CN114869913A - 牙髓干细胞在制备治疗多发性硬化症的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物医药技术领域，具体讲，涉及牙髓干细胞在制备多发性硬化症的药物中的应用。本发明实施例提出牙髓干细胞在制备治疗多发性硬化症的药物中的应用。牙髓干细胞具有获取简便、体外易扩增、增殖能力强，较人体其他间充质干细更具临床应用优势。本发明实施例经研究发现，牙髓干细胞可以明显减少EAE小鼠脊髓脱髓鞘病灶，减小脑室周围损伤面积，减少脱髓鞘损伤；还可明显减少脑内免疫细胞浸润，减少T细胞浸润，抑制中枢炎症。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体讲，涉及牙髓干细胞在制备多发性硬化症的药物中的应用。
背景技术
多发性硬化症(Multiple sclerosis，MS)是由活化后的CD4+T细胞介导的累及中枢神经系统的自身免疫性疾病，其主要的免疫机制为外周淋巴细胞进入CNS后引起神经纤维不可逆的炎性脱髓鞘改变及轴突损伤。治疗MS的传统药物包括可帕松(Copaxone)、干扰素β等，副作用较轻，但疗效不显著。新进美国FDA批准的药物如那他珠单抗(Natalizumab)和芬戈莫德(Fingolimod)对MS有显著疗效，这些药物通过抑制淋巴细胞粘附或迁移来减轻神经炎症，但可能引起进行性多灶性白质脑病和心源性猝死等严重并发症。
牙髓干细胞(dental pulp stem cells，DPSC)是一类存在于牙髓组织中具有较强的自我更新和多向分化潜能的间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)。目前，DPSC用于骨组织修复的研究已经进入临床试验阶段，其在皮肤、心肌、肝细胞、血管修复等方面的动物研究也已显示出巨大的治疗潜能。而其在中枢神经系统疾病中应用还未见报道。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了牙髓干细胞在制备治疗多发性硬化症的药物中的应用。
本发明提供了牙髓干细胞在制备治疗多发性硬化症的药物中的应用。
本发明提供了牙髓干细胞用于制备用于抑制中枢炎症和/或减少脱髓鞘损伤的药物中的应用。
可选的，牙髓干细胞从第三磨牙中分离提取获得。
可选的，药物的制剂为细胞悬液或冻干粉。
可选的，细胞悬液中牙髓干细胞的浓度为1×106～1×107个/mL。
可选的，细胞悬液的溶剂为生理盐水。
可选的，制剂中还包括一种或多种药学上可接受的载体或辅料。
可选的，药学上可接受的载体包括增溶剂、助溶剂、乳化剂、矫味剂、矫嗅剂、着色剂、粘合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、pH调节剂、稳定剂、稀释剂、助流剂、表面活性剂和防腐剂。
本发明提供的技术方案与现有技术相比具有如下优点：
本发明实施例提出牙髓干细胞在制备治疗多发性硬化症的药物中的应用。牙髓干细胞具有获取简便、体外易扩增、增殖能力强，较人体其他间充质干细胞(mesenchymalstem cell，MSC)更具临床应用优势。
本发明实施例经研究发现，牙髓干细胞可以明显减少EAE小鼠脊髓脱髓鞘病灶，减小脑室周围损伤面积，在免疫系统方面，可明显减少脑内免疫细胞浸润，减少T细胞浸润。即，采用牙髓干细胞在治疗多发性硬化症的过程中，不仅可以触发神经系统的修复，抑制损伤，还可以出发免疫系统的作用，抑制中枢炎症。
附图说明
图1为本发明实施例中的不同实验组小鼠的临床评分对比图；
图2为本发明实施例中在EAE观察至40天后的不同实验组小鼠的脊髓腰膨大部分的快蓝染色的照片；
图3本发明实施例中在EAE观察至40天后的不同实验组小鼠的脱髓鞘体积比较图；
图4为本发明实施例不同实验组小鼠在高峰期脑室周围损伤的核磁照片；
图5为本发明实施例不同实验组小鼠在高峰期脑室周围损伤体积对比图；
