103330000101
***p<0.001溶剂对照组比较；ΔΔΔp<0.001与长春瑞滨组比较。
实施例8：替格瑞洛对PI3K四个亚型激酶活性的影响
采用I型PI3-Kinase活性检测试剂盒(K-1000s，Echelon Biosciences Inc.，USA)，在一定ATP浓度条件下，检测替格瑞洛体外对PI3K激酶活性的影响，计算IC50值，以确定替格瑞洛对PI3K激酶活性的影响。
2.实验结果：替格瑞洛可有效抑制PI3K四个亚型的激酶活性，其IC50值见表9。以上研究表明替格瑞洛是一个PI3K抑制剂，其对于不同类型的PI3K酶具有明显的抑制活性。
表9.实施例8中替格瑞洛对PI3K四个亚型激酶活性的抑制作用
Figure BDA0003736103330000102
实施例9：替格瑞洛与阿霉素联用对PI3K下游信号通路和多药耐药蛋白表达的影响
1.MCF-7和MCF-7/Adr细胞计数后，以6×105/孔种板于6孔板中，细胞贴壁后分别单独处理2μM阿霉素或10μM替格瑞洛，阿霉素和替格瑞洛联用组同时处理2μM阿霉素和10μM替格瑞洛，24小时后采用RIPA buffer提取总蛋白，利用western blot方法检测PI3K下游mTORC1和mTORC2信号通路关键蛋白磷酸化水平：乳腺癌细胞血清饥饿后，处理不同浓度的替格瑞洛，24小时后加入10ng/ml的IGF-1刺激1小时，采用RIPA buffer提取总蛋白，Western Blot法检测ticagrelor对PI3K下游mTORC1和mTORC2通路的影响。
2.实验结果：与阿霉素敏感细胞MCF-7相比，耐药细胞MCF-7/Adr中PI3K信号通路关键蛋白的磷酸化水平以及多药耐药蛋白ABCB1的表达明显升高，阿霉素单独处理对PI3K信号通路无影响，并且增加ABCB1的蛋白表达；而替格瑞洛单独处理或与阿霉素联用则有效抑制了耐药细胞中的PI3K信号通路以及ABCB1的蛋白表达(图1)。

Claims (10)

1.替格瑞洛在制备PI3K酶抑制剂中的应用。
2.替格瑞洛在制备治疗或预防PI3K异常激活相关疾病的药物中的应用。
3.替格瑞洛作为抗肿瘤化疗药物增效剂或耐药逆转剂的应用。
4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的PI3K异常激活相关疾病为肿瘤或化疗后复发的肿瘤。
5.如权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤为乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肺癌、白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、甲状腺癌、鼻咽癌、脑膜癌、垂体瘤、口腔癌、颅咽管瘤、丘脑和脑干肿瘤、血管源性肿瘤、颅内转移瘤、、肝癌、胃癌、食管癌、大肠癌、直肠癌、结肠癌、胰腺癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、骨癌、恶性黑色素瘤、神经胶质瘤、皮肤癌中的任意一种或多种。
6.如权利要求1-4中任何一项所述的应用，其特征在于：所述替格瑞洛为替格瑞洛或其在药学上可接受的盐、溶剂化物或可水解酯类。
7.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述抗肿瘤化疗药物为阿霉素、依托泊苷、拓扑替康、长春瑞滨中的任意一种或者多种，优选地，所述的抗肿瘤化疗药物的浓度为0.0025-20μM，增效剂的浓度为1.25-10μM；所述抗肿瘤化疗药物与增效剂的浓度比为：1：0.5-1：4000。
8.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述的替格瑞洛的最小有效剂量为50mg/kg。
9.一种药物组合物，包含抗肿瘤化疗药物和增效剂，其特征在于：所述增效剂为替格瑞洛，所述抗肿瘤化疗药物为阿霉素、依托泊苷、拓扑替康、长春瑞滨中的任意一种或者多种，优选地，所述抗肿瘤化疗药物与增效剂的质量比为：1：1.25-1：200。
10.权利要求9所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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JP2019014685A (ja) * 2017-07-07 2019-01-31 国立大学法人 筑波大学 抗がん剤

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ARAH ZUKKOOR ZORN等: "Drug-Drug Interactions of Common Cardiac Medications and Chemotherapeutic Agents", pages 1 - 10, Retrieved from the Internet <URL:https://www.acc.org/latest-in-cardiology/articles/2018/12/21/09/52/drug-drug-interactions-of-common-cardiac-medications-and-chemotherapeutic-agents> *
OMAR ELASKALANI等: "Antiplatelet Drug Ticagrelor Enhances Chemotherapeutic Ecacy by Targeting the Novel P2Y12-AKT Pathway in Pancreatic Cancer Cells", CANCERS, vol. 12, no. 250, pages 1 - 19 *
WANAS, HANAA等: "Ticagrelor Ameliorates Bleomycin-Induced Pulmonary Fibrosis in Rats by the Inhibition of TGF-β1/Smad3 and PI3K/AKT/mTOR Pathways", CURRENT MOLECULAR PHARMACOLOGY, vol. 15, no. 1 *

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