图6为本发明实施例不同实验组小鼠在免疫后四周NK细胞、B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、小胶质细胞数量的对比结果；
图7为本发明实施例中不同实验组小鼠在免疫后动物活体成像照片；
图8为本发明实施例中小鼠在牙髓干细胞治疗7天后发光点的对比图。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的上述目的、特征和优点，下面将对本发明的方案进行进一步描述。需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本公开，但本发明还可以采用其他不同于在此描述的方式来实施；显然，说明书中的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。
本发明实施例提出牙髓干细胞在制备治疗多发性硬化症的药物中的应用。牙髓干细胞具有获取简便、体外易扩增、增殖能力强，较人体其他间充质干细胞(mesenchymalstem cell，MSC)更具临床应用优势，在合适的体内或体外环境下可分化为多种人体细胞，如成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成牙本质细胞等，为组织、器官修复和免疫相关疾病等的治疗提供细胞来源，被认为是组织工程和再生医学领域最易获取和最有前景的MSC之一。
本发明实施例研究发现，采用牙髓干细胞在用于制备治疗多发性硬化症的药物的过程中，可显著抑制中枢炎症、减少脱髓鞘损伤。EAE小鼠模型是人类多发性硬化(MS)的理想动物模型，在临床神经免疫学的研究中具有重要意义。EAE发生后，大量CD4+T细胞、B细胞等免疫细胞向中枢神经系统浸润,于此同时，EAE激活骨髓造血干细胞，使其大量增殖与分化，生成更多中性粒细胞以及淋巴细胞并向中枢浸润。中枢神经炎症进一步增加，组织损伤加重。
本发明实施例经研究发现，牙髓干细胞可以明显减少EAE小鼠脊髓脱髓鞘病灶，减小脑室损伤面积。在免疫系统方面，可明显减少脑内免疫细胞浸润，减少T细胞浸润。还可显著降低脑内的炎症情况。即，采用牙髓干细胞在治疗多发性硬化症的过程中，不仅可以触发神经系统的修复，抑制损伤，还可以干预免疫系统的作用，抑制中枢炎症。
本发明实施例第二方面还提出了牙髓干细胞用于制备用于抑制中枢炎症和/或减少脱髓鞘损伤的药物中的应用。
作为本发明实施例的一种优选的实施方式，牙髓干细胞通过以下方式获得：牙髓干细胞是从第三磨牙中分离提取的，第三磨牙相当于医疗废物。目前人牙髓干细胞注射液已被国家食品药品监督管理总局批准为新药。
本发明实施例研究发现，可采用牙髓干细胞的悬液作为用于治疗多发性硬化症的药物，为了便于保存和运输，也可制备成冻干粉。
具体的，细胞悬液中牙髓干细胞的浓度为1×106～1×107个/mL。细胞悬液的溶剂为生理盐水。
为了增加制剂的性能，悬液中还可以添加一种或多种药学上可接受的载体或辅料。
药学上可接受的载体或辅料可选自增溶剂、助溶剂、乳化剂、矫味剂、矫嗅剂、着色剂、粘合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、pH调节剂、稳定剂、稀释剂、助流剂、表面活性剂和防腐剂。
本发明实施例还涉及治疗多发性硬化症的方法，具体为采用治疗有效量的药物给予受试者，该药物中包括牙髓干细胞。在本发明中，术语“有效量”指的是足以提供所需的作用但不存在毒性或存在可接受的毒性的化合物的量。该量在受试者之间可能有所不同，取决于受试者的物种、年龄以及身体状况、正在治疗的疾病的严重度、所使用的具体化合物、它的施用方式等。合适的有效量可以由本领域的普通技术人员确定。术语“治疗有效量”用于指示活性化合物或药物制剂引起所指示的生物反应或药物反应的量。这种反应可以出现在由研究人员、兽医、内科医生或其他临床医师所试图治疗的组织、系统(包括人类在内的动物)中。在一些具体的实施方案中，药物还可以包括一种或多种神经系统疾病的治疗药物。
在一些具体的实施方案中，通过包括以下各项在内的途径中的一种施用所述药物：静脉内施用、腹膜内施用、冠状动脉内施用、动脉内施用、皮内施用、皮下施用、透皮递送、气管内施用、关节内施用、心室内施用、吸入、脑内、经脐、口服、眼内、肺部施用、导管注入、通过栓剂以及直接注射到组织中。此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。为达到用药目的，增强治疗效果，本公开的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
下述实施例中涉及
下述实施例中涉及到的试剂耗材如下：
小鼠购自斯贝福生物科技技术有限公司；
MOG35-55，购自金斯瑞；不完全佛氏佐剂购自BD；PT购自ListlabTB，购自BD；LuxolFast Blue Stain Kit(Myelin Stain)购自abcam；PBS，购自Hyclone；Luminol购自Sigma；牙髓干细胞购自诺禾致远生物信息科技有限公司；7T核磁采用Siemens ClinScanscanner；小动物活体成像采用Xenogen IVIS200流式细胞仪Aria采用BD Biosciences。
实施例：EAE模型小鼠的临床症状及脱髓鞘病灶和脑炎症检测
1、实验动物：C57/BL6小鼠，10周龄，雌性，随机分为4组，每组10只，分别为：
假手术组对照组(Sham+Vehicle)：假手术后给予生理盐水：
假手术组给药组(Sham+DPSC)：假手术后给予牙髓干细胞悬液；
模型组对照组(EAE+Vehicle)：造模后给予生理盐水：
模型组给药组(EAE+DPSC)：造模后给予牙髓干细胞悬液；
牙髓干细胞悬液的制备：牙髓干细胞以1×106/mL的浓度溶于生理盐水中。
2、动物实验方法：
2.1模型建立：
将小鼠多肽抗原MOG35-55(纯度＞95％)与含有灭活结核分枝杆菌的完全弗氏佐剂在注射器中反复混合进行乳化，使之形成油包水的状态。选取小鼠双侧上、下肢连线中点后背皮肤为注射点，皮下注射乳剂(MOG35-55 200μg，灭活结核分枝杆菌500μg)，上下各100μL，共注射200μL。在免疫的当天及两天后腹腔注射百日咳毒素200ng。
MOG35-55的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，具体为：
MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK。
2.2假手术方法：具体操作同实验组，手术只做到皮下注射，但是不注射任何药物。
动物实验完成后，每天观察小鼠的状态，进行临床评分，并记录。
按照0-5分的标准：0：无症状；1：尾巴无力；2：后肢无力或者步态不稳；3：完全后肢瘫痪；4：完全后肢瘫痪伴前肢无力或瘫痪；5：死亡。
造模成功的说明：经上述造模后，小鼠出现了尾巴下垂症状，显示小鼠通过MOG35-55免疫诱导自身免疫性脑脊髓炎(EAE)成功。
3、给药方式：
假手术组给药组(Sham+DPSC)：小鼠假手术后按照实验组小鼠发病第一天立即给予200μL牙髓干细胞制备悬液，浓度为5×106/mL，尾静脉注射；
假手术组对照组(Sham+Vehicle)：小鼠假手术后同时间点给予同剂量生理盐水；
模型组给药组(EAE+DPSC)：通过MOG35-55免疫诱导C57/BL6小鼠EAE，发病第一天立即给予与假手术组剂量相同的牙髓干细胞制备悬液尾静脉注射；
模型组对照组(EAE+Vehicle)：通过MOG35-55免疫诱导C57/BL6小鼠EAE，发病第一天立即给予与假手术组剂量相同的生理盐水尾静脉注射。
4、实验方法：
4.1造模后，免疫前及发病第一天立即给予牙髓干细胞制备悬液尾静脉注射，对照组小鼠给予生理盐水。每天观察小鼠的状态进行临床评分，直至造模后40天。
4.2在EAE高峰及治疗两周后，分析脑内炎症，同时检测了脑内免疫细胞的浸润情况及免疫后40天脊髓脱髓鞘的检查：
(1)脊髓脱髓鞘病灶：
采用免疫组化技术进行小鼠脊髓染色，比较EAE模型成功40天后牙髓干细胞治疗组和生理盐水治疗组的脊髓脱髓鞘水平。
石蜡切片制备：在诱导EAE模型成功后第一天，分成两组，一组尾静脉注射DPSC作为实验组，另一组尾静脉注射生理盐水作为对照组，随后观察4周后，麻醉取材，依次经磷酸盐缓冲液和4％多聚甲醛灌注后固定脊髓。首先用6％水合氯醛深度麻醉小鼠并妥善固定，沿胸腹连线纵向剪开皮肤，暴露出胸腔及腹腔后游离出心脏并剪破肝脏，开放静脉通道，依次给予20mLPBS及20mL4％多聚甲醛通过左心室灌注，灌注成功的标准为肝脏等腹腔脏器变白，灌注完成后沿后背中线剪开，剥离脊柱，剥离脊髓，上至胸椎，下到尾椎，然后沿脊柱一侧剪开，暴露脊髓，取腰髓节段，置于4％多聚甲醛中4℃浸泡固定16h以上。固定完成后将脑组织从甲醛中取出，放入组织包埋盒中并做好标记，按顺序置于50％乙醇、75％乙醇、85％乙醇、95％乙醇、无水乙醇(2次)中各1h，二甲苯20min(2次)，软蜡(52～54℃)、硬蜡(56～58℃)各1.5h，标本在上述溶液中依次经过脱水、透明及浸蜡后进行包埋。取出包埋后实验组及对照组标本，用石蜡切片机将脊髓组织切割成5μm厚度切片，在40℃蒸馏水中展开完全后捞片，然后在60℃烘片机上烘干2h备用，石蜡切片于常温储存。
免疫组化染色步骤：脊髓切片依次置于二甲苯10min(2次)，无水乙醇5min(2次)，95％乙醇、85％乙醇、75％乙醇、50％乙醇。放入装有Luxol Fast Blue Solution的染色盒子中，置于60℃温箱中2h，蒸馏水彻底清洗5min，多次浸泡在碳酸锂中，每次最多不超过20s，继续重复放在Alcohol Reagent，边冲洗边在显微镜下观察，直至灰质无色，白质仍然是蓝色，再次用蒸馏水冲洗，在CresylEcht Violet放2～5分钟，在蒸馏水中快速冲洗后放于无水乙醇中快速脱水，最后用合成树脂封片，在普通显微镜尽快拍照。对图像使用软件imageJ对进行染色结果分析。对每个脊髓腰髓节段的六个层面的脱髓鞘面积进行累计计算，代表脊髓的脱髓鞘体积。
(2)小鼠脑室周围损伤：
采用7T小动物MRI在诱导模型40天时分别对实验组和对照组进行扫描，采用的是30cm水平孔径主磁体和BioSpecAvance III波谱仪(Bruker，Billerica，MA，USA)，小鼠脑成像应用72mm发射线圈和小鼠表面接收线圈。小鼠吸入3.5％异氟烷麻醉，1.0～2.0％异氟烷加70％N2和30％O2面罩维持。MRI扫描过程中，小动物监控仪器和门控装置(SAInstruments，Stoney Brook，NY，USA)通过放在小鼠腹部下的枕头传感器实时监测小鼠的呼吸。将小鼠放于加热的循环水毯上(Bruker，Billerica，MA，USA)，这样有利于维持小鼠正常的体温(36～37℃)。如上所述，小鼠脑的轴向2D多层面T2加权像由弛豫增强快速采集序列(fat suppressed Rapid Acquisition with Relaxation Enhancement，RARE)获取(TR＝4000ms，TE＝60ms，平均次数＝4，FOV＝19.2mm×19.2mm，矩阵＝192×192，层面厚度＝0.5mm，TA＝6min24s)。采用imageJ对所有含有脑室损伤的层面进行累计计算，比较不同组的损伤面积，判断牙髓干细胞的治疗效果。
(4)流式细胞术检测：
制备脑组织单细胞悬液：
4.1腹腔注射10％水合氯醛深度麻醉小鼠并妥善固定，沿胸腹连线中点向上纵向剪开皮肤，充分暴露出胸腔且游离出心脏，剪破右心耳，而后剪破肝脏开放静脉通道，灌注针经左心尖插入，灌注20mL PBS至肝脏等腹腔脏器完全变白，灌注成功后剥离出小鼠脑组织并放在冰PBS中浸泡备用；
4.2小鼠脑组织放于1.5mL EP管中，加入提前配置好的胶原酶1mL，在37℃温箱中消化半小时，15min时拿出温箱并用移液枪轻轻吹打在放回，消化完毕后1500rpm离心5min；
4.3弃上清，加入提前配置好的30％的precool工作液7mL，涡匀后700g离心10min，慢升慢降；
4.4首先用移液枪吸弃上层髓鞘，再弃去上清，加入1mLPBS，充分吹匀细胞悬液随后均分转移至不同组别干净的流式管中，再加入1mLPBS洗涤细胞，1500rpm离心5min；
4.5弃去上清，加入100μL 1％BSA重悬细胞，计数。
流式抗体染色流式抗体的荧光染料配色选用了以下通道：异硫氰酸荧光素(fluoresce Isothiocyanate，FITC)，藻红蛋白(Phycoerythrin，PE)，多甲藻叶绿素蛋白(PerCP-Cy5.5)，别藻青蛋白(allophycocyanin，APC)，别藻青蛋白-花青素7(APC-Cy7)和藻红蛋白-花青素7(PE-Cy7)。
针对小鼠目的抗原的特异性流式抗体：抗小鼠CD45抗体、抗小鼠CD3抗体、抗小鼠CD4抗体、抗小鼠CD8抗体、抗小鼠CD19抗体、抗小鼠NK1.1抗体、抗小鼠CD11b抗体、抗小鼠F4/80抗体、抗小鼠Ly6C抗体、抗小鼠Ly6G抗体、抗小鼠7AAD抗体。
表面抗体染色：在100μL单细胞悬液流式管中加入表面抗体并涡匀，(严格按照说明书剂量依次加入)，加入完毕后，4℃避光孵育30min。加入1mL PBS洗涤，1500rpm离心5min，弃去上清，加入400μL PBS重悬吹匀，过滤上机。
本实验中流式抗体染色采用了空白对照、单阳补偿、同型对照及荧光扣除对照(Fluorescence minus one，FMO)的设置。使用FACS Aria II来收集流式细胞术的数据，选取FlowJoV10(Version 10，FlowJo，LLC)分析所得的流式数据。
(5)动物活体成像检测。
小动物活体成像采用Xenogen IVIS200仪器，本实施例采用的是生物发光(bioluminescence)，通过腹腔注射鲁米诺，与脑内的氧化物反应发光来反应小鼠脑内的炎症反应。
具体步骤如下：
5.1、小鼠吸入3.5％异氟烷麻醉，1.0～2.0％异氟烷加70％N2和30％O2面罩维持。
5.2、用剪刀剃去小鼠头部毛发而后进行脱毛备皮。
5.3、腹腔注射上述提前配好的鲁米诺溶液，剂量200mg/kg。
5.4、充分等待3～5分钟后，将小鼠放于暗室，调整小鼠位置，准确的摆放于小动物活体成像“田”字扫描的区域中。
5.5、按打开软件系统调整参数，对脑部感兴趣区域进行充分扫描，检测高强度的验证信号。
5.6、用Excel软件管理所得信号强度的数据。
5、实验结果：
5.1、牙髓干细胞用药对EAE小鼠神经功能的影响：
如图1所示，与生理盐水处理组相比，EAE小鼠接受牙髓干细胞治疗后，发病高峰时间有所延迟，临床评分明显降低。这说明牙髓干细胞确实能够减缓EAE小鼠的神经功能。
5.2、牙髓干细胞用药对脊髓脱髓鞘病灶的影响：
在EAE观察至40天后，取小鼠脊髓腰膨大部分进行快蓝染色，测定EAE小鼠的脱髓鞘体积。
图2中示出了EAE小鼠在发病后第一天分别给予生理盐水和牙髓干细胞制备悬液尾静脉注射治疗的两组的染色结果，图3为脱髓鞘体积比较图。
如图2和图3所示，在免疫后40天，与生理盐水处理组相比，牙髓干细胞给药组的EAE小鼠脊髓脱髓鞘病灶明显减少。
5.3、牙髓干细胞用药对EAE小鼠脑室周围损伤的影响
在EAE高峰期，分别尾静脉注射治疗生理盐水和牙髓干细胞制备悬液两周后，通过核磁观察牙髓干细胞制备悬液对脑室周围损伤的体积的影响结果。实验结果如图4和图5。
如图4和图5所示，在免疫后28天，与生理盐水处理组相比，牙髓干细胞给药组的EAE小鼠的脑室周围损伤体积减小。
5.4、流式细胞术检测。
在EAE免疫后四周，通过流式细胞术检测NK、B、CD4+T细胞、CD8+T细胞、小胶质细胞的数量，说明对中枢神经系统内各种免疫细胞浸润的影响，实验结果如图6。
如图6所示，牙髓干细胞用药组脑内免疫细胞浸润减少，T细胞浸润减少。
5.5、动物活体成像检测
在EAE发病初期及治疗7天后，通过动物活体成像对小鼠脑部分进行炎性发光成像，观察牙髓干细胞制备悬液对EAE小鼠脑内炎症的影响情况，实验结果如图7和图8所示。
如图7所示，在发病高峰和牙髓干细胞治疗7天以后的ROI展示，左侧列为模型组对照组在发病高峰的照片，右侧列为牙髓干细胞治疗7天后的照片；免疫图8为牙髓干细胞治疗7天后光子/秒/cm2/sr对比图。
图7和图8说明牙髓干细胞用药组小鼠脑内炎症明显减少，牙髓干细胞可以减轻了脑内的炎症。
以上结果表明，髓干细胞悬液能够改善自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型神经功能，减少外周免疫细胞向中枢神经系统的浸润，最终抑制EAE小鼠的中枢神经系统炎症，减少轴突、髓鞘的损伤，对于治疗神经炎症性疾病和免疫性疾病具有重要的临床应用价值。
以上所述仅是本公开的具体实施方式，使本领域技术人员能够理解或实现本公开。对这些实施例的多种修改对本领域的技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本公开的范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本公开将不会被限制于本文所述的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
序列表
<110> 天坛医院
<120> 牙髓干细胞在制备治疗多发性硬化症的药物中的应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Met Glu Val Gly Trp Tyr Arg Ser Pro Phe Ser Arg Val Val His Leu
1 5 10 15
Tyr Arg Asn Gly Lys
20
Claims (8)
1.牙髓干细胞在制备治疗多发性硬化症的药物中的应用。
2.牙髓干细胞用于制备用于抑制中枢炎症和/或减少脱髓鞘损伤的药物中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述牙髓干细胞从第三磨牙中分离提取获得。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的制剂为细胞悬液或冻干粉。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述细胞悬液中牙髓干细胞的浓度为1×106～1×107个/mL。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述细胞悬液的溶剂为生理盐水。
7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述制剂中还包括一种或多种药学上可接受的载体或辅料。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药学上可接受的载体包括增溶剂、助溶剂、乳化剂、矫味剂、矫嗅剂、着色剂、粘合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、pH调节剂、稳定剂、稀释剂、助流剂、表面活性剂和防腐剂。
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| KERRIE FOYLE: "Characterisation of human dental pulp stem cells in an animal model of multiple sclerosis", 《THE UNIVERSITY OF ADELAIDE》, 31 December 2019 (2019-12-31), pages 4 - 5 * |
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